HU193483B - Process for cultivating celles of higher organisms and apparatus for the process - Google Patents
Process for cultivating celles of higher organisms and apparatus for the process Download PDFInfo
- Publication number
- HU193483B HU193483B HU422582A HU422582A HU193483B HU 193483 B HU193483 B HU 193483B HU 422582 A HU422582 A HU 422582A HU 422582 A HU422582 A HU 422582A HU 193483 B HU193483 B HU 193483B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- carrier
- culture
- cells
- higher organisms
- culturing
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
- C12M23/02—Form or structure of the vessel
- C12M23/14—Bags
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
- C12M23/48—Holding appliances; Racks; Supports
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M27/00—Means for mixing, agitating or circulating fluids in the vessel
- C12M27/16—Vibrating; Shaking; Tilting
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Clinical Laboratory Science (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Abstract
Description
A találmány tárgya eljárás magasabb rendű szervezetek tenyésztésére és berendezés en nek az eljárásnak a megvalósítására.The present invention relates to a process for the cultivation of higher organisms and to an apparatus for carrying out the process.
Ismert, hogy magasabb rendű növényi és ál lati sejtek szuszpenzióinak a tenyésztése — a mikroorganizmusok tenyésztésével összeha sonlítva nemcsak lényegesen hosszabb ide ig tart általában, hanem különleges berendezést is igényel, tekintettel a magasabb rendű sejtek eltérő sajátságaira. Magasabb rendű szerveze tek nem differenciált sejtjei tenyésztésének a hosszabb időtartama a lassúbb ütemű oxigén felhasználással is összhangban van: ennek kő vetkeztében a magasabb rendű sejtek tényé szetei nem igényelnek erőteljes levegőztetést és keverést, ami például szükséges akkor, ha mikroorganizmusokat fermentorokban, süly lyesztett tenyészetekben szaporítanak. Ezzel ellentétben, a tenyésztőfolyadék gyors mozga tása és a keverők alakja következtében fellé pő akadályok a magasabb rendű szervezetek sejtjei a fellépő nyíróerők következtében ősz szehasonlíthatatlanul erősebben károsítják, mint például a rostos gombák esetében; ez a fő oka annak,hogy az általánosan használt termen táló berendezések nem alkalmazhatók a maga sabb rendű sejtek tenyésztésére.It is known that the cultivation of suspensions of higher plant and animal cells - compared to the cultivation of microorganisms - generally takes not only much longer, but also requires special equipment, given the different characteristics of higher cells. The longer duration of culturing non-differentiated cells of higher organisms is also consistent with the slower rate of oxygen utilization: as a result, higher cell facts do not require vigorous aeration and agitation, such as when microorganisms are inoculated in fermentors. In contrast, obstacles due to the rapid movement of the culture fluid and the shape of the agitators result in incomparably greater damage to the cells of higher organisms as a result of the shearing forces applied, such as in the case of fibrous fungi; this is the main reason that commonly used production equipment is not suitable for the cultivation of higher cells.
Mindeddig magasabb rendű szervezetek sejtjeit csak laboratóriumi méretekben, kis fo lyadéktérfogatokban, lombikokban vagy Petri csészékben, vagy egy vízszintes tengely mén tén folyamatosan forgatott lombikokban (az úgynevezett roller berendezésben) lehetett te nyészteniUntil now, cells of higher organisms could only be grown in laboratory sizes, in small fluid volumes, in flasks or petri dishes, or in flasks (so-called roller apparatus) continuously rotated on a horizontal axis.
Ismert egy egyszerű és ipari méretben alkal mazható berendezés aerob mikroorganizmu sok sztacionór (állandó) tenyésztésére a te nyésztőközeg (tenyésztőfolyadék) felületén, amellyel rugalmas és hajlékony, műanyagból készült zsákokat töltenek meg oltás után, e cél ra például polietilénből készült, steril levegővel felfújt zsákokat alkalmaznak, és a tenyésztés során a növekvő tenyészet felületén bevitt le vegővel levegőztetik (172 552 számú csehszlo vák szerzői tanúsítvány).A simple and industrially applicable device for cultivating a large number of aerobic microorganisms on a stationary (permanent) surface of the culture medium (culture fluid) is used to fill flexible and flexible plastic bags after inoculation, for example using polyethylene air-inflated bags , and aerated with air applied to the surface of the growing culture during breeding (Czech Certification No. 172,552).
További kutatás során sikerült igazolni, hogy ez a berendezés csekély módosítással alkal mazható magasabb rendű szervezetek sejt szuszpenzióinak ipari méretekben való te nyésztésére.Further research has shown that this device can be used with minor modifications to grow cell suspensions of higher organisms on an industrial scale.
Ennek alapján a találmány tárgya eljárás magasabb rendű szervezetek sejtjeinek te nyésztésére, például folyékony tenyésztőké zegben, szuszpenzióban való tenyésztésére, különösen hajlékony és/vagy rugalmas falú, elő nyösen zsákalakú, levegőztető gáz és tápanya gok bevitelére alkalmas nyílásokkal ellátott edényekben. A találmány szerinti eljárás abban áll, hogy a tenyésztést a tenyésztőközegnek a tenyésztőzsák legalább egyik oldala folyamatos vagy szakaszos helyzetváltoztatásával keltett hullámmozgás útján végzett folyamatos vagy szakaszos keverése közben hajtjuk végreSUMMARY OF THE INVENTION The present invention relates to a method for culturing cells of higher organisms, for example, in liquid culture medium, in suspension, in particular vessels with flexible and / or elastic wall, preferably with sachet openings for aeration gas and nutrients. The method of the present invention comprises cultivating the culture medium by continuously or intermittently agitating the culture medium by continuous or intermittent movement of the culture bag by changing the position of at least one side of the culture bag.
A találmány egy további tárgya berendezés magasabb rendű szervezetek sejtjeinek tenyésztésére. E berendezés áll egy síkrészből, amelynek felületméretei korlátozottak, vala mint egy mozgatórészből, amely a síkrész lega lább egyik oldalának a helyzetét folyamatosan vagy szakaszosan változtatja.Another object of the present invention is to provide apparatus for culturing cells of higher organisms. This device consists of a plane part having a limited surface dimension and an actuator part which continuously or intermittently changes the position of at least one side of the plane part.
Ez a síkrész el lehet látva továbbá a tenyész tőedény rögzítésére szolgáló eszközökkel, va lamint nyílásokkal és/vagy egyenetlen felülettel és/vagy valamilyen temperáló eszközzel.This flat portion may further be provided with means for securing the breeding vessel, as well as openings and / or uneven surface and / or a tempering means.
A találmány szerinti berendezésre vázlatosan illusztrált példát mutatunk be a csatolt raj zon, az 14. ábrákon, ahol a berendezés több megvalósítási változatát hosszmetszetben mutatjuk be.An exemplary embodiment of the apparatus of the present invention is illustrated in the accompanying drawings, in which FIGS. 14 is a cross-sectional view of several embodiments of the apparatus.
Az 1. ábra mutatja a találmány szerinti berendezés legegyszerűbb megvalósítási forrná ját: a korlátozott felületméretű 7 síkrószt, a 3 mozgatórészt és a 7 tenyésztőedény rögzítésé re szolgáló 2 eszközöket. Az 1 síkrész a 4 ten gely körül elmozdulhat; a 4 tengelyt vagy az 7 síkrész peremei között (l ábra), vagy az 7 sík rész peremén (2.ábra) helyezzük el. A 3. ábra mutatja az5 alakított felülettel ellátott 1 síkrészt; a 4. ábra ábrázolja az 5 alakított felület kombi nálását a 6 nyílásokkal. Az 5 alakított felületen ebben az esetben a síkrészre helyezett, megfe lelően kialakított testet értünk.Figure 1 illustrates the simplest embodiment of the apparatus according to the invention: a flat rope 7 with a limited surface area, an actuator 3 and means 2 for fixing the culture vessel 7. The plane portion 1 may move about the axis 4; the shaft 4 is placed either between the edges of the flat part 7 (Fig. 1) or at the edge of the flat part 7 (Fig. 2). Figure 3 shows a planar portion 1 with a formed surface 5; Figure 4 illustrates the combination of the formed surface 5 with the apertures 6. The formed surface 5 in this case means a properly formed body placed on the flat part.
Az 1 korlátozott felületméretű sikrész, amely a találmány szerinti berendezés alapve tő részét alkotja, és amelyet a továbbiakban rö viden „hordozónak nevezünk, lehet teljesen sík és egyenletes felületű (lásd az 1. és 2. ábrát) vagy 5 egyenetlen felületű, különbözőképpen, szabályosan vagy szabálytalanul kialakított, és el lehet látva a kedvezően kialakított 6 nyílá sokkal (lásd a 3. és 4. ábrát), és szükség esetén - határesetben rács vagy hálóalakú is le hét (ezt nem ábrázoltuk).The limited surface area 1, which forms the essential part of the apparatus of the invention, hereinafter referred to as "carrier", may have a completely flat and even surface (see Figures 1 and 2) or 5 may have an uneven surface, or irregularly formed and may be provided with a well-formed arrow 6 (see Figures 3 and 4) and, if necessary, a lattice or mesh of seven (not shown).
Az 1 hordozónak ezzel a módosításával a 7 tenyésztőzsák fenekének kívánt alakítása elér hető. Egy vagy több, megfelelően kialakított test (ezt részletesen nem ábrázoltuk) ugyanerre a célra szolgálhat, e testeket kívánt esetben egy szerűen az 1 hordozó sík felületére helyez zük.Nyilvánvaló, hogy a 6 nyílások az 7 hordo zón annak 5 megfelelő felületi kialakításával vagy áthelyezhető alakos testekkel kombinál hatók.With this modification of the carrier 1 the desired shape of the bottom of the culture bag 7 can be achieved. One or more properly formed bodies (not shown in detail) may serve the same purpose, if desired, being simply placed on the flat surface of the substrate 1. Obviously, the apertures 6 on the substrate 7 may have a corresponding surface design or combined with bodies.
Az 7 hordozót elláthatjuk továbbá a 7 te nyésztőzsák kapcsolására vagy rögzítésére szolgáló, átrendezhető 2 eszközökkel, amelyek például rögzített vagy billenő és/vagy beállítha tó oldallapok, tetszőleges megfelelő kivitelezés sel (ez lehet például az 7 hordozó meghajlított pereme), amely lehetővé teszi a megadott mé retü 7 hordozó alkalmazását különböző nagy ságú és alakú 7 tenyésztőzsákok megtartásé ra.The carrier 7 may also be provided with rearrangeable means 2 for engaging or securing the rearing bag 7, such as fixed or tilting and / or adjustable side panels, of any suitable design (such as a bent edge of the carrier 7). using a carrier 7 to hold different sized and shaped culture bags 7.
Kívánt esetben az 7 hordozót temperáló eszközzel láthatjuk el, amely határesetben ön magában képezheti a teljes 1 hordozót a 2 esz közökkel együtt, amelyek a 7 tenyésztőzsák rögzítésére szolgálnak.If desired, the carrier 7 may be provided with a tempering means, which in the extreme may itself comprise the entire carrier 1 together with the means 2 for securing the carrier bag 7.
Az 7 hordozó helyzetének a 7 tenyésztő zsákkal együttes folyamatos vagy szakaszos helyzetváltoztatása, amely a tenyésztőközeg keverését hullámmozgással biztosítja, önmagában ismert módon és/vagy olyan módon érhető el, amely szintén a találmány körébe tartozik.Continuous or intermittent position change of the position of the carrier 7 in combination with the culture bag 7, which provides wave agitation of the culture medium, is achieved in a manner known per se and / or within the scope of the invention.
A bütykös tengely, excenter, emeltyű vagy tolattyú alkalmas mozgató eszközzel, például elektromotorral hajtható; az elektromotort folytonosan vagy szakaszosan működtethetjük, az előre meghatározott programnak megfelelően.The camshaft, eccentric, lever or slider may be driven by a suitable actuator such as an electric motor; the electric motor can be operated continuously or intermittently according to a predetermined program.
Azt a helyet, amelyen a hordozó elmozdul (horog, tengely, csapágy), ugyanígy, az 7 hordozó kerülete és középpontja között bárhol beállíthatjuk, ahogyan az adott esetben legcélszerűbb.The position at which the carrier moves (hook, axle, bearing) can likewise be adjusted anywhere between the circumference and the center of the carrier 7 as is most convenient.
Kívánt esetben az 7 hordozó helyzete változtatható akár az egyik oldalán, akár valamennyi oldala felöl, egymás után. A löketek ma gassága, sebessége és frekvenciája lényegében a tenyésztett szervezettől, a tenyésztőközeg viszkozitásától és természetesen a tenyósz tés időrendjétől függ, ezért minden esetben kü lön külön kell meghatározni.If desired, the position of the carrier 7 can be varied either on one side or on all sides, one after the other. The height, velocity and frequency of strokes are essentially dependent on the cultured organism, the viscosity of the culture medium and, of course, on the timing of breeding, and must therefore be determined separately.
Ha egyfajta organizmust hosszabb időn át tenyésztünk, akkor elsősorban az üzemeltetés gazdaságossága szempontjából célszerű több 7 hordozót a 7 tenyósztőzsákokkal példá ul egymás fölé vagy egymás mellé helyezni és egy mozgatóeszközzel működtetni.When cultivating a particular organism for a prolonged period of time, it is expedient from the point of view of operating economy, for example, to place a plurality of carriers 7 above and next to one another with the carrier bags 7 and to operate them with a moving device.
A találmány szerinti eljárás alkalmazásával igen egyszerűen érjük el a tenyésztőközeg hullámmozgását olyan mértékben, amely az adott organizmus számára a legkedvezőbb. A folyadék hullámmozgása a szaporodó sejtek szuszpenziójának kielégítő keverése mellett biztosítja a tenyésztőközeg viszonylag nagy felületét (térfogatához viszonyítva), amely érintkezésben áll a folyamatosan odajuttatott légróteggel, és egyszersmind biztosítja az oxigén kielégítő elszállítását a szaporodó sejtekhez. A hullámmozgás áltál elért keverés hatékonyságát tovább növelhetjük úgy, hogy az 7 hordozót rácsalakúra képezzük ki, és a 7 rugalmas és hajlékony tenyésztőzsák alsó oldalát számos barázdával alakítjuk ki, amelyek a hullámmozgás irányára merőlegesek a súly hatása alatt. Ezáltal nemcsak a sejtszuszpenzió keveredését, hanem a tenyésztőközeg oxigénnel való ellátását is elősegítjük, egy duzzasztó gát rendszerhez hasonló módonUsing the method of the invention, it is very easy to achieve the wave motion of the culture medium to the extent that is most favorable to the particular organism. Liquid wave motion, while sufficiently agitating the suspension of proliferating cells, provides a relatively large surface area (relative to volume) of the culture medium that is in contact with the continuously delivered air filament and at the same time ensures a satisfactory delivery of oxygen to the proliferating cells. The efficiency of the mixing achieved by the wave motion can be further enhanced by forming the carrier 7 in the form of a grid and forming the underside of the flexible and flexible culture bag 7 with a plurality of grooves perpendicular to the direction of the wave movement under the effect of weight. Thus, not only is the mixing of the cell suspension promoted, but also the oxygenation of the culture medium in a manner similar to a barrier barrier system.
A találmány szerinti berendezés elsősorban szabadon szuszpendált sejtek tenyésztésére szolgál, amelyek növekvése és szaporodása szilárd szubsztrátumhoz (például fibroblasztok hoz) való kötődést feltételez. Az ilyen sejtek a 7 tenyésztőzsák belső falán szaporodnak, s így a sejtek megkötődésóre és szaporodására alkalmas, hatékony terület lényegesen megnövekszik azoknak a mikrohordozóknak a jelenléte által, amelyek a tenyésztőközegben szuszpendálva vannakThe apparatus of the invention is primarily intended for the cultivation of freely suspended cells, the growth and proliferation of which requires binding to a solid substrate (e.g., fibroblasts). Such cells proliferate on the inner wall of the culture bag 7, thereby significantly increasing the effective area for cell binding and proliferation by the presence of the microcarriers suspended in the culture medium.
A találmány szerinti berendezésben az elmozdulások mérete és frekvenciája, a tenyész töközeg felületének magassága, a légáram, a hőmérséklet és a tenyésztés időtartama empi4 rikusan optimalizálható áz adott sejttípus és a tenyésztőközeg adott összetétele szerint.In the apparatus of the invention, the size and frequency of the displacements, the height of the culture medium surface, the airflow, the temperature and the duration of the culture can be empirically optimized according to the particular cell type and composition of the culture medium.
A találmány szerinti eljárás és berendezés előnyösen alkalmazható rostos mikroorganizmusok tenyésztésére is folyékony tenyésztőközeg felületén. Állandó tenyésztés során az oldatból felfelé a növekvő mikroorganizmusok irányába való lassú tápanyag-diffúzió gyakran válik a növekvés és szaporodás korlátozó tényezőjévé. Az 7 hordozók helyzetváltoztatásával előidézett szakaszos hullámmozgás következtében a közegben oldott tenyésztési szubsztrátumok konvekciója megy végbe, és ez lehetővé teszi a gyorsabb felszívódást, aminek következtében növekvésük meggyorsul, és szaporodásuk intenzívebbé válik.The method and apparatus of the invention are also advantageously applicable to the cultivation of fibrous microorganisms on the surface of a liquid culture medium. During continuous culture, slow nutrient diffusion from the solution upwards to the growth microorganisms often becomes a limiting factor for growth and reproduction. As a result of the intermittent wave motion caused by the positioning of the carriers, convection of the culture substrates dissolved in the medium takes place, which allows for faster absorption, whereby their growth is accelerated and their growth intensified.
A találmány szerinti eljárást és berendezést részletesen bemutatjuk az alábbi, nemkorlátozó jellegű példákban.The following non-limiting examples illustrate the process and apparatus of the invention in detail.
7. példaExample 7
A 7 tenyésztőzsákokat, amelyek mérete 32,5x44 cm, polietilén-szeletekből készítjük merőleges irányú hegesztéssel. A 7 zsákokat 2500 ml folyékony tenyósztőközeggel töltjük meg, amely 25 t°/o szacharózt és 1 t% ammóni um-citrátot tartalmaz szén-, illetve nitrogénforrásként. A felületmóretet 1000 cm2-re állítjuk 25 mm felületi magasságban. A közeget sterilezés után 24 “C-ra hűtjük, és Claviceps purpurea CCM F 725 szaporítótörzs konidiumá ból készült, szubmerz vegetatív inokulummal beoltjuk. A 7 tenyésztőzsákokat 24 “C hőmérsékleten 21 napig inkubáljuk, és az ötödik naptól kezdve a közeg felületén át levegőztetjük 410 ml/perc/1000 cm2 steril levegővel. így összesen hat tenyésztőzsákot állítunk elő, ame lyek közül hármat a teljes hátralévő időben inkubálunk, míg a másik hármat szakaszosan rázzuk 8 mm magassággal és óránként egy lengéssel, a tizedik naptól kezdve A lengési 4 tengelyt a 7 tenyésztözsák felezőpontjában helyezzük el. Az inkubálás befejezése után a micéliumot eltávolítjuk, vízzel átöblítjük, szárítjuk,'súlyát ós alkaloidtartalmát meghatározzuk Ha az inkubálást úgy végezzük, hogy a tenyésztőközeget szakaszos hullámmozgással keverjük, akkor 14 % al nagyobb szárazsúlyú micéliumot ka púnk, és a micélium alkaloidtartalma átlagosan 35 t% kai több, mint azon kontrollok alkaloid tartalma, amelyet az inkubálás időtartama alatt nem mozgatunk.The culture bags 7, 32.5 x 44 cm, are made of polyethylene slices by perpendicular welding. The bags 7 are filled with 2500 ml of liquid culture medium containing 25% sucrose and 1% ammonium citrate as carbon and nitrogen sources. The surface is set to 1000 cm 2 at a surface height of 25 mm. After sterilization, the medium is cooled to 24 ° C and inoculated with a submerged vegetative inoculum of the conidia of Claviceps purpurea CCM F 725. The culture bags 7 were incubated at 24 ° C for 21 days and, starting on the fifth day, aerated with 410 ml / min / 1000 cm 2 of sterile air. Thus, a total of six culture bags are prepared, three of which are incubated for the remainder of the time, while the other three are shaken intermittently at a height of 8 mm and one swing every hour, starting from the tenth day. At the end of the incubation, the mycelium is removed, rinsed with water, dried, and its alkaloid content is determined by weight. more than the alkaloid content of controls that are not moved during incubation.
2. példaExample 2
A tenyésztést az 1. példában használt be rendezésben végezzük. Vinca rosea sejtszusz penzióját használjuk a tenyésztésre. A töltést azThe cultivation was carried out using the equipment used in Example 1. Vinca rosea cell suspension is used for culture. The charge is
1. példában leírt módon végezzük, a tenyész tés időtartama 14 nap 24 “C hőmérsékleten a közeg 3 t% szacharózt és 2 x 10 6 mól 2,4 di klór-fenoxi-ecetsavat tartalmaz [T. Murashige és F Skoog: Physiol. Plánt. 75, 473 (1962)J A te nyósztést állandó rázás közben végezzük, a rá zás magassága 4 mm, frekvenciája 1 rázás/10 másodperc. A levegőztetést a tenyésztés teljes időtartama alatt végezzük 30 ml/perc/1000 cm2 levegőtérfogattal. A 2500 ml tenyésztőközeggel megtöltött 7 tenyésztőzsákot 3 x 105 sejt/ml inokulummal oltjuk. A tenyésztés végrehajtása után a sejtmennyiség 35 x 105 sejt/ml.As described in Example 1, the culture period is 14 days at 24 ° C and the medium contains 3% sucrose and 2 x 10 6 moles of 2.4 dichlorophenoxyacetic acid [T. Murashige and F Skoog, Physiol. Plant. 75, 473 (1962) JA te shaking is performed with constant shaking at a height of 4 mm and a frequency of 1 shaking / 10 seconds. Aeration is performed at 30 ml / min / 1000 cm 2 air volume throughout the culture. The 7 culture bags filled with 2500 ml of culture medium were inoculated with 3 x 10 5 cells / ml inoculum. After culturing, the cell volume was 35 x 10 5 cells / ml.
Claims (4)
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS995581A CS231615B1 (en) | 1981-12-29 | 1981-12-29 | Method of cultivation of cells of higher organism and device to perform the method |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU193483B true HU193483B (en) | 1987-10-28 |
Family
ID=5447309
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU422582A HU193483B (en) | 1981-12-29 | 1982-12-29 | Process for cultivating celles of higher organisms and apparatus for the process |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| CH (1) | CH658071A5 (en) |
| CS (1) | CS231615B1 (en) |
| DE (1) | DE3248543A1 (en) |
| FR (1) | FR2519020A1 (en) |
| HU (1) | HU193483B (en) |
| YU (1) | YU273282A (en) |
Families Citing this family (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0258795B1 (en) * | 1986-08-27 | 1993-11-03 | Kawasumi Laboratories, Inc. | A method for cultivating cells and an instrument therefor |
| US5017490A (en) * | 1989-03-10 | 1991-05-21 | Baxter International Inc. | Method for in vitro reproduction and growth of cells in culture medium |
| CH697035A5 (en) * | 1999-05-04 | 2008-03-31 | Marcel Roell | Bioreactor. |
| US7300789B2 (en) | 2002-05-21 | 2007-11-27 | L'oreal | Bioreactor forming a rigid vessel |
| NZ547222A (en) * | 2003-11-18 | 2010-03-26 | Nestec Sa | System for cell culture |
| DE102005007512A1 (en) * | 2004-02-20 | 2005-09-08 | CESCO Bioengineering Co., Ltd., Chutung | Apparatus and method for preparing and culturing cells |
| BE1016454A6 (en) * | 2005-02-17 | 2006-11-07 | Ben Kunnen | Method for building a customer base for dealers, businessmen, the self-employed and the like. |
| US8603805B2 (en) | 2005-04-22 | 2013-12-10 | Hyclone Laboratories, Inc. | Gas spargers and related container systems |
| WO2007052718A1 (en) * | 2005-11-01 | 2007-05-10 | Medinet Co., Ltd. | Shaker for cell culture and shaken culture system in cell culture method |
| EP2373779A4 (en) * | 2008-11-18 | 2012-12-19 | Ravindranath Gandlur | Disposable bioreactor system |
| US9376655B2 (en) | 2011-09-29 | 2016-06-28 | Life Technologies Corporation | Filter systems for separating microcarriers from cell culture solutions |
| WO2013049692A1 (en) | 2011-09-30 | 2013-04-04 | Hyclone Laboratories, Inc. | Container with film sparger |
| WO2013103293A1 (en) * | 2012-01-04 | 2013-07-11 | Cellution Biotech B.V. | Method and apparatus for cultivating cells |
| DE102014105472B4 (en) * | 2014-04-16 | 2016-03-17 | Sartorius Stedim Biotech Gmbh | Mixing and thawing device |
| US9079690B1 (en) | 2014-06-26 | 2015-07-14 | Advanced Scientifics, Inc. | Freezer bag, storage system, and method of freezing |
| DE102015119756B3 (en) | 2015-11-16 | 2016-11-17 | Sartorius Stedim Biotech Gmbh | Mixing device for mixing a bioreactor comprising a synchronization device |
| JP2017184716A (en) * | 2016-03-31 | 2017-10-12 | 東洋製罐グループホールディングス株式会社 | Cell culture containers, supporting jigs for cell culture containers, and cell culture methods |
| WO2018077994A1 (en) * | 2016-10-28 | 2018-05-03 | General Electric Company | Bioreactor tray |
| CN110177864B (en) | 2016-12-01 | 2022-11-08 | 生命科技股份有限公司 | Microcarrier filter bag assembly and method of use |
| CN117965269A (en) * | 2018-04-25 | 2024-05-03 | 环球生命科技咨询美国有限责任公司 | Inflatable bioreactor and method of use |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE845484C (en) * | 1946-10-26 | 1952-07-31 | Raytheon Mfg Co | Process for accelerating the growth of microorganisms by means of pressure wave treatment |
| CH326434A (en) * | 1955-01-25 | 1957-12-31 | Guiochon Pierre Frederic Henri | Method and container for the production of cultures of lower organisms and of tissues, in particular of the mycelium of fungi |
| DE2128744C3 (en) * | 1971-06-09 | 1979-03-29 | Max-Planck-Gesellschaft Zur Foerderung Der Wissenschaften E.V., 3400 Goettingen | Process for the mass cultivation of cells and tissues |
| CS172552B1 (en) * | 1974-12-29 | 1977-01-28 |
-
1981
- 1981-12-29 CS CS995581A patent/CS231615B1/en unknown
-
1982
- 1982-11-29 FR FR8220003A patent/FR2519020A1/en active Granted
- 1982-12-10 YU YU273282A patent/YU273282A/en unknown
- 1982-12-28 CH CH759782A patent/CH658071A5/en not_active IP Right Cessation
- 1982-12-29 DE DE19823248543 patent/DE3248543A1/en active Granted
- 1982-12-29 HU HU422582A patent/HU193483B/en not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CH658071A5 (en) | 1986-10-15 |
| CS231615B1 (en) | 1984-12-14 |
| FR2519020A1 (en) | 1983-07-01 |
| YU273282A (en) | 1985-10-31 |
| FR2519020B1 (en) | 1985-05-03 |
| DE3248543C2 (en) | 1988-02-04 |
| DE3248543A1 (en) | 1983-07-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| HU193483B (en) | Process for cultivating celles of higher organisms and apparatus for the process | |
| US20050186669A1 (en) | Apparatus and method for preparing and culturing cells | |
| EP0197299B1 (en) | Method and apparatus for carrying out cell culture | |
| US7033823B2 (en) | Cell-cultivating device | |
| CN103409321A (en) | Microalgae suspension-adhesion mixed culture and separated harvesting method based on suspended carrier | |
| MX9303274A (en) | PROCESS FOR PRODUCTION OF VENTILATED VIRUS VACCINE ZOSTER ATTENUATED. | |
| CN104694474A (en) | Cell culture method | |
| EP3907274A1 (en) | Bioreactor and method for the production of adherent cell cultures employing said bioreactor | |
| Adelberg | Agitated, thin-films of liquid media for efficient micropropagation | |
| EP0191356B1 (en) | Culture apparatus and method | |
| CN1241470C (en) | Method for breeding sprout by tissue culture, and vessels therefor | |
| TWI270576B (en) | Cell-cultivating device and method | |
| ES2204316B1 (en) | PROCEDURE FOR OBTAINING BIOCAPSULAR OF LEAVES, BIOCAPSULES AS WELL OBTAINED AND APPLICATIONS. | |
| Balogun et al. | Novelty, rapidity and quality in seed yam production: the case of Temporary Immersion Bioreactors | |
| CN220597427U (en) | Culture bag with biological film stripping carrier | |
| CN214115574U (en) | Hook type carbon dioxide cell culture box | |
| JPH01243997A (en) | Production of microbial cellulose | |
| Sun et al. | Characteristics of immobilized Rhizopus oryzae in polyurethane foam cubes | |
| US5223429A (en) | Method for the mass growth of cells in a thin film of nutrient medium foam | |
| CN2173789Y (en) | Cell culture limiting device | |
| JPS63109724A (en) | Culture of shiitake | |
| Kinnersley et al. | Method and composition for plant tissue and cell culture | |
| EP0276154A3 (en) | Method and apparatus for cell culture | |
| RU2001123409A (en) | The method of cultivation of microorganisms Mycobacterium tuberculosis | |
| JPH08278A (en) | Production of cellulosic substance |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HU90 | Patent valid on 900628 | ||
| HMM4 | Cancellation of final prot. due to non-payment of fee |