CS270527B1

CS270527B1 - Sposob izolácie hipokastanozidu," nového saponínu oplodia pagaštana koňského

Info

Publication number: CS270527B1
Application number: CS886558A
Authority: CS
Inventors: Andrej Rndr Vadkerti; Bohumil Ing Csc Proksa; Jirina Ing Csc Omelkova; Zdeno Dr Ing Drsc Voticky
Original assignee: Andrej Rndr Vadkerti; Proksa Bohumil; Jirina Ing Csc Omelkova; Zdeno Dr Ing Drsc Voticky
Priority date: 1988-10-03
Filing date: 1988-10-03
Publication date: 1990-07-12
Also published as: CS655888A1

Description

CS 270527 B1 1

Vynález sa týká spSsobu izolácie hipokastanozidu, nového saponínu oplodia pagaš-tana koňského. Z plodov pagaStana koňského (Aesculus hyppocastanum L.) sa izoluje esoín (DE pat. 1 125 117, 1 792 341, 2 257 755, DD pat. 11 178, 17 049, 20 912, US pat 3 450 691,

Fr. pat. 2 361 420), ktorý sa používá.pře výrobu farmaceutických prípravkov použí-vaných najma pri liečení posttraumatických a pooperačných edémov. Popři antiflogis-tických a antiedematóznych vlastnostiach má escín aj antimikrobiálne účinky (R. Tsche-sche, G. Wulff: Z. Naturforsch., 2OB,543, 1965).

Oplodie pagaštana koňského (perikarp), na rozdiel od plodov, neobsahuje escín,ale nový, doteraz neopisaný saponín hipokastanozid, ktorého Struktura sa stanovilapomocou spektrálných a chemických analytických metod. Hipokastanozid je rovnako akoescín zmesou Strukturálně blízkých lótok, triterpenických glykozidov. Kým v escíneje aglykónom protoescigenín a baringtogenol C esterifikovaný nižSími organickými ky-selinami a s glykozidicky viazaným trisacharidom tvořeným kyselinou glukurónovou,glukózou, galaktózou alebo xylózou; v hipokastanozide je aglykónom R^-barigenol spo-lu s malým množstvom baringtogenolu C, ktoré sú esterifikované kyselinou tiglinovou((E)-2metyl-2-buténovou), angelikovou ((Z)-2-metyl-2-buténovou, octovou a Salšíminižšími kyselinami. V polohe 3 je na aglykón viazaný kyslý trisacharid pozostávajúciz kyseliny glukurónovej a dvoch neutrálnych cukrov reprezentovaných kombináciou ram-nózy, glukózy, manózy, galaktózy, xylózy alebo arabionózy. Hlavnou zložkou tejto zme-si je látka štruktúrneho vzorca I.

Nový saponín hipokastanozid je farmakologicky účinná látka inhibujúca rast pato-génnych mikroorganizmov. Hipokastanozid sa izoluje postupom podlá vynálezu, pri kto-rom sa oplodie pagaštana koňského extrahuje zmesou alkoholu s počtom uhlíkov 1 až3 a vody v objemovom pomere 1 až 9 i 1 pri teplote 15 až 35 °C, extrakt sa oddělí,zahustí, odparok sa rozpustí v 5 až 15 násobnom množstve alkoholu s počtom uhlíkov3 až 5, přidá sa chloroform a vodný roztok organickej kyseliny v objemovom pomere al-koholu, chloroformu a vodného roztoku kyseliny 1 až 2 : 3 až 5 : 3, zmes sa zamieša,nechá rozdělit', spodná vrstva sa oddělí a rozpúšťadlá sa odparia. Ako vodný roztokorganickej kyseliny sa použije vodný roztok 0,15 až 0,60 mol.dm-^ alifatickej kar-bonové j kyseliny s počtom uhlíkov 1 až 3. Výhodou tohoto vynálezu je, že sa izoloval nový, doteraz neznámy saponín, hypo-kastanozid, ktorý inhibuje rast patogénných mikroorganizmov.

OH OH CS 270527 B1 Příklad 1

Suché, zomleté oplodie pagaštana koňského (500 g) sa extrahuje dvakrát po 2 l zmesou etanolu a vody v objemovom pomere 7 : 3 pni teplote 25 °C, spojené extrakty sa odparia do sucha. Odparek (33 g) sa rozpustí v 0,4 1 2-propanolu, přidá sa 1 1 chloroformu a 0.6 1 0.5 mol.dm-^ vodnéj kyseliny octovéj, zmes sa premieša, nechá rozdělit/, spodná vrstva sa oddělí a odpaří do sucha. Získá sa 3.5 g hipokastanozidu, t.t. 228 °C (rozkl.), /Oi/^0 -21° (c=l, metanol), priemerná relativná molekulová hmotnost: M = 1186 (určená titračne) ·r

Stanovenie inhihičného účinku: * Kmene sa kultivovali na Sikmom sladinovom agare. Dvojdňová kultura sa suspendovala v 1 cm^ sterilněj vody, zamiešala do testovacieho agaru a naliala na Petriho misky. „ Testovací agar obsahoval 1 % (NH^gSO^, 0.1 % KHgPO^, 0.05 % MgSO^, 2 % glukózy, 0.001 % kvasničného extraktu a 1.5 % agaru. Na povrch agaru sa položili sterilnédisky s priemerom 5 mm z filtračného papiera Whatman I, ktoré boli napuštěné rozto-kom hipokastanozidu tak, aby disk obsahoval 20 až 50 /ug látky.

Hipokastanozid inhiboval rast patogénnych mikroorganizmov:

Cryptococcus neoformans, Leucosporidium scottii, Lipomyces starkeyi, Rhodotorularubra, Candida tropicalis, C. pseudotropicalis, C. albicans, C. claussenii, C. pa-rapsilosis. Příklad 2

Suché, zomleté oplodie pagaštana koňského (200 g) sa extrahuje dvakrát po 1 1zmesou metanolu a vody v objemovom pomere 1 : 1 při teplote 18 °C, spojené extrak-ty sa odparia do sucha. Odparok (12 g) sa rozpustí v 0.1 1 2-butanolu, přidá sa0.2 1 chloroformu a 0,15 1 0.15 mol.dm“^ vodnej kyseliny mravčej, zmes sa premieša,nechá rozdělit, spodná vrstva sa oddělí a jej odpařením do sucha sa získá 1.4 ghipokastanozidu s t.t. 226 °C (rozkl.) Příklad 3 ____ _ _

Suché, zomleté oplodie pagaštana koňského (250 g) sa extrahuje dvakrát po 1 1zmesi propanolu a vody v objemovom pomere 3 : 1 pri teplote 35 °C, spojené extraktysa odparia do sucha. Odparok (16 g) sa rozpustí v 0.3 1 peňtanolu, přidá sa 0.45 1chloroformu a 0.45 1 0.6 mol.dm“^ vodnej kyseliny propiónovej, zmes ,sa premieša, κ nechá rozdělit/, spodná vrstva sa oddělí a odpaří do sucha, čím sa získá 1.8 g hipo- kastanozidu s t.t. 228 °C (rozkl.) Příklad 4

Suché, zomleté oplodie pagaštana koňského (400 g) sa extrahuje dvakrát po 2 1zmesi etanolu a vody v objemovom pomere 9 : 1 pri teplote 27 °C , spojené extraktysa odparia do sucha. Odparok (24 g) sa rozpustí v 0.4 1 propanolu, pridajú sa 2 1chloroformu a 1.2 1 0.3 mol.dm J vodnej kyseliny octovej, zmes sa premieša, nechározdělit, spodná vrstva sa oddělí a odpaří do sucha, čím sa získá 2.4 g hipokasta-nozidu s t.t. 227 °C (rozkl.).

Claims

CS 270527 BX 3 PREDMET VYNÁLEZU

1. Spfcsoh izolácie hipokaatanozidu, nového aaponínu oplodia pagaštana koňského,vyznačujúci sa tým, že oplodie sa extrahuje zmeaou vody a alkoholu pri teplote 15až 35 °C, extrakt sa oddělí, rozpúšťadlá sa oddestilujú, zvyšok sa rozpustí v al-kohole, přidá sa chloroform a vodný roztok organickéj kyseliny v ohjemovom pomerealkoholu, chloroformu a vodného roztoku organickéj kyseliny 1 až 2 : 3 až 5 : 3,zmes sa zamieša, nechá rozdělit*, spodná vrstva sa oddělí a rozpúšťadlá sa odesti-lujú.
2. SpSsoh izolácie hipokaatanozidu podlá hodu 1 vyznačujúci sa tým, že oplo-die sa extrahuje zmesou alkoholu s počtom uhlíkov 1 až 3 a vody v ohjemovom pomere1 až 9 : 1.
3. SpBsoh izolácie hipokaatanozidu podía hodu 1 vyznačujúci sa tým, že zvyšokpo oddeetilovaní rozpúšťadiel z extraktu sa rozpustí v alkohole s počtom uhlíkov3 až 5 v hmotnostnom pomere zvyšku a alkoholu 1 : 5 až 15.
4. Sposoh izolácie hipokaatanozidu podía hodu 1 vyznačujúci sa tým, že akovodný roztok organickej kyseliny sa použije vodný roztok 0.15 až 0.60 mol.dm-^alifatickej kyseliny s počtom uhlíkov 1 až 3.