CS262698B2 - Způsob výroby teplotně stálých krystalických cefalosporinů - Google Patents

Abstract

Způsob výroby stabilních krystalických cefalosporinů obecného vzorce yilb, kde X je jodovodík nebo chlorovodík a —Nu znamená pyridiniový, N-methylmorfoliniový, N- -methylpyrrolidiniový nebo 2,3-cyklopente- nopyridiniový zbytek, vyznačující se tím, že se na roztok sloučeniny vzorce Via v 1,1,2- -trichlortrifluorethanu působí v libovolném pořadí jodtrimethylsilanem a pyridinem, N- -methylmorfo,línem, N-methylpyrrolidinem nebo 2,3-cyklopentenopyridinem, z produktu se působením nižšího alkanolu odstraní silylové skupiny a produkt se okyselí chlorovodíkem nebo jodov.odíkem. Vyrobené sloučeniny slouží jako meziprodukty pro přípravu cefalosporinových antibiotik se širokým spektrem účinku.

Description

Způsob výroby stabilních krystalických cefalosporinů obecného vzorce yilb, kde X je jodovodík nebo chlorovodík a —Nu znamená pyridiniový, N-methylmorfoliniový, N-methylpyrrolidiniový nebo 2,3-cyklopentenopyridiniový zbytek, vyznačující se tím, že se na roztok sloučeniny vzorce Via v 1,1,2-trichlortrifluorethanu působí v libovolném pořadí jodtrimethylsilanem a pyridinem, N-methylmorfo,línem, N-methylpyrrolidinem nebo 2,3-cyklopentenopyridinem, z produktu se působením nižšího alkanolu odstraní silylové skupiny a produkt se okyselí chlorovodíkem nebo jodov.odíkem. Vyrobené sloučeniny slouží jako meziprodukty pro přípravu cefalosporinových antibiotik se širokým spektrem účinku.

Vynález se týká teplotně stálých krystalických solí cefalosporinových derivátů obecného vzorce Vllb

Χ.Η,Ν·^ _XS ni

CR,-N:a coo (V i ib) kde

X znamená chlorovodík nebo jodovodík a + —Nu znamená zbytek vzorce

ve kterém

B¹ znamená atom vodíku nebo běžnou chránící skupinu karboxylové funkce, a jejich N-silylderiváty.

Ve shora citovaném patentovém spisu nejsou tyto sloučeniny doloženy příklady provedení, ale jsou pouze popsány strukturními vzorci jako meziprodukty pro alternativní sled reakcí pro přípravu určitých cefalosporinů (acylací a pak odštěpením Chrániči skupiny z karboxylové funkce). Příklady provedení ilustrující tento sled reakcí nepoužívají shora uvedené sloučeniny (a rovněž je při nich nutno provést jako závěrečný reakční stupeň odstranění chránící skupiny karboxylové funkce). Všechny finální produkty popsané v americkém patentovém spisu č. 4 406 899 vyžadují zařazení chromatograflckého čištění k rozdělení vzniklé směsi A²- a A³-isomerů.

V americkém patentovém spisu číslo 4168 309, vydaném 18. září 1979 (Earry E. Ayresj, jsou popsány sloučeniny obecného vzorce

Tyto sloučeniny jsou v A²-Isomeru a lze je převádět na cefalosporinová antibiotika bez nutnosti odštěpování chránící skupiny karboxylové funkce.

Vlastním předmětem vynálezu je způsob výroby solí shora uvedeného obecného vzorce Vllb.

V americkém patentovém spisu číslo 4 406 899, vydaném 27. srpna 1983 (Aburaki a spod.), jsou popsány sloučeniny obecného vzorce

kde

Ph znamená fenylovou skupinu a sloučeniny obecného vzorce

ve kterém

R“‘ představuje chrániči skupinu karboxylové funkce,

R¹ společně s uhlíkovými atomy, na něž je navázán, tveří případně substituovaný nasycený nebo částečně nasycený čtyř- až desetičlenný heterocyklický kruh, který může obsahovat jeden nebo několik dalších heteroatomů vybraných ze skupiny zahrnující kyslík, dusík a síru, přerušovaná čára představuje buď cef-2-em-, nebo cef-3-emderivát a

X^- znamená aniont, a jejich adiční soli s kyselinami a N-silylované deriváty.

V citovaném patentovém spisu nejsou tyto sloučeniny doloženy příklady provedení, ale jsou popsány pouze strukturními vzorci jako meziprodukty pro alternativní syntézu určitých cefálosporinů (acylací a pak odštěpením karboxylové skupiny). Příklady provedení ilustrující tuto syntézu nepoužívají tyto sloučeniny (a rovněž je při nich nutno provést jako závěrečný reakční stupeň odstranění chránící skupiny karboxylové funkce).

Používání chráněných karboxylových funkcí při postupech podle obou shora citovaných patentů je nevýhodné proto, že vyžaduje po provedení acylace odštěpení chrá262698 nicích skupin, při němž dochází rovněž částečně k odštěpení acylového zbytku, takže dosažený výtěžek je nižší než 100 °/o.

V americkém patentovém spisu číslo 4 223 135, vydaném 16. září 1980 (Derek Walker a spol.), jsou popsány sloučeniny obecného vzorce

ve kterém

B znamená atom chloru, methoxyskupinu nebo zbytek —CHzE, kde E představuje vodík, skupinu —OCCH3, —0CNH2 nebo —SZ,

II II o o v níž Z znamená popřípadě substituovaný pěti- nebo šestičlenný heterocyklický kruh obsahující 2 až 4 atomy dusíku a popřípadě 1 atom kyslíku nebo síry, přičemž atom sí6 ry ve skupině —SZ je navázán na uhlíkový atom heterocyklického kruhu ve významu symbolu Z a

A představuje trimethylsilylovou skupinu nebo snadno odštěpitelnou esterovou chránící skupinu.

Tyto sloučeniny se připravují přidáním suchého oxidu uhličitého k roztoku sloučeniny obecného vzorce

ve kterém

A a B mají shora uvedený význam, v inertním organickém rozpouštědle, jímž je s výhodou methylenchlorid.

Americký patentový spis číslo 4 316 017, který byl udělen na částečně pokračovací přhlášku patentového spisu č. 4 223 135, má v podstatě stejný popis.

Americký patentový spis číslo 4 336 253,' vydaný 22. června 1982 (Willlam H. W. Lunn), popisuje sloučeniny obecného vzorce I

dl

......

a jejich přípravu reakcí sloučeniny obecného vzorce II

N.....—~r

C-CONH

II

N.

o

OR

OCCH₃ cooh til} se silylačním činidlem, jako je trimethylsilylacetamid, bistrimethylsilylacetamid apod., vedoucí lke vzniku sloučeniny obecného vzorce III

SiHN

reakcí sloučeniny obecného· vzorce III s trimethylsilyljodidem za vzniku sloučeniny obecného vzorce IV

N

C~ CONH- j- -/'

J-WV 'CH,1 ^0R COQSiJCHJ.

itV) která se pak podrobí reakci se sloučeninou obecného vzorce za vzniku sloučeniny obecného vzorce I.

Jako rozpouštědla vhodná pro reakce vedoucí ke vzniku sloučenin vzorců III a IV jsou uváděny chlorované uhlovodíky a nižší álkylnitrily.

Americké patentové spisy č. 4 379 787, 4 382 931 a 4 382 932 (William H. W. Lunn a spal.), se týkají analogických sloučenin a postupů, kde R je například amino-substituovaný oxazolový, oxadlazolový nebo isoxazolový kruh a substituentem v poloze 3 je například popřípadě substituovaný pyridinový, chinolinový nebo isochinolinový zbytek.

V jihoafrickém patentovém spisu číslo 84/3343, vydaném 25. října 1984, je popsán způsob výroby cefalosporinů obecného vzorce I

ve kterém

R znamená thiazolylový nebo 1,2,4-thiadiazolylový zbytek,

R¹ představuje atom vodíku nebo methoxyskupinu,

R² znamená některý z četných substituentů známých z chemie cefalosporinů a

A představuje popřípadě substituovaný chinoliniový nebo pyridiniový zbytek.

Sloučeniny shora uvedeného obecného vzorce I se připravují tak, že se sloučenina obecného vzorce II

ve kteirém

R⁸ znamená atom vodíku nebo chránící skupinu aminové funkce a

R⁷ představuje skupinu, kterou je možno nahradit působením báze odpovídající zbytku A, nechá reagovat s bází odpovídající zbytku A v přítomnosti trialkyljodsilanu, za vzniku sloučeniny obecného vzorce III

R<

r⁸nh--4 o | yy coo“ , lnu která se pak (po odstranění chránící skupiny aminové funkce) acyluje kyselinou obecného vzorce IV

R—C—COOH

OR²

Mezi uváděné vhodné skupiny R⁷ náležejí acetoxyskuplna, propionyloxyskuplna, chloracetoxyskupina, acetylacetoxyskupina a karbamoyloxyskupina. Jako vhodná rozpouštědla jsou uváděna následující rozpouštědla: methylenchlorid, chloroform, dichlorethan, trichlorethan, tetrachlormethan, acetonitrll, propionitril a frigandy. Nejvýhodnějším rozpouštědlem je methylenchlorid.

Ve shora citovaném patentu se uznává, že shora uvedený obecný postup je znám, že však autoři vynálezu zjistili, že je možno dosáhnout překvapivě vysokých výtěžků v případě, že se nukleofilní substituční reakce sloučeniny obecného vzorce II (vedoucí ke sloučenině obecného vzorce III) provádí tak, že se nejprve přidá nadbytek (až dvacetinásobný nadbytek) báze odpovídající zbytku A a pak trialkyljodsilan v množství až do desetinásobného nadbytku.

V publikované německé přhlášce vynálezu č. P 3316798.2, podané 7. května 1983, z níž se uplatňuje pro shora citovaný jihoaf262698 rický patentový spis unijní priorita, jsou uvedena stejná rozpouštědla jako výše, pouze s tou výjimkou, že se namísto výrazu „frigand“ používá výraz frigen“. V 10. vydání publikace Merck Index jsou uvedeny preparáty Frigen 11, Frigen 12 a Frigen 114 jako jiná označení preparátů Freon 11, Freon 12 a Freon 114, což jsou trichlorfluormethan, dichlordifluormethan, resp. l,2-dichlor-l,l,2,2-tetrafluoretban.

Sloučeniny shora uvedeného obecného vzorce Vllb, které se připravují způsobem podle vynálezu, jsou krystalické, teplotně stabilní a prakticky prosté odpovídajícího A²-isomerui. V důsleduk nepřítomnosti tohoto A²-isomeru lze shora uvedené sloučeniny převádět acylací na širokou paletu cefalosportnů, které jsou rovněž prakticky prosté A²-isomeru a n nichž tedy není nutno provádět chromatografické dělení ²A- aA³-isomerů. V důsledku teplotní stálosti sloučenin podle vynálezu je možno tyto látky izolovat a skladovat, a převádět je na výsledné produkty až tehdy, kdy je to žádoucí. Další výhodou látek obecného vzorce Vllb je to, že před acylací nevyžadují chránění karboxylové skupiny a v důsledku toho není nutno po acylací chránící skupinu karhoxylové funkce odštěpovat, čímž se zlepšuje účinnost celého postupu.

V souladu s vynálezem se sloučeniny obecného vzorce Vllb připravují tak, že se na roztok sloučeniny obecného vzorce IVa

(IV&A v 1,1,2-trichlortrifluorethanu působí v libovolném pořadí nejméně jedním ekvivalentem jodtrimethylsilamu a nejméně jedním ekvivalentem sloučeniny obecného vzorce

z výsledného produktu se působením nižšího alkanolu odstraní silylové skupiny a produkt se okyselí chlorovodíkem nebo jodovodíkem.

Podle jednoho provedení způsobu podle vynálezu se tedy na roztok sloučeniny vzorve IVa τΎ Ί

I

O i;

CH-GC C-H (IVáJ v 1,1,2-trichlortrifluorethanu působí trimethylsilyljodidem (jodtrimethylsilanem). Toto rozpouštědlo překvapivě vede ke vzniku sloučeniny níže uvedeného vzorce lita, která je prakticky prostá A²-isomeru, zatímco při použití podobných běžných rozpouštědel, například 1,2-dichlorethanu, vzniká sloučenina vzorce lila obsahující značné množství (například 25 %) nežádoucího A²-isomeru. Použití jiných běžných rozpouštědel, jako chlorbenzenu, dioxanu, tetrachlarmethanu a podobně, rovněž vede ke vzniku značných množství nežádoucího A²-isomeru.

Shora zmíněná reakce se provádí při teplotě zhruba od 5 ^CC do 45 °C, přičemž účelně se pracuje při teplotě místnosti. K převedení celého množství sloučeniny vzorce IVa na sloučeninu vzorce lila je zapotřebí nejméně jednoho ekvivalentu trimethylsilyljodidu. V praxi se na každý ekvivalent sloučeniny vzorce IVa používá zhruba 0,9 až 1,5, nejvýhodněji zhruba 1,0 až 1,2 ekvivalentu trimethylsilyljodidu.

Vzniklá sloučenina odpovídající vzorci lila

( CHJ.,Sí.hN~~ o

CQ^ScíCH^ (UláJ se pak v 1,1,2-trichlortrifluorethanu nechá reagovat s výše uvedenými nukleofily za vzniku sloučeniny níže uvedeného obecného vzorce Ha. S překvapením bylo zjištěno, že při použití 1,1,2-trichlortrifluorethanu jako rozpouštědla vzniká sloučenina vzorce Ha prakticky prostá A²-isomeru, zatímco použití běžných rozpouštědel, jako methylenchloridu, tetrahydromethanu, chloroformu nebo dioxanu vede ke vzniku sloučeniny vzorce II obsahující velké množství nežádoucího A²-isomeru (například 50 % A²-isomer).

Reakce se provádí při teplotě zhruba od —10 °C do 25 °C, s výhodou zhruba od 0 °C do 10 °C. I když je možno použít větší nebo menší množství nukleofilu, nejčistší produkt vzniká v případě, že se na každý ekvivalent sloučeniny vzorce lila použije zhruba 1 ekvivalent nukleofilu.

Na roztok vzniklé vzorce Ila	sloučeniny	obecného
(CHJ, SLHN-r— w *»>	ς τη
		-£ - „M Λ .*
0	í ‘ ’ >?.
	co, sík:

v 1,1,2-trichlortrifluorethanu (Freon TF] se pak působí nižším, alkanolem nebo vodo-u k odstranění trimethylsilylových skupin a pak chlorovodíkem nebo jodovodíkem za vzniku hydrochloridu nebo hydrojodidu. K odštěpení trimethylsilylových skupin se s výhodou používá nižší alkanol, nejvýhodněji methanol. Reakce se provádí při teplotě zhruba od —10 °C do 25 °C, s výhodou při teplotě cca 0 až 10 °C. Na každý ekvivalent sloučeniny vzorce Ila se používá cca 2 až 5 ekvivalentů methanolu, s výhodou zhruba 3 až 4 ekvivalenty methanolu.

Podle alternativního postupu přípravy sloučeniny vzorce Ila se k roztoku sloučeniny vzorce IVa v 1,1,2-trichlortrifluorethanu přidá nejprve nukleofil a pak nejméně 1 ekvivalent trimethylsilyljodidu. Tuto reakci lze provádět při teplotě zhruba od 5 do 45 °C, přičemž účelně se pracuje při teplotě okolo 35 °C. Nukleofil je možno používat v množství zhruba od 1,0 do 2,0 ekvivalentu na každý ekvivalent sloučeniny vzorce IVa, s výhodou v množství zhruba od 1,2 do 1,5 ekvivalentu. Trimethylsilyljodid je zhruba od 1,5 do 2,0 ekvivalentů na každý ekvivalent sloučeniny vzorce IVa.

Sloučeninu vzorce IVa lze připravit reakcí 7-aminocefalosporanové kyseliny (7-ACA), tj. sloučeniny vzorce V

H₂N-r—S ₀

COgH (V!

s hexamethyldisllazanem v přítomnosti cca 0,01 až 0,1 ekvivalentu trimethylsilyljodidu na každý ekvivalent 7-aminocefalosporanové kyseliny, v, 1,1,2-trichlortrifluorethanu nebo methylenchloridu, při teplotě od teploty místnosti do teploty varu rozpouštědla. S výhodou se reakce provádí za varu pod zpětným chladičem. Hexamethyldisilazan je možno používat v- množství zhruba od 0,95 do 1,4 ekvivalentu na každý ekvivalent 7-aminocefalosporanové kyseliny, s výhodou zhruba od 1,0 do 1,3 ekvivalentu, a nejvýhodněji pak v množství 1,2 ekvivalentu na každý ekvivalent 7-amlnocefalosporanové kyseliny.

Celý způsob podle vynálezu se s výhodou provádí v jediné reakční nádobě, tj. bez Izolace meziproduktů.

Při provádění shora popsaného sledu reakcí bylo zjištěno, že spíše než přes odpovídající 3-chlormethylderivát nebo 3-brommethylderivát je třeba postupovat přes 3-jodmethylderivát vzorce lila. S překvapením bylo zjištěno, že totiž reakcí sloučeniny vzorce IVa s trimethylsilylchloridem nebo trimethylsilylbromidem vzniká menší množství očekávaného 3-chlormethyl- nebo 3-brommethylanalogu sloučeniny vzorce lila, například i po desetidenním zahřívání k varu pod zpětným chladičem maximálně asi 5 až 15 %.

Sloučeniny obecného vzorce Vllb lze snadno převést na širokou paletu antibiotik, a to acylací příslušnou kyselinou vytvářející postranní řetězec. Tak například výhodná sloučenina odpovídající obecnému vzorci Vllb, +

v němž —Nu představuje N-methylpyrrolidiniový zbytek a X má shora uvedený význam (sloučenina obecného vzorce I) se převede na 7-[a-(2-aminothiazol-4-yl)-a-(Z)-methoxyiminoacetamido] -3- [ (1-methy.l-l-pyrrolidinio) methyl] -3-cefem-4-karboxylát vzorce VIII N-acylací aktivovaným esterem, jímž je 1-benzotriazoly 1- (Z) -2- (2-aminothiazol-4-ylj-2-methoxyiminoacetát, postupem podle následujícího reakčního schématu:

OCONH li

N.

.S.

\

OC i—i

..\k

COO (Vlil)

Tato reakce se snadno uskuteční v přítomnosti Ν,Ν-dimethylanilinu v dimethylformamidu při teplotě místnosti a při reakční době pohybující se od 10 do 20 hodin, nebo tak, že se sloučenina vzorce I rozpustí ve vodě a dimethylformamidu, k roztoku se přidá za chlazení ledem hydrogenuhličitan sodný a

262693 směs se nechá reagovat při teplotě místnosti po dobu zhruba od 30 minut do 5 hodin, nebo tak, že se sloučenina vzorce I rozpustí ve vodě, roztok se ochladí na 5 až 15 °C, přlkapáním hydroxidu sodného se pH upraví na hodnotu 5,5 až 6, přidá se tetrahydrofuran, hydroxidem sodným se hodnota pH upraví na 6,7 až 6,9, přidá se aktivovaný ester a reakce se nechá probíhat 1 až 5 hodin při teplotě místnosti. Používaný aktivovaný ester je známý a je popsán například v Japan Kokai 54-95593 (28 07 79] (Hoechst), a ve zveřejněné německé přihlášce vynálezu číslo

2758000.3 (24 12 77). Použití sloučenin vzorce VIII je popsáno v americkém patentovém spisu č. 4 406 899 (Aburaki a spol.).

I ostatní sloučeniny obecného vzorce Vllb je možno acylovat analogickým způsobem za vzniku velkého množství širokospektrých cefalosporinů.

Vynález ilustrují následující příklady provedení, jimiž se však rozsah vynálezu v žádném směru neomezuje. Tvary signálů v NMR spektrech se označují následujícími běžnými zkratkami:

s = singlet t = triplet m — multiplet š = široký signál d = dublet q — kvartet dd = dvojitý dublet

Příklad 1 (6R,7R) -trimethylsilyl-7- (trimethylsilyl) amino-3-acetoxymethylcef-3-em-4-karboxylát

Metoda A

V sušárně vysušená baňka opatřená Friedrichovým chladičem se v proudu suchého dusíku ochladí na teplotu místnosti a předloží se do ní 50,0 g (184 mmoly) 7-aminocefalosporanové kyseliny o čistotě 97,2 % a 400 ml 1,1,2-trichlartrifluorethanu vysušeného nad molekulárním sítem. Ke vzniklé suspenzi se za intenzivního míchání a za nepřístupu vlhkosti přidá 46,5 ml (222 mmoly; 1,2 ekvivalentu) 98% 1,1,1,3,3,3-hexamethyldisilazanu a 0,80 ml (5,6 mmolu; 0,03 ekvivalentu) jodtrimethylsilanu. Suspenze se 16 až 18 hodin silně zahřívá k varu pod zpětným chladičem, načež se ochladí na teplotu místnosti. ^XH-NMR spektrum vzorku mírně zakalené reakční směsi svědčí o vyšší než 95% konverzi na žádaný produkt.

NMR (perdeuterodichlormethan, 360 MHz, hodnoty á):

0,23 [s, 9H, N—Si(CH3)3],

0,38 [s, 9H, — COOSi(CH3)3],

1,51 (d, 1H, J = 13,6 Hz, NH—],

2,09 (s, 3H, —COCH3),

3,41 (d, 1H, J == 18,3 Hz, —SCHa—),

3,61 (d, 1H, J = 18 3 Hz, — SCHa),

4,80 [dd, 1H, J = 4,5, 13,6 Hz, —COCH/NHSi(CH3)3/],

4,83 (d, 1H, 1 = 13,2 Hz, —CH2OCOCH3),

4,91 [d, 1H, 1 = 4,5¹ Hz, —COCH/NHSi(CH3)3CH—/],

5,11 (d, 1H, J = 13,2 Hz, —CH2OCOCH3). Metoda B

V sušárně vysušená baňka opatřená Friedrichovým chladičem se v proudu suchého dusíku ochladí na teplotu místnosti a předloží se do ní 10,0 g (36,7 mmolu) 7-aminocefalosporanové kyseliny o čistotě 97,2 % a 80 ml suchého 1,1,2-trichlortrifluorethanu vysušeného nad molekulárním sítem. Ke vzniklé suspenzi se přidá 9,3 ml (44,1 milimolu; 1,2 ekvivalentu) 98% 1,1,1,3,3,3-hexamethyldisilazanu a 44 ml (1,1 mmolu; 0,03 ekvivalentu) 0,025M roztoku jodovodíku v

1,1,2-trichlortrifluorethanu (připraveného uváděním jodovodíku do suchého 1,1,2-trichlortrifluorethanu a titrací výsledného nasyceného roztoku na fenolftaleinj. Reakční suspenze se za intenzivního míchání a za vyloučení přístupu vlhkosti energicky vaří pod zpětným chladičem po dobu 22 hodiny, načež se ochladí na teplotu místnosti. ^XH-NMR spektrum měřené v perdeuterodichlormethanu při 360 MHz svědčí o vyšší než 95% konverzi na žádaný produkt.

Metoda C

V sušárně vysušená baňka opatřená Friedrichovým chladičem se v proudu suchého dusíku ochladí na teplotu místnosti a předloží se do ní 10,0 g (36,7 mmolu) 7-aminocefalosporanové kyseliny o čistotě 97,2 % a 80 ml dichlormethanu vysušeného nad molekulárním sítem. Ke vzniklé suspenzi se za energetického míchání a za vyloučení přístupu vlhkosti přidá 9,3 ml (44,1 mmolu; 1,2 ekvivalentu) 98% 1,1,1,3,3,3-hexamethyldisilazanu a 0,16 ml (1,1 mmolu; 0,03 ekvivalentu) trimethylsilyljodidu. Reakční suspenze se 5 hodin energicky vaří pod zpětným chladičem, načež se mírně zakalená reakční směs ochladí na teplotu místnosti. ^XH-NMR spektrum měřené v perdeuterodichlormethanu při 360 MHz svědčí o vyšší než 95% konverzi na žádaný produkt. Příklad 2 (6R,7R) -trimethylsilyl-7- (trimethylsilyl )amino-3-jodmethylcef-3-em-4-karboxylát

Metoda A

K reakční směsi obsahující (6R,7R)-trimethylsilyl-7- (trimethylsilyl) amino-3-acetoxymethylcef-3-em-4-karboxyilát v 1,1,2-trichíor262698 trifluorethanu (připravené postupem podle metody A příkladu 1 z 50,0 g 7-aminocefalosporanové kyseliny) se v atmosféře suchého dusíku při teplotě místnosti pomalu přidá celkem 30 ml (210 mmolů; 1,15 ekvivalentu) trimethylsilyljodidu. Průběh reakce se sleduje ¹H-NMR spektroskopií (v acetátové oblasti). Po jedné hodině se reakční suspenze zfiltruje pod přetlakem dusíku a pevný materiál se jednou promyje 100 ml čerstvého 1,1,2-tricblortrifluorethanu. Vzorek filtrátu má následující ¹H-NMR spektrum, které svědčí o tom, že in šitu vznikl (6R,7R) -trimethylsilyl-7- (trimethylsilyl) amino-3-jodmethylcef-3-em-4-karboxylát.

NMR (perdeuterodichlormethan, 360 MHz, hodnoty 5):

0,16 [s, 9H, NHSi(CH3)3],

0,40 [s, 9H, —COOSi(CH3)3],

1,51 (d, 1H, J = 13,4 Hz, NH),

3,54 (d, 1H, J = 17,9 Hz, —SCHz—),

3,80 (d, 1H, J = 17,9 Hz, — SCH2—),

4,37 (d, 1H, J = 9,2 Hz, —CH2I),

4,49 (d, 1H, J = 9,2 Hz, — CH2l),

4,75 [dd, 1H, J = 4,6, 13,4 Hz, —COCH/NHSi[CH3)3/],

4,89 [d, 1H, J = 4,6 Hz, —COCH/NHSi;(iCH3)3/CH—].

Metoda B

K míchanému roztoku (6R,7R)-trimethylsilyl-7- (trimethylsilyl) amino-3-acetoxymethylcef-3-em-4-karboxylátu v dichlormethanu [připraven postupem podle metody C příkladu 1, přičemž se jedná o 20 ml reakční směsi (pro tuto reakci bylo použito 11,7 milimolu výchozího materiálu)] se v atmosféře dusíku při teplotě místnosti pomalu přidá 1,66 ml (11,7 mmolů; 1,0 ekvivalentu) jodtrimethylsilanu. Po dalším jednohodinovém míchání svědčí ¹H-NMR spektrum (acetátová oblast) vzorku reakční směsi o vyšší než 95% konverzi na žádaný (6R,7R)-trimethylsilyl-7- (trimethylsilyl )amino-3-jodmethylcef-3-em-4-karboxylát.

Příklad 3 (6R,7R) -7-amino-3- (1-methyl-l-pyrrolidinio)methylcef-3-em-4-karboxylát-monohydrochlorid

Metoda A

K roztoku (6R,7R)-trimethylsilyl-7-i[ trimethylsilyl ),amlno-3-jodmethylcef-3-em-4-karboxylátu v 1,1,2-trichlortrifluorethanu (připravenému postupem podle metody A příkladu 2 z 50,0 g 7-aminocefalosporanové kyseliny ) se při teplotě 0 až 5 °C v atmosféře suchého dusíku přikape takovou rychlostí, aby bylo možno udržet teplotu reakční směsi pod 10 °C, 19,0 ml (183 mmolů; 1,0 ekvivalentu) 97% N-methylpyrrolidimu vysušeného nad molekulárním sítem. Po skončeném přidávání se výsledná suspenze 15 minut intenzívně míchá při teplotě 0 až 5 °C, pak se k ní k usnadnění míchání přidá dalších 100 ml suchého 1,1,2-trichlortrifluorethanu, načež se míchá takovou rychlostí, aby se teplota reakční směsi udržela pod 10 °C, přikape 25 ml (615 mmolů; 3,35 ekvivalentu) methanolu. Suspenze se pak ještě dalších 15 minut energicky míchá při teplotě 0 až 5 °C. Reakční směs se zfiltruje a zachycený pevný materiál se jednou promyje 100 ml čerstvého 1,1,2-trichlortrifluorethanu. Produkt se nejprve částečně vysuší 15mlnutovým odsáváním, načež se 16 hodin suší ve vakuu při teplotě místnosti. Získá se

71,3 g (více než 100 %) surového produktu.

Ke shora připravenému materiálu se přidá 200 ml vody, hodnota pH suspenze (2,40) se přikapáním koncentrované kyseliny chlorovodíkové sníží na 0,50, přidá se 10,0 g aktivního uhlí a výsledná suspenze se 15 minut míchá při teplotě místnosti. Aktivní uhlí se odfiltruje přes vrstvičku 10,0 g křemeliny, která se pak jednou promyje 25 ml čerstvě deionizované vody. Z vodného roztoku se produkt vysráží přikapáním 5 objemových dílů acetonu. Vzniklá suspenze se 0chladí na 0 až 5 °C a při této teplotě se udržuje 30 minut, načež se zfiltruje v.e vakuu. Filtrační koláč se postupně promyje 50 ml studené (0 až 5°C) směsí acetonu a vody (5 :1) a dvakrát vždy 50 ml acetonu, částečně se vysuší 15minutovým odsáváním a pak sel dosuší ve vakuu. Získá se 23,3 g (39 procent) sněhově bílého krystalického (6R,7R) -7-amino-3- (1-methyl-l-pyrrolidinio) methylcef-3-em-4-karboxylát-monohydrochloridu.

Podle kapalinové chromatografie s vysokou rozlišovací schopností činí čistota produktu 96,3 %.

NMR (deuteriumoxid, 360 MHz, hodnoty delta):

2,14 — 2,32 [nejasný tvar signálu, 4H, —N(CH3)CH2CH2—],

3,00 (s, 3H, NCH3),

3,46 — 3,67 [m, 5H, —N(CH3),CH2CH2,

SCH2],

3,96 (d, 1H, J = 16,9 Hz, —SCH2),

4,09 (d, 1H, J = 13,9 Hz, =CCH2N—),

4,73 (d, 1H, J = 13,9 Hz, =CCH2N—),

5,21 (d, 1H, J = 5Í,1 Hz, — COCHCHS—),

5,41 (d, 1H, J = 5,1 Hz, —COCHCHS—).

Metoda B

K suspenzi (6R,7R)-trimethylsilyl-7-(trimethylsilyl )amino-3- (1-methyl-l-pyr rolidino) methylcef-3-em-4-karboxylát-jodidu v 1,1,2-trichlortrifluorethanu (připravené postupem podle metody A z 20,0 g 7-aminocefalosporanové kyseliny), ochlazené na 0 až 5 °C, se v atmosféře suchého dusíku během 5 minut přikape za udržování teploty pod 9 C 10' ml (246 mmolů; 3,35 ekvivalentu) methanolu. Po skončeném přidávání se suspenze 15 minut míchá při teplotě místnosti, načež se k ní během 10 minut přikape 50 ml 3N kyseliny chlorovodíkové (připravené přidáním 250 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové k 756 ml deionizované vody). Po skončeném přidávání se chladicí lázeň odstraní, reakční směs se 15 minut míchá, pak se fáze oddělí, objem vodné fáze se upraví na 100 ml a vodná vrstva se při teplotě místnosti 30 minut míchá s 4,0 g (20 % hmotnosti výchozí 7-aminosporanové kyseliny) aktivního uhlí. Výsledná suspenze se zfiltruje přes vrstvu 4,0 g křemeliny, která se pak jednou promyje 10 ml deionizované vody. Objem vodného filtrátu se upraví na 1Ό0 mililitrů.

Krystalízační metoda 1:

K 50 ml shora připravené zahuštěné vrstvy se k vyrážení produktu přikape 250 ml (5 objemů) acetonu. Výsledná suspenze se 1 hodinu míchá za chlazení vodou s ledem, pak se odsaje, zbytek na filtru se postupně promyje dvakrát vždy 40 ml směsi acetonu a vody (5:1) a jednou 40 ml acetonu (promývací roztoky mají teplotu 0 až 5°C), částečně se vysuší 15minutovým odsáváním a pak se dosuší ve vakuu při teplotě místnosti (15' hodin). Získá se 4,48 g (37 '%, vztaženo na 50% teoretický výtěžek z 20,0 g výchozí 7-aminocefalosporanové kyseliny) bezbarvého krystalického (6R,7R)-7-amino-3- (1-methyl- 1-pyrrolidinlo )methyIcef-3-em-4-karboxylát-monohydrochloridu. Krystalizační metoda 2:

K 50 ml shora připravené zahuštěné vodné vrstvy se k vysrážení produktu přikape 150 ml (3 objemy) isopropylalkoholu. Výsledná suspenze se za chlazení vodou s ledem 1 hodinu míchá, pak se odsaje, zbytek na filtru se postupně promyje dvakrát vždy 40 ml směsi isopropylalkoholu a vody (9:1) a jednou 40 ml acetonu (promývací roztoky mají teplotu 0 až 5C), částečně se vysuší ISminutovým odsáváním a pak se dosuší ve vakuu při teplotě- místnosti (15 hodin). Získá se 5,46 g (45 %, vztaženo na 50% teoretický výtěžek z 20,0 g výchozí 7-amlnocefalosporanové kyseliny) špinavě bílého krystalického (6R,7R) -7-amino-3- (1-methyl-l-pyrrolidinio) methylcef-3-em-4-karboxylát-monohydrochloridu.

Metoda C

K roztoku (6R,7R)-trimethylsilyl-7-trimethylsilyl)a.mino-3-jod!methylcef-3-em-4-karboxylátu v dichlormethanu (připravenému podle metody B příkladu 2) se při teplotě 0 až 5 °C v atmosféře suchého dusíku takovou rychlostí, aby se teplota udržela pod 10 °C přikape 1 21 ml (11,7 mmolu; 1,0 ekvivalentu) 97% N-methylpyrro,lidinu vysušeného nad molekulárním sítem. Po skončeném přidávání se suspenze 15 minut míchá při teplotě 0 až 5 °C, pak se k ní při teplotě pod 10 °C přikape 0,95 ml (23,5 mmolu; 2,0 ekvivalentu) methanolu a v míchání při teplotě 0 až 5°C se pokračuje ještě 15 minut. Pevný materiál se odsaje, promyje se jednou 50 ml methanolu a jednou 50 ml dichlormethanu a vysuší se ve vakuu při teplotě místnosti. Získá se 2,65 g (76 % surového ,{6R,7R) -7-amino-3- (1-methy l-l-pyrrolidinio )methylcef-3-em-4-karboxy,iátu (jako hydrojodid) ve formě slabě červeně žluté pevné látky. ¹H-NMR spektrum tohoto materiálu (360 MHz) svědčí o tom, že produktem je směs Δ²- a A³-isomerů v poměru 65 : 35.

Příklad 4

Dihy drochlorid (6R,7R) -7-amino-3-{pyridinio)methylcef-3-em-4-karboxylové kyseliny

K míchanému roztoku (6R,7R) -trimethylS'ilyI-7-(trimethylsilyl)ammo-3-jodmethylcef-3-em-4-karboxylátu v 1,1,2-trichlortrifluorethanu (připraven postupem podle metody A příkladu 2 z 2,50 g 7-amirtocefalosporanové kyseliny) se při teplotě 0 až 5 °G v atmosféře suchého dusíku přikape během 10 minut roztok 1,6 ml (20,0 mmolů; 2,2 ekvivalentu) pyridinu vysušeného nad hydroxidem draselným v 5 ml 1,1,2-trichlortrifluorethanu vysušeného nad molekulárním sítem. Po skončeném přidávání se reakční směs míchá ještě 15 minut, pak se k ní přikape 1,5 mililitru (37,0 mmolů; 4,0 ekvivalenty) methanolu a vzniklé suspenze se 15 minut míchá při teplotě 0 až 5 °C. Pevný materiál se odsaje, promyje se čerstvým 1,1,2-trichlortrifluormethanem a vysuší se ve vakuu do konstantní hmotnosti. Získá se 3,0 g surového produktu.

Přítomnost žádaného (6R,7R)-7-amino-3- (pyrtdinio) methylcef-3-em-4-kar boxylátu (ve formě hydrojodldu) v tomto surovém materiálu byla potvrzena srovnáním ¹H-NMR spektra (360 MHz) a chromatogramu získaného při kapalinové chromatografií s vysokou rozlišovací schopností (čistota 34 %) se spektrem a chromatogramem autentického vzorku tohoto materiálu připraveného nezávislým způsobem [viz rovněž G. C. D. Smith, evropský patentový spis číslo 70706, 26 01 83, str. 21).

Příklad 5

Pokus o přípravu (6R,7R)-7-amino-3-,(1-methyl-l-pyrrolidinio) methylcef-3-em-4-karboxyiát-monohydrochloridu postupnou reakcí (6R,7R)-trimethylsilyl-7- (trimethylsllyl )amino-3-aceto262698 xymethylcef-3-em-4-karboxylátu v

1,1,2-trichlortrifluorethanu s hromtrimethylsilanem, N-methylpyrrolidinem a vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové

K mírně zakalené reakčni směsi obsahující (6R,7R) -trimethylsilyl-7- (trimethylsilyl) aimino-3-acetoxymethylcef-3-em-4-karboxylát v 1,1,2-trichlortrifluorethanu (připravené postupem podle metody A příkladu 1 z 10,0 g 7-aminocefalosporanové kyseliny) se za míchání při teplotě místnosti v atmosféře suchého dusíku pomalu přidá během 1 minuty

4,3 ml (42,2 mmolů; 1,15 ekvivalentu) 98% bromtrimethylsilanu. Průběh reakce se sleduje ¹H-NMR spektroskopií. Po 90minutovém míchání při teplotě místnosti je možno v reakční směsi detekovat pouze stopy reakčních produktů (3-brommethylcefalosporin a trimethylsilyl-acetát). Reakčni směs se v dusíkové atmosféře mírně zahřeje k varu pod zpětným chladičem a průběh reakce se dále sleduje ^XH-NMR spektroskopií. Po 10 dnech v reakčni směsi převládají výchozí materiály. Při analýze reakčni směsi ^XH-NMR spektroskopií (360 MHz) byla v nejlepším případě zjištěna pouze 15% (podle plochy signálu) konverze na žádaný (6R,7R)-trimethylsilyl-7- (trimethylsilyl )amino-3-br ommethylcef-3-em-4-karboxylát.

P ř í k 1 a d 6

Pokus o přípravu. (6R,7R)-7-amino-3- (1-methyl-l-pyrr olidinio) methylcef-3-em-4-karboxylát-monohydrochloridu postupnou reakcí (6R,7R)-trimethylsilyl-7- (trimethylsilyl) amino-3-acetoxymethylcef-3-em-4-karboxy,látu v

1,1,2-trichlortrifluorethanu s chlortrimethylsllanem, N-methy.lpyrrolidinem a vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové

Tento pokus se provádí způsobem popsaným v příkladu 5 s tím rozdílem, že se namísto bromtrimethylsilanu použije 5,4 ml (42,2 mmolů; 1,15 ekvivalentu) chlortrimethylsitanu. Po lOdenním zahřívání reakčni směsi v dusíkové atmosféře pod zpětným chladičem svědčí ^XH-NMR spektroskopie (360 MHz) o přítomnosti převážně chlor trimethylsilanu a (6R,7R)trimethylsilyl-7- (trimethylsilyl )amino-3-acetoxymethylcef-3-em-4-karboxylátu.

Byla zjištěna nanejvýš 5% (podle plochy signálu) konverze na žádaný (6R,7R)-trimethylsilyl-7- (trimethylsilyl )amino-3-chlormethylcef-3-em-4-karboxylát.

Příklad 7

Reakčni schéma přípravy hydrochlorídu nebo hydrojodidu (6R,7R)-7-amino-3- (1-methy 1-1-pyrrolidinio) methylcef-3-em-4-karboxylátu v jedné reakčni nádobě, tj. bez izolace meziproduktů

V následující části je uveden přehled zkušeností a pozorování získaných při několikanásobném opakování reakcí za použití stejných množství reakčních složek, reakčních teplot apod.

Postup

1.

Do 350 ml 1,1,2-trichlortrifluorethanu se v dusíkové atmosféře vnese '50,0 g (0,184 molu) 7-aminocefalosporanové kyseliny (poznámka 1).

2.

Ke shora připravené suspenzi se v jediné dávce přidá za míchání 46,5 ml (0,22 molu; 1,2 ekvivalentu) 1,1,1,3,3,3-hexamethyldisilazanu.

3.

Ke směsi se za použití injekční stříkačky v, jediné dávce přidá 0,78 ml (6,0 mmolů; 0,03 ekvivalentu) trimethylsilyljodidu (poznámka 2).

4.

Reakčni směs se 7 až 10 hodin zahřívá k varu pod zpětným chladičem (poznámky 3 a 4], přičemž průběh reakce se sleduje NMR spektroskopií (poznámka 5).

Silylační směs se ochladí na teplotu místnosti, zředí se 150 ml 1,1,2-trichlortrifluorethanu a v dusíkové atmosféře se ochladí na 5°C.

6.

Během 10 minut se za intenzivního míchání přidá 26,83 ml (0,26 molu; 1,4 ekvivalentu) N-methylpyrrolidinu za udržování reakční teploty pod 10°C (poznámka 6).

7.

Ke směsi z reakčního stupně 6 se při teplotě 5 °C a za energického míchání pomalu přidá během 10 až 15 minut pomocí injekční stříkačky 47,1 mil (0,33 molu; 1,8 ekvivalentu) trimethylsilyl jodidu.

Během přidávání trimethylsilyljodidu dochází k mírné exotermní reakci. Reakčni suspenze se v atmosféře suchého dusíku 30 minut míchá při teplotě 5 °C.

8.

Výsledná suspenze se opatrně zahřeje na 35 až 36 °C a při této teplotě se 45 až 5'5 hodin míchá. Průběh substituční reakce se sleduje kapalinovou chromatografii s vysokou rozlišovací schopností (poznámka 7).

9.

Jak objem reakční směsi, tak rychlost míchání se pravidelně kontrolují. Podle potřeby se přidá dalších 100 ml 1,1,2-trichlortrlfluorethanu (poznámka 8).

10.

Po ukončení reakce (v chiromatogramu získaném při kapalinové chromatografii s vysokou rozlišovací schopností činí plocha odpovídající 7-aminocefalosporanové kyselině méně než 2 % celkové plochy] se výsledná suspenze v dusíkové atmosféře ochladí na 5 °C a během 8 minut se k ní při teplotě 5 °C přikape 25 ml (0,615 molu) methonalu (poznámka 9).

11.

Po přidání methanolu, po němž suspenze značně zřídne, se směs ještě 15 minut míchá při teplotě 5 až 10 °C.

12.

Chladicí lázeň se odstraní a ke směsí se během 2 minut za intenzivního míchání přidá 125 ml 3N kyseliny chlorovodíkové připravené vnesením 250 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové do 756 ml vody. Při tomto přidávání vystoupí teplota reakční směsi na 12 až 15 °C.

13.

Směs, v níž probíhá hydrolýza, se co nejrychleji zahřeje na 20 až 25 °C (ne však nad 25 °C) a 15 minut se při teplotě 20 až 25 °C míchá.

14.

Fáze se oddělí a organická fáze (spodií fáze) se extrahuje jednou 50 ml vody. Tato vodná fáze se používá k promývání při filtraci odděleného vodného roztoku.

15.

K oddělenému vodnému roztoku ze stupně 14 se přidá 2,5 g křemeliny a směs se zfiltruje přes «vrstvu 7,5 g křemeliny. Vrstva křemeliny se promyje vodnou fází získanou při extrakci organické fáze ve stupni 14 a pak 25 ml deionizované vody.

16.

Vodná fáze se spojí s promývacími kapalinami a výsledný roztok o objemu cca 270 mililitrů, který je červenavě hnědý, se 30 minut míchá při teplotě 21 až 23 °C s 10 g aktivního uhlí. Po přidání 2,5 g křemeliny se směs míchá ještě 5 minut.

17.

Aktivní uhlí se odfiltruje přes vrstvu 7,5 g křemeliny, filtrační koláč se jednou promyje 75 ml vody a vysuší se 5minutový.m odsáváním.

18.

Je-li to nutné, oddělí se popřípadě zbytky

1,1,2-trichlortrifluorethanu usazené pod vodným roztokem.

19.

K čirému, oranžově zbarvenému vodnému roztoku o objemu cca 350 ml a pH 0,9 až .1,15 se až do počínajícího zákalu přikapává isopropylalkohol (poznámka 10).

20.

Přidávání isopropylalkoholu se ukončí .a směs se nechá 15 minut krystalovat při teplotě 21 až 23 °C.

21.

Po této době se k suspenzi během 45 až 60 minut přidá další isopropylalkohol (celkem se přidá 1,2 litru Isopropylalkoholu) a výsledná suspenze se za chlazení na 0 až 5 °C 60 minut míchá.

22.

Produkt se odfiltruje a filtrační koláč se promyje studenou směsí (0 až 5°C) isopropylalkoholu a vody v poměru 9 : 1 (dvakrát 100 ml; poznámka 11) a jednou 100 ml acetonu. Produkt (poznámka 12) se 15 minut suší odsáváním a pak se vysuší ve vakuu do konstantní hmotnosti. Získá se 46 až 51 g (75 až 83 °/o) surové směsi hydrochlorldu a hydrojodidu sloučeniny uvedené v názvu (sloučenina obecného vzorce I] ve formě špinavě bílé až bílé krystalické látky. Výtěžek (počítáno na účinnost) činí 60 až 63,4 procenta.

23.

Podle NMR spektroskopie má produkt čistotu vyšší než 95 °/o. Zjištěný poměr při kapalinové chromatografii s vysokou rozlišovací schopností oproti analytickému vzorci 4³-formy hydrochioridu sloučeniny obep2Β2098 ného vzorce I činí 750 až 800 /zg/mg. Čistota počítána z plochy signálu je vyšší než 95 procent.

Poznámka 1:

7-aminocefalosporanová kyselina je mimořádně prášivá pevná látka, kterou je třeba navažovat v digestoři nebo na jiném místě s přiměřenou ventilací. K ochraně proti prachovým částečkám 7-aminocefalosporanové kyseliny je třeba používat respirátorů a popřípadě příslušných ochranných oděvů nebo pomůcek.

Poznámka 2:

Všechny operace s trimethylsilyljodidem je třeba provádět za co možno nejdokonalejšího vyloučení vlhkosti.

Poznámka 3:

Bylo zjištěno, že reakční doba se mění a je pravděpodobně závislá na přítomnosti trimethylsilyljodidu nebo jeho reaktivního ekvivalentu jako katalyzátoru. Pokud je reakce pomalá, urychlí a dokončí ji přídavek dalšího trimethylsilyljodidu.

Poznámka 4:

Je důležité udržovat intenzívní var pod zpětným chladičem, protože hlavní hnací sílu reakce představuje odstraňování vznikajícího amoniaku.

Poznámka 5:

Při odebírání vzorků reakční směsi je důležité pracovat za bezvodých podmínek, což platí pro všechny reakce tohoto postupu. Poznámka 6:

Vzrůst teploty nad 10 °C během přidávání N-methylpyr:rolidinu má za následek vznik vyššího množství nežádoucího A²-isome:ru (v poměru 1: 26).

Poznámka 7:

Vzorky je třeba analyzovat kapalinovou chromatografií s vysokou rozlišovací schopností každých 4 až 6 hodin. Rozhodující roli při této reakci hraje reakční teplota, reakční doba, koncentrace a počet ekvivalentů trimethylsilyljodidu, jakož i zásaditost reakčního prostředí.

Poznámka 8:

Suspenze velice zhoustne a k usnadnění míchání je třeba směs zředit určitým množstvím 1,1,2-trichlortrifluorethanu.

Poznámka 9:

Před přidáním methanolu je suspenze tak hustá, že shluky materiálu ulpívají na stěnách reakční nádoby, což znesnadňuje dokonalé promíchání s methanolem. Je třeba pozorovat a kontrolovat, zda dojde k dobrému a úplnémiu promíchání ve všech místech reakční nádoby.

Poznámka 10:

Je obvykle zapotřebí 0,5 až 1,0 objemu isopropanolu.

Poznámka 11.

Promývací kapalina se připraví smísením 90 ml isopropanolu a 10 ml vody a ochlazením směsi ve vodě s ledem na 0 až 5^;oC.

Poznámka 12:

V separátním pokusu se produkt izoluje jako čistý hydrojodid tak, že se na suspenzi z reakčního stupně 11 působí 125 ml 3N jodovodíku namísto 125 ml 3N chlorovodíku (jako ve stupni 12). Shora popsaným zpracováním (viz stupně 13 až 21) vodné fáze se získá 44,3 g bílého krystalického hydrojodidiu. Korigovaná účinnost kapalinové chromatografie s vysokou rozlišovací schopností oproti analytickému standardu hydrochloridu činí 105 %. Výtěžek vztažený na 7-aminocefalosporanovou kyselinu (počítáno na účinnost) činí 56,7 %.

Příklad 8

Překrystalování (6R,7R)-7-amino-3- (1-methyl-l-pyrroJidinio) methylcef-3-em-4-karboxy.lát-monohydrochloridu (hydrochlorid obecného vzorce I)

POSTUP

1.

K 125 ml (3,5 molu; 3,50 ekvivalentu) IN kyseliny chlorovodíkové se za intenzivního míchání v jediném podílu přidá 15,0 g (0,045 molu) surového hydrochloridů obecného vzorce I (poznámka 1, 2).

2.

Výsledná směs se 5 minut míchá při teplotě místnosti.

3.

V jediné dávce se za intenzivního míchání přidá 8,0 g aktivního uhlí a suspenze se míchá ještě 45 minut,

8 2 S 9 δ

4.

Suspenze se odsaje pres vrstvu 8,0 g křemeliny, filtrační koláč se jednou promyje 35 ml vody a 5 minut se suší odsáváním.

5.

Mírně zakalený filtrát se vyčeří přes filtr o velikosti pórů 5 μηι, čímž se získá jiskřivě čirý vodný filtrát o objemu 170 ml.

6.

Za intenzivního míchání se během 25 minut až k počínajícímu zákalu přikapává isopropylalkohol (125 ml), načež se přidávání isopropanolu přeruší.

Vzniklá suspenze se 1.5 minut míchá při teplotě místnosti, během kteréžto doby se dobře vyvinou zárodky krystalů.

7.

Během 25 minut se za energického míchání přikape dalších. 475 ml isopropylalkoholu (poznámka 3).

8.

Výsledná suspenze se 1 hodinu míchá za chlazení vodou s ledem.

9.

Suspenze se zfiltruje a postupně se promyje při 0 až 5 °C dvakrát vždy 120 ml směsi Isopropanolu a vody v poměru 9 :1 (poznámka 4] a jednou 120 ml acetonu, analýza vypočteno

10.

Filtrační koláč se částečně vysuší 15minutovým odsáváním. Dalším sušením ve vakuu parní vývěvy při teplotě 40 °C, trvající 15 hodin, se získá 7,87 g (52 %) sněhově bílého elektrostatického krystalického hydrochloridu vzorce I (poznámka 5).

Poznámka 1:

Počet mol výchozího hydrochloridu vzorce I je vztažen na 100% čistotu.

Poznámka 2:

IN roztok kyseliny chlorovodíkové se připraví přidáním 83 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové do 920 ml destilované vody.

Poznámka 3:

Celkový objem isopropylalkoholu používaného ke krystalizaci činí Θ00 ml, což představuje 3,5náscbek objemu vyčeřeného vodného filtrátu ze stupně 5.

Poznámka 4:

Promývací směs isopropylalkoholu a vody, tvořená 108 ml isopropylalkoholu .a 12 ml vody, se ochladí v ledu na 0 až 5 °C. Poznámka 5:

V následující části jsou uvedeny analytické údaje překrystalovaného hydrochloridu vzorce I:

nalezeno korigováno na KF % C % H % N % S KF (H2) zbytek (sulfátový popel]

Účinnost při kapalinové chromatografíi s vysokou rozlišovací schopností činí oproti standardnímu vzorku hydrochloridu vzorce I 99,5 %. Klettovo číslo — 3 (vzorek o hmotnosti 100,0 mg se v odměrné nádobě zředí přečištěnou vodou [Milli-Q] n,a objem 10 ml a roztok se zfiltruje přes speciální filtr pro kapalinovou chromatografii s vysokou rozlišovací schopností [Millex]; studené světlo; délka dráhy 1,2 cmj.

Bylo obecně zjištěno, že „surový“ hydrochlorid vzorce I, získaný přidáním chlorovodíku do finální směsi, obsahuje určité množství hydrojodidu vzorce I, který se vytvoří z jodidu přítomného v meziproduktu vzorce II. Přes svoji vysokou antibakteriální čistotu je tedy nutno tento produkt nor-

46,77	46,02	46,71
6,04	6,17	6,10
12,59	12,31	12,49
9,61	9,50	9,64
—	1,47

<0,1 málně překrystalovat shora popsaným způsobem, aby se hydrojidid vzorce I odstranil.

Naproti tomu hydrojodid vzorce I, připravený přidáním jodovodíku k finální reakční směsi, po základní krystalizaci neobsahuje hydrochlorid vzorce I. V souladu s tím je tedy hydrojodid vzorce I normálně vysoce čistý a nevyžaduje překrystalování.

Příklad 9

Konverze sloučeniny obecného vzorce I (X = HC1) na sloučeninu vzorce VIII

6 2 6 9 S

21,72 g (0,0612 molu) sloučeniny obecného vzorce I, v němž X znamená chlorovodík, se za míchání rozpustí při teplotě 25 °C ve 190 ml vody. Směs se ochladí na 8 až 10 °C a její pH. se přikapáním 30,5 ml (0,061 molu; 1,0 ekvivalentu) 2N roztoku hydroxidu sodného upraví z 2,5 na 5,8 (rozmezí 5,7 až 5,9). Celkový objem směsi činí 214 ml.

Ve třech podílech se přidá 555 ml tetrahydrofuranu. Po přidání každého z těchto podílů vystoupí teplota směsi na 12 až 13 °C a před přidáním dalšího podílu se vždy sníží znovu na 8 až 10 °C. Přidávání trvá celkem 10 minut, pH reakční směsi činí 5,8 až 6,1.

Přikapáním 2,0 ml (0,004 molu) 2N roztoku hydroxidu sodného se pH směsi upraví na hodnotu 6,8 (rozmezí 6,7 až 6,9).

Ke směsi se během 45 minut v 5 stejných podílech přidá celkem 29,5 g (0,0927 molu) aktivovaného esteru [l-benzotriazol-(Z)-2-(2-aminothiazol-4-yl j-2-methyoxyiminoacetátuj. Po přidání prvního podílu aktivovaného esteru se chladicí lázeň odstraní a před přidáním každého dalšího podílu aktivovaného esteru se pH reakční směsi přikapáním 2N roztoku hydroxidu sodného vždy znovu nastaví na hodnotu 6,5 (rozmezí 6,5 až 6,7).

Čirá světle oranžová reakční směs se 2 až 3 hodiny míchá při teplotě 25 °C, přičemž během počátečních 30 minut se každých 5 až 10 minut hodnota pH přídavkem 2N roztoku hydroxidu sodného vždy znovu nastaví na 6,5 (rozmezí 6,5 až 6,7). Ve zbývající reakční době se pH nastavuje na hodnotu 6,5 vždy po 15 minutách. Celkem se spotřebuje 29,5 ml 2N hydroxidu sodného (0,059 molu; 0,97 ekvivalentu). Ukončení reakce se potvrdí kapalinovou chromatografií s vysokou rozlišovací schopností.

Pevné podíly se z reakční směsi odfiltrují a promyjí se dvakrát vždy 5 ml vody. Filtrát se extrahuje 790 ml methylisobutylketonu a vodná vrstva se oddělí. Organická fáze se promyje 64 ml vody, vodné fáze se spojí a 10 minut se míchají s 5,1 g preparátu Dicalite. Pevné podíly se odsají a promyjí se dvakrát vždy 5 ml vody.

Výsledný čirý oranžový roztok o objemu 314 ml se za intenzivního míchání okyselí přikapáním 14,5 ml 4N kyseliny sírové na pH 3,7 (rozmezí 3,5 až 4,0). Po tomto okyselení se směs zakalí a začne z ní krystalovat adiční sůl sloučeniny vzorce VIII s kyselinou sírovou.

Krystalizace se nechá probíhat 10 až 15 minut, načež se přikapáním 7,5 ml 4N kyseliny sírové upraví hodnota pH na 3,0 (rozmezí 2,9 až 3,1 j. Směs se ochladí na 0 ,až 5 °C a během 20 až 30 minut se k ní přidá dalších 63,5 ml 4N kyseliny sírové, takže výsledná směs má pH 1,3 až 1,5. Po skončeném přidávání kyseliny sírové se suspenze 1 hodinu míchá při teplotě 0 až 5 °C.

Bílý krystalický produkt se odsaje a promyje se 63,5 ml 0,5N kyseliny sírové. Pevné podíly se odsají, l5minutovým odsáváním se částečně vysuší, promyjí se dvakrát vždy 100 ml acetonu, znovu se částečně vysuší lOminutovým odsáváním a pak se 1 hodinu energicky míchají ve 400 ml acetonu. Pevný materiál se odsaje, promyje se dvakrát vždy 100 ml acetonu a ve vakuu 1 333 až 2 000 Pa se při teplotě 35 až 40 °C vysuší do konstantní hmotnosti (3 až 6 hodin).

Produkt, jímž je adiční sůl sloučeniny vzorce VIII s kyselinou sírovou, se izoluje jako mírně elektrostatická bílá krystalická látka.

Výtěžek činí 28,79 g (81,4 %).

Příklad 10

Konverze sloučeniny obecného vzorce I (X · HI) na sloučeninu vzorce VIII

Opakuje se obecný postup popsaný v předcházejícím příkladu s tím, že se namísto hydrochloridu vzorce I použije ekvimolární množství hydrojodidu vzorce I. Získá se sloučenina uvedená v názvu.

Další detaily způsobu podle vynálezu ilustrují následující příklady provedení. Ve vzorcích uvedených v těchto příkladech představuje zkratka Ac acetylovou skupinu a zkratka IMS trimethylsilylovou skupinu.

Příklad 11 (6R,7R) -trimethylsilyl-7- (tr imethylsilyl)amino-3-acetoxymethylcef-3-em-4-karboxylát (f

H

TNS N.

i

CQ-H

2.

c >.....

CO,TMS

Baňka vysušená v sušárně, opatřená zpětným chladičem, se v proudu dusíku ochladí na teplotu místnosti, načež se do ní předloží 10,0 g (36,7 mmoluj 7-arninocefalosporanové kyseliny o čistotě 97,2 % a 70 ml 1,1,2-trichlortrifluorethámu vysušeného nad molekulárním sítem. Ke vzniklé suspenzi se za intenzivního míchání a za vyloučení vlhkosti přidá pomocí injekční stříkačky 9,3 ml (44,1 mmolu; 1,2 ekvivalentu) 98% 1,1,1,3,3,3-hexamethyldisilazanu a 0,16 ml (1,1 milimolu; 0,03 ekvivalentu) jodtrlmethylsilanu. Suspenze se za mírného uvádění dusíku energicky zahřívá 7 až 10 hodin pod zpětným chladičem, pak se v atmosféře suchého dusíku ochladí na teplotu místnosti a zředí se 30 ml čerstvého 1,1,2-trichlortrifluorethanu. ¹H-NMR spektrum vzorku mírně zakalené reakční směsi svědčí o vyšší než 95% konverzi na žádaný produkt, který je identický s produktem z příkladu 1. ¹H-NMR spektrum produktu je totožné se spektrem produktu uvedeným u metody A příkladu 1.

P ř í k 1 a d 12 (6R,7R)-7-amino-3- (1,-methyl-l-pyrrolidinio j methylcef-3-em-4-karboxylát-monohydro jodid

K mírně zakalenému roztoku (6R,7R)-trimethylsilyl-7 (trimethylsilyl) amino-3-acetoxymethylcef-3-em-4-karboxylátu v 1,1,2-trichlortrif luorethanu (připravenému postupem podle přikladli lij se během 1 až 2 minut za intenzivního míchání při teplotě 0 až 5 °C v atmosféře suchého dusíku přikape '5,35 ml (51,4 mmolu; 1,4 ekvivalentu] 97% N-methylpyrrolidinu vysušeného nad molekulárním sítem, načež se během 5 minut za neustálého energického míchání přidá pomocí injekční stříkačky 9,40 ml (66,1 mmolu; 1,8 ekvivalentu) trimethylsilyl jodidu. Během přidávání se reakční teplota udržuje pod 10 °C. Výsledná suspenze se ještě 30 minut míchá při teplotě 0 až 5°C a pak se vloží do olejové lázně, jejíž teplota se pečlivě udržuje na 35 až 36 °C. Průběh reakce se sleduje kapalinovou chromatografii s vysokou rozlišovací schopností. Po 45 až 48 hodinách je reakce ukončena (obsah 7-aminocefalosporanové kyseliny je nižší než 2 % plochy signálu). Reakční směs se v atmosféře suchého dusíku ochladí na 0 až 5 °C a za intenzivního míchání se k ní přikape celkem 5,0 ml (123 mmolů; 3,35 ekvivalentu) methanolu, přičemž během tohoto přidávání se teplota udržuje pod 10 °C. Suspenze se ještě 15 minut míchá při teplotě 0 až ‘5 stupňů Celsia, načež se k ní v jediné dávce přidá 25 ml 3N vodného roztoku jodovodíku (75 mmolů; 2,0 ekvivalentu]. Po skončeném přidávání se chladicí lázeň odstraní a dvoufázová směs se rychle zahřeje na 20 až 25 °C, při kteréžto teplotě se ještě 15 minut energicky míchá. Fáze se oddělí a organická fáze se ještě jednou extrahuje 10 mililtry vody. Tento vodný extrakt se uschová pro pozdější použití.

Hlavní vodná fáze se při teplotě 20 až 25 stupňů Celsia 10 minut míchá s 0,5 g křemeliny. Suspenze se zfiltruje přes vrstvu 1,5 g křemeliny předem promyté 50 ml vody, po filtraci se vrstva křemeliny promyje nejprve shora získaným vodným extraktem a pak jednou 5 ml vody. Filtrační koláč se částečně vysuší 5minutovým odsáváním. Po přidání 2,0 g aktivního uhlí k filtrátu se suspenze 30 minut míchá při teplotě 20 až 25 °C, načež se k ní přidá 0,5 g křemeliny a v míchání se pokračuje ještě 5 minut. Výsledná suspenze se zfiltruje přes 1,5 g křemeliny předem promyté 50 ml vody a po filtraci se tato vrstva promyje jednou 5 ml vody, načež se částečně vysuší Sminutovým odsáváním. Filtrát se vyčeří filtrací přes filtr s velikostí pórů 5 μτη.

K čiré, jantarově zbarvené vodné fázi se při teplotě 20 až 25 °C k vysrážení produktu přikape 3,5 objemu isopropanolu. Vzniklá suspenze se ochladí na 0 až 5 °C, nechá se 1 hodinu stát, zfiltruje se a zbytek na filtru se promyje při teplotě 0 až 5 °C nejprve dvakrát vždy 20 ml směsi isopropanolu a vody (4:1 objem/objem) a pak dvakrát vždy 20 mililitry acetonu. Filtrační koláč se nejprve částečně vysuší 5minutovým odsáváním a pak se dosuší ve vakuu při teplotě 20 až 25 stupňů Celsia do konstantní hmotnosti. Získá se 8,94 g (57 %) bílého krystalického (6R.7R) -7-amino-3- (1-methyl-l-pyrrolidinio )methylcef-3-em-4-karboxylát-monohydrojodidu. Podle kapalinové chromatografie s vysokou rozlišovací schopností činí čistota soli 97 % (počítáno z plochy a ^XH-NMR spektrum (360 MHz) monohydrojodidu sloučeniny uvedené v názvu je identické s ^XH-NMR spektrem hydrochloridu odpovídajícího produktu připraveného podle metody A příkladu 3.

Příklad 13 (6R,7R) -7-amino-3- (4-methyl-4-morfo,lmo)methylcef-3-em-4-karboxylát-monohydro jodid

H

Tí/iSir (ý __ /,5,.

.....^CA^ ______'· cor Cí

262S98

Sloučenina uvedená v názvu se připraví z roztoku (6R,7R)-trimethylsilyl-7-(trimethylsilyl]amino-3-c:cetoxymethylcef-3-em-4-karboxylátu v 1,1,2-trichlortrifluorethanu (z 50,0 g výchozí 7-aminocefalospo.ranové kyseliny) postupem popsaným v příkladu 12 s tím rozdílem, že se namísto N-methylpyrrolidinu použije 28,3 ml (257 mmolů; 1,4 ekvivalentu) N-methylmorf olinu vysušeného nad molekulárním sítem. Průběh reakce se sleduje kapalinovou chromatografii s vysokou rozlišovací schopností. Při teplotě 35 až 36 °C je reakce ukončena za 7 až 8 hodin. Reakční směs sé zpracuje postupem popsaným v příkladu 12 (vzhledem ke zvýšenému množství výchozí látky se množství všech používaných materiálů násobí pětkrát], čímž se získá 36,0 g (41 %] mírně špinavě bílého krystalického monohydrojodidu (6R,7R) -7-amino-3- (4-methylmorfolinio)methylcef-3-em-4-karboxylátu. Podle kapalinové chromatografie s vysokou rozlišovací schopností je čistota produktu (počítáno z plochy vyšší než 95 °/o.

¹H-NMR (deuteriumoxid, 360 MHz, hodnoty ó):

vypočteno:

35,40 % C, 4,34 % H, 9,53 % N, nalezeno:

34,99 % C, 4,38 % H, 9,35 % N. Příklad 14 (6R,7R) -7-amino-3- (1-pyridinio) methylcef-3-em-4-karboxylát-monohydrojodid

H

TMS M

0'

Ϊ co ,s.

\.

OAc cojhs

3,30 (s, 3H, N—CHs),

3,60 [m, 4H, —N(CH3)CHzCH2OCH2CH2],

3,68 (d, lil, J ···: 10 Hz, - -SCIHl.

4,04 (d, 1H, J= 10 Hz, — SCÍL·—),

4,2 [m, 4H, —N(CH3)'CH2CH2OCH2CH2],

4,25 (d, 1H, ) - 14 Hz,

V >

-•^C+V/ ^chj

4,93 (d, 1Η, J = 14 Hz,

5,30 (d, 1H, J =· 5 Hz,

C-6 /3-laktamu),

5,53 (d, 1H, J = 5 Hz, C-7 (S-laktamu). IČ (KBr technika):

460, 1 795 a 1 600 cnv¹.

Analýza pro: C13H19N3O4S . H1

Sloučenina uvedená v názvu se připraví z roztoku (6R,7R)-trimethylsiilyl-7-(trimethylsilyl)amino-3-acetoxymethylcef-3-em-4-karboxylátu v 1,1,2-trichlortrifluorethanu (z 10,0 g výchozí 7-aminocefalosporanové kyseliny) postupem^ popsaným v příkladu 12 s tím rozdílem, že se namísto N-methylpyrrolidinu použije 4,2 ml (51,4 molu; 1,4-ekvivalentu) pyridinu vysušeného nad hydroxidem draselným. Průběh reakce se sleduje kapalinovou chromatografii s vysokou rozlišovací schopností. Při teplotě 35 až 36 °C je reakce ukončena za 51 hodin. Výsledná suspenze se pod přetlakem dusíku zfiltruje a zbytek na filtru se promyje dvakrát vždy 100 mil čerstvého 1,1,2-trichlortrifiluorethanu. Filtrační koláč se rychle přidá k 50 ml suchého dichlormethanu předchlazeného ve vodě s ledem na 0 až 5 °C a ke vzniklému tmavému roztoku se za intenzivního míchání při teplotě pod 10 °C přikape 5,0 ml (123 mmolů; 3,35 ekvivalentu) methanolu. Výsledná suspenze se ještě 15 minut míchá při teplotě 0 až 5 °C, pak se pevný podíl odfiltruje a promyje se dvakrát vždy 50 ml čerstvého dichlormethanu. Filtrační koláč se suspenduje ve 150 ml dichlormethanu, suspenze se 1 hodinu míchá, pak se pevný produkt odfiltruje a po dvojnásobném promytí vždy 50 ml dichlormethanu se vysuší ve vakuu při 20 až 25 °C do konstantní hmotnosti. Získá se 14,7 g (95 %) surového (6R,7R)-7-amino-3- (lpyridinio) methylcef-3-em-4-karboxylát-monohydrojodidu.

!H-NMR spektrum, měřené při 360 MHz a chromatogram získaný při kapalinové chromatografii shora získaného materiálu s vysokou rozlišovací schopností (čistota 65 % — počítáno z plochy; hlavní nečistotou je pyridin-hydrojodid, jehož množství činí 13 % plochy) odpovídající spektru a chromatogramu autentického vzorku připraveného nezávislým způsobem (viz rovněž G. C. D. Smith, evropský patentový spis č. 70706, 26. leden 1983, str. 21).

Příklad 15 (6R,7R ] -7-amino (1- (2,3-cy klopenteno) pyridinio ] methylcef-3-em-4-karboxylát-monohydrojodid

H

T/S ;M

O'

-....../ c

.....

cr

o

Sloučenina uvedená v názvu se připraví z roztoku (6R,7R)-trimethylsilyl-7-(trimethylsilyl )amino-3-acetoxymethylcef-3-em-4-karboxylátu v 1,1,2-trichlort.rifluorethamu (z 10,0 g výchozí 7-aminocefalosporanové kyseliny) postupem podle příkladu 12 s tím rozdílem, že se namísto N-methylpyrrolidinu použije 6,02 ml (51,4 mmoiu; 1,4 ekvivalentu) 2,3-cyklopentenopyridinu vysušeného nad molekulárním sítem. Průběh reakce se sleduje kapalinouvou chromatografií s vysokou rozlišovací schopností. Při teplotě 35 až 36 °C je reakce ukoněena za 52 hodiny. Zpracováním reakční směsi za použití postupu popsaného v příkladu 14 se získá 13,2 g (78 °/o) surového (6R,7R)-7-amino-3-(1-( 2,3-cyklopenteno) pyridinio ] methylcef-3-em-4-karboxylát-monohydro jodidu.

Yl-NMR spektrum tohoto materiálu, měřené při 360 MHz a chromatogram získaný při kapalinové chromatografií s vysokou rozlišovací schopností (čistota 92 % — počítáno z plochy) odpovídají spektru a chromatogramu autentického vzorku tohoto produktu, připraveného nezávislým způsobem.

P ř í k 1 a d 16 (6R,7R) -7-amino-3-11- (2-acetoxy) ethyl-l-pyrrolidinio jmethylcef-3-em-4-karboxylát -monohydro jodid

Sloučenina uvedená v názvu se připraví z roztoku (6R,7R)-trimethylsilyl-7-(trímethylsilyl j amino-3-acetoxymethylcef-3-em-4-karboxylátu v 1,1,2-trichlortrifluorethanu (z 10,0 g výchozí 7-aminocefalospo:ranové kyseliny) postupem popsaným v příkladu 12 s tím rozdílem, že se namísto N-methylpyrazolidinu použije 8,08 g (51,4 mmoiu; 1,4 ekvivalentu j N- (2-acetoxy) ethylpyrrolidinu. Průběh reakce se sleduje kapalinovou chromatografií s vysokou rozlišovací schopností. Během prvních 22 hodin, kdy reakce probíhá při teplotě 35 až 36 °C, se z reakční směsi vylučuje olej. Po celkem 48 hodinách (při teplotě 35 až 36 °C) nedochází k dalšíma spotřebovávání výchozího materiálu. Reakční směs se v atmosféře suchého dusíku ochladí na 0 až 5 °C a za udržování teploty pod 10 °C se k ní přikape roztok 7,45 ml (184 mmolů; 5,0 ekvivalentů) methanolu v 50 ml 1,1,2-trichlortrifluorethanu. Po skončeném přidávání se vzniklá suspenze nejprve 3,5 hodiny míchá při teplotě 0 až 5!°C, pak se odsaje, filtrační koláč se promyje dvakrát vždy 50 ml 1,1,2-trichlortrifluorethanu a vysuší se ve vakuu při teplotě 20 až 25 °C do konstantní hmotnosti. Získá se 27,9 g (více než 100 %) surového produktu.

Přítomnost žádaného (6R,7R)-7-amino-3[ 1- (2-acetoxy) ethyl-l-pyrrolidinio ] methylcef-3-em-4-karboxylát-monohydrojodidu v tomto surovém materiálu se ověří porovnáním ⁴H-NMR spektra (360 MHz) tohoto materiálu a jeho chromatogramu získaného při kapalinové chromatografií s vysokou rozlišovací schopností se sípektrem a chromatogramem autentického materiálu připraveného nezávislým postupem. Podle ^XH-NMR spektra (360 MHzj obsahuje produkt A³-isomer a A²-isomer v poměru 1 : 1,7 a značné množství výchozího aminu. V chromatogramu zabírá A³-isomer 24 % plochy a nežádoucí A²-isomer je přítomen v množství odpovídajícím 34 % plochy.

Příklad 17 (6R,7R) -7-amino-3- [ 1- (2-trimethylsilyloxy) ethyl-l-pyrr olidinio ] -methylcef-3-em-4-karboxylát-monohydrojodid

Sloučenina uvedená v názvu se připraví z roztoku (6R,7R)-trimethylsilyl-7-(trimethylsilyl j amino-3-acetoxymethy Icef-3-em-4-karboxylátu v 1,1,2-trichlortriíluorethanu (z 10,0 g výchozí 7-aminocefalospnranové kyseliny] postupem popsaným v příkladu 12 s tím rozdílem, že se namísto N-methylpyrrolldinu použije 9,63 g (51,4 mmolu; 1,4 ekvivalentu) N-( 2-trimethylsilyloxy Jethylpyrrolidinu. Průběh reakce se sleduje kapalinovou chromatografií s vysokou rozlišovací schopností. Vznikající směs A³- a A²-isomerů sloučeniny uvedené v názvu se detekuje jako směs odpovídajících volných hydroxysloučenin, vzhledem k hydrolýze trimethylsilylového zbytku během chromatografie. Během prvních 23 hodin, při kterých se pracuje při teplotě 35 až 36 °C, se z reakční směsi vylučuje olejovitý materiál. Po celkem 30hodinové reakci při teplotě 35 až 36 °C se již nespotřebovává žádný výchozí materiál. Přesně stejným zpracováním reakční směsi jako v příkladu 16 se získá 29,77 g (více než 100 %) surového produktu.

Přítomnost žádaného (6R,7R)-7-amino-3-(1-( 2-trimethylsilyloxy) ethyl-l-pyrrolidinio]methylcef-3-em-4-karboxylát-monohydrojodidu v tomto surovém materiálu se ověří porovnáním ¹H-NMR spektra (360 MHz) tohoto materiálu a jeho chromatogramu získaného při kapalinové chromatografii s vysokou rozlišovací schopností se spektrem a chromatogramem autentického materiálu připraveného nezávislým způsobem. Podle ^XH-NMR spektra (360 MHz) obsahuje produkt A³-isomer a A²-lsomer v poměru 1: 3,3 a značné množství výchozího aminu. V chromatogramu zabírá žádaný A³-isomer 16 % plochy a A²-isomeT je přítomen v množství odpovídajícím 60 % plochy.

Příklad 18

7- [ a- (2-aminothíazol-4-Iy)-a-(Z) -methoxy iminoacetamido )-3-((1-methyl-l-pyrrolidinio) methyl]-3-cefem 4-karboxylát ί-

Ο ^!3 ...........x, i

CO£ CH₃

V 87 ml vody se při teplotě 20 až 25 ^CC za intenzivního míchání suspenduje 12,76 g (30 mmolů) (6R,7R)-7-amino-3-(l-methyl-l-pyrrolidinio jmethylcef-3-em-4-karboxylát-monohydro jodidu (připraveného v příkladu 12], suspenze se ochladí na 8 až 10 °C a její pH se při teplotě 7 °C přikapáním 13,0 ml 2N roztoku hydroxidu sodného (26 mmolů; 0,87 ekvivalentu) během 35 minut zvýší na hodnotu 5,80. Po přidání 555 ml tetrahydrofuranu se pH výsledného roztoku při 10 °C zvýší přikapáním 1,9 ml 2N roztoku hydroxidu sodného (3,8 mmolu; 0,13 ekvivalentu) na hodnotu 6,8. Chladicí lázeň se odstraní a ke směsi se ve dvou stejných podílech o hmotnosti 14,75 g vždy po 30 minutách přidá 29,5 g (92,7 mmolu; 1,5 ekvivalentu) aktivovaného hydroxybenzotriazolylesteriu syn-2-i(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyimlnooctové kyseliny. Po každém přidání se hodnota pH vždy každých 5 až 10 minut upraví přikapáním 2N roztoku hydroxidu sodného znovu na hodnotu 6,5. Ve zbývající reakční době se hodnota pH upravuje znovu na 6,5 přikapáváním 2N roztoku hydroxidu sodného každých 15 minut. Celkově se spotřebuje 28,6 ml 2N hydroxidu sodného (57,2 mmolu; 1,91 ekvivalentu). Ukončení reakce se zjistí kapalinovou chromatografií s vysokou rozlišovací schopností.

Po 1,75 hodiny se výsledný tmavý roztok vylije do 365 ml methylisobutylketonu, spodní vodná fáze se oddělí a organická fáze se ještě jednou extrahuje 30 ml vody. Spojené vodné fáze se 10 minut míchají při teplotě 20 až 25 °C a 2,35 g křemeliny, nerozpustný materiál se odsaje a filtrační koláč se promyje jednou 5 ml vody. Jantarově zbarvená vodná fáze se vyčeří filtrací přes filtr s velikostí pórů 5 /tm. Při 17 °C má roztok pH 6,40.

K tomuto roztoku se za intenzivního míchání přidá 6,7 ml 4N kyseliny sírové, čímž vznikne zakalený roztok, který má při 18 °C pH 3,82. Z tohoto roztoku se za energetického míchání nechá 5 minut krystalovat produkt, načež se přidá dalších 3,5 ml 4N kyseliny sírové. Vzniklá suspenze, která má při teplotě 20 °O pH 3,09, se ochladí na 0 až 5 °C a během 20 minut se k ní přikape 30 ml 4N kyseliny sírové. Směs se 1 hodinu míchá při teplotě 0 až 5 °C, pak se vyloučená sraženina odfiltruje a promyje se jednou 30 ml 0,5N kyseliny sírové. Filtrační koláč se částečně vysuší 15minutovým odsáváním, pak se promyje dvakrát vždy 50 ml acetonu, znovu se částečně vysuší 15minutovým odsáváním, načež se 1 hodinu míchá ve 200 ml acetonu při teplotě 20 až 25 °C. Sůl se odfiltruje, promyje se dvakrát vždy 50 ml acetonu, částečně se vysuší lSminutovým odsáváním a pak se dosuši ve vakuu při teplotě 40 °C do konstantní hmotnosti. Získá se 12,41 g (72 %) krystalické, mírně špinavě bílé sloučeniny uvedené v názvu, ve formě soli s kyselinou sírovou.

¹H NMR (deuteriumoxid, 360 MHz, hodnoty delta):

2,16 —- 2,33 [zakrytý signál, 4H, —N(CH3)CH2CH2CH2],

3,01 (s, 3H, N—CH3),

3,45 — 3,65 [m, 5H, —N(CH3)CH2CH2CH2, —SCH2—),

3,95 (d, 1H, J = 17 Hz, — SCH2—), 4,04 (d, 1H, J= 14 Hz,

I r¹ o

4,08 [s, 3H, — OCH3), 4,75 (d, 1H, I = 14 Hz,

5,37 (d, 1H, J = 5 Hz, C-6 /3-laktamu), 5,86 (d, 1H, J = 5 Hz, C-7 ,/3-laktamu),

7,16 (s, 1H, C — 5 thtazolu).

Analýza pro: C19H24N6O5S2 . H2SO4 vypočteno:

39,43 % C, 4,53 % H, 14,53 % N, 16,63 % S, nalezeno:

39,40 % C, 4,47 % H, 14,39 % N, 16,60 °/o S.

Příklad 19

7- [ a- (2-aminothiazol-4-yl) -a- (Z) -methoxyiminoacetamido]-3-( (4-methyl-4-morfolinio)methyl-3-cefem-4-karboxylát '0 _XOCR N H ' aV·

N—I lj ^£' . Ó ^u o

O I i, co ^Chs z <- ^,Ha^so4

I % j co_s

CH

40

Sloučenina uvedená v názvu se připraví postupem popsaným v příkladu 18 z 54,0 g (122 mmolů) (6R,7R j-7-amino-3-(4-methyl-4-morfolinio)methylcef-3-em-4-karboxylát-monohydrojodidu (připraveného v příkladu 13 a 59,0 g (184 mmoly; 1,5 ekvivalentu) aktivovaného hydroxybenzotriazolylesteru syn-2- (2-aminothiazol-4-yl) -2-methoxyiminooctové kyseliny.

Tímto způsobem se získá celkem 60,1 g (84 °/o) bílé krystalické sloučeniny uvedené v názvu, ve formě soli s kyselinou sírovou.

⁴H-NMR (360 MHz, deuteriumoxid/deuterovaný hydrogenuhličitan sodný, hodnoty ó'j:

4,95 (d, 1H, J = 14 Hz, +/—\ ~CH,N O j

5,47 (d, 1H, J = 5 Hz, C-6 /3-laktamu),

5,96 (d, 1H, J = 5 Hz, C-7 0-laktamu), 7,10 (s, 1H, C-5 thiazolu.

Analýza pro: C19H24N6O6S3. H2SQ4

3,30 (s, 3H, NCH3),

3,55 [m, 5H, — N (CH3)CH2CH2OCH2CH2, —SCHz—1,

4,05 (d, 1H, J = 16 Hz, —SCH2—), 4,10 (s, 3H, —OCH3),

4,1 [m, 4H, — N(CH3)CH2CH2OCHzCH2],

4,21 (d, 1H, J = 14 Hz,

-'CH N O ), ch₅ .

Tabulka sloučenina výtěžek (příkladě.) (%)

12	57
13	41
14	95
15	78
16	>100d>
17	>100d)

Legenda:

vypočteno:

38,37 % C, 4,41 % H, 14,13 % N, 16,18 % S, ϋί)1Ρ7ΡΠΠ'

38,16 % C, 4,32 % H, 14,08 % N, 16,14 °/o S.

Příklad 20

V následující tabulce jsou shrnuty výsled ky získané při analýzách produktů z někte rých příkladů. S výjimkou sloučenin z pří kladů 12 a 13 se uváděné údaje týkají su irových hydrojodidů izolovaných filtrací sus penze po přidání methanolu. Sloučeniny : příkladů 12 a 13 byly izolovány z této sus penze po přidání 3N vodné kyseliny jodo vodíkové.

čistota A3-isome:ru (% plochy HPLCj	poměr A3: A2-isomeru HPLCa) NMRb)
97	97 : 0 —
>95	>95:0 —
65c>	65 : 6 —
92	92 : 0 —
24	24 : 34 1 : 1,7
16	16 : 80 1: 3,3

^a,uváděnými údaji jsou procenta plochy pro každý isomer na chromatogramu získaném při kapalinové chromatografií s vysokou rozlišovací schopností izolované soli s kyselinou jodovodíkovou;

^b,uváděným údajem je poměr isomerů získaný porovnávací integrací signálů pro jednotlivé Isomery;

^c)hlavní nečistotou je hydro jodid pyridinu (24 % plochy];

^d)NMR spektrum suirové soli s kyselinou jodovodíkovou, měřené při 360 MHz svědčí o tom, že hlavní nečistotou je nezreagovaný výchozí amin.

Claims (3)

1. PŘEDMĚT

   VYNALEZU

   1. Způsob výroby teplotně stálých krystalických cefalosporinů obecného vzorce Vllb

   IVU b) v 1,1,2-trichlortrifluorethanu působí v libovolném pořadí nejméně jedním ekvivalentem jodtrimethylsilanu a nejméně jedním ekvivalentem sloučeniny vzorce bí b / \„....../ ch₃

   v...

   kde

   X znamená chlorovodík nebo jodovodík a,

   4—Nu znamená zbytek vzorce ch₃ z výsledného produktu se působením nižšího alkanolu odstraní silylové skupiny a produkt se okyselí chlorovodíkem nebo jodovodíkem.
2. 2. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se používají odpovídající výchozí látky, za vzniku sloučenin obecného vzorce Vllb, ve kterém X má shora uvedený význam +

   a —Nu představuje zbytek vzorce prakticky prostých A²-isomeru, vyznačující se tím, že se na roztok sloučeniny obecného vzorce IVa

   UV&.}
3. 3. Způsob podle bodů 1 a 2, vyznačující se tím, že se používají odpovídající výchozí látky, za vzniku sloučeniny obecného vzorce Vllb, v němž —Nu znamená 1-methyl-1-pyrrolidiniový zbytek a X má shora uvedený význam.