CS256635B1 - Způsob extrahování polyvalentního inhibitoru proteáz z živočišných žláz - Google Patents
Způsob extrahování polyvalentního inhibitoru proteáz z živočišných žláz Download PDFInfo
- Publication number
- CS256635B1 CS256635B1 CS862994A CS299486A CS256635B1 CS 256635 B1 CS256635 B1 CS 256635B1 CS 862994 A CS862994 A CS 862994A CS 299486 A CS299486 A CS 299486A CS 256635 B1 CS256635 B1 CS 256635B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- hours
- animal
- ethanol
- concentration
- phase
- Prior art date
Links
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 title claims abstract description 17
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 12
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 title claims description 9
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 title abstract description 8
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 title abstract 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 title abstract 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 title abstract 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 32
- 239000012071 phase Substances 0.000 claims abstract description 10
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims abstract description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 8
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 7
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 claims abstract description 7
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 6
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 4
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims abstract description 3
- 238000007865 diluting Methods 0.000 claims abstract description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 3
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 claims description 6
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 claims description 6
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 claims description 5
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 abstract description 12
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 abstract description 7
- 238000013019 agitation Methods 0.000 abstract description 3
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 abstract 1
- 230000000762 glandular Effects 0.000 abstract 1
- 108010039627 Aprotinin Proteins 0.000 description 2
- 102000001399 Kallikrein Human genes 0.000 description 1
- 108060005987 Kallikrein Proteins 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- -1 alkaline earth metal salts Chemical class 0.000 description 1
- 229960004405 aprotinin Drugs 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 230000000937 inactivator Effects 0.000 description 1
- ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N iniprol Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 229910052723 transition metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003624 transition metals Chemical class 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Extraction Or Liquid Replacement (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
Způsob extrakce polyvalentního inhibitoru
proteáz ze živočišných žláz, například
z hovězích plic, vodným roztokem organických
rozpouštědel, například etanolu,
s přídavkem rozpustných^anorganických
solí při zvýšené ^eplotě spočívá v tom,
že živočišná tkán se extrahuje ve dvou,
fázích, přičemž v prvé fázi se živočišná
tkán extrahuje za míchání v oblasti vysoké
turbulence po dobu 3 až 8 hodin s výhodou
5 liodin při pH 5,5 až 6,7 s výhodou
6,5 při teplotě 40 až 45 °C vodným roztokem
etanolu o hmotnostní koncentraci 70
až 80 'ío a přídavkem 1 až 3 % hmot. chloridu
yápenatého, v druhé fázi se živočišná
tkán extrahuje za míchání v oblasti laminární
za současného zředění směsi vodou
na 10 až 90 % původní koncentrace etanolu
s výhodou na 60 % původní koncentrace po
dobu 1 až 18 hodin, s výhodou 16 hodin
při pH 5,5 až 6,5 při teplotě 18 až 40 “c
a ze získané suspenze se pevná fáze oddělí
a extrakt se zpracuje známým způsobem.
Description
DURDIL PETR ing. CSc., REVAJNEG STANISLAV, PRAHA
Způsob extrahování polyvalentního inhibitoru proteáz z živočišných žláz
Způsob extrakce polyvalentního inhibitoru proteáz ze živočišných žláz, například z hovězích plic, vodným roztokem organických rozpouštědel, například etanolu, s přídavkem rozpustných^anorganických solí při zvýšené ^eplotě spočívá v tom, že živočišná tkán se extrahuje ve dvou, fázích, přičemž v prvé fázi se živočišná tkán extrahuje za míchání v oblasti vysoké turbulence po dobu 3 až 8 hodin s výhodou 5 liodin při pH 5,5 až 6,7 s výhodou 6,5 při teplotě 40 až 45 °C vodným roztokem etanolu o hmotnostní koncentraci 70 až 80 'ío a přídavkem 1 až 3 % hmot. chloridu yápenatého, v druhé fázi se živočišná tkán extrahuje za míchání v oblasti laminární za současného zředění směsi vodou na 10 až 90 % původní koncentrace etanolu s výhodou na 60 % původní koncentrace po dobu 1 až 18 hodin, s výhodou 16 hodin při pH 5,5 až 6,5 při teplotě 18 až 40 “c a ze získané suspenze se pevná fáze oddělí a extrakt se zpracuje známým způsobem.
236635 (51) lni c6
B Ol D 11/00
- 1 256 635
Vynález se týká způsobu extrahování polyvalentního inhibitoru proteáz z živočišných žláz.
Postup získávání polyvalentního inhibitoru proteáz /Kallikrein inactivator, Aprotinin, Antilysin/ ze živočišných žláz je zpracován v řadě prací. Inhibitor je získáván například z pankreatu, jater, sleziny, plic a dalšího materiálu.
Při známých způsobech přípravy inhibitoru se používají k extrakci rozdrcených žláz vodné roztoky nebo roztoky vody s organickými rozpouštědly /alkoholy, organickými kyselinami, ketony a pod./ za přítomnosti solí kovů alkalických zemin, alkalických kovů, přechodných kovů a pod. /viz NSR patenty č. 1 014 288, 1 011 576, U.S. pat. 2 840 986/. Teploty při extrakcích se pohybují od 20 do 40 °C. Extrakce probíhají za míchání od několika rniůut po 5 hodiny.
Dle československého vynálezu AO č. 155 891 je postup extrakce následující: plíce čerstvé nebo rozmražené se rozemelou na kousky velikosti řádově milimetrů, extrakční prostředí tvoří vodní roztok etanolu s přídavkem chloridu vápenatého, teplota směsi obou fází /plic a roztoku/ se udržuje na hodnotě 40 až 42 °C, extrakce probíhá za promíchávání po dobu 2 hodiny a následuje oddělení pevné fáze od extraktu na odstředivce. Tímto způsobem extrakce se vyzíská ze Žláz část inhibitoru. Výtěžnost není zdaleka optimální z hlediska skutečných možností využití suroviny, neboí se dosahuje stavu, který je velmi vzdálen od rovnováhy mezi extrahovanou surovinou a extrakčním prostředím.
- 2 256 635
Uvedené nedostatky odstraňuje způsob extrahování polyvalentního inhibitoru proteéz z živočišných žláz podle vynálezu, jehož podstata spočívá v extrakci živočišné tkáně probíhající ve dvou fázích, přičemž v prvé fázi extrakce probíhá za míchání v oblasti vysoké turbulence po dobu 3 až 8 hodin s výhodou 5 hodin při pH 5,5 až 6,7 s výhodou při teplotě 40 až 45 °0 vodným roztokem etanolu o hmotnostní koncentraci 70 až 80 % s přídavkem 1 až 3 % hmot. chloridu vápenatého, v druhé fázi extrakce probíhá za míchání v oblasti laminární za současného zředění směsi vodou na 10 až 90 % původní koncentrace etanolu s výhodou na 60 % původní koncentrace po dobu 1 až 18 hodin s výhodou 16 hodin při pH 5,5 až 6,5 při teplotě 18 až 40 °C, ze získané suspenze se pevná fáze oddělí a extrakt se zpracuje známým způsobem.
Postupem dle vynálezu se dosáhne výtěžnosti inhibitoru 350 000 až 400 000 TU/kg plic, což ve srovnání s dosud známými postupy je o cca 30 % více.
Vlastním příkladem se demonstruje postup extrakce.
Příklad kg plic se desintegruje na částice maximálních rozměrů 3 nm. Hmota se okamžitě přenese do extrakčního zařízení, v němž je směs etanolu a vody o koncentraci etanolu 75 % hmot. s přídavkem 3 % hmot. chloridu vápenatého. Směs se podrobí při teplotě 40 až 42 °C intenzivnímu míchání v oblasti vysoké turbulence po dobu 5 hodin, přičemž pH se průběžně udržuje na hodnotě
6,5 přídavkem minerální kyseliny /HCl/. Po této operaci se změní míchání a směs je dále promíchávána zvolna v laminární oblast proudění, po dobu 16 hodin, přičemž se sníží koncentrace etanolu na hodnotu 40 % hmot. a teplota se samovolně sníží až na 20 °C při pH 6. Dále se směs odstředí, pevná fáze je odpad. Inhibitor obsažený v roztoku se po několika operacích, při nichž se odstraňují balastní látky, vysráží. Získaný surový produkt se nejprve čistí frakcionací a pak následuje fáze čištění pomocí gelového molekulárního síta. Výtěžek inhibitoru činí 0,75 g o aktivitě 5 200 TU/mg.
Claims (1)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZU256 635Způsob extrakce polyvalentního inhibitoru proteóz ze živočišných žláz, například z hovězích plic, vodným roztokem organických rozpouštědel, například etanolu, s přídavkem rozpustných anorganických solí při zvýšené teplotě, vyznačující se tím, že živočišná tkán se extrahuje ve dvou fázích, přičemž v prvé fázi se živočišná tkáň extrahuje za míchání v oblasti vysoké turbulence po dobu 3 až 8 hodin s výhodou 5 hodin při pH 5,5 až 6,7 s výhodou 6,5 při teplotě 40 až 45 °C vodným roztokem etanolu o hmotnostní koncentraci 70 až 80 % s přídavkem 1 až 3 % hmot. chloridu vápenatého, v druhé fázi se živočišná tkáň extrahuje za míchání v oblasti laminární za současného zředění směsi vodou na 10 až 90 % původní koncentrace etanolu s výhodou na 60 % původní koncentrace po dobu 1 až 18 hodin, s výhodou 16 hodin při pH 5,5 až 6,5 při teplotě 18 až 40 °G a ze získané suspenze se pevná fáze oddělí a extrakt se zpracuje známým způsobem.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS862994A CS256635B1 (cs) | 1986-04-25 | 1986-04-25 | Způsob extrahování polyvalentního inhibitoru proteáz z živočišných žláz |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS862994A CS256635B1 (cs) | 1986-04-25 | 1986-04-25 | Způsob extrahování polyvalentního inhibitoru proteáz z živočišných žláz |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS299486A1 CS299486A1 (en) | 1987-09-17 |
| CS256635B1 true CS256635B1 (cs) | 1988-04-15 |
Family
ID=5368731
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS862994A CS256635B1 (cs) | 1986-04-25 | 1986-04-25 | Způsob extrahování polyvalentního inhibitoru proteáz z živočišných žláz |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS256635B1 (cs) |
-
1986
- 1986-04-25 CS CS862994A patent/CS256635B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS299486A1 (en) | 1987-09-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| HU196435B (en) | Process for separating pancreatine | |
| KR20040085139A (ko) | 향상된 기름종자단백질 회수 | |
| JPS5836345A (ja) | 等電点沈澱させた植物性蛋白質混合物からの７ｓ及び１１ｓ蛋白質の分別及び単離 | |
| US4296026A (en) | Production of soybean protein isolate of improved purity | |
| EP0163271A2 (en) | Alkaline refined gum and use thereof in improved well-treating compositions | |
| US4307014A (en) | Soybean protein isolate production | |
| CS256635B1 (cs) | Způsob extrahování polyvalentního inhibitoru proteáz z živočišných žláz | |
| US2410084A (en) | Recovery of heparin | |
| US4420642A (en) | Selective removal and recovery of catechol mixed with 2-methallyloxyphenol | |
| US4216293A (en) | Extracting protease-inhibitor from animal tissue containing same | |
| Dresden et al. | Schistosoma mansoni: calcium content of cercariae and its effects on protease activity in vitro | |
| JP2003342489A (ja) | 藍藻類からのフィコシアニンの抽出方法 | |
| US4029641A (en) | Process for the simultaneous obtention of insulin and pancreatin from swine pancreases | |
| GB732951A (en) | Improved process for the recovery of proteolytic enzymes from pancreas gland material | |
| US3168448A (en) | Process of preparing a lipolytic enzyme composition | |
| US2797184A (en) | Process for the recovery of heparin | |
| US3016331A (en) | Purification of heparin | |
| CS248011B2 (en) | Preparation method of water extracts of permanent composition with low content of fat and other contaminating components with high content of heparin | |
| US2834713A (en) | Preparation of enzyme extracts from liver | |
| JP2534043B2 (ja) | 十字花科植物から有効成分の分離方法 | |
| US20120302735A1 (en) | Production of soy protein product | |
| US3670075A (en) | Process of preparing a protease inhibitor | |
| US2567378A (en) | Preparation of pepsinogen and pepsin | |
| US3260654A (en) | Method for the preparation of a pancreas extract having a high proteolytic activity | |
| US2585546A (en) | Production of high viscosity hyaluronic acid |