CN210796462U - 用于样本处理及检测的一体化试剂杯 - Google Patents
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Abstract
本实用新型公开了一种具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯包括旋转盖、试剂杯体和注射移液器,试剂杯体的一端与旋转盖相连接,试剂杯体的另一端与试剂盒相连接;注射移液器贯穿旋转盖和试剂杯体,通过移动使注射移液器的底部远离或靠近试剂盒。该试剂杯实现了通过注射移液器吸取试剂盒内的待测样本并和多种反应试剂混匀,再发生检测反应,获得检测结果,整个过程全自动在该试剂杯中发生,其限位密封结构与试剂的隔离封膜保证产品在一个密闭的环境中检测,避免气溶胶污染,密封性好,待测样本进入,通过配套的检测仪器控制,直接出检测结果,自动化程度高,且结构简单,成本低,检测精确度高,同时还可进行磁颗粒提取样本核酸。
Description
技术领域
本实用新型属于医疗设备技术领域,尤其是涉及一种具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯。
背景技术
分子检测技术平台主要有聚合酶链反应技术、分子杂交技术、DNA测序技术,基因芯片等。分子检测技术已广泛应用于传染病的诊断、流行病的调查、食品卫生检查、肿瘤和遗传病的早期诊断、法医鉴定、肿瘤个体化诊疗、血液筛查、产前筛查、药物代谢基因组学等各个领域的研究。是目前发展最为迅速的临床检验技术。
聚合酶链式反应技术(PCR)是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特点,是能将微量的DNA大幅增加。PCR(聚合酶链式反应)是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60℃左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调节温度至DNA聚合酶最适反应温度(72℃左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。
荧光定量PCR技术是聚合酶链反应技术的主要应用,也是分子检测技术的主流。不过样本提取的繁琐性和气溶胶污染是限制荧光定量PCR技术进一步应用于临床的重要壁垒。同时传统产品实验步骤多、自动化程度低、需要专门的PCR实验室等因素都会制约其快速发展和基层临床的应用。
随着社会发展和医疗模式的转变,临床迫切需要一种检测准确、操作简单,体积小巧,无需特定PCR实验室的自动化一体化产品。但是由于分子检测其自身技术的复杂性,从样品处理到结果报告的全自动化、一体化仪器平台很少,或者存在诸多难以解决的如结构复杂、灵敏度差、操作和检测设备复杂的技术问题,目前无法满足日益发展的临床要求。
其中现有常规实时荧光定量PCR技术不足:
1)实验步骤多;
2)自动化程度低;
3)需要专门的PCR实验室;
4)对操作人员要求高;
5)容易气溶胶污染。
现有样本提取和检测一体化方案不足:
1)检测试剂杯结构复杂,成本高昂,无法进行磁颗粒提取样本核酸;
2)产品通量不大,只有一个反应管;
3)PCR管开模要求高,成本高昂;
4)封口膜刺破工艺有风险。
赛沛公司GeneXpert申请了几个相关的专利,其中包括美国专利文献(US9669409)公开了一种盖子结构、专利US9669409底座的结构和功能、专利US9322052中公开的PCR反应管结构等;但赛沛公司GeneXpert所申请的专利中未涉及磁颗粒提取样本的功能,而磁颗粒提取是常用的方法;反应管要人工插入反应杯内,操作繁琐;一次只能做一个反应管,通量有限。
中国专利文献(申请号:2018102991469)公开了一种设置有物料转移结构的样本处理及检测试剂杯盒,包括由外罩形成的盒本体,且盒本体的顶端外罩开设有开合式加样口,所述盒本体的内侧设有载物圆盘,且载物圆盘的中部设有圆孔,圆孔侧壁设有第二固定扣,圆孔的外围设有开设在载物圆盘上的废弃液存储仓、第一卡槽、第二卡槽和密封孔,且废弃液存储仓、第一卡槽和第二卡槽均通过封膜形成密封区,所述圆孔内设有物料转移结构,第一卡槽内胶粘密封有样本处理塑料管;但该技术方案中PCR管整合在其他模块一起开模,对生产工艺要求很高,且成本高,而且用移液枪头刺破封口膜有风险。
因此,有必要开发一种操作简单,自动化程度高,成本低,无污染的具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯及检测方法。
实用新型内容
本实用新型要解决的技术问题是,提供一种操作简单,自动化程度高,成本低,密封性好,无污染的具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯。
为解决上述技术问题,本实用新型采用的技术方案是,该具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯,包括旋转盖、试剂杯体和注射移液器,所述试剂杯体的一端与所述旋转盖相连接,所述试剂杯体的另一端与试剂盒相连接;所述注射移液器贯穿所述旋转盖和所述试剂杯体,通过移动使所述注射移液器的底部远离或靠近所述试剂盒。
采用上述技术方案,通过设置旋转盖和试剂杯体相连接,注射移液器贯穿旋转盖和试剂杯体通过移动使注射移液器的底部远离或靠近试剂盒,从而实现了通过注射移液器吸取试剂盒内的待测样本并和多种反应试剂混匀,再发生检测反应,从而获得检测结果,整个过程全自动在该试剂杯中发生,上(旋转盖)、下部(试剂盒)的限位密封结构与试剂的隔离封膜保证产品在一个密闭的环境中检测,避免气溶胶污染,密封性好;待测样本进入,通过配套的检测仪器控制,直接出检测结果,自动化程度高,该试剂杯结构简单,成本低,检测精确度高,同时还可进行磁颗粒提取样本核酸,具有主动物料转移功能。
本实用新型进一步改进在于,所述旋转盖与所述试剂杯体为可旋转连接。通过旋转盖相对于试剂杯体旋转,可以带动贯穿旋转盖的注射移液器在试剂杯体内沿圆周运动,从而使注射移液器的底部进入试剂盒内不同的位置。
本实用新型进一步改进在于,所述注射移液器包括按压部、移液管和尖刺部,所述按压部的一端连接在所述移液管的内部且与所述移液管呈活塞连接;所述尖刺部连接在所述移液管远离所述按压部的一端;所述尖刺部为中空结构。该注射移液器通过按压部在移液管内做活塞运动,使中空结构的尖刺部吸取和压出待测样本并和多种反应试剂混匀,从而实现全自动检测。其中注射移液器的吸液排液是通过外部检测仪器控制按压部来实现的;此外中空结构的尖刺部可以刺破封口膜,保证产品质量,性能稳定。
本实用新型进一步改进在于,所述旋转盖上还设有定位驱动槽,用于与外部设备连接通过外部设备控制所述旋转盖相对于所述试剂杯体旋转。
本实用新型进一步改进在于,所述注射移液器的外部设有旋转盖限位件,所述试剂杯体上设有限位件滑槽,所述旋转盖限位件与所述限位件滑槽相配合达到限位作用。旋转盖限位件与试剂杯体上的限位件滑槽相配合作用,用于对试剂杯体固定限位作用,同时旋转盖限位件位于注射移液器的外部用于保护注射移液器在未开启使用前的储存,因此在将该试剂杯装入相应的检测仪器时需要将旋转盖限位件拔下。其中旋转盖和试剂盒与试剂杯体连接好后,再通过热封、超声、点胶等方法实现试剂盒反应时的密封环境,避免PCR反应的气溶胶污染。
本实用新型进一步改进在于,所述旋转盖上还设有移液器导向柱,所述移液器导向柱伸入所述试剂杯体的内部。旋转盖上在注射移液器的贯穿孔靠近试剂杯体的一端设有移液器导向柱,使注射移液器贯穿旋转盖后伸入移液器导向柱内,通过移液器导向柱加强对注射移液器的移液定向,从而保证对试剂盒内的各试剂管定位准确,吸液移液准确。
本实用新型进一步改进在于,所述注射移液器通过移液器固定件和移液器密封件与所述旋转盖固定连接。移液器密封件可以采用橡胶或硅胶材质,这样的设置既能使注射移液器在贯穿孔内移动,又能保证试剂杯体内的密封性。
本实用新型进一步改进在于,所述旋转盖上还设有进样口,所述进样口靠近所述试剂杯体的一端设有向所述试剂杯体内延伸的进样导向柱。进样导向柱的作用是对进样的方向进行定向,保证对试剂盒的样本管定位准确,加样准确。
本实用新型进一步改进在于,所述试剂盒上设有若干个试剂管,且所述试剂盒上设有至少一个PCR管。试剂盒中若干个试剂管的试剂隔离通过封膜实现,各个试剂管中装有不同的试剂,其中PCR管中封装反应冻干粉,这样设置可根据产品通量自由增减试剂管数量。优选地,试剂管的数量为11个,PCR管的数量为1个,其中11个试剂管分别为样本管(管口无封膜)、含RNA carrier,proteinase K等干燥物质的试剂管(管口有封膜)、裂解液管(装有裂解液的试剂管,管口有封膜)、磁颗粒管(内装有磁颗粒的试剂管,管口有封膜)、洗液A管(装有洗液A的试剂管,管口有封膜)、洗液B管(装有洗液B的试剂管,管口有封膜)、废洗液管(用于装有废液的试剂管,管口无封膜)、洗液一(用于无菌水的试剂管,管口有封膜)、洗液二(用于装无菌水的试剂管,管口有封膜)、EB洗脱液管(用于装EB洗脱液的试剂管,管口有封膜)、液体石蜡管(装有液体石蜡的试剂管,管口有封膜);其中磁颗粒可以采用球形、方形、哑铃形等或多种形状的磁颗粒混合。
本实用新型进一步改进在于,所述旋转盖的外部还设有旋转盖定位圈。旋转盖定位圈设置在旋转盖的外部起到固定限位作用。
本实用新型进一步改进在于,所述试剂杯体靠近所述试剂盒的一端设有凹槽,所述试剂盒靠近所述试剂杯体的一端设有凸形边条,所述凹槽与所述凸形边条相卡合从而实现所述试剂杯体与所述试剂盒的固定限位。
作为本实用新型的优选技术方案,所述旋转盖上设有至少一个密封圈,所述密封圈嵌套在所述试剂杯体中,所述试剂杯体中设有相应的与所述密封圈配合的结构。
作为本实用新型的优选技术方案,所述旋转盖限位件包括旋转盖限位卡扣和旋转盖限位罩,所述旋转盖限位罩的顶部沿水平向外延伸且垂直延伸设有所述旋转盖限位卡扣,所述旋转盖限位卡扣与所述限位件滑槽相配合,卡合定位。
作为本实用新型的优选技术方案,所述移液器固定件的外侧设有移液器限位卡套。旋转盖限位罩通过移液器限位卡套安装在注射移液器的外部,用于保护注射移液器,即保护注射移液器在未开启使用前的储存。
作为本实用新型的优选技术方案,所述进样口上设有加样塞。
作为本实用新型的优选技术方案,所述PCR管通过PCR固定螺栓和PCR固定螺帽与所述试剂盒形成可拆卸连接。PCR管中封装反应冻干粉后通过PCR固定螺帽连接到试剂盒上的PCR固定螺栓,这样的结构设置可以采用通用的PCR管,降低成本。外接检测仪器还具有PCR管的管套式温度调控装置,磁吸附装置,尤其是PCR管的反应温度调控装置。
作为本实用新型的优选技术方案,所述移液管贯穿所述旋转盖伸入所述试剂杯体内,通过移动使所述尖刺部远离或靠近所述试剂盒;所述按压部位于所述旋转盖远离所述试剂杯体的一侧,且所述按压部在所述旋转盖限位罩的内部。这样的设置进一步有利于保护注射移液器在未开启使用前的储存。
作为本实用新型的优选技术方案,所述移液管在与所述按压部相连接的一端设有管套,所述管套上还连接有卡板,所述卡板与所述移液器限位卡套相卡合。从而更好地对注射移液器起到定位保护作用。
本实用新型还要解决的问题是,提供一种操作简单,自动化程度高,成本低,密封性好、无污染的具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯测试样本的方法。
为了解决上述技术问题,本实用新型采用的技术方案是,该使用具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯检测样本的方法,具体包括以下步骤:
(1)打开该一体化试剂杯包装,扫码确认信息,加样到试剂杯的进样口;
(2)将步骤(1)中的所述试剂杯中的旋转盖限位件拔下,再将该试剂杯放入检测仪器中,启动检测;所述检测仪器控制注射移液器移动、吸液排液以及控制旋转盖旋转;
(3)所述注射移液器移入待测样本并吸取待测样本,然后将所述待测样本加入RNAcarrier,proteinase K干燥物质中混匀,获得混匀物;
(4)所述注射移液器移入所述混匀物并吸取所述混匀物,然后将所述混匀物加入裂解液中混匀,获得裂解混匀物;
(5)所述注射移液器移入所述裂解混匀物吸取所述裂解混匀物,然后将所述裂解混匀物加入磁颗粒中先孵育再进行磁颗粒吸附;所述注射移液器吸取废液,移入废液管;
(6)所述注射移液器移入洗液并吸取洗液,然后将所述洗液加入所述步骤(5)的待检样本中,解除磁吸后先混匀再进行磁颗粒吸附,所述注射移液器再次吸取废液,移入废液管;
(7)重复步骤(6),获得清洗后的样本;
(8)将所述注射移液器移入洗液一进行清洗;
(9)所述注射移液器移入洗脱液EB并吸取洗脱液EB,然后将所述洗脱液EB加入所述步骤(7)的清洗后的样本,先进行孵育再进行磁颗粒吸附,获得已洗脱的样本;
(10)将所述注射移液器移入洗液二中进行清洗;
(11)所述注射移液器吸取所述步骤(9)中已洗脱的样本并移入PCR管与内置PCR试剂混匀;
(12)所述注射移液器移入液体石蜡混匀后吸取液体石蜡混匀物,且将所述液体石蜡混匀物移入PCR管,完成样本的提取并做PCR反应准备;
(13)所述注射移液器回归初始位置;
(14)进行PCR反应,所述检测仪器检测出荧光信号得出检测结果。
采用上述技术方案,通过检测仪器控制该具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯中的旋转盖旋转从而带动注射移液器在试剂杯体中旋转,通过检测仪器控制该具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯中注射移液器移动、吸液排液,将待测样本加入试剂盒内样本管中,从而使待测样本与各种试剂混匀进行样本的提取和PCR反应,从而实现了待测样本加入,该试剂杯放入检测仪器后,直接得出结果,完成了复杂的分子检测过程;其中外接的检测仪器控制注射移液器的上下运动、注射移液器的吸液排液及混匀,旋转盖的旋转,同时还具有PCR管的管套式温度调控装置、磁吸附装置。
与现有技术相比,本实用新型的技术方案,具有以下有益效果:
1)对操作人员要求不高,试剂、仪器操作简便、自动化高、一体化设计、避免气溶胶污染、不需要专门的PCR实验室,为荧光定量PCR技术普及到基层医疗机构提供有力的技术保障;
2)该试剂杯结构简单、操作简单、成本低,检测结果准确,同时可进行磁颗粒提取样本核酸;可根据产品通量自由增减试剂管数量,采用中空结构的尖刺部刺破装有试剂的试剂管,保证产品质量,性能稳定;该试剂杯是集核酸提取及扩增检测一体化的装置,实现了样本进,结果出的便捷操作,完成了复杂的分子检测;该试剂杯还可以用于免疫反应检测;
3)由于现有市场产品集成前处理的耗材相对复杂,导致单个检测的成本过高,使得分子POCT依然只能应用于高端市场,没有突破应用场景的局限;本实用新型的技术方案对分子诊断POCT产品进行合理定位,开发低成本、流程简单的便携式PCR的POCT设备及试剂,真正将PCR技术应用到POCT领域,提高社会经济收益。
附图说明
下面结合附图和本实用新型的实施方式进一步详细说明:
图1是本实用新型的具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯的立体结构示意图;
图2是本实用新型的具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯的剖面结构示意图;
图3是本实用新型的具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯的结构爆炸图;
图4是本实用新型的具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯的后视结构图;
图5是本实用新型具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯的前视结构图;
图6是本实用新型的具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯中的旋转盖的俯视结构图;
图7是本实用新型的具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯去掉试剂杯体的结构图;
图8是本实用新型的具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯的注射移液器的按压部与旋转盖局部放大示意图;
图9是本实用新型的具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯的旋转盖限位件与注射移液器的按压部的局部放大示意图;
图10是本实用新型的试剂盒的局部放大结构图;
图11是本实用新型的试剂盒的仰视图;
图12是本实用新型的试剂盒的俯视图;
其中:1-旋转盖;101-旋转盖限位件;1011-旋转盖限位卡扣;1012-旋转盖限位罩;102-旋转盖定位圈;103-密封圈;2-试剂杯体;201-限位件滑槽;202-凹槽;3-注射移液器;301-按压部;302-移液管;303-尖刺部;304-移液器限位卡套;305-管套;306-卡板;307-移液器导向柱;308-移液器固定件;309-移液器密封件;4-试剂盒;401-凸形边条;402-PCR管;4021-PCR管固定螺帽;4022-PCR管固定螺栓;5-定位驱动槽;6-进样口;601-进样导向柱;602-加样塞。
具体实施方式
为了更好地说明该实用新型的技术方案,现结合附图及实施例对本实用新型的技术方案作进一步详细的说明。
实施例1:如图1~12所示,该具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯包括旋转盖1、试剂杯体2和注射移液器3,所述试剂杯体2的一端与所述旋转盖1相连接,所述试剂杯体2的另一端与试剂盒4相连接;所述注射移液器3贯穿所述旋转盖1和所述试剂杯体2,通过移动使所述注射移液器3的底部远离或靠近所述试剂盒4;所述旋转盖1与所述试剂杯体2为可旋转连接;通过旋转盖1相对于试剂杯体2旋转,可以使贯穿旋转盖1的注射移液器3在试剂杯体2内沿圆周运动,从而使注射移液器3的底部进入试剂盒4内不同的位置;所述注射移液器3包括按压部301、移液管302和尖刺部303,所述按压部301的一端连接在所述移液管302的内部且与所述移液管302呈活塞连接;所述尖刺部303连接在所述移液管302远离所述按压部301的一端;所述尖刺部303为中空结构;该注射移液器3通过按压部301在移液管302内作活塞运动,使中空结构的尖刺部303吸取和压出待测样本并和多种反应试剂混匀,从而实现全自动检测;所述旋转盖1上还设有定位驱动槽5,用于与外部设备连接通过外部设备控制所述旋转盖1相对于所述试剂杯体2旋转;所述注射移液器3的外部设有旋转盖限位件101,所述试剂杯体2上设有限位件滑槽201,所述旋转盖限位件301与所述限位件滑槽201相配合达到限位作用;旋转盖限位件301与试剂杯体2上的限位件滑槽201相配合作用,用于对试剂杯体2固定限位作用,同时旋转盖限位件301位于注射移液器3的外部用于保护注射移液器3在未开启使用前的储存,因此在将该试剂杯装入相应的检测仪器时需要将旋转盖限位件301拔下;其中旋转盖1和试剂盒4与试剂杯体2连接好后,再通过热封、超声、点胶等方法实现试剂盒4反应时的密封环境,避免PCR反应的气溶胶污染;所述旋转盖1上还设有移液器导向柱307,所述移液器导向柱307伸入所述试剂杯体2的内部;旋转盖1上在注射移液器3的贯穿孔靠近试剂杯体2的一端设有移液器导向柱307,使注射移液器3贯穿旋转盖1后伸入移液器导向柱307内,通过移液器导向柱307对注射移液器3的移液定向,从而保证对试剂盒4内的各试剂管定位准确,吸液移液准确;所述注射移液器3通过移液器固定件308和移液器密封件309与所述旋转盖1固定连接;移液器密封件309可以采用橡胶或硅胶材质;所述旋转盖1上还设有进样口6,所述进样口6靠近所述试剂杯体2的一端设有向所述试剂杯体2内延伸的进样导向柱601;进样导向柱601的作用是对进样的方向进行定向;所述试剂盒4上设有11个试剂管,且所述试剂盒上设有1个PCR管402;试剂盒4中11个试剂管的试剂隔离通过封膜实现,各个试剂管中装有不同的试剂,其中PCR管402中封装反应冻干粉,这样设置可根据产品通量自由增减试剂管数量。本实施例中优选地11个试剂管分别为样本管(管口无封膜)、含RNA carrier,proteinase K等干燥物质的试剂管(管口有封膜)、裂解液管(装有裂解液的试剂管,管口有封膜)、磁颗粒管(内装有磁颗粒的试剂管,管口有封膜)、洗液A管(装有洗液A的试剂管,管口有封膜)、洗液B管(装有洗液B的试剂管,管口有封膜)、废洗液管(用于装有废液的试剂管,管口无封膜)、洗液一(用于无菌水的试剂管,管口有封膜)、洗液二(用于装无菌水的试剂管,管口有封膜)、EB洗脱液管(用于装EB洗脱液的试剂管,管口有封膜)、液体石蜡管(装有液体石蜡的试剂管,管口有封膜);所述旋转盖1的外部还设有旋转盖定位圈102;旋转盖定位圈102设置在旋转盖1的外部起到固定限位作用;所述试剂杯体2靠近所述试剂盒4的一端设有凹槽202,所述试剂盒4靠近所述试剂杯体2的一端设有凸形边条401,所述凹槽202与所述凸形边条401相卡合从而实现所述试剂杯体2与所述试剂盒4的固定限位;所述旋转盖上设有3个密封圈103,所述密封圈103嵌套在所述试剂杯体2中,所述试剂杯体2中设有相应的与所述密封圈配合的结构;所述旋转盖限位件101包括旋转盖限位卡扣1011和旋转盖限位罩1012,所述旋转盖限位罩1012的顶部沿水平向外延伸且垂直延伸设有所述旋转盖限位卡扣1011,所述旋转盖限位卡扣1011与所述限位件滑槽201相配合,卡合定位;所述移液器固定件303的外侧设有移液器限位卡套304;旋转盖限位罩1012通过移液器限位卡套304安装在注射移液器3的外部,用于保护注射移液器3,即保护注射移液器3在未开启使用前的储存;所述移液管302贯穿所述旋转盖伸入所述试剂杯体2内,通过移动使所述尖刺部303远离或靠近所述试剂盒4;所述按压部301位于所述旋转盖1远离所述试剂杯体2的一侧,且所述按压部301在所述旋转盖限位罩1012的内部;这样的设置进一步有利于保护注射移液器3在未开启使用前的储存;所述移液管302在与所述按压部301相连接的一端设有管套305,所述管套305上还连接有卡板306,所述卡板306与所述移液器限位卡套304相卡合;从而更好地对注射移液器3起到定位保护作用;所述进样口6上设有加样塞602;所述PCR管402通过PCR固定螺栓4022和PCR固定螺帽4021与所述试剂盒形成可拆卸连接;PCR管402中封装反应冻干粉后通过PCR固定螺帽4021连接到试剂盒上的PCR固定螺栓4022;采用通用PCR管402,成本低。
该使用具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯检测样本的方法,具体包括以下步骤:
(1)打开该一体化试剂杯包装,扫码确认信息,加样到试剂杯的进样口;
(2)将步骤(1)中的所述试剂杯中的旋转盖限位件拔下,再将该试剂杯放入检测仪器中,启动检测;所述检测仪器控制注射移液器移动以及控制旋转盖旋转;
(3)所述注射移液器移入待测样本并吸取待测样本,然后将所述待测样本加入RNAcarrier,proteinase K干燥物质中混匀,获得混匀物;
(4)所述注射移液器移入所述混匀物并吸取所述混匀物,然后将所述混匀物加入裂解液中混匀,获得裂解混匀物;
(5)所述注射移液器移入所述裂解混匀物吸取所述裂解混匀物,然后将所述裂解混匀物加入磁颗粒中先孵育再进行磁颗粒吸附;所述注射移液器吸取废液,移入废液管;
(6)所述注射移液器移入洗液并吸取洗液,然后将所述洗液加入所述步骤(5)的待检样本中,解除磁吸后先混匀再进行磁颗粒吸附,所述注射移液器再次吸取废液,移入废液管;
(7)重复步骤(6),获得清洗后的样本;
(8)将所述注射移液器移入洗液一进行清洗;
(9)所述注射移液器移入洗脱液EB并吸取洗脱液EB,然后将所述洗脱液EB加入所述步骤(7)的清洗后的样本,先进行孵育再进行磁颗粒吸附,获得已洗脱的样本;
(10)将所述注射移液器移入洗液二中进行清洗;
(11)所述注射移液器吸取所述步骤(9)中已洗脱的样本并移入PCR管与内置PCR试剂混匀;
(12)所述注射移液器移入液体石蜡混匀后吸取液体石蜡混匀物,且将所述液体石蜡混匀物移入PCR管,完成样本的提取并做PCR反应准备;
(13)所述注射移液器回归初始位置;
(14)进行PCR反应,所述检测仪器检测出荧光信号得出检测结果。
结合实施例1的具体步骤为:(其中,试剂盒4中的11个试剂管分别为1#样本管(管口无封膜)、2#干燥物质的试剂管(管口有封膜)、3#裂解液管(装有裂解液的试剂管,管口有封膜)、4#磁颗粒管(内装有磁颗粒的试剂管,管口有封膜)、5#洗液A管(装有洗液A的试剂管,管口有封膜)、6#洗液B管(装有洗液B的试剂管,管口有封膜)、7#废洗液管(用于装有废液的试剂管,管口无封膜)、8#洗液一(用于无菌水的试剂管,管口有封膜)、9#洗液二(用于装无菌水的试剂管,管口有封膜)、10#EB洗脱液管(用于装EB洗脱液的试剂管,管口有封膜)、11#液体石蜡管(装有液体石蜡的试剂管,管口有封膜);12#PCR管402(内含PCR反应试剂冻干粉)
打开铝箔袋封口(2-8度存储或室温);扫二维码,确认提取信息等;用移液枪吸取200μL等测样本加到该试剂杯的进样口;
1)将装有待测样本的试剂盒4与试剂杯体2相连接;将连接好的该试剂杯中的旋转盖限位件101拔下,再将该试剂杯放入检测仪器中,启动检测;所述检测仪器控制注射移液器3移动和控制旋转盖旋转;(其中检测仪器控制注射移液器3的上下运动、注射移液器3的吸液排液及混匀,旋转盖1的旋转,检测仪器还具有PCR管402的管套式温度调控装置和磁吸附装置);
2)注射移液器3的初始位在7#废液管位,注射移液器3上升;
3)试剂杯体2上面的旋转盖1旋转带动注射移液器3旋转,使注射移液器3对准1#样本管孔;
4)试剂杯体2内的注射移液器3下降,吸取200μL样本,注射移液器3上升;
5)试剂杯体2上面的旋转盖旋转带动注射移液器3旋转,使注射移液器3对准2#干燥物质试剂管孔,(内含RNA carrier,proteinase K等干燥物质);
6)试剂杯体2内的注射移液器3下降,刺破2#干燥物质试剂管孔上铝箔封口(双层),混匀10次,200μL量程;
7)注射移液器3吸取200μL液体,注射移液器3上升;
8)试剂杯体2上面旋转盖1旋转带动注射移液器3旋转,使注射移液器3对准3#裂解液管孔,(内含裂解液300μL);
9)试剂杯体2内的注射移液器下降,刺破3#裂解液管孔上铝箔封口,混匀10次,200μL量程;
10)注射移液器3吸取500μL液体,注射移液器3上升;
11)试剂杯体2上面旋转盖1旋转带动注射移液器3旋转,使注射移液器3对准4#磁颗粒管孔,(内含磁颗粒50μL);
12)试剂杯体2内的注射移液器3下降,刺破4#磁颗粒管孔上铝箔封口,混匀10次,200μL量程;
13)60℃孵育10分钟,期间注射移液器3混匀10次,200μL量程;
14)磁吸附装置贴住4#磁颗粒管,1分钟,使4#磁颗粒管内磁颗粒被吸附;
15)用注射移液器3吸取4#磁颗粒管内液体500μL,并将废液移入7#废液管内;
16)试剂杯体2上面旋转盖1旋转带动注射移液器3旋转,使注射移液器3对准5#洗液A管孔,(内含洗液A500μL);
17)试剂杯体2内注射移液器3下降,刺破5#洗液A管孔上铝箔封口;
18)注射移液器3吸取5#洗液A管内的500μL液体,注射移液器3上升;
19)试剂杯体2上面旋转盖1旋转带动注射移液器3旋转,使注射移液器3对准4#磁颗粒管孔(内含已吸附的磁颗粒);
20)试剂杯体2内的注射移液器3下降,穿过4#磁颗粒管孔上铝箔封口(已破);
21)磁吸附装置移走,混匀10次,200μL量程;
22)磁吸附装置贴住4#磁颗粒管,1分钟,使4#磁颗粒管内磁颗粒被吸附;
23)用注射移液器3取走4#磁颗粒管内的液体500μL,并将废液移入7#废液管孔内;
24)试剂杯体2上面旋转盖1旋转带动注射移液器3旋转,使注射移液器3对准6#洗液B管孔(内含洗液B1000μL);
25)试剂杯体2内的注射移液器3下降,刺破6#洗液B管孔上铝箔封口,混匀3次,200μL量程;
26)注射移液器3吸取6#洗液B管内的500μL液体,注射移液器3上升;
27)试剂杯体2上面旋转盖1旋转带动注射移液器3旋转,使注射移液器3对准4#磁颗粒管孔(内含已吸附的磁颗粒);
28)试剂杯体2内的注射移液器3下降,穿过4#磁颗粒管孔上铝箔封口(已破);
29)磁吸附装置移走,混匀10次,200μL量程;
30)磁吸附装置贴住4#磁颗粒管,1分钟,使4#磁颗粒管内磁颗粒被吸附;
31)用注射移液器3取走4#磁颗粒管内液体500μL,并将废液移入7#废液管孔内;
32)试剂杯体2上面旋转盖1旋转带动注射移液器3旋转,使注射移液器3对准8#洗液一孔,(内含洗液1000μL);
33)试剂杯体2内的注射移液器3下降,刺破8#洗液一孔上铝箔封口,混匀10次,500μL量程,注射移液器3上升;
34)试剂杯体2上面旋转盖1旋转带动注射移液器3旋转,使注射移液器3对准10#EB洗脱液管孔,(内含洗脱液EB 150μL);
35)试剂杯体2内的注射移液器3下降,刺破10#EB洗脱液管孔上铝箔封口,混匀3次,200μL量程;
36)注射移液器3吸取10#EB洗脱液管内70μL液体,注射移液器3上升;
37)试剂杯体2上面旋转盖1旋转带动注射移液器3旋转,使注射移液器3对准4#磁颗粒管孔(内含已吸附磁颗粒);
38)试剂杯体2内的注射移液器3下降,穿过4#磁颗粒管孔上铝箔封口(已破);
39)混匀10次,50μL量程;
40)55℃孵育5分钟,期间注射移液器3轻轻混匀2次,50μL量程;
41)磁吸附装置贴住4#磁颗粒管,1分钟,使4#磁颗粒管内磁颗粒被吸附;
42)试剂杯体2上面旋转盖1旋转带动注射移液器3旋转,使注射移液器3对准9#洗液二孔,(内含洗液1000μL);
43)试剂杯体2内的注射移液器3下降,穿过9#洗液二孔上铝箔封口(已破),混匀10次,500μL量程,注射移液器3上升;
44)试剂杯体2上面旋转盖1旋转带动注射移液器3旋转,使注射移液器3对准4#磁颗粒管孔,(内含已洗脱样本70μL);
45)试剂杯体2内的注射移液器3下降,穿过4#磁颗粒管孔上铝箔封口(已破;
46)注射移液器吸取4#磁颗粒管内的50μL液体(已洗脱的样本),注射移液器3上升;
47)试剂杯体2上面旋转盖1旋转带动注射移液器3旋转,使注射移液器3对准12#PCR管402孔(内含PCR试剂冻干粉);
48)试剂杯体2内的注射移液器3下降,刺破12#PCR管402孔上铝箔封口,混匀10次,50μL量程,注射移液器3上升;
49)试剂杯体2上面旋转盖1旋转带动注射移液器3旋转,使注射移液器3对准11#液体石蜡管孔,(内含液体石蜡200μL);
50)试剂杯体2内的注射移液器3下降,刺破11#液体石蜡管孔上铝箔封口,混匀3次,100μL量程;
51)注射移液器3吸取11#液体石蜡管内的100μL液体,注射移液器3上升;
52)试剂杯体2上面旋转盖1旋转带动注射移液器3旋转,使注射移液器3对准12#PCR管402孔,(内含PCR反应所需试剂等50μL);
53)试剂杯体2内的注射移液器3下降,穿过12#PCR管402孔上铝箔封口(已破);
54)向12#PCR管402滴加100μL石蜡,完成样本提取和PCR反应准备;
55)注射移液器3回归初始位;
56)进行PCR反应,检测仪器检测荧光信号得出检测结果。
以上显示和描述了本实用新型的基本原理、主要特征及优点。本行业的技术人员应该了解,本实用新型不受上述实施例的限制,上述实施例和说明书中描述的只是说明本实用新型的原理,在不脱离本实用新型精神和范围的前提下,本实用新型还会有各种变化和改进,例如改变试剂杯的大小或试剂盒内试剂管的形状或排序或做一些其它微略的调整,这些变化和改进都落入要求保护的本实用新型范围内。本实用新型要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。
Claims (18)
1.一种具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯,其特征在于,包括旋转盖、试剂杯体和注射移液器,所述试剂杯体的一端与所述旋转盖相连接,所述试剂杯体的另一端与试剂盒相连接;所述注射移液器贯穿所述旋转盖和所述试剂杯体,通过移动使所述注射移液器的底部远离或靠近所述试剂盒。
2.根据权利要求1所述的具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯,其特征在于,所述旋转盖与所述试剂杯体为可旋转连接。
3.根据权利要求2所述的具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯,其特征在于,所述注射移液器包括按压部、移液管和尖刺部,所述按压部的一端连接在所述移液管的内部且与所述移液管呈活塞连接;所述尖刺部连接在所述移液管远离所述按压部的一端;所述尖刺部为中空结构。
4.根据权利要求2所述的具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯,其特征在于,所述旋转盖上还设有定位驱动槽,用于与外部设备连接通过外部设备控制所述旋转盖相对于所述试剂杯体旋转。
5.根据权利要求3所述的具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯,其特征在于,所述注射移液器的外部设有旋转盖限位件,所述试剂杯体上设有限位件滑槽,所述旋转盖限位件与所述限位件滑槽相配合达到限位作用。
6.根据权利要求3所述的具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯,其特征在于,所述旋转盖上还设有移液器导向柱,所述移液器导向柱伸入所述试剂杯体的内部。
7.根据权利要求3所述的具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯,其特征在于,所述注射移液器通过移液器固定件和移液器密封件与所述旋转盖固定连接。
8.根据权利要求3所述的具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯,其特征在于,所述旋转盖上还设有进样口,所述进样口靠近所述试剂杯体的一端设有向所述试剂杯体内延伸的进样导向柱。
9.根据权利要求3所述的具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯,其特征在于,所述试剂盒上设有若干个试剂管,且所述试剂盒上设有至少一个PCR管。
10.根据权利要求3所述的具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯,其特征在于,所述旋转盖的外部还设有旋转盖定位圈。
11.根据权利要求5所述的具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯,其特征在于,所述试剂杯体靠近所述试剂盒的一端设有凹槽,所述试剂盒靠近所述试剂杯体的一端设有凸形边条,所述凹槽与所述凸形边条相卡合从而实现所述试剂杯体与所述试剂盒的固定限位。
12.根据权利要求5所述的具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯,其特征在于,所述旋转盖上设有至少一个密封圈,所述密封圈嵌套在所述试剂杯体中,所述试剂杯体中设有相应的与所述密封圈配合的结构。
13.根据权利要求5所述的具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯,其特征在于,所述旋转盖限位件包括旋转盖限位卡扣和旋转盖限位罩,所述旋转盖限位罩的顶部沿水平向外延伸且垂直延伸设有所述旋转盖限位卡扣,所述旋转盖限位卡扣与所述限位件滑槽相配合,卡合定位。
14.根据权利要求7所述的具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯,其特征在于,所述移液器固定件的外侧设有移液器限位卡套。
15.根据权利要求8所述的具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯,其特征在于,所述进样口上设有加样塞。
16.根据权利要求9所述的具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯,其特征在于,所述PCR管通过PCR固定螺栓和PCR固定螺帽与所述试剂盒形成可拆卸连接。
17.根据权利要求13所述的具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯,其特征在于,所述移液管贯穿所述旋转盖伸入所述试剂杯体内,通过移动使所述尖刺部远离或靠近所述试剂盒;所述按压部位于所述旋转盖远离所述试剂杯体的一侧,且所述按压部在所述旋转盖限位罩的内部。
18.根据权利要求14所述的具有主动物料转移功能的样本处理及检测一体化试剂杯,其特征在于,所述移液管在与所述按压部相连接的一端设有管套,所述管套上还连接有卡板,所述卡板与所述移液器限位卡套相卡合。
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