CS211694B1 - Spósob přípravy imobilizovanej endopolygalakturonázy - Google Patents
Spósob přípravy imobilizovanej endopolygalakturonázy Download PDFInfo
- Publication number
- CS211694B1 CS211694B1 CS172980A CS172980A CS211694B1 CS 211694 B1 CS211694 B1 CS 211694B1 CS 172980 A CS172980 A CS 172980A CS 172980 A CS172980 A CS 172980A CS 211694 B1 CS211694 B1 CS 211694B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- endopolygalacturonase
- enzyme
- immobilized
- preparation
- preparing immobilized
- Prior art date
Links
- 108010059820 Polygalacturonase Proteins 0.000 title claims description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 10
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 14
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 14
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 9
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 5
- 150000001991 dicarboxylic acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000002009 diols Chemical class 0.000 claims description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 2
- KKEYFWRCBNTPAC-UHFFFAOYSA-L terephthalate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)C1=CC=C(C([O-])=O)C=C1 KKEYFWRCBNTPAC-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- -1 hydroxyalkyl methacrylate Chemical compound 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 229920000139 polyethylene terephthalate Polymers 0.000 description 4
- 239000005020 polyethylene terephthalate Substances 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920002230 Pectic acid Polymers 0.000 description 2
- KKEYFWRCBNTPAC-UHFFFAOYSA-N Terephthalic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(C(O)=O)C=C1 KKEYFWRCBNTPAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N cyanogen bromide Chemical compound BrC#N ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N pectic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)O[C@H](C(O)=O)[C@@H]1OC1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O2)C(O)=O)O)[C@@H](C(O)=O)O1 LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N 0.000 description 2
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 2
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 2
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 2
- 239000010318 polygalacturonic acid Substances 0.000 description 2
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000004873 anchoring Methods 0.000 description 1
- 238000009924 canning Methods 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000010924 continuous production Methods 0.000 description 1
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 1
- 108010093305 exopolygalacturonase Proteins 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 230000002351 pectolytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000004584 polyacrylic acid Substances 0.000 description 1
- 229920000307 polymer substrate Polymers 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000003335 steric effect Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Description
Vynález sa týká sposobu přípravy imobilizovaného pektolytického enzýmu endopolygalakturonázy /poly-alfa-1,4-D-galacturonid glycanohydrolase, E. C. 3. 2. 1. 15/, ktorá specificky katalyzuje náhodné stiepenie vnútorných alfa-1,4 glykoxidických vazieb v molekule kyseliny pektovej, resp. pektínu a sposobuje tým výrazné zníženie viskozity ich roztokov.
Doteraz známe imobilizácie tohto enzýmu sa zakladajú na kovalentnom viazaní na nerozpustné nosiče typu Sepharozy, hydroxyalkylmetakrylátu, alebo celulózy, po ich aktivácii brómkyanom, připadne na gél polyakrylovej kyseliny pomocou karbodiimidu.
Obecnou nevýhodou týchto postupov je operačná zložitosť, podmienená nutnosíou aktivácie nosiča před imobilizáciou enzýmu. U nosičov aktivovaných brómkyanom naviac dochádza často k postupnému uvolňovaniu zakotveného enzýmu do roztoku.
dalším nedostatkom je změna sposobu účinku kovalentně viazaného enzýmu na polymérne substráty, podmienená stérickými efektami, ktorá sa prejavuje pomalším znižovaním viskozity ich roztokov než rozpustným enzýmom pri rovnakom stupni degradácie.
Uvedené nedostatky sa odstraňujú postupom podlá vynálezu, ktorého podstatou je, že sa enzým adsorbuje pri pH 3,8 až 4,6 a laboratórnej teplote na polymér obsahujúci v hlavnom reťazci esterová skupinu, na bázi diolov a dikarboxylových kyselin, s výhodou na polyetyléntereftalát.
Výhoda spósobu přípravy imobilizovanej endopolygalakturonázy spočívá v operačnej jednoduchosti postupu a stálosti zakotvenía, čo pri dodržiavaní optimálnych podmienok enzýmovej reakcie umožňuje používať zmobilizovaný enzym opakované, alebo v dlhodobých kontinuálnych procesoch.
Ďalšou přednostou preparátu připraveného podía postupu je, že spósob jeho účinku na polymérne substráty nie je tak výrazné pozměněný oproti nezakotvenému enzýmu ako v případe preparátov, v ktorých bol enzym iraobilizovaný kovalentnýra viazaníro.
Spósob přípravy podía vynálezu je vysvětlený na nasledujúcich príkladoch.
Přikladl
Endopolygalakturonáza přítomná v technických preparátoch pektináz, alebo z nich připravená lubovolným postupom, napr. afznztnou ehromatografiou na szeťovanej kyselině pektovej, bola zmobilizovaná na polyety1éntereftalát připravený z etylénglykolu a kyseliny tereftalovej peřd Ia následuj úceho postupu: k 1 g polyetylénteref talátu premytom 0,1 M octanovým tlmivým roztokom o pH medzi 3,8 a 4,6 a suspendovanému v 10 ml tohto tlmivého roztoku sa přidá 10 mg endopolygalakturonázy rozpustenej v tlmivom roztoku. Po 4 hodinách miešania pri laboratórnej teplote sa gél oddělí vhodným spósobom /fíltrácia, dekantácia, centrifugácia/.
Příklad 2
Polyetyléntereftalát suspendovaný vo vodě alebo tlmivom roztoku o pH medzi 3,8 a 4,6 sa naplní do kolony. Cez kolonu sa filtruje roztok obsahujúci endopolygalakturonázu dovtedy, kým efluent nevykazuje enzýmovú aktivitu. Kolona sa potom premyje octovým tlmivým roztokom pH 4,0 až 4,4.
Schopnosť zmobilizovaného enzýmu katalyzovať zmienenú degradáczu pektínových látok je závislá na obsahu adsorbovateIných kontarainujúcich látok vo východzom enzýmovom preparáte a tvoří přibližné 35 až 60 Z schopnosti nezakotveného enzýmu.
Význam vynálezu spočívá v tom, že zmobilizovaná endopolygalakturonáza má využitie v konzervárenskom priemysle pri príprave štiav a muštov.
Claims (2)
- Spósob přípravy imobilizovanej endopolygalakturonázy vyznačený tým, že sa enzým adsorbuje pri pR 3,8 až 4,6 a laboratórnej teplote na polymérnu látku typu polykondenzátu na báze díolov a dikarboxylových kyselin, s výhodou na po 1yety1éntereftalát .
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS172980A CS211694B1 (cs) | 1980-03-13 | 1980-03-13 | Spósob přípravy imobilizovanej endopolygalakturonázy |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS172980A CS211694B1 (cs) | 1980-03-13 | 1980-03-13 | Spósob přípravy imobilizovanej endopolygalakturonázy |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS211694B1 true CS211694B1 (cs) | 1982-02-26 |
Family
ID=5352387
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS172980A CS211694B1 (cs) | 1980-03-13 | 1980-03-13 | Spósob přípravy imobilizovanej endopolygalakturonázy |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS211694B1 (sk) |
-
1980
- 1980-03-13 CS CS172980A patent/CS211694B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Vaillant et al. | Co-immobilized pectinlyase and endocellulase on chitin and nylon supports | |
| Monsan | Optimization of glutaraldehyde activation of a support for enzyme immobilization | |
| FI85285C (fi) | Tvaerbundet, vattenoloesligt glukosisomeras och foerfarande foer framstaellning daerav. | |
| US4888285A (en) | Enzyme immobilization on a water-insoluble amino group-containing carrier | |
| US5998183A (en) | Enzyme immobilization on a siliceous support with a polyaldehyde cross-linking agent | |
| Tsen et al. | Fiber entrapment of naringinase from Penicillium sp. and application to fruit juice debittering | |
| JPH0697998B2 (ja) | 固定化リパーゼ調製品の製造方法 | |
| US4593004A (en) | Process for the immobilization of cyclodextrine glycosyltransferase enzyme | |
| US4500554A (en) | Wine stabilization using immobilized tannic acid | |
| CS211694B1 (cs) | Spósob přípravy imobilizovanej endopolygalakturonázy | |
| US4279998A (en) | Regenerable insoluble support for protein immobilization | |
| JPS6141608B2 (sk) | ||
| Stambolieva et al. | Covalent attachment of proteins to Spheron by means of benzoquinone | |
| Koli et al. | Continuous cane sugar inversion process using immobilized invertase | |
| Rexova-Benkova et al. | Endopolygalacturonase immobilized on a porous poly (2, 6-dimethyl-p-phenyleneoxide) | |
| CA2277371C (en) | Siliceous support media for immobilization of enzymes | |
| CS257830B1 (sk) | Spósob prlpravy imobilizovanej exopolygalakturonázy | |
| JP2595004B2 (ja) | 酵素固定化用担体とその酵素固定化方法および酵素脱着方法 | |
| Pitcher | Introduction to immobilized enzymes | |
| JPH0446113B2 (sk) | ||
| SU1059002A1 (ru) | Способ иммобилизации @ -лизиндекарбоксилазы | |
| KR101153396B1 (ko) | 버퍼혼합시스템을 이용하여 리파아제를 담체에 고정화시키는 방법 | |
| CS230892B1 (cs) | Sposob přípravy itnobilizovanej endopolygalakturonizy | |
| Beeckmans et al. | Kinetics of immobilized pig heart fumarase | |
| Bihari et al. | A support-spacer-ligand system for specific affinity adsorption of penicillin acylase |