CS233220B1 - Spdsob přípravy D-manózy - Google Patents

Abstract

Vynález sa týká sp6sobu přípravy D-manózy. Podstata vynálezu spočívá v tom, Se sa zmes D-glukózy a D-manozy selektivně rozdělí pomocou silné kyslého vymienača katiónov vo vápenatéj formě, ako eluačné činidlo sa použije 50 až 60 % vodný roztok etylalkoholu. Čistá frakcia, ktorá obsahuje D-raanozu sa po zahuštění a odfarbení aktívnym.uhlím zahustí a z etylalkoholu vykrystalizuje. Vynález má rozsiahle použitie pri Stádiu biochemických pochodov, v medicíně a v potravinárskom priemysle.

Description

Vynález sa týká spčsobu přípravy D-manózy zo zmesi cukrov D-manóza, D-glukóza.

D-manóza patří medzi veTmi vzácné sacharidy aldohexózy, ktorá sa v prírode nachádza najčastejšie vo formě polysacharidov manánov a glukomanénov. Z týchto zdrojov sa mčže připravit kyslou alebo enzymatickou hydrolýzou; ako zo semien palmy Phytelephas macrocarpa [tí. Riess: Ber. 22, 609 (1889)J z riasy Porthyra umbilicalis £C. S. Hudson,

E. L. Jackson: J. Am. Chem. Soc. 56, 958 ('1944)7, alebo z buněčných stien kvasiniek

Saccacharomyces cerevisiae fj. Šandula, A. Vojtková: Folia Microbiol. 19, 94 (1974)7 .

*

Taktiež sa mčže připravit oxidáoiou manitolu [e. Fischer, J. Hirschberger: Ber. 21,

1805 (1889)J. 7. Bílik popisuje přípravu D-manózy epimerizáciou D-glukózy pomocou molybdenánových ionov ako katalyzátora, kde D-manózu izoluje ako derivát fenylhydrazón [A. O. 149051J· Autoři J. Kubala a kolektiv připravili kryštalickii D-manózu cez derivát N-fenyl-D-manozylamín[(A.O. 214431 )J.

Uvedené metody přípravy D-manózy z glukomanénov, oxidáciou D-manitolu alebo izoláciou zo zmesi D-glukózy a D-manózy pomocou derivátov sú značné obtiažne, nakoTko v prírodných meteriáloch ako aj v buněčných stěnách kvaeiniek je obsah D-manózy nízký a výtažky sú malé. Viacstupňová syntéza přípravy oxidáciou manitolu má zatial’ len teoretický význam. Izolácia D-manózy za pomoci nerozpustného derivátu pomocou fenylhydrazínu resp. anilínu je komplikovaná tým, že tieto látky sú jedy.

Uvedené nevýhody v podstatnej miere odstraňuje spčsob přípravy D-manózy podl’a vynálezu, ktorého podstata spočívá v tom, že sa zmes D-glukózy, D-manózy selektfvne rozdělí pomocou silné kyslého vymieňača katiónov vo vápenatej formě. Eluačné činidlo sa použije vodný roztok etylalkoholu. Frakcia D-manózy sa zahustí za zníženého tlaku na sirup a vykrystalizuje z etylalkoholu.

Výhodou navrhovaného spfisobu přípravy D-manózy oproti doterajším postupom přípravy je, že předmětný spSsob přípravy je hodporárnejší a zdravotně nezávadný, umožňuje pracovat’ v jednoduchých zariadeniach, ktoré nie sú náročné na energiu a sú bežne dostupné. Umožňuje pracovat bez látok, ktoré znečistujú životné prostredie ako fenylhydrazín, ktorý je karcinogénnouilátkou a anilín ako zvlášť nebezpečný jed a ich odstrénenie v prevádzkovom měřítku si vyžaduje Speciálně zariadenie a je nákladné. Získaný vedlejší produkt D-glukózy sa mčže v nezmenenom stave grátiť do pčvodnej reakcie alebo po kryštalizácii komerčně zhodnotit.

Příklad 1

Slino kyslý vymieňač katiónov (Dowex 50 WX 8 0,07 až 0,13 mm) sa naplní do kolony s dTžkou 100 cm a priemerom 2,5 cm postupné sa premáva (1 000 ml) 10 % kyselinou chlorovodíkovou a nechá pčsobiť po dobu 24 hod. Potom sa ionomenič premyje destilovanou vodou (5 000 ml) do neutrálnej reakcie pH 7· Aktivácia sa uskutoční (2 000 ml) 20 % roztokom chloridu vápenatého a nadbytočné ióny sa vymyjú destilovanou vodou do negatívnej reakcie na chloridy. 2 g zmesi obsahujúcej 50 % D-manózy sa rozpustí v 4 ml (50 % etylalkoholu a nanesie na kolonu naplnenú slino kyelým vymieňačom katiónov (Dowex 50 WX 8 0,07 až 0,13 mm vo vápenatej formě) s dTžkou 100 cm a priemerom 2,5 cm.

Ako eluačné činidlo sa použije 50 % etylalkohol za pomoci zberača frakcií pri prietoku 10 ml/h. Jednotlivé frakcie sa sledujú papierovou chromatografiou (Whatman No 1) zostupnou chromatografiou v sústave etylacetát-pyridín-voda v objemovom pomeře 8:2:1 a detegujú alkalickým dusičnanom strieborným alebo za pomoci kyseliny 3,5 dinitrosalicylovej spektrofotometricky. Frakcia 1 až 25 bola negativné na cukry, frakcia 26 až 33 obsahovala D-glukózu, frakcia 34 až 36 bola negativné na cukry a frakcia 37 až 45 obsahovala D-manózu.

Frakcia, ktorá obsahovala D-manózu sa vákuovo zahustí na sirup, přečistí prídavkom aktívneho uhlia (0 1 g), přefiltruje a lyofilizuje. Prídavkom 96 % etyialkoholu (5 ml) vykryšalizuje (0,80 g) D-manózy. Opakovanou kryštalizáciou matečných lúhov sa získalo óalšlch (0,10 g) D-manózy čím sa dosiahla výťažnosť 90 %. Specifická otáčivosť («)²®+ 14° (C=5 voda), Teplota topenia 130 až 132 °C.

Příklad 2 g zmesi obsahujúcej 75 % D-glukózy a 25 % D-manózy sa rozpustí v (4 ml) 60 % etyialkoholu a nanesie ha kolonu naplněná silno kyslým vymieňačom katiónov (Dowex 50 WX 8 0,07 až ®, 13 mm vo vápenatej formě) s dl’žkou 100 cm a priemerom 2,5 cm. Ako eluačné činidlo sa použije 60 % etylalkohol za pomoci zberača frakcií pri prietoku 10 ml/h. Jedriotlivé frakoie sa sledujú papeirovou chromatografiou (Whatman No 1) zostupenou chromatografiou v sústave etylacetát-pyridín-voda v objemovom pomere 8j2:1 a detegujú alkalickým dusičrianom strieborným alebo za pomoci kyseliny 3,5 dinitrosalicylovej spektrofotometrieky. Frakcia 1 až 22 bola negativné na cukry, frakcia 23 až 40 obsahovala D-glukózu, frakcia 41 až 43 boly negativna na cukry a frakcia 44 až 50 obsahovala D-manózu. Frakcia, ktorá obsahovala D-manózu sa vákuovo zahustí na sirup, přečistí prídavkom aktívneho uhlia (01 g), přefiltruje a lyofilizuje (0,245 g). Prídavkom 96 % etyialkoholu (5 ml) vykrystalizuje (0,23 g) D-manózy. Opakovanou kryštalizáciou matečných lúhov sa získá áalších (0,01 g) D-manózy čím .sa dosiahla výťažnosť až 96 %. Specifická otáčivosť ( )*° + ,4° (C = 5 voda), Teplota topenia 130 až 132 °C.

Vynález má rozsiahle použitie pri štúdiu biochemických poehodov, v medicíně a v potravinérskom priemysie.

Claims (1)

1. PREDMET VYNÁLEZU

   SpSsob přípravy D-manózy zo zmesi D-glukózy a D-manózy, vyznačujúci sa tým, že sa pomocou silné kyslého katexu vo vápenatej formě za pomoci 50 až 60% etyialkoholu ako elučpého Činidla izoluje D-manóza, ktoré po přečištění aktívnym uhlím a zahuštění vykryštaluje z etyialkoholu.