CS230542B1 - Způsob přípravy cyklických peptidů - Google Patents

Způsob přípravy cyklických peptidů Download PDF

Info

Publication number
CS230542B1
CS230542B1 CS567082A CS567082A CS230542B1 CS 230542 B1 CS230542 B1 CS 230542B1 CS 567082 A CS567082 A CS 567082A CS 567082 A CS567082 A CS 567082A CS 230542 B1 CS230542 B1 CS 230542B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
methanol
mixture
cyclic peptides
ile
gly
Prior art date
Application number
CS567082A
Other languages
English (en)
Inventor
Milan Krojidlo
Martin Flegel
Michal Lebl
Jiri Kolinsky
Original Assignee
Milan Krojidlo
Martin Flegel
Michal Lebl
Jiri Kolinsky
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Milan Krojidlo, Martin Flegel, Michal Lebl, Jiri Kolinsky filed Critical Milan Krojidlo
Priority to CS567082A priority Critical patent/CS230542B1/cs
Publication of CS230542B1 publication Critical patent/CS230542B1/cs

Links

Landscapes

  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

Uveden* problémy řeší způsob přípravy cyklických peptldů ze skupiny dipeptidů až oktapeptidů, cyklizací s vytvořením amidické vazby a s použitím aktivního esteru protonací chráněného peptídu podle vynálezu, při němž ae odpovídající peptid s volnou kerboxylovou skupinou a aminoskuplnou chráněnou protonací převádí nejprve reakcí s 1-hydroxybenztriazolem pomocí dicyklohexylkerbodiimidu v příslušný aktivní N-hydroxybenztrlazolylester, který se působením prostředí s hodnotou pH 8,0 ež 10,0, s výhodou 8,6 až 9,0 podrobí cyklizací.
Při uvedeném způsobu přípravy se jako prostředí s hodnotou pH 8,0 až 10,0 používá metanolického roztoku trietylamínu nebo N-etylpiperidinu.
Způsob provedení cyklizece se dále objasňuje v příkladech provedení.
Přikladl · „
Deamino-1-karbaoxytocin u
K roztoku Z-Tyr-Ile-Gln-Aan-CysíCjHgCOOIO-Pro-Iieu-Gly-NHj (2,25 g, chromatograficky čistý) v kyselině octové (20 ml) se přidá roztok 35% bromovodiku v kyselině octové (20 ml). Po vysrážení éterem a vysušení se získaiý hydrobromid oktapeptidamidu rozpustí ve směsi dimetylformamidu (30 ml) a dioxanu (21 ml), roztok se ochladí na 0 °C, přidá se 1-hydroxybenztriazol (2,98 g) a dicyklohexylkarbodiimid (3,2* g) a v míchání se pokračuje 2 h při teplotě místnosti.
Fotě sa suspenze zfiltruje a filtrát nakape do směsi-metanolu (1 000 ml), pyridinu (50 ml) a trietylamínu (10 ml). Po 2 h stání při teplotě místnosti se reakční směs odpaří do sucha, odparek se rozpustí v 50% kyselině octová a čistí průchodem přes molekulární síto na bázi dextranováho gelu.
K eluci se použije 50% kyselina octová. Lyofilizací eluátu se získá 1,* g produktu, který se čistí kapalinovou chromatografli na koloně modifikovaného sllikagelu Ο,θ (800 g) pomocí mobilní fáze obsahující 50 % obj. metanolu a 50 % obj. 0,2% kyseliny trifluoroctové. Odpařením a lyofilizací se získá O,*16 g (20 % teorie) deamino-1-karbaoxytocinu. Čistota látky byla ovéřena kapalinovou chromatografli (2 systémy) a chromatografli na tenké vrstvě (* systémy).
Pro C**H67N,,O12S.* h2O (1 0*6,2):
vypočteno: 50,52 % C, 7,23 % H, 14,73 % N;
nelezeno: 50,58 % C, 6,94 % H, 14,68 % N.
p
Aminokyselinová analýza: Asp 1,00, Glu 0,97, Pro 0,99, CysíCjHgCOOOH) 1,02, Gly 1,00,
Ile 0,96, Leu 0,99, Tyr 0,98.
v
Příklad 2 (2-0-metyltyrosin)deamino-1-karbaoxy tocin
K roztoku Nps-TyríMeí-Ile-Gln-Asn-CysíCjHgCOOOID-Pro-Leu-Gly-NHj (17,4 g, chromatograficky čistý) v dimetylformamidu (180 ml) se přidá roztok 2N chlorovodíku v eteru (50 ml). Po 15 minutách stání při teplotě místnosti se vysrážl vzniklý hydrochlorid oktapeptidamidu éterem, vysuěí a rozpustí ve směsi dimetylformamidu (240 ml) a dioxanu (150 ml). Po ochlazení na 0 °C se přidá 1-hydroxybenztriazol (2, g) a dieyklohexylkarbodiimid (23,1 g) a reakční směs se míchá 2 h při teplotě místnosti. Poté se zfiltruje a filtrát se nakape do směsi metanolu (4 000 ml) a trietylamínu (35 ml) za míchání.
Po 2 h stání při teplotě místnosti se reakční směs odpaří do sucha, odparek rozpustí v 50% kyselině octová a čistí no koloně molekulárního síta (4 000 ml), s použitím 50% kyseliny octové joko elučního činidla. Lyofilizací eluátu se získá 9,3 g produktu, který se čistí kapalinovou chromatografií ne koloně modifikovaného silikagelu (C,g) (500 g) pomocí mobilní fáze obsahující 50 % obj. metanolu e 50 % obj. 0,2% kyseliny trifluoroctové. Odpařením a lyofilizací se získá 3,38 g (22 % teorie) (2-0-metyltyrosin)deamino-l-karbaoxytocinu: (u )^5 = -74,30° (c = 0,2; 1K kyselina octová). Čistota látky byla ověřena kapalinovou chrSmatografií (2 systémy) a chromatografií na tenké vrstvě (4 systémy).
Pro C45H69N,,O)2S.2 H2O (1 024,1):
vypočteno: 52,78 % C, 6,99 % H, 15,05 % N;
nalezeno: 52,50 % C, 6,93 % H, 15,29 % N.
Aminokyselinová anelýza: Asp 0,96, Olu 1,02, Pro 1,01, Gly 0,98, Cys (C^HgCOOH) 0,93, Ile 1 ,00, Leu 1 ,03, Tyr 0,98.
Příklad 3 (2-p-metylfenylalanin)deamino-6-karbaoxytocin
a) K roztoku Npu-Phe(Ne)-Ile-Gln-Asn-HCy(CgH^COOHJ-Pro-Léu-Gly-NHg (200 mg) v dimetylformamidu (5 ml) se přidá roztok 3,6 N chlorovodíku v éteru (0,5 ml). Po 7 minutách stání při teplotě místnosti se vzniklý hydrochlorid oktapeptidamidu vysráží éterem, vysuší a rozpustí ve směsi dimetylformamidu (3 ml) a dioxanu (1,8 ml). Po ochlazení na 0 °C se přidá 1-hydroxybenztriazol (241 mg) a dicyklohexylkarbodiimid (265 mg) a reakční směs se míchá 2 h při teplotě místnosti.
Zfiltruje se e filtrát se nakape do směsi metanolu (200 ml) a N-etylpiperidinu, kterého se přidá tolik, aby pH směsi bylo přibližně 8,5 (asi 0,6 ml). Po 2 h zahřívání na 60 °C se reakční směs odpaří na malý objem, vysráží éterem a produkt se vysuSí. Preparativní chromatografií na koloně modifikovaného silikagelu (C^g) (50 x 0,9 cm) v systému 55 % obj. metanolu a 45 % vody se získá 31 mg (17 % teorie) (2-p-metylfenylalanin)deamino-6-kerbaoxytocinu. čistota látky byla ověřena analogicky jako v příkladu 1.
Pro C45H69N1,O,,S.4 H20 (1 044):
vypočteno: 51 ,76 % G, 7,43 % H, 14,75 % N;
nalezeno: 51 ,89 % C, 7,15 % H, 14,73 % N.
Aminokyselinová analýza: Asp 1,03, Glu ',01, Pro 0,94, Gly 1,00, Ile 0,96, Leu 1,05, Phe(Me) 1 ,08 HCyíC^COOH) 0,90.
b) Cyklizace byla provedena jako v předchozím odstavci, až ne to, že roztok aktivního esteru byl vnesen do 200 ml pyridinu. Stejným způsobem zpracování a čištění jako výše se získá 18 mg (10 % teorie) látky stejné jako postupem a).
Příklad 4 (2-fenylalanin)deamino-6-karbaoxytocin
Nps-Phe-Ile-Gln-Asn-HCy(CgH^COOHl-Pro-Leu-Gly-NHg (200 mg) ae zpracuje způsobem popsaným v příkladu 3a). Čištěním preparetivní chromatografií na koloně modifikovaného silikegelu (Ο,θ) (50 x 0,9 cm) v systému 50 % obj. metanolu a 50 % obj. vody se získá 29 mg <16 % teorie) žádaného produktu, jehož čistota a analytické hodnoty byly prokázány výěe popsanými metodami.
Pro C44H67N1,°11S·2 H2° <994,2):
vypočteno: 53,15 % C, 7,20 % H, 15,50 % N;
nalezeno: 52,90 % C, 6,95 % H, 15,26 « N.
Aminokyselinová analýza: Asp 0,96, Glu 1,01, Pro 1,02, Gly 0,97, Ile 0,97, Leu 1,06, Phe 1 ,01 , HCy(C2H4COOH) 1,01.
Příklad 5
Seamlno-6-karbaoxytocin
Z Nps-Tyr-Ile-Gln-Asn-HCy(CgH^C-OHI-Pro-Leu-Gly-NHg (200 mg) se chránící skupina odstraní způsobem popsaným v příkladu 3a). Hydrochlorid oktapeptidamidu ae rozpustí v dimetylformamidu (4 ml), ochladí na 0 °C, přidá 1-hydroxybenztriazol (241 mg) a dicyklohexylkarbodiimid (265 mg). Po 2,5 h míchání při teplotě místnosti se suspenze zfiltruje do směsi metanolu (200 ml) a N-etylpiperidinu (0,45 ml; pH 8,5). Po 1 h zahřívání na 50 °C se roztok zpracuje stejně jako v příkladu 3á).
Čištěním preparatlvní chromatografií jako v příkladu 4, ale v systému 40 % obj. metanolu a 60 % obj. vody se získá 36 mg (20 Se teorie) deamino-6-karbaoxytocinu, jehož
čistota a identita byla ověřena výše popsanými metodami
Pro C44H67N,,0,2S.4 H20 (1 046):
vypočteno: 50,52 % C, 7,23 % H, 14,73 % N;
nalezeno: 50,38 % C, 7,11 % H, 14,58 % N.
Aminokyselinová analýza: Asp ',01, Glu 0,96, Pro 1,04, Gly 0,98, Ile 1,00, HCyíCgH^COOH) 0,96, Leu 1,03, Tyr 0,97.
, I
Příklad 6
Cyklo(fenylalanyl-glycyl)
Glycyl-fenylalanin (0,53 g) se rozpustí ve 2,4 K chlorovodíku v metanolu (15 ml), ihned se odpaří, vysráží éterem a vysuší. Vzniklý hydrochlorid dipeptidu se rozpustí ve směsi dimetylformamidu (10 ml) e dioxanu (5 ml). Po ochlazení na 0 °G se přidá 1-hydroxybenztriezol (1,28 g) a dicyklohexylkarbodiimid (0,75 g) e reakční směs se míchá 2 h při teplotě místnosti. Suspenze se zfiltruje a filtrát nakape do směsi metanolu (250 ml) s N-etylpiperidinu, kterého se přidá tolik, aby pH směsi bylo přibližně 8,5. Roztok se míchá 20 h při teplotě místnosti, poté se zahustí a-vysráží éterem. Získaný produkt (0,37, g) se přečistí preparetivní kapalinovou chromatografií výše popsaným způsobem. Získá se 159,' mg (33 % teorie) produktu s t. t. 263 až 265 °C.
Pro CnH12N2O2 (204,3):
vypočteno: 64,61 % C, 5,87 % H, 13,71 % N;
nalezeno: 64,30 % C, 5,98 % H, 13,42 % N.
Příklad 7 £
Cyklo(N -tosyllysyl-glycyl)
Hydrobromid NĚ-tosyllysyl-glyclnu (438,3 mg) se cyklizuje způsobem popsaným v příkla du 6. Přečištěním preparativní kapalinovou chrometografií se získá 190 mg (56 % teorie) produktu s t. t. 184 ež 185 °C.
Pro C,5H21N3O4S (339,42):
vypočteno: 53,08 % G 6,24 % H, 12,37 % N;
nalezeno: 52,95 % C, o,34 % H, 12,19 % N.

Claims (2)

  1. PŘEDMĚT VYNÁLEZU
    1. Způsob přípravy cyklických peptidů ze skupiny dipeptldů až oktapeptidů, cyklizací s vytvořením amidické vazby a s použitím aktivního esteru protonací chráněného peptidu, vyznačující se tím, že se odpovídající peptid s volnou karboxylovou skupinou a aminoskupinou chráněnou protonací převádí nejprve reakci s 1-hydroxybenztriazolem pomocí dicyklohexylkarboďiimidu v příslušný aktivní N-hydroxybenztriazolylester, který se působením prostředí s hodnotou pH 8,0 až 10,0, s výhodou 8,6 až 9,0 podrobí cyklizaci.
  2. 2. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se jako prostředí s hodnotou pH 8,0 až 10,0 používá metanolického roztoku trietylaminu nebo N-etylpiperidinu.
CS567082A 1982-07-27 1982-07-27 Způsob přípravy cyklických peptidů CS230542B1 (cs)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS567082A CS230542B1 (cs) 1982-07-27 1982-07-27 Způsob přípravy cyklických peptidů

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS567082A CS230542B1 (cs) 1982-07-27 1982-07-27 Způsob přípravy cyklických peptidů

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS230542B1 true CS230542B1 (cs) 1984-08-13

Family

ID=5401987

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS567082A CS230542B1 (cs) 1982-07-27 1982-07-27 Způsob přípravy cyklických peptidů

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS230542B1 (cs)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI94350C (fi) Menetelmä T-soluavustaja-aktiivisuutta omaavien peptidien valmistamiseksi
CA1336080C (en) Peptide derivatives, a process for the preparation thereof, and the use thereof
HU185263B (en) Process for producing peptides effective on the immuncontroll analogous with the tp5
EP0561412A1 (en) Parathyroid hormone derivatives
PT87350B (pt) Processo para a preparacao de peptideos com accao de inibicao de fosfolipase a2 e de composicoes farmaceuticas que os contem
Ciardelli et al. Des-N-tetramethyltriostin A and bis-L-seryldes-N-tetramethyltriostin A, synthetic analogs of the quinoxaline antibiotics
US4376760A (en) Tridecapeptide
Albericio et al. Solid phase synthesis and HPLC purification of the protected 1-12 sequence of apamin for rapid synthesis of apamin analogues differing in the C-terminal region
US4711952A (en) Serum thymic factor peptide analogs and process for the preparation thereof
CS230542B1 (cs) Způsob přípravy cyklických peptidů
JPS6330318B2 (cs)
JPH0631314B2 (ja) 新規なゴナドリベリン誘導体
Prestidge et al. Use of substituted benzyl esters as carboxyl-protecting groups in solid-phase peptide synthesis
ELST et al. Synthesis and conformational study of two cyclic analogues of somatostatin containing an AMPA‐spacer unit
Ranjalahy‐Rasoloarijao et al. Synthesis and ionic channels of a linear gramicidin containing naphthylalanine instead of tryptophan
Van Nispen et al. Synthesis and charge‐transfer properties of two ACTH analogues containing pentamethylphenylalanine in position 9
US4784988A (en) Peptides correlated to lysozyme
GB2109796A (en) Anorexigenic tripeptides, process for the preparation thereof and pharmaceutical compositions containing them
EP0406931B1 (en) New analogues of all-bond retroinverted thymopentin, the method for the synthesis of the same and their employment for the preparation of pharmaceutical compositions
BAUCE et al. Synthesis of a series of residue 1 (pyroglutamic acid) analogs of thyrotrophin releasing hormone
US4370312A (en) Decapeptide
JP2782232B2 (ja) プロテアーゼ阻害剤
GB2231051A (en) Bombesin antagonists
CA1103239A (en) Product and process for treating schizophrenia
JP2793216B2 (ja) 粘膜による吸収を高める、ソルビン及び誘導ペプチド