CN211079184U - 一种结合了超声和电流脉冲的转染装置 - Google Patents
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Abstract
本实用新型公开了一种结合了超声和电流脉冲的转染装置，包括绝缘腔体，绝缘腔体包括腔本体和盖合在腔本体上的上盖，腔本体内壁相对两侧各连接有一电极，腔本体内部还设有超声波探头，超声波探头连接有第一导线，第一导线贯穿上盖，上盖底部两侧各设有一电极触点，两个电极触点与两个电极一一对应并接触，电极触点还连接有第二导线，第二导线贯穿上盖。本实用新型结合了超声波和电流脉冲对细胞进行转染，其优势在于利用超声波的空化作用在细胞膜上形成孔洞或缺陷，大大降低了细胞在电场中的穿孔难度，弱化了电场分布对细胞穿孔的影响，同时降低了有效电场强度，从而大幅度地提高了细胞的转染效率和成活率。
Description
技术领域
本实用新型涉及细胞实验技术领域，尤其涉及一种结合了超声和电流脉冲的转染装置。
背景技术
转染是一种将外源性物质导入细胞中，检测细胞的反应或是对细胞进行改造，从而深入了解细胞的生物特性的方法。转染无论在基础生命科学研究领域，例如对细胞信号通路的研究，还是在制药领域，例如利用细胞表达并生产抗体药，以及在临床医疗领域，例如CAR-T、干细胞治疗等，都是必不可少的工具。
转染大致可以分为试剂转染，例如磷酸钙法、脂质体法等；病毒感染，例如腺病毒、慢病毒感染等；以及物理转染，例如电穿孔转染、微管注射等。试剂转染依赖于细胞对试剂与质粒复合物的摄入，常常伴随细胞毒性。并且对于原代细胞或者吞噬能力差的细胞，转染效率很低。病毒感染利用病毒的机制将基因片段嵌入到宿主细胞中，完成转染。具有很高的转染效率，但是受到细胞种类和质粒片段大小的限制，同时，对操作和安全性的要求比较高，实验步骤繁琐，周期长。此外，由于改变了宿主本身的基因，在临床应用上存在很大的风险。物理转染的方法常常需要昂贵的仪器和专业的操作人员，并且效率很低。其中电穿孔转染操作相对简单，效率较高，因此在对于难转细胞，例如神经元细胞、胚胎干细胞、血液细胞等，应用比较广泛。电穿孔转染法是在外加电场的作用下，在细胞膜上产生暂时的孔洞，从而让外源性物质，例如质粒，通过电泳的方式进入细胞的方法。传统的电穿孔转染法，由于电场分布的限制，只能在最优区域获得较好的转染效果，而在其它区域，要么转染率低，要么细胞死亡率高。因此，整体的转染率不高。同时，由于大量细胞死亡，对样品中细胞数量的要求也比较高。
发明内容
为了解决上述背景技术中所提到的问题，本实用新型提供了一种结合了超声和电流脉冲的转染装置，能够利用超声波的空化作用在细胞膜上制造孔洞，同时结合正负电流脉冲将质粒导入细胞。
一种结合了超声和电流脉冲的转染装置，包括绝缘容器，所述绝缘容器包括顶部为敞开式的绝缘容器本体、用于封闭绝缘容器本体的绝缘盖，所述绝缘容器本体内壁相对两侧各连接有一电极，所述绝缘容器本体内部还设有超声波探头，所述超声波探头连接有第一导线，所述第一导线贯穿绝缘盖伸到绝缘容器外部，所述绝缘盖底部两侧各设有一电极触点，两个所述电极触点与两个所述电极一一对应并接触，所述电极触点还连接有第二导线，所述第二导线贯穿绝缘盖伸到绝缘容器外部。
进一步地，所述电极为惰性电极。
进一步地，所述惰性电极为石墨电极或惰性金属电极。
进一步地，所述惰性金属电极为铂电极或金电极。
进一步地，还包括超声波发生器，所述超声波发生器与第一导线连接。
进一步地，还包括双向脉冲电源，所述双向脉冲电源分别与两个第二导线连接。
进一步地，所述绝缘容器为长方体结构，所述绝缘容器的容积为0.15-1.2ml。
进一步地，所述绝缘盖包括绝缘盖本体，所述绝缘盖本体底部设有与绝缘容器本体相配合的凸块，所述电极触点设在凸块的底部两侧。
进一步地，所述超声波探头位于绝缘容器本体内的中部。
本实用新型的有益效果是：
本实用新型结合了超声波和电流脉冲对细胞进行转染，利用超声波的空化作用在细胞膜上形成孔洞或缺陷，大大降低了细胞在电场中的穿孔难度，弱化了电场分布对细胞穿孔的影响，同时降低了有效电场强度，从而大幅度地提高了细胞的转染效率和成活率。
附图说明
图1为本实用新型的结构示意图。
其中，1为绝缘容器本体，2为电极，3为超声波探头，4为第一导线，5为电极触点，6为第二导线，7为绝缘盖本体，8为凸块。
具体实施方式
下面结合附图，通过具体实施例对本实用新型做进一步详细说明。
如图所示的一种结合了超声和电流脉冲的转染装置，包括绝缘容器，绝缘容器为长方体结构，绝缘容器的容积为0.15-1.2ml。绝缘容器包括顶部为敞开式的绝缘容器本体1、用于封闭绝缘容器本体1的绝缘盖，绝缘容器本体1内壁相对两侧各连接有一电极2，绝缘容器本体1内部还设有超声波探头3，超声波探头3位于绝缘容器本体1内的中部。超声波探头3 连接有第一导线4，第一导线4贯穿绝缘盖伸到绝缘容器外部，绝缘盖底部两侧各设有一电极触点5，两个电极触点5与两个电极2一一对应并接触，电极触点5还连接有第二导线6，第二导线6贯穿绝缘盖伸到绝缘容器外部。
电极2为惰性电极。惰性电极为石墨电极或惰性金属电极。优选地，惰性金属电极为铂电极或金电极。
另外，本实用新型还包括超声波发生器(附图未示出)、双向脉冲电源(附图未示出)，超声波发生器与第一导线4连接，双向脉冲电源分别与两个第二导线6连接。
绝缘盖包括绝缘盖本体7，绝缘盖本体7底部设有与绝缘容器本体7相配合的凸块8，电极触点5设在凸块8的底部两侧。
本实用新型在具体实施时：将细胞加入电转缓冲液，使细胞浓度为106-108个/ml，然后加入需要电转染转入细胞的质粒，质粒浓度为10-100μg/ml，得到细胞和待转物悬液，细胞和待转物悬液的体积为0.1-1ml。打开绝缘盖，将细胞和待转物悬液通过移液枪注入到绝缘容器本体1内，盖上绝缘盖，电极触点5与电极2接触。通过超声波探头3输出超声波，频率为 20KHz-3MHz，超声时间为5-20s；在输出超声波的同时，通过双向脉冲电源输出正向电流脉冲，电压为20-200V，持续时间为2-20ms，输出电压暂停0.5-5ms后，输出反向电流脉冲，电压为20-200V，持续时间为2-20ms，上述正向电流脉冲和反向电流脉冲重复1-5次，每次间隔均为0.5-5ms。
以上所述仅为本实用新型的优选实施例而已，并不用于限制本实用新型，尽管参照前述实施例对本实用新型进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本实用新型的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本实用新型的保护范围之内。
Claims (9)
1.一种结合了超声和电流脉冲的转染装置，其特征在于，包括绝缘容器，所述绝缘容器包括顶部为敞开式的绝缘容器本体、用于封闭绝缘容器本体的绝缘盖，所述绝缘容器本体内壁相对两侧各连接有一电极，所述绝缘容器本体内部还设有超声波探头，所述超声波探头连接有第一导线，所述第一导线贯穿绝缘盖伸到绝缘容器外部，所述绝缘盖底部两侧各设有一电极触点，两个所述电极触点与两个所述电极一一对应并接触，所述电极触点还连接有第二导线，所述第二导线贯穿绝缘盖伸到绝缘容器外部。
2.根据权利要求1所述的结合了超声和电流脉冲的转染装置，其特征在于，所述电极为惰性电极。
3.根据权利要求2所述的结合了超声和电流脉冲的转染装置，其特征在于，所述惰性电极为石墨电极或惰性金属电极。
4.根据权利要求3所述的结合了超声和电流脉冲的转染装置，其特征在于，所述惰性金属电极为铂电极或金电极。
5.根据权利要求1所述的结合了超声和电流脉冲的转染装置，其特征在于，还包括超声波发生器，所述超声波发生器与第一导线连接。
6.根据权利要求1所述的结合了超声和电流脉冲的转染装置，其特征在于，还包括双向脉冲电源，所述双向脉冲电源分别与两个第二导线连接。
7.根据权利要求1所述的结合了超声和电流脉冲的转染装置，其特征在于，所述绝缘容器为长方体结构，所述绝缘容器的容积为0.15-1.2ml。
8.根据权利要求1所述的结合了超声和电流脉冲的转染装置，其特征在于，所述绝缘盖包括绝缘盖本体，所述绝缘盖本体底部设有与绝缘容器本体相配合的凸块，所述电极触点设在凸块的底部两侧。
9.根据权利要求1所述的结合了超声和电流脉冲的转染装置，其特征在于，所述超声波探头位于绝缘容器本体内的中部。
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| CN201921298940.8U CN211079184U (zh) | 2019-08-12 | 2019-08-12 | 一种结合了超声和电流脉冲的转染装置 |
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114196533A (zh) * | 2021-11-01 | 2022-03-18 | 上海盟德生物科技有限公司 | 一种微通道细胞电转仪 |
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2019
- 2019-08-12 CN CN201921298940.8U patent/CN211079184U/zh active Active
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