CS200018B1 - Method of activity increase of production strain aspergillus niger at the technical fermentation of citric acid - Google Patents

Method of activity increase of production strain aspergillus niger at the technical fermentation of citric acid Download PDF

Info

Publication number
CS200018B1
CS200018B1 CS341478A CS341478A CS200018B1 CS 200018 B1 CS200018 B1 CS 200018B1 CS 341478 A CS341478 A CS 341478A CS 341478 A CS341478 A CS 341478A CS 200018 B1 CS200018 B1 CS 200018B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
aspergillus niger
citric acid
spores
production strain
fermentation
Prior art date
Application number
CS341478A
Other languages
English (en)
Slovak (sk)
Inventor
Stefan Varosek
Eva Gulova
Elena Suchonova
Brigita Filipova
Original Assignee
Stefan Varosek
Eva Gulova
Elena Suchonova
Brigita Filipova
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Stefan Varosek, Eva Gulova, Elena Suchonova, Brigita Filipova filed Critical Stefan Varosek
Priority to CS341478A priority Critical patent/CS200018B1/cs
Publication of CS200018B1 publication Critical patent/CS200018B1/cs

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

POPIS VYNÁLEZU
K AUTORSKÉMU OSVEDČENIU 200 018 (11) (Bl) ČESKOSLOVENSKASOCIALISTICKÁREPUBLIKA( 19 )
(61) (23) Výstavná priorita(22) Přihlášené 26 05 78(21) PV 3414-78 (51)lnt. Cl. C 12 N 1/38
ÚŘAD PRO VYNÁLEZY
A OBJEVY (40) Zverejnené 30 11 79(45) Vydané 01 02 83
Autor vynálezu varoSek Stepán mg., pieSíany, guíová eva mg., hlohovec,
SUCHOSOVÁ ELENA, HLOHOVEC, FILIPOVÁ BRIGITA, HLOHOVEC (54) S po sob zvýšenia aktivity produkčněho kmeňa Aspergillus niger u tech- nickej fermentácie kyseliny oitrónovej 1
Predmetom vynálezu Je zvýSenie aktivnosti produkčního kmeňa Aspergillus niger u tech-nické;} fermentácie kyseliny oitrónovej, pri získaní Jeho nových vlastností v opakovanomstyku s kultivačným médiom, ktorá obsahuje áčinná látku.
Samozřejmým předpokladem priemyslováho citrónového kvasenia Je aktívny kmen, zaruču-Júci vysoká výlažnosl v priemyselnom měřítku na nasadený cukor. Je váeobecne známe, žepremena cukru na organická kyselinu, v tomto případe na kyselinu citrónová, sa deje infra-celulámymi enzýmami, tj. vo vnátri buniek, ktorá vytvárajá mycéliová vrstvu. Cukor vnikápod osmotickým tlakom do buniek a kyselina difunduje do roztoků. Od enzymatickej aktivitytakto vytvořeného mycélia, závisí priebeh, doba a výsledek fermentácie.
Existuje nlekolko spósobov ako zvýšil aktívnosl produkčního kmeňa, či už Je to poso-benle UV světla, alebo tzv. mutagenných látok, prlčom dochádza k morfologickým změnám upoužitého produkčního kmeňa. fialéím spósobom získávánia aktívnejéej formy mikroorganizmusa považujá zásahy, ktoré vedú k pramene v metabolizme v smere zvýSeneJ látkovej výměny,na základe stále opakovaného kontaktu produkčního kmeňa s kultivačným médiom. Ako pri tom-to sposobe, aj pri predošlýoh, základnou podmlenkou zostáva, aby produkčný kmeň okrem vy-sekej výlažnosti mal nasledujácevlastnosti: - kul ti váda musí byl Jednoduchá, so zabezpečením dostatečného množstva spor kmeňaAspergillus niger pre prevádzku, - nesmis podliehal fyziologickej degenerácil a musí vykazoval určitá odolnosl vóči 200 018 200 01» menSím zněném prostredia, - mat schopnost rýohlo porastat na organických substrátooh s ódolnostou voči kontami-nuj účin mikroorganizmem. Této podmienka je z priemyslového hlediska doležitá, no rýchlatvorba myoellámej blány na povrohu substrátu a použitie chemických sterlllzačnýoh látok,zabezpečujú dnes minimélny výskyt zvlážt bakteriálnej kontamlnáele pri fermentécii kyse-liny citrónovej, - nevytvářet vo zvýšenaj miere vedlajžie kyseliny, zvlážt kyselinu oxalovú, ktorejoddelovanle z vykvaseného média epoaobuje značné problémy a zvýžené náklady na výrobu.
Na základe hoře uvedeného sa za účelom zvýženia aktivnosti kmena huby Aspergillusniger aplikoval systém ovplyvnenla porodného prevédakového kmena změnou jeho kultivačnýchpodmienok a to od konzervy cez tekuté podu až po sporulačnú podu, stéle opakovaným póso-bením pri jeho pripravé účinnou látkou a to peroxidem vodika,
Pridavok peroxidu vodika k tekutej a pevnej sporulačnej pode mé za následek, že do-chádza k zmene morfologického znaku u produkčného kmena Aspergillus niger a to v tom, žeoproti povodnej sporulačnej pode je jej zafarbenle preraetaním submycélia žité a nle bie-le. No hlavným znakom je dosiahnutla mohutnejžej tvorby spor, rýchla klíčivost na prevédz-kovom médiu a předpokládaná zvýžené aktivnost vo vztahu k biosyntéze kyseliny citrónovej,bez změny farby konidlí, ktoré zostévajú čieme,
Vzhladom k tomu, že výsledky biosyntézy kyseliny citrónovej sú závislé od použitéhomédia a od obsahu stimulačných a lnhibičných látok v tomto médiu, Sálej od použitého pro-dukčného kmena, boli pro stanovenie rozdlelu porovnané spory získané z kultlvácie kmenaAspergillus niger na povodnej kultivačněj pode a pode s účinnou látkou v roznych kombiná-ciach cez kvasné pokusy, V tabulke č. 1 sú uvedené výsledky vplyvu změny v zloženi tekutej a sporulačnej pev-nej pódy, na aktivnost kmena Aspergillus niger, pri fermentécii na melasovom substrátev Erlemeyerových baňkách pri sledovaní roznych komblnáeií s přídavkem účinnéj látky a tak-to získaných spor, s ktorýml sa prevledlo očkovanle, oproti povodným.
Tabulka č, 1t povodná tekutá nová tekutá řevná sporulačná podá póda bez HgOg podá s H202 výtažek v % výtažek v % »UBU»s»sBaisi»i«»HnEmn»na»nu»«nan«innMnMan»iueaiii«i č. 1 Povodná podá č. 2 Podá s obsahom HgOg č. 3 Podá s obsahom glycerín * HgOgč. 4 Podá s obsahom glycerin 66,1 72,2 69,8 97,0 70,2 99,2 71,8 87,5 Výsledky charakterizujú produkčnú aktivitu medsl kmeňom Aspergillus niger, kultivova- ným na roznych podach, pričom vplyv účinnéj látky je zřejmý uř pri pokuse č. 1, keS bol přidaný len do tekutej pódy a vzrast výtěžnosti u spor získaných z povodnej sporulačnej pódy a pódy opraoovanej účinnou látkou, je daný rozdlelom vo výtěžnosti od 6 až 17 %, čo 200 018 je dostatečné Statisticky významný rozdiel pri 4 paralelkách u každého pokusu. Súčasne sadosiahlo o 30 až 40 % vačŠie množstvo spor z 1 Erlenmeyerovej baňky, čo je v gramoch 0,6až 0,8, oproti 0,3 až 0,5 g na povodnej pode. V ňalSom pokuse sa sledovalo optimálně zloženie sporulažnej pody s prídavkom účinnejlátky před a po sterilizácii sporulažnej pody, očkovanej sporami z tekutej pody, s prídav-kom účinnej látky. Získané spory kmeňa Aspergillus ttiger boli testované na melasovom sub-stráte v Erlenmeyerových baňkách, výsledky sú v nasledujúcej tabuike;
Tabulka δ. 2: ž. pokusu prídavok H202 prídavok glycerín výlažok % ml/1 + HgOg ml/1 sasssssssaiassBSBasseasasscssscsssssasssccassSKasssss-assassssscsas; ssssasssssss: 1 + 0,1 82,4 2 + 0,3 97,1 3 + 0,5 99,4 4 + 0,5 101,6 5 + 0,6 83,8 6 - 0,1 87,5 7 - 0,2 90,1 8 - 0,3 98,8 9 “ 0,4 92,0
Poznámka: + HgOg (přidaná po sterilizácii sporulažnej pody) - HgOg (přidané před sterilizáciou sporulažnej pody)
Ako z výsledkov vidno, najvačší vplyv na aktivnost spor produkčného kmeňa Aspergillusniger mal prídavok samotného peroxidu vodíka, ktorý sa přidával po sterilizácii do sporu-lažnej pody. AvSak praktické prevedenie si vyžaduje zvláštně opatřenia pre zabezpeženiesterility, čo pri príprave velkého množstva spor pre prevádzkové účely je obtiažne, Prída-vok peroxide vodíka před sterilizáciou, vzhladom k vysokým sterilizačným teplotám pri pří-pravě sporulažnej pody, si vyžiadal použil vhodný prídavok negativného katalyzátora, akosú (kys, fosforečná, kys. sírová, glycerín) a iné. Použitím kombinácie glycerín + peroxidvodíka, s vylúčením glukózy, sa dosiahli výsledky adekvátně prídavkom peroxidu vodíka posterilizácii (vlň tabulka č. 2, pokus 6 až 9) to znamená, že 1. spósob sa dá použil preoverovanle vplyvu účinnej látky na kmen Aspergillus niger a 2. pre bežnú přípravu sporpre prevádzku.
Poznámka: V ňalšom popise je označenie (P) pre spory získané kultiváciou na póvodnej pode, označenie (N) pre spory získané kultiváciou na pode s účin- nou látkou.
Za účelom Salšieho sledovania aktivnosti takto získaného spórového materiálu, previe- 200 018 dol sa laboratómy pokus za použitia melás z 2 oukrovarníckych kampaní a to melasy č. 1z roku 1976, č. 2 z roku 1977 za použitia spor Aspergillus niger (P, N), Laboratómy po-kus sa viedol vo fermentačných nádobách (obsah 2000 ml, výSka 9 om), výsledky sú v tabul-ka S, 3,
Tabulka č, 3t
Melasa očkovaná sporami Pvýíažok v %
SCSSSSSSSSSSS«5SS8SSSSCCff8SSS8SSSS3BSCaSS8aU8SJ očkované sporami Nvýíažok v % 75,6 84,2 1 65,8 2 71,1
Aj v tomto pokuse produkcia kyseliny citrónovéj je u spor N vyžila o 10 až 13 % výíažnoa-ti, rýchlejSia tvorba mycellámej blány o 4 až 5 hodin, tj. z 22 hod, u spor F na 17 až18 hod, u N,
Nlekolko v mnohých prípadooh aktivně kmene, ktorá dávajú vysoká výtažky v laboratór-nych podmlenkach nedávajú rovnaká výsledky v prevádske, je potřebná zabezpečií sledovanleaktivnosti spor kmeňa Aspergillus niger ces prevádsková pokusy, kde je možná súčasne od-aladovaí odolnost voči kontaminujúoim mikroorganizmem, rýchlosí klíčenia, biosyntázy ky-seliny citrónovej, Struktura mycálla a jeho odolnoaí voči parazitlckej pliesni (Pěnicília)a porovnal a povodným kmeňom, výsledky sú v následujúcej tabulke:
Tabulka č. 4t
Spory kmeňa Asperg. výíažok tltr. výíažok bez počet niger - očkovaná na nas, oukor cudzích kys. pokuaov v % v %
SSa3SSS3SSES8SSSS3SSSX&88SSS8SSSa88fiSaSSSS8B«*C8«CB«8K3BCCBSSItSBaSK8BSXKSB8l«8S P 58,56 58,37 200 H 67,82 67,09 296
Zhodnotenle prevádzkových výsledkoví - výskyt bakteriálnych misiek prakticky bezvýznamný, - výíažnoaí u spor N je o cca 10 % vyššia, - tvorba vedlajSíeh kyselin za použitia spor P i H do 1 %, bez výskytu kyseliny oxa-lovej, - rýchloaí klíčeni a a tvorba mycellámej blány posunutá v smere spor H a to z 22 ho-din u F na 18 hod. u N, - morfologioká zdravá myoálla s pevnejiou Struktúrou u V, dávajú předpoklad vyŽSejodolnosti voči penicíliam.
Spory získané kultlváclou, za súčasnáho posobenla účlnnej látky u kmeňa Aspergillusniger, sú dostatočne aktivně s dosahováním vysokých výíažnosti, nepodllehajú fyziologie-

Claims (1)

  1. 200 010 kej degenerácii. Sposob prevedenia pokuaovj a Fokus 2. 1 a 2 Repná melase sa zriedi vodou tak, aby koneentrácia polarizačného cukru bole 13 až 14%. Za studená sa roztok upraví přísadami ferrokyanidu draselného a kys. fosforečnej. Kys.sírovou sa upraví pH. Takto upravený roztok sa rozleje po 100 ml do Berlenmeyerových barniek (obsah 300 ml), po uzatvorení prebieha sterilizácia v autokláve pri 100 kPa 30 min. Po ochládání sa sterilný substrát očkuje sporami produkčného kmeňa Aspergillus niger. Pokus 2. 3 Repná melasa sa zriedl vodou tak, aby koneentrácia polarizačného cukru bola po narie-dění 13 až 14 %. Po zohriatí na teplotu nad 85 °C sa tento roztok upraví běžným sposobom,přídavkem! ferrokyanldu, kys. fosforečnéj a kys. sírovej. Potom prebieha sterilizácia 10min. pri 100 °C. Po ochladení sa substrát rozdělí do fermentačných nádob po 2000 ml a na-očkoval sporami produkčného kmeňa Aspergillus niger P a N. Po 9.- dňoch sa fermentácia úkončila a stanovil sa jej výíažok, běžným sposobom v 3 paralelkách. Pokus č, 4 Melasový roztok připravený ako v pokuse 3, v 2 varákoch o objeme a 18 000 litrov. U každého pokusu sa substrát eSte opracoval antlbakteriálnou látkou. Pri teplote 45 °C jenáplň 1 kvasnej komory očkovaná sporami, po 9. dňoch sa stanovil výeledok fermentácie. PREDMET VYNÁLEZU Sposob zvýčenia aktivity produkčného kmeňa Aspergillus niger u technickéj fermentá-cie kyseliny citrónovéj vyznačený tým, že sa produkčný kmen opakované kontaktuje s kulti-vačným médiom, obsahujúcim 0,1 až 0,5 ml/1 peroxidu vodíka za súčasnej aplikácle kataly-zátorov typu glycerín a kyseliny fosforečnej, brzdiacich rozklad peroxidu vodíka pri ste-rilizácii.
CS341478A 1978-05-26 1978-05-26 Method of activity increase of production strain aspergillus niger at the technical fermentation of citric acid CS200018B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS341478A CS200018B1 (en) 1978-05-26 1978-05-26 Method of activity increase of production strain aspergillus niger at the technical fermentation of citric acid

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS341478A CS200018B1 (en) 1978-05-26 1978-05-26 Method of activity increase of production strain aspergillus niger at the technical fermentation of citric acid

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS200018B1 true CS200018B1 (en) 1980-08-29

Family

ID=5374117

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS341478A CS200018B1 (en) 1978-05-26 1978-05-26 Method of activity increase of production strain aspergillus niger at the technical fermentation of citric acid

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS200018B1 (cs)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Benninga A history of lactic acid making: a chapter in the history of biotechnology
DE69620819T2 (de) Enzymatische Produktion von Glukonsäure und ihrer Salzen
Lin et al. Screening and production of erythritol by newly isolated osmophilic yeast-like fungi
DE1800508B2 (de) Verfahren zur herstellung von proteolytischen enzymaufbereitungen und ihre verwendung
BR112015021883B1 (pt) Métodos para controle da concentração de microrganismos indesejáveis em uma solução aquosa empregada em um processo de fermentação
CS200018B1 (en) Method of activity increase of production strain aspergillus niger at the technical fermentation of citric acid
DE2334463A1 (de) Verfahren zur gewinnung von proteolytischen enzymen, die so hergestellten proteolytischen enzyme und ihre verwendung
DE1812710C3 (de) Verfahren zur biotechnischen Herstellung von Zitronensäure und ihren Salzen durch Mikroorganismen
CN101302551A (zh) 一种赤藓糖醇生产方法
Turner On the relation between respiration and fermentation in yeast and the higher plants. A review of our knowledge of the effect of iodoacetate on the metabolism of plants
CN109182151A (zh) 银杏内生真菌的分离筛选方法
CN104782406B (zh) 一种食用菌的培养方法
Slifkin Parasitism of Olpidiopsis incrassata on members of the Saprolegniaceae. I. Host range and effects of light, temperature, and stage of host on infectivity
Tarlyn et al. Axenic culture of Pistia stratiotes for use in plant biochemical studies
TWI463014B (zh) Method for the production of ethanol
DE2925427C2 (de) Verfahren zur Herstellung von Protease
CN104844352A (zh) 一种水培植物用杀菌增氧剂及其使用方法
CN85104280A (zh) 一种利用微生物连续酿造水果醋的方法
Karstens et al. The cultivation of plant tissues in vitro with starch as a source of carbon
US1818781A (en) Method of carrying out biochemical processes
ATE78972T1 (de) Eine leistungsfaehige methode, baumwolle aus kultivierten zellen zu regenerieren.
DE19907115A1 (de) Verfahren zur Herstellung von L-Sorbose
CN117838742A (zh) 一种具有乙酰胆碱抑制活性的灵芝三萜粗提物的制备方法
Erb et al. Factors affecting the production of amylase by Aspergillus niger, strain NRRL337, when grown in submerged culture
RU2349644C2 (ru) Способ получения ферментного препарата лакказы