CN85102838A - 微生物细胞的固定化方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提出了一种微生物细胞的固定化方法。是采用聚乙烯醇作载体包埋微生物细胞,并使用成型剂使包埋微生物细胞成型后定型,制备出外形为规则珠状的凝胶态固定化微生物细胞。
本发明的特点是载体价格便宜,成型剂可重复使用,制备工艺操作简便,稳定性高,外形规则的成品使用方便,机械强度优良。
本发明可以广泛应用于医药工业和食品饮料工业,改进传统的发酵工艺。
Description
本发明涉及一种微生物细胞的固定化方法。
以前的微生物细胞固定化方法一般是用胶类作为载体。例如明胶、琼脂、果胶、海藻胶等。中国科学院微生物研究所等单位制备的生产6-氨基青霉素烷酸(简称6-APA)的固定化大肠杆菌细胞,就是采用琼脂作载体,结合戊二醛处理的方法,如《微生物学报》1980年20卷4期文章所述。该方法最大的缺点是所得的固定化细胞酶活性低,只有2u/克固胞。因而应用于生产时效率低,直接影响到生产6-APA的产量及质量,并且其固定化细胞的机械强度较差,降低了使用效果和寿命。
近年来有人提出用聚乙烯醇(PVA)作为载体固定微生物细胞制备酒精,例如日本特许出愿公开昭57-138390、昭57-198088。但他们制备固定化微生物细胞需在模具中成形,固定化后脱模,使用时要用机械方法破碎。因而使用起来很不方便,而且破碎后不均匀、不规则的形状会影响使用效果,特别是当用于反应器中时。
本发明的目的就是为了解决上述方法存在的缺点。用新的方法制备出固定化微生物细胞,并使之具有酶活性高、机械强度好、外形为规则珠状,适宜于在反应器中长期使用等优点。
本发明采用聚乙烯醇作为包埋微生物细胞的载体,用成形剂成形,低温冷冻定形的方案。成形剂选用油脂类物质,以植物油或矿物油为佳。制备工艺是,首先把制备好的聚乙烯醇溶液与微生物细胞混合均匀,可用浓度在10%~20%之间的PVA溶液,微生物细胞与聚乙烯醇溶液的重量比选择在1∶1至9范围内。然后在细胞-聚乙烯醇混合物中加入成形剂,并充分搅拌,使之分散成珠状,细胞-聚乙烯醇混合物与成形剂的重量比可以是1∶0.5至2。再将已成形的包埋微生物细胞在一定温度下放置一段时间定形,一般需要在-10℃至-40℃温度条件下保留8~20小时即可。待定形后即可除去成形剂,成形剂可回收以备重复使用,最后可经后处理,例如清洁处理等,则得到形状规则的珠状凝胶态成品固定化微生物细胞。
实施例
用本发明可制备工业上用于生产6-APA的固定化大肠杆菌细胞。
原料的配比:
浓度15%的PVA溶液 10克
大肠杆菌细胞 10克
菜籽油 20克
制备条件:
温度 -20℃
时间 12小时
结果:
所得固定化细胞外形为规则珠状凝胶态,酶活性为8u/克固胞,机械强度良好。
本发明可以应用于医药工业和食品饮料工业,改进传统的发酵工艺。
本发明的特点是,用聚乙烯醇作载体价格便宜,成形剂可重复使用,因而成本低廉。制备工艺方法操作简便,稳定性高。制备出的固定化大肠杆菌细胞酶活达到8u/克固胞,可以生产出浓度较高的6-APA转化液,从而提高了生产效率。成品固定化微生物细胞外形为规则珠状凝胶态,使用方便,机械强度优良,长期在较高温度和压力条件下使用无破裂。特别适于工业上在柱反应器中使用。
Claims (5)
1、用聚乙烯醇(PVA)作载体包埋微生物细胞的固定化方法,其特征是使用了成形剂,所用的成形剂是油脂类物质。并用低温冷冻法定形。
2、如权利要求1所说的固定化方法,其特征是所说的油脂类物质是植物油或者矿物油。
3、如权利要求1、2所说的固定化方法,其特征是把微生物细胞与制备好的聚乙烯醇溶液混合后,在细胞-聚乙烯醇混合物中加入成形剂充分搅拌,使之成形为珠状,然后在一定温度下放置一段时间使之定形,待定形后除去成形剂,经后处理得到成品固定化微生物细胞。
4、如权利要求3所说的固定化方法,其特征是作载体的聚乙烯醇溶液浓度在10%~20%之间。
原料的重量比为:
PVA溶液∶微生物细胞=1至9∶1;
细胞-PVA混合物∶成形剂=1∶0.5至2;
制备条件为:
温度 -10℃至-40℃
时间 8至20小时
5、用权利要求4所述固定化方法制备的固定化微生物细胞,其特征是固定化大肠杆菌细胞,外形呈珠状凝胶态。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN 85102838 CN85102838A (zh) | 1985-04-01 | 1985-04-01 | 微生物细胞的固定化方法 |
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CN 85102838 CN85102838A (zh) | 1985-04-01 | 1985-04-01 | 微生物细胞的固定化方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
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CN85102838A true CN85102838A (zh) | 1986-09-10 |
Family
ID=4792796
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
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CN 85102838 Pending CN85102838A (zh) | 1985-04-01 | 1985-04-01 | 微生物细胞的固定化方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN85102838A (zh) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2001082704A3 (en) * | 2000-05-02 | 2002-04-04 | Univ Victoria | Sprayable formulations of mycelium-based biological control agents |
CN100379858C (zh) * | 2005-10-26 | 2008-04-09 | 云南师范大学 | 一种用于生物质发酵产氢的固定化微生物及制备方法 |
CN100463966C (zh) * | 2006-05-12 | 2009-02-25 | 陕西科技大学 | 一种细胞固定化的方法 |
CN101293700B (zh) * | 2007-04-26 | 2012-07-18 | 株式会社日立工业设备技术 | 包埋固定化载体的减容方法、包埋固定化载体、水质净化方法及包埋固定化载体的制造装置 |
-
1985
- 1985-04-01 CN CN 85102838 patent/CN85102838A/zh active Pending
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C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |