CS195756B1 - Method of determination of the efficacy of the glycogenphosphorylasis in the blood - Google Patents
Method of determination of the efficacy of the glycogenphosphorylasis in the blood Download PDFInfo
- Publication number
- CS195756B1 CS195756B1 CS85674A CS85674A CS195756B1 CS 195756 B1 CS195756 B1 CS 195756B1 CS 85674 A CS85674 A CS 85674A CS 85674 A CS85674 A CS 85674A CS 195756 B1 CS195756 B1 CS 195756B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- solution
- liter
- glycogen
- moles
- mercaptoethanol
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 23
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 title claims abstract description 6
- 239000008280 blood Substances 0.000 title claims abstract description 6
- 102000009097 Phosphorylases Human genes 0.000 claims abstract description 19
- 108010073135 Phosphorylases Proteins 0.000 claims abstract description 19
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethyl mercaptane Natural products CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 claims abstract description 13
- 239000008107 starch Substances 0.000 claims abstract description 13
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 claims abstract description 13
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 claims abstract description 12
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 claims abstract description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 11
- YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N glycylglycine Chemical compound [NH3+]CC(=O)NCC([O-])=O YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims abstract description 6
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims abstract description 6
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims abstract description 6
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract description 6
- 108010008488 Glycylglycine Proteins 0.000 claims abstract description 5
- 229940043257 glycylglycine Drugs 0.000 claims abstract description 5
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 19
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 claims description 5
- 238000005374 membrane filtration Methods 0.000 claims description 4
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims description 3
- AVPCPPOOQICIRJ-UHFFFAOYSA-L sodium glycerol 2-phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OCC(CO)OP([O-])([O-])=O AVPCPPOOQICIRJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 239000012636 effector Substances 0.000 claims description 2
- 229960002901 sodium glycerophosphate Drugs 0.000 claims description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims 1
- REULQIKBNNDNDX-UHFFFAOYSA-M sodium;2,3-dihydroxypropyl hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OCC(O)COP(O)([O-])=O REULQIKBNNDNDX-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 abstract description 32
- PUZPDOWCWNUUKD-UHFFFAOYSA-M sodium fluoride Chemical compound [F-].[Na+] PUZPDOWCWNUUKD-UHFFFAOYSA-M 0.000 abstract description 10
- HXXFSFRBOHSIMQ-VFUOTHLCSA-N alpha-D-glucose 1-phosphate Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](OP(O)(O)=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O HXXFSFRBOHSIMQ-VFUOTHLCSA-N 0.000 abstract description 7
- 229950010772 glucose-1-phosphate Drugs 0.000 abstract description 7
- UDMBCSSLTHHNCD-UHFFFAOYSA-N Coenzym Q(11) Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(O)=O)C(O)C1O UDMBCSSLTHHNCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 5
- UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N adenosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N 0.000 abstract description 5
- LNQVTSROQXJCDD-UHFFFAOYSA-N adenosine monophosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(CO)C(OP(O)(O)=O)C1O LNQVTSROQXJCDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 5
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 abstract description 5
- 239000011734 sodium Substances 0.000 abstract description 5
- 239000011775 sodium fluoride Substances 0.000 abstract description 5
- 235000013024 sodium fluoride Nutrition 0.000 abstract description 5
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 abstract description 4
- HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N Acrylamide Chemical compound NC(=O)C=C HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- DKNPRRRKHAEUMW-UHFFFAOYSA-N Iodine aqueous Chemical compound [K+].I[I-]I DKNPRRRKHAEUMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 abstract description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 abstract description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 abstract description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 2
- 229910052816 inorganic phosphate Inorganic materials 0.000 abstract description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 abstract description 2
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 abstract 6
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 abstract 6
- 229960001484 edetic acid Drugs 0.000 abstract 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 abstract 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 abstract 1
- 235000013681 dietary sucrose Nutrition 0.000 abstract 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 abstract 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 abstract 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 abstract 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 abstract 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 abstract 1
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 abstract 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 abstract 1
- 102000007390 Glycogen Phosphorylase Human genes 0.000 description 6
- 108010046163 Glycogen Phosphorylase Proteins 0.000 description 6
- WZIMSXIXZTUBSO-UHFFFAOYSA-N 2-[[bis(carboxymethyl)amino]methyl-(carboxymethyl)amino]acetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CN(CC(O)=O)CC(O)=O WZIMSXIXZTUBSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 3
- NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M potassium iodide Chemical compound [K+].[I-] NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 2
- QHQZEEGNGSZBOL-UHFFFAOYSA-N 2-(aminomethyl)-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol Chemical compound NCC(CO)(CO)CO QHQZEEGNGSZBOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000856 Amylose Polymers 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010044467 Isoenzymes Proteins 0.000 description 1
- 235000010716 Vigna mungo Nutrition 0.000 description 1
- 244000042295 Vigna mungo Species 0.000 description 1
- 229960003190 adenosine monophosphate Drugs 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 125000003147 glycosyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 210000000663 muscle cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/48—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving transferase
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
Vynález se týká způsobu stanovení účinnosti lsoíosforylázy v krvi. Jde zejména o glykogen fosforylázy.
Vynález si klade za úkol zlepšit způsob stanovení glykogenfosforylázy tak, aby bylo možno stanovit jak celkovou fosforylázu, tak určité isofosforylázy.
Jsou známy způsoby kvantitativního stanovení glykogenfosforylázy, například účinnosti fosforylázy ze svalů měřením glukózo-l-fosfátu nebo orthofosfátu v homogenátech tkání.
1. Pfannemilller, B.: In: Handbuch der Physiologisch- und pethologisch-chemlschen Analyse (Hrg. Hoppe-Beyler u. Thierfelder], Springer Verlag, Berlin-Gčttingen-Heidelberg, sv. VI/B, str. 225 až 253 (1966),
2. Will, H. urid R. G. Krause: Acta biol. med. german. 28, 919 až 933 (1972).
Tyto způsoby spočívají v tom, že se zjišťují různé reakční produkty reakce, která je katalyzována enzymem. Jde o uvolnění anorganického fosfátu, prodloužení glykosylových řetězců molekuly glykogenu, popřípadě tvorba glukózo-l-fosfátu. Ke zjištění těchto produktů je známa celá řada způsobů, které se od sebe liší svou citlivostí jen nepodstatně. Známé způsoby se více nebo
S měně hodí ke kvantitativnímu stanovení účinnosti enzymu, bez ohledu na kvalitativní rozdíly mezi různými isoenzymy fosforylázy. Stanovení účinnosti je v krevním séru spojeno s tou nevýhodou, že. je přítomno pouze velmi malé množství fosforylázy při velkém přebytku jiných bílkovin.
Zjištění účinnosti fosforylázy, zejména specifické fosforylázy pro srdeční sval v krevním séru u lidí, má velký diagnostický význam, protože po poškození buněk svalu, například při infarktu, se tento enzym objevuje v krevním séru [Krause, E. G., H. Běhm, H. Will a A. Wollenberger: Dtsch. Ges. wesen 27, 903 (1972)). Způsob zjišťování účinnosti glykofenfosforylázy v krevním séru však dosud není znám.
Vynález si tedy klade za úkol navrhnout způsob stanovení účinnosti glykogenfosforylázy v krevním séru.
Předmětem vynálezu je způsob stanovení účinnosti glykogeníosforylázy v krevním séru, vyznačující se tím, že se krevní sérum po předběžném zpracování smísí se substrátem pro enzym a roztokem, obsahujícím efektor a po inkubaci se měří enzymatická účinnost podle vzniklých reakčních produktů.
Krevní sérum se předběžně zpracovává koncentrací pomocí membránové filtrace v poměru 2:1 až 3:1 a popřípadě se předběžně zpracovává škrobem. К předběžnému zpracování škrobem se sérum nanese na sloupec naplněný škrobem při teplotě 0 až 5 °C. Sloupec se uvede do· rovnovážného stavu v roztoku s obsahem 1 až 103 molu/litr fluoridu sodného, 0,1 až 10“4 molu/litr j3-glycerofosfátu sodného a 0,1 až 104 molu/litr merkaptoethanolu o pH 5,5 až 7,0. Potom se roztok nechá procházet sloupcem, načež se vymývá fosforylázou při teplotě 10 až 35 °C a pH 6,0 až 7,5 dalším roztokem, který obsahuje 0,1 až 10 “4 molu/litr β-glycerofosfátu sodného, 1 až 10~4 molu/litr kyseliny ethylendiamintetraoctové a 0,1 až 10_4 molu/litr merkaptoethanolu.
Sérum, koncentrované membránovou filtrací, se smísí s roztokem, který obsahuje 1 až 103 molu/litr glycylglycinu, 0,1 až 104 molu/litr merkaptoethanolu a 1 až 104 molu/litr kyseliny ethylendiamintetraoctové při pH 6 až 7,5.
Tato směs, popřípadě eluát ze škrobového sloupce se přidá к roztoku, který obsahuje roztok glykogenu, glukózo-l-fosfátu a adenosinmonofosfátu v poměru 5:3:2 a výsledná směs se inkubuje 60 minut při teplotě 37 °C. Potom se směs denaturuje kyselinou trichloroctovou a obsah fosfátu se stanoví opticky.
Glykogenfosíoryláza se dělí na 3 isofosforylázy elektroforézou, aby bylo možno stanovit formu, typickou pro srdeční sval. Po inkubaci za přítomnosti substrátu se isoíosforylázy barví podle reakčního produktu směsí jodu a jodidu draselného.
Způsob podle vynálezu je vhodný jako vyšetřovací metoda к diagnóze srdečního infarktu, což při použití dosavadních způsobů nebylo možné. V krevním séru zdravých osob není možno naměřit žádnou účinnost fosforylázy. Z tohoto hlediska principiálně způsobuje jakékoli stanovení fosforylázy v krevním séru podezření na infarkt.
V následujících příkladech se popisuje stanovení fosforylázy i složení činidla, které se к provádění způsobu podle vynálezu používá.
Přikladl
Činidlo ke stanovení fosforylázy má následující složení:
roztok 1
0,1 m fluoridu sodného
0,001 m /J-glycerofosfátu sodného o pH 6,1 0,015 m merkaptoethanolu roztok 2
0,04 m jS-glycerofosfátu sodného o pH 6,8 0,001 m kyseliny ethylendiamintetraoctové 0,015 m merkaptoethanolu roztok 3
0,04 m glycylglycinu o pH 6,8
0,01 m merkaptoethanolu 0,008 m kyseliny ethylendiamintetraoctové roztok 4
3,3 o/o glykogenu roztok 5
0,083 m glukózo-l-fosfátu
0,005 m adenosínmonofosfátu
Sérum se koncentruje membránovou filtrací v poměru 2:1 až 3:1, popřípadě se předběžně zpracuje nerozpustným škrobem. V tomto případě se 3 až 4 ml séra nanesou při 4 °C na sloupec škrobu o rozměru 2X1 centimetrů, v. rovnovážném, stavu ,v...rozto.-. ku 1. Potom se sloupec promyje 3 X 3 ml roztoku 1 a vymývá se 2 ml roztoku 2 při 30 °C fosforylázou.
díl koncentrovaného séra se smísí s 1 dílem roztoku 3 а к 5 dílům směsi, popřípadě eluátu se přidají 3 díly roztoku 4 a 2 díly roztoku 5. Po 60 minutách inkubace při 37 °C se roztok denaturuje kyselinou trichloroctovou a známým způsobem [Wěií -Melherbe, H.: In: Handbuch der Physiologisch- und pathologisch-hemischen Analyse (Hrg. Hoppe-Seyler ů. Thierfelder), Springer Verlag, Berlin-Góttgen-Heidelberg, sv. III/l, str. 457 až 538 (1955)], se provede analýza fosforečnanu, který je reakčním produktem.
P ř í к 1 a d 2
Nyní se provádí stanovení enzymatické účinnosti za přítomnosti specifických inhibičních látek isofosforylázy, takže se na rozdíl od stanovení podle příkladu i zjistí podíl fosforylázy specifické pro· srdeční sval.
Činidlo к oddělení isofosforylázy a stanovení enzymatické účinnosti má následující složení:
roztok 1
0,042 m tris(hydroxymethyl)aminoethanu 0,001 m kyseliny ethylendiamintetraoctové 0,049 m kyseliny borité o pH 8,2 roztok 2
0,03 m glukózo-l-fosfátu
0,002 m adenosínmonofosfátu
0,002 m /?-glycerofosfátu sodného o pH 6,8
0,002 m kyseliny ethylendiaminotetraoctové
0,001 m merkaptoethanolu
0,1 m fluoridu sodného roztok 3
0,01 m jodu
0,014 m jodidu draselného
Alikvotní část eluátu ze šroubového sloupce s obsahem fosforylázy se zředí roztokem 1 v poměru 2:1 2. m sacharózy a diskovou elektroforetickou technikou se oddělí iso fosforyláza. K dělení se užije gelu ve složení 5 % akrylamidu a 0,2 % N,N‘-methylbisakrylamidu s obsahem 0,1 % glykogenu a roztoku 1 jako · pufru, který je zároveň elektrodovým . pufrem. Po inkubaci tohoto · gelu v roztok 2 se nanese roztok 3, čímž se zbarví amylózové postranní řetězce vzniklé polymeraci glykogenu.
Claims (4)
1. Způsob stanovení účinnosti glykogenfosfoirylázy · v krvi, vyznačující se tím, že se krevní . sérum po předběžném zpracování smísí se substrátem pro enzym a roztokem, obsahujícím efektor a po· inkubaci se měří enzymatická účinnost podle vzniklých reakčních produktů.
2. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že . se krevní sérum koncentruje membránovou filtrací v poměru 2:1 až 3:1 a popřípadě se· předběžně zpracovává nerozpustným škrobem.
3. Způsob podle bodu 2, vyznačující . se tím, že se při předběžném zpracování škrobem krevní sérum ' nanese při teplotě 4 °C na sloupec škrobu, uvedený do· rovnovážného stavu v roztoku, který obsahuje . 1 až 10-3 molu/litr chloridu sodného, 0,1 až 10“4 mohi/Mte Jglycerofosfátu sodného· a 0,1 až 10-4 molu/litr· merkaptoethanolu při pH 6,1, potom se sloupec promyje tímtéž roztokem a nakonec se vymývá při teplotě 30 °C a pH 6,8 roztokem, který obsahuje 0,1 až 10“4 molu/litr.· β-glycerofosfátu sodíku, 1 až 10“4 molu/litr kyseliny ethylendiamintetraoctové a 0,1 až 10“ molu/litr merkaptoethanolu k získání fosforylázy.
4. Způsob podle bodů 1 a· 2, vyznačující se tím, že se koncentrované sérum mísí s roztokem, který obsahuje 1 až 10“3 molu/ /litr glycylglycinu, 0,1 až 10“4 molu/litr merkaptoethanolu a 1 až 10 4 molu/litr kyseliny ethylendiamintetraoctové při pH 6,8, získaná směs, popřípadě eluát ze škrobového sloupce se přidá k roztoku glykogenu · a k roztoku glukózo1- 1-fosfátu a ' adenosinmono1fosfátu v poměru 5:3:2, výsledná směs se inkubuje 60 minut při teplotě 37 °C, denaturuje se · kyselinou trichloroctovou a obsah fosfátu se stanoví opticky po· redukci fosfomolybdenanového komplexu.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DD16876573A DD101986A1 (cs) | 1973-02-07 | 1973-02-07 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS195756B1 true CS195756B1 (en) | 1980-02-29 |
Family
ID=5490033
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS85674A CS195756B1 (en) | 1973-02-07 | 1974-02-07 | Method of determination of the efficacy of the glycogenphosphorylasis in the blood |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| BG (1) | BG20730A1 (cs) |
| CS (1) | CS195756B1 (cs) |
| DD (1) | DD101986A1 (cs) |
| DE (1) | DE2401484A1 (cs) |
| FR (1) | FR2327545A1 (cs) |
| GB (1) | GB1451004A (cs) |
| HU (1) | HU169957B (cs) |
| PL (1) | PL94983B1 (cs) |
| SU (1) | SU976958A1 (cs) |
-
1973
- 1973-02-07 DD DD16876573A patent/DD101986A1/xx unknown
-
1974
- 1974-01-12 DE DE19742401484 patent/DE2401484A1/de not_active Withdrawn
- 1974-01-29 GB GB406174A patent/GB1451004A/en not_active Expired
- 1974-02-05 BG BG2570174A patent/BG20730A1/xx unknown
- 1974-02-06 SU SU741999385A patent/SU976958A1/ru active
- 1974-02-06 HU HUAE000406 patent/HU169957B/hu unknown
- 1974-02-07 PL PL16863774A patent/PL94983B1/pl unknown
- 1974-02-07 FR FR7404148A patent/FR2327545A1/fr active Granted
- 1974-02-07 CS CS85674A patent/CS195756B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL94983B1 (cs) | 1977-09-30 |
| HU169957B (cs) | 1977-03-28 |
| FR2327545B1 (cs) | 1978-02-17 |
| DD101986A1 (cs) | 1973-11-20 |
| SU976958A1 (ru) | 1982-11-30 |
| GB1451004A (en) | 1976-09-29 |
| BG20730A1 (cs) | 1975-12-20 |
| FR2327545A1 (fr) | 1977-05-06 |
| DE2401484A1 (de) | 1974-08-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Natowicz et al. | Enzymatic identification of mannose 6-phosphate on the recognition marker for receptor-mediated pinocytosis of beta-glucuronidase by human fibroblasts. | |
| CA1125151A (en) | Triglycerides assay and reagents therefor | |
| Slater | Spectrophotometric determination of fructose-1: 6-diphosphate, hexosemonophosphates, adenosinetriphosphate and adenosinediphosphate | |
| Ghosh et al. | Adenosine diphosphate glucose pyrophosphorylase: a regulatory enzyme in the biosynthesis of starch in spinach leaf chloroplasts | |
| KR920010313B1 (ko) | 유체중 나트륨이온의 측정 | |
| Maréchal et al. | Metabolism of trehalose in Euglena gracilis: I. partial purification and some properties of trehalose phosphorylase | |
| Fraenkel et al. | The specific fructose diphosphatase of Escherichia coli: properties and partial purification | |
| Milner et al. | The role of phosphatidylglycerol in the vectorial phosphorylation of sugar by isolated bacterial membrane preparations | |
| JPH0417640B2 (cs) | ||
| Darrow et al. | Subunit association and catalytic activity of uridine diphosphate galactose-4-epimerase from yeast. | |
| JPS63152998A (ja) | 糖転移酵素の測定方法 | |
| CARTENI'‐FARINA et al. | 5′‐Methylthioadenosine Phosphorylase from Caldariella acidophila: Purification and Properties | |
| US4237044A (en) | Antibodies against creatinekinase-M8 and process for the production thereof | |
| CS195756B1 (en) | Method of determination of the efficacy of the glycogenphosphorylasis in the blood | |
| Graves et al. | Pyridoxal phosphate-dependent conformational states of glycogen phosphorylase as probed by interconverting enzymes. | |
| Rudick et al. | Uridine diphosphate glucose pyrophosphorylase of Acanthamoeba castellanii: purification, kinetic, and developmental studies | |
| Leloir et al. | [35] Galactokinase and galactowaldenase | |
| Kirchgesser et al. | A colorimetric assay for the determination of acid nucleoside triphosphatase activity | |
| Vanderheiden | ITP pyrophosphohydrolase and IDP phosphohydrolase in rat tissue | |
| EP0071087B1 (en) | Improved determination of creatine phosphokinase in body fluids | |
| Bernstein et al. | Adenylate kinase in human tissue: II. Serum adenylate kinase and myocardial infarction | |
| Gonzalez et al. | Fish Liver Fructose 1, 6-Diphosphatase: I. PURIFICATION OF THE ENZYME FROM GENYPTERUS CHILENSIS AND STUDIES ON ADENOSINE 5′-MONOPHOSPHATE INHIBITION | |
| Klein et al. | Anion-exchange chromatography of erythrocytic and muscle adenylate kinase and its effect on the serum creatine kinase isoenzyme assays. | |
| EP0134292B1 (en) | Determination of carbohydrate acceptors | |
| Cheung et al. | The ribonuclease-catalyzed hydrolysis of uridine-2', 3'-phosphate |