CS237325B2

CS237325B2 - Způsob přípravy knrbexyalkylciipeptidů

Info

Publication number: CS237325B2
Application number: CS821339A
Authority: CS
Inventors: Arthur A Patchett; Elbert E Harris; Matthew J Wyvratt; Edward W Tristram
Original assignee: Merck & Co Inc
Priority date: 1978-12-11
Filing date: 1982-02-26
Publication date: 1985-07-16
Also published as: CS237326B2; CS237328B2; CS237327B2

Abstract

Způsob přípravy karboxyalkyldipeptidů obecného vzorce 1 O Rl R3 Ri Rs 0 - II II I I II R—C—C—ΝΉ—CH—C—·N—C—C—Re (I) .1. II I. ....-v. Rž O R7 a jejích farmaceuticky vhodných solí a biologicky účinného isomeru, spočívající v reakci ketonu obecného vzorce II s aminokyselinou nebo chráněnou aminokyselinou obecného vzorce III. Látky vzorce I jsou použitelné jako inhibitory konvertujícího enzymu a jako antihypertensiva

Description

Vynález se týká způsobu přípravy karboxyalkyldipeptidů obecného vzorce I

O Ri R3 Rd Rd O

R—C—-C—NH—CH—C—N—C—C—Re (I)

R2 O R7 kde

R a Re jsou stejná nebo rozdílné a znamenají hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkenoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, dialkylaminoalkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylovém zbytku, acylaminoalkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylovém zbytku a 2 až 12 atomy uhlíku v acylovém zbytku, acyloxyalkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylovém zbytku a 2 až 12 atomy uhlíku v acylovém zbytku, aryloxyskupinu s alespoň 6 atomy uhlíku, aralkyloxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém zbytku a alespoň 6 atomy uhlíku v arylovém zbytku, substituovanou aryloxyskupinu s alespoň 6 atomy uhlíku nebo substituovanou aralkoxyskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém zbytku a alespoň 6 atomy uhlíku v arylovém zbytku, kde substituentem je methyl, halogen nebo methoxyskupina, aminoskupinu, alkylaminoskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, dialkylaminoskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, aralkylaminoskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém zbytku a alespoň 6 atomy uhlíku v arylovém zbytku nebo hydroxyaminoskupinu,

Ri je vodík, alkyl s 1 až 20 atomy uhlíku, který zahrnuje rozvětvené acyklické skupiny, allyl, substituovaný alkyl s 1 až 4 atomy uhlíku, kde substituentem je halogen, hydroxyskupina, alkoxyskupina s 1 až 3 atomy uhlíku, aryloxyskupina s alespoň 6 atomy uhlíku, aminoskupina, alkylaminoskupina, dialkylaminoskupina s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém zbytku, acylaminoskupina se 2 až 12 atomy uhlíku, arylaminoskupina s alespoň 6 atomy uhlíku, a guanidinoskupina, imidazolyl, indolyl, merkaptoskupina, alkylthioskupina s 1 až 3 atomy uhlíku, arylthioskupina s alespoň 6 atomy uhlíku, karboxyskupina, karboxamidoskupina, karboalkoxyskupina s 1 až 3 atomy uhlíku, fenyl, substituovaný fenyl, kde substituentem je alkyl s 1 až 3 atomy uhlíku, alkoxyskupina s 1 až 3 atomy uhlíku, nebo halogen, aralkyl s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém zbytku a alespoň 6 atomy uhlíku v arylovém zbytku nebo indolylalkyl s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém zbytku, aralkenyl s 1 až 4 atomy uhlíku v alkenylovém zbytku a alespoň 6 atomy uhlíku v arylovém zbytku, substituovaný aralkyl s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém zbytku a alespoň 6 atomy uhlíku v arylovém zbytku, substituovaný indolylethyl, substituovaný aralkenyl s 1 až 3 atomy uhlíku v alkenylovém zbytku a alespoň 6 atomy uhlíku v arylovém zbytku, kde substituentem je halogen nebo dihalogen, alkyl s 1 až 3 atomy uhlíku, hydroxyskupina, alkoxyskupina s 1 až 3 atomy uhlíku, aminoskupina, aminomethyl, acylaminoskupina se 2 až 12 atomy uhlíku, dialkylaminoskupina s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém zbytku, alkylaminoskupina s 1 až 3 atomy uhlíku, karboxyl, halogenalkyl s 1 až 3 atomy uhlíku, kyanoskupina nebo sulfonamidoskupina, aralkyl s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém zbytku a alespoň 6 atomy uhlíku v arylovém zbytku nebo indolylethyl, substituovaný na alkylové části aminoskupinou nebo acylaminoskupinou se 2 až 12 atomy uhlíku,

Rz znamená vodík nebo alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku,

R2 je vodík,

R3 je vodík, alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, fenylalkyl s 1 až Θ atomy uhlíku, aminomethyl-fenylalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, hydroxyfenylalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, hydroxyalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, acetylaminoalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, acylaminoalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylovém zbytku s 2 až 12 atomy uhlíku v acylovém zbytku, aminoalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, dimethylaminoalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, halogenalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, guanidinoalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, imidazolylalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, indolylalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, merkaptoalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku a alkylthioalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylovém zbytku,

Rt je vodík nebo alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku,

Rg je vodík, alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, fenyl, fenylalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, hydroxyfenylalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, hydroxyalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, aminoalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, guanidinoalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, imidazolylalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, indolylalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, merkaptoalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku nebo alkylthioalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylovém zbytku,

Rra Rs jsou popřípadě spojeny dohromady k vytvoření alkylenového můstku se 2 až 4 atomy uhlíku, alkylenového můstku se 2 až 3 atomy uhlíku a jedním atomem síry, alkylenového můstku se 3 až 4 atomy uhlíku obsahujícího dvojnou vazbu nebo alkylenového můstku se 2 až 4 atomy uhlíku substituovaného hydroxy-, alkolxyskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku nebo alkylem s 1 až 6 atomy uhlíku, a jejich farmaceuticky vhodných solí a biologicky účinného isomeru.

Alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku nebo alkenylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku zahrnují například methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, terc.butyl, pentyl, isopentyl, hexyl nebo vinyl, allyl, butenyl apod. Aralkylové skupiny s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém zbytku a alespoň 6 atomy uhlíku v arylovém zbytku zahrnují například benzyl, p-methoxybenzyl apod. Halo237325 gen znamená chlor, brom, jod nebo fluor. Aryl představuje fenyl nebo naftyl. Heteroarylové skupiny zahrnují například pyridyl, thienyl, furyl, indolyl, benzthienyl, imidazolyl a thiazolyl.

Substituované alkylové zbytky substituentu Ri, R3 a Rs se znázorní skupinami jako

HO-CH2-, HS-CH2-, H2N-[CH2)4-, CH3-S-ÍCH2]2-, H2N- (CH2 )3-,

NH

II

H2N—C—NH“(CH2)3— a podobně.

R4 a Rs, když jsou spojeny atomem uhlíku a dusíku, ke kterému jsou připojeny, tvoří 4ař 6členný kruh, který může obsahovat jeden atom síry nebo dvojnou vazbu.

Výhodné kruhy mají obecný vzorec

COOH kde

Y je CH2, S nebo CHOCH3, nebo vzorec

COOH

Výhodné jsou sloučeniny obecného vzorce I, kde

R je hydroxyskupina, alkoxyskupina s 1 až 6 atomy uhlíku, alkenoxyskupina s í až 6 atomy uhlíku, aralkyloxyskupina s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém zbytku a alespoň 6 atomy uhlíku v arylovém zbytku, dialkylaminoskupína s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylovém zbytku, alkoxyskupina s 1 až 6 atomy uhlíku, acy lamin oalkoxyskupina s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylovém zbytku a 2 až 12 atomy uhlíku v acylovém zbytku, acy loxy skupina se 2 až 12 atomy uhlíku, alkoxyskupina s 1 až 6 atomy uhlíku, kde substituentem je methyl, halogen nebo methoxyskupina,

R6 je hydroxy- nebo amínoskupina,

R2 a R7 je vodík,

R3 je alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku nebo aminoalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku,

R4 a Rs jsou spojeny a tvoří výhodné kruhy, jak uvedeno výše, kde Y je CH2, S nebo

CH-OCHs,

Ri má výše uvedený význam.

Výhodnější sloučeniny jsou takové výhodné sloučeniny obecného vzorce I, kde

Ri je alkyl s 1 až 8 atomy uhlíku, substituovaný alkyl s 1 až 4 atomy uhlíku, kde substituentem je amínoskupina s alespoň 6 atomy uhlíku, aryloxyskupina s alespoň 6 atomy uhlíku nebo arylaminoskupina s alespoň 6 atomy uhlíku, aralkyl s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém zbytku a alespoň 6 torny uhlíku v arylovém zbytku nebo indolylalkyl s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém zbytku nebo substituovaný aralkyl (fenylalkyl nebo nafty 1alkyl) s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém zbytku a substituovaný indolylalkyl s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém zbytku, kde substituentem (yj je halogen, dihalogen, aminoskupina, aminoalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, hydroxyskupina, alkoxyskupina s 1 až 6 atomy uhlíku nebo alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku.

Nejvýhodnější jsou sloučeniny obecného vzorce I, kde

R je hydroxyskupina nebo alkoxyskupina s 1 až 6 atomy uhlíku,

Rs je hydroxyskupina,

R2 a R7 je vodík,

R3 je methyl nebo aminoalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku,

R4 a Rs jsou spojeny atomem uhlíku a atomem dusíku a tvoří prolin, 4-thiaprolin nebo 4-methoxyprolin,

Ri je alkyl s 1 až 18 atomy uhlíku, substituovaný alkyl s 1 až 4 atomy uhlíku, kde substituentem je amínoskupina, arylthíoskupina s alespoň 6 atomy uhlíku nebo aryloxyskupina s alespoň 6 atomy uhlíku nebo indolylalkyl s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém zbytku, jako indolylethyl, nebo substituovaný aralkyl (fenylalkyl nebo naftylalkyl) s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém zbytku a substituovaný indolylethyl, kde substituentem (yj je halogen, dihalogen, amínoskupina, aminoalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, hydroxyskupina, alkoxyskupina s 1 až 6 atomy uhlíku nebo alkyl s 1 až 6 ato-my uhlíku.

Výhodné, výhodnější a nejvýhodnější sloučeniny také zahrnují farmaceuticky vhodné soli.

Sloučeniny podle vynálezu jsou použitelné jako inhibitory konvertujícího enzymu a jako anf hypertenstva.

Způsob přípravy sloučenin vzorce I se provádí tak, že se nechá reagovat keton obecného vzorce II

O Rl

R—C—C = O (II) kde

R má výše uvedený význam kromě hydroxyskupiny a

Rl má výše uvedený význam, přičemž může obsahovat vhodnou ochranu jakékoliv reaktivní skupiny, s aminokyselinou nebo chráněnou aminokyselinou obecného vzorce III

HžNCH—COOH (III) kde

Rs má výše uvedený význom, přičemž může zahrnovat vhodnou ochranu jakékoliv reaktivní skupiny, v přítomnosti redukčního činidla za vzniku meziproduktu obecného vzorce IV

O Ri R3

R—C—CH—NHCHCOOH (IV) kds

R, Ri a R3 mají výše uvedený význam, a potom se tento meziprodukt kopuluje s aminokyselinou nebo chráněným derivátem aminokyseliny obecného vzorce V

Rl Rs

I 1

HN—C—CO—Rs (V)

R7 kde

Rs má výše uvedený význam kromě hydroxyskupiny a

Rs má výše uvedený význam, přičemž může zahrnovat vhodnou ochranu jakékoliv reaktivní skupiny a

R7 a Ri mají výše uvedený význam a získá se sloučenina obecného vzorce I, kde R a Rs mají výše uvedený význam kromě hydroxyskupiny a Ri, Rz, R3, Rá, Rs a R7 mají výše uvedený význam, potom se ochranné skupiny odstraní a popřípadě se přemění R a/nebo Rs hydrolýzou nebo hydrogenací vhodného meziproduktu na hydroxyskupinu a popřípadě se připraví její sůl a popřípadě se izoluje biologicky účinnější isomer chromatografií nebo frakční krystalizaci.

Ketokyselina (nebo ester, amid nebo hydroxamová kyselina] vzorce II se kondenzuje s aminokyselinou vzorce III ve vodném roztoku, s výhodou téměř neutrálním, nebo ve vhodném organickém rozpouštědle (například CH3CN) za přítomnosti kyanoborohydridu sodného a získá se sloučenina vzorce I (Rz=H).

Během kopulační reakce se reaktivní skupiny chrání například N-formylem, N-terc.butoxykarbonylem a N-karbobenzoylskupinou a potom se odstraní za vzniku sloučeniny vzorce I.

Kondenzační činidla v tomto postupu jsou taková, jako se používají v chemii peptidů, jako dicyklohexylkarbodiimid nebo difenylfosforylazid nebo se může sloučenina vzorce IV aktivovat přes přechodně vytvořené aktivní estery, takové, jaké se odvozují od 1-hydroxybenzotriazolu.

Jestliže R a R6 je karboxylová ochranná skupina, jako alkoxy- nebo benzyloxyskupina nebo podobně, může se přeměnit známými způsoby, jako hydrolýzou nebo hydrogenací na sloučeninu vzorce I, kde R a/nebo R6 je hydroxyskupina.

Výchozí látky, které se požadují pro výše uvedený postup, jsou známé v literatuře nebo se mohou připravit známými způsoby ze známých výchozích materiálů.

V produktech obecného vzorce I mohou být atomy uhlíku, ke kterým jsou Ri, R3 a Rs připojeny, asymetrické. Tudíž existují sloučeniny v diastereomerních formách nebo jejich směsích. Ve výše popsané syntéze se mohou použít racernáty, enantiomery nebo diastereomery jako výchozí látky. Když se získají při syntetických postupech diastereomerní produkty, mohou se tyto dělit běžnými chromatografickými metodami nebo metodami frakční krystalizace. Obecně jsou v S-konfiguraci výhodné částečné struktury, tj.

O Ri R₃

R—C—C—NH, —NH—CHCO—

R2 a

Rá Rs O —N—C—C —

R7 aminokyseliny vzorce I.

Sloučeniny podle vynálezu tvoří soli s různými anorganickými a organickými kyselinami a zásadami, které jsou také zahrnuty do rozsahu vynálezu. Tyto soli zahrnují amonné soli, soli alkalického kovu, jako sodné a draselné soli, které jsou výhodné, soli kovů alkalických zemin, jako vápenaté a horečnaté soli, soli s organickými zásadami, například dicyklohexylaminové soli, N-methyl-D-glukamin, soli s aminokyselinami, jako arginin, lysin apod. Také se mohou připravit soli s organickými a anorganickými kyselinami, například HCI, HBr, H2SO4, H3PO4, methansulfoncvou, toluensulfonovou, maleinovou, fumarovou, kafrsulfonovou kyselinou. Výhodné jsou netoxické fyziologicky vhodné soli, ačkoliv jsou také použitelné jiné soli, například při izolaci nebo čištění produktu,

37 3 2 S

Soli se mohou vytvořit běžnými způsoby, jako reakcí volné kyseliny nebo volné báze produktu s jedním nebo více ekvivalenty vhodné báze nebo kyseliny v rozpouštědle nebo prostředí, ve kterém je sůl nerozpustná, nebo v rozpouštědle, jako vodě, které se potom odstraní ve vakuu nebo sublimačním sušením nebo výměnou kationtů přítomné soli za jiný katión na vhodném iontoměniči.

Sloučeniny podle vynálezu inhibují enzym konvertující angiotensin a tak blokují konverzi dekapeptidu angiotensinu I na angiotensin II. Angiotensin II je účinná látka zvyšující krevní tlak.

Účinek snižující krevní tlak se může odvozovat od ihibice jeho biosyntézy, obzvláště u zvířat a lidí, jejichž hypertense je ovlivněna angiotensinem II. Dále odbourává konvertující enzym vasodepresorickou látku bradykinin. Proto inhibitory enzymu konvertujícího angíotensm mohou snižovat krevní tlak také potenciací bradykininu. Ačkoliv se musí relativní význam těchto a dalších možných mechanismů potvrdit, jsou inhibitory enzymu konvertujícího angiotensin účinné antihypertensní látky na různých modelech zvířat a jsou použitelné klinicky, například u mnohých pacientů v humánní terapii s renovaskulární, maligní a esenciální hypertensí. Viz například D. W. Cushman et al., Biochemistry 16, 5484 (1977).

Zhodnocení Inhibitorů konvertujícího enzymu je provedeno ve zkoušce in vitro inhibice enzymu. Například použitelnou metodu uvedl Y. Piquilloud, A. Reinharz a M. Roth, Biochem. Biophys. Acta, 206, 136 (1970), podle které se měří hydrolýza karbobenzyloxyfenylalanylhistidinylleucinu. Hodnocení in vivo se například provádějí u krys s normálním tlakem, kterým se podává angiotensin I, podle techniky J. R Weeks a J. A. Jonese, Proč. Soc. Exp. Biol. Med. 104, 646 (1960) nebo na modelu krys s vysokým obsahem reninu, jak uvádí S. Koletsky et al., Proč. Soc. Exp. Biol. Med. 125, 96 (1967).

Sloučeniny podle vynálezu jsou použitelné jako antihypertensiva při léčení hypertensních savců, včetně lidí, a mohou se podávat k dosažení snížení krevního tlaku formováním do směsí, jako tablet, kapslí nebo elixírů pro parenterální podání. Sloučeniny podle vynálezu se mohou podávat pacientům (zvířatům a lidem] při potřebě tohoto léčení v dávkovém rozmezí 5 až 500 mg na pacienta při podávání několikrát za den, celková denní dávka je v rozmezí 5 až 2000 mg. Dávka se mění v závislosti na závažnosti onemocnění, hmotnosti pacienta a dalších faktorech, které určí lékař.

Také se mohou podávat sloučeniny podle vynálezu ve směsi s dalšími diuretiky nebo antibypertensivy. Typické jsou směsi, jejichž individuální denní dávky se pohybují od jedné pětiny minimálně doporučených klinických dávek do maximálně doporučených hladin pro stav, kdy jsou podávány jednotlivě. K ilustraci těchto směsí se může jedna anťhypertensní látka podle vynálezu klinicky účinná v rozmezí 15 až 200 mg na den účinně smísit při hladině v rozmezí 3 až 200 mg na den s následujícími antihypertensivy a diuretiky v daném rozmezí dávek na den:

hydrochlorthiazid (15 až 200 mg), chlorthiazid (125 až 2G0 mg), ethakrynová kyselina (15 až 200 mg), amilorid (5 až 20 mg), furosemid (5 až 80 mg), propane lol (20 až 480 mg), timolol (5 až 50 mg) a metyldopa (65 až 2000 mgj. Kromě toho jsou směsi s třemi léky, jako hydrochlorthiazid (15 až 200 mgj plus amilorid (5 až 20 mg) + inhibitor konvertujícího enzymu podle vynálezu (3 až 200 mgj nebo hydrochlorthiazid (15 až 200 mgj + timolol (5 až 50 mgj + 4- inhibitor konvertujícího enzymu podle vynálezu (3 až 200 mg), účinné směsi při léčení vysokého krevního tlaku u hypertensních pacientů. Výše uvedené rozmezí dávek se adjustuje na jednotkovém základě podle potřeby k dosažení rozdělení denní dávky.

Dávka, se mění v závislosti na závažnosti onemocnění, hmotnosti pacienta a dalších faktorech, které zhodnotí lékař.

Výše uvedené směsi se formují do farmaceutických přípravků, jak uvedeno dále.

Asi 10 až 500 mg sloučeniny nebo směsi sloučenm vzorce I nebo fyziologicky vhodné soii se smísí s fyziologicky vhodným vehikulcm, nosičem, pomocnou látkou, pojivém, konzervační látkou, stabilizátorem, aromatickou látkou, atd. v jednotkové dávkové formě podle přijaté farmaceutické praxe. Množství účinné látky v těchto směsích nebo přípravcích je takové, aby se dosáhlo vhodných dávek v daném rozmezí.

Příkladem .adjuvantů, které se mohou včlenit do tablet, kapslí apod., jsou následující látky: pojivo, jako tragant, arabská guma, kukuřičný škrob nebo želatina, pomocná látka, jako nrkrokrystalická celulóza, rozvolíiovadlo, jako kukuřičný škrob, předem želaťnový škrob, kyselina alginová apod., kluzná látka, jako stearan horečnatý, sladidlo, jako sacharóza, laktóza nebo sacharin, aromatická látka, jako silice z máty peprné, libavková silice nebo třešňová silice. Když se použije jako jednotková dávková forma kapsle, může obsahovat kromě výše uvedených látek tekutý nos'č, jako mastný olej. Různé další materiály mohou být obsaženy jako povlak nebo mohou jiným způsobem modifikovat fyzikální formu dávkové jednotky. Například mohou být tablety potaženy šelakem, cukrem nebo obojím. Sirup nebo elixír může obsahovat účinnou sloučeninu, sacharózu jako sladidlo, methyl- a propylparaben jako konzervační látku, barvivo¹ a aromatickou látku, jako třešňovou nebo pomerančovou silici.

Sterilní směs pro injekce se může formovat podle běžné farmaceutické praxe rozpuštěním nebo suspendováním účinné látky ve vehikulu, jako vodě pro injekci, přírodně se vyskytujícím rozstlinném oleji, jako sezamovém oleji, kokosovém oleji, podzemnicovém oleji, bavlníkovém oleji atd., nebo syntetickém mastném vehikuiu, jako ethyloleanu nebo podobně. Podle potřeby se mohou včlenit pufry, konzervační látky, antioxidační látky apod.

Způsob podle vynálezu objasňují následující příklady. Výhodné diastereomery těchto příkladů se izolují sloupcovou chromatografií nebo frakční krystalizaci.

Příklad 1

N- (l-karboxy-3-f enylpropyl j-L-alanyl-L-prolin

Směs 4-fenyl-2-oxomáselné kyseliny (1,49 gramu) a L-alanyl-L-prolinu (0,31 g) ve vodě se upraví hydroxidem sodným na pH 7,5 a přes noc se nechá působit kyanoborohydrid sodný (0,32 g). Produkt se adsorbuje na silně kyselém iontoměniči a eluuje se 2% pyridinem ve vodě a získá se 0,36 g surového diastereomerního produktu, N- (1-karboxy-3-fenylpropyl)-L-alanyl-L-prolinu. Čistí se gelovou filtrací (LH-20) pno spektrografickou analýzu. NMR spektrum v DMSO ukazuje aromatický vodík při 7,20, široký siglet při 4,30, široké multiplety při 3,0-3,9, 2,67 a 1,94 a dublet při 1,23 a 1,15. Hmotové spektrum ukazuje molekulový iont při 492 m/e pro ditrimethylsilylovaný druh.

Příklad 2

N- [ l-karbo'xy-2- (S )-amino-3-f enylpropyl ] -D,L-alanyl-L-prolin

2-amino-4-fenyl-3- (S) -f taloylaminobutanová kyselina se kondenzuje s pyruvoyl-L-prolinem pomocí kyanohorohyridu sodného v methanolu v neutrálním prostředí a získá se N-(l-karboxy-3-fenyl-2-f taloylamino )-D,L-alanyl-L-prolin jako směs isomerů. Tento materiál se zahřívá v ethanolu pod zpětným chladičem s jedním ekvivalentem hydrazinu po dobu 1,5 hodiny, ochladí se, ftalhydrazid se odfiltruje a žádaný produkt se Izoluje chromatografickými metodami a získá se žádaná sloučenina. Chromatografie v tenké vrstvě na silikagelu se směsí 10 EtoAc: 5 pyridin :

: 1 HOAc : 3 HzO dává skvrnu s R_f ~ 0,15.

Příklad 3

N- [ l-kaťboxy-2- (S) -benzoylamino-3-f enylpropyl ] -D,L-alanyl-L-prolin

Roztok N-ftaloyl-3-amino-4-fenyl-2-hydroxybutyronitrilu v ethanolu nasyceném bezvodým amoniakem se nechá stát 3 dny při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek se zahřívá 6 hodin pod zpětným chladičem v koncentrované kyselině chlorovodíkové. Odpaří se do sucha a zbytek se čistí na koloně iontoměniče Dowex-50 (H⁺), eluuje se postupně směsí voda-methanol 10 :1, voda-pyrídin 50 :1 a konečně 0,5 M roztokem hydroxidu amonného. Žádaná 2,3-diamino-4-fenylpropionové kyselina se izoluje z tohoto posledního eluentu koncentrací do sucha. Připraví se roztok komplexu mědi této aminokyseliny a benzoyluje se 3-aminoskupina in šitu benzoylchloridem za zásaditých podmínek, metodou, kterou popsal R. Roeske et al., J. Am. Chem. Soc·, 78, 5883 (1956).

Komplex mědi se štěpí sirovodíkem a získá se 2-amlno-3-(S)-benz©ylamino-4-fenylmáselná kyselina. Tento meziprodukt se kondenzuje s pyruvoyl-2-prolinem pomocí kyanoborohydridu sodného v methanolu v neutrálním prostředí a získá se žádaný N-jl-karboxy-2- (S j-benzoylamino-3-fenyl-propyl j -D,L-alanyl-L-prolin jako směs izomerů, které se může dělit případně chromatografickými metodami.

Hmotové spektrum ukazuje vrchol při 596 m/e pro disilylovaný molekulový ion minus 15. NMR spektrum ukazuje ahsorbanci pro dva fenyly při 7,0-7,5 <S a diastereomerní methyly při 1,1 8.

Příklad 4

N-(2-amino-l-karboxy-4-methylpentyl)-D,L-alanyl-L-prolin

K roztoku 0,731 g trans-3-amino-4-(2-methylpropyl j-2-azetidinonu {připravený adicí chlorsulfonylisokyanatanu na 4-methyl-l-penten, získaný ,6-laktam se chrání jako terc.butyldhnethylsílylový derivát a potom se přidá dilsopropylamid lithný, déle tosylazid a chlortrimethylsilan. Kysele se zpracuje a chromatografií na silikagelu se získá trans-3-azído-4- (2-methylpropyl j-2-azetidinon, který se hydrogenuje (10% Pd/ethanol) na aminoderívát] a 4,58 g benzylpyruvátu ve 20 ml absolutního ethanolu obsahujícím 10 g práškovitého 4A molekulárního síta se přidá po kapkách roztok kyanoborohydridu sodného (0,65 gj v 8 ml absolutního ethanolu, dokud není reakce úplná. Reakčni směs se filtruje a filtrát se koncentruje. Zbytek se rozpustí v 50 ml vody a okyselí se 1 N HC1 na pH = 3. Směs se upraví 10% roztokem uhlič^:tanu sodného na pH = 9,5. Vodný roztok se nasytí chloridem sodným a extrahuje se ethylacetátem (5 X 40 ml).

Spojené organické vrstvy se suší síranem sodným a koncentrují se za vzniku oleje (4,94 g). Chromatografií na silikagelu (ethylacetát) se získá 1,11 g produktu. NMR spektrum a hmotové spektrum souhlasí se strukturou benzylesteru N-[trans-4-( 2-methylpropyl j -2-oxo-3-azetidinyl j -D,L-alaninu. Debenzylace se provádí katalytickou hydrogenaci [10% Pd/C, 2:1 — etanol: voda]. Ke studenému roztoku (0°C) kyseliny (428 mg) a terc.butýlesteru L-prolinu (377 mg) v 5 ml dimethylformamidu se přidá roztok difenyl237325 fosforylazidu (650 mg) v 5 ml dimethylformamidu a potom roztok triethylaminu (223 miligramů v 5 mg dimethylformamidu) během 20 minut. Po 3 hodinách se ledová lázeň odstraní a reakční směs se nechá míchat přes noc při teplotě okolí. Přidá se 100 mililitrů ethylacetátu a výsledný roztok se promyje 2 X 40 ml vody, 3 X 30 ml 5% roztoku uhličitanu sodného a 1 X 50 ml vody, načež se suší síranem sodným. Koncentrací se získá 0,78 g oleje, jehož NMR spektrum a hmotové spektrum souhlasí se strukturou terc.butylesteru N- [trans-4- (2-methylpropyl)-2-oxo-3-azetidinyl]-D,L-alanyl-L-prolinu. Surový produkt se rozpustí ve 25 ml kyseliny trifluoroctové při 0 °C. Reakční směs se míchá 20 minut při 0 °C a potom 2,5 hodiny při teplotě místnosti. Reakční směs se koncentruje do sucha a ke zbytku se přidá při teplotě místnosti 30 ml 1 N hydroxidu sodného a nechá se působit 4,5 hodiny. Zásaditá směs se přidá pomalu k silně kyselému iontoměniči a produkt se získá 2% pyridinem ve vodě. Lyofilizaci se získá 0,30 g N-[2-amino-l-karboxy-4-methylpentyl]-D,L-alanyl-L-prolín, který obsahuje 4-diastereomery (S, S, S, S; S, S, R, S; R, R, R, S; R, R, S, S,j oddělitelné chromatograficky. NMR spektrum a hmotové spektrum potvrzuje strukturu. NMR spektrum ukazuje multiplety při 4,5, 3,85, 2,3, 1,79 a 1,16 ppm. Hmotový spektrogram ukazuje vrchol při 458 (disilylovaný molekulový iont-15).

Claims

pRedmEt

Způsob přípravy karboxyalkyldipeptidů obecného vzorce I

O Ri R3 R4 Rs O

R—C—C—NH—CH—-C—N—C—C—Re (I)

Rz O R7 kde

R á R6 jsou stejné nebo rozdílné a znamenají hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkenoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, dialkylaminoalkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylovém zbytku, acylaminoalkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylovém zbytku a 2 až 12 atomy uhlíku v acylovém zbytku, acyloxyalkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylovém zbytku a 2 až 12 atomy uhlíku v acylovém zbytku,. arýloxyskupinu s alespoň 6 atomy uhlíku, ařalkyloxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém zbytku a alespoň 6 atomy uhlíku v arýlovém zbytku, substituovanou aryloxyskupinu s alespoň 6 atomy uhlíku nebo substituovanou aralkoxyskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém zbytku a alespoň 6 atomy uhlíku v arýlovém zbytku, kde substituentem je methyl, halogen nebo methoxyskupina, aminoskupinu, alkylaminoskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, dialkylaminoskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, aralkylaminoskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém zbytku a alespoň 6 atomy uhlíku v arýlovém zbytku nebo hydroxyaminoskupinu,

Ri je vodík, alkyl s 1 až 20 atomy uhlíku, který zahrnuje rozvětvené acyklické skupiny, allyl, substituovaný alkyl s 1 až 4 atomy uhlíku, kde substituentem je halogen, hydroxyskupina, alkoxyskupina s 1 až 3 atomy uhlíku, aryloxyskupina s alespoň 6 atomy uhlíku, aminoskupina, alkylaminoskupina, dialkylaminoskupina s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém zbytku, acylaminoskupina se 2 až 12 atomy uhlíku, arylaminoskupina s alespoň 6 atomy uhlíku, a guanidinoskupina, imidaVYNÁLEZU zolyl, indolyl, merkaptoskupina, alkylthioskupina s 1 až 3 atomy uhlíku, arylthioskupina s alespoň 6 atomy uhlíku, karboxyskupina, karboxamidoskupina, karboalkoxyskupina s 1 až 3 atomy uhlíku, fenyl, substituovaný fenyl, kde substituentem je .alkyl s 1 až 3 atomy uhlíku, alkoxyskuplna s 1 až 3 atomy uhlíku nebo halogen, aralkyl s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém zbytku a alespoň 6 atomy uhlíku v arýlovém zbytku nebo indolylalkyl s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém zbytku, aralkenyl s 1 až 4 atomy uhlíku v alkenylovám zbytku a. alespoň 6 atomy uhlíku v arýlovém zbytku, substituovaný aralkyl s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém zbytku a alespoň 6 atomy uhlíku v arýlovém zbytku, substituovaný indolylethyl, substituovaný aralkenyl s 1 až 3 atomy uhlíku v alkenylovém zbytku a alespoň 6 atomy uhlíku v arylovém zbytku, kde substituentem je halogen nebo dihalogen, alkyl s 1 až 3 atomy uhlíku, hydroxyskupina, alkoxyskupina s 1 až 3 atomy uhlíku, aminoskupina, aminomethyl, acylaminoskupina se 2 až 12 atomy uhlíku, dialkylaminoskupina s 1 až 3 atomy uhlíku v al· kýlovém zbytku, alkylaminoskupina s 1 až 3 atomy uhlíku, karboxyl, halogenalkyl a 1 až 3 atomy uhlíku, kyanoskupina, nebo sulfonamidoskuplna, aralkyl s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém zbytku a alespoň 6 atomy uhlíku v arýlovém zbytku nebo indolylethyl, substituovaný na alkylové části aminoskupinou nebo acylaminoskupinou se 2 až 12 atomy uhlíku, R7 znamená vodík nebo- alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, R2 je vodík, R3 je vodík, alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, fenylalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, aminomethyl-fenylalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, hydroxyfenylalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, hydroxyalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, acetylaminoalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, acylaminoalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylovém zbytku a 2 až 12 atomy uhlíku v acylovém zbytku, aminoalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, dimethylaminoalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, halogenalkyl s 1 až
2 373.25
6 atomy uhlíku, guanidinoalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, imidazolylalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, indolylalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, merkaptoalkyl. s 1 až 6 atomy uhlíku a alkylthioalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylovém zbytku,

Rd je vodík nebo alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku,

Rs je vodík, alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, fenyl, fenylalíkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, hydroxyfemylalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, hydroxyalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, aminoalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, guaimidinoalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, imidazolylalkyl s 1 až 6 atamy uhlíku, indolylalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, merkaptoalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku nebo alkylthioalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylovém zbytku,

Rd a Rs jsou popřípadě spojeny dohromady k vytvoření alkylenového můstku se 2 až 4 atomy uhlíku, alkylenového můstku se 2 až 3 atomy uhlíku a jedním atomem síry, alkylenového můstku se 3 až 4 atomy uhlíku obsahujícího dvojnou vazbu nebo alkylenového můstku se 2 až 4 atomy uhlíku substituovaného hydroxyskupinou, alkoxyskupinou s 1 až 8 atomy uhlíku nebo alkylem s 1 až 6 atomy uhlíku, a jejich farmaceuticky vhodných solí a biologicky účinného isomeru, vyznačený tím, že se nechá reagovat keton obecného vzorce ΓΙ

ΠΡ*''

O Rl

R-—C—C = O (II) kde

R má výše uvedený význam kromě ihydroxyskupiny a

Ri má výše uvedený význam, přičemž může obsahovat vhodnou ochranu jakékoliv reaktivní skupiny s aminokyselinou nebo chráněnou aminokyselinou obecného vzorce III

R-3

H2NCH—COOH (III) kde

Rs má výše uvedený význam, přičemž může zahrnovat vhodnou ochranu jakékoliv reaktivní skupiny, v přítomnosti redukčního činidla za vzniku meziproduktu obecného vzorce IV

O Rl R3

II I I

R-C—CH—NHCHCOOR (IV) kde

R, Ri a R3 mají výše uvedený význam a potom se tento meziprodukt kopuluje s aminokyselinou nebo chráněným derivátem aminokyseliny obecného vzorce V

Rd Rs

HN—C—CO—Re (V)

R7 kde

R6 má výše uvedený význam kromě hydroxyskupiny a

Rs má výše uvedený význam, přičemž může zahrnovat vhodnou ochranu jakékoliv reaktivní skupiny a

R7 a R4 mají výše uvedený význam a získá se sloučenina obecného vzorce I, kde R a R6 mají výše uvedený význam kromě hydroxyskupiny a Rl, R2, R3, Rd, Rs a R7 mají výše uvedený význam, potom se ochranné skupiny odstraní a popřípadě se přemění R a/nebo R6 hydrolýzou nebo hydrogenací vhodného meziproduktu na hydroxyskupinu a popřípadě se připraví její sůl a popřípadě se izoluje biologicky účinnější isomer chromatografií nebo frakční krystalizaci.