CS206992B1 - Způsob separace glukózooxidázy - Google Patents
Způsob separace glukózooxidázy Download PDFInfo
- Publication number
- CS206992B1 CS206992B1 CS725579A CS725579A CS206992B1 CS 206992 B1 CS206992 B1 CS 206992B1 CS 725579 A CS725579 A CS 725579A CS 725579 A CS725579 A CS 725579A CS 206992 B1 CS206992 B1 CS 206992B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- cellulose
- glucose oxidase
- solution
- sorption
- separation
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 10
- 238000000926 separation method Methods 0.000 title description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 claims description 16
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 claims description 16
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 claims description 15
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 claims description 15
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 claims description 15
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 claims description 15
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims description 5
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 claims description 2
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 5
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- MZVQCMJNVPIDEA-UHFFFAOYSA-N [CH2]CN(CC)CC Chemical group [CH2]CN(CC)CC MZVQCMJNVPIDEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- -1 diethylaminoethyl groups Chemical group 0.000 description 2
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
Description
Vynález se týká způsobu separace glukózooxidázy z roztoků získaných extrakci plísňových buněk.
K separaci glukózooxidázy z roztoků se dosud užívá způsob, při kterém se glukózooxidáza sorbuje na mikrokrystalické fibrilárni celulóze s dietylaminoetylovymi nebo distylaminohydroxipropylovými výměnnými skupinami, ionexová celulóza se zachycenou glukózooxidázou se odfiltruje a čistá glukózooxidáza se izoluje eluci.
Nevýhody tohoto způsobu tkvi především v tom,.že vláknitá struktura mikrokrystalické celulózy je příčinou špatné filtrovatelnosti a sorpci nelze provádět kontinuálně v kolonách, ale pouze násadou celulózy do zpracovávaného roztoku. Dalši nevýhodou tohoto způsobu je jeho nepřesnost a špatná reprodukovatelnost.
Uvedené nevýhody odstraňuje způsob separace glukózooxidázy podle vynálezu, jehož podstata spočívá v tom, že se roztok glukózooxidázy uvádi do styku s celulózou v perlové formě s dietylaminoetylovými nebo dietylaminohydroxipropylovými výměnnými skupinami o velikosti zrn 30 až 800 fum a zachycená glukózooxidáza se izoluje ze sorbentu eluci.
Výhodou způsobu podle vynálezu je, že jej lze provádět jak šaržovitě násadou celulózy do roztoku glukózooxidázy, tak i kontinuálně průtokem roztoku kolonou naplněnou perlovou celulózou. Oe to umožněno vlastnosti perlové celulózy a jejich derivátů, které jsou v potřebném rozsahu tlaků nestlačitelné a nezpůsobuji pokles průtoku v závislosti na tlaku. Dalši výhodou tohoto způsobu je jeho přesnost a reprodukovatelnost. Makroporézni charakter perlové celulózy umožňuje, na rozdil od fibrilárni celulózy,uplatnit při sorpci nejen vnější, ale i vnitřní povrch a perlová celulóza obsahuje vyšší množství sorpčně aktivních skupin, takže dochází ke zvýšeni sorpčni kapacity vůči glukózooxidáze.
206 992
206 882
Přiklad 1 t v 1 000 ml roztoku glukózooxidázy o aktivitě 4.500/ul Og ml“^ h“1- bylo suspendováno 2,5 g OEAE-perlové celulózy obsahujici 2,0 milimolů dietylaminoetylových skupin v 1 g při velikosti zrna 30 <um. Suspenze byla utichána 30 minut při 20 °C a potom byl sorbent odfiltrován. Ve filtrátu bylo zjištěno 7,75 % původni aktivity. Veškerá sorbované enzymová aktivita byla ze sorbentu eluována 1 M roztokem chloridu sodného při teplotě 15 až 20 °C. Přiklad 2 t v 1 000 ml roztoku glukozooxidázy o aktivitě 4.500 ^ul 0gml*^h“^ bylo suspendováno 10 g DEAHP-cslulózy obsahujici 2,5 millmolu distylaminohydroxipropylových skupin v 1 g při velikosti zrna 30 (um. Suspenze byla michána 30 minut při 20 °C a potom byl sorbent odfiltrován. Ve filtrátu bylo zjištěno 15 % původni enzymové aktivity. Veškerá sorbované enzymová aktivita byla ze sorbentu eluována 1 M roztokem chloridu sodného při teplotě 15 až 20 °C.
Přiklad 3 » □EAE - celulóza perlová o koncentraci dietylaminoetylových skupin 2,0 milimolů / g byla naplněna do sloupce rozměrů 0,9 x 15 cm. Sloupcem byl propouštěn roztok glukozooxidázy o aktivitě 4.500 ^um Og ml“^ h“1, rychlostí 1 mí cm“2' min.“'1'. Při zjištěné aktivitě 340 ml Og ml“ h“1 ve vytékajicim roztoku z kolony, tj. po průtoku 500 ml roztoku kolonou, bylo propouštěni zastaveno. Potom byl sloupec promyt vodou a enzym byl eluován 1 M roztokem chloridu sodného. V eluátu bylo získáno 92,25 % veškeré vložené enzymově aktivity.
Claims (2)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZU1, Způsob separace glukozooxidázy z roztoků získaných extrakci plisňových buněk sorpci na celulóze s distylaminoetylovými nebo dietylaminohydroxipropylovými výměnnými skupinami, vyznačený tim, že se roztok uvádi do styku s celulózou v perlové formě o velikosti zrn 30 až 800 (um, načež se zachycené glukózooxidáza izoluje ze sorbentu sluci.
- 2. Způsob separace podle bodu 1, vyznačený tim, že se roztok glukózooxidázy nechá protékat vrstvou celulózy v perlové formě.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS725579A CS206992B1 (cs) | 1979-10-25 | 1979-10-25 | Způsob separace glukózooxidázy |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS725579A CS206992B1 (cs) | 1979-10-25 | 1979-10-25 | Způsob separace glukózooxidázy |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS206992B1 true CS206992B1 (cs) | 1981-07-31 |
Family
ID=5421370
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS725579A CS206992B1 (cs) | 1979-10-25 | 1979-10-25 | Způsob separace glukózooxidázy |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS206992B1 (cs) |
-
1979
- 1979-10-25 CS CS725579A patent/CS206992B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0092845B1 (en) | Process for purifying enzyme | |
| Ballio et al. | The isolation of trehalose and polyols from the conidia of Penicillium chrysogenum Thom | |
| CS206992B1 (cs) | Způsob separace glukózooxidázy | |
| Burke et al. | A two-step procedure for purification of papain from extract of papaya latex | |
| CA1209938A (en) | Chromatographic separation of dextrose from starch hydrolysate | |
| CA1232850A (en) | Purification of superoxide dismutase | |
| US3095410A (en) | Deae substituted balsa wood ion-exchange material | |
| Rees et al. | Studies on nucleotides and related compounds in plants I. Isolation and identification of starch grain nucleotides | |
| US3591678A (en) | Method of purifying intrinsic factor | |
| US3093638A (en) | Cephalosporin c | |
| US3254003A (en) | Process for removing transglucosidase from amyloglucosidase | |
| US4160697A (en) | Method for purification of crude urokinase | |
| JPH0586802B2 (cs) | ||
| FI91279C (fi) | Menetelmä reaktorissa olevan immobilisoidun entsyymin aktiivisuuden pitämiseksi vakiona | |
| Anzai et al. | Isolation of a complex of endo-cellulases from the gastric teeth of Dolabella auricularia by affinity chromatography | |
| US3042586A (en) | Purification of streptokinase | |
| Kornberg et al. | [131] Preparation of coenzyme A | |
| EP0185379A3 (en) | A process for the production of purified glucose isomerase | |
| Cammaerts et al. | Study of the intracellular location and the genetic control of malate dehydrogenase isozymes in Arabidopsis thaliana | |
| Morris | The three essential criteria | |
| JPS6463378A (en) | Separation of single stranded tpa and double standard tpa | |
| CS211153B1 (cs) | Způsob separace invertázy | |
| KR880001678B1 (ko) | 5'-이노신산 함유액의 정제방법 | |
| Lee | Purification and some properties of phosphofructokinase from human erythrocytes | |
| JPH0459796A (ja) | アフィニティークロマトグラフィー用担体およびアンチトロンビン３の精製方法 |