CS270195B1 - Myší lymfocytárny hybridóm VÚ 809/5 - Google Patents
Myší lymfocytárny hybridóm VÚ 809/5 Download PDFInfo
- Publication number
- CS270195B1 CS270195B1 CS888154A CS815488A CS270195B1 CS 270195 B1 CS270195 B1 CS 270195B1 CS 888154 A CS888154 A CS 888154A CS 815488 A CS815488 A CS 815488A CS 270195 B1 CS270195 B1 CS 270195B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- hybridoma
- herpes simplex
- type
- simplex virus
- monoclonal antibody
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
CS 270 195 B1 1
Vynález sa týká nového hybridómu, tj. hybridného jednobunkového organizmu, zostroje-ného fúziou myšej myelómovsj buňky Sp2/0 a myšej slezinovej lymfoidnej buňky, produkujú -cej protilátku vofil glykoproteínu gB virusu Herpes simplex typ 1. U virusu Herpes simplex rozoznávame dva antlgénne odlišné typy Herpes simplex typ 1a typ 2. Ooteraz sa protilátky /antiséra/ voSi virusu Herpes simplex typ 1 připravovaliimunizáciou pokusných zvierat, najčasteJSie králikov, purifikovaným alebo nepurifIkovanýmvirusem resp. niektorým izolovaným protsínom'/Forghani B., Sohmidt N., Lennette E.H.:
Solid phase rádioimmunoassay for Identification of herpesv.irus homlnis types 1 and 2 fromolinioal materiál.'Appl. Microbiol. 2JB, /1974/ 661-667« Dreesman G.R., Watson D.O., Court-ney R.3., Adam E., Melnick 3.1.i Oetection of herpesvirus type-specifio antibody by micro-solid-phase radioimmunometrio assayi Intervirology 12, /1979/ 115-119). Sérum takto imuni-znvanýoh zvierat, odebrané po viaoerýoh dévkaoh antlpémi, alúžlln akn ztii'nj protllélnktzv. typovošpeoifickýoh, ktoré sa využívali na dékaz antigénu virusu Herpes simplex typ 1v základnom výskums a v lmunodiagnostioksj praxi. Vzhledom na to, že virusy Herpes simplextyp 1 a. 2 obsahuje nielen typovošpsoifické, ale aj typovo spoločné antlgénne determinanty,takto připravené antiséra vočl virusu Herpes simplex obsahujú vysoké hladiny typovospoloč-ných protilátok, ktoré sťažujú resp. úplné znemožňujú správné urCenie typu infikujúcehovirusu pri diagnostiokom testovaní. TypovospoloSné protilátky sa obvykle odstraňujú zosér vysycovaním s vírusom Herpes simplex typ 1, Co je procedúra velmi náročné na materiála naviac len v malom počte pripadov úspěšná. Výrobné šarže konvenčných typovošpeoifickýohantisér sa dajú ťažko Standardizovat a bývaju v širokom rozmedzi kvality. V poslednom ča-se sa s úspšchom používajú na typizáciu virusu Herpes simplex typ 1 monoklonálne protilát-ky tzv. typovošpeoifické, ktoré sů schopné detegovat iníekciu vírusom Herpes simplex typ1 v klinickom materiále.
Uvedené nevýhody doteraz používaných postupov sa nevyskytnú, ak je k dispozícii hy-bridómova buňková línia produkujúca typovošpeclfickú monoklonálnu protilátku vočl glyko-proteínu gB virusu Herpes simplex typ 1, ktorá je uložená v zbierke hybridómov Virologic-kého ústavu SAV, Mlýnská dolina 1, Bratislava pod označením VÚ 809/5.
Uvedený hybridóm bol získaný spčsobom známým z odbornej literatúry (Kohler, G.,Milstein, C.i Continuous oultures of fused cella secreting antibody of predefined speci-ficity. Nátuře, 256, /1975/, 495., Gerhard, W.i Fusion of cells in suspension and outgrowthof hybride in conditioned medium. Monoclonal antibodiest A. new dimension in Biological aria-lyses, Kennett R. H. a spol., eds. New York, Plenům Press /1980/, 770.) Hybridné buňky zís-kané po fúzii myších myelómovych Sp2/0 buniek a buniek získaných zo sleziny myši BALB/cimunizovanéj extraktom buniek infiko^nýoh vírusom Herpes simplex typ 1, boli klonované apo otestovaní bol vybraný klon VÚ 809/5. Výhodou hybridómu je, že produkuje homogénnu pro-tilátku, tzv. monoklonálnu protilátku, ktorá je schopná Specificky reagovat s glykoproteí-nom gB virusu Herpes simplex typ 1. Hybridóm VÚ B09/5 možno kultivovat in vitro v médiachvhodnýoh prs*živočišné buňky alebo in vivo v paritoneálnej dutině myši kmeňa BALB/o, Zkonzerv zmrazených buniek uchovaných v kvapalnom dusíku, možno začat produkciu protilátkybez áalšej imunizácie zvieraťa antigénom. Příklad:
Za účelom získania vačšieho množstva monoklonálnej protilátky VÚ B09/5 kultiváciouhybridómovyoh buniek in vivo, 5x10 buniek sa aplikovalo do paritoneálnej dutiny myši. Přelepšie uchytenie buniek bola myš 15 dní před aplikáciou buniek premedikovaná parafínovýmolsjom /0,5 ml intraperitoneálne na 1 myš/. PO 10 dňoch rastu hybridómu v peri.toneálne jdutině, bóla myš zabitá a vyprodukovaná ascitická tekutina odobraná. Týmto postupom možnopriemerne získat asi 7 ml ascitickej tekutiny obsahujúcej B mg/ml protilátky. Ascitickátekutina obsahujúca produkt hybridómu VÚ 809/5 vykazovala Specifické vazbu k virusu Herpessimplex typ 1 v rádioimunoanalytickom teste /RIA/, v imunoenzymatickej analýze /ELISA/ av imunofluorescenčnom teste /IF/. Metodou rádioimunoprecipitácie a elektrofořezy v póly-
Claims (1)
- 2 CS 270 195 B1 akrylamidovom géli sa zistila vazba monoklonálnej protilátky na glykoproteín gB virusuHerpes simplex typ 1. Buňky hybridómu VÚ 809/5 rastů in vitro ako polosuspenzná kultúra. Majů gulatý tvara velkost charakteristickú pře myelómove buňky. Obsahujú fúzované buňkové jadrá, su aneu-ploídne. Buňky hybridómu VÚ 809/5 majú ultraštrukt.úrny obraz typických myelómóvých bu-niek, kde prevažujúcou organelou sů volné a na membránu viazané polyribozómy. Základnýmkultivačným médiom je Oulbeccova modifikácia-Eagleovho minimálneho esenciáineho média(Dulbecco, R., Freeman, G., Virology B /1959/, 396). Toto médium, označované ako DMEM, jepre kultiváciu hybridómu doplněné gentamycinom a inaktivovaným prekolostrálnym tel’acím sérom <10%, Bioveta, Ivanovice na Hané). Hybridóm je kultivovaný pri 37 °C v atmosféře 5%COj. Oeho generačná doba je přibližné 24 hod. Produkovaná protilátka je monoklonálny imu-noglobulín podtriedy IgG 2a. Hybridóm VÚ B09/5 může byť využívaný ako zdroj protilátky voči glykoproteínu gB virusu Herpes simplex typ 1, ktorá sa dá použit na kvalitatívny důkaz přítomnosti virusu Her-pes simplex typ 1 vo vySetrovanom materiále, na kvantitativné stanovenie množstva infiku-júceho virusu resp. glykoproteínu gB, pri vyhodnocování epidemiologickéj situácie, na pu-rifikáciu glykoproteínu gB a ako zdroj protilátky Jedinej podtriedy (IgG 2a) pre přípravuantisér Specifických pre uvedené podtriedu. PREDMET VYNÁLEZU Myší lymfocytárny hybridóm VÚ 809/5, produkujúci monoklonálnu protilátku podtriedy IgG 2a voči glykoproteínu gB virusu Herpes simplex typ 1.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS888154A CS270195B1 (sk) | 1988-12-09 | 1988-12-09 | Myší lymfocytárny hybridóm VÚ 809/5 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS888154A CS270195B1 (sk) | 1988-12-09 | 1988-12-09 | Myší lymfocytárny hybridóm VÚ 809/5 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS815488A1 CS815488A1 (en) | 1989-10-13 |
| CS270195B1 true CS270195B1 (sk) | 1990-06-13 |
Family
ID=5431740
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS888154A CS270195B1 (sk) | 1988-12-09 | 1988-12-09 | Myší lymfocytárny hybridóm VÚ 809/5 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS270195B1 (cs) |
-
1988
- 1988-12-09 CS CS888154A patent/CS270195B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS815488A1 (en) | 1989-10-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Lee et al. | Monoclonal antibodies with specificity for three different serotypes of Marek's disease viruses in chickens. | |
| Walsh et al. | Monoclonal antibodies to respiratory syncytial virus proteins: identification of the fusion protein | |
| Pereira et al. | Type-common and type-specific monoclonal antibody to herpes simplex virus type 1 | |
| Noble et al. | Anti-gD monoclonal antibodies inhibit cell fusion induced by herpes simplex virus type 1 | |
| EP0610250B2 (en) | Porcine reproductive respiratory syndrome (prrs) vaccine and diagnostic | |
| CN105950563B (zh) | 杂交瘤细胞株7e3及其分泌的抗口蹄疫a型病毒的单克隆抗体与应用 | |
| EP0162533A2 (en) | The detection of human cytomegalovirus specific IgM | |
| Routledge et al. | The development of monoclonal antibodies to respiratory syncytial virus and their use in diagnosis by indirect immunofluorescence | |
| EP0960336B1 (en) | Peptide reagent for the detection of human cytomegalovirus (cmv) | |
| Rossiter et al. | The development of antibodies in rabbits and cattle infected experimentally with an African strain of malignant catarrhal fever virus | |
| Cui et al. | Monoclonal-antibody-mediated enzyme-linked immunosorbent assay for detection of reticuloendotheliosis viruses | |
| Dittmar et al. | Monoclonal antibodies specific for dengue virus type 3 | |
| Lenkei et al. | High correlations of anti-CMV titers with lymphocyte activation status and CD57 antibody-binding capacity as estimated with three-color, quantitative flow cytometry in blood donors | |
| CS270195B1 (sk) | Myší lymfocytárny hybridóm VÚ 809/5 | |
| Franko et al. | Monoclonal antibodies specific for Hantaan virus. | |
| Forghani et al. | Serological reactivity of some monoclonal antibodies to varicella-zoster virus | |
| Forghani et al. | Antisera to human cytomegalovirus produced in hamsters: reactivity in radioimmunoassay and other antibody assay systems | |
| CS270194B1 (cs) | Myší lymfocytárny hybridem VÚ 499/1 | |
| CS270193B1 (cs) | Myší lymfocytárny hybridům VÚ 303/4 | |
| US4572896A (en) | Monoclonal antibodies to herpes simplex virus type I polypeptides | |
| Kao et al. | Monoclonal antibodies for the rapid diagnosis of respiratory syncytial virus infection by immunofluorescence | |
| CS270192B1 (sk) | Myší lymfooytámy hybridám VÚ T96/4 | |
| Lee et al. | Comparison of rabies humoral antibody titers in rabbits and humans by indirect radioimmunoassay, rapid-fluorescent-focus-inhibition technique, and indirect fluorescent-antibody assay | |
| CS271293B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridoma vu t51/3 | |
| RU2186107C1 (ru) | Штамм гибридных клеток м1/n-10g9 животных mus musculus l., продуцирующих моноклональные антитела к вирусу марбург |