CS204030B2 - Method of producing novel antibiotic bl 580 zeta - Google Patents
Method of producing novel antibiotic bl 580 zeta Download PDFInfo
- Publication number
- CS204030B2 CS204030B2 CS784018A CS401878A CS204030B2 CS 204030 B2 CS204030 B2 CS 204030B2 CS 784018 A CS784018 A CS 784018A CS 401878 A CS401878 A CS 401878A CS 204030 B2 CS204030 B2 CS 204030B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- zeta
- mixture
- column
- concentrated
- ethyl acetate
- Prior art date
Links
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 title claims abstract description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 4
- 241000187391 Streptomyces hygroscopicus Species 0.000 claims abstract description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 abstract description 8
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 abstract description 8
- 229940124536 anticoccidial agent Drugs 0.000 abstract description 3
- 239000003224 coccidiostatic agent Substances 0.000 abstract description 3
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 abstract 1
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 49
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 23
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 15
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 14
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 14
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 9
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 8
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 8
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 8
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 8
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 8
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 8
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 7
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 7
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 7
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 description 6
- DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N Tert-Butanol Chemical compound CC(C)(C)O DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 6
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 6
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 6
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 6
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 5
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 5
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 5
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 5
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 5
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 4
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 4
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000011089 carbon dioxide Nutrition 0.000 description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 4
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 4
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 210000004215 spore Anatomy 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000223932 Eimeria tenella Species 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 239000002024 ethyl acetate extract Substances 0.000 description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 3
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 3
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 3
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 3
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 3
- GHOKWGTUZJEAQD-ZETCQYMHSA-N (D)-(+)-Pantothenic acid Chemical compound OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(O)=O GHOKWGTUZJEAQD-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 2
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- -1 Alkali metal salts Chemical class 0.000 description 2
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 2
- 241000223931 Eimeria acervulina Species 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- MJVAVZPDRWSRRC-UHFFFAOYSA-N Menadione Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(C)=CC(=O)C2=C1 MJVAVZPDRWSRRC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 229910001413 alkali metal ion Inorganic materials 0.000 description 2
- YNQLUTRBYVCPMQ-UHFFFAOYSA-N alpha-methyl toluene Natural products CCC1=CC=CC=C1 YNQLUTRBYVCPMQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 2
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 2
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 2
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 2
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- 239000013505 freshwater Substances 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- GLDOVTGHNKAZLK-UHFFFAOYSA-N octadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCO GLDOVTGHNKAZLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003250 oocyst Anatomy 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 2
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 2
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001763 2-hydroxyethyl(trimethyl)azanium Substances 0.000 description 1
- ZVGCIMVMXFUSDB-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-1-nitro-1-nitrosoguanidine Chemical compound CN=C(N)N(N=O)[N+]([O-])=O ZVGCIMVMXFUSDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N Boron Chemical compound [B] ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000273930 Brevoortia tyrannus Species 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GHOKWGTUZJEAQD-UHFFFAOYSA-N Chick antidermatitis factor Natural products OCC(C)(C)C(O)C(=O)NCCC(O)=O GHOKWGTUZJEAQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000019743 Choline chloride Nutrition 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XZMCDFZZKTWFGF-UHFFFAOYSA-N Cyanamide Chemical compound NC#N XZMCDFZZKTWFGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N D-Lyxoflavin Natural products OCC(O)C(O)C(O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000223924 Eimeria Species 0.000 description 1
- 235000019733 Fish meal Nutrition 0.000 description 1
- 108010068370 Glutens Proteins 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000004658 Medicago sativa Species 0.000 description 1
- 235000010624 Medicago sativa Nutrition 0.000 description 1
- ZOKXTWBITQBERF-UHFFFAOYSA-N Molybdenum Chemical compound [Mo] ZOKXTWBITQBERF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000364057 Peoria Species 0.000 description 1
- 108010009736 Protein Hydrolysates Proteins 0.000 description 1
- 206010039509 Scab Diseases 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N Vitamin A Natural products OC/C=C(/C)\C=C\C=C(\C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N 0.000 description 1
- QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N Vitamin D3 Natural products C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C/C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N 0.000 description 1
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 1
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 description 1
- 150000001449 anionic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 230000002051 biphasic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007664 blowing Methods 0.000 description 1
- 229910052796 boron Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 235000019365 chlortetracycline Nutrition 0.000 description 1
- SGMZJAMFUVOLNK-UHFFFAOYSA-M choline chloride Chemical compound [Cl-].C[N+](C)(C)CCO SGMZJAMFUVOLNK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960003178 choline chloride Drugs 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 239000003245 coal Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 235000013861 fat-free Nutrition 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 1
- 239000004467 fishmeal Substances 0.000 description 1
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 1
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 235000021312 gluten Nutrition 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-M hydrogensulfate Chemical compound OS([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 229910001412 inorganic anion Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910001411 inorganic cation Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002198 insoluble material Substances 0.000 description 1
- 238000009413 insulation Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 239000010699 lard oil Substances 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N mechlorethamine Chemical class ClCCN(C)CCCl HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004961 mechlorethamine Drugs 0.000 description 1
- 239000012092 media component Substances 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 239000011733 molybdenum Substances 0.000 description 1
- 229910052750 molybdenum Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 1
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 1
- 229940055726 pantothenic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019161 pantothenic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011713 pantothenic acid Substances 0.000 description 1
- 238000005192 partition Methods 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 239000003531 protein hydrolysate Substances 0.000 description 1
- 235000019192 riboflavin Nutrition 0.000 description 1
- 239000002151 riboflavin Substances 0.000 description 1
- 229960002477 riboflavin Drugs 0.000 description 1
- 239000004576 sand Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 1
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 1
- QYSXJUFSXHHAJI-YRZJJWOYSA-N vitamin D3 Chemical compound C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-YRZJJWOYSA-N 0.000 description 1
- 235000005282 vitamin D3 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011647 vitamin D3 Substances 0.000 description 1
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 1
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 1
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 1
- 235000012711 vitamin K3 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011652 vitamin K3 Substances 0.000 description 1
- 229940045997 vitamin a Drugs 0.000 description 1
- 229940021056 vitamin d3 Drugs 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229940041603 vitamin k 3 Drugs 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
- C12P1/06—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes by using actinomycetales
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07G—COMPOUNDS OF UNKNOWN CONSTITUTION
- C07G11/00—Antibiotics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/465—Streptomyces
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/886—Streptomyces
- Y10S435/898—Streptomyces hygroscopicus
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Mycology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Fodder In General (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Feed For Specific Animals (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
Vynález se týká způsobu výroby nového antibiotika označeného BL 680 ZETA. Účinnost nového antibiotika jako antikokcidiálního činidla a jeho chemické a fyzikální vlastnosti je odlišují od dříve popsaných antibiotik.
Nové antibiotikum vyráběné podle vynálezu je organickou kyselinou a je tedy schopné vytvářet soli s ionty alkalických kovů. Tudíž soli vzniklé smícháním volné kyseliny antibiotika se stechiometrickými množstvími iontů alkalických kovů, účelně v neutrálním rozpouštědle, se tvoří s ionty, například sodíku, draslíku, amonia a příbuznými kationty. Soli alkalických kovů a antibiotika BL850 ZETA všeobecně jsou krystalické pevné látky poměrně nerozpustné ve vodě, avšak rozpustné ve většině obvyklých organických rozpouštědel, například v methanolu, ethylacetátu, acetonu, chloroformu, heptanu, etheru a benzenu.
Způsob výroby nového antibiotika, označeného BL850 ZETA, spočívá podle vynálezu v tom, že se kultivuje Streptomyces hygroscopicus NRRL 11108 ve vodném živném prostředí o hodnotě pH v rozsahu od 6 do 8, obsahujícím asimilovatelné zdroje uhlohydrátu, dusíku a anorganických solí za submerních aerobních podmínek při teplotě 25 až 32 °C, s výhodou po dobu 48 až 96 ho2 din, načež se antibiotikum izoluje z vyfermentovaného živného média.
Nové antibiotikum, které bylo označeno BL580 ZETA, vzniká za kontrolovaných podmínek během kultivace nové mutanty kmene Streptococcus hygroscopicus, která se získává z izolátu přirozeně selektované jediné kolonie S. hygroscopicus NRRL 5647 působením N-methyl-N‘-nitro-N“-nitrosoguanidinu. Živá kultura kmene nové mutanty byla uložena v Culture Collection Laboratory, Northern Regional Research Center, United States Department of Agriculture, Peoria, Illinois a byla přidána ke stálé sbírce pod přírůstkovým číslem NRRL 11108.
Kultivační, fyziologické a morfologické znaky NRRL 11108 jsou v podstatě stejné jako u NRRL 5647 (jak bylo určeno Dr. H. Tresnerem, Lederle Laboratories Division, Američan Cyanamid Company, Pearl River, New York), s tím rozdílem, že NRRL 11108 na většině médií sporuluje málo nebo nesporuluje vůbec. Obecný popis NRRL 5647 je uveřejněn v americkém patentnímu spisu č. 3 812 249.
Rozumí se, že při produkci BL580 ZETA není vynález omezen na jednotlivý mikroorganismus nebo mikroorganismy plně odpovídající růstu a mikroskopickým charakteristikám NRRL 11108. Ve skutečnosti je žá204030 doučí a záměrné zahrnout použití mutant produkovaných různým způsobem· z NRRL 11108, například ozářením X-paprsky, ultrafialovým ozářením, dusíkatým yperitem, · vystavením účinku fágu apod.
Antibiotikum BL5.80 ZETA je aktivním antikokcidiálním činidlem, jak bylo zjištěno následujícími testy in vivo, při kterých bylo použito následující diety pro kuřata:
Premix s vitamíny a aminokyselinami 0,5 %
Stopové minerály 0,1 %
Chlorid sodný 0,3 %
Fosforečnan vápenatý 1,2 %
Mletý vápenec 0,5 %
Stabilizovaný tuk 4,0 %
Dehydratovaná vojtěška (17 % bílkovin) 2,0 · %
Kukuřičná lepková mouka (41 % bílkovin) 5,0 %
Menhaden rybí moučka (60 % bílkovin ) 5,0 '%
Sójová neodtučněná mouka (44 % bílkovin) 30,0 %
Mletá žlutá kukuřice, jemná do 100 %
Premix obsahující vitamíny a aminokyseliny ve výše uvedené dietě pro kuřata byl připraven z následující směsi. Kvantitativní údaje se týkají jednotek v kilogramu diety pro kuřata.
Butylhydroxytoluen dl-Methionin
Vitamín A Vitamín D3
125 mg
500 mg 3300 mj 1100 mj
Riboflavin | 4,4 | mg |
Vitamín E | 2,2 | mj |
Niacin | 27,5 | mg |
Kyselina pantothenová | 8,8 | mg |
Cholinchlorid | 500 | mg |
Kyselina listová | 1,43 | mg |
Menadion bisulfát sodný | 1,1 | mg |
Vitamín Bi2 | 11 | μζ |
Mletá žlutá kukuřice, jemná do | 5 | g |
Směsné inokulum 5000 •spor ulovených oocyst Eimeria acervulina a dostatečný počet oocyst Eimeria tenella k vyvolání 85 až 100% mortality neošetřených kontrol bylo podáno skupinám sedmidenních kuřat přímou inokulací do volete všech kuřat. Kuřata měla volný přístup k dietě a vodě během celého zkušebního období. Dva dny po naočkování bylo podáváno různým skupinám testovaných kuřat medikované krmivo, skládající se z diety pro kuřata a různých množství antibiotika BL580 ZETA. Deset dní po naočkování bylo testování ukončeno. Kuřata byla zvážena, pitvána a bylo hodnoceno poškození jejich zažívacího ústrojí. Výsledky tohoto testu jsou patrné z níže uvedené tabulky I. Tyto výsledky ukazují, že bylo dosaženo 80 % přežití infikovaných kuřat, když bylo infikovaným kuřatům v dietě podáno· 60· ppm BL580· ZETA. Tyto výsledky rovněž ukazují signifikantní potlačení lézí vyvolaných Eimeria tenella a Eimeria acervulina, když bylo infikovaným kuřatům v dietě podáno 30 nebo 60 ppm BL580 ZETA.
TABULKA I
Koncentrace BL580 Výchozí
ZETA · v dietě, ppm počet kuřat
Procento kuřat se zmenšenými lézemi Eimeria Procento přežití Eimeria tenella acervulina
Kultivace mikroorganismu Streptomyces hygroscopicus NRRL 11108 lze provádět v širokém výběru tekutých živných prostředí. Prostředí, která jsou použitelná pro· produkci antibiotika· BL850 ZETA, obsahují aslmilovatelný zdroj uhlíku, například škrob, cukr, melasu, glycerol atd., asimilovatelný zdroj dusíku, například bílkoviny, hydrolyzáty bílkovin, polypeptidy, aminokyseliny, kukuřičný ' výluh atd., a anorganické aniointy a kationty, například draslík, sodík, vápník, síran, fosforečnan, chlorid atd. Stopové prvky, například bor, molybden, měď atd., jsou dodávány jako nečistoty jiných složek média.
Vzdušnění tanků a nádob se provádí proháněním· sterilního vzduchu prostředím nebo na povrch fermentačního prostředí. Další míchání v tancích se provádí rotačním míchadlem. Protipěnidlo, například jedno procento oktadekanolu v sádlovém oleji, může být přidáno· v případě potřeby.
Inokulum v třepačce ze Streptomyces hygroscopicus NRRL 11108 se připravuje naočkováním dávek sterilního tekutého média v 500 ml baňkách se škrabanými nebo smytými sporami ze šikmého agaru kultury. Obvykle se používá následujícího média:
Sójová mouka 1,0 %
Glukóza 2,0 %
Kukuřičný výluh 0,f5 %
Uhličitan vápenatý 0,3 %
Voda do 100 %
Baňky se inkubují při teplotě od 25 do °C, s výhodou 28 °C, a intenzívně třepou na rotační třepačce po dobu 48 až 96 ho204030 din. Dvě 100 ml dávky tohoto· inokula se použijí k naočkování stejného sterilního prostředí ve 2O11trové nádobě. Toto inokulum je inkubováno za míchání a vzdušnění sterilním vzduchem po dobu 36 až 64 hodin při teplotě 25 až 29 °C, s výhodou při teplotě 28 CiC. Toto inokulum se použije · k naočkování 300 litrů téhož sterilního média ve fermentačním tanku. Toto inokulum se inkubuje za míchání a vzdušnění sterilním vzduchem po dobu 36 až 64 hodin při teplotě 25 až 29 °C, s výhodou při teplotě 28 °C. Toto inokulum se použije k naočkování 400011trového fermentačního· tanku obsahujícího 3000 litrů sterilního média, například následujícího složení:
Kukuřičný výluh 0,,5 %
Sójová mouka 1,0 %
Kukuřičný škrob 4,0 %
Uhličitan vápenatý 0,1 %
Voda do 100 Ψο
Toto prostředí je fermentováno po dobu 100 až 200 hodin při teplotě od 27 do· 32 °C za míchání rotačním míchadlem a vzdušněném v množství 0,4 až 0,8 litru vzduchu na litr média za minutu. Obvykle se přidává protipěnidlo, například Hodag R FD82, v poměru asi 16 1/4545 · litrů postředí.
Po skončení fermentace se vyfermentovaná půda, obsahující antibiotikum BL 580 ZETA, spojí asi s polovičním objemem octanu eťhylnatého a míchá se po· dobu 2 až 3 hodin. Přidá se přibližně 8 °/o křemeliny a směs se filtruje deskovým a rámovým filtrem. Koláč na filtru se promyje ethylacetátem. Ethylacetátové extrakty se spojí a koncentrují v destilačním přístroji na sirup. Sirup se smíchá s dvojnásobkem svého objemu n-heptanu a skladuje při teplotě 4°C přes noc. Supernatant se oddělí dekantací a zahustí na gumovitý koncentrát, který se rozmíchá s 10 litry methanolu a chladí po několik hodin suchým ledem. Směs se zfiltruje přes fritu pokrytou křemelinou a promyje studeným methanolem. Methanolový roztok se zkoncentruje ve vakuu na sirupovitý odparek.
Připraví se chromatografická kolona s aktivním uhlím v poměru asi 1 litr uhlí na 50 gramů násady. Vysušený odparek se rozpustí v methylenchloridu v poměru 40 g/1 a nalije na kolonu. Methylen, chloridový eluát se shromažďuje jako· jedna frakce a zkoncentruje nia sirup. Odparek se smíchá s methanolem· a uloží v chladírně se suchým ledem, aby se teplota snížila na —10 °C na dobu 15 minut. Ztuhlý olej se po 15 minutách odfiltruje a produkt rozpustný v methanolu se koncentruje ve vakuu za vzniku oleje. Tento olej se rozpustí v minimálním množství methylenchloridu, přidá se silikagel a zkoncentruje se, až není přítomno žádné rozpouštědlo, a nanese se na sloupec swsháho silikagelu. Kolona se vyvíjí smčsí ethylacetátu s benzenem v poměru 1:1. · Kolona se potom nechá vykapat do sucha. Část sloupce s Rf 0,10 až 0,45 se vyřízne a rozmíchá ve směsi ethylacetátu s methylenchloridem a methanolem (2:2:1 objemově). Tato směs se zfiltruje, promyje další směsí rozpouštědel a zkoncentruje ve vakuu do sucha.
Smícháním n-heptanu s methanolem, ethylacetátem a vodou (3000 : 1500 : 20 : 40 objemově) se připraví dvoufázový systém. S dolní fází tohoto systému se smíchá Calatom R (Eagle-Pícher Industries, Clncinnati, Ohio), druh křemeliny, v poměru asi 2000 g/1650 ml dolní fáze a naplní se po částech do kolony (vntřní průměr 7,5 cm). Náplň se aplikuje ve formě směsi křemeliny, dolní fáze a lyofiižzovaného produktu. Naplněná kolona se vyvíjí horní fází a shromažďují se frakce. Aktivita se deteguje pomocí chromatografie na· tenké vrstvě u· vybraných frakcí za použití desek se silikagelem a směsi chloroformu s ethylacetátem (1:1) jako· vývojky a zuhelnatí se kyselinou sírovou k detegování. Frakce . 123 až 186 (konec) se spojí, zkoncentrují a poskytnou antibiotikum BL580 ZETA.
Vynález bude popsán podrobněji ve spojení s následujícími specifickými příklady provedení.
Příklad 1
Příprava inokula .................................................
Typické médium používané k růstu primárního inokula se připravuje podle následujícího· předpisu:
Sójová mouka 1,0 g
Glukóza 2,0 g
Kukuřičný výluh 0,5 %
Uhličitan vápenatý 0,3 °/o
Voda do 100 ml
Smyté nebo seškrábané spory ze šikmého agaru Streptomyces hygroscopicus NRRL 11108 se použijí k naočkování dvou 500 ml baněk, přičemž každá obsahuje 100 ml výše uvedeného média, které bylo sterilizováno. Baňky se umístí na rotační třepačku a intenzívně třepou po dobu 72 hodin při teplotě 28 °C. Získané inokulum se přenese do 22 litrové skleněné nádoby, obsahující 12 litrů stejného sterilního média. Toto sekundární inokulum se vzdušní sterilním vzduchem, zatímco růst probíhá po dobu 48 hodin při teplotě 28 °C. Získané sekundární inokulum se přenese do 44011Ίγ^№ tanku, obsahujícho 300 litrů stejného sterřlního média. Toto· terciární inokulum se vzdušní sterilním vzduchem v množství jeného· média. Toto terciární inokulum se den litr vzduchu/litrmédia/minuta a míchá rotačním míchadlém s 173 ot/min. Růst pokračuje po dobu 48 hodin při teplotě 28 ŮC. Hodnota pH v této době · je 6,9 až 7,0.
Příklad 2
Fermentace
Fermentační médium se připravuje podle následujícího předpisu:
Kukuřičný výluh 0,5g
Sójová mouka 1,0g
Kukuřičný škrob 4,0g
Uhličitan vápenatý 0,1g
Voda do 100 ml
30001itrová násada fermentačního média výše uvedeného složení ve 4000 litrovém tanku se sterilizuje při 120 °C po dobu 60 minut. Hodnota pH média po sterilizaci je 6,4 až 6,5. Toto médium se inokuluje 300 litry terciárního inokula, připraveného tak, jak je popsáno v příkladu 1. Fermentace se provádí při teplotě 28 až 29 °C za použití 11 litrů Hodag R FD82 jako protipěnidla. Vzdušnění se realizuje 0,6 litru sterilního vzduchu na litr půdy za minutu. Půda se míchá rotačním míchadlem se 150 ot/min. Na konci 138 hodiny fermentace se půda zpracuje.
Příklad 3
Izolace a čištění
2600 litrový podíl vyfermentované půdy, připravené tak, jak je popsáno v příkladu 2, s hodnotou pH 7,3, se smíchá s 1300 litry ethylacetátu a míchá se po dobu 0,5 hodiny. Přidá se 8 % (hmotnostně) křemeliny. Směs se filtruje po částech za míchání dvojicí rámových tlakových filtrů. Vodně-ethylacetátové filtráty se spojí, získá se 3300 litrů, které se nechají oddělit, přičemž se získá 1100 litrů ethylacetátového extraktu. Když se všechny podíly směsi půdy s ethylacetátem a křemelinou zfiltrují filtrem, přepážka filtru se promyje ethylacetátem. Ethylacetátové promývací roztoky se spojí a oddělí, přičemž poskytnou 600 litrů ethylacetátových promývacích roztoků. 1100 litrů ethylacetátového extraktu a 600 litrů promývacího ethylacetátového roztoku se spojí a koncentruje v destilačním přístroji objemu 1760 litrů asi na 100 litrů. Těchto 100 litrů se koncentruje dále ve 220 litrovém destilačním přístroji na 20 litrů. Těchto 20 litrů se koncentruje dále ve skleněné destilační aparatuře na strup.
Sirup se skladuje při 4°C po dobu 48 hodin a potom se smíchá s dvojnásobkem svého objemu n-heptanu. Směs se ponechá stát při teplotě 4°C přes noc. Supernatant se oddělí dekantací a koncentruje se na gumovitý odparek. Ke gumovitému odparku se přidá 10 litrů methanolu a směs se chladí pomocí suchého ledu po několik hodin. Směs se filtruje přes fritu obsahující vrstvu křemeliny promytou studeným methanolem. Spojené filtráty a promývací roztoky se koncentrují ve vakuu na sirup a poskytnou 1124 g odparku. Tento odparek se roz pustí v methylenchloridu v množství 33 g/1. Připraví se chromatografická kolona naplněná 27 litry granulovaného uhlí (20 až 40 ok). Roztok odparku v methylenchloridu se nechá protékat touto kolonou průtokovou rychlostí 400 ml/min. Methylenchloridový eluát se shromažďuje jako jediná frakce a koncentruje na sirup. Odparek se důkladně smísí s methanolem. Teplota směsi se sníží na —10 °C, v chladírně pomocí suchého ledu, a po dobu 15 minut se udržuje při teplotě —10 °C. Ztuhlý olej se odstraní filtrací a methanolický filtrát se koncentruje ve vakuu na sirup, čímž se získá
363,8 g oleje.
Suchá plněná chromatografická kolona se připraví naplněním 4 kg silikagelu do kolony z plastické hmoty obvodu 30,5 cm. Dávka 200 g výše uvedeného oleje se rozpustí v minimálním množství methylenchloridu. Přidá se 300 g silikagelu, důkladně smíchá a směs se zkoncentruje ve vakuu do sucha. Suchá směs se naplní do kolony a na horní část sloupce se umístí trochu mořského písku, aby se zabránilo poruchám sloupce během eluování. Kolona z plastické hmoty se umístí do skleněného pouzdra, aby získala oporu. Sloupec se eluuje 9,4 litry směsi ethylacetátu s benzenem v objemovém poměru 1:1. Sbírají se frakce a kolona se nechá vytéci do sucha. Část sloupce s Rf 0,10 až 0,45 se odstraní a suspenduje ve směsi ethylacetátu s methylenchloridem a methanolem v poměru 2:2:1. Směs se zfiltruje a promyje stejnou směsí rozpouštědel a koncentruje ve vakuu к suchu, přičemž se získá 22 g odparku.
Smícháním n-heptanu s metanolem, ethylacetátem a vodou (3000:1500:20:40 objemově) se připraví dvoufázový systém. 2000 g křemeliny promyté kyselinou se smíchá s 1650 ml spodní fáze tohoto rozpouštědlového systému a plní po částech do skleněné kolony (vnitřního průměru 7,5 cm). Dvacet dva gramy odparku se rozpustí ve spodní fázi, zfiltruje se a filtrát se smíchá s křemelinou a naplní do kolony. Naplněná kolona se vyvíjí horní fází rozpouštědlového systému a pomocí sběrače frakcí se odebírají frakce. Žádaná látka se zjistí sledováním vzorků frakcí pomocí chromatografie na tenké vrstvě. Frakce 123 až 186 (konec) se spojí, koncentrují ve vakuu na odparek, ten se rozpustí v terc.butylalkoholu a lyofilizuje, přičemž se získá 4,2 g produktu BL580 ZETA.
Příklad 4
Příprava sodné soli BL580 ZETA
900 mg BL580 ZETA se rozpustí ve směsi ml diethyletheru s 70 ml nízkovroucího petroletheru. Tento roztok se míchá se stejným objemem vody. Směs se upraví za míchání na hodnotu pH 2,0 1N kyselinou chlorovodíkovou. Vodná fáze se odstraní.
2040 9
Přidá se čerstvá voda. Dvoufázový systém se míchá a hodnota pH se upraví na 10,0 za použití 0,1 N hydroxidu sodného. Vzniklá emulze se odstředí. Horní fáze se koncentruje ve vakuu za vzniku bezbarvého odparku. Tento odparek se rozpustí v 15 ml diethyletheru a 30 ml nízkovroucího petroletheru. Roztok se nechá odpařovat v mrazírně při teplotě 4 °C po dobu 18 hodin, přičemž se objem sníží asi na 50 °/o. Nerozpustný materiál se oddělí filtrací a promyje petroletherem, čímž se získá bezbarvá pevná látka. Filtrát se odpaří a zpracuje jako vpředu, přičemž poskytne druhý podíl. Tento druhý filtrát se odpaří a zpracuje jako vpředu, přičemž poskytne třetí podíl. První a třetí -podíl se spojí, přičemž poskytnou 445 mg -sodné soli Bl580 ZETA.
Sodná sůl -BL580 ZETA má teplotu tání 162°C, specifickou otáčivost [a]D 20 = —3 - ± ± 2° (c = 0,94 v methanolu), a elementární analýzu (procenta): C 60,97, H 8,69, Na 2,70. Sodná sůl BL580 ZETA má charakteristickou absorpci v infračervené oblasti spektra při následujících vlnových délkách: 2,93, 3,43, 6,12, 7,27, 8,63, 9,07, 9,57, 10,05 a 10,45 jum. Standardní infračervené absorpční spektrum, sodné soli BL580 ZETA je znázorněno na -obr. 1 připojených výkresů. Standardní 13C spektrum nukleární magnetické rezonance sodné soli BL850 ZETA je znázorněno- na obr. 2 připojených výkresů. Standardní protonové spektrum magnetické rezonance sodné soli BL580 ZETA Je znázorněno na obr. 3 připojených výkresů.
Příklad 5
Příprava volné kyseliny BL580 ZETA
125 mg sodné soli BL580 ZETA se rozpustí ve 100 ml diethyletheru. Přidá se 100 ml vody a pH se upraví za míchání přidáním 1 N kyseliny chlorovodíkové na hodnotu 2,0. Etherová vrstva se oddělí a promyje čerstvou vodou. Promytý ether se - koncentruje ve vakuu. Odparek se rozpustí v terc.butylalkoholu a po lyofilizaci poskytne - 106 mg volné kyseliny BL580 ZETA.
Volná kyselina BL580 ZETA má teplotu tání 105 až 107 °C, specifickou otáčivost [a)D 20 = +7 ± 2° (c = 0,9 v methanolu) a elementární analýzu (procenta): C 63,99, H 9,43. Volná kyselina BL580 ZETA má charakteristickou absorpci v infračervené oblasti spektra při následujících vlnových délkách: 2,87, 3,40, 3,80, 5,87, 8,62, 9,02, 9,45, 9,57, 10,04 a 10,43 ^m. Standardní infračervené spektrum volné kyseliny BL580 ZETA je znázorněno - ' na obr. 4 připojených.’ výkresů.
Claims (1)
- Způsob výroby nového antibiotika BL580 ZETA, vyznačující se tím, že se kultivuje Streptomyces hygroscopicus NRRL 11108 ve vodném živném prostředí o hodnotě pH v rozsahu od 6 do- 8, obsahujícím asimilovatelné zdroje uhlohydrátu, dusíku a anorgaYNÁLEZU nických solí za submerzních aerobních podmínek při teplotě 25 až 32 °C, s výhodou po dobu 48 až 96 hodin, načež se antibiotikum izoluje z vyfermentovaného živného média.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US05/807,867 US4132779A (en) | 1977-06-20 | 1977-06-20 | Antibiotic BL580 Zeta and use thereof as anticoccidial agent |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CS204030B2 true CS204030B2 (en) | 1981-03-31 |
Family
ID=25197330
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CS784018A CS204030B2 (en) | 1977-06-20 | 1978-06-19 | Method of producing novel antibiotic bl 580 zeta |
Country Status (25)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4132779A (cs) |
JP (1) | JPS549202A (cs) |
AR (1) | AR218065A1 (cs) |
AT (1) | AT357670B (cs) |
AU (1) | AU520412B2 (cs) |
BE (1) | BE868236A (cs) |
CA (1) | CA1113874A (cs) |
CH (1) | CH643591A5 (cs) |
CS (1) | CS204030B2 (cs) |
DD (1) | DD138222A5 (cs) |
DE (1) | DE2824860A1 (cs) |
DK (1) | DK275678A (cs) |
ES (1) | ES470959A1 (cs) |
FR (1) | FR2395276A1 (cs) |
GB (1) | GB1561370A (cs) |
GR (1) | GR69878B (cs) |
IE (1) | IE47098B1 (cs) |
IL (1) | IL54681A (cs) |
IT (1) | IT1105522B (cs) |
NL (1) | NL7806494A (cs) |
NZ (1) | NZ187277A (cs) |
PL (1) | PL207755A1 (cs) |
PT (1) | PT68148A (cs) |
SE (1) | SE431347B (cs) |
ZA (1) | ZA782808B (cs) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4189537A (en) * | 1976-06-30 | 1980-02-19 | American Cyanamid Company | Process of producing antibiotic BL580Δ with Streptomyces hygroscopicus |
IT1227657B (it) * | 1988-12-01 | 1991-04-23 | Mini Ricerca Scient Tecnolog | Antibiotici ab-021 e processo per la loro produzione |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3595955A (en) * | 1969-03-26 | 1971-07-27 | Upjohn Co | Geldanamycin and process for producing same |
US3711605A (en) * | 1971-05-14 | 1973-01-16 | Lilly Co Eli | Antibiotic a150a |
US3812249A (en) * | 1972-11-24 | 1974-05-21 | American Cyanamid Co | Antibiotic bl580 |
US3993749A (en) * | 1974-04-12 | 1976-11-23 | Ayerst Mckenna And Harrison Ltd. | Rapamycin and process of preparation |
-
1977
- 1977-06-20 US US05/807,867 patent/US4132779A/en not_active Expired - Lifetime
-
1978
- 1978-05-09 IL IL54681A patent/IL54681A/xx unknown
- 1978-05-12 GB GB19393/78A patent/GB1561370A/en not_active Expired
- 1978-05-12 AU AU36076/78A patent/AU520412B2/en not_active Expired
- 1978-05-15 NZ NZ187277A patent/NZ187277A/xx unknown
- 1978-05-15 GR GR56237A patent/GR69878B/el unknown
- 1978-05-16 ZA ZA00782808A patent/ZA782808B/xx unknown
- 1978-05-23 CA CA303,848A patent/CA1113874A/en not_active Expired
- 1978-05-24 AR AR272315A patent/AR218065A1/es active
- 1978-06-06 DE DE19782824860 patent/DE2824860A1/de not_active Withdrawn
- 1978-06-07 PT PT68148A patent/PT68148A/pt unknown
- 1978-06-15 FR FR7817967A patent/FR2395276A1/fr active Granted
- 1978-06-15 NL NL7806494A patent/NL7806494A/xx not_active Application Discontinuation
- 1978-06-16 CH CH658978A patent/CH643591A5/de not_active IP Right Cessation
- 1978-06-16 AT AT439578A patent/AT357670B/de not_active IP Right Cessation
- 1978-06-19 IE IE1233/78A patent/IE47098B1/en unknown
- 1978-06-19 BE BE188663A patent/BE868236A/xx not_active IP Right Cessation
- 1978-06-19 CS CS784018A patent/CS204030B2/cs unknown
- 1978-06-19 SE SE7807007A patent/SE431347B/sv unknown
- 1978-06-19 IT IT49923/78A patent/IT1105522B/it active
- 1978-06-19 PL PL20775578A patent/PL207755A1/xx unknown
- 1978-06-19 DK DK275678A patent/DK275678A/da not_active Application Discontinuation
- 1978-06-20 JP JP7381678A patent/JPS549202A/ja active Pending
- 1978-06-20 DD DD78206147A patent/DD138222A5/xx unknown
- 1978-06-20 ES ES470959A patent/ES470959A1/es not_active Expired
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
IL54681A0 (en) | 1978-07-31 |
CH643591A5 (de) | 1984-06-15 |
AU3607678A (en) | 1979-11-15 |
US4132779A (en) | 1979-01-02 |
IE781233L (en) | 1978-12-20 |
AU520412B2 (en) | 1982-01-28 |
JPS549202A (en) | 1979-01-24 |
ES470959A1 (es) | 1979-10-01 |
IT7849923A0 (it) | 1978-06-19 |
ZA782808B (en) | 1979-05-30 |
PT68148A (en) | 1978-07-01 |
SE7807007L (sv) | 1978-12-21 |
AT357670B (de) | 1980-07-25 |
IL54681A (en) | 1982-12-31 |
BE868236A (fr) | 1978-12-19 |
IT1105522B (it) | 1985-11-04 |
CA1113874A (en) | 1981-12-08 |
DD138222A5 (de) | 1979-10-17 |
FR2395276B1 (cs) | 1981-07-10 |
DE2824860A1 (de) | 1979-01-04 |
GR69878B (cs) | 1982-07-20 |
IE47098B1 (en) | 1983-12-14 |
DK275678A (da) | 1978-12-21 |
ATA439578A (de) | 1979-12-15 |
GB1561370A (en) | 1980-02-20 |
AR218065A1 (es) | 1980-05-15 |
NZ187277A (en) | 1981-01-23 |
FR2395276A1 (fr) | 1979-01-19 |
PL207755A1 (pl) | 1979-07-02 |
SE431347B (sv) | 1984-01-30 |
NL7806494A (nl) | 1978-12-22 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP0029329B1 (en) | Enzyme inhibitor produced by cultivation of a streptomyces microorganism, a process for producing it and a culture of the microorganism | |
EP0182315A2 (en) | Novel antibiotic NK84-0218 pharmaceutical compositions containing it and process for the production of the same | |
CZ390592A3 (en) | Process for preparing 4,5-dihydrogendanamycin and hydroquinone thereof and the use of such compounds | |
EP0001709B1 (en) | Deoxynarasin antibiotics, their production and use | |
EP0185456B1 (en) | Cl-1577d and cl-1577e antibiotic/antitumor compounds, their production and use | |
US4594248A (en) | CL-1577-B4 compound, its production and use | |
US4138481A (en) | Antibiotic BL580Δ and method of use | |
US4279894A (en) | Streptomyces metabolite | |
SU751332A3 (ru) | Способ получени антибиотического комплекса а-35512 | |
CS204030B2 (en) | Method of producing novel antibiotic bl 580 zeta | |
EP0042172B1 (en) | Antibiotic compounds, pharmaceutical compositions containing such compounds, process for production thereof | |
CN1045997C (zh) | 抗球虫剂组合物及其制备方法 | |
US4249008A (en) | 3,4-Dihydro-4-hydroxy-5-(3-hydroxy-2-pyridinyl)-4-methyl-2H-pyrrole-2-carboxamide | |
US4189537A (en) | Process of producing antibiotic BL580Δ with Streptomyces hygroscopicus | |
CA1046965A (en) | Naphthyridinomycin antibiotics from streptomyces | |
CA1093999A (en) | Antibiotic bl580.delta. from streptomyces hygrosicopieus | |
KR810001709B1 (ko) | 항생제 bl580△의 제조방법 | |
EP0293787B1 (en) | Antibiotic 6270B, processes for its production, and its use as an anticoccidiosis agent and a feed additive | |
US3856939A (en) | Antibiotic bl869 {62 {11 and method of preparation | |
JP2522528B2 (ja) | 鳥類における慢性呼吸性疾患、家禽コレラ及び壊疽性腸炎を抑制する方法 | |
US2965547A (en) | Process for the production of l-6-diazo-5-oxonorleucine | |
US3734832A (en) | Fermentation process for producing physostigmine | |
SU528883A3 (ru) | Способ получени антибиотиков | |
US3891754A (en) | Antibiotic ensanchomycin and process of producing the same | |
SU452237A1 (ru) | Способ получени антибиотика реумицина |