CS197323B2 - Coated supporting material for the chromatography on the thin layer with the concentrating zone - Google Patents

Coated supporting material for the chromatography on the thin layer with the concentrating zone Download PDF

Info

Publication number
CS197323B2
CS197323B2 CS783432A CS343278A CS197323B2 CS 197323 B2 CS197323 B2 CS 197323B2 CS 783432 A CS783432 A CS 783432A CS 343278 A CS343278 A CS 343278A CS 197323 B2 CS197323 B2 CS 197323B2
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
layer
concentration zone
chromatography
silica
concentration
Prior art date
Application number
CS783432A
Other languages
English (en)
Inventor
Herbert Halpaap
Karl-Friedrich Krebs
Hans Heinz
Original Assignee
Merck Patent Gmbh
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Merck Patent Gmbh filed Critical Merck Patent Gmbh
Publication of CS197323B2 publication Critical patent/CS197323B2/cs

Links

Classifications

    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/02—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising inorganic material
    • B01J20/10—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising inorganic material comprising silica or silicate
    • B01J20/103—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising inorganic material comprising silica or silicate comprising silica
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
    • B01J20/28014—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their form
    • B01J20/2803—Sorbents comprising a binder, e.g. for forming aggregated, agglomerated or granulated products
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
    • B01J20/28054—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their surface properties or porosity
    • B01J20/28057—Surface area, e.g. B.E.T specific surface area
    • B01J20/28059—Surface area, e.g. B.E.T specific surface area being less than 100 m2/g
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
    • B01J20/28054—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their surface properties or porosity
    • B01J20/28069—Pore volume, e.g. total pore volume, mesopore volume, micropore volume
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
    • B01J20/28054—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their surface properties or porosity
    • B01J20/28078—Pore diameter
    • B01J20/28085—Pore diameter being more than 50 nm, i.e. macropores
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/281—Sorbents specially adapted for preparative, analytical or investigative chromatography
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3202—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the carrier, support or substrate used for impregnation or coating
    • B01J20/3204—Inorganic carriers, supports or substrates
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3202—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the carrier, support or substrate used for impregnation or coating
    • B01J20/3206—Organic carriers, supports or substrates
    • B01J20/3208—Polymeric carriers, supports or substrates
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3234—Inorganic material layers
    • B01J20/3236—Inorganic material layers containing metal, other than zeolites, e.g. oxides, hydroxides, sulphides or salts
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/90—Plate chromatography, e.g. thin layer or paper chromatography
    • G01N30/92—Construction of the plate
    • G01N30/93—Application of the sorbent layer
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J2220/00—Aspects relating to sorbent materials
    • B01J2220/40—Aspects relating to the composition of sorbent or filter aid materials
    • B01J2220/49—Materials comprising an indicator, e.g. colour indicator, pH-indicator
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J2220/00—Aspects relating to sorbent materials
    • B01J2220/50—Aspects relating to the use of sorbent or filter aid materials
    • B01J2220/54—Sorbents specially adapted for analytical or investigative chromatography

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Nanotechnology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
  • Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
  • Silicon Compounds (AREA)

Description

Předmětem vynálezu je nosný materiál pro chromatografii na tenké vrstvě s koncentrační zónou předřazenou vrstvě chromatografické.
V obchodě je řada nosných materiálů, zejména skleněných destiček, nebo také fólií z plastických hmot, popřípadě hliníkových fólií, které jsou povlečeny vrstvami vhodnými pro chromatografii, zejména pro chromatografii na tenké vrstvě. Je již také známo1 * * * V opatřovat tyto přípravky kombinovanými vrstvami sillkagel—křemelina, přičemž se využívá rozdílných adsorpčních vlastností obou sorpčních prostředků na společném podkladě.
Tím se umožňuje exaktní vyhodnocování chromatogramu ještě i pak, když jsou vzorky nestejnoměrně naneseny. U známých destiček pro chromatografii v tenké vrstvě se stýká prakticky inaktivní vrstva s chromatograficky aktivním materiálem. Vlastní chromatografii se tím předřazuje koncentrování, kterého se dosahuje vrstvou ležící před vrstvou chromatografickou.
Koncentrační efekt spočívá na rozdílu adsorpčních možností obou částí vrstvy. Zatímco se pro chromatografickou vrstvu výhodně používají osvědčené silikagelové vrstvy, pro inaktivní zónu se dosud používá jako materiál tvořící vrstvu křemelina. Nor1 mální siliikagel není pro tento účel s ohledem na svou aktivitu vhodný. Známé přípravky s vrstvou křemeliny však mají značné nedostatky, které vyplývají z vlastností křemeliny. Křemelina jako přírodní produkt je svou kvalitou a získatelností závislá na ložiscích a k získání upotřebitelného materiálu pro tento účel je třeba velmi nákladných čisticích metod. Musí se odstranit zabarvující součásti, velmi často však není možno zabrátnit tomu, aby v křemenně nezůstaly zbytky anorganických solí nebo stopy těžkých kovů, které chromatografil ruší.
Nyní bylo nalezeno, že se získá zvlášť výhodný nosný materiál pro chromatografii ve vrstvě, když se pro koncentrační zónu . použije synteticky vyrobený porézní kysličník křemičitý středního objemu pórů s velmi velkou šířkou pórů. Tímto způsobem se dosáhne mimořádně dobrého rozprostření naneseného vzorku v koncentrační zóně, které se velmi příznivě projevuje na následné chromatografii.
Předmětem vynálezu je povrstvený nosný materiál pro chromatografii v tenké vrstvě s koncentrační zónou předřazenou vrstvě chromatografické, jehož podstata spočívá v tom, že koncentrační zóna je ze synteticky vyrobeného porézního kysličníku
197 3 křemičitého s objemem pórů 0,5 až 1,5 ml/ /g a se šíří pčrů 2 až 15 ^m.
Zvlášť výhodně se ukazuje kysličník křemičitý koncentrační zóny o velikosti zrn v rozsahu 10 až 50 μπι. Dále je zvlášť Myhod-* né upravit tloušťku vrstvy koncentrační zóny asi na 100 až 200, výhodně asi 150 (um.
Předmětem vynálezu je dále použití synteticky vyrobeného, porézního kysličníku křemičitého se středním objemem pórů a se šíří pórů 2 až 15, výhodně 4 až 8 μπι, jako inaktivního sorpčního prostředku pro koncentrační zónu předřazenou chromatografické vrstvě povrstveného nosného materiálu.
Kysličník křemičitý pro koncentrační zónu se vyrábí známým způsobem. Vychází se například z obchodního pro chromatografické účely synteticky vyráběného silikagelu. Zde se mohou použít zejména úzce pórovité a středně pórovité druhy. Velmi často používaný silikagel (silikagel 60) má například šíři pórů asi 5 až 7 nm. Velikost částic výchozího materiálu může být libovolná, odpovídá však všeobecně přibližně velikosti částic například silikagelu voleného pro chromatografickou vrstvu.
Rozšíření pórů potřebné pro použití podle vynálezu se provádí známým způsobem, například impregnací silikagelu solným roztokem a následným žíháním. Po vymytí se takto získaný kysličník křemičitý se širokými póry obvyklým způsobem třídí. Silikagel se širokými póry má být úzce tříděn, aby byl vhodný pro koncentrační zónu, a má vykazovat střední objem pórů a extrémně vysokou šíři pórů, jakož i s tím spojený zvlášť malý specifický povrch.
Zvlášť dobře vhodný je kysličník křemičitý s následujícími hodnotami:
a) Šíře pórů
Šíře pórů má být asi 2 až 15 μπι, výhodně 2 až 8 дт. Přednost má šíře pórů přes 4 ^m. Síře pórů se určuje obvyklým způsobem, zejména rtuťovým pórozimetrem.
b) Specifický povrch
Specifický povrch se určuje známou metodou BET (Brunauera, Emmetta, Tellera, J. of the Am. Chem. Soc., sv. 60, str. 309, 1938). Specifický povrch kysličníku křemičitého používaného podle vynálezu má být <1 m2/ /g, výhodně 0,2 až 0,8 m2/g.
c) Objem pórů
Objem pórů se stanovuje pórozimetrem. Kysličník křemičitý používaný podle vynálezu má mít objem pórů 0,5 ml/g až 1,5 ml/ /g, výhodně 0,5 až 1,0 ml/g.
Tento synteticky vyrobený kysličník křemičitý má velmi vysoký, stupeň čistoty. Jako typová analýza pro maximální obsah nečistot platí například následující:
23 4
Chlorid (Cl) 0,008 %
síran (SOi) 0,003 O/o
dusičnan (NO3) 0,005 «/o
olovo (Pb) 0,005 %
měď i(Cu) 0,0005 0/0
železo (Fe) 0,002 0/0
zinek (Zn) 0,0005 %
Je-li širokopórézní kysličník křemičitý vhodný к použití podle vynálezu je možno stanovit například dále uvedeným testem:
Metodou uvedenou v příkladech se vyrobí destičky nebo fólie pro chromatografii v tenké vrstvě s koncentrační zónou. Na koncentrační zónu nacházející se v horizontální poloze se během 10 sek. pomocí kalibrované kombinace mikrometr—stříkání nanese 10 μΐ roztoku čistého barviva cerešové violetě BRN @ (derivát anthrachinonu), ceresové zeleně BB ® (l,4-p-to>luidino-9,10-anthrachinon) a modře 18,90 Sandoz, vždy 0,01 % (hmot./obj.) v toluenu, a roztok se kruhovitě rozprostře. Po uplynutí dalších 10 sek. se rozpouštědlo vysuší paprskem studeného vzduchu. Vytvoří se kruhová plocha, jejíž nejkrajnější úzký kraj je v intenzitě zesílený. Kruhová plocha má mít průměr nejméně J6 mm.
Zpracování tohoto kysličník křemičitého na známou koncentrační zónu destiček nebo fólií pro chromatografii v tenké vrstvě se provádí obvyklým způsobem. Jako nosič se mohou použít všechny obvyklé materiály, přičemž mají přednost skleněné destičky. Použitelné však jsou i fólie, například z hliníku nebo také z plastických hmot. Sorpční prostředky se suspendují v roztíratelných, nejčastěji vodných suspensích a po intenzívním rozmíchání a případném odplynování se obvyklými natíracími přístroji, popřípadě povrstvovacími zařízeními nanášejí na nosný materiál.
Pro chromatografickou vrstvu se mohou používat všechny i jinak obvyklé používané sorpční prostředky, například silikagel (s různou šíří pór.ů mezi 4 a 1000 nm), kysličníky hliníku, celulózy, křemičitany hořčíku a polyamidy. Silikagel také může mít modifikovaný (například silanisovaný) povrch.
Obvykle se к sorpčním prostředkům přidávají ještě pojidla, která zvyšují přilnavost a odolnost proti otěru, a/nebo indikátory. Jako pojidla mají přednost organická pojidla jmenovaná v německém patentovém spise 1 442 446 nebo v DAS 1 517 929. Nejvíce používaným indikátorem je fluorescěnční indikátor, zvláště manganem aktivovaný křemičitan zinečnatý, absorbující při 254 nm v UF. Pojidla se zpravidla přidávají v množství 0,1 až asi 10 %, indikátory v množství asi 0,5 až 5 hmot. °/o, vždy vztaženo na hotovou vrstvu.
'Natírací přístroje, popřípadě povrstvova cí' zařízení jsou tak · uspořádána, aby vrstvy sorpčního prostředku určené pro chromatografii . přiléhaly přímo k užší vrstvě koncentrační zóny. Při povrstvení například skleněných ' destiček obvyklého formátu 20 . X 20 cm., může například chromatografická vrstva mít šířku 175 mm, zatímco pro koncen' trační zónu se určuje šíře 25 mm.
Tloušťka vrstvy obou zón se velmi často mění. Tak například může být u výhodné formy provedení vlastní chromatografická vrstva tlustá 250 ,um, · zatímco tloušťka koncentrační zóny · je asi 150 μπι.
Po· povrstvení se dělicí · materiály obvyklým' způsobem suší. Povrstvovací . zařízení jsou zpravidla ' seřízena tak, aby po· usušení byly' tloušťky získaných vrstev 100 až 300 ^m. ' Sušení se nejlépe provádí v sušicích kanálech při teplotách asi 1Ž0 až 150 °C. Doba sušení závisí na délce sušicího kanálu.
Při srovnání nového· materiálu s dosud obvyklými hotovými přípravky pro chromatografii . v tenké · vrstvě s kombinací vrstev se ukazuje značně zlepšená dělicí . účinnost při ' stejné kvalitě chromatografické vrstvy. Že by bylo· možno dosáhnout s kysličníkem křemičitým udané charakteristiky těchto výhod, nebylo· možno· předvídat. Proto dosud i1 odborníci stále ' zůstávali u jinýčh materiálů, zejména u křemeliny, ačkoliv jejich nevýhody byly dostatečně známé.
Zvláštní výhoda nového materiálu spočívá také v tom, že se může dosáhnout velmi dobré průtokové rychlosti. Obě . části vrstev spolu ostře hraničí, přesto však do· . sebe přecházejí, takže eluční prostředek při protékání hraniční linie nemá žádný odpor. Také · nyní poprvé možná vazba vrstev, co se týká · přísad jako pojidel a indikátorů, je značnou výhodou.
Při použití má nový materiál s koncentrační zónou značné výhody. Po bodovém, popřípadě kruhovitém nanesení vzorku nastává · během vyvíjeoího postupu automaticky koncentrování k úzké startovací linii, . od které začíná vlastní chromatografie bez přerušení. V každém případě se dělené . substance po· · koncentraci objeví . na vrstvě sorbentu v úzkém pruhu se stejnými · hodnotami Rf, v chromatografické vrstvě. Mimo koncentrační · efekt nastává přímo· na destičce · v koh-centrační zóně ještě vyčištění, které může za jiných okolností nahradit nutnou · extrakci chromatografované účinné látky. . .
Anorganické a · organické soli se váži, zčásti i polární neutrální látky, jako· cukr. Nanášení se může provádět bez zvláštní pečlivosti s ohledem na geometrii a roztažení nanášecího místa. Proto s sebou destičky, popřípadě fólie s koncentrační zónou nesou značnou úsporu času. Dále se zabrání rozkladu nebo irreversibilní adsorpci citlivých substancí vysoce aktivním silikagelem při zasychání nánosu v koncentrační zóně.
Styk s vlastním sorpčním prostředkem nastává až po průtoku koncentrační zónou a zde pouze v rozpuštěném stavu. V tomto smyslu je zde prakticky nanášení . za vlhka jako· ... u vysoce účinné kapalinové sloupcové chromatografie. Možnost nanášení ponořováním může nahradit nanášení,· v pruhu nanášecím . přístrojem. Automatickým· hanášecím přístrojem se lepšího nánosu v pruhu nemůže . dosáhnout. Při použití silně zředěného· roztoku by se muselo nanášet opakovaným nanášením v pruhu za sušení mezi jednotlivými nánosy,. aby se k chromatografickému vyvíjení · naneslo stejné množství substance. Nanášení ponořováním umožňuje také vycházet . z . velmi zředěných roztoků. V · případě použití metody nanášení ponořováním · (postavením · do ' · ' vyvíjecí kapaliny) také s dosavadními destičkami se šilikagelem bez koncentrační zóny bylo by možno dosáhnout koncentrování do· pruhu jen tím, že by se vícekrát za sebou · vyvíjelo silně polárním eluačním prostředkem do· určité výše nad místem . nanášky nad hladinu vyvíjecího roztoku, než by bylo možno· začít s · vlastní chromatografií. Hotové přípravky pro chromatografii v tenké vrstvě s koncentrační zónou nabízejí naproti tomu výhodu kontinunální práce. Mimoto · se v koncentrační zóně zachycují balastní látky jako . anorganické nebo organické soli a určité polární neutrální látky. Díky příznivějším výchozím pozicím při začátku · vlastní chromatografie je také dělicí · . účinnost znatelně lepší. Toto je . znatelné . zvláště . při nanášení většího množství, ale i při velmi zředěných roztocích.
Nový· materiál je zvlášť vhodný pro dělicí problémy, u kterých jsou přítomna různá množství účinné látky a doprovodných látek, takže zvlášť · úspěšně probíhá použití v biochemii, v klinické · biochemii · a ve farmaceutické kontrole kvality. '
Nový povrstvený nosný materiál nachází použití všude tam . a stejným způsobem jako destičky nebo fólie obvykle dosud pro· chromatografii v tenké vrstvě.
Příklad · · 1
a) K 88 1 odsolené vody se za míchání přidá · 800 · g natriumpolyakrylátu. Potom se vmíchá 38,4 g středně pórovitého silikagelu (střední šíře pórů · 6 · nm) o' průměrné velikosti zrn 15 /um a 800 g manganem aktivovaného křemičitanu zinečnatého. · Suspense se louhem sodným upraví na hodnotu pH asi 6,5. Za míchání se doplní vodou na celkovou hmotnost 136 kg.
b) K 7,8 1 odsolené vody se za . míchání přidá 60 g natriumpolyakrylátu. Potom . se za míchání přidá 60 g manganem aktivovaného . křemičitanu zinečnatého a 2,88 g porézního kysličníku křemičitého o následující charakteristice:
střední velikost zrn střední šíře pórů objem pórů specifický povrch až 20 μτη až 15 jum
0,5 až 1,0 ml/g
0,4 až 0,8 mz/g
c) Obě podle a) a b) získané suspense se odplynují. Naplní se jimi povrstvovací zařízení, pomocí kterého se skleněné destičky formátu 20 X 20 cm mohou povrstvit tak, aby vrstva široká 175 mm, vytvořená suspensí a), přímo navazovala na vrstvu získanou ze suspense b), širokou 25 mm. Povrstvovací zařízení se upraví tak, aby po usušení zůstaly tloušťky vrstev asi 250 ,«m pro vrstvu chromatografickou a asi 150 ^m pro koncentrační zónu. Sušení destiček se provádí v sušicím kanálu asi 10 minut při 150 °C.
P ř í к 1 a d 2
Analogicky příkladu 1 se připraví suspense
a) a b).
Povrstvovacím zařízením se odplyněnými suspensemi povrství 200 mm široká role hliníkového pásu nebo fólie z plastické hmoty (tereftalová fólie 0,2 mm silná). Chromatografická vrstva široká 175 mm hraničí přímo s koncentrační zónou širokou 25 mm.
Příklad 3
a) Analogicky příkladu la) se za použití 39,2 kg středně pórovitého silikagelu (šíře pórů 5 až 7 nm) se střední velikostí zrn 5 až 10 дт připraví suspense.
b) Analogicky příkladu lb) se za použití 2,94 kg šlrokoporézního kysličníku křemičitého se střední velikostí zrn 15 až 20 μπι střední šíří pórů kolem 8 ,«m objemem pórů kolem 0,8 ml/g a specifickým povrchem kolem 0,7 m2/g připraví suspense.
c) Další zpracování a povrstvování se provádí analogicky příkladu lc). Na získaných deističkách přiléhá chromatografická vrstva široká 175 mm přímo na koncentrační zónu širokou 25 mm. Destičky se pak půlí na formát 10 X 20 cm.
Příklad 4
a) Intenzívně se míchá 1000 g obchodní mikrokrystallcké celulózy pro chromatografii v tenké vrstvě, 3,45 1 odsolené vody a 50 ml 1% vodného roztoku sodné soli karboxymethylcelulózy.
b) К 520 ml odsolené vody se za míchání 4 g kyseliny natriumpolymethakrylové. Potom se vmíchá 196 g kysličníku křemičitého, popsaného v příkladu 3b). Suspense se za míchání upraví louhem sodným na hodnotu 6,5.
c) Povrstvení se provádí analogicky příkladu lc). Celulózová vrstva určená pro chromatografii přiléhá přímo na koncentrační zónu širokou 25 mm.
Příklady použití
P ř í к 1 a d A
Na destičky získané podle příkladu 1 se nanese 6 libovolných ploch 0,1% roztoku směsi lipofilních barviv. Přitom nehraje žádnou roli, v jaké výši se nános na koncentrační zónu provede. V každém případě se ukazují dělené substance po koncentrování к úzké linii se stejnými hodnotami Rf v chromatografické vrstvě. Nanesou se různá množství, totiž 2, 4, 8, 12, 16 a 20 μ\ (přiměřené vždy μζ], bodově asi 12 mm od spodního okraje. Vyvíjení sc provádí v normální komoře bez sycení komory toluenem až do výše dráhy 10 cm ve vrstvě silikagelu (= dělicí dráha od rozhraní až к čelu vzlínajícího eluačního prostředku).
Vzorky, nanesené na koncentrační zónu v poměrně velkém množství, zaujmou hodně velkou kruhovou plochu. Stejnoměrné zbarvení vnitřní kruhové plochy spočívá na prakticky ideálně inertních vlastnostech této vrstvy.
Vždy podle průměru kruhu se směs substancí koncentruje na hranici v úzkou linii v délce průměru chvostování, velmi značném při velkém nánosu, slabě znatelném při malýčh množstvích, při větším průtoku rozpouštědla během vlastní chromatpgrafie úplně mizí. Všechny substance vykakazují stejné hodnoty Rf. Stoupajícím množstvím nánosu ubývá samozřejmě rozpouštění mezi sousedními dvojicemi substancí, přesto je však i při nanášecích plochách 20 μξ ještě zcela postačující.
Příklad В jsou-li roztoky velmi zředěné, může být výhodné, destičku s koncentrační zónou jednoduše ponořit do zředěného roztoku. К tomu se používá destička vyrobená podle příkladu 3. Maximální ponoření nesmí přestoupit výšku koncentrační zóny. Vlastní vyvíjení začíná po usušení nanášecího roztoku. Na hranici se sílikagelovou vrstvou se nejdříve vytvoří úzký pruh, ze kterého začíná pak vlastní chromatografie.
Automatickým nanášecím přístrojem by se nemohlo dosáhnout lepšího pruhového nánosu. Právě tak při použití silně zředěného roztoku by se muselo vícekrát nanášet (v pruhu za sušení mezi jednotlivými nánosy, aby se naneslo stejné množství substance pro chromatografické vyvíjení.
Příklad C
Také u velmi silně zředěných roztoků je díky koncentrování na hraniční linii s chro197323 matograflckou vrstvou ještě ' ' možný důkaz dělených substancí. Tak ' například byly na destičce získané podle příkladu 1' zleva doprava naneseny 2, 6, 10, 14 a 18 μΐ 0,001% roztoku llpofilních barviv, odpovídající 0,02, 0,06, 0,10, 0,14 a 0,18 μξ. Po provedeném vyvíjení byly ještě zachytitelné i 20 ng na nejvnějšnější levé dráze.
'Příklad .D .
Nový materiál sé výborně hodí i pro dělení llpofilních barviv, která jsou ve velmi rozdílných koncentracích. Na povrstvenou hliníkovou fólii, vyrobenou podle příkladu 2, se nanese následující:
Testovací směs I:
0,005 % . modrého barviva s vyšší hodnotou Rf
0,5 % červeného . barviva s nižší hodnotou Rf
Testovací směs II:
0,5 % modrého barviva s vyšší hodnotou ' Rf
0,005 % červeného· barviva s nižší hodno tou Rf ..................................................... f .......' i . . .. A .» > .
Nanesená množství 2, 4, 8, 16 μΐ (odpovídá 0,1/10, 0,2/20, 0,4/40 a 0,8 p/eítyg popř. opačně).
Vyvíjení se provádí v normální vyvíjecí komoře bez sycení komory toluenem až do výše dráhy 10 cm v sillkagelové vrstvě.
Po vyvíjení se ukazuje, že · při dělení · substancí s blízko sebe ležícími hodnotami Rf se snadněji dělí malá množství substancí s vyššími hodnotami Rf než malá množství substancí · s nižšími hodnotami Rf. Na . fóliích s koncentrační zónou je vždy jasně průkazná lepší kvalita dělení.
Příklad E
Také při dělení aminokyselin je možno dobře vidět výhodné vlastnosti. Na destičku získanou podle příkladu 1 se nanese směs aminokyselin v pořadí podle ubývajících hodnot Rf.
L-leucin
DL-valin kyselina a-aminomáselná «-alanin
DL-threonin glycin glutamin arginin
Nanesená množství: 0,75, É, ' 4, 6, 8, -^ul 0,02procentního roztoku každé aminokyseliny, což odpovídá 0,15, 0,4, 0,8, 1,2, 1,6 ^g.
Vyvíjení bez sycení komory· v normální · vyvíjecí komoře. Eluační prostředek: n-propanol/voda (80/20). .
Dělicí dráha rozpouštědla . ve vrstvě silikagelu: 10 cm.
Detekce: Postřik ninhydrinem, zahřívání 3 min. na 120 qC.
Při . srovnání s normální destičkou pro chromatografií v tenké vrstvě se silikagelem je dělení na destičce pro chromatografli v tenké vrstvě . silikagel s koncentrační zónou, zvláště v nízkém rozsahu Rf, jasně lepší.
P ř í k 1 a d F i
Srovnáním obvyklých v obchodě jsoucích destiček s koncentrační zónou z křemeliny má materiál podle vynálezu jasnou převahu.
Srovnávány byly
A. .
Destička · pro· tenkovrstvou chromatografií silikagel/diatomit.
B.
Hotová destička pro chromatografií v· tenké vrstvě silikagel/křemelina.
C.
Destička podle příkladu 1.
Nanášeny byly roztoky barviv ceresové violeti · . BRN iČsté, ceresové · ' zeleně BB a modře 18,90 Sandoz, vždy jako 0,1% roztok (hmot./obj.) v benzenu.
a) Průměr ploch kruhového nánosu při několikerém bodovém nanášení · kapilárou 2 μΐ na koncentrační zóny:
Nanesené množství v μΐ A B průměr v mm C
4 9 10 11,5
8 12,5 13,5 15
12 14,5 16 18
16 15,5 19 20,5
20 16 ’ 21 22,5
střední hodnota 78 90 100
průměrových relací
b) Průměr ploch . kruhového nánosu při zisušení tryskou 5 μ1 a 20 μΐ na koncenbodovém . nanášení v jednom sledu bez me- trační zóny:
Nanesené množství v μΐ A B průměr v mm c
5 10 11,5 12,5
10 13 15 17
20 18 22 25
střední hodnota 76 89 100
průměrových relací
Čísla ukazují, že má obvyklá obchodní destička B o 10 %, destička A o 23 % menší rozprostírací efekt než destička C, což je způsobeno menší inertností koncentračních zón v A a B. Čím větší je průměr kruhové plochy nánosu, tím příznivější je při stejné kvalitě chromatografické . vrstvy chromatografická dělicí účinnost destičky.
Příklad G
Zvlášť výhodně je možno destičky nebo fólie s koncentrační zónou používat také při zkoušení biologických kapalin. Často se přitom může vypustit extrakční proces (cleanup) nutný při normální chromatografii, který je přirozeně spojen se ztrátami, popřípadě nepřesnostmi. Tak jsou například možné přímé zkoušky tělesných kapalin, například moče.
Destička pro chromatografii v tenké vrstvě zhotovená analogicky příkladu 3, jejíž sllikagel chromatografické vrstvy odpovídá charakteristice popsané ve vykládacím . spi se 2 524 065, se používá ve formátu 100 X X 100 mm, z toho je koncentrační zóna 25 krát 100 mm. Tloušťka chromatografické vrstvy je 200 ^m, vrstvy koncentrační zóny asi 150 ^m. Koncentrační zóna se ponoří asi 15 mm hluboko do krysí moče, která obsahuje volné bifenylmetabolity. Ihned potom se vrstva za ' tepla suší. Na dvě místa koncentrační zóny se pak nanesou vždy 2 /ti směsi bifenylolu-(2), bifenylolu-(4), bifenyldiolu-(2,2‘) a bifenyldiolu-(4,4‘) vždy v 0,01% roztoku a usuší se. Vyvíjení se provádí v normální vyvíjecí komoře bez sycení komory směsí rozpouštědel toluen/chloroform/methanol (70/15/15) až do výše 50 mm v silikagelové vrstvě. Po usušení jsou v přesné poloze srovnávacích substancí v UF nebo po postřiku kaliumhexakyanoferratem (III) (chloridem železitým znatelné v moči čtyři pásy metabolitů (hodnoty Rf bifenylolu-(2) asi 65, bifenylolu-(4) asi 50, bifenyldiolu-(2,2‘) asi 40 a bifenyldiolu· -(4,4‘) asi 20—25].

Claims (3)

1. Povrstvený nosný materiál pro chromatografii na tenké vrstvě s koncentrační zónou předřazenou vrstvě chromatografické, vyznačený tím, že koncentrační zóna je ze synteticky vyrobeného, porézního kysličníku křemičitého s objemem pórů 0,5 až 1,5 ml/g a se šíří pórů 2 až 15 ^m.
vynalezu
2. Materiál podle bodu 1, vyznačený tím, že kysličník křemičitý koncentrační zóny má zrnění v rozsahu 10 až 50 μτη.
3. Materiál podle bodů 1 až 2, vyznačený tím, že tloušťka vrstvy koncentrační zóny je 100 až 200, výhodně 150 μΐη.
CS783432A 1977-05-31 1978-05-26 Coated supporting material for the chromatography on the thin layer with the concentrating zone CS197323B2 (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE2724569A DE2724569C2 (de) 1977-05-31 1977-05-31 Beschichtete Trägermaterialien für die Dünnschichtchromatographie mit Konzentrierungszone

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS197323B2 true CS197323B2 (en) 1980-04-30

Family

ID=6010324

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS783432A CS197323B2 (en) 1977-05-31 1978-05-26 Coated supporting material for the chromatography on the thin layer with the concentrating zone

Country Status (8)

Country Link
US (1) US4158626A (cs)
JP (1) JPS53149393A (cs)
CH (1) CH640145A5 (cs)
CS (1) CS197323B2 (cs)
DE (1) DE2724569C2 (cs)
FR (1) FR2392699A1 (cs)
GB (1) GB1596800A (cs)
NL (1) NL7805946A (cs)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4348286A (en) * 1981-07-17 1982-09-07 Analtech, Incorporated Large sample thin layer chromatography
FR2510758A1 (fr) 1981-07-30 1983-02-04 Oreal Procede de prelevement et d'analyse par chromatographie sur plaque et dispositifs permettant sa mise en oeuvre
JP3749941B2 (ja) * 1997-09-04 2006-03-01 独立行政法人産業技術総合研究所 セシウム分離材の製造方法
CN104081199B (zh) * 2012-02-03 2016-05-11 株式会社大赛璐 色谱介质
JP7109194B2 (ja) 2018-01-15 2022-07-29 三菱重工パワー環境ソリューション株式会社 電気集塵装置
MX2021001166A (es) 2018-08-01 2021-04-19 Mitsubishi Heavy Ind Power Environmental Solutions Ltd Precipitador electrostatico.
WO2022192121A1 (en) * 2021-03-08 2022-09-15 University Of Washington Picoscale thin layer chromatography for analysis of single cells and microsamples

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NL288991A (cs) * 1962-06-09
DE1792083A1 (de) * 1968-07-19 1971-04-29 Merck Anlagen Gmbh Zweischichtenplatte und ihre Verwendung zur duennschichtchromatographischen Auftrennung von Aminosaeuren

Also Published As

Publication number Publication date
GB1596800A (en) 1981-08-26
FR2392699A1 (fr) 1978-12-29
DE2724569C2 (de) 1982-09-16
CH640145A5 (de) 1983-12-30
JPS575461B2 (cs) 1982-01-30
FR2392699B1 (cs) 1983-04-08
US4158626A (en) 1979-06-19
JPS53149393A (en) 1978-12-26
NL7805946A (nl) 1978-12-04
DE2724569A1 (de) 1978-12-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Wall Thin-layer chromatography: a modern practical approach
Touchstone Practice of thin layer chromatography
JP5941405B2 (ja) 薄層クロマトグラフィーによる試料の検出方法、薄層クロマトグラフィープレート、及びその製造方法
CH662062A5 (de) Verfahren und vorrichtung zur trennung einer oder mehrerer in loesung befindlicher verbindungen mit hilfe einer dynamischen saeulen-fluessigkeitschromatographie.
JPH04264253A (ja) 膜上での毛細電気泳動留分の収集のための装置
CS197323B2 (en) Coated supporting material for the chromatography on the thin layer with the concentrating zone
JP2003344378A (ja) ダイオキシン類分析用前処理カラム及びダイオキシン類分析前処理方法
STOLMAN Thin layer chromatography application in toxicology
Wilson et al. Reversed-phase thin-layer chromatography for the separation and analysis of ecdysteroids
JP2660558B2 (ja) 精製グアヤク脂およびその製造法
US4064041A (en) Separating material for thin layer chromatography
JPH0159545B2 (cs)
US3455818A (en) Chromatographic process
Lewis et al. Factors affecting the ion-pair reversed-phase thin-layer chromatogrphy of organic acids on paraffin-coated and C18 bonded silica gel
Mohammad et al. Surfactants modified silica phase for sorption studies of essential amino acids by thin layer chromatography
JPS6310785B2 (cs)
US4225639A (en) Process for preparing alumina being suitable for layer chromatography
DE2826664C2 (de) Verfahren zur Bestimmung von polycyclischen aromatischen Kohlenwasserstoffen
Mohammad et al. Migration behavior of aromatic amines on alumina thin layers developed with water‐in‐oil microemulsion
Stahl Instruments used in thin-layer chromatography and their operation
Mohammad et al. Micellar TLC of inorganic ions: Simultaneous separation of lead (II), zinc (II), and cobalt (II) and spectrophotometric estimation of zinc (II)
SU161753A1 (cs)
Singh Chromatography
SU1109636A1 (ru) Тонкослойна хроматографическа пластина
US4272380A (en) Solvent front detection method and manufacture