CS235340B2 - Způsob výroby derivátů ergopeptinu - Google Patents
Způsob výroby derivátů ergopeptinu Download PDFInfo
- Publication number
- CS235340B2 CS235340B2 CS629283A CS629283A CS235340B2 CS 235340 B2 CS235340 B2 CS 235340B2 CS 629283 A CS629283 A CS 629283A CS 629283 A CS629283 A CS 629283A CS 235340 B2 CS235340 B2 CS 235340B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- strain
- culture
- compounds
- group
- mycelium
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 11
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 27
- 150000003839 salts Chemical group 0.000 claims description 14
- 241000221751 Claviceps purpurea Species 0.000 claims description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 7
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 6
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 4
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 4
- DZLNHFMRPBPULJ-GSVOUGTGSA-N D-thioproline Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSCN1 DZLNHFMRPBPULJ-GSVOUGTGSA-N 0.000 claims description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 2
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 claims 1
- 239000012458 free base Substances 0.000 claims 1
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 claims 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 48
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 16
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 16
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 14
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 9
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 150000003797 alkaloid derivatives Chemical class 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 6
- OFKDAAIKGIBASY-VFGNJEKYSA-N ergotamine Chemical compound C([C@H]1C(=O)N2CCC[C@H]2[C@]2(O)O[C@@](C(N21)=O)(C)NC(=O)[C@H]1CN([C@H]2C(C3=CC=CC4=NC=C([C]34)C2)=C1)C)C1=CC=CC=C1 OFKDAAIKGIBASY-VFGNJEKYSA-N 0.000 description 6
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N Alumina Chemical class [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 5
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 5
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 5
- HEFIYUQVAZFDEE-MKTPKCENSA-N ergocristine Chemical compound C([C@H]1C(=O)N2CCC[C@H]2[C@]2(O)O[C@](C(N21)=O)(NC(=O)[C@@H]1C=C2C=3C=CC=C4NC=C(C=34)C[C@H]2N(C)C1)C(C)C)C1=CC=CC=C1 HEFIYUQVAZFDEE-MKTPKCENSA-N 0.000 description 5
- HEFIYUQVAZFDEE-UHFFFAOYSA-N ergocristinine Natural products N12C(=O)C(C(C)C)(NC(=O)C3C=C4C=5C=CC=C6NC=C(C=56)CC4N(C)C3)OC2(O)C2CCCN2C(=O)C1CC1=CC=CC=C1 HEFIYUQVAZFDEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 5
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 5
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960004943 ergotamine Drugs 0.000 description 4
- XCGSFFUVFURLIX-UHFFFAOYSA-N ergotaminine Natural products C1=C(C=2C=CC=C3NC=C(C=23)C2)C2N(C)CC1C(=O)NC(C(N12)=O)(C)OC1(O)C1CCCN1C(=O)C2CC1=CC=CC=C1 XCGSFFUVFURLIX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 4
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 3
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 3
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000003946 Prolactin Human genes 0.000 description 2
- 108010057464 Prolactin Proteins 0.000 description 2
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 2
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000005811 Viola adunca Nutrition 0.000 description 2
- 240000009038 Viola odorata Species 0.000 description 2
- 235000013487 Viola odorata Nutrition 0.000 description 2
- 235000002254 Viola papilionacea Nutrition 0.000 description 2
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 2
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- -1 carbon monosaccharide Chemical class 0.000 description 2
- 230000003727 cerebral blood flow Effects 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N dihydroxy(oxo)silane Chemical compound O[Si](O)=O IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N dopamine Chemical compound NCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003291 dopaminomimetic effect Effects 0.000 description 2
- HEFIYUQVAZFDEE-NASJTFDLSA-N ergocristinine Chemical compound C([C@H]1C(=O)N2CCC[C@H]2[C@]2(O)O[C@](C(N21)=O)(NC(=O)[C@H]1C=C2C=3C=CC=C4NC=C(C=34)C[C@H]2N(C)C1)C(C)C)C1=CC=CC=C1 HEFIYUQVAZFDEE-NASJTFDLSA-N 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000006651 lactation Effects 0.000 description 2
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 2
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 2
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 2
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 230000019612 pigmentation Effects 0.000 description 2
- 235000012015 potatoes Nutrition 0.000 description 2
- 229940097325 prolactin Drugs 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 2
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 2
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 2
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 2
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010000599 Acromegaly Diseases 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000209200 Bromus Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 102000015554 Dopamine receptor Human genes 0.000 description 1
- 108050004812 Dopamine receptor Proteins 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M Formate Chemical compound [O-]C=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010058359 Hypogonadism Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 208000019695 Migraine disease Diseases 0.000 description 1
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000027089 Parkinsonian disease Diseases 0.000 description 1
- 206010034010 Parkinsonism Diseases 0.000 description 1
- 241000364057 Peoria Species 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010036832 Prolactinoma Diseases 0.000 description 1
- 241000576755 Sclerotia Species 0.000 description 1
- 241001558929 Sclerotium <basidiomycota> Species 0.000 description 1
- 206010039966 Senile dementia Diseases 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N Tin Chemical compound [Sn] ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000172533 Viola sororia Species 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- XKMRRTOUMJRJIA-UHFFFAOYSA-N ammonia nh3 Chemical compound N.N XKMRRTOUMJRJIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 239000000935 antidepressant agent Substances 0.000 description 1
- 229940005513 antidepressants Drugs 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- KBKZYWOOZPIUJT-UHFFFAOYSA-N azane;hypochlorous acid Chemical compound N.ClO KBKZYWOOZPIUJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Chemical compound BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BTANRVKWQNVYAZ-UHFFFAOYSA-N butan-2-ol Chemical compound CCC(C)O BTANRVKWQNVYAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 229960003638 dopamine Drugs 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 230000004153 glucose metabolism Effects 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010027599 migraine Diseases 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- DIVDFFZHCJEHGG-UHFFFAOYSA-N oxidopamine Chemical compound NCCC1=CC(O)=C(O)C=C1O DIVDFFZHCJEHGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000803 paradoxical effect Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 229930015720 peptide alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000011403 purification operation Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000001953 sensory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002295 serotoninergic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004622 sleep time Effects 0.000 description 1
- 230000008454 sleep-wake cycle Effects 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 210000003523 substantia nigra Anatomy 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 230000003639 vasoconstrictive effect Effects 0.000 description 1
- 239000005526 vasoconstrictor agent Substances 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
Předložený vynález se týká způsobu výroby nových derivátů ergopeptinu, které mají cenné farmakologické vlastnosti a které se mohou používat jako účinné složky léěiv.
Předmětem předloženého vynálezu je způsob výroby derivátů ergopeptinu obecného vzorce I
R, znamená methylovou skupinu a
Kg znamená isobutylovou skupinu nebo benzylovou skupinu, nebo
Rj znamená ethylovou skupinu a
Rg znamená benzylovou skupinu nebo
R, znamená isopropylovou skupinu a
Rg znamená isopropylovou skupinu, sek.butylovou skupinu, isobutylovou skupinu nebo benzylbvou skupinu,a jejich edičních solí s kyselinami kultivací kmene Claviceps purpurea produkujícího odpovídající 9*- methylenderivát nebo kmene získaného z Claviceps purpurea, který spočívá v tom, že se ke kapalné kultuře tohoto kmene přidá 1 až 5 g/1 L-thiazolidin-4-kar235340
235340 2 boxylové kyseliny nebo soli této kyseliny, kultivace se provádí při 22 až 26 °C a získané sloučeniny se popřípadě převedou na své adični soli s kyselinami.
Vhodnými kyselinami pro tvorbu solí jsou například chlorovodíková kyselina, sírová kyselina, malelnová kyselina, fumarová kyselina a vinná kyselina.
Používat se mohou jak kmeny Claviceps purpurea tak i takové kmeny, které se mohou získat z výchozího kmene Claviceps purpurea mutací za účinku záření nebo působením mutagenních látek nebo selekcí. Takové kmeny jsou známé a jsou k dispozici veřejnosti.
K výrobě 9'-thiaergotaminu a 9’-thieergotamininu se například používá jako výhodný kmen produkující ergotamin/ergotaminin mutanta Claviceps purpurea NRRL 12043. Kultura tohoto kmena byla uložena 20. 9. 79 ve sbírce United States Department of Agriculture (Northern Regional Research Center), Peoria, 111., Sp. st. a. pod číslem kultury NRRL· 12043. '
K výrobě 9'-thiaergokristinu a 9'-thiaergokristininu se používá jeko výhodný kmen produkující ergokristin/ergokristin mutanta Claviceps purpurea NRRL· 12044. Jeho kultura byla uložena 29. 9. 79 vs shora uvedeném ukládacím místě pod označením kultury NRRL 12044.
Kmeny použitelné k výrobě ostatních sloučenin vzorce 1 jsou známá a jsou rovněž veřejnosti k dispozici.
Charakteristika a fermentační získávání kmenů NRRL· 12043 a 12044 z
a) Charakteristika kmene NRRL 12043
Kmen výchozí houby se izoluje ze sklerotia obsahujícího ergotamin, které bylo nalezeno na svěřepu (Bromus) v oblasti Vallis (Švýcarsko). Vícestupňovým mutagenním postupem za použití ultrafialového záření a chemikálií se dospěje ke kmeni NRRL 12043, který se používá podle vynálezu, a který lze charakterizovat následujícím způsobem:
Malý kousek mycelia kmene NRRL 12043 se naočkuje do středu agarové desky s prostředím dále uvedeného složení:
g sacharózy, 10 g asparaginu, 0,5 g casamino-kyseliny (Difco), 0,25 g KHgPO^,
0,25 g MgSO^.7 HgO, 0,125 g KC1, 16 mg FeSO^.7 HgO, 10 mg ZnSO^.7 HgO, 15 g agařu a destilovaná voda do 1 litru. Hodnota pH se 25% roztokem amóniaku upraví na 6,0. Prostředí se steriluje 20 minut při teplotě 120 °C. Při teplotě 24 °C se po 7 dnech vytvoří kolonie o průměru eei 3 cm, po 14 dnech se vytvoří kolonie o průměru asi 5 cm a po 20 dnech sa vytvoří kolonie o průměru asi 8 cm. Teto kolonie je klenutá e má mírné záhyby. Okraj je difueni. Barvě kolonie je uprostřed béžově fialová a na okraji béžové Sedá. Kolonie stará 20 dnů obsahuje na 1 cín asi 1.10® konidií. Tyto konidie jsou oválné a jejich rozměry činí 6 až 12 χ 4 až 7 ^un.
b) Charakteristika kmene 12044
Kmen výchozí plísně byl izolován ze sklerotia na Šitě v Severní Americe a tento kmen obsahuje ergokristin. Vícestupňovým mutagenním postupem za použiti ultrafialových paprsků a chemikálií se dospěje ke kmeni NRRL 12044, který ee používá podle vynálezu, a který lze charakterizovat následujícím způsobem:
Malý kousek mycelia kmene NRRL 12044 se naočkuje do středu agarové desky s prostředím dále uvedeného složení:
g sladového extraktu (Wander), 30 g brambor (Stocki, Knorr), ,5 g agaru a destilovaná voda do 1 litru. Hodnota pH činí 5,3 až 5,7. Živné prostředí se sterilizuje 20 minut při teplotě 120 °C. Po 7 dnech při teplotě 24 °C se vytvoří kolonie o průměru asi 2 cm, po 14 dnech kolonie o průměru asi 4 cm a po 20 dnech kolonie o průměru asi 5 cm,
Mycelium je pločně klenuté a je pokryto bílým, vatovitým pletivem hyf vyčnívajících do prostoru. Ve středu je vytvořen kráterovitý hrbol o průměru asi 1 cm. Od tohoto hrbolu vycházejí radiální záhyby. Mycelium pokrývající agar je fialově zbarveno. Vznikají koncentrické zóny se silnější pigmentací a koncentrické zóny se slabší pigmentací. Okřaj je difusní. Mycelium o stáří 20 dnů obsahuje na 1 cn/ asi 1.10® konidií. Tyto konidie se značně liší ve svých rozměrech (5 ež 12 i 3 až 7 yUm; většinou však 5 až 6 x,3 yum). Mycelium neobsahuje žádné alkaloidy.
Rozmnožování a výroba očkovací látky
a) Kmen NRRL 12043
Rozmnožování á výroba očkovací látky kmene NRRL· 12043 se může provádět tím, že se konidie z některé ze shora popsaných kolonií suspendují ve sterilní vodě a touto suspenzi se naočkuji zkumavky se šikmým agarem s agarovou živnou půdou,sestávající z: 70g sladového extraktu (Wander), 30g brambor (Stocki, Knorr), 15g agaru a destilované vody do 1 litru. Hodnota pH Siní 5,3 až 5,7. živná půda se sterilizuje 20 minut při teplotě 120 °C.
Po 14 dnech obsahuje takováto kultura šikmého agaru (12 ml živné půdy ve zkumavce o průměru 18 mm a o délce 20 cm, uložena šikmo (k vytvoření klinu) asi 1x10^ Konidií. Z takovéto kultury šikmého agaru se konidie suspendují ve sterilní vodě a přitom se dosáhne koncentrace 10 až 10' spor/ml. Pomocí vždy 0,5 ml této suspenze se rovnoměrně očkují zkumavky se šikmým agarem se stejnou živnou půdou. Tyto kultury se kultivují při teplotě 24 °C po dobu 14 dnů.Potom se skladují při teplotě -40 °C.
b) NRRL· 12044
Rozmnožování a výroba očkovací látky kmene NRRL 12044 se může provádět tak, že. se- koni dle z některé ze shora popsaných kolonií suspendují ve sterilní vodě a pomocí této suspenze se naočkuje šikmý agar ve zkumavkách se shora popsanou živnou půdou. Po 18 dnech obsahuje takováto kultura šikmého agaru (12 ml živné půdy ve zkumavce o průměru 18 mm a délce 20 cm, uložena šikmo ( k vytvoření klínu) asi 1 až 2.10® konidií. Konidie z takovéto kultury šikmého agaru se suspendují ve sterilní vodě a přitom se dosáhne koncentrace 10® až 10^ spór/ml. Pomocí vždy 0,5 ml této suspenze se rovnoměrně očkuji zkumavky se šikmým agarem se stejnou živnou půdou. Tyto kultury se potom kultivují při teplotě 24 °C po dobu 14 dnů. Potom se skladují při,teplotě -40 °C.
Předběžné kultury
Při provádění postupu podle vynálezu se ukázalo výhodným, vypěstovat spory nejdříve přes předchozí stupeň popřípadě přes předchozí stupeň a to dříve než se naočkuje produkční živná půda. Zpočátku se má volit živná půda, ,ve které dochází k dobrému klíčení spor a k rychlému růstu mycelia. Pro takovou živnáu půdu jsou vhodné: zdroj uhlíku v bohaté koncentraci ve formě monosacharidů nebo disachaxidu, popřípadě v kombinaci s polyalkoholem, zdroj dusíku ve formě aminokyseliny nebo amonné soli, dále minerální soli, stopové prvky a komplexní přísady z rostlinných semen. Hodnota pH se výhodně upravuje na hodnotu mezi 5 a 7. živná půda se v prvním stupni bohatě naočkuje konidiemi a potom se inkubuje na třepačce nebo ve fermentátoru různých velikostí při teplotě 22 až 26 °C po dobu 4 až, 7 dnů. Vznikne hustá kultura z kyprých, vatovitých 2 až 3 mm měřících, nepigmentovaných vloček mycelia, které sestávají z dlouhých hyf o průměru 3 až 6 /um.
Hlavní kultury
Částí kultury, která byla získána v jednom nebo popřípadě v několika předchozích stupních, se očkuje produkční živná půda, která má výhodně taková složení, aby se v krátká době dosáhlo vysoká hmotnosti mycella. Jako nejlepší a nejlevnějěí zdroj uhlíku se ukázala sacharóza, jako zdroj dusíku amonná soli, jako oxalát, citrát, sukcinát a formlát. Dále se mají přidávat minerální soli a jako stopová prvky železo a zinek. Kultivace se provádí bui v Erlenmeyerových baňkách:nebo ve fermentátorech různých velikostí. Důležitá je dobrá provzdušnování. Optimální teplota se pohybuje na 24 °C.
Na začátku tvoření alkaloidů, obvykle mezi 3. a 6. dnem kultivace hlavní kultury se k hlavní kultuře přidá 1 až 5 g/litr L-thiazolidln-4-karboxylové kyseliny, nebo některá eoli táto kyseliny, jako například soli draselná, sodná nebo amonná. Potom se kultury fermentují po dobu dalších 6 až 12 dnů. V průběhu 9 až 18 dnů vznikne hustá kultura, sestávající hlavně z 0,5 až 3 mm dlouhých a 0,1 až 1 mm silných válcovitých kompaktních částic mycelia vedle jemných vloček. Částice mycelia vykazují ve svá struktuře obraz plectenchymatické tkáně z kulovitých nebo polyedrických až nízkých válcovitých, tlustoetšnných a silně vakuolizovaných buněk o rozměrech 6 až 12 x 6 až 14 /um, zejména 8x9 ^um, která je prostoupena dlouhými hyfami o dálce až 100 /um. Tyto částice jsou pigmentovány nahnádlou barvou. Filtrát kultury je rovnáž nahnšdle zbarven.
Když, se přírůstek hmotnosti a obsah alkaloidů v myceliu sníží, mohou se alkaloidy o sobě známými metodami extrahovat pomocí organických rozpouštědel z veškerá kašovitá kultury, nebo se mycelium oddělí filtrací nebo odstřelováním od filtrátu a extrahují se obě části, každá zvlášl. Hlavní podíl peptidických alkaloidů je obohacován v myceliu.
Izolace sloučenin vzorce I
Tyto ergotpeptiny obsahující síru se dají izolovat ze suspenze kultury, z filtrátu kultury nebo z mycelia známými extrakčnlmi postupy. Čištění se provádí za použití obvyklých čisticích operací, jako například vysrážením z aktivních rozpouštědel pomocí inaktivních rozpouštědel nebo převedením na soli, která jsou obtížná rozpustná. Zvláště vhodná jsou známá čisticí postupy jako například chromatografie na oxidech hliníku, silikagelechi Sephedexu Ui-20 atd, a to vždy ve vhodných systémech rozpouštědel. Stejná jako známé ergotpeptiny jsou i tyto nové 9'-thiaergopeptiny citlivé vůči dennímu světlu.
Ve volné formě a v polárních rozpouštědlech izomerují tyto sloučeniny až k dosažení určité rovnováhy vždy na druhou formu.
Ve formě soli, jaká ee může vyrobit například působením methansulfonové kyseliny, je 9'-thiaergotamin a 9'-thiaergokristin stabilní po dlouhou dobu.
Sloučeniny získané podle vynálezu se mohou, pokud je to žádoucí předvádět o sobě známými metodami na další sloučeniny vzorce I.
Tak se mohou sloučeniny vzorce I alkylovat v poloze 1 nebo/a 2 nbbo/.a 6.
Dále se mohou sloučeniny vzorce I redukovat v poloze 9,10.
Kromš toho se mohou sloučeniny vzorce I halogenovat v poloze 2.
Sloučeniny vyráběné podle vynálezu nebyly v literatuře dosud popsány. Tyto sloučeniny, mají při pokusu na zvířatech zajímavé farmakologické vlastnosti a mohou se tudíž používat jako léčiva.
Zejména vykazují tyto sloučeniny stimulační účinek na receptory dopaminu. Dopaminergní vlastnosti bylo možno zjistovat na krysách, u kterých bylo vyvoláno injekcí 6-hydroxydopaminu do substantia migra unilaterální poškození substantia nigra v nigro-neosteriatální dopaminové dráze, dávkami mezi asi 0,5 až !00 mg/kg [metoda podle U. Ungerstedta,
Acta phyeiol. acand. Suppl. 367. 69-93 (1971)1. Po aplikaci účinné látky byla zjistitelná zřetelná aktivace tím, že krysy vykonávaly otáčivé pohyby ve směru nedenervované strany.
Uvedená nové látky se mohou používat na základě svých dopaminergních vlastností k léčení parkinsonismu.
Dále mají tyto nové sloučeniny účinek projevující se brzděním sekrece prolaktinu.
Tak brzdí tyto látky u krysy implantace (zachycení oplozeného vajíčka v děložní sliznici) po eubkutánní aplikaci dávek mezi 0,01 a 1 mg/kg a laktaci za použití dávek 1 až 10 mg/kg p. o. [ srov. Experientia 1 330 (1978) 1.
Tyto nové látky se mohou na základě sxých vlastností projevujících se brzděním sekrece prolaktinu používat například ke zbrzdění laktace, galaktorrhózy, k léčení hyperprolaktinemického hypogonadismu a akromegália nebo k léčení prolaktinomů.
Dále způsobují nové látky v cyklu spaní-bděni u chronicky implantované krysy od asi 3 mg/kg i. p. nebo tO mg/kg p. o. zkrácení doby paradoxálního spánku a prodloužení stavu bdění [srov. J. M. Vigouret a další, Pharmacology 16. 1, 156-173 (1978)]. Kromě toho způsobuji tyto sloučeniny při 0,3 mg/kg i. p. zvýšení látkové výměny glukózy v buněčných jádrech mozkových nervů senzorického zpracování informací. (Metoda podle I>. Solokoffa, Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism 1981, 1_, 7-36, Η. E. Savaki a dalěí, Brain Research 1982, 233. 347 a J. McCulloch a další, Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism 1981, 1, ,33-136).
Na základě těchto výsledků jsou nově látky vhodné k léčení senilní demence, zejména v taném stádiu a ka zvýšení vigilance.
Kromě toho mají sloučeniny podle vynálezu vasokonstrikční aktivitu, kterou lze prokázat in vitro na spirálovitých proužcích Arteria carotis axterna psa (E. Muller-Schweinitzer, Naunyn-Schmiedeberg'β Arch. Pharmacol., 292. 113 až 118 (1976)) za použití dávek od 10 nM/litr.
Na základě svého vasokonstrukčního účinku se nové látky používají k léčení migrény.
Dále vyvolávají tyto látky na kryse s poškozeným mozkem a míchou [Brit. J. Pharmac. Chemother.30 (1967), 78 až 87jza použití dávky od asi 5 ež 50 /um/kg i. v. dlouhotrvající presorický efekt spojený se zvýšením krevního tlaku. Na kočce (ííellander) [Angiologica 3 ' (1966), 77 až 99] způsobují tyto látky silné, v závislosti na dávce dlouhotrvající konstrikce cév v dávkách od asi 0,5 do asi 50 /ig/kg i. a.
Na základě této aktivity se mohou používat tyto látky jako prostředky k tonizaci žil.
Konečně mají sloučeniny podle vynálezu na základě výsledků v cyklu spaní-bdění serotoninergní účinek. S ohledem na tento účinek a na výsledky na Ungerstedtově modelu se mohou tyto látky používat jako antidepresiva, především u starších lidí.
V následujících příkladech, které vynález blíže objasňují, jsou údaje všech teplot ve stupních Celsia a tyto údaje nejsou korigovány.
Příklad I
9'-thiaergotamin a 9'-thiaergotaminin
1. Kultivace kmene NRRL 12043
a) Předběžné kultura:
Q
Konidie kultury Clavlceps purpurea kmene NRRL 12043 (asi 10) na ěikmém agaru sa suspenduji v 10 ml sterilní vody. Pomoci 1 ml této suspenze konldlí se naočkuje 200 ml předběžného kultivačního prostředí následujícího složení:
sacharóza
Proflo ělavelan amonný Ca(NO3)2i4 H20 kh2po4 MgS04.7 h2o KC1
FeSO4.7 H20 ZnS04.7 H20 destilovaná voda g/lltr
100
0,25
0,25
0,125
0,0166
0,0068 do 1 litru, které se nachází v Erlenmeyerově bance o obsahu 500 ml. Hodnota pH se pomocí NH40H Upraví na 6,5. Půda se sterilizuje 20 minut při teplotě 120 °C. Tato předběžná kultura se při teplotě 24 °C protřepává za otáčení (180 otáček za minutu, obvod 5 cm). Na konci růstu má kultura hodnotu pH 5,3 a hmotnost suchého mycelia činí 22 g/litr.
b) Hlavní kultura:
Pomocí 10 ml předběžné kultury ee naočkuje 50 ml hlavní kultivační jícího složení:
Živné půdy náeledusacharóza ělavelan amónný Ca(N03)2.4 H20 MgSO4. 7 H2O kh2po4 KC1
FeS04.7 H2O ZnSO4.7 H20 destilované voda g/litr
240
9,6
2,5
0,625
0,625
0,312
0,0252
0,0102 do 1 litru, která se nachází v Erlenmeyerově baňce o obsahu 500 ml; hodnota pK se pomocí 25% hydroxidu amonného upraví na 6,2. živné půda se sterilizuje 20 minut při teplotě 110 °C.
Tato kultura se inkubuje při teplotě 24 °C na otáčející se třepačce (180 otáček za minutu, obvod 5 cm). Po 4 dnech trvání kultivace se ke kultuře přidá 90 mg L-thiazolidin-4-karboxylové kyseliny. V inkubaci kultury se pokračuje ještě 10 dnů na otáčivá třepačce. Po ukončení fementace se kultury odfiltrují. Hycelium se šetrně vysuší. Hmotnost suchého mycelia hlavní kultury činí 85 g/litr. Obsah alkaloidu činí 12 mg/g. Podíl 9*-thiaergotaminu a 9 '-thiaergotamininu činí 10 % z celkového obsahu alkaloidů.
2. Izolace titulních sloučenin
500 g suchého mycelia se homogenizuje dvakrát vždy s 1 600 ml methanolu a 2 % koncentrovaného amoniaku, jakož i dvakrát vždy s 1 200 ml methanolu vždy po dobu 5 minut pomocí přístroje Ultra-Turrax a spojené filtráty se odpaří ve vakuu při maximální teplotě lázně 40 °C (asi 50 g vínově červeného zbytku). Tento zbytek se rozpustí v 500 ml methanolu a roztok se filtruje v chromatografické trubici o průměru 10 cm přes 500 g oxidu hlinitého aktivity II. stupně (Woelm), dále se provede promytí 2 000 ml methanolu a veškerý filtrát se ve vakuu odpaří k suchu (získá se 25 g žluté pěny). Tento zbytek se nyní rozdělí na 200-násobném množství silikagelu 60 (Merck) v methylenchloridu a 2 % methanolu chromatografickým postupem. Zbytky frakcí se zkoumají chromatografií na tenké vrstvě a ty frakce, které obsahovaly pouze skvrny látky odpovídající 9’-thiaergotaminu (srov. hodnoty Rj, v tabulce 1) se spojí.
9’-thiaergotamin:
Ty frakce, které podle chromatografické analýzy na tenké vrstvě a v souhlase s odpovídající hodnotou R^ obsahují 9 -thieergotamin, se rozpustí v ethylacetátu, roztok se filtruje vrstvou mastku a po zahuštění filtrátu ve vakuu se přidá malé množství hexanu, přičemž vykrystaluje alkaloid. Překrystalováním ze stejného rozpouštědla se získají čisté krystaly bílé až nažloutlé barvy. Teplota tání od 199 °C pomalý rozklad; [ ce] = -165° (c = 0,5 v chloroformu).
9'-thiaergotamin-methansulfonát:
180 mg 9 ’-thiaergotaminu se rozpustí v malém množství ethanolu a k roztoku se přidá alkoholický roztok obsahující 29 mg methansulfonová kyseliny, přičemž vykrystaluje alkaloid ve formě methansulfonátu. Překrystalováním z methanolu se získá čistá bílá sůl, Teplota tání od 211 °C rozklfed; = +76° (c = 0,51 v methanolu).
'-thiaergotaminin:
Chromatografované frakce s jednotnou skvrnou podle chromatogramu na tenké vrstvě a s jednotnou hodnotou R^ (viz tabulku 1) se rozpustí v ethylacetátu, spojí se a filtrují se přes vrstvu mastku za vzniku čirého filtrátu. Ke koncentrovanému roztoku se přidá malé množství hexanu, přičemž se alkaloid vysráží ve formě bílých krystalů. Překrystalováním ze stejného rozpouštědla se získá čistá sloučenina. Teplota tání od 199° rozklad; = +343° (c = 0,55 v chloroformu).
Tabulka 1
Hodnoty Rf zjištěné chromatografováním na tenké vrstvě ve srovnání s hodnotami ergotaminu (Et) a ergotamininu (Et-in)
Vrstva a rozpouětědlový systém
Thia-Et Et
Thia-Et-in Et-in směs ethylacetétu a sek. butanolu (9:1) směs toluenu a isopropanolu (9:1) směs toluenu a isopropanolu (19:1).
silikagel* 2) směs teluenu a isopropanolu (85:15) směs methylenchloridu a methanolu (93:7)
| 0,44 | 0,34 | 0,68 | 0,59 |
| 0,58 | 0,50 | 0,69 | 0,63 |
| 0,30 | 0,24 | 0,58 | 0,46 |
| 0,15 | 0,11 | 0,43 | 0,31 |
| 0,25 | 0,22 | 0,65 | 0,52 |
hotové destičky oxidu hlinitého Merck F 254 (typ E) 2) hotové silikagelové destičky Merck F 254.
Na destičkách pro chromatografii na tenké vrstvě se jevily skvrny látky při ultrafialovém světle vlnové délky 254 nm jako modrofialové skvrny a při ultrafialovém světle vlnové délky 366 nm jako světle modré skvrny. Mohou se zjistit také pomocí jodových par jako hnědé skvrny.
Urkovo činidlo typidké pro ergoťpeptiny se výtečně hodí k detekci skvrn látek.
Po postříkání se projevují tyto sloučeniny modrofialovou barvou, které se projevuje intenzivněji v důsledku působení denního světla nebo proudu vodní péry (Hauch-Konig).
Příklad 2
9'-thiaorgokristin a 9'-thiaergokristinin
t. Kultivace kmene HRRL 12044
Kmen 12044 ee kultivuje analogickým způsobem jaké je popsán v příkladu 3. Hmotnost suchého mycelia hlavní’ kultUry činí 80 g/litr. Obsah alkaloidů činí 10 mg/g. Podíl titulních sloučenin činí 8 % z celkového obsahu alkaloidů.
2. Izolace titulních sloučenin:
500 g suchého mycelia se dvakrát homogenizuje vždy s 1 500 ml methanolu a 2 % koncentřo váného amoniaku a dvakrát se homogenizuje vždy s 1 500 ml methanolu po dobu 5 minut pomocí přístroje ultraturrax. Spojená filtráty se odpaří ve vakuu při maximální teplotě lázně 40 °C (190 g vlnově červeného zbytku).Po rozpuštění v 900 ml methanolu se získaný roztok filtruje 10 om vysokou vrstvou 600 g oxidu hlinitého (bazický, aktivity 11. stupně), díle sa vrstva promyje 2 000 ml methanolu a filtrát se odpaří ve vakuu k suchu (108 g).
Tento zbytek se nyní rozdělí v methanolu na 3 000 g Sephadexu LH-20, přičemž se jímají frakce po 200 ml, které se odpaří. Zbytky frakcí, které podle chromatografie na tenké vrstvě obsahují nové thia-ergotpeptidy, se opojí (526 mg) a znovu se chromatografujl na (20 g‘Sephadexu LH-20 v methanolu, přičemž se získá 156 mg čisté směsi 9'-thiaergokristinu a 9'ržhiaergokristininu. Rozdělení těchto dvou sloučenin se provádí známými chromatografickými metodami na silikagelu 60 (Merck) za použití methylenchloridu a 2 % methanolu.
9'-thiaargskristin:
Zbytky frakcí, které podle chromatografické analýzy na tenké vrstvě a v souhlase s jeho hodnotou (srov. tabulku 2) obsahují pouze 9”-thieergokristin, se spojí a krystalují se z benzenu (28 mg). Teplota tání 146 °C (jihnutí za pomalého rozkladu)= -176° (c = 0,5 v chloroformu).
9'-thiaergokristinin:
Chromatografické frakce, která se podle chromatografie na tenké vrstvě jeví jako jednotné a které mají skvrnu látky ve shodě s příslušnými hodnotami Rf (viz tabulku 2), se spojí a krystalují se ze směsi ethanolu a ethylacetátu. Teplota tání 209 až 210 °C za rozkladu;[ct] = +344° (c = 0,51 v CHCl^).
Tabulke 2
Hodnoty R^ zjištěná chromatografií na tenké vrstvě ve srovnání s hodnotami ergokristinu (Ec) a ergokristininu (Ec-in) w
Vrstva a rozpouštěd- Thia-Ec Ec Thia-Ec-in Ec-in lový systém směs ethylacetátu
| a sek. butanolu (9:1) | 0,68 | 0,63 | 0,78 | 0,70 |
| směs toluenu a isopropanolu (9:1) | 0,68 | 0,62 | 0,69 | 0,66 |
| směs toluenu a lsopropanolu (19:1) | 0,50 | 0,42 | 0,58 | 0,47 |
| silikagel2) směs toluenu a iso- propanolu (85:15) | 0,37 | 0,28 | 0,56 | 0,48 |
| směs methylenchloridu a methanolu (93:7) | 0,47 | 0,41 | 0,70 | 0,60 |
vysvětlivky k tabulce 2:
hotové destičky oxidu hlinitého Merck F 254 (typ e) hotové silikagelové destičky Merck F 254
Pokud jde o detekci skvrn látek pak platí totéž co je uvedeno v příkladu 1.
Příklad 3
Analogickým postupem jako je popsán v příkladu 1 nebo 2 se může vyrobit také 9'-thia-í6-ergekryptin [teplota tání 203 až 205 °C (rozklad);[ = +46° (c = 0,7 v dimethylformamidu)] a 9'-thia-oí-ergokryptinin [teplota tání 228 až 230 °C (rozklad);[ oc]p° = +281° (c = 0,8 v dimethylformamidu)] tím, že se použije kmene produkujícího směs ergokryptinu a ergokryptininu.
Claims (1)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZUZpůsob výroby derivátů ergopeptinu obecného vzorce I v němž buiR, znamená methylovou skupinu aRg znamená isobutylovou skupinu nebo benzylovou skupinu, neboR, znamená ethylovou skupinu aRg znamená benzylovou skupinu neboR, znamená isopropylovou skupinu aRg znamená isopropylovou skupinu, sek. butylovou skupinu, isobutylovou skupinu nebo benzylovou skupinu, ve foraé volné báze nebo adičnl soli s kyselinou, kultivací kmene Claviceps purpurea produkujícího odpovídající 9'-methylenderivát nebo kmene získaného z Claviceps purpurea, vyznačující se tím, že se ke kapalné kultuře tohoto kmene přidá 1 až 5 g/1 L-thia.zolidin-4-karboxylové kyseliny nebo soli této kyseliny, kultivace ee provádí při teploté 22 až 26 °C a získané sloučeniny se popřípadě převedou na své ediční soli a kyselinami.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CH514081 | 1981-08-07 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS235340B2 true CS235340B2 (cs) | 1985-05-15 |
Family
ID=4288609
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS629283A CS235340B2 (cs) | 1981-08-07 | 1982-08-06 | Způsob výroby derivátů ergopeptinu |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS235340B2 (cs) |
-
1982
- 1982-08-06 CS CS629283A patent/CS235340B2/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE69422526T2 (de) | Polyzyklische antiparasitäre derivate, verfahren und stamm zu ihrer herstellung und ihrer verwendung | |
| EP1274698B1 (en) | Percyquinnin, a process for its production and its use as a pharmaceutical | |
| US4804660A (en) | Ergot cyclic peptide alkaloids having a venotonizing effect, useful for treating orthostatic hypotension | |
| EP1751272B1 (en) | Production of tacrolimus (fk-506) using new streptomyces species | |
| EP0703917A1 (en) | Indolocarbazole compound useful as proteinkinase c inhibitor | |
| US3432598A (en) | Antibiotic sl 2266 | |
| US5563054A (en) | Process for preparation of benzo[B]thiophene glucuronides | |
| US4992425A (en) | Antibiotics BU-3608D and BU-3608E | |
| FR2568892A1 (fr) | Nouvel antibiotique sandramycine, procede de preparation de celui-ci, culture biologiquement pure du micro-organisme nocardioides sp, atcc no 39419, et composition pharmaceutique contenant la sandramycine | |
| CS235340B2 (cs) | Způsob výroby derivátů ergopeptinu | |
| DE2028403B2 (de) | Pepstatin | |
| US6297043B1 (en) | Mumbaistatin, a process for it's production and its use as a pharmaceutical | |
| FI75188B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara 9'-tiaergopeptinderivat. | |
| WO1996016053A1 (en) | Phthalide compounds and their production process | |
| EP0504711B1 (en) | Compound UCA1064-B | |
| US5217882A (en) | Microbial transformation process for producing antihypertensive N2 -glucuronide products | |
| US4753959A (en) | Antibiotic lactone compound | |
| EP0818464B1 (en) | Methylsulfomycin l, a process for its production and its use | |
| US3803307A (en) | Antibiotic sl 21429 | |
| US5096817A (en) | Process for producing antibiotics BU-3608 D and BU-3608 E | |
| US3833723A (en) | Alamethicin and production therefor | |
| DE3881566T2 (de) | Antitumor-derivate, verfahren zu ihrer herstellung und pharmazeutische zusammensetzungen, die sie enthalten. | |
| DE69902537T2 (de) | Eine verbindung, wf002, ein verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung | |
| EP0180045A2 (en) | Benzanthrin compounds | |
| CS248719B2 (en) | Production method of the clavine alcaloids |