CS236477B2

CS236477B2 - Prostředek vhodný pro povzbuzení rychlosti růstu a pro snížení ukládání tuku u teplokrevných zvířat

Info

Publication number: CS236477B2
Application number: CS823095A
Authority: CS
Inventors: Jane A Kiernan; Pamela K Baker
Original assignee: American Cyanamid Co
Priority date: 1982-04-29
Filing date: 1982-04-29
Publication date: 1985-05-15

Description

Vynález se týká derivátů fenyletanolaninu a jejich edičních solí s kyselinami, které jsou vhodné jako růstové promotory ε prostředky pro redukci ukládání tuku u hospodářských a domácích zvířat.

V patentu USA č, 3 536 712, vydaném 27. října 1970, jsou zveřejněny substituční produkty určitých 1 -(aminpdihologenfenyl)-2-aminoetanů a jejich adiční soli s kyselinami. Autoři tohoto patentu, zejména zveřejnili způsoby syntézy těchto sloučenin a uvedli, že jsou tyto sloučeniny užitečné pro povzbuzení krevního oběhu, jako bronchodilatační prostředky, energetika, sedativa, antipyretika, antiflogistika a antitussivo pro teplokrevné živočichy. Příklady je však doložena pouze použitelnost jako analgetik. V uvedeném patentu není dokumentováno ani navrženo použití těchto látek pro snižování ukládání tuku nebo zvyšování rychlosti růstu u teplokrevných zvířat, zejména hospodářských a domácích zvířat, jako jsou vepři, drůbež, psi, ovce, kozy, kočky nebo hovězí dobytek.

Nyní se zjistilo, že rychlost růstu a potlačení ukládání tuku u zvířat chovaných na maso i jiných zvířat, jako jsou vepři, kuřata, krůty, domácí miláčkové, králíci, ovce, kozy a hovězí dobytek, včetně telat,·se.může zvýšit a účinnost využití potravy se tak může měřitelně zlepšit, když se těmto zvířatům orálně nebo parenterálně podá účinné množství sloučeniny, která je účinnou složkou prostředku podle vynálezu.

Předmětem vynálezu je prostředek .vhodný pro povzbuzení rychlosti růstu a pro snížení ukládání tuku u teplokrevných zvířat obsahující účinnou složku a vhodné nosiče a/nebo ředidla této účinné složky. Prostředek podle vynálezu se vyznačuje tím, že jeko účinnou složku obsahuje sloučeninu zvolenou ze souboru zahrnujícího sloučeniny obecného vzorce

X

ch-ch-nr₂r₃ kde

Z představuje vodík nebo halogen, jako například fluor, chlor, jod nebo brom,'ale a výhodou chlor nebo brom,

Z představuje vodík, skupinu NHg nebo skupinu obecného vzorce NHCOR^, kde aá dále uvedený význaa,

Z představuje vodík, helogen, jako například fluor, chlor, jod nebo brom, ale a výhodou chlor nabo bro· nebo hydroxyskupinu,

R, představuje vodík nebo alkylskupinu obsahující 1 až 4 atoay uhlíku,

Rg představuje vodík, alkylskupinu obsahující 1 až 4 atoay uhlíku a přímým nebo rozvětveným řetězcem nebo alkenylskupinu obsahující 3 až 4 atomy uhlíku,

Rj představuje vodík, alkylskupinu obsahující 1 až 6 atomů uhlíku a přímým nebo rozvětveným řetězcem, cykloalkylskupinu obsahující 3 až 6 atomů uhlíku, metoxypropylakupinu, alkenylskupinu obsahující 3 až 4 atomy uhlíku, fenyl-, 2-hydroxyetyl-, alfa,alfa-dimetylfenatyl- nebo benzylakupinu a kromě toho

Rg a R^ dohromady, apoleěně a atomem dusíku, ke kterému jsou vázány, mohou předatevovat morfolinoakupinu nebo Ν'-alkylpiperazinoskupinu obsahující 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém zbytku,

R^ představuje vodík, hydroxyskupinu nebo skupinu obecného vzorce ORg, kde Rg má dále uvedený význam,

Rj představuje vodík nebo alkylskupinu obsahující 1 až 4 atomy uhlíku a

Rg představuje alkylskupinu obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, a tou podmínkou, že když Rj představuje fenyl-, 2-hydroxyetyl-, alfa,alfa-dimatylfenetyl, cykloalkylskupinu ae 3 až 6 atomy uhlíku nebo metoxypropylakupinu, Rg představuje vodík; když Z představuje hydroxyskupinu, znamenají Z a Y atomy vodíku; a když Y představuje skupinu obecného vzorce NHCĎR^, kde R^ má shore uvedený význam, znamená alespoň jeden ze symbolů Z a Z atom vodíku a dála a tou podmínkou, že aleapoň jeden ze eubstituentů Z, Y a Z představuje jiný substituent než vodík, racemické směsi těchto sloučenin, jejich opticky aktivní izomery a jejich netoxické fermekologicky vhodné adiěné soli a kyselinami.

Prostředek podle vynálezu má a výhodou formu přísady do krmivá, injekčního preparátu nebo implantátu.

Přednostními sloučeninami pro použití ke shora uvedeným účelům, tj. jako účinné složky prostředku podle vynálezu, jsou sloučeniny ahora uvedeného obecného vzorce, ve kterých každý ze symbolů Z a Z představuje chlor nebo brom, X představuje vodík nebo skupinu HHg, R, představuje vodík nebo C, až alkylskupinu a R^ představuje hydroxyskupinu, a jejich netoxické farmakologicky vhodné ediční aoli a kyselinami.

Nejvýhodnějšími sloučeninami pro zvyšování rychlosti růstu zvířat produkujících maso a tím pro zlepšování účinnosti využití potravy jsou:

4-emino-alfe- [(terč.butylamino)metyl]-3,5-dichlorbenzylalkoholhydrochlorid, 4-emino-3,5-dibrom-alfa-f(diieopropylamino)metyljbenzylalkoholhydrochlorid, 4-amino-3,5-dichlor-alfa-[(diieopropylamino)metyl]benzylalkoholhydrochlorid, 4-amino-3,5-dibrom-elfa-[(terč.butylamino)metyl]benzylalkoholhydrochlorid, 4-amino-3,5-dichlor-alfa-[(metylamino)metyl]benzylalkoholhydrochlorid,

4-amino-3,5-dichlor-alfa-[(allylamino)metylj benzylalkohol,

4-amino-3-brom-alfa-[(terč.butylamino)metyl]-5-chlorbenzylalkoholhydrochlorid, alfa-(4-amino-3,5-dichlorfeny1)-4-morfolinetanolhydrochlorid, 4-emino-3-brom-alfa- [(terc.butylemino)metyl]-5-chlorbenzylalkoholhydrochlorld a alfa-[(terč.butylamino)metylj-3,5-dichlorbenzylalkoholhydrochlorid.

Sloučeniny dále uvedeného obecného vzorce I (Y představuje vodík) se mohou připravit kondenzací vhodné substituovaného atyrenoxidu s vhodné substituovaným aminem v přítomnosti inertního rozpouétédle, jeko nižšího alkoholu, při teploté věru nebo v blízkosti varu tohoto rozpouštědla podle následující rovnice:

kde

X a Z představují atomy halogenu,

R₂ a mají shora uvedený význam a

X je vodík.

Tak ee může 3,5-dichloretyrenoxid nechat reagovat s ekvimolárním množstvím nebo molárním přebytkem terc.butylamihu v etanolu při teploté refluxu po dobu aei 1 až asi 8 hodin, nebo tak dlouho, dokud není reakce v podstatě skončena. Získá ee požadovaný alfa-[(terc.butylamino)metyl]-3,5-dichlorbensylalkohol. Reakci ilustruje tato rovnice:

+ HgNC^-t

EtOH

-Cl

Cl

CH - CHg - NH - C^-t

OH

Takto získaný produkt ee může přečistit známými postupy, jako například chrometografií nebo překrystalováním jeho soli.

Takto sískané halogenovaná sloučenina sa Isoluje bídnými laboratorními postupy a pak se nechá reagovat a vhodným alkoholem pod atmosférou inertního plynu, jako dusíku, při teplotá od aai 0 do 5 °C. Takto slskaný produkt obecného vsoree I aa pak Isoluj· standardními laboratorními postupy a pak popřlpadá přečisti. Shora uvadaný postup reakci lsa graficky ilustrovat tímito rovnicemi:

kde

X, Y, Z, &₂, Kp a Rg mají shora uvadaný výsnam.

Sloučenina obecného vsorca I, kdo R^ představuje skupinu ORg sa mAia alternativní připravit tak, ie ae odpovídajíc! sloučenina obecného vsorca 1, kde R^ představuje hydroxyskupinu, rospustl v odpovídajícím alkoholu obecného vsorca r₆°h, kde

R_Ď mé shora uvedený výsnam, a vsniklý rostok se nasytí plynným chlorovodíkem. Reakční srnče ae pak mlohé při teplotč místnosti po dobu postačující pro praktické dovrienl reakce. Produkt ae isoluje standardními laboratorními postupy a je-li to íédoucl, přečisti se. Tuto reakci lsa ilustrovat následující rovnici.

kde

X, Y, Z, Rg, Rj a Rg mají shora uvedený význam.

Pod označením alfa,8lfa-dimetylfenetylskupina se v těchto podlahách s definici předmětu vynálezu rozumí struktura, kterou lze znázornit vzorcem

CH

Shora definované deriváty fenyletanolamínu a jejich adiční soli s kyselinami jsou při orálním podávání účinné pro povzbuzování rychlosti růstu a zlepšování účinnosti využití stravy shora uvedených zvířat obvykle v dávce asi 0,01 až 300 g na tunu krmivá.

Vzhledem k tomu, že účinné a přednostně používané koncentrace účinné složky v potravě poněkud kolísají u různých druhů shora uvedených zvířat, jsou tyto koncentrace pro každý druh zvířat uvedeny v následující tabulce X. Koncentrace je udávána v gramech na tunu krmivá. ,

Tabulka X

Sloučenina	Účinná koncentrace v krmivu (g/t)	>
Přednostní koncentrace (fi/t)	Druh zvířete
Sloučenina	0,1 až 300	1 až 200	vepř
obecného	0,1 až 200	1 až 100	ovce, koza
vzorce X	0,01 až 30	0,1 ež 10	kuře, králík
	0,01 až 50	0,1 až 10	krůta
	0,1 až 200	1 až 100	hovězí dobytek

Krmivové směsi pro zvířata, poskytující požadované povzbuzení růstu a zvýšení účinnosti využití potravy u shora uvedených zvířat, se mohou vyrobit smísením derivátu fenyletanolamínu nebo jeho adičnl soli nebo krmivové přísady obsahující tuto sloučeninu s takovým množstvím vhodného krmivá pro tato zvířata, aby se dosáhlo požadované koncentrace účinné sloučeniny v krmivu.

2364TI

Krmivové přísady ae mohou vyrobit smísením asi 75 eí 95 % hmotnostních derivátu fenyletanolaminu nebo Jeho adiSnl soli s asi 5 aá asi 25 % hmotnostními vhodného nosiče nebo ředidla. Jako nosiče, které jsou vhodné pro doplnénl účinných sloučenin ne krmivové přísady lze uvést moučku z vojtéčky, sojovou mouku, moučku z bavlnlkových semen, moučku se semen lnu, chlorid sodný, kukuřičnou mouku, třtinovou melasu, močovinu, kostní moučku, moučku z kukuřičných klasů spod. Nosič podporuje rovnoměrné rozděleni účinné přísady ve výsledné krmivové směsi, se kterou ee krmivová přísada misi. Plni tedy důležitou funkci tlm, Se zajiěluje řádná rozděleni účinné přísady v krmivu.

Když se krmivové přísady používá k finální úpravě krmivá avrchu, nosič rovněž pomáhá zajistit rovnoměrné rozděleni účinné látky na povrchu upraveného krmivá.

Pro parenterální podávání se může derivát fenyletanolaminu zpracovat do podoby pasty nebo pelety, která ae může podávat jako implantát, obvykle pod kůži na hlavě naho na uchu zvířata, u kterého se má dosáhnout povsbusenl růstu a/nebo zlepěenl účinnosti využiti krmivé.

V praxi sa při parenterálnlm podáváni obvykle zvířeti injikuje takové množství shora uvedeného derivátu fenyletanolaminu, aby zvíře obdrželo dávku 0,001 až 100 mg/kg tělesné hmotnosti účinné přísady. Přednostní úroveň dávky účinného derivátu fenyletanolaminu je pro vepře 0,01 až 50 mg/kg tělesné hmotnosti a pro hověsl dobytek 0,001 až 50 mg/kg tělesné hmotnosti. Přednostní úroveň dávky tohoto derivátu pro drůbež je asi 0,001 až 35 mg/kg tělesné hmotnosti a přednostní úroveň dávky popsaného derivátu fenyletanolaminu pro ovce a kozy je 0,001 až 40 mg/kg tělesné hmotnosti zvířete. Přednostní úroveň dávky pro králíky a domácí zvířata je 0,001 až 35 mg/kg tělesné hmotnosti zvířete.

Pastovité přípravky se mohou připravit dispergováním účinného derivátu fenyletenolaminu ve farmaceuticky vhodném oleji, jako v podzemnlcovém oleji, sezamovém oleji, kukuřičném oleji apod.

Pelety obsahující účinnou koncentraci fanyletanolaminového derivátu se mohou připravit smísením této složky s ředidlem, jako uhlovodíkovým voskem, biodegradovatelnými polymery, karnubovým voskem apod. Pro zlepěenl peletizačnlho postupu se může popřípadě přidat mazadlo, jako atearát hořečnatý nebo stearát vápenatý.

Je samozřejmé, že zvířeti se může pro dosaženi požadované úrovně dávky, která zajisti zvýěenou rychlost růstu a/nebo zlepěenou účinnost využiti krmivá, podat vlče než jedna peleta. Sále se zjistilo, že se zvířatům rovněž mohou zavádět přídavné implantáty periodicky v průběhu doby oěetřovánl, aby sa udržela vhodná rychlost uvolňováni účinné látky v těle zvířete.

Kromě toho, že sloučeniny podle vynálezu povzbuzuji růst a zlepěujl účinnost využiti potravy u zvířat produkujících maso, mají jeStě přídavnou výhodu, že při zvolené úrovni dávkováni potlačuji u těchto zvířat ukládáni tuku. Tato biologická odezva má podstatnou výhodu pro pěstitele drůbeže a vepřů, poněvadž při podávání shora uvedených sloučenin ve vhodných dávkách se sískajl jateční zvířata s libověJělm masem, sa které pletl masný průmysl najvyěěl ceny.

Vynález poskytuje různé výhody i chovatelům domácích miláčků nebo veterinářům, kteří a· snaží zbavit domácí zvířata nežádoucího tuku. Pěstitelé drůbeže a vepřového dobytka dosáhnou sa použiti metody podle předloženého vynálezu zvýšených přírůstků libového masa, sa které pak při výkupu obdrží vyžil cenu. S překvapením se rovněž sjistilo, ža když se · sloučeniny podle vynálezu podávají ve svolených dávkách vepřovému dobytku nebo drůbeži, dosáhne ee rovněž podstatného svýženl účinnosti výkrmu a povsbusenl rychlosti růstu.

Následující příklady blité objasňují vynález. Příklady nají pouze Ilustrativní charakter, ale rozsah vynálezu v žádném smíru neomezují.

Přikladl

Hodnocení zkoušených sloučenin, jakožto promotorů růstu zvířat

Na pokus se použije samiček myší CFL (Carworth Perme). MySi o stáří Šesti týdnů se umístí po deseti v klecích v klimatizované místnosti (22,2 až 24,4 °C) s automaticky regulovaným osvítlením - 14 hodin zapnuto, ,0 hodin vypnuto. Jako základního krmivá se při tichto pokusech použije laboratorní stravy Purina Laboratory Chow (jejíž složení je uvedeno dále), která se myiím poskytuje podle chuti bez omezení. Kovniž přívod vody se myiím neomezuje.

Třináct dnů po umístinl v klecích se desetičlenná skupiny myíí zváží β myii se urči podle náhodného klíče ne různé pokusy. Koncentrace různých sloučenin ve strevi je uvedena v následujících tabulkách. Po daliích dvanácti dnech se myii opit. zváží a pokus se ukončí. Zkuiební dáte jsou uvedena v následující tabulce II e jsou vyjádřena jako percentuální přírůstek ve srovnání s kontrolní skupinou. Strava použitá pro laboratorní myii, ke které se přidávají účinné sloučeniny (purine Laboratory Chow) mé následující složení:

Strava

Zaručené složení surová bílkovina ne méni než surový tuk ne méni než surová buničina ne více než popel ne více než

23,0 %

4,5 « 6,0 % 9,0 %

Složky

Mesokostní moučka, sušeni odstředěni mliko, mouka z pieničných klíčků, rybí moučka, moučka ze zvířecích jater, sušená buničina z cukrovky, mletá extrudovaná kukuřice, ovesné krupky, sojová mouka, moučka ze sušené vojtiiky, třtinová melase, živočišný tuk konzervovaný BMA, přísadě vitamínu B, ₂, panfotenát vápenatý, cholinchlorid, kyselina listová, riboflavinová přísada, suiené pivní kvasnice, tiamin, niecin, přísadě vitamínu A, L-aktivovený rostlinný sterol, přísada vitamínu S, uhličitan vápenatý, střední fosforečnan vápenatý, jodovaná sůl, citran železitoamónný, oxid železa, oxid manganatý, uhličitan kobaltnatý, oxid méSnetý, oxid zinečnatý.

2ΜΠ

Tabulka II

Hodnocení skoulených sloučenin jako promotorů růstu svítat

Dávka	Počáteční hmotnost myči (<)	Konečná hmotnost myči (<)	Přírůstek <«>	Přírůstek vshladem ka kontrolním mýlím (»>
4-amino-alfa-
- L(t are. buty 1-
aminometyl)- -3,5-dichlor-
bensylalkohol-
hydrochlorld
Obsah va strav!
(ppn)
0	23,46	24,67	1,21
	23,46	24,49	1,03
	22,79	24,62	1,83
	24,10	25,98	1,88
	24,23	25,52	1,29
	23,63	24,93	1,30
	23,33	24,76	1.43
	22,75	23,86	1,11
Průměrná hod-
nota kontrol-
ní skupiny	23,47	24,85	1.39
50	22,95	25,63	2,68
	23,91	26,14	2,23
	24,26 ,	26,30	2,04 .
Průměr	23,71	26,02	2,32	+66,9
100	23,50	25,39	1,89
	23,80	26,04	2,24
	23,00	25,65	2,65
Průměr	23,43	25,69	2,26	+62,6
200	23,03	24,80	1,77
	24,50	26,12	1,62
	23,08	25,04	1,96
Průměr	23,54	25,32	1,78	+28,1

Shora popsaný postup se opakuje za použiti různých promotorů růstu podle vynálezu. Při každém pokusu se použije kontrolních zvířat. Dvanáct dnů po zahájeni zkoušky se zvířata zváží a zkoušky se skonči. Výsledky testů jsou uvedeny v následující tabulce 111, jakožto hmotnostní přírůstek, každé zkouSené skupiny a percentuální přírůstek zkoušené skupiny vzhledem ke kontrolní skupinš myši.

Tabulka 111

Hodnocení zkoušených sloučenin jako promotorů růstu zvířat

Sloučenina	Dávka [ppm]	Hmotnostní přírůstek l«]	Percentuální přírůstek vzhledem ke kontrolní skupinš [56 ]
4-amino-3,5-dibrom-alfa[(terč.butylamino)-metyl]benzylalkoholhydrochlorid	400	16,5	+22,2
	200	20,4	+51 ,1
	100	22,9	+69,0
	50	23,3	+72,6
4-araino-3,5-dibrom-alfa-[(diisopropylamino)-	200	20,2	+46,4
-metyl]benzylalkoholhydrochlorid	100	16,9	+22,5
p-amino-alfa-[(dimetylamino)metyl]-	200	17,6	+28,3
benzylalkohol	100	1 5,6	+13,0
p-amino-alfa-[(diisopropylamino)metyl]-	200	16,5	+18,7
benzylalkoholhydrochlorid	100	14,2	+ 2,2
4-amino-3,5-dichlor-alfa-[(dimetylamlno)metylj benzylalkoholhydrochlorid	100	18,4	+ 7,6
4-amino-3,5-dichlor-alfa-[(diisopropylamino)-	200	23,9	+66,0
metyl]benzylalkoholhydrochlorid	100	21,3	+47,9
4-amino-3,5-dichlor-alfa- [(cyklohexylamino)-	200	’9,3	+48,5
metyl]benzylalkoholhydrochlorid	100	16,3	+25,4
p-amino-alfa- [(terc.butylamino)metyl]-	200	19,6	+88,5
benzylalkohol	100	18,2	+75,0
	50	17,9	+72,1
	25	13,6	+30,8
4-amino-3,5-dichlor-alfa-[(metylamino)metyl]-	200	15,6	+54,5
benzylalkoholhydrochlorid	100	18,9	♦87,1
p-amino-alfa- [(metylamino)metyl]benzylalkoholhydrochlorid	100	14,8	+18,4
alfa-(4-amino-3,5-dichlorfenyl)-4-morfolin-	200	15,9	+34,7
ethanolhydrochlorid	100	14,0	+18,6
4-amino-alfa-[(sek.butylamino)metyll-3,5-dichlorbenzylelkohol	200	13,2	+16,8

Percentuální přírůstek vzhledem ke kontrolní skupiná

SlouSenina

Dávka [pp«]

Hmotnostní přírůstek [β]

4-amino-3,5-dichlor-alfe- [(3-metoxypropyl)-	200	'5,4	+23,2
amino]metylbenzylalkohol	100	23,0	+84,0
4-amino-3,5-dichlor-alf a- [(diallyamino)metyl? -	200	'7,4	+39,2
bensylalkoholhydrochlorid	100	'8,4	+47,2
4-amlno-3,5-dichlor-alfe-[(bensylamino)-
metyí]benzylalkoholhydrochlorid	200	10,6	+'9,'
4-amino-alfa-£( bu ty lamino )metyl] -3 , 5-dichlorbensylalkohol	100	14,6	+64,0
4-amlno-3,5-dichlor-alf a- [(4-metyl-1 -	200	9,4	+ 5,6
-piperasinyl)metyl]bensylelkohol	100	9,5	+ 6,7
4-amino-3,5-dichlor-alfa-[(isopropy lamino)-	200	'3,1	+26,0
metyl]bensylalkohol	100	18,9	+81,7
4-amino-alfa-(aminometyl)-3,5-dichlor-
bensylalkoholhydrochlorid	100	'3,4	+19,0
4-amino-3,5-dichlor-alfa-[(hexylamino)metyl]bensylalkohol	200	16,8	+15,9
100	19,2	+32,8
alfa- [(terc.butylamino)metyl]-3,5-dichlor-	200	'9,3	+33,1
bensylelkoholhydrochlorid	100	20,2	+39,3
4-amino-3,5-dichlor-alfa-[(dietylamino)-
metyl]bensylalkoholhydrochlorid	100 Λ	'7,5	+20,7
alfa- [(allylamlno)metyl] -4-amino-3 , 5-di-	200	16,8	+118,2
chlorbensylalkohol	,00	'7,1	+122,1
4-amino-alfa-(anilinomety1)-3,5-ďi chlor-	200	20,7	+25,5
bensylalkohol	100	'7,5	+ 6,1
4-amino-alfa-[1-terč.butylamino)etyl] -3,5-	200	22,7	+37,6
dichlorbenzylalkoholhydrochlorld	,00	23,8	+44,5
4-amino-3-brom-alfa-[(terč.butylamino)-	200	18,5	+60,9
aetyl]-5-chlorbensylalkoholhydrochlorid	100	'9,5	+69,6
alfa-[(terč.butylamino)mety l] -m-hydroxy-	200	'5,8	+ 9,0
bensylalkoholhydrochlorid	10Ó	'9,9	+37,2
alfa- [(Isopropy lamino )mety l] -a-hydroxy-	400	-	+54,4
bensylalkoholhydrochlorid	200	-	+53,0
	,00	-	+39,7

η

Sloučenina	Dávka [ppm]	Hmotnostní přírůstek [d	Percentuální přírůstek vzhledem ke kontrolní skupině [%]
alfa-[(smi no)metyl]-m-hydroxybenzylalko-	200		+ 4,4
holhydrochlorid	100	-	+30,7
4~amino-N-terc.butyl-3,5-dichlor-beta-	200	18,8	+37,2
-metojcyfenetylhydrochlorid	50	21 ,6	+57,7

Příklad 2

Hodnocení sloučenin jako promotorů růstu zvířat r

Pro hodnocení se použije postupu popsaného v příkladě 1, Strava je stejná jako v tomto příkladě a výsledky jsou vyjádřeny jako percentuální přírůstky ve srovnání s kontrolními zvířaty.

Výsledky jsou uvedeny v tabulce IV.

Tabulka IV

Hodnocení akouěených sloučenin jako promotorů růstu zvířat

Dávka	Počáteční hmotnost myěi (g)	Konečná hmotnost mySi (g)	Přírůstek (g)	Percentuální přírůstek vzhledem ke kontrolním myším (%)
4-amino-álfa-(terč.buty1-
arainomety1)-3,5-dichlor-
benzylalkoholhydrochlorid
Obseh ve stravě (ppm)
0	24,49	25,17	0,68
	24,25	26,06	1 ,81
	23,65	25,43	1 ,78
	22,83	24,33	1 ,50
	24,39	25,59	1 ,20
	24,36	26,06	1,70
	23,11	24,50	1,39
	23,54	24,82	1 ,28
Průměrná hodnota kontrolní
skupiny	23,83	25,25	1 ,42
200	23,46	25,49	2,03
	23,68	25,97	2,37
	23,56	25,40	1,84
Průměr	23,57	25,62	2,05	+44,4

Příklad 3

Hodnocení skoulených sloučenin jako krmivových přísad pro povzbuzení rychlosti rAetu drůbeže

Jednodenní kuřata (Hubbard X Hubbard Crossbred Chicks) se podle náhodného klíče rozdílí do ohrádek vždy po 10 kuřatech (5 samečků a 5 samiček).

Osmi ohrádek s kuřaty se používá jako kontrolních skupin, kterým se nepodává žádná účinná látka a pro každou úroveň dávky promotoru růstu se používá čtyř ohrádek s kuřatyDoba pokusu je 28 dnů.

Kontrolní zvířata dostávají neupravenou stravu Broiler Retion No. 453 (složení viz dále) a vodu ad libitum. Oletřoveným kuřatům se podává stejná krmivo obsahující skoulenou látku v množství uvedeném dále a vodu rovngž ad libitum. Hmotnost kuřat se určuje na počátku a po skončení pokusu. Rovngž se určí hmotnostní přírůstek a množství zkonzumovaného krmivá. Získaná data se zprůmgrují a jsou sumárng uvedena v následující tabulce V, kde jsou uvedeny hodnoty percentuálního zlepžení hmotnostního přírůstku a hodnoty pomgru krmivo/hmotnostní přírůstek.

Složka

Obsah (9 hmotnosti) mletá kukuřice žluté zralosti sojová olejovitá mouka (49 *) rybí moučka ze sleSů (60 %} kukuřičná škrobová mouka (60 %) moučka ze sugené vojtlžky (17 %) stabilizovaný tuk střední fosforečnan vápenatý mletý vápenec chlorid sodný srnče stopových prvků vitaminový premix ⁺⁺

53,45

28,00

5,00

2,00

4,00

1,20

0,50

0,30

0,05

0,50

Smis stopových prvků (%),

100,00

0,5 kg/t poskytuje (ppm)

mangan	12,50
železo	6,00
zinek	5,00
mé3	0,65
jod	0,35
kobalt	0,25
vápník minimální	15,30
vápník maximální	17,35

62,5

30,0

25,0

3.25 1,75

1.25

Vitamínový Prémii na 1 tunu	Navážka v gramech
DL metionin	453,6
BHT (butylovený hydroxytoluen)	113,6
vitamin A (30 OOO^Ug/g)	100,0
vitamin Dy (200 000 /Ug/g)	5,0
vitamin E (44 150,ug/kg)	45,4
Kiboflevin	4,0
Niacinamid	25,0
Tabulka V	\
Střední hmotnostní přírůstek a účinnost krmivá	u kontrolních kuřat a kuřat oSetřených
zku&ební látkou - třináctidenní zkouSka

Podávaná zkouSená látka	Obsah ve stravS (ppm)	Střední přírůstek Cg)	Percentuální přírůstek vzhledem ke kontrolním kuřatům (%)	Krmivo /pří- růstek	ZlepSení oproti kontrolním kuřatům (%)
Kontrolní pokus	0	266,5	-	1,40	-
4-amino- ot[( t er c. bu ty lamino) -	0,3	271,8	+2,0	1,40	0
metyl]-3,5-dichlorbenzylalkohol	0,6	274,3 .	„ ,,, +2,9	1 ,38	+1,4
	1,25	259,9	-2,5	1,41	-0,7
	2,5	260,8	-2,1	’ .39	+0,7
	5,0	251,9	-5,5 >	1,40	0
4-amino-3,5-dibrom-c<ý [(terč. -	0,3 ,	270,8	+’Ί	1 ,40	0
butylemino)metyl]benzylelko-	0,6	271 ,8	+2,0	1,38	+1,4
holhydrochlorid	'.25	267,5	+0,4	1,39	+0,7
	2,5	265,2	-0,5	1 ,38	+1,4
	5,0	270,3	+1,4	1,37	+2,1

236477 14

P ř í k 1 β a 4

Hodnocení zkouiených sloučenin jako antillpogenních činidel - zkouSky na myiích

Na pokus se použije samiček myií CFL (Carworth Farma). Myči o stáří Šesti týdnů se umístí po deseti v klecích v klimatizovaná místnosti (22,2 až 24,4 °C) s automaticky regulovaným osvitlením - 14 hodin sepnuto, 10 hodin vypnuto. Jako základního krmivá se při tichto pokusech použije laboratorní stravy Purina Laboretory Chow (jejíž složení je uvedeno dále), která ee myiím poskytuje podle chuti bez omezení. RovnSž přívod vody se myiím neomezuje. Strava použitá pro laboratorní mySi, ke která ee přidávají účinná sloučeniny (Purina Laboretory Chow) má následující složení:

Strava

Zaručená složení: surová bílkovina ne mánS než 23,0 % surový tuk ne mánS než 4,5 % surová bunlčina ne více než 6,0 * popel ne více než 9,0 *

Složky

Uaaokoetní moučka, aulená odetřediná mléko, mouka s pieničných klíčků, rybí moučka, moučka se zvířecích jater,.suiená buničina s cukrovky, mletá extrudovaná kukuřice, ovesné krupky, sojová mouka, moučka se suiená vojtiiky, třtinová melasa, živočiiný tuk konzervovaný BHA, přísada vitamínu B₁₂, pantotenát vápenatý, cholinchlorid, kyselina listová, riboflavinová přísada, suiené pivní kvasnice, tiamin, nlacin, přlaeda vitamínu A, D-aktivovaný rostlinný sterol, přísada vitaminu E, uhličitan vápenatý, střední fosforečnan vápenatý, jodovaná sůl, citran želesitoemonný, oxid železa, oxid manganatý, uhličitan kobaltnatý, oxid mi&nstý, oxid zinečnatý.

Třináct dnů po umlstiní v klecích ee desetičlenné skupiny myií sváží a myli se určí podle náhodného klíče na různá pokusy. Koncentrace různých sloučenin ve etravS je uvedena v následujících tabulkách. Po dalBích dvanácti dnech ee myii opit sváží a pokus se ukončí. Při každá skouice ee užije alespoň tří klecí (30 mySí) jako kontrolních svířat. Zkuiební data jeou uvedena v tabulce VI e jsou vyjádřena jako percentuální podíl, tilesná hmotnosti tvořený tukem, percentuální zrnina množství tčlesného tuku ve srovnání e kontrolními zvířaty a jako percentuální hmotnostní přírůstek v gramech vstažený na myi. / > o ti p > *3 co tf

- >

o (i co

Λ .

V δ

P H ti

O ·Η >>

-μ a *»

M «

CO ti *<

o m o * — co

CM <*> O V- V- (M

I t I

I

X» CQ ti o

H CO fi Ή 4) P Ό «—I O o *> a b P 42 »

OP íft ► a

•rl I) ® P>b 44

X

P Φ co p g o co ·> 2 <3 « P b « Q Ή P S *4 N a o. >

XB 4» a β co b ti o >Φ X> ti *-*

O p to u\ ic\ <n o o σ> σ» oj ir\ rx m m co v * * * · «, ·, «- CM CM ·“ —

1Λ kO ΙΛ lí> Ý <M CM ai CM CM tf\ irt m σ\ σ\ cm — — O ·< <n m — <\T C\T

ΙΛ \0 ΙΛ CM CM CM

Hodnocení antilipogenního účinku a účinku povzbuzujícího růst zvířat na myčích a p ti >3 « b ® O O >2 p ti *>

a xe p «3 *> 2 £ o. S _Λ 3 h o « a x>> 3

P o P «Η 44 4> *J N >o a O O « ťb a ti ► O s a

P o. β e>

► «

S

O

O ^5 f- X ΙΛ .Χ m m m <n n CJ (Μ ΛΙ M (M

O O O O O kx m <n m <*>

<*·» m m N cm n

200 30 23,5 25,3 1,8 10,50 -12,13

400 30 23,4 24,9 1,4 9,10 -23,80

236477 16

Určování podílu tělesné hmotnosti tvořeného tukem

A) Příprava trupů

Z každé myši se vyjme žaludek a střeva. Všechny ostatní části těla, včetně kůže a kožešiny se ponechají neporušení. Každá klec s myšmi (10) se sváží a vloží do 1 000 ml kádinky a 30 minut se autoklávuje při 120 °C (103,06 kPe). Trupy s každé klece sa pak smísí a homogenižují. Homogenát ee zváží a odeberou se z něho duplicitně pětigramové vzorky pro analýzu,

B) Analýza tuku

Ke každému pětigramovému vzorku homogenátu získaného ve stupni A se přidá 15 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové a směa se dobře promísl. Vzorky se zahřívají 2 hodiny, na vodní lázni o teplotě 84 °C. Tuk se extrahuje 30 ml petroléteru (dvakrát 15 ml petroláteru). Směs a petrqláteřem se dobře promíaí v mixéru Vortex. Vodná vrstva ae oddělí od organické vrstvy nízkootáčkovým odstřelováním a petroléterová vrstva (obsahující tuk) se převede do zvážených 30ml kádinek, Po odpaření do sucha se kádinky obsahující tuk znovu zváží, aby se určilo množství tuku v gramech na 5 gramů hoefogenátu. Percentuální obsah tuku v trupu se vypočítá podle tohoto vzorce:

[obsah tuku ve vzorku (g)]. [celkové množe ty í homogenátu (g)J percentuální obsah tuku v trupu (%) = ¹⁰⁰ [navážka vzorku (g)J . [hmotnost myších trupů (g)

Příklad 5

Antilipogenní hodnocení zkoušených sloučenin, studie na myších

Samičky CPI myší, 55 dnů staré, sa rozváží do skupin po 10 a umístí v klecích tak, aby hmotnostní rozdíl myší v jednotlivých klecích byl co nejmenií. Zkoušky se provádějí s jednotlivými klecemi podle nepravidelného klíče.

Každá zkouěkB se třikrát opakuje, tj. vidy se použije tří klecí po 10 myších. Pro kontrolní účely slouží 10 klecí po 10 myších. Zkoušená látky ee smísí se stravou v dála uvedené dávce. Strava a voda se během dvanáctidennl zkušební periody poskytuje myším, bez omezení (ad libitum). Rozsypané krmivo sa během doby trvání testu sbírá. Ha konci zkušebního období ae zváží sebraná krmivo a v každé zkoušce ae určí střední konzumace krmivá vztažená ne klec a, deseti myšmi. Celá skupina deseti myší se najednou sváží a určí se hmotnostní přírůstek. Myši se usmrtí zlomením vazu. Každé myši sa odejme pravý dšložnl tukový polštář. Tuková polštáře deseti myší z jedná klece se vidy zváží najednou.

Aby se stanovila korelace mezi percentuálním snížením hmotnosti tukových polštářů ošetřovaných zvířat, určí ae u zvířat z několika ošetřovaných skupin celkový obsah tělesného tuku za použití metody stanovení tělesného tuku popsané v příkladě 5. Získaná data jaou uvedena v tabulce VII u těch skupin, u kterých bylo toto určování prováděno. Z percentuálního snížení hmotnosti tukových polštářů a z určení celkového obsahu tuku v trupu myší u zkoušených skupin je zřejmá, že snížení hmotnosti tukových polštářů u zvířat obvykle ukazuje na snížení obsahu tělesného tuku u ošetřovaných zvířat.

Tabulka VII

Antilipogenní hodnocení zkoušených sloučenin - studie na myších

Sloučenina	Dávka (ppm)	Percentuální snížení hmotnosti tukových polštářů s ohledem na kontrolní myši (»)	Percentuální snížení obsahu tšlesného tuku vzhledem ke kontrolním myším (%)
4~amíno-3, í-dibrom-a- [(terč. butylamino )metyl] -	400	-21,4	-14,6
benzylalkoholhydrochlořid	200	-27,5⁺	-18,4⁺
	100	-13,9⁺	- 5,3⁺
4-amino~3,5-dibrom-a“[(diisopropylaDiino)metyl]-	- 200	-11,1	- 9,4
benzylalkoholhydrochlořid
4-emino-«~f( terč. butylamino )metyl] -3,5-dichlor-	400	-50,0	-23,8
benzylalkoholhydrochlorid	200	-28,1	-12,1
	100	-37,9	-14,4
4-amino-3,5-dichlor-#-f(metylamino)metyl]-	200	-14,7	- 9,9
benzylalkoholhydrochlořid	100	- 8,8	-11,5
4-amino-3,5-dichlor- a-[(dietyl)metyl] benzy lei-	200	-64,7
koholhydrochlorid	100	-41,2
4-araino-«-r(sek.butylamino)metylJ 3,5-dichlor-	200	-56,2	-36,3
benzylelkohol	100	-18,2	-19,3
4-amino-3,5-dichlor-a -[(diallylaminojraetyl] -	200	-12,0
benzylalkoholhydrochlořid
4-amino-3,5-dichlor- a-[(benzylamino)metylj -	200	-17,7	- 5,4
benzylalkoholhydrochlořid	100	-21,1	- 1,7
4-araino- «-[(butylamino)metyl] -3,5-díchlor	200	-21,54	-16,78
benzylalkohol	100	-24,7	-13,08
4-amino-3) 5-di chlor- a -[(isopropylamino)metylj -	200	-50,2	-25,5
benzylalkohol	100	-36,9	-20,4
a-/ sllylamino )metyl]-4-amino-3,5-di chlor-	200	-16,5
benzylalkohol	100	-18,3
4-amino-«-[l -(terč. butylamino )etylj -3,5-	100	-18,8
-di chlorbenzylalkoholhydrochlorid
«-{(terc.butylemino)metyl) -3,5-dichlor-	200	-22,5
benzylalkoholhydrochlořid	100	-14,8

Sloučenina	Dávka (ppm)	Percentuální snížení hmotnosti tukových polštářů s ohledem na kontrolní myši (»)	Percentuální snížení obsahu tělesného tuku vzhledem ke kontrolním myším (%)

4-emÍno-3-brom-« -£(terc.butylamino)metyl] -	200	-17,8
-5-chlorbenzylelkoholhydrochlorid	,00	-18,7
m-hydroxy-a -[(isopropylamino)metyl] benzyl-	400	-19,8
alkohol	200	-26,2
	100	- 7,5
4-emino-K-terc.butyl-3,5-dichlorfenetylaminhydrochlorid	50	-24,8
4-amino-3,5-dichlor-ůt- £(cyklopropylamino)-	100	-30,7
metyl]-benzylelkohol
4-£2-(terč.butylamino)-1-hydroxyetyl]-2 '-	200	- 6,7
-chloracetanilid	100	-12,1
4-smino-3 ,5-dichlor-st- [(cyklopentylamino)-	200	-24,5
metyl]benzylelkohol	50	- 4,7
4-amino-3,5-dichlor-a -£(/2-hydroxyetyl/amino)-	200	-15,2
metyl]benzylelkohol	50	- 7,4
4-emino-<*-[,( terč.butylamino)metyl] -3,5-dijod-	200	-32,6
benzylalkoholhydrochlorid	,00	-26,6
4-amiho-K-terc . butyl-3,5-dichlor-j3-metoxy-	200	-13,4
fenetylaminhydrochlorid	⁵⁰	-21,7

⁺ průměr ze dvou zkoušek

Příklad 7

Antilipogenní hodnocení zkoušených sloučenin, studie ne krysách

Používá se postupu a krmivé používaného pro vyhodnocování entilipogenního účinku zkoušených sloučenin na myších, popsaného v příkladu 1, a tím rozdílem, že doba ošetřování je 14 dnů a používá se 10 krys, umístěných v klecích vždy po jedné.

Percentuální podíl tělesné hmotnosti tvořený tukem ee určuje stejným způsobem jako v příkladě 4 pouze s tím rozdílem, že se před homogenizací krysích trupů odstraní z těl k&že a vnitřní orgány.

Výaledky této studie jsou uvedeny v tabulce VIII, která následuje.

XI) e * £83

OJ kf\ m -* mjI I I

M3 o ur\ r— + n oj cj

Hodnocení antilipogenního účinku a účinku na povzbuzení rychlosti růstu zkoučených sloučenin u krys

» e* * es

O O O) <O -< ΙΑ IA <

t- ΓΊ \O 01 <Q \O <*T t— t—' t— t—

Příklad 8

Vyhodnocování zkoušených sloučenin, jeko krmivových přišed pro povzbuzeni rychlosti růstu e zlepšeni účinnosti využití potravy u myši

Čtyři týdny steré samičky krys (rozmezí 5 g) (Charles River Breeding Laboratories, Wilmington, Massachusetts) se umístí po dvou v klecích umístěných v klimatizované místnosti (22,2 až 24,4 °C) s automaticky regulovaným osvětlením - 14 hodin zapnuto, 10 hodin vypnuto Jeko základního krmivá se použije při tšchto pokusech laboratorní stravy, Purina Laboratory Chow, která se krysám poskytuje podle chuti bez omezení. Ani přívod vody ze myším neomezuje.

Čtyři dny po umístěni v klecích se zvířata sváži a rozdělí do zkušebních skupin tek, aby rozdíly ve hmotnosti skupin byly co nejasněl. V každé ošetřované skupině je 10 krys. Zkoušené látky se podávají ve střevě, kde jsou obsaženy v koncentraci 2 ppm, 10 ppm a 50 ppm, po dobu 12,5 týdne. Zvířata se každý týden váží a spotřeba se opraví podle množství, které zvířata rozsypou. Množství rozsypaného krmivá se denně zaznamenává.

Výsledky zkoušení jsou uvedeny v tabulce IX, která následuje.

Tabulka IX

Vyhodnocováni zkoušených sloučenin, jakožto krmivových přísad pro povzbuzeni rychlosti růstu a pro zleplení účinnosti využiti krmivá u myši

Zkoužená sloučenina	Dávka (ppm)	Přírůstek ⁸⁵(g)	Spotřeba krmivá ^b) (g)	Poměr krmiva/přírůstek (percentuální zlepšeni vzhledem ke kontrolním krysám (»)
Kontrolní pokus		157	1 304	8,31
4-amino- Db- (terč. butylaminometyl) -	2	178 (+13,4*)	1 443 (+10,7«) 8,11 (+2,4»)
-3,5-dichlorbenzylalkoholhydrochlorid	10	186 (+18,5»)	1 467 (+11 ,	5») 7,89 (+5,1»)
	50	175 (+11,5»)	1 394 (+ 6,	9») 7,97 (+4,1»)
4-amino-3,5-dibrom-ft- [(terč. butylamino)	- 2	164 (+4,5»)	1 362 (+4,5*) 8,3 (0,1»)
metyl] benzylalkoholhydrochlorid	10	185 (+7,8»)	1 459 (+11,	9») 7,89 (+5,1«)
	50	184 í+17,2*)	1 416 (+8,6») 7,70 (+7,3»)

Uvedené hodnoty představuji průměrný přírůstek v gramech, vztažený na jednu krysu, aa celou dobu pokusu.

^b) Uvedené hodnoty představuji průměrnou spotřebu krmivá, vztaženou ne jednu krysu, za celou dobu pokusu.

Příklad 9

0(.- [(terč. bu ty lamino) mety l] -3,5-di chlorbenzy lalkoholhydrochlorid

Roztok obsahující 3,5 g 3,5-dichloretyrenoxidu v 50 ml absolutního etanolu a 20 ml terc.butylaminu se mírni vaří pod zpětným chladiiem po dobu 8 hodin a pak se smis odpaří do sucha. Vzniklý čirý žlutý sirup sa rozpustí v 75 ml etanolu a 25 ml vody, rostok ae ochladí na 5 °C a okyselí 3N kyselinou chlorovodíkovou. Roztok ze odpaří za vakua do sucha á zbyli pevni bili litka ee překryzteluje z acetonu. Zláká ee 2,81 g látky o teploti tání 218 až 221 °C.

Analýza pro C^H^NOClgHCl:

vypočteno: 48,26 % C, 6,08 % H, 4,69 % H;

nelezeno: 48,49 % C, 6,17 % H, 4,66 % N.

Volná báze titulní sloučeniny ee získá neutralizací titulní sloučeniny vodným 10% hydroxidem sodným. Jiná soli volná báze ee pek získej! tak, že se na volnou bázi při shora uvedeném postupu (vodný etanol) působí příslušnými kyselinami, jako kyselinou sírovou, kyselinou ortofosforečnou, kyselinou dusičnou, kyselinou metansulfonovou, kyselinou toluensulfonovou a kyselinou pamoovou.

Intermediární 3,5-dichloretyrenoxid potřebný pro přípravu titulní sloučeniny ee připraví redukcí 28,4 g 3,5-dichlorfenacylbromidu ve 125 ml absolutního etanolu při 5 °C působením 8 g netriumborhydridu, který ee přidává po částech. Po skončení přidávání hydridů se reekční smis 16 hodin míchá při teploti okolí, které se dosáhne tím, že se postupné nechá přes noc roztát led v ledové lázni, do která byle původně reakční baňka ponořena. Přebytek hydridů se rozloží přídavkem 100 ml vody, vodná smis ee ochledl ne 5 °C a opatrné okyselí koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou na pH 3. Smis ee extrahuje 300 ml metylenchloridu, extrakt se vysuší síranem hořečnatým, přefiltruje e odpaří ze vakua do sucha. Získá se epoxid ve formě čirého žlutého oleje.

Intermediární fenecylbromid pro shora uvedený styrenoxid se připraví bromecí 10 g 3,5-dichloracetofenonu ve emisi 50 ml chloroformu a 50 ml etylacetátu pomocí 23,6 g bromidu miňnetiho. Smis ee vaří 2,5 hodiny pod zpětným chladičem a pak se ochladl na teplotu místnosti. Pak se smis 16 hodin míchá při teploti místnosti, chladí se 2 hodiny ledem a přefiltruje se. Filtrační koláč se promyje 50 ml chloroformu. Spojená filtráty se dvakrát odbarví aktivním uhlím, přefiltrují e odpaří do sucha za vakua. Získá ee oranžový olej tvořený 3,5-dichlorofenecylbromidem.

Přikladlo

Následující 3,5-dichlorfenyl sloučeniny (A), které ee podobají titulní sloučenině z příkladu 9, se připraví způsobem popsaným v příkladu 9 s tím rozdílem, že se místo terč.butylaminu použije aminů obecného vzorce r₂r₃nh kde

R₂ a Rj mají dále uvedený význam.

i

CH - CHg - KR₂®₃

Sloučenina	A
r₂	«3
1	B	H
2	H	ch₃
3	B	^C2^H5
4	H	i-C₃«7
5	H	ň-CjH?
6	H	n-C₆K,₃
7	H	cyklohexyl
8	H	ch₂-ch«ch₂
9	H	ch₂-ch«ch-ch₃
10	H	ch₂c»ch
11	H	fenyl
12	H	metoxypropyl
13	H	benzyl
14	ch₃	^CH3
15	^C2^H5	c₂h₅
16	CHgCH-CHg	CMgCH-CHg
17	i-C^	-ι-°Λ
18	CH₂-CH«CH₂	-Ch₂-CH>CH₂
19	H	cyklopropyl
20	-CHg-CHg-O-CHg-CHg-
21	H	n-butyl
22	H	0(0Η₃)₂-0Η₂-θ

Příklad Π ¢(- [(terč. butylamino) metyl] -3,5-dibrombenzy lalkoholhydrochlorid

Titulní sloučenina se připraví z 3,5-dibromatyrenoxidu stejným způsobem, jako je způsob popsaný v příkladu 9. Výchozí látky pro tento styrenoxld se připraví podobným způsobem z výchozího 3 '-5'-dibromecetofenonu.

Odpovídající (t-[ílsopropylamino)metyl]-3,5-dibrombenzylalkoholhydrochlorid se připraví tak, že se použije isopropylaminu místo terc.butyleminu.

Příklad 12 m-hydroxy-ít- r(isopropylamino)metyl] benzylelkoholhydrochlorid

Ve 135 ml 95% etanolu se 5 hodin za mícháni vaří pod zpětným chladičem 36,75 g m-hydroxyacetofenonu, 36,5 g benzylchloridu, 1,75 g jodidu draselného a 24,6 g uhličitanu draselného. Smés se ochladí a za vakua odpaří, aby se odstranil etanol, a přidá se 100 ml vody. Pak se směs extrahuje třikrát dietyléterem. Získá se 350 ml extraktu, který se promyje 50 ml vody, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2 x 50 ml), 50 ml vody a nakonec 50 ml nasyceného roztoku chloridu sodného. Filtrát se vysuěí síranem sodným a odpaří do sucha. Olej získaný jako zbytek se předestiluje.

Získá se 49,13 g m-benzyloxyacetofenonu o teplotě varu 145 bž 147 °C/26,7 Pa.

186 g tohoto acetofenonu se brómuje 349 g bromidu méňnatého ve směsi 1 litru chloroformu a 1,5 litru etanolu, která se zahřívá ne teplotu varu. Vzniklý bromovodík se odstraňuje proplachováním dusíkem. Po 4 hodinách se směs přefiltruje a filtrační koláč se promyje chloroformem (2 x 100 ml). Filtrát se za vakua odpaří. Získaný olej se rozpustí ve 200ml absolutního etanolu (2 x 50 ml) a vysuěí.

Získá se 64,28 g m-benzyloxyfenacylbromidu o teplotě tání 57 až 58 °C. Dalším chlazením filtrátu se získá 34 g produktu. Vzorek fenacylhromidu o hmotnosti 64 g se přidá k míchané smšsi obsahující 212 ml isopropylaminu ve 425 ml etanolu pod atmosférou dusíku při 5 °C. Teplota vzroste na 12 °C a získá se čirý roztok. Roztok se vlije na led (2 litry) obsahující 500 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové a 1 500 ml vody. Směs se míchá 20 minut, ipak se přefiltruje ε pevná látka sa promyje vodou. Po vysušení se získá 98,64 g produktu o teplotě tání 200 až 203 °C za rozkladu. Pevná látka se rozpustí ve 400 ml vroucího metanolu pod zpštným chladičem, přidá se 400 ml isopropylalkoholu a roztok se zkoncentruje na 400 ml.

Směs se ochladí a oddill se krystaly, které jsou tvořeny ketoaminem o teplotě táni 213 až 215 °C za rozkladu (54,36 g). Tato látka (16 g) se přidá ke 150 ml metanolu, který obsahuje 2 g 5% paladiovaného uhlí a smis ae hydrogenuje v Peerové bombě za přetlaku 288,5 kPa vodíku. Směs se přefiltruje a filtrát se odpaří. Zbytek se smíchá s 50 ml isopropylalkoholu a odpaří do sucha. Získá se sirup, který se mísí se 100 ml etanolu. Krystaly se oddělí, promyjí dietyléterem a vysuší. Získá se 10,77 g titulní sloučeniny o teplotě tání 129 až 132 °C.

Když se použije terc.butylaminu místo isopropylaminu, získá se m-hydroxy-flj-ftterc.butylemino)metyl]benzylalkoholhydrochlorid o teplotě tání 150 až 154 °C (rozklad). Když ae místo isopropylaminu použije diisopropyleuinu, benzylaminu nebo allylaminu, získá se hydrochlorid m-hydroxy-o(-t(diieopropylamino)metyl]benzylalkoholu, m-hydroxy-DÍ-f (benzylamino)metyl]benzylalkoholu nebo m-hydroxy-(t-[(sllylamino)metyl] benzylalkoholu.

PříklaaU

4-amino-o(,- f( terč. buty lamino) ne ty lj -3,5-dijodbenzylalkoholhydrochlorld

V 10 ml kyseliny octové se míchá 0,42 g p-emiho-flf- [(terč. buty lamino )metyl]-benzylalkoholu pod dusíkovou atmosférou a k roztoku se přidá 0,48 g Ν,Ν-dichlorbenzensulfonamidu ⁸ 0,6 g jodidu sodného a směs se míchá pod dusíkovou atmosférou 20 minut. Po 3 dnech ae smis vlije na led a alkalizuje se 50% vodným hydroxidem sodným. Směs se extrahuje metylenchloridem (3 x 25 ml) a chromatografuje na silikagelové desce ze použití systému obsahujícího 1 % hydroxidu amonného a 20 % metanolu v metylenchloridu. Získá se 0,22 g titulní sloučeniny. Reakce sa opakuje ve vitčím měřítku (8x) a eluovaný surový produkt se rozpustí ve 100 ml směsi etanolu a 10 ml vody, směs se promíchá a přidá ae 10% kyselina chlorovodíková až do dosažení pH 3.

Směs se za vakua odpaří do sucha. Přidá se isopropylalkohol a směs se odpaří do sucha. Postup se Opakuje dvakrát a zbytek ae nechá vykrystalovat ze směsi metanolu a isopropylalkoholu. Přitom ae postupuje tak, že aa nechá metanol odpařit až do vzniku krystalů (metanolu se použije pro rozpuštění surové látky před přidáním isopropylelkoholu). Po ochlazení se získají 2 g titulní sloučeniny o teplotě tání 187 °C ze rozkladu.

Analýza pro C, jClIgNgQ⁵ vypočteno: 29,02 % C, 2,86 % H, 5,64 % N;

nelezeno: 29,11 % C, 3,64 % H, 5,64 % N.

Příklad 14 «- [(terč.butylamino)metyl)-3,5-dlchlorbenzylelkoholhydrochlorid

V tomto příkladě je uveden alternativní poetup pro získání titulní sloučeniny e sloučenin popsaných v příkladu 9. 10 g 4-amino-(L-C(terc.butylamino)metyl]-3,5-dlchlorbenzylalkoholu se přidá ke 100 ml 50 až 52% kyseliny ortofoeforečné, směs se míchá β chladí ne 8 °C v ledové lázni a přidá se během 65 minut 2,77 g dusitanu sodného v 15 ml vody. Směs se napění. Tvorbě pěny se potlačuje silikonovou protipěnovou přísadou. Po minutách se směs přestane chladit e míchá ee další 2 hodiny. Pak ee směs vlije do směai ledu a vody a přidává se 50% vodný roztok hydroxidu sodného tak dlouho, dokud není směs alkalická.

Alkalická směs se extrahuje metylenchloridem (3x) za vzniku 200 ml roztoku, který se promyje 25 ml 2% roztoku hydroxidu sodného, vyeuěí síranem hořečnatým a odpaří za vakua do sucha za vzniku 9,13 g hnědého oleje. Během stání olej ztuhne a pak ee rozpustí ve 100 ml etanolu obsahujícího 10 ml vody. Roztok se okyselí ne pH 3 10% kyselinou chlorovodíkovou a,odpaří se do sucha. Ne zbytek se působí 50 ml isopropylelkoholu e vzniklá směs se odpaří do sucha. Tento postup se opakuje. Získá se iplnavi bílá pevná látka, která se rozpustí v metanolu. Roztok se odpaří ee vakua na sirup, který ee zředí 50 ml isopropylelkoholu a nechá stát. Krystaly, které vzniknou, se oddělí, promyjl lsopropylalkoholem a vyeuěí. Získá se 7,8 g titulní sloučeniny o teplotě tání 217 at 221 °C za rozkladu.

Sloučenina popsaná v příkladu 6 se připraví podobným způsobem. Deaminacl 4-emino-3,5-dibrom-ft-[(terc.butylamino)metyl3benzylalkoholu se získá 3,5-dibrom-j(-f(tere.butylsmino)metyl]benzylBlkohol o teplotě tání 249 až 251 °C (rozklad).

Při lc 1 a d 15 ¹

4-amino-3,5-dichlor-bete-metoxyfenetylaminhydrochlorid

Pod dusíkovou atmosférou se 11 g 4-amlno-<-£(terc.butylamino)metyl]-3,5-dichlorbenzylchloridu přidá k 75 ml metanolu o teplotě 0 °C. Po 20 minutách se chladicí lázeň odstaví e reakční směs se míchá při teplotě místnosti. Fo skončení reakce ae směs sa vakua odpaří do sucha., Zbytek se míchá v 75 ml vody a směs ae zalkalizuje 6M roztokem hydroxidu sodného a extrahuje ae metylenchloridem (3 x 50 ml). Organické fáse se vysuSÍ síranem hořečnatým a odpaří do sucha. Získá se oranžový olej. Olej se rozpustí ve 150 ml absolutního etenolu a roztok se okyselí roztokem chlorovodíku v isopropylalkoholu na pK 2. Hoztok se odpaří do sucha a zbytek se míchá v 75 ml etylecetátu. Po ochlassní se získá světle žlutá pevná látka, která se oddělí. Získá es 6,97 g titulní sloučeniny o teplotě tání 195 až 198 °C za rozkladu.

Podobně se ze použití etylelkoholu, isopropylalkoholu, n-butylalkoholu a n-hexylelkoholu získá odpovídající bete-etoxy-, beta-isopropoxy-, n-butoxy a n-hexyloxyfenetylaminhydrochlorid.

Přikladu

4-emino-<- L( terč.butylamino)metyl]-3,5-dichlorbenzylchlorid

Po dusíkovou atmosférou se 27,72 g 4-amino-Zť- [(terč. buty lamino) metyl] -3,5-dichlorbenzylalkoholu přidá ke 200 ml tionylchloridu ze míchání při 0 až 5 °C. Fo přidání celého množství se reakční směs 3 hodiny míchá při teplotě místnosti. Pak se směs za vakua odpaří do sucha. Získá se 37,34 g žluté pevné látky, které se použije v tom stavu,, v jakém je.

Příklad 17

Alternativní způsob přípravy 4-amino-3,5-dichlor-beta-metoxyfenetylaminhydrochloridu

100 ml metanolu a 10 g 4-amlno-K-[(terc.butylamino)metyl]-3,5-dichlorbenzylelkoholu se míchá v ledové lázni a do roztoku se uvádí plynný chlorovodík. Po nasycení roztoku se směs míchá jednu hodinu při teplotě místnosti a pak se odpaří do sucha. Pevná látka se pak míchá v etylecetátu. Titulní sloučenina se odfiltruje.

Claims

pRedmét vynálezu

1. Prostředek vhodný pro povzbuzení rychlosti růstu a pro snížení ukládání tuku u teplokrevných zvířat obsahující účinnou složku a vhodná nosiče a/nebo ředidle táto účinná složky, vyznačující se tím, že Jako účinnou složku obsahuje sloučeninu svolenou se souboru zahrnujícího sloučeniny obecného vzorce kde

X představuje vodík nebo halogen, jako například fluor, chlor, Jod nebo brom, s výhodou chlor nebo brom,

Y představuje vodík, skupinu NHg nebo NKCOR^,

Z představuje vodík, halogen, jako například fluor, chlor, jod nebo brom, s výhodou chlor nebo brom, nebo hydroxyskupinu,

R, představuje vodík nebo alkylakupinu obsahující 1 až 4 atomy uhlíku,

Rg předetavuje vodík, alkylekupinu obsahující 1 až 4 atomy uhlíku s přímým nebo rosvátveným řetězcem nebo alkenylskupinu obsahující 3 až 4 atomy uhlíku,

Rj představuje vodík, alkylskupinu obsahující 1 až 6 atomů uhlíku s přímým nebo rozvětveným řetězcem, cykloalkylskupinu obsahující 3 až 6 atomů uhlíku, mstoxypropylskupinu, alkenylskupinu obsahující 3 až 4 atomy uhlíku, fenyl-, 2-hydroxyetyl-, alfa,alfa-dimetylfenetyl- nebo benzylskupinu a kromě toho

Rg a Rj dohromady, společně a atomem dusíku, ke kterému jsou vázány, mohou představovat morfolinoskupinu nebo N'-alkylpiperezinoskupinu obsahující 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovám zbytku,

R^ představuje vodík, hydroxyskuplnu nebo skupinu obecného vzorce OR^, kde R má dále uvedený význam, &

R^ představuje vodík nebo alkylekupinu obsahující 1 až 4 atomy uhlíku e

Rg představuje alkylekupinu obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, s tou podmínkou, že když R^ představuje fenyl-, 2-hydroxystyl-, elfa,alfe-dimetylfenetyl-, cykloalkyl- skupinu se 3 až 6 atomy uhlíku nebo metoxypropylskupinu, Rg představuje vodík) když Z představuje hydroxyskupinu, znamenají X a Y atomy vodíku; a když Y představuje skupinu obeánéhq vsorce NHGOR^, kde Rj má shora uvedený význam, znamená alespoň jeden ze symbolů X e Z atom vodíku e dále e tou podmínkou, že alespoň jeden se symbolů X, Y e —·«

Z představuje Jiný subatituent než vodík, racemioké směsi těchto sloučenin, Jejich opticky aktivní izomery a jejich netoxická farmakologie ky vhodné adiční aoli a kyselinami.
2. Prostředek podle bodu 1, vyznačující se tím, ie mé formu přísady do krmivá, přičemž obsahuje 75 až 95 % hmotnostních účinné složky definované v bodé 1 a 5 až 25 % hmotnostních vhodného nosiče nebo ředidla.
3. Prostředek podle bodu 1, vyznačující se tím, že má formu injekčního preparátu.
4. Prostředek podle bodu 1 , vyznačující se tím, že má formu implantátu.