JPS633592B2 - - Google Patents
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- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、細胞組織の培養における細胞組織の
密度を所定の範囲にコントロールすることがで
き、それによつて細胞組織の増殖を効率的に行な
わせることができる細胞組織の培養槽に関する。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION The present invention provides a method for culturing cell tissues in which the density of cell tissues can be controlled within a predetermined range, thereby allowing efficient proliferation of cell tissues. Regarding culture tanks.
本明細書における「培養容積」は、与えられた
量の細胞組織が培養液中で攪拌されて、移動しな
がら培養される容積であり、培養液中に仕切を設
けて区画された部分の容積であることができる。
また「培養容積範囲」は、与えられた細胞組織
が、その増殖するのに必要な細胞組織の密度を維
持しながら培養される容積の範囲であつて、培養
容積と同様に、培養液中に仕切を設けて区画され
た部分の容積であることができるが、細胞組織が
増殖するのに必要な細胞組織の密度は、或る範囲
の数値を有するから、これを維持するのに必要な
培養容積範囲もこれに対応する範囲の数値を有す
ることになるのである。 "Culture volume" as used herein refers to the volume in which a given amount of cell tissue is stirred in a culture solution and cultured while moving, and the volume of a section divided by providing a partition in the culture solution. can be.
In addition, the "culture volume range" is the volume range in which a given cell tissue is cultured while maintaining the density of the cell tissue necessary for its proliferation. It can be the volume of a partitioned area, but since the density of cell tissue required for cell tissue to proliferate has a certain range of values, the culture required to maintain it The volume range will also have a corresponding range of numerical values.
微生物を培養し、それによつて特定の物質を微
生物の菌体または培養物中に蓄養することになる
その特定の物質を生産する方法の発明は、各種の
抗生物質、アミノ酸またはビタミンなどの製造方
法として、以前より開発され、そして広く知られ
るようになつている。このために大量の微生物を
培養する方法が開発された。大量の微生物を培養
するのに、培養液にに空気または酸素を吹き込む
と同時に、培養液を激しく攪拌して、微生物の菌
体と空気または酸素との接触および微生物の菌体
と培養液の栄養源との接触を良好に保つことが広
く知られている。
The invention of a method for producing a specific substance by culturing microorganisms and thereby cultivating the specific substance in the cells or culture of the microorganism is a method for producing various antibiotics, amino acids, vitamins, etc. It has been developed for some time and is becoming widely known. For this purpose, a method for culturing large amounts of microorganisms was developed. To cultivate a large amount of microorganisms, air or oxygen is blown into the culture solution, and at the same time, the culture solution is vigorously stirred to bring the microorganisms into contact with air or oxygen and to reduce nutrients between the microorganisms and the culture solution. It is widely known to maintain good contact with the source.
最近、動物の細胞組織を培地に接種し、培養す
ることによつて、動物の細胞組織を増殖させる方
法が行なわれるようになり、また植物の細胞組織
を培地に接種し、培養することによつて、その植
物の細胞組織を増殖させる方法もよく行なわれる
ようになつてきた。特に植物の細胞組織の場合、
植物の細胞組織に含まれる物質、たとえば、アル
カロイド、ステロイド、テルペノイド、キノンま
たは色素配糖体などの物質を植物の細胞組織の培
養による増殖によつて生産することが試みられ
た。しかしながら動物の細胞組織および植物の細
胞組織は、いずれも多細胞系であるために、その
培養において、微生物の培養と同様に激しい攪拌
を行なうと、細胞組織が衝突して損傷することが
多くなるという傾向がある。このために、動物の
細胞組織または植物の細胞組織の培養において、
攪拌羽根や攪拌翼等の機械的攪拌を伴なわない空
気の吹き込みによつて培養液を攪拌することが行
なわれた。たとえばWagnerは、ヤエヤマアオキ
(Morinda citrifolia)の細胞組織の培養によつ
てアントラキノン類を生産する場合に、丸底型の
培養槽に通気管(空気送入管)をその底近くに開
口し、この通気管から空気を培養液の底に供給
し、供給された空気泡の上昇(エアーリフト)に
よつて培養液を攪拌するとともに、培養液に酸素
を補給することを行なつた。また橋本らは、同様
な装置によつて、シコニンの生産を、またSmart
らも、同様な装置によつて、セルペンチンの生産
を行なつた。 Recently, methods have been used to proliferate animal cell tissues by inoculating animal cell tissues into a medium and culturing them. As a result, methods of propagating the cell tissues of plants have also become popular. Especially in the case of plant tissue,
Attempts have been made to produce substances contained in plant cell tissues, such as alkaloids, steroids, terpenoids, quinones, or pigment glycosides, by propagating plant cell tissues in culture. However, since both animal and plant cell tissues are multicellular, if they are cultured with vigorous agitation, similar to the culture of microorganisms, the cell tissues will often collide and be damaged. There is a tendency. For this purpose, in culturing animal or plant tissue,
The culture solution was stirred by blowing air without mechanical stirring using a stirring blade or stirring blade. For example, when producing anthraquinones by culturing the cell tissue of Morinda citrifolia, Wagner established that a ventilation tube (air supply tube) was opened near the bottom of a round-bottomed culture tank. Air was supplied from the trachea to the bottom of the culture solution, and the rise of the supplied air bubbles (air lift) stirred the culture solution and supplied oxygen to the culture solution. Hashimoto et al. also used a similar device to produce shikonin.
They also produced serpentin using a similar device.
本発明者らは、ラウオルフイア属に属する植物
の細胞組織の培養によるレセルピンの生産を企図
して、丸底の培養槽に通気管を、その底部の近く
に開口するように取り付け、その培養槽におい
て、その植物の細胞組織の培養を試みたが、培養
液中の細胞組織の密度が高過ぎる場合およびその
密度が低過ぎる場合のいずれの場合も、植物のの
細胞組織の増殖が思わしくないことを知見した。
そして植物の細胞組織が培養液中の通気攪拌培養
によつて順調に生育するには、適当な細胞密度に
おいて培養することを必要とすることがわかつ
た。すなわち、一定量の植物の細胞組織がある場
合、これを適正な細胞密度において培養しようと
すると、その一定量の細胞組織を培養するのに必
要な培養液の容積があるが、本発明者らは、一定
量の細胞組織を培養するのに必要な培養液の容積
は、培養槽内にある培養液内に適当な仕切を設け
ることによつて、確保することができ、それによ
つて細胞組織の増殖を順調に行なわせることを見
出し、この知見に基づいて本発明に到達した。 The present inventors intended to produce reserpine by culturing cell tissues of plants belonging to the genus Rauolphia, and installed a ventilation pipe in a round-bottomed culture tank so as to open near the bottom of the culture tank. , tried culturing the cell tissue of the plant, but found that the proliferation of the cell tissue of the plant was undesirable, both when the density of the cell tissue in the culture solution was too high and when the density was too low. I found out.
It has also been found that in order for plant cell tissues to grow smoothly by aeration and agitation culture in a culture solution, it is necessary to culture them at an appropriate cell density. In other words, when there is a certain amount of plant cell tissue and we try to culture it at an appropriate cell density, there is a volume of culture solution necessary to culture that certain amount of cell tissue. The volume of the culture solution required to culture a certain amount of cell tissue can be secured by providing an appropriate partition in the culture solution in the culture tank. The present invention was based on this finding.
本発明の目的は、培養槽内における培養容積を
任意に区画し、その区画において、与えられた植
物の細胞組織を培養することができる培養槽を提
供することにある。
An object of the present invention is to provide a culture tank in which the culture volume within the culture tank can be arbitrarily divided and cell tissues of a given plant can be cultured in the compartments.
本発明は、培養槽の底部の近くに開口する通気
管および排気口を有するエアーリフト攪拌式の培
養槽において、その取り付け軸に沿つて移動する
ことができるガイド板を取り付け、その移動によ
つて、細胞組織の培養容積を任意に増殖すること
ができることを特徴とする培養槽である。本発明
の培養槽において、ガイド板は、培養槽内の培養
液を区画し、その区画内において細胞組織の培養
を行なわせることができる仕切の1つであつて、
このガイド板は、取り付け軸(場合により、通気
管であることもできる)に沿つてスライドし、移
動することができ、それによつて、細胞組織の培
養を行なわせる区画の容積(培養容積)を増殖す
ることができるものである。また本発明の培養槽
におけるガイド板の移動と固定を、培養槽の外側
に取り付けたガイド板の昇降および固定装置によ
つて行なわせることができ、それによつて培養さ
れる細胞組織の増殖を順調に行なわせることがで
きる。 The present invention provides an air lift agitation type culture tank having a ventilation pipe and an exhaust port that open near the bottom of the culture tank. , a culture tank characterized by being able to arbitrarily increase the culture volume of cell tissue. In the culture tank of the present invention, the guide plate is one of the partitions that can partition the culture solution in the culture tank and allow cell tissue to be cultured within the partition,
This guide plate can be slid and moved along the mounting axis (optionally also a vent tube), thereby increasing the volume of the compartment in which the tissue is to be cultured (cultivation volume). It is something that can multiply. Furthermore, the movement and fixation of the guide plate in the culture tank of the present invention can be carried out by the lifting and lowering of the guide plate and the fixing device attached to the outside of the culture tank, thereby ensuring smooth growth of the cell tissue to be cultured. can be made to do so.
またガイド板を逆ワン型の形状とし、それによ
つて、エアーリフト攪拌によつて培養した場合、
逆ワン型のガイド板の内側に、培養液の深部に空
気(酸素)を供給する空気層を形成しうるように
することもできる。 In addition, when the guide plate is shaped like an inverted one, and culture is carried out by air lift agitation,
It is also possible to form an air layer inside the inverted one-type guide plate to supply air (oxygen) to the deep part of the culture solution.
本発明の培養槽の一例を図面によつて説明す
る。
An example of the culture tank of the present invention will be explained with reference to the drawings.
第1図は、本発明の培養槽の一例の断面を示す
側面図、第2図および第3図は、本発明の培養槽
の他の例の一部を切欠いてその断面を示す側面
図、第4図は、第1図および第3図に示した本発
明の培養槽の一例の平面図、そして第5図は、第
2図に示した本発明の培養槽の一例の平面図であ
る。 FIG. 1 is a side view showing a cross section of an example of the culture tank of the present invention, FIGS. 2 and 3 are side views showing a cross section of another example of the culture tank of the present invention with a part cut away, FIG. 4 is a plan view of an example of the culture tank of the present invention shown in FIGS. 1 and 3, and FIG. 5 is a plan view of an example of the culture tank of the invention shown in FIG. .
第1図において、1は培養槽、2は培養槽1の
半球状の底部、3は培養槽1の蓋、そして4は、
培養槽1に空気を供給する通気管であつて、その
一方の端部は培養槽1の底部2の近くに開口し、
その他方の端部は、通常、滅菌装置(図示なし)
を通じて空気供給装置〔図示なし、たとえば、圧
縮空気溜、空気圧縮機(コンプレツサー)または
送風機など〕に接続し、この空気供給装置から培
養槽1の底部2の近くに空気が供給され、その空
気が培養液中を上昇することによつて培養液が攪
拌される(エアーリフトによる攪拌)。5は原材
料の供給口、6は排気管、7は排気管6の管系に
取り付けられたフイルター、そして8は通気管4
の管系のバルブである。また9は、培養槽1の内
部の通気管4に、上下にスライドして移動できる
ように取り付けられたガイド板、そして10は、
ガイド板9の通気管4への取り付け部であつて、
上下にスライドして移動することができるように
なつている。さらに11は、ガイド板9を上下に
動かすとともに、所定の位置に固定する昇降装
置、12は、ガイド板9を昇降装置11によつて
上下に動かし、所定の位置に固定するための連結
棒、そして13は、通気管4および連結棒12の
軸封部分である。 In FIG. 1, 1 is the culture tank, 2 is the hemispherical bottom of the culture tank 1, 3 is the lid of the culture tank 1, and 4 is the
A ventilation pipe for supplying air to the culture tank 1, one end of which opens near the bottom 2 of the culture tank 1,
The other end is typically a sterilizer (not shown)
is connected to an air supply device (not shown, for example, a compressed air reservoir, an air compressor, or a blower) through which air is supplied near the bottom 2 of the culture tank 1, and the air is The culture solution is stirred by rising in the culture solution (agitation by air lift). 5 is a raw material supply port, 6 is an exhaust pipe, 7 is a filter attached to the pipe system of the exhaust pipe 6, and 8 is a ventilation pipe 4.
This is a valve in the pipe system. Further, 9 is a guide plate attached to the ventilation pipe 4 inside the culture tank 1 so as to be able to slide up and down, and 10 is a
An attachment portion of the guide plate 9 to the ventilation pipe 4,
It can be moved by sliding up and down. Furthermore, 11 is a lifting device for moving the guide plate 9 up and down and fixing it in a predetermined position; 12 is a connecting rod for moving the guide plate 9 up and down by the lifting device 11 and fixing it in a predetermined position; 13 is a shaft sealing portion of the ventilation pipe 4 and the connecting rod 12.
第2図において、1は培養槽、2は培養槽1の
円頭角錐状の底部、3は培養槽1の蓋、そして4
は、培養槽1に空気を供給する通気管であつて、
第1図の培養槽と同様に、その一端は培養槽1の
底部の近くに開口し、その他端は、通常、滅菌装
置(図示なし)を通じて空気供給装〔図示なし、
たとえば、圧縮空気溜、空気圧縮機(コンプレツ
サー)または送風機など〕に接続し、この空気供
給装置から培養槽1の底部近くに空気が供給さ
れ、その空気が培養液中を上昇することによつて
培養液が攪拌される。5は原材料の供給口、6は
排気管、7は排気管6の管系のフイルター、そし
て8は通気管4の管系のバルブである。また9
は、培養槽1の内部の通気管4に、その取り付け
部10のスライドによつて上下しうるように取付
けられたガイド板、そして14はガイド板9を適
当な位置に固定するネヂである。 In Fig. 2, 1 is the culture tank, 2 is the conical pyramid-shaped bottom of the culture tank 1, 3 is the lid of the culture tank 1, and 4 is the lid of the culture tank 1.
is a ventilation pipe that supplies air to the culture tank 1,
Similar to the culture tank of FIG. 1, one end thereof opens near the bottom of the culture tank 1, and the other end is connected to an air supply system (not shown), usually through a sterilizer (not shown).
For example, by connecting to a compressed air reservoir, an air compressor, or a blower, air is supplied from this air supply device to near the bottom of the culture tank 1, and the air rises in the culture solution. The culture solution is stirred. Reference numeral 5 designates a raw material supply port, 6 an exhaust pipe, 7 a filter in the exhaust pipe 6 pipe system, and 8 a valve in the ventilation pipe 4 pipe system. Also 9
1 is a guide plate that is attached to the ventilation pipe 4 inside the culture tank 1 so that it can be moved up and down by sliding the attachment part 10 thereof, and 14 is a screw that fixes the guide plate 9 in an appropriate position.
第3図において、1は培養槽、2は培養槽1の
円頭角維状の底部、3は培養槽1の蓋、そして4
は、培養槽1に空気を供給する通気管であつて、
第1図および第2図の培養槽と同様に空気供給装
置(図示なし)から空気が供給される。5は原材
料の供給口、6は排気管、7は排気管6の管系の
フイルター、そして8は、排気管4の管系のバル
ブである。また9は、培養槽1の内部の通気管4
に、その取り付け部10のスライドによつて上下
しうるように取り付けられた逆ワン形のガイド
板、11は、第1図の培養槽と同様に、ガイド板
9を上下に動かすとともに、所定の位置に固定す
る昇降装置、12は、同様に、ガイド板9を昇降
装置11によつて上下に動かし、所定の位置に固
定するための連結棒、そして13は、通気管4お
よび連結棒12の軸封部分である。さらに15
は、培養槽1の培養生成物の取り出し口である。 In Fig. 3, 1 is the culture tank, 2 is the round-shaped fiber-shaped bottom of the culture tank 1, 3 is the lid of the culture tank 1, and 4 is the lid of the culture tank 1.
is a ventilation pipe that supplies air to the culture tank 1,
Air is supplied from an air supply device (not shown) in the same way as in the culture tank shown in FIGS. 1 and 2. 5 is a raw material supply port, 6 is an exhaust pipe, 7 is a filter in the pipe system of the exhaust pipe 6, and 8 is a valve in the pipe system of the exhaust pipe 4. Further, 9 is a ventilation pipe 4 inside the culture tank 1.
1, an inverted one-shaped guide plate 11 attached so as to be able to move up and down by sliding the attachment part 10 moves the guide plate 9 up and down, as in the culture tank shown in FIG. A lifting device 12 similarly moves the guide plate 9 up and down by the lifting device 11, and a connecting rod 13 fixes the guide plate 9 in a predetermined position. This is the shaft seal part. 15 more
is an outlet for taking out the culture product of the culture tank 1.
第6図において、1は培養槽、2は培養槽1の
円頭角錐状の底部、3は培養槽1の蓋、そして4
は、培養槽1に空気を供給する通気管であつて、
第1図および第2図の培養槽と同様に空気供給装
置(図示なし)から空気が供給される。5は原材
料の供給口、6は排気管、7は排気管6の管のフ
イルター、そして8は、通気管4の管系のバルブ
である。また9は、培養槽1の内部の通気管4
に、その取り付け部10のスライドによつて上下
しうるように取り付けられた3個の逆ワン形状の
ガイド板、そして14は逆ワン形状のガイド板9
を適当な位置に固定するネヂである。 In Fig. 6, 1 is the culture tank, 2 is the conical pyramid-shaped bottom of the culture tank 1, 3 is the lid of the culture tank 1, and 4 is the lid of the culture tank 1.
is a ventilation pipe that supplies air to the culture tank 1,
Air is supplied from an air supply device (not shown) in the same way as in the culture tank shown in FIGS. 1 and 2. 5 is a raw material supply port, 6 is an exhaust pipe, 7 is a filter for the exhaust pipe 6, and 8 is a valve for the ventilation pipe 4. Further, 9 is a ventilation pipe 4 inside the culture tank 1.
, three inverted one-shaped guide plates are attached so as to be able to move up and down by sliding the attachment part 10, and 14 is an inverted one-shaped guide plate 9.
It is a screw that fixes it in an appropriate position.
本発明の培養槽において、培養槽1の水平断面
の形状は、第4図および第5図に示すとおり、円
形および四角形のいずれの形状であつてもよい
が、さらに他の多角形状であつてよい。また培養
槽1の底部の形状は、第1図、第2図および第3
図に示すとおり、半球状および円頭角錐状をいず
れであつてもよいが、空気の送入による培養液の
攪拌ができる形状である限り、いかなる形状であ
つてもよい。さらに、培養生成物の取り出しは培
養槽1の蓋3を開けることによつて行なれるが、
培養槽1の底部に培養生成物の取り出し口15を
設け、培養槽1の蓋3を開けることなく、この取
り出し口15から培養生成物を取り出すこともで
きる。さらにまたガイド板9の形状は、第1図お
よび第2図に示すとおりの平板形状であつてもよ
いが、第3図に示すとおりの逆ワン形であつて、
その上面は、周囲に向つて傾斜し、上面に落下し
た材料を周囲の隙間から下方の培養容積部分に落
せるような形状にすることもできる。ガイド板9
の形状を第3図に示すとおりの逆ワン形状にする
と、エアーリフト攪拌を行なう培養において、第
3図および第6図に示すとおりの空気層16が培
養槽1の底部2の上部に形成されるが、この空気
層16から培養槽1の底部2の培養容積部分に空
気が供給されるので、酸素の要求量の大きい細胞
組織であつても、細胞を破壊することなく、液体
培地において培養することができる利点を生ず
る。さらになおガイド板9を所定の位置に移動
し、そして固定するために、第2図に示すとお
り、通気管4にネヂ14で止めるようにすること
ができるだけでなく、ガイド板9に連結棒12を
取り付け、この連結棒12によるガイド板9の昇
降および固定をするための昇降装置11を培養槽
1の蓋3の上に設けることもできる。この場合、
通気管4および連結棒12の軸封部分13を取り
付けることが好ましい。 In the culture tank of the present invention, the horizontal cross-sectional shape of the culture tank 1 may be either circular or quadrangular as shown in FIGS. 4 and 5, but may also be other polygonal shapes. good. The shape of the bottom of the culture tank 1 is shown in Figures 1, 2 and 3.
As shown in the figure, the shape may be either hemispherical or pyramidal, but any shape may be used as long as the culture solution can be stirred by introducing air. Furthermore, the culture product can be taken out by opening the lid 3 of the culture tank 1;
A culture product take-out port 15 is provided at the bottom of the culture tank 1, and the culture product can be taken out from the take-out port 15 without opening the lid 3 of the culture tank 1. Furthermore, the shape of the guide plate 9 may be a flat plate shape as shown in FIGS. 1 and 2, or may be an inverted one-shaped shape as shown in FIG.
The upper surface may be sloped towards the periphery and shaped to allow material falling onto the upper surface to fall through the peripheral gap into the culture volume below. Guide plate 9
When the shape of the culture tank is made into an inverted one-shape as shown in FIG. 3, an air layer 16 as shown in FIGS. However, since air is supplied from this air layer 16 to the culture volume at the bottom 2 of the culture tank 1, even if the cell tissue has a high oxygen demand, it can be cultured in a liquid medium without destroying the cells. This gives rise to advantages that can be achieved. Furthermore, in order to move and fix the guide plate 9 in place, it is possible not only to fasten it to the ventilation pipe 4 with screws 14, but also to attach the connecting rod 12 to the guide plate 9, as shown in FIG. It is also possible to install a lifting device 11 on the lid 3 of the culture tank 1 for lifting and fixing the guide plate 9 using the connecting rod 12. in this case,
Preferably, the shaft sealing portion 13 of the ventilation pipe 4 and the connecting rod 12 is attached.
本発明の培養槽を使用して細胞の培養を行なう
場合、培養槽1の蓋3を開け、予め滅菌処理をし
た培養液および種細胞を培養槽1に装入する。こ
の種細胞の使用量と予め実験的に求められた培養
容積範囲から、その種細胞の順調な生育に必要な
培養槽の培養容積を算出し、この培養容積が得ら
れるように、ガイド板9の位置を算出して、通気
管4におけるその位置にガイド板9を固定した
後、培養槽1の蓋3を閉じ、通気管4から空気を
培養槽1に吹き込み、それによつて培養液への空
気の補給と培養液の攪拌を行なつて、培養を開始
する。第1図および第3図に示す培養槽1のよう
に、ガイド板9の移動および固定を培養槽1の蓋
3の上の昇降装置11で行なうことができる場合
は、培養槽1の蓋3を開けることなく、培養液と
種細胞を原材料の供給口5から培養槽1に装入
し、必要ならば培養槽1を小刻みに揺すつて装入
した全部の種細胞をガイド板9の下に落し込み、
そしてガイド板9を所定の位置に移動し、固定し
た後に、通気管4から空気を培養槽1に送入し
て、同様に培養を開始することもできる。培養を
開始してから1〜2日後に、細胞が増殖し、それ
によつて細胞の量が培養容積範囲を超え、細胞の
順調な生育に必要な培養容積が増大するので、そ
の時、この培養容積が得られるように、ガイド板
9の位置を算出し、その位置までガイド板9を引
き上げ固定する。そして通気管4から空気を培養
槽1に送入して培養を開始する。第2図の培養槽
の場合、ガイド板9の移動と固定を培養槽1の蓋
3を開けて行なつた後、培養槽1の蓋3を閉じて
培養を再開するが、第1図および第3図の培養槽
のように、培養槽1の外でガイド板9の移動と固
定を行なうことができる装置の場合は、ガイド板
9の移動と固定を培養槽1の蓋3を開けることな
く行ない、直ちに培養を再開することができる。
さらに1〜2日後に、細胞が増殖した時、前述の
ガイド板9の引き上げと固定および培養槽1への
空気の送入による培養の再開を繰り返し、さらに
細胞の増殖によるガイド板9の引き上げと固定お
よび空気の培養槽1への送入による培養の開始
を、細胞の増殖による培養容積の増大が培養槽1
の容積の限度に達するまで繰り返して、増殖した
細胞を収得する。第1図および第2図の培養槽の
ように培養生成物の取り出し口15のない場合
は、培養槽1の蓋3を開いて増殖した細胞を取り
出すが、第3図の培養槽のように培養生成物の取
り出し口15がある場合は、この取り出しし口1
5から増殖した細胞を培養液とともに取り出し、
増殖した細胞を収得する。 When culturing cells using the culture tank of the present invention, the lid 3 of the culture tank 1 is opened, and culture solution and seed cells that have been sterilized in advance are charged into the culture tank 1. From the amount of seed cells to be used and the culture volume range experimentally determined in advance, the culture volume of the culture tank required for the smooth growth of the seed cells is calculated, and the guide plate 9 is set so that this culture volume can be obtained. After calculating the position of and fixing the guide plate 9 at that position in the ventilation pipe 4, the lid 3 of the culture tank 1 is closed, and air is blown into the culture tank 1 from the ventilation pipe 4, thereby blowing into the culture solution. Start culturing by supplying air and stirring the culture solution. When the guide plate 9 can be moved and fixed by the lifting device 11 on the lid 3 of the culture tank 1, as in the case of the culture tank 1 shown in FIGS. 1 and 3, the lid 3 of the culture tank 1 Charge the culture solution and seed cells into the culture tank 1 from the raw material supply port 5 without opening the tank, and if necessary, shake the culture tank 1 little by little to transfer all the loaded seed cells under the guide plate 9. Falling into
After moving the guide plate 9 to a predetermined position and fixing it, air can be introduced into the culture tank 1 from the ventilation pipe 4 to start culturing in the same manner. One to two days after starting the culture, the cells will proliferate and the amount of cells will exceed the culture volume range, increasing the culture volume required for the smooth growth of the cells. The position of the guide plate 9 is calculated so that the position of the guide plate 9 is obtained, and the guide plate 9 is pulled up and fixed to that position. Then, air is introduced into the culture tank 1 from the ventilation pipe 4 to start culturing. In the case of the culture tank shown in Fig. 2, the guide plate 9 is moved and fixed by opening the lid 3 of the culture tank 1, and then the lid 3 of the culture tank 1 is closed to restart the culture. In the case of a device such as the culture tank shown in FIG. 3, in which the guide plate 9 can be moved and fixed outside the culture tank 1, the guide plate 9 can be moved and fixed by opening the lid 3 of the culture tank 1. The culture can be restarted immediately.
After another 1 to 2 days, when the cells have proliferated, the above-mentioned lifting and fixing of the guide plate 9 and resumption of culture by introducing air into the culture tank 1 are repeated, and then the guide plate 9 is pulled up and fixed as the cells proliferate. The culture is started by fixing and introducing air into the culture tank 1, and the culture volume increases due to cell proliferation.
Repeat until the volume limit is reached to obtain proliferated cells. In cases where there is no outlet 15 for taking out the culture product, such as in the culture tank shown in FIGS. 1 and 2, the lid 3 of the culture tank 1 is opened to take out the grown cells, but as in the case of the culture tank shown in FIG. If there is a culture product outlet 15, this outlet 1
Take out the cells grown from 5 together with the culture medium,
Obtain the proliferated cells.
本発明の培養槽およびこれを使用した培養装置
は、植物の細胞組織の培養に使用できるだけでな
く、他の多細胞系の細胞組織、たとえば、動物の
細胞組織の培養に好適に使用され、また微生物の
培養にも使用することができる。 The culture tank of the present invention and the culture device using the same can not only be used for culturing plant cell tissues, but also suitably used for culturing other multicellular cell tissues, such as animal cell tissues. It can also be used for culturing microorganisms.
本発明の培養槽は、その培養容積を任意に変更
することができるので、細胞組織の培養中に、そ
の培養容積を、細胞組織の順適な生育および増殖
に必要な範囲(培養容積範囲)に調整することが
でき、それによつて、細胞組織の増殖を効率的に
行なうことができる。
Since the culture tank of the present invention can arbitrarily change its culture volume, during the culture of cell tissues, the culture volume can be adjusted to a range necessary for the appropriate growth and proliferation of cell tissues (culture volume range). This allows for efficient cell tissue proliferation.
また本発明の培養槽は、逆ワン形状のガイド板
を取り付けているので、エアーリフト攪拌を行な
いながら培養をする場合、培養槽の深部に空気層
を生じ、この空気層から酸素を培養槽の深部に供
給することができる。またこのガイド板の上面は
周辺に向つて傾斜しているので、たとえエアーリ
フトによつて軽い細胞組織が培養容積部分の外の
ガイド板上に上げられたとしても、ガイド板の下
の培養容積部分に落すことができる。 In addition, the culture tank of the present invention is equipped with an inverted one-shaped guide plate, so when culturing is carried out while performing air lift agitation, an air layer is created in the deep part of the culture tank, and oxygen is transferred from this air layer to the culture tank. Can be supplied deep. In addition, the top surface of this guide plate is sloped toward the periphery, so even if light cell tissue is lifted onto the guide plate outside the culture volume by air lift, the culture volume below the guide plate is It can be dropped into parts.
第1図は、本発明の培養槽の一例の断面を示す
側面図、第2図および第3図は、他の例の一部を
切欠いてその断面を示す側面図、第4図は、第1
図および第3図に示した本発明の培養槽の一例の
平面図、第5図は、第2図に示した他の平面図、
そして第6図は、本発明の他の一例の一部を切欠
いてその断面を示す側面図である。
図面符号、1:培養槽、2:培養槽1の底部、
3:培養槽1の蓋、4:通気管、5:原材料の供
給口、6:排気管、7:排気管6の管系のフイル
ター、8:通気管4の管系のバルブ、9:ガイド
板、10:ガイド板9の取り付け部、11:ガイ
ド板9の昇降装置、12:ガイド板9と昇降装置
11の連結棒、13:軸封部分、14:ガイド板
9を固定するネヂ、15:培養生成物の取り出し
口、16:空気層。
FIG. 1 is a side view showing a cross section of an example of the culture tank of the present invention, FIGS. 2 and 3 are side views showing a cross section of another example with a part cut away, and FIG. 1
FIG. 5 is a plan view of an example of the culture tank of the present invention shown in FIGS.
FIG. 6 is a side view showing a partially cut away cross section of another example of the present invention. Drawing code, 1: Culture tank, 2: Bottom of culture tank 1,
3: Lid of culture tank 1, 4: Ventilation pipe, 5: Raw material supply port, 6: Exhaust pipe, 7: Filter of pipe system of exhaust pipe 6, 8: Valve of pipe system of vent pipe 4, 9: Guide plate, 10: attachment part of guide plate 9, 11: elevating device for guide plate 9, 12: connecting rod between guide plate 9 and elevating device 11, 13: shaft sealing portion, 14: screw for fixing guide plate 9, 15 : Culture product outlet, 16: Air layer.
Claims (1)
排気口を有し、通気管より送入される空気によつ
て培養液を攪拌する培養槽において、その取り付
け軸に沿つて移動しうるガイド板を取り付け、そ
の移動によつて、細胞組織の培養が行なわれる培
養容積を任意に増減することができることを特徴
とする培養槽。 2 ガイド板の取り付け軸が通気管であることを
特徴とする特許請求の範囲第1項に記載の培養
槽。 3 ガイド板の昇降装置が培養槽の蓋の上に取り
付けられ、それによつてガイド板の移動を培養槽
の外側で行なうことを特徴とする特許請求の範囲
第1項または第2項に記載の培養槽。 4 培養槽の底部の近くに開口する通気管および
排気口を有し、通気管より送入される空気によつ
て培養液を攪拌する培養槽において、その取り付
け軸に沿つて移動しうる逆ワン形状のガイド板を
取り付け、その移動によつて、細胞組織の培養が
行なわれる培養容積を任意に増減することができ
るとともに、培養中に培養液の深部に空気層を形
成することができることを特徴とする培養槽。 5 逆ワン形状のガイド板の取り付け軸が通気管
であることを特徴とする特許請求の範囲第4項に
記載の培養槽。 6 逆ワン形状のガイド板の昇降装置が培養槽の
蓋の上に取り付けられ、それによつて逆ワン形状
のガイド板の移動を培養槽の外側で行なうことを
特徴とする特許請求の範囲第4項または第5項に
記載の培養槽。 7 2またはそれ以上の数の逆ワン形状のガイド
板が、その取り付け軸に取り付けられていること
を特徴とする特許請求の範囲第4項ないし第6項
のいずれかに記載の培養槽。[Scope of Claims] 1. In a culture tank that has a ventilation pipe and an exhaust port that open near the bottom of the culture tank and that stirs the culture solution by air introduced from the ventilation pipe, 1. A culture tank, characterized in that a culture tank is equipped with a guide plate that can be moved along with the guide plate, and by moving the guide plate, the culture volume in which cell tissue is cultured can be arbitrarily increased or decreased. 2. The culture tank according to claim 1, wherein the mounting shaft of the guide plate is a ventilation pipe. 3. The device according to claim 1 or 2, characterized in that the guide plate lifting device is mounted on the lid of the culture tank, whereby the guide plate is moved outside the culture tank. Culture tank. 4 In a culture tank that has a ventilation pipe and an exhaust port that open near the bottom of the culture tank and that stirs the culture solution by air introduced from the ventilation pipe, an inverted one that can move along its installation axis. A shaped guide plate is attached, and by moving the guide plate, the culture volume in which cell tissue is cultured can be arbitrarily increased or decreased, and an air layer can be formed deep in the culture medium during culture. Culture tank. 5. The culture tank according to claim 4, wherein the mounting shaft of the inverted one-shaped guide plate is a ventilation pipe. 6. Claim 4, characterized in that the lifting device for the inverted one-shaped guide plate is mounted on the lid of the culture tank, whereby the movement of the inverted one-shaped guide plate is performed outside the culture tank. The culture tank according to item 1 or item 5. 7. The culture tank according to any one of claims 4 to 6, characterized in that two or more inverted one-shaped guide plates are attached to the mounting shaft thereof.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP10749884A JPS60251878A (en) | 1984-05-29 | 1984-05-29 | Cultivation tank |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP10749884A JPS60251878A (en) | 1984-05-29 | 1984-05-29 | Cultivation tank |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS60251878A JPS60251878A (en) | 1985-12-12 |
JPS633592B2 true JPS633592B2 (en) | 1988-01-25 |
Family
ID=14460728
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP10749884A Granted JPS60251878A (en) | 1984-05-29 | 1984-05-29 | Cultivation tank |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS60251878A (en) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5443985A (en) * | 1993-07-22 | 1995-08-22 | Alberta Research Council | Cell culture bioreactor |
US7754478B2 (en) | 2003-12-18 | 2010-07-13 | Kaneka Corporation | Device for cell culture |
JP7416269B2 (en) * | 2020-08-26 | 2024-01-17 | 株式会社島津製作所 | Cell culture vessels and cell culture systems |
-
1984
- 1984-05-29 JP JP10749884A patent/JPS60251878A/en active Granted
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPS60251878A (en) | 1985-12-12 |
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