CN213240174U - 一种用于检测细胞因子IFN-γ的酶联免疫检测板及试剂盒 - Google Patents

Abstract

本实用新型公开了一种用于检测细胞因子IFN‑γ的酶联免疫检测板及试剂盒，本实用新型的酶联免疫检测板包括连接的酶标板和稀释板；所述酶标板上设有矩阵分布的检测孔，所述检测孔内包被有IFN‑γ抗体；所述稀释板上设有试剂槽和矩阵分布的稀释槽，所述试剂槽用于盛放稀释液，所述稀释槽用于进行待测样品和IFN‑γ标准品的稀释。因为该检测板将酶标板和稀释板集成于一起，检测员只需要在该检测板上进行稀释与检测的实验操作，而不用先在离心管的工位进行稀释操作，再在酶标板进行检测操作，本实用新型实验操作起来方便有条理，使用简便，出错率低，前期准备工作更加的简单。

Description

一种用于检测细胞因子IFN-γ的酶联免疫检测板及试剂盒

技术领域

本实用新型涉及生物学检测领域，特别涉及一种用于检测细胞因子IFN-γ的酶联免疫检测板及试剂盒。

背景技术

细胞因子(cytokine，CK)是由多种组织合成、分泌的小分子多肽或糖蛋白，能介导细胞间的相互作用，具有多种生物学功能，将机体感染微生物后引起体液中多种细胞因子如TNF-α、IL-1、IFN-γ、IL-12、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、MCP-1和IL-8等迅速大量产生的现象称为“细胞因子风暴”(cytokine storm)，引发的一系列发热、低血压、缺氧，以及出现与血清中某些细胞因子水平显着升高有关的神经系统症状免疫应答反应称之为“细胞因子释放综合征”(Cytokine Release Syndrome，CRS)。

近年来，随着现代基因工程和细胞工程技术的快速发展，免疫学在临床医学中得到广泛应用，涌现出众多新型的免疫治疗技术，包括癌症免疫细胞治疗。由于机体对细胞产品的应答反应，患者在细胞治疗过程中也具有发生CRS的风险。因此，对细胞因子水平的监测是免疫细胞治疗过程中的重要环节，细胞因子风暴的及时监控，直接决定着用药时间和药物选择，影响着治疗效果。在临床上，一般通过检查TNF-α、IFN-γ(IFNG)、IFN-γ、IL-10、GM-CSF(CSF2)等细胞因子的上升指标，来检测细胞因子风暴的严重程度。其中，IFN-γ具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调控的作用，参与的信号通路可调控多个基因的表达水平，产生多种的细胞反应，如促进NK细胞活性、促进抗原呈递和提高巨噬细胞溶酶体活性等。因此在免疫细胞治疗过程中，中IFN-γ水平的监测显得尤其重要。

现有的用于检测细胞因子IFN-γ的ELISA试剂盒通常包括96孔酶标板和用于盛装试剂的试剂瓶，其中所述试剂瓶包括装有标准品的试剂瓶、装有稀释液的试剂瓶、装有酶标二抗的试剂瓶、装有显色液的试剂瓶、装有终止液的试剂瓶和装有洗涤液的试剂瓶。在ELISA检测时，需要向96孔酶标板中加入不同组别、不同浓度的待测样品，以及不同浓度的标准品。常规的操作是用离心管将标准品进行梯度稀释，同时根据患者情况将待检样品进行一定倍数的稀释，然后将各稀释液从离心管中加入到96孔酶标板中对应的检测孔。

发明人在实现本申请的过程中，发现上述技术至少存在以下问题：在进行上述的ELISA检测前，需要进行前期的试剂耗材、实验设备仪器的准备，同时还需要在离心管中对样品和标准品进行稀释，最终将稀释好的稀释液加入到对应的每孔检测孔中，且为了实验数据的准确性，通常会设置平行孔。常规操作的过程复杂，出错率高。

实用新型内容

本实用新型的主要目的是提出一种用于检测细胞因子IFN-γ的酶联免疫检测板及试剂盒，旨在解决现有实验常规ELISA检测存在的操作复杂，出错率高，前期准备工作繁琐的技术问题。

为实现上述目的，本实用新型提出的一种用于检测细胞因子IFN-γ的酶联免疫检测板，所述酶联免疫检测板包括连接的酶标板和稀释板；所述酶标板上设有矩阵分布的检测孔，所述检测孔内包被有IFN-γ抗体；所述稀释板上设有试剂槽和矩阵分布的稀释槽，所述试剂槽用于盛放稀释液，所述稀释槽用于进行待测样品和IFN-γ标准品的稀释。

可选地，所述酶标板和稀释板可拆卸连接。

可选地，所述酶标板上设有矩阵分布的6列8行共48个检测孔，所述稀释板设有矩阵分布的2列8行共16个稀释槽，所述试剂槽的数量为1个。

可选地，所述酶联免疫检测板还包括底座和滑板；所述底座包括矩形板体，所述矩形板体四周边上设有四个边框，四个边框和矩形板体围成一个方形槽；所述矩形板体两侧的边框上设有两个滑槽；所述滑板的两端分别卡设在对应的滑槽中与其滑动连接；所述滑板上端面设有加样孔，每一所述加样孔对应一个所述检测孔，所述加样孔一侧设置有数字指示标。

可选地，所述滑板包括横向板和两块竖向板，所述横向板两侧下端均固定有一竖向板，所述竖向板内侧设有与所述滑槽相匹配的滑块，所述滑块与滑槽滑动连接。

本实用新型还提出一种用于检测细胞因子IFN-γ的酶联免疫试剂盒，包括盒体，所述盒体内设有上述酶联免疫检测板。

可选地，所述盒体内还设有试剂瓶，其中所述试剂瓶包括装有标准品的试剂瓶、装有稀释液的试剂瓶、装有酶标二抗的试剂瓶、装有显色液的试剂瓶、装有终止液的试剂瓶和装有洗涤液的试剂瓶。

可选地，所述试剂盒还包括用于闭合盒体顶部开口的盒盖。

可选地，所述的盒体和盒盖的材料为纸质或硬质塑料。

本实用新型具有如下有益效果：

本实用新型的酶联免疫检测板包括连接的酶标板和稀释板；所述酶标板上设有矩阵分布的检测孔，所述检测孔内包被有IFN-γ抗体；所述稀释板上设有试剂槽和矩阵分布的稀释槽，所述试剂槽用于盛放稀释液，所述稀释槽用于进行待测样品和IFN-γ标准品的稀释。因为该检测板将酶标板和稀释板集成于一起，检测员只需要在该检测板上进行稀释与检测的实验操作，而不用先在离心管的工位进行稀释操作，再在酶标板进行检测操作，本实用新型实验操作起来方便有条理，使用简便，出错率低，前期准备工作更加的简单。

附图说明

为了更清楚地说明本实用新型实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本实用新型的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图示出的结构获得其他的附图。

图1为本实用新型用于检测细胞因子IFN-γ的酶联免疫检测板一实施例的结构示意图；

图2为本实用新型用于检测细胞因子IFN-γ的酶联免疫检测板另一实施例的结构示意图。

附图标号说明：

具体实施方式

下面将结合本实用新型实施例中的附图，对本实用新型实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本实用新型的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本实用新型中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本实用新型保护的范围。

需要说明，若本实用新型实施例中有涉及方向性指示(诸如上、下、左、右、前、后……)，则该方向性指示仅用于解释在某一特定姿态(如附图所示)下各部件之间的相对位置关系、运动情况等，如果该特定姿态发生改变时，则该方向性指示也相应地随之改变。

另外，若本实用新型实施例中有涉及“第一”、“第二”等的描述，则该“第一”、“第二”等的描述仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示其相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括至少一个该特征。另外，若全文中出现的“和/或”的含义为，包括三个并列的方案，以“A和/或B”为例，包括A方案，或B方案，或A和B同时满足的方案。另外，各个实施例之间的技术方案可以相互结合，但是必须是以本领域普通技术人员能够实现为基础，当技术方案的结合出现相互矛盾或无法实现时应当认为这种技术方案的结合不存在，也不在本实用新型要求的保护范围之内。

正如背景技术所描述的，现有技术中存在在进行上述的ELISA检测前，需要进行前期的试剂耗材、实验设备仪器的准备，同时还需要在离心管中对样品和标准品进行稀释，最终将稀释好的稀释液加入到对应的每孔检测孔中，且为了实验数据的准确性，通常会设置平行孔。常规操作的过程复杂，出错率高的技术问题。为了解决上述技术问题，本实用新型提供了一种用于检测细胞因子IFN-γ的酶联免疫检测板及试剂盒。

参阅图1，一种用于检测细胞因子IFN-γ的酶联免疫检测板，所述酶联免疫检测板包括连接的酶标板10和稀释板20；所述酶标板10上设有矩阵分布的检测孔30，所述检测孔30内包被有IFN-γ抗体；所述稀释板20上设有试剂槽40和矩阵分布的稀释槽50，所述试剂槽40用于盛放稀释液，所述稀释槽50用于进行待测样品和IFN-γ标准品的稀释。

本实用新型的酶联免疫检测板将酶标板10和稀释板20集成于一起，检测员只需要在该检测板上进行稀释与检测的实验操作，而不用先在离心管的工位进行稀释操作，再在酶标板10进行检测操作，本实用新型实验操作起来方便有条理，使用简便，出错率低，前期准备工作更加的简单。

更具体地，所述检测板从左至右被分为酶标板10和稀释板20。

本申请实施例中，对所述酶标板10和稀释板20的连接方式不作特别限定，可以采用本领域技术人员熟知的方式进行，只要使得酶标板10和稀释板20连接为一体即可。更优选地，所述酶标板10和稀释板20可拆卸连接。

本申请实施例中，对所述检测孔30和稀释槽50的数量不作具体限定，本领域技术人员可以根据实际需要进行选择。作为优选，所述酶标板上设有矩阵分布的6列8行共48个检测孔30，所述稀释板20设有矩阵分布的2列8行共16个稀释槽50。

本申请实施例中，所述试剂槽40的数量优选但不限定为1个。通过设置试剂槽40盛放稀释液，便于在稀释槽50中对待测样品和IFN-γ标准品进行稀释，简化操作。

为了便于操作，降低加样过程中漏加、错加现象，所述检测孔30位置与稀释槽50的位置对应设置。

传统的酶联免疫试剂盒的酶标板上的检测孔30与检测孔30之间没有明显的界限，在加入无色试剂的情况下难以辨认实验情况，会导致出现错加或者漏加的情况而影响实验的准确性，更甚者会导致实验的失败。

为了解决上述技术问题，本实用新型进行进一步改进。具体地，参阅图2，所述检测板包括底座和滑板60；所述底座包括矩形板体，所述矩形板体四周边上设有四个边框，四个边框和矩形板体围成一个方形槽；所述矩形板体两侧的边框上设有两个滑槽；所述滑板60的两端分别卡设在对应的滑槽中与其滑动连接；所述滑板60上端面设有加样孔61，每一所述加样孔61对应一个所述检测孔30，所述加样孔61一侧设置有数字指示标62。

更具体地，所述滑板60包括横向板和两块竖向板，所述横向板两侧下端均固定有一竖向板，所述竖向板内侧设有与所述滑槽相匹配的滑块，所述滑块与滑槽滑动连接。

可以理解，所述滑板60上设置一组与加样孔61大小间距对应的加样孔61。

所述加样孔61的尺寸可以按照现有的加样吸头尺寸设计，以保证加样吸头只能伸入到各加样孔61高度的2/3处进行加样，能够使各孔中试样的微量加入更加快速、准确。

本申请实施例中，所述滑板60与所述底座为可拆卸连接，加完样将滑板60从底座上移除。

使用时，通过所述滑板上的加样孔61向检测孔30中加样，滑板与滑槽滑动连接，可自由滑动，加一排向前滑动一排，同时滑板上设置有数字指示标62，便于加样时区分每一个加样孔61，以免加错。本申请大大降低了加样过程中漏加、错加现象，减少加样过程的出错几率，提高了试验的准确性。并且装置中滑板加样后可取下，因此不影响酶标仪机器检测，结构简单。

本申请实施例中，所述酶标板10和稀释板20与所述底座为可拆卸连接。通过这种设置，可以将使用过的酶标板10和稀释板20从底座上移除，更换新的酶标板和稀释板用于测试。

本实用新型提供的一种用于检测细胞因子IFN-γ的酶联免疫试剂盒，包括盒体，所述盒体内设有上述酶联免疫检测板。

进一步地，所述盒体内还设有试剂瓶。本申请对所述试剂瓶没有特别限制，采用常规检测细胞因子IFN-γ的酶联免疫试剂盒的试剂瓶即可，作为优选，所述试剂瓶包括装有IFN-γ标准品的试剂瓶、装有稀释液的试剂瓶、装有酶标二抗的试剂瓶、装有显色液的试剂瓶、装有终止液的试剂瓶和装有洗涤液的试剂瓶。

进一步地，所述试剂盒还包括用于闭合盒体顶部开口的盒盖。

本申请实施例中，所述盒体和所述盒盖是相连接的或相互独立的；作为优选，所述盒盖盖在所述盒体上，用磁扣或粘胶连结。

本申请实施例中，所述的盒体和盒盖的材料为纸质或硬质塑料。

本试剂盒应用双抗体夹心法测定样品中细胞因子IFN-γ水平。向包被有IFN-γ抗体的检测孔30中加入样品，样品中IFN-γ与IFN-γ抗体结合，形成抗体-抗原复合物，经过彻底洗涤后，再加入酶标二抗，最后形成：抗体-抗原-酶标二抗的结合物。经过再次彻底洗涤后，加入显色液进行显色。颜色的深浅和样品中的IFN-γ呈正比。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(A值)，通过标准曲线计算样品中IFN-γ浓度。

具体使用方法为：(1)将装有稀释液的试剂瓶中的稀释液倒入稀释板20的试剂槽40中，在稀释槽50中分别将待测样品和IFN-γ标准品用稀释液稀释到合适浓度；(2)将稀释好的待测样品和IFN-γ标准品加入到相应的检测孔30中；(3)孵育；(4)洗涤；(5)将酶标二抗加入到相应的检测孔30中；(6)孵育；(7)洗涤；(8)底物温育：将显色液加入到相应的检测孔30中，室温避光温育；(9)滴加终止液至相应的检测孔30中；(10)在450nm波长处测量吸光度(A)值。

以IFN-γ标准品的浓度为横坐标，IFN-γ标准品对应A值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的A值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数，即为待测样品IFN-γ的实际浓度。

以上所述仅为本实用新型的可选实施例，并非因此限制本实用新型的专利范围，凡是在本实用新型的发明构思下，利用本实用新型说明书及附图内容所作的等效结构变换，或直接/间接运用在其他相关的技术领域均包括在本实用新型的专利保护范围内。

Claims (9)

1.一种用于检测细胞因子IFN-γ的酶联免疫检测板，其特征在于，所述酶联免疫检测板包括连接的酶标板和稀释板；所述酶标板上设有矩阵分布的检测孔，所述检测孔内包被有IFN-γ抗体；所述稀释板上设有试剂槽和矩阵分布的稀释槽，所述试剂槽用于盛放稀释液，所述稀释槽用于进行待测样品和IFN-γ标准品的稀释。

2.如权利要求1所述的用于检测细胞因子IFN-γ的酶联免疫检测板，其特征在于，所述酶标板和稀释板可拆卸连接。

3.如权利要求1所述的用于检测细胞因子IFN-γ的酶联免疫检测板，其特征在于，所述酶标板上设有矩阵分布的6列8行共48个检测孔，所述稀释板设有矩阵分布的2列8行共16个稀释槽，所述试剂槽的数量为1个。

4.如权利要求1所述的用于检测细胞因子IFN-γ的酶联免疫检测板，其特征在于，所述酶联免疫检测板还包括底座和滑板；所述底座包括矩形板体，所述矩形板体四周边上设有四个边框，四个边框和矩形板体围成一个方形槽；所述矩形板体两侧的边框上设有两个滑槽；所述滑板的两端分别卡设在对应的滑槽中与其滑动连接；所述滑板上端面设有加样孔，每一所述加样孔对应一个所述检测孔，所述加样孔一侧设置有数字指示标。

5.如权利要求4所述的用于检测细胞因子IFN-γ的酶联免疫检测板，其特征在于，所述滑板包括横向板和两块竖向板，所述横向板两侧下端均固定有一竖向板，所述竖向板内侧设有与所述滑槽相匹配的滑块，所述滑块与滑槽滑动连接。

6.一种用于检测细胞因子IFN-γ的酶联免疫试剂盒，包括盒体，其特征在于，所述盒体内设有权利要求1-5任一项所述的酶联免疫检测板。

7.如权利要求6所述的用于检测细胞因子IFN-γ的酶联免疫试剂盒，其特征在于，所述盒体内还设有试剂瓶，其中所述试剂瓶包括装有标准品的试剂瓶、装有稀释液的试剂瓶、装有酶标二抗的试剂瓶、装有显色液的试剂瓶、装有终止液的试剂瓶和装有洗涤液的试剂瓶。

8.如权利要求6所述的用于检测细胞因子IFN-γ的酶联免疫试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括用于闭合所述盒体顶部开口的盒盖。

9.如权利要求8所述的用于检测细胞因子IFN-γ的酶联免疫试剂盒，其特征在于，所述的盒体和盒盖的材料为纸质或硬质塑料。

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