CS209714B1 - Způsob výroby kyseliny citrónové submersním fermentačnim způsobem zkvašováním cukerných roztoků plísni Aspergillus niger - Google Patents

Způsob výroby kyseliny citrónové submersním fermentačnim způsobem zkvašováním cukerných roztoků plísni Aspergillus niger Download PDF

Info

Publication number
CS209714B1
CS209714B1 CS864179A CS864179A CS209714B1 CS 209714 B1 CS209714 B1 CS 209714B1 CS 864179 A CS864179 A CS 864179A CS 864179 A CS864179 A CS 864179A CS 209714 B1 CS209714 B1 CS 209714B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
fermentation
citric acid
aspergillus niger
sugar
production
Prior art date
Application number
CS864179A
Other languages
English (en)
Inventor
Leopold Seichert
Marie Musilkova
Zdenek Fencl
Emma Ujcova
Original Assignee
Leopold Seichert
Marie Musilkova
Zdenek Fencl
Emma Ujcova
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Leopold Seichert, Marie Musilkova, Zdenek Fencl, Emma Ujcova filed Critical Leopold Seichert
Priority to CS864179A priority Critical patent/CS209714B1/cs
Publication of CS209714B1 publication Critical patent/CS209714B1/cs

Links

Landscapes

  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

Vynález se týká způsobů výroby kyseliny citrónové submersním fermentačnim způsobem zkvašování cukerných roztoků plísní Aspergillus niger.
Pro submersní způsob výroby kyseliny citrónové nelze použít produkční kmeny Aspergillus niger vhodné při výrobě způsobem povrchovým a je nutno vyšlechtit a aplikovat kmeny nové - nově vyšlechtěné mutanty plísně Aspergillus niger. Nevyřešenou otázkou ovšem stále zůstává přísná specifita v citlivosti jednotlivých mutant k základním podmínkám fermentace, bez jejichž znalostí nelze pak dosáhnout ekonomické výroby.
Tato skutečnost vylučuje aplikovat stejnou technologii pří použití různých pródukčních kmenů. Tak např. autoři S. M.
Martin a W. K. Warers /Ing. Eng. Chem. 44, 2229/ 1 952/, D. S. Clark /Can. J. Microbiol. 8, 133/1962/ nebo US Patent No 3 105 015 používají plísně rostoucí ve formě pelet.
V poslední době sí stále více autorů všímá vztahu mezi morfologií plísně A, niger a produkcí kyseliny citrónové. A. Cimerman a sp. /Abst. V. Int.Ferm. Sym, Berlin 1976, 405/ se snaží o snížení velikosti pelet přidáním různých přirozených polymerů a tím o zvýšení tvorby citrónové kyseliny. V další prácí /4th FEMS Symposium, Vienne, 1977/ pak sleduje morfologii plísně až do konečné tvorby pelet, tj. do 74 hod., a bere ji ja-· ko indikátor produkce citrónové kyseliny.
Nevýhody růstu v peletách spočívají v tom, že proces je náročnější, na čas /o 2-3 dny/, je dosahována nižší výtěžnost /o 20-30 %/, je vysoká spotřeba O2 /poměr kapaliny ku O2 je cca 2:1/.
Tyto nevýhody odstraňuje způsob výroby kyseliny citrónové podle vynálezu, jehož podstatou je, že se kultivují mutanty plísně Aspergillus niger a to 97 A uložené ve sbírce mikroorganismů CCF č. 1597, E 81 uložené ve sbírce mikroorganismů CCF Č. 1598 nebo NG 233 uložené ve sbírce mikroorganismů CCF č. 1599, jejichž inokulum se nechá růst ve formě pelet a poté se přenese do vlastního fermentačního tanku, kde se nechá růst difusně po celou dobu fermentace při počátečním pH = 5 a při teplotě 28 až 32 °C na kultivační půdě, která obsahuje cukrový substrát v koncentraci 5 7 až 20 7 váhových. Cukerným substrátem se rozumí sacharosa, glu kosa, fruktosa, hydrolysáty slámy dřevních odpadů, třtinová a datlová štáva nebo stává z jiných ovocných plodů, které*obsahu j í cuk r.
Protože pří difuzním způsobu fermentace dochází k bezprostřednímu styku media se vše mi vlákny produkční plísně, je fermentační proces podstatně urychlen, je dosahováno vyšší výtěžností a je snížena spotřeba substrátu pro vlastní růst produkčního mikroorganismu. Proces nevyžaduje vysokou aeraci /poměr kyseliny ku O2 je cca 5:1/ a tím dochází ke značnému snížení vlastních nákladů na energii a výrobu.
Difuzní způsob fermentace je umožněn vlastnostmi nových vysokoprodukčních mutant plísně Aspergillus niger. Další velkou výhodou uvedeného kmene je, že během procesu se vytváří minimální množství vedlejších kyselin /pouze ve stopách/.
Dále jsou uvedeny příklady kyseliny citrónové podle vynálezu.
Příklad 1
Příprava ínokula: Použijeme spor plísně Aspergillus niger mutanty E 81 rostoucích v Er lenmayerových baňkách v objemu 100 ml obsahujících 15 ml nabobtnalých a povařených pšeničných zrn. Obsahem jedné baňky očkujeme 24 1 mďdia následujícího složení:
X sacharózy, 0,25 X NH4N03, 0,025 X
MgS04 . 7H2O, 0,01 X KH2PO4, 0,01 X rozpustného škrobu, 0,0001 X ZnSOz, . 7H2O, 0,0002 procenta CuSO, . 5H2O, 0,00065 X FeCl^. Otáčky míchadla 400 ot/min., množství vháněného vzduchu 6 1/min, teplota 28 - 30 °C, doba kultivace 35 - 40 hodin. Vyrostlé inokulum je v peletách.
Příprava ferraentačního media: Připravíme sterilní fermentační médium o složení
X sacharózy, 0,08 X NH4CI, 0,1 močoviny, 0,05 X MgSO/.7H2O, 0,016 X KH2PO4, 0,007 X KC1, 0,002 XMnS04.7H20, 0,001 X MnSO4.7H2O, 0,001 X FeS0^.7H20 a očkujeme při teplote média 30 až 35 °C 3 až 5 X ínokula.
Vlastní fermentace: Nerezový fermentor s centrálně umístěným mechanickým míchadlem /ólopatková turbina s dělicím kotoučem/ obsahuje 152 1 produkčního fermentačního média. Obrátky míchadla během fermentace 400 ot/min. Množství vháněného vzduchu 30 1/min., teplota 30 °C, doba fermentace 120 hod. Růst mycelia je difusní umožňující dosažení výtěžnosti 75 - 80 X na vnesený cukr. Vedlejší kyseliny jsou tvořeny pouze ve stopách.
Příklad 2
Příprava ínokula se provádí podobně jako v příkladu 1, s tím rozdílem, že jako mutanty se použije mutanta Aspergillus niger 97 A. Příprava ínokula: Spory plísně Aspergillus niger mutant 97 A se vykultivují na nabobtnalých a povařených pšeničných zrnech ve 300 ml v Erlenmayerovýeh baňkách. Každá baňka obsahuje 60 ml těchto zrn. Optimální množství spor pro zaočkování je obsah dvou baněk na 300 1 média. Inokulum bylo připravveno v 500 1 sedových fermentorech s centrálním míchadlem dosahujících 300 1 me^dia o složení jako v příklade 1.
Otáčky míchadla 140 ot/min., množství vháněného vzduchu 120 až 140 1/min., přetlak 0,.05 MP, teplota 28 až 32 °C, doba kultivace 35 až 48 hodin. Vyrostlé inokulum je v peletách. Složení vlastního fermentačního media je stejné jako v příkladě 1 s tím rozdílem, že místo 15 X sacharózy se použije 10 X glukózy.
Vlastní fermentace: nerezový fermentor o objemu 5 000 1 vybavený jako v příkladě 1 napustíme vodou do 2/3 požadovaného objemu a rozpustíme uvedené soli pro fermentační medium a doplníme vodou na 4 350 1 a provedeme sterilizaci 30 minut při 115 °C.
Otáčky míchadla 180 ot/min, množství vháněného vzduchu 1 000 1/min, přetlak ve fermentoru 0,05 MP. Doba fermentace 96 h, výtěžnost 80 X.
Příklad 3
Příprava ínokula se provádí podobně jako v příkladu 1 s tím .roždílem, že jako mutanty se použije mutanta Aspergillus niger NG 233.
Rovněž složení vlastního fermentačního media je stejné, ale s tím rozdílem, že místo sacharózy se použije hydrolysát slámy, obsahující glukosu, který se naředí vodou tak, aby obsahoval 10 X cukru.
V tabulce I. je porovnán povrchový způsob fermentace a stávající submersní způsob fermentace se submersní fermentací dle vynálezu,pokud jde o náklady, dobu fermentace, výtěžnost, spotřebu elektrické energie atd. .pro výrobní jednotku s objemem výroby cca 72 t/den.
Tabulka oba fermentace ýtěžnost ák1ady:
. Investiční náklady budovy zař ízen í celkem . Výrobní náklady suroviny elektr. energie mzdy celkem . Roční náklady odpisy zařízení odpisy budov výrobní náklady celkem ní fermentace ze 34,40 na 26,3 cenových jednotek ve srovnání s 28,21 cenových jednotek při povrchové výrobě stejné kapacity. Mimoto způsob podle vynálezu je z hlediska cukerného zdroje flexibilní a lze proto
Povrchová Submersní fer- Submersní
fermentace mentace dle stá- fermentace
vaj ícíbo stavu dle vynálezu
techniky
9 dnů 7 dnů 4 dny
70 Z 70 Z 80 Z
57,0 25,6 25,6
26,62 38,27 38,27
83,62 63,87 63,87
10,76 12,70 12,70
0,90 1.0,40 3,20
12,87 7, 90 7,90
24,53 31 ,00 23,80
1 ,78 2,55 1,70
1 ,90 0,85 0,60
24,53 3 1 ,00 24,00
28,21 34,40 26,30
1 u submers- použít nej různější cukerné substráty.
V tabulce uvedené údaje jsou převzaty z časopisu Process Biochemistry, November 1 977 /Schierholt J.: Fermentation Processes for the Production of Citric Acid/.

Claims (2)

  1. VYNÁLEZU
    1. Způsob výroby kyseliny citrónové submersním fermentačním způsobem zkvašováním cukerných roztoků plísně Aspergillus nígěr, vyznačený tím, že se kultivuj í mutanty plísně Aspergillus niger a to 97 A, uložené ve sbírce mikroorganismů CCF č. 1597, E 81 uložené ve sbírce mikroorganismů CCF č. 1598 nebo NG 233 uložené ve sbírce mikroorganismů CCF č. 1599, jejichž inokulum>se nechá růst ve formě pelet a poté se přenese do vlastního fermentačního tanku, kde se nechá růst difusně po celou dobu fermentace při počátečním pH = 5 a pří teplotě 28 až 32 °C na kultivační půdě, která obsahuje cukrový substrát v koncentraci 5 Z až 20 Z hmotnostních.
  2. 2. Způsob podle bodu 1, vyznačený tím, že cukerným substrátem se rozumí sacharóza, glukóza, fruktóza, hydrolysáty slámy dřevních odpadů, třtinová a datlová šťáva nebo šťáva z ovocných plodů, které obsahuj cukr.
CS864179A 1979-12-11 1979-12-11 Způsob výroby kyseliny citrónové submersním fermentačnim způsobem zkvašováním cukerných roztoků plísni Aspergillus niger CS209714B1 (cs)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS864179A CS209714B1 (cs) 1979-12-11 1979-12-11 Způsob výroby kyseliny citrónové submersním fermentačnim způsobem zkvašováním cukerných roztoků plísni Aspergillus niger

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS864179A CS209714B1 (cs) 1979-12-11 1979-12-11 Způsob výroby kyseliny citrónové submersním fermentačnim způsobem zkvašováním cukerných roztoků plísni Aspergillus niger

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS209714B1 true CS209714B1 (cs) 1981-12-31

Family

ID=5437240

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS864179A CS209714B1 (cs) 1979-12-11 1979-12-11 Způsob výroby kyseliny citrónové submersním fermentačnim způsobem zkvašováním cukerných roztoků plísni Aspergillus niger

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS209714B1 (cs)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CA1202921A (en) Hyperproducing cellulase microorganism
Moraine et al. Kinetics of the xanthan fermentation
Papagianni et al. Submerged and solid-state phytase fermentation by Aspergillus niger: effects of agitation and medium viscosity on phytase production, fungal morphology and inoculum performance
Allais et al. Isolation and characterization of bacterial strains with inulinase activity
SE435627B (sv) Forfarande for framstellning av etanol genom fermentering av en substans, innehallande xylos, med jest av arterna pichia stipitis, p. segobiensis eller candida shehatae
Kwon et al. Optimization of culture conditions and medium components for the production of mycelial biomass and exo-polysaccharides with Cordyceps militaris in liquid culture
CN101855973B (zh) 一种漆酶产生真菌菌株白耙齿菌及其培养方法和应用
SU1090262A3 (ru) Способ получени @ -галактозидазы
RU2001949C1 (ru) Штамм гриба TRICHODERMA REESEI - продуцент целлюлолитических ферментов
EP1070136B1 (en) Strain of the microorganism penicillium oxalicum var. armeniaca and its application
Öngen-Baysal et al. Production of inulinase by mixed culture of Aspergillus niger and Kluyveromyces marxianus
NO147927B (no) Anordning for aa skille fra hverandre to medier som befinner seg i hvert sitt rom paa hver sin side av en ringformet aapning mellom to deler som er bevegelige i forhold til hverandre
Hansson et al. Effects of cultivation techniques and media on yields and morphology of the basidiomycete Armillaria mellea
CS209714B1 (cs) Způsob výroby kyseliny citrónové submersním fermentačnim způsobem zkvašováním cukerných roztoků plísni Aspergillus niger
CN108893498B (zh) 一种提高聚苹果酸产量的发酵方法
RU2090610C1 (ru) Штамм дрожжей candida famata - продуцент кормовой биомассы
Priem et al. Production of β-1.4-xylanase in continuous culture by Aureobasidium Pullulans CBS 58475
US6716617B1 (en) Fermentation method with continuous mass cultivation of ciliates (protozoa) for producing biogenous valuable substances
DK171744B1 (da) Fremgangsmåde til fremstilling af pyrodruesyre
Kumari et al. THE INVERTASE-A REVIEW
Schellart Fungal protein from corn waste effluents: a model study
CS202709B1 (cs) Způsob výroby kyseliny citrónové submersním fermentačním způsobem zkvašováním cukerných roztoků plísní Aspergillus niger
Zetelaki‐Horváth et al. Effect of oxygen transfer rate on the composition of the pectolytic enzyme complex of Aspergillus niger
SU1116058A1 (ru) Питательна среда дл культивировани продуцента мацерирующих ферментов @ @ -31
CN108148770A (zh) 一种发酵培养基及高效表达蛋白的发酵方法