CS231615B1 - Method of cultivation of cells of higher organism and device to perform the method - Google Patents
Method of cultivation of cells of higher organism and device to perform the method Download PDFInfo
- Publication number
- CS231615B1 CS231615B1 CS995581A CS995581A CS231615B1 CS 231615 B1 CS231615 B1 CS 231615B1 CS 995581 A CS995581 A CS 995581A CS 995581 A CS995581 A CS 995581A CS 231615 B1 CS231615 B1 CS 231615B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- cells
- cultivation
- culturing
- bag
- nutrient medium
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 10
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims abstract description 12
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims abstract description 9
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 claims abstract description 9
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 6
- 238000005273 aeration Methods 0.000 claims description 3
- 238000005496 tempering Methods 0.000 claims 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 13
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 3
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 2
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 2
- 150000003797 alkaloid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 2
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 2
- -1 polyethylene Polymers 0.000 description 2
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 2
- 238000007493 shaping process Methods 0.000 description 2
- 208000019300 CLIPPERS Diseases 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UGFAIRIUMAVXCW-UHFFFAOYSA-N Carbon monoxide Chemical compound [O+]#[C-] UGFAIRIUMAVXCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283074 Equus asinus Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- IOYNQIMAUDJVEI-BMVIKAAMSA-N Tepraloxydim Chemical group C1C(=O)C(C(=N/OC\C=C\Cl)/CC)=C(O)CC1C1CCOCC1 IOYNQIMAUDJVEI-BMVIKAAMSA-N 0.000 description 1
- 206010000210 abortion Diseases 0.000 description 1
- 231100000176 abortion Toxicity 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 238000004873 anchoring Methods 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000269888 azena Species 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000021930 chronic lymphocytic inflammation with pontine perivascular enhancement responsive to steroids Diseases 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 239000003546 flue gas Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 1
- 125000000325 methylidene group Chemical group [H]C([H])=* 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 1
- 238000005096 rolling process Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
- C12M23/02—Form or structure of the vessel
- C12M23/14—Bags
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
- C12M23/48—Holding appliances; Racks; Supports
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M27/00—Means for mixing, agitating or circulating fluids in the vessel
- C12M27/16—Vibrating; Shaking; Tilting
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Clinical Laboratory Science (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Abstract
Description
Vynález se týká způsobu tad.tivace buněk vyšších organismů a zařízení k provádění tohoto způsobu·BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention
Jak je' známo, vyžaduje kultivace buněčných suspenzí vyšších rostlin i živočišných buněk ve srovnání s kutivací mikroorganismů zpravidla nejen podstatně delší dobu, ale i zvláštní zařízení, konstruované s ohledem na odlišné vlastnosti těchto buněk· Delší perioda růstu nediferencovaných buněk vyšších organismů je v souhlase také s pomaaejší- utilizací kyslíku; proto nevyžaduj takové kultury intenzivní vzdušnění a míchání, jako je tomu při submerzní kiltivaci mikroorganismů ve fermentorech· Naopak, rychlý pohyb kiutivační kapaliny a mechanické zábrany v podobě míchadel a zarážek poškozují bunky vyšších organismů střižnými ne231 615 srovnatelně více, než je tomu například v případě vláknitých hub, a jsou ve skutečnosti hlavním důvodem toho, že běžných fermentačních zařízení není možno pro jejich kultivaci využívat*As is known, cultivation of cell suspensions of higher plants and animal cells requires, as a rule, not only a considerably longer time than that of microorganisms, but also a special device designed with respect to the different properties of these cells. with slower oxygen utilization; therefore are not in need of such a culture intensive aeration and agitation, such as in submerged kiltivaci microorganisms in fermenters · Conversely, fast movement kiutivační fluid and mechanical barriers in the form of stirrers and stops e to damage cells yl higher or g anismů shear ne231 615 comparably more than this is the case, for example, in the case of filamentous fungi, and they are in fact the main reason that conventional fermentation plants cannot be used for their cultivation *
Až dosudbylo možno úspěšně pěstovat buňky vyšších organismů jen v laboratorním měřítku, v malých objemech kapalin, v baňkách či na Petriho miskách, nebo v baňkách, otáčejících se kontinuálně poděl horizontální osy na tzv. rollereoh.Until now, cells of higher organisms have only been successfully grown on a laboratory scale, in small volumes of liquids, in flasks or on petri dishes, or in flasks rotating continuously along the horizontal axis to the so-called rollereoh.
Je známo jednoduché a průmyslově využitelné zařízení pro stacionární kultivaci aerobních mikroorganismů na hladině kapalné živné půdy, kterou se po inokulaoi plní pružné a poddajné vaky z plastické hmoty, například z polyethylenu, nafouklé sterilním vzduchem a v průběhu kultivace vzdušněné vzduchem přiváděným na povroh rostoucí kultury /autorské osvědčení č. 172 552/.A simple and industrially applicable apparatus for the stationary cultivation of aerobic microorganisms on the surface of a liquid culture medium is known which, after inoculation, is filled with flexible and pliable plastic bags, for example polyethylene, inflated with sterile air and Certificate No. 172 552 /.
V průběhu dalšího výzkumu se podařilo prokázat, že tohoto zařízení je možno s malou úpravou využít i pro kultivaci buněčných suspenzí vyšších organismů v technickém měřítku·In the course of further research it was proved that this device can be used with a small modification for cultivation of cell suspensions of higher organisms on a technical scale.
Předmětem vynálezu je tedy způsob kultivace buněk vyšších organismů, například v suspenzi v tekutém živném mediu, v nádobách, zejména s poddajnými a/nebo pružnými stěnami, s výhodou ve tvaru vaku, opatřených přívodem aeračního plynu a živin. Podstata způsobu spočívá v tom, že se kultivace provádí za kontinuálního nebo periodického promíchávání živného media rozvlněním, vyvolaným kontinuální nebo periodickou změnou polohy alespoň jedné strany kultivační nádoby.Accordingly, the present invention provides a method for culturing higher organism cells, for example in suspension in a liquid nutrient medium, in containers, in particular with flexible and / or flexible walls, preferably in the form of a bag, provided with an aeration gas and nutrient supply. The essence of the method is that the cultivation is carried out with continuous or periodic mixing of the nutrient medium by rolling, caused by a continuous or periodic change of position of at least one side of the cultivation vessel.
Předmětem vynálezu je dále zařízení pro kultivaci buněk vyšších organismů, jehož podstata spočívá v tom, že sestává z rovinného útvaru omezených plošných rozměrů a ze zdroje pohybu, měnícího kontinuálně nebo periodicky polohu alespoň jedné strany rovinného útvaru.The invention further relates to an apparatus for culturing cells of higher organisms, characterized in that it consists of a planar formation of limited surface dimensions and of a source of movement changing continuously or periodically the position of at least one side of the planar formation.
231 615231 615
Tento rovinný.útvar mlže být dále opatřen jedn:ta nebo více proetitedky к . uchycení kultivač^ nádoby, dále otvory a/nebo nerovným povrchem a/nebo temperova^m strojím.This rovinný.útvar bivalve further be provided with medium-j: the more or proetitedky к. ^ gripping culturing vessel further openings and / No b of unequal ovrchem P and / or temper strojím microns.
Příklad, zařízení podle vynálezu je schematicky znázorněn na připojeném výkresu na obr. 1 až 4, na nichž je uvedeno několik alternativ provedení zařízení, a to v podélném řezu.An example of a device according to the invention is shown schematically in the accompanying drawing in FIGS. 1 to 4, in which several alternative embodiments of the device are shown in longitudinal section.
Obr. 1 znázorňuje nej jednodušší provedení zařízení podle vynálezu; roví.aný útvar omezených plošných rozměrů je označen J., zdroj pohybu 2 a prostředek 2 k uchycení kultivační nádoby rovinný útvar 1 ee může poh/bovat kolem oey A » ' umíšené hul mezi okraji /obr. 1/ nebo na okraji /'obr. 2/ rovl^mého ’ útvaru 1. Na obr. 3 je znázorněn rovinný utvař 1 opatřený tvarovaným povrchem £, na obr, 4 je uvedena kombinace tvarovaného povrchu £ e otvory . 6. Nerovným povrchem £ ee v tomto případě rozumí i vhodně tvarované těleso, položené na rovinný útvar 1.Giant. 1 shows the most simple embodiment of the device according to the finding y; roví.aný formation of limited surface dimensions is designated J. source 2 and the movement means 2 for mounting the culture vessel planar unit 1 may ee p OH / OE can typically around y A » 'umíšené Hul between the edges / Fig. 1 / n or and the edge / 'FIG. 2 / m ^ é Rovli it 'U shape 1. FIG. 3 is Zn and n Zorn of one planar formation provided £ contoured surface, in Figure 4, the combination of the shaped surface e £ openings. 6th EE £ uneven surface in this case means and suitably shaped body ITEMS en é ú a planar shape of the first
Rovinný útvar 1 ' omezených plošných' rozměrů, . tvořící podstatnou součást zařízení podle vynálezu, označovaný dále pro stručnost jako podložka, může mít povrch úplně rovný a hladký /viz obr, 1 a 2/ nebo nerovný £, různě, pravidelně či nepravidelně tvarovaný, popřípadě opatřený o^tvory 6 Sedmého tvaru /obr. 3'a. 4/,'které ' v mezním případě mohou tvořit mříž nebo aít /není znázorněno/. Touto úpravou povrchu podložky 1 lze dosáhnout žádoucího tvarování dna kultivačního vaku y. Témuž účelu může sloužit jedno nebo více vhodně 'tvarovaným těles /zvláší neznázornšno/, která se v případě potřeby'na rovný povrch ' podložky 1 jednoduše položí. Je samozřejmě možná i kombbnace otvorů 6 v podložce 1 s vhodným tvarováním jejího povrchu £ nebo 8 přemíítiteliýmL tvarovanými těleey.Planar U-shaped profile 1 'H omezenýc printed' dimensions. forming an essential part of the invention, referred to herein for brevity as according to z k may have p ovrch LO ln E is equal HLA d cal / see Figures 1 and 2 / or uneven £, varying, regularly or not p ravideln of shaped, p o p of IP DE of at Eny p o ^ form a 6 Seventh shape / Fig. 3'a. 4 /, 'placed' in the extreme case may form a lattice OR AIT / her e n shown /. This LO Ravo p ovrc h at substrate 1 can achieve a desired shaping of the bottom of the culture bag y. To that of the faces may be used with one or i ce suitably 'shaped bodies ES / from the chassis neznázornšno /, where A is in the case of abortion should' on a flat surface 'of the washer 1 simply placed. It is, of course, also possible to combine the openings 6 in the support 1 with suitable shaping of its surface 8 or 8 by the transferable molded bodies.
Podložka 1 může být dále opatřena pevnými nebo přestavitelnými prostředky 2 k uchycení nebo připevnění kultivačního ' vaku y mpříklsd pev^mi nebo sklápěcím a/neto přestavi-telnými ^strrniMrnl, libovolného vhotosho prove<ien //mohou toThe pad 1 can be further provided with fixed or adjustable means 2 for fixing or attaching the culture 's bag mpříklsd a solid or me ^ skl APE if m and / Neto cease-ionisable m ^ i strrniMrnl, any vhotosho rove p <n // IE can t O
231 815 být například jednoduše ohnuté okraje podložky 1/, jež umožňují použití podložky 1 určité základní ' velikosti pro toiltivační vaky 2 různých velikostí a tvarů.231,815 for example be simply bent edges of the pad 1 / allowing use p 1 odložky certain basic 'toiltivační bag sizes for different size y 2 and AR in the TV.
Je-li to zapoořehí, mlže být podložka 1 opatřena tempe· rovacím ústrojím, které v meznta přip>adě samo může tvořit oelou podložku 1 včetně prostředí 2 k uchycení tailtivačního vaku 2·If zapoořehí, bivalves be provided with pad 1 · Tempe desulphurising device which e in p meznta RIP> ADA itself may form a substrate 1 including oelou medium 2 for gripping the bag 2 · tailtivačního
Kontinuální nebo periodická změna polohy podložky 1 s kultivační vekem 2 vyvolávající promíchávání kultivačního media rozvlněním, je dosažitelná mnoha o sobě známými způsoby a/nebo prostředky, které však do rozsahu tohoto vynálezu· Jen jako příklady lze vačku, excentr, páku nebo píst ap^<e«>, poháněné vhodným zdrojem pohybu, nappíklad elektromotorem, který je v čin^c^e^s^:í buň neustále nebo občas, zejména podle předem nastaveného programu· Rovněž místo, ve kterém se podložka pohybuje /závěs, osa, ložisko ěpod·/, může být upraveno kdekoliv mezi okrajem a středem podložky 1 tak, jak je to pro daný případ tejvhpdetjší· ·A continuous or periodic change in the position of the lid 1 with a cultivation lid 2 causing mixing of the culture medium by a ripple is achievable by a number of known methods and / or means, but within the scope of the invention. e «> driven by a suitable source of motion, nappíklad electric motor, which is c in ^ c ^ e ^ s ^: s the cells for continuously no b of times, in particular according to a preset program · also the place where the pad is moved / suspension the axis, the bearing below · /, can be adjusted anywhere between the edge and the center of the washer 1, as is the case in the case
Polohu podložky 1 lze meědt, je-li to Sátouuí, ЬтЛ z je·né str^^ nebo střídmě ze všech síran po sobě, ^elitobt zftrihů, jejich rychlost a četnost je pochooPtIltn ' závislá na charakteru kultivovaného organismu, na viskozitě kiltivačního media a samozřejmě na celkovém. režimu kultivace a stanovuje se pro Oažeý případ zvláš$· The position P 1 may be deferred clippers meědt, if Sátouuí, ЬтЛ from the Ne · p ^^ or of the sparingly with EC H sulfate consecutive ^ elitobt zftrihů, their speed and the frequency is pochooPtIltn 'depends on the nature of the cultured organism. the viscosity of the kiltivation medium and of course the total. mode of cultivation and is determined to oases e d ý BC IPA optional AS $ ·
Při kutivaci jednoho druhu organismu po delší výrobní obd<^·^:^ je účel^ především z hlediska hospcOLááttžSi provozu a obsluhy, když se více podložek 1 s kultivačními, vaky 2> u.spořáeanými napří^a· na· sebou a/nebo νβ·1β sebe, ovládá jedním zdrojem pohybuWhen kutivaci one species of the organism for a longer manufacturing OBD <^ · ^: ^ is the purpose-especially with respect to h ospcOLááttžSi Operation, when more supports 1 with culture, bags 2> US P ORa eanými eg ^ and · at · are b ou and / OR νβ · 1β with EBE about l asks one source movement
Způsobem podle vynálezu se velmi jednoduše a šetrně'dosáhne rozvlnění kU.tivečtího media v takové míře, jaká je pro eaný organi3mus nejvhode^ší. Vlnění Spaliny přitom zajzíšSu5According to the invention very simply and šetrně'dosáhne snaking kU.tivečtího medium in such a degree as that for E Aný organ i3 him with nejvhode-width. The ripple of the flue gas is in the process5
231 615 je dostatečné míchání suspenze rostoucích buněk a relativně velký povrch bťLtivačnílio media /vzheedem k jeho který je ve styku s kontinuálně obnovovaným vzduchovým polštářem a zaručuje zároveň dostatečný přenos Oslíku do mooících se buněk účinnost mí^ární ' . rozvlněním může být nadto zvýšena úpravou podložky 1 do formy ; roštu, při čemž apodní strana pružného a poddajného kultivačního vaku , , naplněného živnou půdou, se její hmoonnotí vytvaruje do řady rýh, kolmý oh ke směru vlnění. Tím nejen potencuje míchání buněčné suspenze, , nýbrž i ok· slič ování živné půdy, podobna' jako je tomu na systému vodních splavů.231 615 sufficient stirring suspension growing cells a relatively large povrc h bťLtivačnílio media / vzheedem k H of which is in contact with a continuously-refreshed air cushion and simultaneously ensures adequate EXAMPLE eno with donkey in m o ICIC hs e cell efficiency mu ^ ární '. rozvlněním can moreover be increased by adjusting the sublayer and the lens 1 into the mold; grate, wherein p and W ater side of the elastic and flexible culture bag filled with a nutrient medium with a hmoonnotí formed into a series of ridges perpendicular to the direction of OH waves. This not only potentiates the mixing of the cell suspension but also the cultivation of the culture medium, similar to that of a waterway system.
Zaaízení podle vynálezu slouží především ke kultivaci volně suspendovaných buněk, jejichž imnžení a růst jsou podmíněny zakotvením na povrchu pevného substrátu /například fibroblasty/· Takové buňky rostou pak na vnitřn:! stěně ku.tiva^tao vaku J» přičemž J činnou plochu pro zakotvení a ríis-t buněk je navíc možno podstatně zvýšit přídavkem mihaOnnsičů, které jsou suspendovány v živné půdě.Zaaízení invention is primarily used for culturing the freely suspended cells whose growth imnžení and are subject to capture on the surface of the rigid substrate / as fibroblasts / s · T b as methylene uňky then grow at inside :! ku.tiva-wall bag tao J »BC ICEM f J P jail employed for anchoring and Riis-T cells can additionally be essentially increased by addition mihaOnnsičů that are suspended in the broth.
V zařízení podle,vynálezu je možno velikost a četnost pohybů, výšku hladiny živné půdy, průtok vzduchu, teplotu a dobu kultivace empiricky optimaaizovat pro daný druh buněk a dané složení živné půdy.In the device according to the invention, the magnitude and frequency of the movements, the height of the culture medium, the air flow, the temperature and the cultivation time can be empirically optimized for a given cell type and the culture medium.
Zpíůsob a zařízení podle vynálezu jsou s výhodou použitelné i při kutivaoi vláknitých mikroorganismů na hladině kapalné ' živné půdy. Při klidové stacionární kultivaci se totiž často stává lz^nitujfcum faktorem růatu a produkce pomalá difuze živin z roztoku směrem vzhůru k rostoucímu mikroorganismu. Občasným rozvlněním, vyvolaný změnou polohy podložky. 1, dochází ke konveJkci živných substrátů rozpuštěných v půdě, což umožňuje jejich rychlejší resorpci a tím i urychluje růst ' a zvyšuje produkec.The method and the device according to the invention are advantageously also applicable to the processing of filamentous microorganisms on the surface of a liquid culture medium. Indeed, in resting stationary cultivation, the growth factor often becomes lysing and the production of slow diffusion of nutrients from the solution towards the growing microorganism. Occasional curling caused by changing the position of the pad. 1, the nutrient substrates dissolved in the soil are converted, allowing them to be resorbed more rapidly, thereby accelerating growth and increasing production.
231 SIS231 SIS
NásleduJící příklady způsob podle vynálezu pouze ilustrují» ale nijak neomezují.The following examples illustrate the process according to the invention but are not intended to limit it in any way.
Příklad 1Example 1
Pro kutivaci byly příčnými sváry připraveny z polyetylenového rukávce taJtivační vaky 2 0 velikosti 32,5 x 44 om· Vaky 2. byly Plněny po 2 500 ml tekuté živné půdy, obsahující 25 % tootn. saouarosy a 1 % taotau citeoiunu am^ou^í^ho jako zdroje uhlíku a dusíku· Onozením plošných rozměrů rovným dnem a pevným r^ečkom’ byla upravena velikost ploohy hladiny půdy na 1 000 o° při výšoz hladiiy 25 mm· Půda po sterilizaci byla vyohlazena na 'teplotu 24 °C a ' zaočkována submerznm vegetativním inokulem, připrav eiým z konidií produkčního kmene Clavicepa purpurea CCM'P-725· Kuutivačií vaky ' 2 byly inkutovány při teplotě 24 °0 po dobu 21 dní a od 5,dne počínaje byly vzdušněny nad hladinu půdy steriniím vzduchem v mužžtví 410 ol/oin./1000 om· Celkem bylo takto připraveno šest kiutivačiícU vaků 2i tři z nich byly inkubovány po celou dobu v klidu, další tři byly počínaje lO.dnem vystaveny periodickému kývání při výšce kyvu 8 mm ' a frekvenci 1 kyv/1 U· Oaa kyvu £ byla' umístěna ' v polovině délky kultivačního vaku 2· 70 skončení inkubace bylo narootlé m°aelium vyjmuuto, opláchnuto vodou, usušeno, zváženo a stanoven obsah alkaloidů· Při inkubaci s periodickým rozvlněním živné půdy bylo proti kontrolán, iikuibovaným po celou dobu v ' klidu, získáno v ' průměru o 14 . jé víoe suché hmotnnoti oyccZia, obsah alkaloidů v myoeliu se zvýšil v průměru o . 55 1' U^oo^t^,·For kutivaci transverse seals were prepared from polyethylene sleeves taJtivační bags 2 0 size 32.5 x 44 om · The bags were met for the second 2500 ml of liquid broth containing 25% tootn. Sao at Aros y and 1% Taotao citeoiunu am ^ ou ^ i ^ it as source of carbon and nitrogen · Onozením surface dimensions flat bottom and fixed R ECKO 'would la resized plooh y levels Pooh dy to 1000 of DEG during TX oz ice h i i y 25 mm · Soil after sterilization by y la in the hl Azena at 'a temperature of 24 ° C and' submerged seeded with vegetative inoculum m, prepare eiým of conidia production strain Clavicepa purpurea CCM'P-725 · Kuutivačií bags' 2 b y L y inkutovány at t EPLO thee 24 ° 0 for 21 days, and 5, d no starting b y ly aerated above the level of soil steriniím air in mužžtví 410 ol / oin. / 1000 om · There were thus prepared six kiutivačiícU of bags 2i, three of them were incubated at rest all the time, the other three were subjected to periodic rocking at a swing height of 8 mm 'and a frequency of 1 kyv / 1 U · 0aaa of the swing £ · 70 end of incubation was removed and rinsed o water, dried, weighed and determined alkaloid content · In incubation with periodic spillage of the broth, an average of 14 was obtained against the control, which was incubated at rest. If the dry weight of the oyccium is more dry, the alkaloid content of the myoelium has increased by an average of. 55 1 'U ^ oo ^ t ^ ·
Příklad 2Example 2
Kultivace byla prováděna na steinéo ' zařízení. jako v přídědu 1· Ke kUtivaci bylo užito suspenzní buněčné kU-tury dru-, hu Vinca roaea, odvozené ze stonkové^ kalusu· p lnění stejiéCultivation was carried out on a stein device. as prided 1 · kUtivaci was used to suspension cell Ku-ture dru- HU Vi NCA ROAE about dvozené of stem callus ^ · M EETING you Jié
231 615 jak je uvedeno v příkladu 1, doba kultivace 14 dní při teplotě 24 °C v mediu se 3 % hmotn. sacharoey a 2.10“6 M kyseliny 2,4-dichlorfenojyoctové /T.Muuashige, F.Skoog, Physšol. Plant. 15, 473» 1962/. Kultivace byla prováděna za stálého kývání při výšce kyvu 4 mm a frekvenci 1 ky/10 sec. · VzdxUjněf no rovněž po celou dobu kultivace vzduchem o objemu 30 ml/min/ 1000 cm2. S inokulem bylo do kultivačního vaku 2» plněnáho 2 500 ml· půdy, vneseno 3 · 10^ bněk/ml. Po skončení kQtlvace bylo nalezeno 35 . 10^ buněk/^·231 615 as shown in Example 1, a culture time of 14 days at 24 ° C in a 3 wt. sacharoey and 2.10 ' 6 M 2,4-dichlorophenoylacetic acid / T. Muuashige, F. Skoog, Physshol. Plant. 15, 473 (1962)]. Cultivation was carried out with constant rocking at a swing height of 4 mm and a frequency of 1 ky / 10 sec. · Excluded also during the whole time of cultivation with air of 30 ml / min / 1000 cm 2 . Inoculum was added to the culture bag 2 »p ln driving systems of 2500 ml · p limbs introduced 3 · 10 ^ bněk / ml. 35 were found after the cessation. 10 ^ cells / ^ ·
Claims (4)
Priority Applications (6)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS995581A CS231615B1 (en) | 1981-12-29 | 1981-12-29 | Method of cultivation of cells of higher organism and device to perform the method |
| FR8220003A FR2519020A1 (en) | 1981-12-29 | 1982-11-29 | PROCESS FOR THE CULTURE OF CELLS OF HIGHER ORGANISMS AND DEVICE FOR CARRYING OUT THIS PROCESS |
| YU273282A YU273282A (en) | 1981-12-29 | 1982-12-10 | Process for the cultivation of cells of higler organisms |
| CH759782A CH658071A5 (en) | 1981-12-29 | 1982-12-28 | METHOD FOR CULTIVATING CELLS OF HIGHER ORGANISMS AND DEVICE FOR CARRYING OUT THIS METHOD. |
| HU422582A HU193483B (en) | 1981-12-29 | 1982-12-29 | Process for cultivating celles of higher organisms and apparatus for the process |
| DE19823248543 DE3248543A1 (en) | 1981-12-29 | 1982-12-29 | Method and device for the culturing of cells of higher organisms |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS995581A CS231615B1 (en) | 1981-12-29 | 1981-12-29 | Method of cultivation of cells of higher organism and device to perform the method |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS231615B1 true CS231615B1 (en) | 1984-12-14 |
Family
ID=5447309
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS995581A CS231615B1 (en) | 1981-12-29 | 1981-12-29 | Method of cultivation of cells of higher organism and device to perform the method |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| CH (1) | CH658071A5 (en) |
| CS (1) | CS231615B1 (en) |
| DE (1) | DE3248543A1 (en) |
| FR (1) | FR2519020A1 (en) |
| HU (1) | HU193483B (en) |
| YU (1) | YU273282A (en) |
Families Citing this family (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3788026T2 (en) * | 1986-08-27 | 1994-04-21 | Kawasumi Lab Inc | Method and device for culturing cells. |
| US5017490A (en) * | 1989-03-10 | 1991-05-21 | Baxter International Inc. | Method for in vitro reproduction and growth of cells in culture medium |
| CH697035A5 (en) * | 1999-05-04 | 2008-03-31 | Marcel Roell | Bioreactor. |
| US7300789B2 (en) | 2002-05-21 | 2007-11-27 | L'oreal | Bioreactor forming a rigid vessel |
| EA009722B1 (en) * | 2003-11-18 | 2008-02-28 | Нестек С.А. | System for cell culture |
| FR2866655B1 (en) * | 2004-02-20 | 2007-05-11 | Cesco Bioengineering Co Ltd | APPARATUS AND METHOD FOR THE PREPARATION AND CULTIVATION OF CELLS |
| BE1016454A6 (en) * | 2005-02-17 | 2006-11-07 | Ben Kunnen | Method for building a customer base for dealers, businessmen, the self-employed and the like. |
| US8603805B2 (en) | 2005-04-22 | 2013-12-10 | Hyclone Laboratories, Inc. | Gas spargers and related container systems |
| KR20080072006A (en) | 2005-11-01 | 2008-08-05 | 가부시키가이샤 메디넷 | Shaking apparatus for cell culture and shaking culture method as cell culture method |
| US20110014689A1 (en) * | 2008-11-18 | 2011-01-20 | Ravindranath Gandlur | Disposable Bio-Reactor System |
| US9376655B2 (en) | 2011-09-29 | 2016-06-28 | Life Technologies Corporation | Filter systems for separating microcarriers from cell culture solutions |
| CN104114266B (en) | 2011-09-30 | 2016-12-14 | 生命科技股份有限公司 | Container with membrane sprayer |
| DK2800805T3 (en) * | 2012-01-04 | 2016-06-20 | Strix Beheer B V | Method and apparatus for culturing cells |
| DE102014105472B4 (en) * | 2014-04-16 | 2016-03-17 | Sartorius Stedim Biotech Gmbh | Mixing and thawing device |
| US9079690B1 (en) | 2014-06-26 | 2015-07-14 | Advanced Scientifics, Inc. | Freezer bag, storage system, and method of freezing |
| DE102015119756B3 (en) | 2015-11-16 | 2016-11-17 | Sartorius Stedim Biotech Gmbh | Mixing device for mixing a bioreactor comprising a synchronization device |
| JP2017184716A (en) * | 2016-03-31 | 2017-10-12 | 東洋製罐グループホールディングス株式会社 | Cell culture containers, supporting jigs for cell culture containers, and cell culture methods |
| ES2824924T3 (en) * | 2016-10-28 | 2021-05-13 | Global Life Sciences Solutions Usa Llc | Bioreactor tray |
| US10589197B2 (en) | 2016-12-01 | 2020-03-17 | Life Technologies Corporation | Microcarrier filter bag assemblies and methods of use |
| EP3784767A1 (en) * | 2018-04-25 | 2021-03-03 | Global Life Sciences Solutions USA LLC | Inflatable bioreactor and method of use |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE845484C (en) * | 1946-10-26 | 1952-07-31 | Raytheon Mfg Co | Process for accelerating the growth of microorganisms by means of pressure wave treatment |
| CH326434A (en) * | 1955-01-25 | 1957-12-31 | Guiochon Pierre Frederic Henri | Method and container for the production of cultures of lower organisms and of tissues, in particular of the mycelium of fungi |
| DE2128744C3 (en) * | 1971-06-09 | 1979-03-29 | Max-Planck-Gesellschaft Zur Foerderung Der Wissenschaften E.V., 3400 Goettingen | Process for the mass cultivation of cells and tissues |
| CS172552B1 (en) * | 1974-12-29 | 1977-01-28 |
-
1981
- 1981-12-29 CS CS995581A patent/CS231615B1/en unknown
-
1982
- 1982-11-29 FR FR8220003A patent/FR2519020A1/en active Granted
- 1982-12-10 YU YU273282A patent/YU273282A/en unknown
- 1982-12-28 CH CH759782A patent/CH658071A5/en not_active IP Right Cessation
- 1982-12-29 HU HU422582A patent/HU193483B/en not_active IP Right Cessation
- 1982-12-29 DE DE19823248543 patent/DE3248543A1/en active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FR2519020B1 (en) | 1985-05-03 |
| DE3248543C2 (en) | 1988-02-04 |
| YU273282A (en) | 1985-10-31 |
| DE3248543A1 (en) | 1983-07-14 |
| FR2519020A1 (en) | 1983-07-01 |
| CH658071A5 (en) | 1986-10-15 |
| HU193483B (en) | 1987-10-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CS231615B1 (en) | Method of cultivation of cells of higher organism and device to perform the method | |
| US20050186669A1 (en) | Apparatus and method for preparing and culturing cells | |
| EP0197299B1 (en) | Method and apparatus for carrying out cell culture | |
| US3853712A (en) | Cell culture systems | |
| EP0433463B1 (en) | Rotary culture device | |
| US7033823B2 (en) | Cell-cultivating device | |
| CN1882681B (en) | System for cell culture | |
| US5510257A (en) | Hollow fiber immobilization with chopped microporous hollow fibers | |
| US6593128B1 (en) | Method for culturing ciliates | |
| US5432087A (en) | Apparatus having rotatable planar trays for culturing microorganisms | |
| EP3907274A1 (en) | Bioreactor and method for the production of adherent cell cultures employing said bioreactor | |
| TWI270576B (en) | Cell-cultivating device and method | |
| CN1121135C (en) | Inoculation method and special apparatus for plant tissue cell culture | |
| Murdin et al. | Growth and metabolism of hybridomas immobilized in packed beds: comparison with static and suspension cultures | |
| CN1203943A (en) | Airlift cyclic immersion lighting plant cell tissue organ culture method and culture reactor | |
| ES2204316B1 (en) | PROCEDURE FOR OBTAINING BIOCAPSULAR OF LEAVES, BIOCAPSULES AS WELL OBTAINED AND APPLICATIONS. | |
| CN112250194A (en) | Method for removing nutritive salt in water in situ and application thereof | |
| RU2021350C1 (en) | Installation for cultivation of cells or microorganisms | |
| RU2021349C1 (en) | Installation for cultivation of biological objects | |
| JPS633592B2 (en) | ||
| Sun et al. | Characteristics of immobilized Rhizopus oryzae in polyurethane foam cubes | |
| WO2025072491A1 (en) | Bioprocessing system for de novo tissue generation and applications thereof | |
| SU1047954A1 (en) | Device for cultivating microprganisms with filament-sponge structure | |
| HK40060587A (en) | Bioreactor and production process of adherent cell cultures that uses the bioreactor | |
| SU1386652A1 (en) | Apparatus for cultivating confervoid mushrooms |