CS201882B1

CS201882B1 - Kmeň mikroorganizmu Saccharomyces cerevisiae CCY 21-4-67-e

Info

Publication number: CS201882B1
Application number: CS849278A
Authority: CS
Inventors: Anna Kockova-Kratochvilova; Lydia Hronska; Karel Beran; Bozena Behalova
Original assignee: Kockova Kratochvilova Anna; Lydia Hronska; Karel Beran; Bozena Behalova
Priority date: 1978-12-18
Filing date: 1978-12-18
Publication date: 1980-11-28

Abstract

Vynález sa týká kmeňa Saccharomyces cerevisiae, ktorý produkuje nad 2 % ergosterolu v sušině. Kvasinky z rodu Saccharomyces sú najdfiležitejšími producentmi ergosterolu. Hodnoty, ktoré sa uvédzajú v staršej literatúre sú poměrně nízké. Viac ako 20 rokov ostal výskům v oblasti vitamínu D v stave relativného pokoja, stúpol až v posledných rokoch. Nevýhody z literatúry doteraz známých kmeňov kvasiniek odstraňuje vynález, ktorým je doteraz z literatúry neznámy kmeň mikroorganizmu Saccharomyces cerevisiae, uložený v Čs. zbierke kvasiniek, Chemický ústav SAV, Bratislava, Dúbravská cesta, pod číslom 21-4-67-e. Hlavnou výhodou nového kmeňa je zvýšená produktivita ergosterolu, ktorá dosahuje hodnoty až 6 % na sušinu biomasy. Kmeň CCY 21-4-67-e vytvára elipsoidné buňky o priemernom dížko-širkovom pomere 1,30, ktorých kvocient povrch/objem je menší ako 1 alebo rovný 1, v 20 % do 1,10. Obsahuje nad 80 % buniek s P/0 menším ako 1. Opakovanou selekciou sa mSže obsah buniek s P/0 menším ako 1 ešte o niečo zvýšit. Obrovské kolonie tohoto kmeňa sú hladké a mastné lesklé, prirastajú za 100 hodin o 1,57 mm. V tekutom prostředí kmeň sedimentuje, na povrchu nevytvéra ani kožku, miazdru ani prstenec.

Description

Kmeň mikroorganizmu Saccharomyces cerevisiae CCY 21-4-67-e

Vynález sa týká kmeňa Saccharomyces cerevisiae, ktorý produkuje nad 2 % ergosterolu v sušině.

Kvasinky z rodu Saccharomyces sú najdfiležitejšími producentmi ergosterolu. Hodnoty, ktoré sa uvédzajú v staršej literatúre sú poměrně nízké. Viac ako 20 rokov ostal výskům v oblasti vitamínu D v stave relativného pokoja, stúpol až v posledných rokoch.

Nevýhody z literatúry doteraz známých kmeňov kvasiniek odstraňuje vynález, ktorým je doteraz z literatúry neznámy kmeň mikroorganizmu Saccharomyces cerevisiae, uložený v Čs. zbierke kvasiniek, Chemický ústav SAV, Bratislava, Dúbravská cesta, pod číslom 21-4-67-e.

Hlavnou výhodou nového kmeňa je zvýšená produktivita ergosterolu, ktorá dosahuje hodnoty až 6 % na sušinu biomasy.

Kmeň CCY 21-4-67-e vytvára elipsoidné buňky o priemernom dížko-širkovom pomere 1,30, ktorých kvocient povrch/objem je menší ako 1 alebo rovný 1, v 20 % do 1,10. Obsahuje nad 80 % buniek s P/0 menším ako 1. Opakovanou selekciou sa mSže obsah buniek s P/0 menším ako 1 ešte o niečo zvýšit. Obrovské kolonie tohoto kmeňa sú hladké a mastné lesklé, prirastajú za 100 hodin o 1,57 mm. V tekutom prostředí kmeň sedimentuje, na povrchu nevytvéra ani kožku, miazdru ani prstenec.

201 882

Kmeň CCY 21-4-67-e po indukcii acetétom dobře sporuluje a mdže dosiahnúť až 62 % sporulačných elementov. Z toho je 2 % jednospórovýoh askov, 16 % dvojapórovýoh, 82 % troja štvorspórových. Spory sú hladké a gul’até. K rastu potřebuje vitamíny v prostředí. Pri 5 °C a pri 42 °C rastie slabo, optimélna teplota je 25 až 28 °C. Kvasí glukózu, galaktózu, maltózu, sacharózu a rafinózu. Tieto cukry tiež asimiluje, neasimiluje dusičňan draselný ani lyzín. Je to kvasinka osmofilné, ktoré znáša až 60 % sacharózy v prostředí. 2 % kyselina mliečna neovplyvňuje rast, 2 % kyselina vinna inhibuje rast na 50 %. V prostředí znéSa 8 % etanolu. Asimiluje etanol, etándiol a metanol.

Póvodný kmeň CCY 21-4-67 /póvodné kultúra označená TK 3 Libóň/ bol naočkovaný v suspenzi! 10' buniek.ml na povrch sladinového agaru a do středu misky na povrch agaru bol uložený kryštólik géfru. Kultivácia prebiehala v trne při 28 °C do doby, ked sa objevili na povrchu ojedinělé kolonie kvasiniek. Opakovaným rozsevom na misky sa vypěstoval mutantný kmeň, ktorý vytvářel len buňky s koeficientom povrch/objem menším ako 1 /ku konců exponenciálněj fázy, teda v době maximálněj produkcie ergosterolu/. Kmeň produkoval zvýšené množstvo ergosterolu od 3,5 do 6 % na sušinu bioni^ey. Tento kmeň sa označil ako CCY 21-4-67-e.

Kmeň CCY 21-4-67-e aa móže priemyselne využit na pestovanie za účelom získania biomasy a to tak klasickým spósobom na výrobu droždia ako aj kontinuálnym spósobom, za použitia melasy alebo inej odpadnej cukornatej suroviny, připadne syntetického etanolu ako zdroja uhlika. Neprodukovaná, odstředěné biomasa ea použije k extrakcii ergosterolu a jeho izolácii. Extrahované zvyšky biomasy aa móžu ďalej epracovať na krmivo alebo móžu byť využité na získanie iných zložiek biomasy kvasiniek /napr. nukleové kyseliny/.

Kmeň CCY 21-4-67-e bol pěstovaný na póde Olaen-Jensena umělého zloženia a na indukčně j póde na trepačke a kontinuálně. Ergosterol sa stanovil po kultivócii a lyofilizácii alebo s použitím vlhkej biomasy. K stanoveniu sa použila 50 až 100 mg vzorka lyofilizovaných kvasiniek, ktoré sa hydrolyzovala 40 % hydroxidom draselným po dobu 1 hodiny pri 0,196 MPa, vytrepala dietyléterom po dobu 2 hodin na trepačke pri 4 °C. Po oddělení éterovej vrstvy sa vodné vrstva ešte raz vytrepala éterom a spojené éterové extrakty ea premyli destilovanou vodou. Čistý éterový extrakt aa odpařil v 0,5 ml chloroformu a doplnil etanolom do 10 ml, připadne zriadil zmesou chloroform:éter 5:100» uokaz ergosterolu sa kontroloval registračným apektofotoriietrom a množstvo sa počítalo z hodnót pri vlnovéj dížke 282 nm.

Claims

Kmeň mikroorganizmu Saccharomyces cerevisiae CCY 21-4-67-e, produkujúci ergosterol.

Cena 2,40 Kčs

TZ 6/70