CN218115404U - 反应装置 - Google Patents

Abstract

本实用新型公开了一种反应装置，包括基座、样本载体、压盖；所述基座上开设有反应槽、排气口、加排液口；所述排气口、所述加排液口分别与所述反应槽连通；所述反应槽内设有支撑台，所述样本载体位于所述反应槽内并抵接在所述支撑台上，所述样本载体具有滤膜，所述压盖上设有压板；所述压板抵接在所述滤膜上。本实用新型可以保证杂交试剂与样本载体充分接触，提高原位杂交结果的准确性。

Description

反应装置

技术领域

本实用新型属于生物实验器械领域，具体涉及反应装置。

背景技术

恶性肿瘤是导致死亡的主要疾病之一，而恶性肿瘤死亡往往是由远处转移造成的。循环肿瘤细胞(circulating tumor cells，CTC)是肿瘤发生远处转移的关键环节，也是肿瘤液体活检的主要靶标之一，在肿瘤患者的预后判断、疗效预测、疗效评价以及复发转移中具有重要的临床意义。外周血中的CTC数量非常稀少，106至107个白细胞中才会有1个CTC。因此，CTC检测首先需要根据其生物学或物理学特性进行富集，然后再根据CTC的基因表达特点对富集到的细胞进行鉴定和分析。

微孔过滤法是一种基于CTC和白细胞在细胞大小和细胞刚性上的差异来富集CTC的方法。外周血中的白细胞和CTC在穿过特定孔径的微孔滤膜过程中，体积和硬度较大的CTC更容易被截留在滤膜上，而体积较小的白细胞则更多地穿过滤膜。目前已有采用微孔过滤法从人外周血中富集CTC的产品，富集后的细胞存在于样本载体(微孔滤膜样本)的滤膜上。为了能进一步对富集后的CTC进行分析，通常需要对细胞进行标记。RNA原位杂交能对细胞表达的不同种类的RNA进行标记，通过分析不同RNA的表达的情况，能够反映CTC转移潜能等生物学状态，为评估癌症患者的治疗效果，疾病进展和预后情况提供更多的判断信息。

现有技术中，通过将样本载体放在反应器的反应槽，然后反应槽内添加杂交试剂进行荧光原位杂交，杂交试剂添加在样本载体和反应槽的底壁之间时，样本载体的滤膜各处的距离与反应槽的底壁不一致，不利于杂交试剂与样本载体接触，影响原位杂交结果的准确性。

发明内容

本实用新型的目的在于提供一种反应装置，本实用新型可以保证杂交试剂与样本载体充分接触，提高原位杂交结果的准确性。

反应装置，包括：基座、样本载体、压盖；

所述基座上开设有反应槽、排气口、加排液口；所述排气口、所述加排液口分别与所述反应槽连通；

所述反应槽内设有支撑台，所述样本载体位于所述反应槽内并抵接在所述支撑台上，所述样本载体具有滤膜，所述压盖上设有压板；所述压板抵接在所述滤膜上。

进一步的是，反应装置还包括密封盖；所述密封盖与所述基座共同围合形成密封腔，所述反应槽位于所述密封腔内，所述压盖位于所述密封腔内。

进一步的是，所述密封盖上设有卡槽，所述密封盖通过所述卡槽套设在所述基座上。

进一步的是，所述基座上设有围板，所述围板的数量为多个，多个所述围板首尾依次连接围合形成定位槽，所述压盖位于所述定位槽内，所述反应槽开设在所述定位槽的底壁上，所述密封盖通过所述卡槽套设在各所述围板上，各所述围板均抵接在所述卡槽的内壁上。

进一步的是，所述卡槽的内壁上设有密封条，所述密封条夹持在所述围板和所述卡槽的内壁之间。

进一步的是，所述压盖的边缘设有抵接块，所述抵接块抵接在所述定位槽的侧壁上，所述压盖的边缘与所述定位槽的侧壁之间具有间隙。

进一步的是，所述压盖上开设有通孔，所述排气口和所述加排液口分别与所述通孔连通，所述通孔的边缘设有支撑件，所述压板安装在所述支撑件上。

进一步的是，所述压盖上设有加强筋，所述基座上设有限位筋，所述加强筋抵接在所述限位筋上。

进一步的是，所述排气口位于所述反应槽的一端，所述加排液口位于所述反应槽的另一端。

进一步的是，所述压盖上设有起盖孔。

本实用新型所提供的技术方案具有以下的优点及效果：

本实用新型的样本载体通过支撑台放置在反应槽内，样本载体与反应槽底壁之间存在间隙，添加杂交试剂先将压板压在样本载体的滤膜上，保证滤膜平齐，滤膜各处与反应槽底壁的距离相同，有利于杂交试剂进入反应槽而不会形成气泡，便于杂交试剂与滤膜上样本的充分接触。压板压在样本载体的滤膜上也有利于完成杂交之后杂交试剂吸出，不产生残留，从而保证原位杂交过程试剂之间不发生交叉反应，有利于提高杂交效果的稳定性和结果的准确性。

附图说明

图1是反应装置的结构示意图；

图2是基座和密封盖的剖视图；

图3是基座和压盖的安装示意图；

图4是图3的剖视图；

图5是基座的结构示意图；

图6是样本载体的结构示意图；

图7是压盖的结构示意图；

图8是密封盖的结构示意图；

图9是第一种起盖器的结构示意图；

图10是第二种起盖器的结构示意图；

图11是起盖器工作示意图；

图12是吸液器的结构示意图。

附图标记说明：

10、基座；11、反应槽；12、排气口；13、加排液口；14、支撑台；15、围板；16、定位槽；17、限位筋；

20、压盖；21、压板；22、通孔；23、支撑件；24、加强筋；25、起盖孔；26、抵接块；

30、密封盖；31、卡槽；32、密封条；

40、样本载体；41、滤膜；42、固定环；

50、起盖器；51、手柄；52、拉勾；

60、吸液器；61、吸盘；62、吸管；

70、密封腔。

具体实施方式

下面结合附图和实施例，对本实用新型的具体实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本实用新型，但不用来限制本实用新型的范围。

在本实用新型的描述中，需要理解的是，术语“中心”、“纵向”、“横向”、“长度”、“宽度”、“厚度”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”“内”、“外”、“顺时针”、“逆时针”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本实用新型和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本实用新型的限制。

在本实用新型的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”、“连通”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本实用新型中的具体含义。

除非特别说明或另有定义，在实用新型的描述中，需要理解的是，实用新型中采用术语“第一”、“第二”等来描述各种信息，但这些信息不应限于这些术语，这些术语仅用来将同一类型的信息彼此区分开。例如，在不脱离实用新型范围的情况下，“第一”信息也可以被称为“第二”信息，类似的，“第二”信息也可以被称为“第一”信息。

除非特别说明或另有定义，本实用新型所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。

为叙述方便，除另有说明外，下文所说的上下方向与图1本身的上下方向一致。

如图1至图8所示，反应装置包括基座10、样本载体40、压盖20；压盖20放置在基座10上方，样本载体40用于放置细胞样品。

基座10上开设有反应槽11、排气口12、加排液口13；排气口12、加排液口13分别与反应槽11连通；排气口12用于排气，加排液口13可用于向反应槽11添加杂交试剂，也可以将反应槽11内完成反应的杂交试剂吸走。

反应槽11内设有支撑台14，支撑台14位于反应槽11的侧壁上。样本载体40具有固定环42和安装在固定环42内的滤膜41，样品细胞放在滤膜41上。样本载体40位于反应槽11内并抵接在支撑台14上，样本载体40放在反应槽11内的时候，滤膜41与反应槽11之间形成用于容纳杂交试剂的试剂槽。若无压板21压平滤膜41，由于无法控制滤膜41的起伏状态，所以在滤膜41上凸的区域容易产生气泡。

本申请的压盖20上设有压板21。压板21呈圆盘状并从上往下抵接在滤膜41上。压盖20盖在基座10上后，压板21压住滤膜41，向下拉伸滤膜41，使其平整，同时还能固定样本载体40。使用时，在压盖20的重力的作用下，压板21向下挤压滤膜41使得滤膜41与反应槽11的底壁平行，滤膜41各处与反应槽11的底壁之间的距离均相同，既能避免试剂进入反应槽11时形成气泡而影响试剂与样本的接触，也能避免试剂吸出时产生残留，从而保证原位杂交过程不同试剂之间不发生交叉反应，有利于提高杂交效果的稳定性，进而提高提高杂交结果的准确性。

优选的，反应槽11为圆形槽，反应槽11底部的圆周直径为13mm，反应槽11顶部的圆周直径为13.6mm。支撑台14有两个并均呈月牙状，高度为0.5mm。两个支撑台14对称设置在反应槽11相对的侧壁上。反应槽11底部直径尺寸比样本载体40的外径尺寸大0.2至0.3mm，反应槽11顶部直径尺寸比样本载体40的直径尺寸大0.4至0.6mm，方便样本载体40放入和取出。压板21的直径是6mm。

具体的，在一些实施例中，基座10外型为长方体，反应槽11有多个，多个反应槽11阵列布设，反应槽11按照水平横向和水平纵向等距排列。压板21、样本载体40也有多个，多个压板21、多个样本载体40、多个反应槽11一一对应。

具体的，在一些实施例中，反应装置还包括密封盖30；密封盖30安装在基座10上，密封盖30与基座10共同围合形成密封腔70。反应槽11位于密封腔70内，压盖20位于密封腔70内。密封盖30能有效降低反应槽11的试剂蒸发，使试剂保持与样本的接触，避免因试剂大量蒸发使得试剂不能与滤膜41接触而形成了空泡。

具体的，在一些实施例中，密封盖30上设有卡槽31，密封盖30通过卡槽31套设在基座10上。基座10设有台阶面，密封盖30抵接在台阶面上。

具体的，在一些实施例中，基座10上设有围板15，围板15的数量为多个，多个围板15首尾依次连接围合形成定位槽16，压盖20位于定位槽16内，实现压盖20的限位，便于快速放置压盖20。反应槽11开设在定位槽16的底壁上，密封盖30通过卡槽31套设在各围板15上，各围板15均抵接在卡槽31的内壁上，各围板15可以防止密封盖30在水平方向上的晃动。

具体的，在一些实施例中，卡槽31的内壁上设有密封条32，密封条32夹持在围板15和卡槽31的内壁之间。密封条32为弹性密封材料，用于密闭密封盖30与基座10之间的缝隙，基座10上的各围板15为一体成型的连续结构，有利于与密封盖30配合，提高密封腔70的密封性能和降低试剂蒸发。

具体的，在一些实施例中，压盖20呈方形压盖20的边缘设有抵接块26，抵接块26有多个，多个抵接块26沿着压盖20边缘间隔分布并均抵接在定位槽16的侧壁上，压盖20的边缘与定位槽16的侧壁之间具有间隙，间隙便于压盖20从定位槽16取出。抵接块26用于限制压盖20盖在基座10后的左右位置，增加与基座10顶部边缘的摩擦力，使压盖20维持向下的压力。

具体的，在一些实施例中，压盖20上开设有通孔22，通孔22的位置和数量均和基座10上的反应孔的位置和数量相对应。排气口12和加排液口13分别与通孔22连通，通孔22的边缘设有支撑件23，压板21安装在支撑件23上。每个通孔22的边缘处延伸出一个支撑件23，支撑件23不与反应槽11的内壁接触，压板21位于支撑件23的末端，压板21的直径是滤膜41的直径的0.7至0.9倍。操作人员可以通过通孔22伸到加排液口13对反应槽11进行试剂的添加和吸出。

具体的，在一些实施例中，压盖20上设有加强筋24，加强筋24能够加强压盖20的强度。基座10上设有限位筋17，加强筋24抵接在限位筋17上。各个反应槽11之间的空隙位置设置有多条限位筋17，与压盖20上的加强筋24配合可限制压板21与反应槽11底部之间的最近距离，避免压板21压穿滤膜41。

具体的，在一些实施例中，排气口12位于反应槽11的一端，加排液口13位于反应槽11的另一端，使得添加试剂或者吸出试剂时不影响排气口12的通气，保证反应槽11的气压平衡，防止添加试剂或者吸出试剂时产生气泡影响反应的效果。加排液口13大于排气口12。

如图9至图11所示，具体的，在一些实施例中，压盖20上设有起盖孔25，完成试剂反应之后，起盖孔25便于压盖20从基座10的定位槽16取出。起盖孔25至少有两个，优选的，起盖孔25有两个并间隔布设。起盖孔25为沿着V形轨迹延伸的通道。

反应装置配备有起盖器50，起盖器50包括手柄51和安装在手柄51上拉勾52；拉勾52至少有一个，拉勾52可以勾在起盖孔25内，通过拉动手柄51可以拉动压盖20。

如图3至图5所示，具体的，在一些实施例中，反应装置配备有吸液器60。吸液器60包括吸盘61和与吸盘61连通的吸管62。吸出反应槽11内的试剂时，吸盘61从加排液口13深入反应槽11并贴合在样本载体40的边缘上，吸盘61与反应槽11的内壁形成一个封闭结构，能有效抽吸反应槽11内的试剂，避免残留。最后通过泵体连接吸管62将反应完的试剂吸出，吸管62也可以连接实验室常用吸头或吸液针上。吸液器60采用具有弹性形变的材料制作，下半部分为吸盘61结构，可随物体表面形状发生形变，更好地贴合物体表面。压板21压盖20能抚平滤膜41，有利于试剂从反应槽11排出。无压板21时由于无法控制滤膜41的起伏状态，吸走试剂时在滤膜41下凹的区域容易发生试剂残留。

本申请的使用方法如下：

放入样本：

a)将样本载体放入基座的反应槽内，样本载体的滤膜附着有细胞的一面朝向反应槽的底部。

b)盖上压盖，压板压紧滤膜。

杂交反应：

a)使用移液器等工具穿过通孔并从加排液口向反应槽加入杂交试剂，试剂流入反应槽内，并与细胞充分接触。

b)盖上密封盖，将反应装置放入控温设备内，实现样本与试剂在特定温度下的杂交反应。

洗涤样本：

a)打开密封盖，将吸液器插入加排液口并从样本载体边缘处吸走反应槽内液体。

b)使用移液器等工具向加/排液口加入洗涤试剂，洗涤试剂流入反应槽内，并与细胞充分接触，将吸液器插入加排液口并从样本载体边缘处吸走反应腔内液体，实现对样本的洗涤。

c)加入洗涤试剂也可以盖上密封盖，将反应装置放入控温设备内，实现特定温度下的洗涤。

取出样本

a)用起盖器伸入压盖的起盖孔，勾起压盖。

b)用镊子取出样本载体。

c)使用显微镜观察对样本进行观察。

其中，杂交反应、洗涤样本、取出样本的具体步骤如下：

(一)将样本载体放入基座内，盖上压盖

(二)向加排液口加入100uL 100％乙醇，静置2min。

(三)用连接有吸液器的1mL吸头从加排液口吸走100％乙醇。

(四)向加排液口加入100uL 70％乙醇，静置2min。

(五)用连接有吸液器的1mL吸头从加排液口吸走70％乙醇。

(六)向加排液口加入100uL 50％乙醇，静置2min。

(七)用连接有吸液器的1mL吸头从加排液口吸走50％乙醇。

(八)向加排液口加入200uL PBS缓冲液，静置2min。

(九)用连接有吸液器的1mL吸头从加排液口吸走PBS缓冲液。

(十)向加排液口加入100uL 1mg/mL胃蛋白酶，静置10min。

(十一)用连接有吸液器的1mL吸头从加排液口吸走胃蛋白酶。

(十二)向加排液口加入200uL PBS缓冲液，静置2min。

(十三)用连接有吸液器的1mL吸头从加排液口吸走PBS缓冲液。

(十四)向加排液口加入100uL特异性杂交探针，盖上密封盖，将反应装置放置于孵育箱内，40℃孵育3h。

(十五)取出反应装置，打开密封盖，用连接有吸液器的1mL吸头从加排液口吸走杂交探针。

(十六)向加排液口加入200uL探针洗涤液，静置2min。

(十七)用连接有吸液器的1mL吸头从加排液口吸走探针洗涤液。

(十八)十六至十七重复三次。

(十九)向加排液口加入100uL第一信号放大探针，盖上密封盖，将反应装置放置于孵育箱内，40℃孵育0.5h。

(二十)取出反应装置，打开密封盖，用连接有吸液器的1mL吸头从加排液口吸走杂交探针。

(二十一)向加排液口加入200uL探针洗涤液，静置2min。

(二十二)用连接有吸液器的1mL吸头从加排液口吸走探针洗涤液。

(二十三)二十二至二十三重复三次。

(二十四)向加排液口加入100uL第二信号放大探针，盖上密封盖，将反应装置放置于孵育箱内，40℃孵育0.5h。

(二十五)取出反应装置，打开密封盖，用连接有吸液器的1mL吸头从加排液口吸走杂交探针。

(二十六)向加排液口加入200uL探针洗涤液，静置2min。

(二十七)用连接有吸液器的1mL吸头从加排液口吸走探针洗涤液。

(二十八)步骤二十七至二十八重复三次。

(二十九)向加排液口加入100uL显色探针，盖上密封盖，将反应装置放置于孵育箱内，40℃孵育0.5h。

(三十)取出反应装置，打开密封盖，用连接有吸液器的1mL吸头从加排液口吸走杂交探针。

(三十一)向加排液口加入200uL探针洗涤液，静置2min。

(三十二)用连接有吸液器的1mL吸头从加排液口吸走探针洗涤液。

(三十三)三十二至三十三重复三次。

(三十四)取出压盖，取出样本载体，置于载玻片上，向滤膜加入DAPI染色液，用盖玻片盖在滤膜上，置于荧光显微镜下观察染色结果。

以上实施例也并非是基于本实用新型的穷尽性列举，在此之外，还可以存在多个未列出的其他实施方式。在不违反本实用新型构思的基础上所作的任何替换与改进，均属本实用新型的保护范围。

Claims (10)

1.反应装置，其特征在于，包括：基座、样本载体、压盖；

所述基座上开设有反应槽、排气口、加排液口；所述排气口、所述加排液口分别与所述反应槽连通；

所述反应槽内设有支撑台，所述样本载体位于所述反应槽内并抵接在所述支撑台上，所述样本载体具有滤膜，所述压盖上设有压板；所述压板抵接在所述滤膜上。

2.根据权利要求1所述的反应装置，其特征在于，还包括密封盖；所述密封盖与所述基座共同围合形成密封腔，所述反应槽位于所述密封腔内，所述压盖位于所述密封腔内。

3.根据权利要求2所述的反应装置，其特征在于，所述密封盖上设有卡槽，所述密封盖通过所述卡槽套设在所述基座上。

4.根据权利要求3所述的反应装置，其特征在于，所述基座上设有围板，所述围板的数量为多个，多个所述围板首尾依次连接围合形成定位槽，所述压盖位于所述定位槽内，所述反应槽开设在所述定位槽的底壁上，所述密封盖通过所述卡槽套设在各所述围板上，各所述围板均抵接在所述卡槽的内壁上。

5.根据权利要求4所述的反应装置，其特征在于，所述卡槽的内壁上设有密封条，所述密封条夹持在所述围板和所述卡槽的内壁之间。

6.根据权利要求4所述的反应装置，其特征在于，所述压盖的边缘设有抵接块，所述抵接块抵接在所述定位槽的侧壁上，所述压盖的边缘与所述定位槽的侧壁之间具有间隙。

7.根据权利要求1至6任一项所述的反应装置，其特征在于，所述压盖上开设有通孔，所述排气口和所述加排液口分别与所述通孔连通，所述通孔的边缘设有支撑件，所述压板安装在所述支撑件上。

8.根据权利要求1至6任一项所述的反应装置，其特征在于，所述压盖上设有加强筋，所述基座上设有限位筋，所述加强筋抵接在所述限位筋上。

9.根据权利要求1至6任一项所述的反应装置，其特征在于，所述排气口位于所述反应槽的一端，所述加排液口位于所述反应槽的另一端。

10.根据权利要求1至6任一项所述的反应装置，其特征在于，所述压盖上设有起盖孔。

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