CS254240B1

CS254240B1 - Q-Benz0yl-Q-(3-trimetylamóniiun-2-hydroxypropyl)celul6za

Info

Publication number: CS254240B1
Application number: CS863790A
Authority: CS
Inventors: Jan Pastyr; Miroslav Antal; Ivan Michalik; Zdena Galova
Original assignee: Jan Pastyr; Miroslav Antal; Ivan Michalik; Zdena Galova
Priority date: 1986-05-23
Filing date: 1986-05-23
Publication date: 1988-01-15
Also published as: CS379086A1

Description

Vynález sa týká Obenzoyl-O-(3-tri.metylamónium-2-hydroxypropyl) celulózy,

O-Benzoyl-O- (3-trimetylamónium-2-hydroxypropyl jcelulóza nebola doteraz připravená. Na separáciu transférových ribonukleových kyselin sa používá henzoylovaná dietylamínoetylcelulóza, ktorá sa připravuje pósobením 2-chlórdietylaimínhydrochloridu na celulózu v alkalickom prostředí [E. A. Peterson, H. A. Sobers: J. Am. Soc. 78, 751 (1956); D- Semenza: Helv. Chem. Acta 43, 1 057 (1960); A. O. Jakubovic: Nátuře 184, 1065 (1959)]. Benzoyláciou dietylamínoetylcelulózy v pyridine sa připraví benzoyldietylamínoetylcelulóza (I. Gillam, S. Millward, D. Blew, M. Tigerstrom, E. Wimmer, G. M. Tener: Biochemistry 6, 3 043 (1967) j.

Doteraz používaný sposob přípravy dietylamínoetylcelulózy má niektoré nevýhody technologického rázu, napr., že hotový produkt po vyzrážaní třeba mechanicky upravovat' a triediť na potřebná zrnitost. Dalej pre potřeby vlazania transferribonukleových kyselin nie je potřebný obsah dusíka v produkte nad 1,0 % hmot. O-(3-trimetylamóniuim-2-hydroxypropylj celulóza bola připravená pósobením 3-chlóro-2-hydroxypropyltrimetylamóniumhydrochloridu v alkalickom prostředí na celulózu [Th. Krause, M. Kaufer, W. Schempp: Das Papier 35 (10A), V33 (1981); M. Kaufer, W. Schemp: Das Papier 34 (12), 575 (1980)].

Podstatou vynálezu je O-benzoyl-O-(3-trimetylamónium-2-hydroxypropyl jcelulóza obecnéhoi vzorca nie je potřebná ďalšia mechanická úprava a triedenie produktu. Spósob přípravy je jednoduchý, časové menej náročný na přípravu ekonomicky výhodnější ako u benzoyldietylamínoetylcelulózy.

Příklad 1

Do trojhrdlej sulfonačnej banky obsahu 5 litrov opatrenej miešadlom, chladičom, deliacim lievikom a vyhrievacím kúpeíom sa do 246 g suchého pyridinu suspenduje 100 g absolútne suchej O-(3-trimetylamónium-2-hydroxypropylj celulózy s obsahom 0,13 o/o hmot. dusíka s výměnnou kapacitou 0,15 mmól. g¹ a n je 200, esterifikuje sa 256 g čerstvo predestilovaného benzoylchloridu za miešania pri teplote 60 °C po dobu 180 minút. Po skončení reakcie sa produkt zráža do 5 1 chladnej (5 °Cj destilovanej vody v digestoře. Po- premiešaní sa odsaje na sklennej frite (S-l). Za tým¹ sa rozdrobí vo vodnom prostředí v mixéri, 3-krát sa dekantuje 2 litrami destilóvanej vody, odsaje, premyje sa 2-krát 2 1 50 % obj. vodného etylalkoholu, za tým 1 1 96 % hmot. etylalkoholu. Odsaje sa, potom sa volné vysuší a nakoniec sa dosuší pri tlaku 10 kPa a teplote 60 °C. Na silách sa vytriedi frakcia o velkosti častíc 0,074 až 0,297 mm. Získá sa 170 g O-benzoyl-O-(3-trimetylamónium-2-hydroxypropylj celulózy s 0,06 % hmot. dusíka a benzoylovým zbytkom odpovedajúcim stupňom substitúcie 2,6 pre benzoyl, s výměnnou kapacitou 0,017 mmól. g^_1.

CH„OR >-4,......O

OR !

í\j

OR

VL z,

Ci-kOR /í.

kde

R je vodík, 3-trimetylamónium-2-hydroxypropyl alebo benzoyl, ktorý je v polohe vodíka hydroxylových skupin na uhlíkoch Cz, C3 a C6 so' stupňom substitúcie pre vodík 0,05 až 0,20 so stupňom substitúcie pre 3-trimeťylamónium-2-hydroxypropyl 0,15 až 0,20 a so stupňom substitúcie pre benzoyl

2,6 až 2,8 a n je 200.

Příklad 2

Postupuje sa ako v příklade 1, s tým rozdielom, že sa použije sletovaná O-(3-trimetylamónium-2-hydroxypropyl jcelulóza 0' velkosti častíc 0,074 až 0,297 mm s obsahom 1,15 % hmot. dusíka s výměnnou kapacitou 0,7 mmól. g^_1 a n je 70 pri použití 342 g benzoylchloridu na esterifikáciu a teplote reakciel 80 °C po dobu 90 minút. Získá sa 180 g O-benzoyl-O-(3-'trimetylamóniuim-2-hydroxypropyl)celulózy s obsahom 0,6 % hmot. dusíka a benzoylovým zbytkom odpovedajúcim stupňu substitúcie 2,8, výměnná kapacita 0,36 mmól . g^-1.

O-Benzoyl-O- (3-dietylamíno-2-hydroxypropyljcelulózu pripravenú podlá príkladov 1 a 2 možno použiť na separáciu transférových ribonukleových kyselin známým . spósobom [I. C. Gillam, G. M. Tener: Methods in Enzymology 20, 55 (1971)].

Výhodou navrhovaného spósobu přípravy O-benzoyl-O- (3-trimetylamónium-2-hydroxypropyíj celulózy je, že pri obsahu 0,4 až 0,7 % hmot. dusíka sa dosiahne výměnná kapacita produktu 0,5 až 0,7 mmól. g^-1, ktorá vyhovuje pre totálnu separáciu transférových ribonukleových kyselin. Pri benzoylácii sieťovanej O-(3-trlmetylamónium-2-hydroxypropyl)celulózy o vhodnej velkosti

Příklad 3

Ako náplň do kolóny šířky 25 m>m, výšky 120 mm sa použije O-benzoyl-O-(3-trimetylamónlum-2-hydroxypropyljcelulóza o velkosti častíc 0,074 až 0,297 mm. Množstvo aplikovaných transferribonukleových kyselin je 200 mg v 20 ml pufru (30 mmól. 1^_I octanu sodného, 5 mmól. I“¹ chloridu horečnatého, 0,5 mmól. I^-1 etyléndiamínotetraoctovej kyseliny, 0,45 mmól. I¹ chloridu sodného, pri pH 4,5), pričom elúcia sa robí gradiántom soli v množstve 250 ml pufru B (30 mmól. I¹ octanu sodného, 5 mmól. 1^_1chloridu horečnatého, 0,5 mmól. 1^_1 etyléndiamínotetraoctovej kyseliny, 1,0 mól. 1^Lchloridu sodného pri pH 4,5) do 250 ml pufru A. Frakcie sa zachytávajú do 90 skúmaviek po 13 ml v celkovom elučnom objeme (V_t = 500 ml) sa kolona ďalej premyje 1 mól. Γ¹ chloridom sodným s 20 % obj. etylalkoholom do absorbancie A26O — 0,3. Celková doba stanovenia totálneho preparátu transférových ribonukleových kyselin na O-benzoyl-O- (3-trimetylamónium-2-hydroxypropyl)celulóza trvá 7 hodin.

δ

Pre porovnanie účinku O-benzoyl-O-(3-trimetylamónium-2-hydroxypropyl)celulózy s doteraz používanou O-benzoyl-O-(2-dietylamínoetyl jcelulózou uvádzame nasledovný příklad:

Příklad 4

Postup ako v příklade 3, s tým rozdielom, že ako náplň do kolony sa použije O-benzoyl-O- (2-dietylamínoetyl) celulóza. Celková doba stanovenia totálneho preparátu transferových ribonukleových kyselin na danom sorbeníe je 8 hodin.

Vynález može nájsť široké použitie v biochemii pri separácii transférových ribonukleových kyselin.

Claims

254240 octanu sodného, 5 mmól. I“1 chloridu ho-rečnatého, 0,5 mmól. I-1 etyléndiamínotet-raoclovej kyseliny, 0,45 nwnól. I"1 chloridusodného, pri pH 4,5), pričom elúcia sa robígradiániom soli v množstve 250 ml pufru B(30 mmól. I"1 octanu sodného, 5 mmól. 1_1chloridu horečnatého, 0,5 mmól. 1_1 etylén-diamínotetraoctovej kyseliny, 1,0 mól. 1Lchloridu sodného pri pH 4,5) do 250 mlpufru A, Frakcie sa zachytávají! do 90 skú-maviek poi 13 ml v celkovom elučnom obje-me (Vt = 500 ml) sa kolona ďalej premyje1 mól. Γ1 chloridom sodným s 20 % obj.etylalkoholom do absorbancie A26O — 0,3.Celková doba stanovenia totálneho prepa-rátu transférových ribonukleových kyselinna O-benzoyl-O- (3-trimetylamónium-2-hyd-roxypropyl)celulóza trvá 7 hodin. δ Pre porovnáme účinku O-benzoyl-O-(3-tri-metylamónium-2-hydroxypropyl) celulózy sdoteraz používanou O-benzoyl-O-(2-dietyl-amínoetyl)celulózou uvádzame nasledovnýpříklad: Příklad 4 P-ostup ako v příklade 3, s tým rozdielom,že ako náplň do kolony sa použije O-benzo-yl-O- (2-dietylamínoetyl) celulóza. Celkovádoba stanovenia totálneho preparátu trans-ferových ribonukleových kyselin na danomsorbeníe je 8 hodin. Vynález móže nájsť široké použitie v bio-chemii pri separácii transférových ribonuk-leových kyselin. O-Benzoyl O - (3-trimetylamóniuin-2-hydrcjxypropyl) celulóza obecného vzorca P R E D M T VYNALEZU

kde R je vodík, 3-trimetylamónium-2 hydroxy-ipropyl alebo benzoyl, ktorý je v polohe vo-díka hydroxylových skupin na uhlíkoch C2,C3 a Ce so stupňom substitúcie pre vodík 0,05 až 0,2 so stupňom substitúcie pre 3--trimetylamónium-2-hydroxypropyl 0,15 až0,20 a so stupňom substitúcie pre benzoyl 2,6 až 2,8 a n je 70 až 200.