CS271292B1 - Mouse lymphocyte hybridoma vu 440/2 - Google Patents
Mouse lymphocyte hybridoma vu 440/2 Download PDFInfo
- Publication number
- CS271292B1 CS271292B1 CS888156A CS815688A CS271292B1 CS 271292 B1 CS271292 B1 CS 271292B1 CS 888156 A CS888156 A CS 888156A CS 815688 A CS815688 A CS 815688A CS 271292 B1 CS271292 B1 CS 271292B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- hybridoma
- type
- herpes simplex
- monoclonal antibody
- simplex virus
- Prior art date
Links
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 title claims abstract description 17
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 title claims description 3
- 241000701074 Human alphaherpesvirus 2 Species 0.000 claims description 12
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 abstract description 5
- 241000700605 Viruses Species 0.000 abstract description 4
- 239000000427 antigen Substances 0.000 abstract description 4
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 abstract description 4
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 abstract description 4
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 abstract description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 abstract 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract 1
- 230000000527 lymphocytic effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 12
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 7
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 description 4
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 210000003200 peritoneal cavity Anatomy 0.000 description 3
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 239000012568 clinical material Substances 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 2
- 239000006145 Eagle's minimal essential medium Substances 0.000 description 1
- 208000009889 Herpes Simplex Diseases 0.000 description 1
- 241000700588 Human alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 239000005662 Paraffin oil Substances 0.000 description 1
- 230000003322 aneuploid effect Effects 0.000 description 1
- 208000036878 aneuploidy Diseases 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003567 ascitic fluid Anatomy 0.000 description 1
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- 210000002729 polyribosome Anatomy 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
1 CS 271292 81
Vynález se týká nového hybridómu, tj. hybridného jednobunkového organizmu, zostro-jeného fúziou myšej myelómovej buňky Sp2/O a myšej slezinovej lymfoidnej buňky, produ-kujúcej protilátku voči virusu Herpes simplex typ 2. U virusu Herpes simplex rozoznávame dva antigénne odlišné typy Herpes simplex typ ia typ 2. Doteraz sa protilátky (antiséra) voči virusu Herpes simplex typ 2 připravova-li imunizáciou pokusných zvierat, najčastejéie krélikov, purifikovaným alebo nepurifi-kovaným virusom resp. niektorým izolováným proteínom (Forghani B., Schmidt N., Lenne-tte E. H.: Solid phase radioimmunoassay for Identification of herpesvirus hominis ty-pes i and 2 from clinical materiál. Appl. Microbiol. 28, (1974) 661 - 667' DreesmanG. R., Watson D. 0., Courtney R. 3., Adam E., Melnick 3. 3.: Detection of herpesvirustype-specific antibody by microsolid-phase rádioimmunometric assayj Intervirology 12,(1979) 115 - 119). Sérum takto imunizovaných zvierat, odobrané po viacerých dávkáchantigénu, slúžilo ako zdroj protilátok tzv. typovospecifických, ktoré sa využívali nadókaz antigénu virus Herpes simplex typ 2 v základnom výskume a v immunodiagnostickejpraxi. Vzhladom na to, že virusy Herpes simplex typ l a 2 obsahujú nielen typovošpeci-fické, ale aj typovo epoločné antigénne determinanty, takto připravené antiséra vočivirusu Herpes simplex obsahujú vysoké hladiny typovospoločných protilátok, ktoré stažu-jú resp. úplné znemožnujú správné určenle typu infikujúceho virusu pri diagnostickomtestovaní. Typovospoločné protilátky sa obvykle odstraňujú zo sér vysycovaním s víru-som Herpes simplex typ i, čo je procedúra velmi náročná na materiál a naviac len v ma-lom počte prípadov úspěšná. výrobně šarže konvenčných typovoSpecifických antisér sa da-jú fcažko Standardizovat a bývajú v širokom rozmedzí kvality. V poslednom čase sa s úspe-chom použivajú na typizáclu virusu Herpes simplex typ 2 monoklonélne protilátky tzv.typovošpecifické, ktoré sú schopné detegovat infekciu virusom Herpes simplex typ 2v klinickom materiále.
Uvedené nevýhody doteraz používaných postupov sa nevyskytnú, ok je k dispozic i ihybridómova buňkové línia produkujúca typovošpecifickú monoklonélnu protilátku vočivirusu Herpes simplex typ 2, ktorá Je uložená v zbierke hybridomóv Virologického ústavuSAV, Mlýnská dolina i, Bratislava pod označením VU 440/2.
Uvedený hybridóm bol získaný spósobom známým z odbornej literatúry (Kohler, G.,Milstein, C.: Continuous cultures of fused cells aecreting antibody of predefíned spe-cificity. Nature,256, (1975), 495., Gerhard W,i Fusion of cells in suspension andoutgrowth of hybride in conditioned medium. Monoclonal antibodies: A new dimension inBiological analyses. Kennett R. H a spol., eds. New York, Plenům Press (1980), 370.Hybridně buňky ziskane po fúzii myších myelómovych Sp2/0 buniek a buniek získaných zosleziny myši BALB/c imunizovanej extraktom buniek infikovaných virusom Herpes simplextyp 2, bolí klonované a po otestovaní bol vybraný klon VU 440/2. Výhodou hybridonu je, že produkuje homogennu protilátku, tzv. monoklonélnu proti-látku, ktoré je schopná Specificky reagovat s virusom Herpes simplex typ 2. HybridómVU 440/2 možno kultivovat in vitro v médiach vhodnýoh pre živočišné buňky alebo invivo v peritonealnej dutině myši kmene BALB/c. z konzerv zmrazených buniek uchovonýchv kvapalnom dusíku, možno začat' produkciu protilátky bez ďalšej imunizácie zvierafcaantigenom. Příklad:
Za účelom získania vačšeho množstva monoklonélnej protilátky VU 440/2 kultiváciouhybridomóvych buniek in vivo, 5x10® buniek sa aplikovalo do peritoneélnej dutiny myši.Pre lepšie uchytenie buniek bola myš 15 dni před aplikaciou buniek premedikovaná pa-rafínovým olejom (0,5 ml intraperitonealne na l myš). Po 10 dňoch rastu hybridómu v pe-ritoneélnej dutině, bola myš zabité a vyprodukovaná ascitická tekutina odobraná. Týmtopoetupom možno priemerne získat asi 7 ml ascitíckej tekutiny obsahujúcej 8 mg/ml pro-tilátky. Ascitická tekutina obsahujúca produkt hybridómu VU 440/2 vykazovala špecifickú
Claims (1)
- CS 271292 B1 2 vazbu k virusu Herpes simplex typ 2 v radioimunoanalytickom teste (ria), v imunoenzy-matickej analýze (ELISA) a v imunofluorescenčnora teste (IF). Buňky hybridómu VU 440/2 rastu in vitro ako polosuspenznó kultúra. Majů gulatýtvar a velkost charakteristická pre myelómove buňky. Obsahujú fúzované buňkové jadré,sú aneuploidne. Buňky hybridómu VU 440/2 majú ultraStruktúrny obraz typických myeló-movych buniek, kde prevažujúcou organelou sú volné a na membránu viazané polyribozómy.Základným kultivačným médiom je Dulbeccova modifikécia Eagleovho mininálneho esenciál-neho média (Dulbecco, R., Freeman, G., virology í-s/1959/, 396). Toto médium, označova-né ako DMEM, je pre kultivaciu hybridómu doplněné gentamycínom a inaktivovaným preko-lostrálnym telecím aérom (10%, Bioveta, Ivanovice na Hané). Hybridóm je kultivovanýpri 37 °C v atmosféře 5% COg. Oeho generačné doba je přibližné 24 h. Produkovaná pro-tilátka je monoklonélny imunoglobulín podtriedy IgG l. Hybridóm VÚ 440/2 može byt: využívaný ako zdroj protilátky voči virusu Herpes sim-plex typ 2, ktorá aa dá použit na kvalitativny dókaz přítomnosti virusu Herpes simplextyp 2 vo vyáetrovanom materiále, na kvantitativné stanovenie množstva infikujúceho vi-rusu pri vyhodnocovaní epidemiologické} situácie a ako zdroj protilátky jedinej podtriedy (IgG 1) pre přípravu antieér specifických pře uvedené podtriedu. PREDMET VYNÁLEZU MySí lymfocytárny hybridóm VU 440/2, produkujúci monoklonálnu protilátku podtrie- dy IgG 1 voči virusu Herpes simplex typ 2.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS888156A CS271292B1 (en) | 1988-12-09 | 1988-12-09 | Mouse lymphocyte hybridoma vu 440/2 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS888156A CS271292B1 (en) | 1988-12-09 | 1988-12-09 | Mouse lymphocyte hybridoma vu 440/2 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS815688A1 CS815688A1 (en) | 1989-11-14 |
| CS271292B1 true CS271292B1 (en) | 1990-09-12 |
Family
ID=5431764
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS888156A CS271292B1 (en) | 1988-12-09 | 1988-12-09 | Mouse lymphocyte hybridoma vu 440/2 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS271292B1 (cs) |
-
1988
- 1988-12-09 CS CS888156A patent/CS271292B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS815688A1 (en) | 1989-11-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Pereira et al. | Type-common and type-specific monoclonal antibody to herpes simplex virus type 1 | |
| Brown et al. | Indirect 125I-labeled protein A assay for monoclonal antibodies to cell surface antigens | |
| Douillard et al. | Enzyme-linked immunosorbent assay for screening monoclonal antibody production: use of intact cells as antigen | |
| Yeargan et al. | Rapid subtyping of equine herpesvirus 1 with monoclonal antibodies | |
| US20100055675A1 (en) | Method for detecting measles virus, membrane assay test device, and membrane assay test kit | |
| EP0179152B1 (en) | Diagnostic system for the detection of cytomegalovirus | |
| EP0162533A2 (en) | The detection of human cytomegalovirus specific IgM | |
| EP2145899A1 (en) | RS virus detecting kit using anti-RS virus monoclonal antibody, immuno-chromatographic test device, and new anti-RS virus monoclonal antibody | |
| AU735981B2 (en) | Peptide reagent for the detection of human cytomegalovirus (CMV) | |
| US4752582A (en) | Monoclonal antibodies to human glycophorin A and cell lines for the production thereof | |
| US6248513B1 (en) | Anticytomegalovirus monoclonal antibodies and processes for the in vitro diagnosis of infections by human cytomegaloviruses and a protein-kinase inducible by cytomegaloviruses and recognizable by aforesaid monoclonal antibodies | |
| Kennel et al. | Distribution of viral glycoprotein gp 69/71 on cell surfaces of producer and nonproducer cells | |
| Porta et al. | Serotype specificity of monoclonal antibodies to cucumber mosaic virus | |
| US4818678A (en) | Diagnostic system for the detection of cytomegalovirus | |
| CS271292B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridoma vu 440/2 | |
| Howes et al. | Mouse hybrid cell lines produce antibodies to herpes simplex virus type 1 | |
| Kao et al. | Monoclonal antibodies for the rapid diagnosis of respiratory syncytial virus infection by immunofluorescence | |
| CS270194B1 (cs) | Myší lymfocytárny hybridem VÚ 499/1 | |
| CS271293B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridoma vu t51/3 | |
| Dawson et al. | Monoclonal antibodies to hepatitis A virus | |
| Nielsen et al. | A biotin—avidin-amplified inhibition enzyme immunoassay for detection of CMV antibodies in human serum | |
| CS270193B1 (cs) | Myší lymfocytárny hybridům VÚ 303/4 | |
| CS270195B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridoma vu 809/5 | |
| Hierholzer et al. | Application of a solid-phase immunofluorometric assay to the selection of monoclonal antibody specific for the adenovirus group-reactive hexon antigen | |
| CS270537B1 (cs) | Myši lymfoeytárny hybridóm VÚ 144/1-2 |