CS200720B1 - Způsob stanovení muciderminů - Google Patents
Způsob stanovení muciderminů Download PDFInfo
- Publication number
- CS200720B1 CS200720B1 CS291478A CS291478A CS200720B1 CS 200720 B1 CS200720 B1 CS 200720B1 CS 291478 A CS291478 A CS 291478A CS 291478 A CS291478 A CS 291478A CS 200720 B1 CS200720 B1 CS 200720B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- mucidermin
- methanol
- calculated
- absorbance
- extinction coefficient
- Prior art date
Links
- JSCQSBGXKRTPHZ-SYKZHUKTSA-N mucidin Chemical compound CO\C=C(\C(=O)OC)/C(/C)=C\C=C\C1=CC=CC=C1 JSCQSBGXKRTPHZ-SYKZHUKTSA-N 0.000 title claims description 36
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 9
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 34
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 16
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 7
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 claims description 6
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 6
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 claims description 5
- 239000011491 glass wool Substances 0.000 claims description 4
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 claims description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 4
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 4
- 230000000171 quenching effect Effects 0.000 description 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 4
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 2
- RTEXIPZMMDUXMR-UHFFFAOYSA-N benzene;ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O.C1=CC=CC=C1 RTEXIPZMMDUXMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MDHYEMXUFSJLGV-UHFFFAOYSA-N beta-phenethyl acetate Natural products CC(=O)OCCC1=CC=CC=C1 MDHYEMXUFSJLGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004992 fission Effects 0.000 description 2
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 2
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- 241000755710 Eilica Species 0.000 description 1
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000993286 Mucidula mucida Species 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 229960000250 adipic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 238000010170 biological method Methods 0.000 description 1
- 239000012490 blank solution Substances 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000000326 densiometry Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000001125 extrusion Methods 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 239000003269 fluorescent indicator Substances 0.000 description 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 1
- 239000005337 ground glass Substances 0.000 description 1
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- DGEYTDCFMQMLTH-UHFFFAOYSA-N methanol;propan-2-ol Chemical compound OC.CC(C)O DGEYTDCFMQMLTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DVMKOWMMZIWHBY-UHFFFAOYSA-N methyl 2-methyl-5-phenylbenzoate Chemical compound C1=C(C)C(C(=O)OC)=CC(C=2C=CC=CC=2)=C1 DVMKOWMMZIWHBY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 239000010453 quartz Substances 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
Description
Vynález se týká způsobu stanoveni muciderminu, protihoubového antibiotika, získaného z produkčního kmene Oudemansiella mucida fermentacním procesem, v meziproduktech výroby nebo ve finální substanci. Chemicky je muoidermin methylester kyseliny 6-fenyl^3-methyl2-methoxymethylen 3,5-hexandienové. V meziproduktech přípravy čisté látky muciderminu I bývají ještě přítomny další látky podobných fyzikálně chemických vlastností, např. muoidermin II, rozkladné produkty, doprovodné látky apod. Znalost přesného obsahu muciderminu v meziproduktech přípravy čisté látky je důležitá z technologického hlediska i při přesném nastavení obsahu muciderminu v konečných lékových formách.
Stanovení muciderminu je prováděno, mimo méně přesné a časově náročné biologické metody /til % rel./ stanovující pouze sumu biologicky účinných látek, metodou spektrofotometrickou, denzitometrickou a metodou plynové chromatografie. Metoda přímé spektrofotoraetrie, bez oddělování balastních látek, je možná prakticky pouze u Čisté substance. U meziproduktů nebo nedostatečně čisté látky muciderminu I se stanoví vlastně suma látek absorbujících při měřeném maximu /mucidermin II, štěpné produkty, balastní látky apod./. Metoda denzitometrioká, po chromatografii na tenké vrstvě, je proveditelná u všech meziproduktů, vyžaduje však pečlivou přípravu chromatogramu, použití standardní substance a v neposlední řadě drahé speciální zařízení. Chyba stanovení při doržení všech podmínek činí až 110 % rel. Stanovení pomocí plynové chromatografie je založeno na kvantitativní
200 720 destrukcí muciderminu vysokou teplotou /220 °C/ na methylester kyseliny 5-fenyl-2-methylbenzoové. Touto metodou však pravděpodobně nelze odlišit muoidermin I od muciderminu II.
Nově byla vypracována jednoduchá, přístrojově nenáročná metoda, jejíž podstata spočívá v rozdělení muciderminu I a II a jejich oddělení od balastníoh látek, průvodních metabolitů, barevných pigmentů nebo rozkladných produktů, ohromatografií na tenké vrstvě silikagelu s fluorescenčním indikátorem UV 254 am, s výhodou na Silufolu UV 254, s použitím spolehlivě dělící eluční soustavy benzen - octan ethylnatý 95 : 5, v detekci zo'n muciderminů pod UV 254 nm, jejich extrakci do organického rozpouštědla, s výhodou do methanolu, oddělení rozptýleného ailikagelu, např. filtrací přes skelnou vatu, a změření absorbancí takto získaných roztoků na vhodném spektrofotometru v maximu absorpce muciderminu I při 293 nm, proti roztoku připravenému stejným sledem operací ze stejné plochy slepého pruhu. Pomocí známého extinkčního koeficientu muciderminu I se potom, s výhodou bez použití etandardu, vypočte obsah muciderminu I nebo XI v procentech.
Výhodou způsobu stanovení podle vynálezu je rychlé oddělení balastů, štěpných produktů, barevných pigmentů apod. od muoiderminů pomocí chromátografie na tenké vrstvě, jednoduchá a účinná extrakce do organického rozpouštědla /methanolu/ a rychlé spektrofotometrioké vyhodnocení získaných roztoků, s výhodou bez používání standardního muciderminu. Obzvláště výhodné je použití hotových folií se eilikagelem s fluorescenčním indikátorem /např.: Silufol UV 254 - silikagel s fluor, indikátorem UV 254 nm na hliníkové podložce/, jakožto nosiče, neboť zdetekované a dále zpracovávané zo'ny lze jednoduše z chromatogramu vystřihnout a vzhledem k tomu, že silikagel velmi pevně lpí na hliníkové podložce, je znečištění extraktu získaného z těchto zon, uvolněnými částečkami silikagelu velmi malé. Stanovení lze provést nejen u muciderminu I, ale stejně přesně i u muciderminu II, popřípadě rozkladných produktů ohromatografioky oddělitelných, v konečném výpočtu počítaných jako muoidermin I.
Další podrobnosti vyplývají z příkladu provedení :
Tenká vrstva silikagelu /Silufol UV 254/ se rozdělí rýhami ve směru vyvíjení na pruhy 2,2 cm široké. Sa dva starty takto upravené tenké vrstvy se potom v délce 1,5 cm nanese po 50 >ul roztoku vzorku /množství vzorku odpovídající 40 mg Čisté substance v 10 ml směsi izopropylalkohol - methano1 1 :1/, na další start 50 jul roztoku ověřené substance /40 mg ověřené substance muciderminu v 10 ml směsi izopropylalkohol - methano1 1:1/ a jeden pruh se ponechá volný. Vyvíjí se v nasycené komoře směsí benzen - octan ethylnatý 95 : 5 do vzdálenosti čela alespoň 18 cm. Po skončeném vyvíjení se deska vysuší v proudu studeného vzduchu /asi 5 minut - do odstranění rozpouštědel/. Pod UV 254 nm jsou potom zřetelné zhášející pruhy muciderminu X Shodné polohou a intenzitou s hlavním zhášejícím pruhem ověřené substance o Ry »0,61, popřípadě zhášející pruhy muciderminu II shodné polohou s vedlejším zhášejíoím pruhem ověřené substance o Rj, 0,44. Pruhy muciderminu I a II se tužkou rychle zaznačí a seškrábnou se /v případě Silufolu vystřihnou nůžkami /tak, aby plochy o stejném Rj, včetně plochy z volného pruhu, byly stejně veliké. Seškrábnutý silikagel ae kvantitativně vnese /vystřižené obdélníčky se vloží/ do zábrusových ná3 dobek, přidá ae 50 ml methanolu /pro UV nebo p.a./, uzavře ae zátkou a třepe ae 1/2 hodiny na mechanické třepačce. Potom se roztoky vhodným způsobem zbaví rozptýlených částeček ailikagelu, nejlépe se pipetou mající špičku obalenou přečištěnou skelnou vatou /1 g skelné vaty se povaří se 100 ml methanolu, methanol se slije, vata se umístí v nálevce a oplachuje se dalšími 100 ml methanolu. Vata se. potom zbaví zbytků methanolu vytlačením a vysušením v sušárně/, odebere vhodné množství roztoku do 1 cm křemenné kyvety a na vhodném spektrofotometru se při 293 na í 1 na změří absorbance proti methanolu jako slepé zkoušce. Obsah muciderminu I, rasp. muciderminu IX ve vzorku v procentedh, počítaných jako mucidermin I, se vypočte pomocí extinkčního koeficientu muciderminu I, podle vzorce % /hmot./hmot./ * / - Aal/ * 100 » 100 ,
100 . n kde A je absorbance roztoku vzorku s muciderminem I /resp. s muciderminem II/ - průměr vz w dvou pruhů, ^sl *^e absorbance roztoku slepého pruhu o stejném R? jako mucidermin I /resp. jako mucidermin II/, n je navážka vzorku v gramech a
100 je extinkční koeficient a muciderminu I v methanolu při 293 nm.
Claims (1)
- předmět vyn a'lezuZpůsob stanovení muciderminů, vyznačující se tím, že se na tenké vrstvě silikagelu oddělí balastní látky, rozdělí mucidermin I a II, zo*ny muciderminů se zpracují extrakci do methanolu a po filtraci přes přečištěnou skelnou vatu se provede spektrofotometrické vyhodnocení, přičemž obsah muciderminu I, resp. muciderminu II ve vzorku v procentech, počítaných jako mucidermin I, se vypočte pomocí extinkčního koeficientu muciderminu I, podle vzorceA . ředění . 100 % /hmot./hmot./ · ......... — -.....——— ’1 100 . navážka /v g/ kde A je absorbance roztoku s muciderminem korigovaná o absorbanči roztoku se slepým pokusem o stejném Rp a1 100 je extinkční koeficient a muciderminu I v methanolu při 293 nm.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS291478A CS200720B1 (cs) | 1978-05-06 | 1978-05-06 | Způsob stanovení muciderminů |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS291478A CS200720B1 (cs) | 1978-05-06 | 1978-05-06 | Způsob stanovení muciderminů |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS200720B1 true CS200720B1 (cs) | 1980-09-15 |
Family
ID=5367654
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS291478A CS200720B1 (cs) | 1978-05-06 | 1978-05-06 | Způsob stanovení muciderminů |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS200720B1 (cs) |
-
1978
- 1978-05-06 CS CS291478A patent/CS200720B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Quilliam | Chemical methods for domoic acid, the amnesic shellfish poisoning (ASP) toxin | |
| Nagy et al. | Quantitative determination of imipramine and desipramine in human blood plasma by direct densitometry of thin-layer chromatograms | |
| Watson et al. | Assay of digoxin in plasma by gas chromatography | |
| Lyman et al. | Detection of coumestrol in leguminous plants | |
| Lee et al. | Simultaneous multi-mycotoxin determination by high performance thin-layer chromatography | |
| Torrado et al. | Comparison of assay methods by second-derivative spectroscopy, colorimetry and fluorescence spectroscopy of salicylic acid in aspirin preparations with a high-performance liquid chromatographic method | |
| Sinha et al. | Stress studies on acyclovir | |
| CS200720B1 (cs) | Způsob stanovení muciderminů | |
| Hundt et al. | Thin-layer chromatographic method for determining carbamazepine and two of its metabolites in serum | |
| Stevanović et al. | Colorimetric method for semiquantitative determination of nitroorganics in water | |
| Baeyens et al. | Fluorescence properties of metoclopramide and its determination in pharmaceutical dosage forms | |
| Frodyma et al. | Detection and determination by ultraviolet reflectance spectrometry of vitamins resolved on thin layer plates | |
| Steyn | Spectrofluorimetric determination of dipyridamole in serum—a comparison of two methods | |
| Ragno et al. | Gas chromatographic and UV derivative determination of nitrendipine and its photodegradation product | |
| Giri et al. | Circular Paper Chromatographic Method for Estimation of Thiamine and Riboflavin in Multivitamin Preparations | |
| Yasuda | Identification and determination of impurities in pentaerythritol tetranitrate | |
| SU1109631A1 (ru) | Способ определени витамина @ | |
| EP0383922B1 (en) | Method for measuring degree of freshness and measuring kit for the method | |
| Wahbi et al. | Spectrofluorimetric determination of guanethidine sulphate, guanfacine hydrochloride, guanoclor sulphate and guanoxan sulphate in tablets and biological fluids, using benzoin | |
| RU2111486C1 (ru) | Способ определения несимметричного диметилгидразина | |
| EP0385441B1 (en) | Marker for petroliferous products | |
| RU2011970C1 (ru) | Способ определения триэтиламина | |
| Kark et al. | Thin-layer chromatographic determination of procainamide and N-acetylprocainamide in human serum and urine at single-dose levels | |
| GB1574807A (en) | Chemical monitoring devices | |
| Pasini et al. | Selective colorimetric determination of ethynodiol diacetate in oral estrogen‐progestin combination |