CN2611382Y - 病原微生物感染诊断型细胞芯片 - Google Patents

Abstract

一种病原微生物感染诊断型细胞芯片，其基片上设置有反应槽，反应槽内设置有细胞薄片。病毒感染细胞薄片的制备包括1]基片的制备，采用机高分子材料、金属或硅制备出基片，在基片表面上采用微加工技术制作出反应槽；2]细胞薄片的制备，根据检测病原微生物，制备病毒感染细胞薄片或病原微生物细胞薄片；3]细胞芯片的制备，将细胞薄片粘接在反应槽内。本实用新型提供了一种高通量、低成本、快速、准确的病原微生物感染诊断型细胞芯片法。

Description

病原微生物感染诊断型细胞芯片

技术领域

本实用新型涉及一种病原微生物感染诊断型细胞芯片。

背景技术

感染性疾病是危害人民健康和生命的常见病和多发病。其感染的普遍性、致病的复杂性使临床上对该类疾病的诊断和治疗非常困难，迫切需要一种有效、快速的诊断技术。

对于病毒性疾病病原体的检测，由于病毒的培养比较困难，且时间较长，阳性率低、不易操作，因此临床上主要依靠血清学方法和分子生物学方法诊断病毒的感染。但上述两类方法不同程度地存在有缺点或不足。例如：中和试验法、补体结合试验法、血凝抑制试验法存在取材及可检测范围狭窄等局限性；酶联免疫吸附法通常采用间接法，由于生产厂家的质量标准不统一，所以假阳性率高；放射免疫分析法对操作人员的技术水平要求较高，且对环境有一定的污染。细菌、真菌等病原微生物主要依靠培养的方法进行诊断，所需时间较长。前述方法的缺陷还在于其对病原微生物的检测均是一对一的检测，而临床上病原微生物与疾病的关系是：一种疾病可以由多种病原微生物引起；一种病原微生物又可以引起多种疾病。因此，其无法满足临床对多种病原微生物的高通量、快速检测的需要。

目前国内外已有基因芯片、蛋白芯片用于病原微生物检测，尚无用于病原微生物诊断的细胞芯片。基因芯片是基于临床病原微生物核酸水平的检测，临床标本中病原微生物的含量很低，核酸必须经PCR扩增放大后才能用于基因芯片检测，多种病原体检测需多重PCR技术，而目前多重PCR技术的应用范围有限，不能满足高通量芯片的需要，且PCR容易出现假阳性，因此其对实验条件和操作者的要求较高，条件一般的医院难以开展。国内已有对肿瘤进行诊断的蛋白芯片产品，一般来讲，蛋白芯片的制作需要高纯度的特异性抗原或特异性单克隆抗体，而高纯度的特异性抗原或特异性单克隆抗体制备工艺复杂，造价高，导致采用其制作的蛋白芯片价格昂贵。

南京益来基因医学有限公司关于细胞芯片的中国专利“细胞微阵列芯片及其制备方法”，专利申请号：00122065.9。该技术的细胞芯片上包被的是培养的正常细胞，仅用于化合物、生物分子或药物的高通量筛选及功能基因组学研究，而无法用于病原微生物检测。

实用新型内容

本实用新型解决了背景技术中通量低、成本高、检测速度慢、准确性差的的技术问题。

本实用新型的技术解决方案是：

一种病原微生物感染诊断型细胞芯片，包括基片1和反应槽2，其特征在于：所述的基片1上设置有反应槽2，反应槽2内设置有细胞薄片3。

上述细胞薄片3是将含有病原微生物的菌涂片或包被有被病毒感染的真核细胞的细胞片切割成的与反应槽2形状相应的薄片。

上述反应槽2的设置凹于或凸于基片1表面均可。

上述反应槽2可为一个、两个或多个，所述设置于反应槽2内的细胞薄片3相应的为一个、两个或多个。

上述多个反应槽2以阵列排布为佳。

上述基片1可为有机高分子材料、金属或硅等；所述的细胞薄片3的材料为玻璃、塑料或硝酸纤维素薄膜等。

本实用新型具有以下优点：

1.高通量。临床上病原微生物与疾病的关系是：一种疾病可以由多种病原微生物引起；一种病原微生物又可以引起多种疾病。因此，本实用新型可同步地检测出多种病原微生物，满足临床对病原微生物的高通量检测的要求；

2.低成本。芯片材料造价低，且材料易得，制备工艺简单，价格低廉；

3.操作简单，易于掌握，检测无需特殊条件，便于普及；

4.检测快速、准确，可对感染性疾病进行快速确诊；

5.对环境无污染；

6.应用范围广。不但可为临床提供诊断依据，还可用于畜禽的微生物检疫。

附图说明

附图图面说明如下：

图1、2、3分别为本实用新型的结构示意图。

具体实施方式

下面将结合附图及实施例对本实用新型作进一步详述：

参见图1、2、3，本实用新型的病原微生物感染诊断型细胞芯片主要由基片1、反应槽2、细胞薄片3构成。基片1可采用有机高分子材料、金属或硅等，其上上加工有放置细胞薄片3的反应槽2，反应槽2据检测需要可为一个、两个或多个，以设置为阵列排布的多个为佳。细胞薄片3是将细菌、真菌、螺旋体等病原微生物的菌涂片或包被有被病毒感染的真核细胞的细胞片，切割成的与反应槽2形状相应的细胞薄片3，细胞薄片的材料可以是玻璃、塑料或硝酸纤维素薄膜等。将细胞薄片3嵌于反应槽2内。细胞薄片上包被有针对某一种病原微生物的特异性抗原，所以可直接用于病原微生物的检测。使用时，可以将盖玻片覆盖于反应槽2上。

本实用新型的制作方法如下：

1.制备基片

采用透光有机高分子材料如聚苯乙烯等制备出基片1，在其上采用微加工技术制作出方形或长方形的反应槽2。

2.制备细胞薄片

根据检测病原微生物的不同，可制备不同的细胞薄片。

1].制备病毒感染细胞薄片；

2].制备细菌、真菌类其他病原微生物细胞薄片。

3.制备细胞芯片

将细胞薄片3用光学透明胶粘接在反应槽2内。

本实用新型制作方法实施例：

1.制备基片：

采用有透光度强的有机高分子材料如聚苯乙烯制备出基片1，基片1的边缘区较中间区略高并呈台阶状，小台阶用来固定盖玻片。基片1上采用微加工技术根据需要制备出若干反应槽2，反应槽2的四壁略高于细胞薄片3的厚度并与小台阶同高，可用以支撑盖玻片。反应槽3内固定细胞薄片3。反应槽2还可以凹陷于基片1中。

2.制备细胞薄片：

1].制备病毒感染细胞薄片；

根据感染病毒的不同，可采用不同的细胞系，如BHK21、Hep-2、Vero-E₆、2BS、NS1、SP-2/0等。

2].制备细菌、真菌等其他病原微生物细胞薄片。

3.制备细胞芯片：

将切好的细胞薄片用胶粘剂粘接到基片相应的反应槽上。4℃保存。

Claims (6)

1.一种病原微生物感染诊断型细胞芯片，包括基片(1)和反应槽(2)，其特征在于：所述的基片(1)上设置有反应槽(2)，反应槽(2)内设置有细胞薄片(3)。

2.如权利要求1所述的病原微生物感染诊断型细胞芯片，其特征在于：所述的细胞薄片(3)是将含有病原微生物的菌涂片或包被有被病毒感染的真核细胞的细胞片切割成的与反应槽(2)形状相应的薄片。

3.如权利要求1所述的病原微生物感染诊断型细胞芯片，其特征在于：所述反应槽(2)的设置凹于或凸于基片(1)表面。

4.如权利要求1或2或3所述的病原微生物感染诊断型细胞芯片，其特征在于：所述的反应槽(2)为一个、两个或多个，所述设置于反应槽(2)内的细胞薄片(3)相应的为一个、两个或多个。

5.如权利要求4所述的病原微生物感染诊断型细胞芯片，其特征在于：所述的多个反应槽(2)为阵列排布。

6.如权利要求5所述的病原微生物感染诊断型细胞芯片，其特征在于：所述的基片(1)为有机高分子材料、金属或硅；所述的细胞薄片(3)的材料为玻璃、塑料或硝酸纤维素薄膜。

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