CS211153B1 - Způsob separace invertázy - Google Patents
Způsob separace invertázy Download PDFInfo
- Publication number
- CS211153B1 CS211153B1 CS260680A CS260680A CS211153B1 CS 211153 B1 CS211153 B1 CS 211153B1 CS 260680 A CS260680 A CS 260680A CS 260680 A CS260680 A CS 260680A CS 211153 B1 CS211153 B1 CS 211153B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- invertase
- cellulose
- solution
- separating
- pearl
- Prior art date
Links
Landscapes
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
Vynález se týká způsobu separace invertázy z roztoků, např. při výrobě z kvasniěných extraktů. Způsob separace invertázy z roztoků podle vynálezu spočívá v tom, že se roztok invertázy při pH,4 až 6 uvádí do styku s perlovou celulózou o velikosti zrna .30 až 800 μη s diethylaminovými skupinami v v koncentraci 0,3 až 3 mmol/g a zachycená invertáza se izoluje ze sorbentu elucí. Přitom se může postupovat tak, že se roztok invertázy nechá protékat vrstvou derivátů celulózy v perlové formě.
Description
Vynález se týká způsobu separace invertázy z roztoků, např. při výrobě z kvasničných extraktů.
K separaci invertázy (β-fruktofuranosid fructohydrolasy, E.C.3.2.1.26) z roztoků se dosud používá způsob, při kterém se invertáza sorbuje na mikrokrystalické fibrilární celulóze s diethylaminovými skupinami, ionexová celulóza se zachyceným enzymem se odfiltruje a ěistý enzym se izoluje elucí. Nevýhoda tohoto způsobu tkví především v tom, že vláknitá struktura mikrokrystalické DEAE-celulózy je příčinou Spatné filtrovatelnosti, separační proces trvá několik až desítky hodin a sorpci nelze tudíž provádět kontinuálně v kolonách, ale pouze násadou ionexového derivátu celulózy do zpracovávaného roztoku. Z toho plyne, že se nedosahuje maximálních sorpčních kapacit ionexových celulóz vůči invertáže, ale pouze rovnovážných kapacit, které jsou nižší. Další nevýhodou stávajícího způsobu izolace je špatná reprodukovatelnost a při analytických stanoveních nepřesnost.
Uvedené nevýhody odstraňuje způsob separace invertázy podle vynálezu, při kterém se roz tok invertázy uvádí do styku s celulózou v perlové formě s diethylaminovými nebo 1-(N,N-diethylamino)-2-hydroxypropylovými skupinami a zachycená invertáza se izoluje ze sorbentu elucí.
Podstata způsobu separace invertázy z roztoků podle vynálezu spočívá v tom, že se roztok invertázy při pH 4 až 6 uvádí do styku s perlovou celulózou o velikosti zrna 30 až 800 /an a s diethylamonovými sorpčně aktivními skupinami v koncentraci 0,3 až 3 mmol/g a ' zachycená invertáza se izoluje ze sorbentu elucí, např. 1 11 NaCl.
Způsob separace výše uvedený lze s výhodou provést tak, že se roztok invertázy nechá protékat vrstvou derivátů celulózy v perlové formě.
Výhodou způsobu podle vynálezu je, že jej lze provádět jak šaržovitě násadou ionexové celulózy do roztoku invertázy, tak i kontinuálně průtokem roztoku kolonou naplněnou perlovou ionexovou celulózou. Za statistických podmínek je sorpce kineticky závislá v případě použití ionexové celulózy o zrnitosti větší než 300 >tm, maximální hodnoty sorpce se dosahuje až po 20 hod, ale již po 4 hodinách sorpce příliš nevzrůstá. U ionoxové celulózy o zrnitosti do 300 pm se dosahuje maximální sorpce již po jedné hodině. Tak např. za těchto podmínek se sorbovalo maximálně 70 mg invertézy/lg ionexové celulózy.
V dynamických podmínkách, kdy byla perlová celulóza umístěna v koloně, nebylo pozorováno ovlivnění hodnot sorpce difúzí ani při průtocích 0,35 cm^/cm2 min, což odpovídá době zdržení, = 2,88 min. Za těchto podmínek byla dosažena také maximální hodnota sorpce 183 až 203 mg invertázy, 1 g sorbentu. Z výsledků jednoznačně plyne, že kapacita ionexové celulózy v dynamických podmínkách několikanásobně převyšuje sorpci ve statických podmínkách.
Níže uvedené příklady ilustrují způsob separace sacharózy, aniž by se tím předmět vynálezu omezoval.
Příklad 1
K 2,5 cm^ pufrovaného roztoku (Britton-Robinson pH 5), obsahujícímu 22,44 mg invertázy, bylo přidáno 1 g odsáté nabotnalé perlové celulózy s diethylaminovými skupinami v OH-formě (1,43 mmol/g, 4 g H20/g, zrnitost 50 až 160 (um). Po 20 hodinách sorpce při 4 °C za občasné ho promícháni suspenze se sorbovalo 70,5 mg invertázy/1 g suchého celulózového ionexu, tj. záchyt činil 62,8 % výchozího .obsahu invertázy.
Veškerá sorbovaná invertáza byla desorbována v koloně nebo na fritě elucí 1 íí NaCl.
Příklad 2
Přes 1 g odsáté ve vodě nabotnalé perlové celulózy s diethylaminovými skupinami v 0H-formě podle příkladu 1 byl čerpán roztok invertázy 6 cm^ (o obsahu 11,22 mg invertázy/cm^) rychlostí 0,35 cmVcm3 min. Nosným médiem byla destilovaná voda. Na celulóze se za těchto podmínek sorbovalo při 25 °C 203 mg invertázy/l g ionexové celulózy, která byla z 81 % aluovatelná 1 M NaCl. Eluovaný roztok invertázy měl aktivitu 2 142 ^pmol/min cm^ pro 10% roztok sacharózy při JO °C a pH 5, což pro aktivitu enzymu 37,5 ^mol/min mg odpovídá obsahu invertázy 268 mg/1 g ionexové celulózy.
Claims (2)
- PŘEDMĚTVYNÁLEZU1. Způsob separace invertázy z roztoků, vyznačený tím, že se roztok invertázy při pH 4 až 6 uvádí do styku s perlovou celulózou o velikosti zrna 30 až 800 £um s diethylaminovými skupinami v koncentraci 0,3 až 3 mmol/g a zachycená invertáza se izoluje ze sorbentu elucí.
- 2. Způsob eeparace podle bodu 1, vyznačený tím, že se roztok invertázy nechá protékat vrstvou derivátů celulózy v perlové formě.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS260680A CS211153B1 (cs) | 1980-04-15 | 1980-04-15 | Způsob separace invertázy |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS260680A CS211153B1 (cs) | 1980-04-15 | 1980-04-15 | Způsob separace invertázy |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS211153B1 true CS211153B1 (cs) | 1982-01-29 |
Family
ID=5363673
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS260680A CS211153B1 (cs) | 1980-04-15 | 1980-04-15 | Způsob separace invertázy |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS211153B1 (cs) |
-
1980
- 1980-04-15 CS CS260680A patent/CS211153B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Nakajima et al. | Recovery of uranium by immobilized microorganisms | |
| US5714183A (en) | Hydrolysis of the galactomannans of coffee extract with immobilized beta-mannanase | |
| EP0490929B1 (en) | A process for the hydrolysis of hemicellulose by immobilized enzymes and a product comprising an immobilized hemicellulolytic enzyme | |
| Messing | [11] Adsorption and inorganic bridge formations | |
| Kim et al. | Adsorption kinetics and behaviors of cellulase components on microcrystalline cellulose | |
| FUJITA et al. | Chromatography in presence of high concentrations of salts on columns of celluloses with and without ion exchange groups (hydrogen bond chromatography): Its application to purification of yeast enzymes | |
| CS211153B1 (cs) | Způsob separace invertázy | |
| Bar et al. | Immobilization of Acetobacter acoti on cellulose ion exchangers: Adsorption isotherms | |
| McClendon et al. | Chromatography on cellulose phosphate of polysaccharide hydrolases from fungi | |
| EP0176585B1 (en) | Enzyme paper for the indication of cholinesterase-inhibitors, the preparation and use thereof | |
| US5177005A (en) | Method for maintaining immobilized glucose isomerase activity during continuous isomerization of glucose to fructose | |
| Watanabe et al. | Characteristics of immobilized tannin for protein adsorption | |
| Nummi et al. | Isolation of cellulases by means of biospecific sorption on amorphous cellulose | |
| Ryu et al. | Adsorption of a xylanase purified from Pulpzyme HC onto alkali-lignin and crystalline cellulose | |
| Watanabe et al. | Preparation of immobilized tannins for protein adsorption | |
| FI91279C (fi) | Menetelmä reaktorissa olevan immobilisoidun entsyymin aktiivisuuden pitämiseksi vakiona | |
| Mislovičová et al. | Coated silica and its behaviour in dye-affinity chromatography | |
| Chen et al. | Immobilized glucose isomerase on DEAE cellulose beads | |
| Danielsson et al. | Determination by the enzyme thermistor of cellobiose formed on degradation of cellulose | |
| Jilka et al. | Uptake of [U-14C] glucose into subcellular particles of wheat seedling roots | |
| Bailey et al. | Selective concentration of polygalacturonase and bD-glucosidase of Aspergillus niger culture filtrate using mineral adsorbents | |
| US4264732A (en) | Enzymatic compositions for isomerizing glucose into levulose | |
| US3910823A (en) | Immobilization of urease on porous titania | |
| SU615087A1 (ru) | Способ получени иммобилизованных никотинамидадениндинуклеотид (над)-зависимых ферментов | |
| Homma et al. | Fractionation of the β-glucosidase component from cellulase by cellulose columns and production of cellobiose by the residual enzymes |