CS270195B1 - Mouse lymphocyte hybridoma vu 809/5 - Google Patents
Mouse lymphocyte hybridoma vu 809/5 Download PDFInfo
- Publication number
- CS270195B1 CS270195B1 CS888154A CS815488A CS270195B1 CS 270195 B1 CS270195 B1 CS 270195B1 CS 888154 A CS888154 A CS 888154A CS 815488 A CS815488 A CS 815488A CS 270195 B1 CS270195 B1 CS 270195B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- hybridoma
- virus
- glycoprotein
- herpes simplex
- antibody
- Prior art date
Links
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 title claims abstract description 16
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 title claims abstract description 4
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 claims abstract description 9
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims abstract description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 3
- 241000700588 Human alphaherpesvirus 1 Species 0.000 claims description 12
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 12
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 claims description 4
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 claims description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 3
- HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N Acrylamide Chemical compound NC(=O)C=C HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 claims 1
- 239000006145 Eagle's minimal essential medium Substances 0.000 claims 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 claims 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 claims 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 claims 1
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 claims 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 claims 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 claims 1
- 210000002729 polyribosome Anatomy 0.000 claims 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 abstract description 6
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 abstract description 5
- 239000000427 antigen Substances 0.000 abstract description 3
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 abstract description 3
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 abstract description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 abstract description 2
- XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N IDUR Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(I)=C1 XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N 0.000 abstract 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 3
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 3
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 210000003567 ascitic fluid Anatomy 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 2
- 208000002874 Acne Vulgaris Diseases 0.000 description 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- 208000009889 Herpes Simplex Diseases 0.000 description 1
- 241000701074 Human alphaherpesvirus 2 Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010000496 acne Diseases 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 229940124599 anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 239000012568 clinical material Substances 0.000 description 1
- 239000003636 conditioned culture medium Substances 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000003200 peritoneal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 238000003156 radioimmunoprecipitation Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
CS 270 195 B1 1
Vynález sa týká nového hybridómu, tj. hybridného jednobunkového organizmu, zostroje-ného fúziou myšej myelómovsj buňky Sp2/0 a myšej slezinovej lymfoidnej buňky, produkujú -cej protilátku vofil glykoproteínu gB virusu Herpes simplex typ 1. U virusu Herpes simplex rozoznávame dva antlgénne odlišné typy Herpes simplex typ 1a typ 2. Ooteraz sa protilátky /antiséra/ voSi virusu Herpes simplex typ 1 připravovaliimunizáciou pokusných zvierat, najčasteJSie králikov, purifikovaným alebo nepurifIkovanýmvirusem resp. niektorým izolovaným protsínom'/Forghani B., Sohmidt N., Lennette E.H.:
Solid phase rádioimmunoassay for Identification of herpesv.irus homlnis types 1 and 2 fromolinioal materiál.'Appl. Microbiol. 2JB, /1974/ 661-667« Dreesman G.R., Watson D.O., Court-ney R.3., Adam E., Melnick 3.1.i Oetection of herpesvirus type-specifio antibody by micro-solid-phase radioimmunometrio assayi Intervirology 12, /1979/ 115-119). Sérum takto imuni-znvanýoh zvierat, odebrané po viaoerýoh dévkaoh antlpémi, alúžlln akn ztii'nj protllélnktzv. typovošpeoifickýoh, ktoré sa využívali na dékaz antigénu virusu Herpes simplex typ 1v základnom výskums a v lmunodiagnostioksj praxi. Vzhledom na to, že virusy Herpes simplextyp 1 a. 2 obsahuje nielen typovošpsoifické, ale aj typovo spoločné antlgénne determinanty,takto připravené antiséra vočl virusu Herpes simplex obsahujú vysoké hladiny typovospoloč-ných protilátok, ktoré sťažujú resp. úplné znemožňujú správné urCenie typu infikujúcehovirusu pri diagnostiokom testovaní. TypovospoloSné protilátky sa obvykle odstraňujú zosér vysycovaním s vírusom Herpes simplex typ 1, Co je procedúra velmi náročné na materiála naviac len v malom počte pripadov úspěšná. Výrobné šarže konvenčných typovošpeoifickýohantisér sa dajú ťažko Standardizovat a bývaju v širokom rozmedzi kvality. V poslednom ča-se sa s úspšchom používajú na typizáciu virusu Herpes simplex typ 1 monoklonálne protilát-ky tzv. typovošpeoifické, ktoré sů schopné detegovat iníekciu vírusom Herpes simplex typ1 v klinickom materiále.
Uvedené nevýhody doteraz používaných postupov sa nevyskytnú, ak je k dispozícii hy-bridómova buňková línia produkujúca typovošpeclfickú monoklonálnu protilátku vočl glyko-proteínu gB virusu Herpes simplex typ 1, ktorá je uložená v zbierke hybridómov Virologic-kého ústavu SAV, Mlýnská dolina 1, Bratislava pod označením VÚ 809/5.
Uvedený hybridóm bol získaný spčsobom známým z odbornej literatúry (Kohler, G.,Milstein, C.i Continuous oultures of fused cella secreting antibody of predefined speci-ficity. Nátuře, 256, /1975/, 495., Gerhard, W.i Fusion of cells in suspension and outgrowthof hybride in conditioned medium. Monoclonal antibodiest A. new dimension in Biological aria-lyses, Kennett R. H. a spol., eds. New York, Plenům Press /1980/, 770.) Hybridné buňky zís-kané po fúzii myších myelómovych Sp2/0 buniek a buniek získaných zo sleziny myši BALB/cimunizovanéj extraktom buniek infiko^nýoh vírusom Herpes simplex typ 1, boli klonované apo otestovaní bol vybraný klon VÚ 809/5. Výhodou hybridómu je, že produkuje homogénnu pro-tilátku, tzv. monoklonálnu protilátku, ktorá je schopná Specificky reagovat s glykoproteí-nom gB virusu Herpes simplex typ 1. Hybridóm VÚ B09/5 možno kultivovat in vitro v médiachvhodnýoh prs*živočišné buňky alebo in vivo v paritoneálnej dutině myši kmeňa BALB/o, Zkonzerv zmrazených buniek uchovaných v kvapalnom dusíku, možno začat produkciu protilátkybez áalšej imunizácie zvieraťa antigénom. Příklad:
Za účelom získania vačšieho množstva monoklonálnej protilátky VÚ B09/5 kultiváciouhybridómovyoh buniek in vivo, 5x10 buniek sa aplikovalo do paritoneálnej dutiny myši. Přelepšie uchytenie buniek bola myš 15 dní před aplikáciou buniek premedikovaná parafínovýmolsjom /0,5 ml intraperitoneálne na 1 myš/. PO 10 dňoch rastu hybridómu v peri.toneálne jdutině, bóla myš zabitá a vyprodukovaná ascitická tekutina odobraná. Týmto postupom možnopriemerne získat asi 7 ml ascitickej tekutiny obsahujúcej B mg/ml protilátky. Ascitickátekutina obsahujúca produkt hybridómu VÚ 809/5 vykazovala Specifické vazbu k virusu Herpessimplex typ 1 v rádioimunoanalytickom teste /RIA/, v imunoenzymatickej analýze /ELISA/ av imunofluorescenčnom teste /IF/. Metodou rádioimunoprecipitácie a elektrofořezy v póly-
Claims (1)
- 2 CS 270 195 B1 akrylamidovom géli sa zistila vazba monoklonálnej protilátky na glykoproteín gB virusuHerpes simplex typ 1. Buňky hybridómu VÚ 809/5 rastů in vitro ako polosuspenzná kultúra. Majů gulatý tvara velkost charakteristickú pře myelómove buňky. Obsahujú fúzované buňkové jadrá, su aneu-ploídne. Buňky hybridómu VÚ 809/5 majú ultraštrukt.úrny obraz typických myelómóvých bu-niek, kde prevažujúcou organelou sů volné a na membránu viazané polyribozómy. Základnýmkultivačným médiom je Oulbeccova modifikácia-Eagleovho minimálneho esenciáineho média(Dulbecco, R., Freeman, G., Virology B /1959/, 396). Toto médium, označované ako DMEM, jepre kultiváciu hybridómu doplněné gentamycinom a inaktivovaným prekolostrálnym tel’acím sérom <10%, Bioveta, Ivanovice na Hané). Hybridóm je kultivovaný pri 37 °C v atmosféře 5%COj. Oeho generačná doba je přibližné 24 hod. Produkovaná protilátka je monoklonálny imu-noglobulín podtriedy IgG 2a. Hybridóm VÚ B09/5 může byť využívaný ako zdroj protilátky voči glykoproteínu gB virusu Herpes simplex typ 1, ktorá sa dá použit na kvalitatívny důkaz přítomnosti virusu Her-pes simplex typ 1 vo vySetrovanom materiále, na kvantitativné stanovenie množstva infiku-júceho virusu resp. glykoproteínu gB, pri vyhodnocování epidemiologickéj situácie, na pu-rifikáciu glykoproteínu gB a ako zdroj protilátky Jedinej podtriedy (IgG 2a) pre přípravuantisér Specifických pre uvedené podtriedu. PREDMET VYNÁLEZU Myší lymfocytárny hybridóm VÚ 809/5, produkujúci monoklonálnu protilátku podtriedy IgG 2a voči glykoproteínu gB virusu Herpes simplex typ 1.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS888154A CS270195B1 (en) | 1988-12-09 | 1988-12-09 | Mouse lymphocyte hybridoma vu 809/5 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS888154A CS270195B1 (en) | 1988-12-09 | 1988-12-09 | Mouse lymphocyte hybridoma vu 809/5 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS815488A1 CS815488A1 (en) | 1989-10-13 |
| CS270195B1 true CS270195B1 (en) | 1990-06-13 |
Family
ID=5431740
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS888154A CS270195B1 (en) | 1988-12-09 | 1988-12-09 | Mouse lymphocyte hybridoma vu 809/5 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS270195B1 (cs) |
-
1988
- 1988-12-09 CS CS888154A patent/CS270195B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS815488A1 (en) | 1989-10-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Pereira et al. | Type-common and type-specific monoclonal antibody to herpes simplex virus type 1 | |
| Lee et al. | Monoclonal antibodies with specificity for three different serotypes of Marek's disease viruses in chickens. | |
| FI89175C (fi) | Foerfarande och produkter foer paovisande av humant t-celleukemivirus | |
| FI83538C (fi) | Foerfarande foer produktion av en hybridomcellinje. | |
| EP0162533A2 (en) | The detection of human cytomegalovirus specific IgM | |
| CN105950563B (zh) | 杂交瘤细胞株7e3及其分泌的抗口蹄疫a型病毒的单克隆抗体与应用 | |
| US5122448A (en) | Assay of anti-Epstein-Barr virus nuclear antigen antibodies with synthetic polypeptides | |
| EP1724285B1 (en) | Anti-HBs monoclonal antibodies | |
| US4752582A (en) | Monoclonal antibodies to human glycophorin A and cell lines for the production thereof | |
| Dittmar et al. | Monoclonal antibodies specific for dengue virus type 3 | |
| Lenkei et al. | High correlations of anti-CMV titers with lymphocyte activation status and CD57 antibody-binding capacity as estimated with three-color, quantitative flow cytometry in blood donors | |
| CS270195B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridoma vu 809/5 | |
| Kao et al. | Monoclonal antibodies for the rapid diagnosis of respiratory syncytial virus infection by immunofluorescence | |
| US4572896A (en) | Monoclonal antibodies to herpes simplex virus type I polypeptides | |
| Dawson et al. | Monoclonal antibodies to hepatitis A virus | |
| US4767710A (en) | Cell lines for the production of monoclonal antibodies to human glycophorin A | |
| Desgranges et al. | High affinity human monoclonal antibodies directed against hepatitis B surface antigen | |
| AU643188B2 (en) | Synthetic polypeptides and antibodies related to epstein-barr virus nuclear antigen | |
| CS270194B1 (cs) | Myší lymfocytárny hybridem VÚ 499/1 | |
| CS271293B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridoma vu t51/3 | |
| RU2186107C1 (ru) | Штамм гибридных клеток м1/n-10g9 животных mus musculus l., продуцирующих моноклональные антитела к вирусу марбург | |
| JP4035754B2 (ja) | ビスフェノールａハプテン化合物、ハイブリドーマ、有機溶媒耐性を有する抗ビスフェノールａ抗体及びそれらを用いたビスフェノールａの測定方法 | |
| JPH06153979A (ja) | 魚類イリドウイルスに対するモノクローナル抗体並びに該抗体を製造するためのハイブリドーマ及び方法 | |
| CS270193B1 (cs) | Myší lymfocytárny hybridům VÚ 303/4 | |
| CN119350495B (zh) | 一种埃博拉病毒结合蛋白抗体及其应用以及埃博拉病毒检测产品 |