CN209846058U - 一种微量玻璃化冷冻保护剂匀速添加装置 - Google Patents

Abstract

一种微量玻璃化冷冻保护剂匀速添加装置，包括储输液管、滴速调节器、吸液器、出液针以及固定支架，储输液管为一医用塑料材质的透明细长软管，其下端固接出液针，储输液管刻度以上部位套接有滴速调节器，而其顶部活动插接有吸液器，此外，储输液管与出液针的连接部以及储输液管与吸液器的连接部都被固定支架的水平延伸夹所固定；所述滴速调节器为一上下两端开孔且直角边开槽的倒梯形中空模件，与直角边平行的模件内侧设有两条竖槽，而中央带有凸轴的圆饼形滑轮可沿着竖槽做竖直上下滑动，所述滴速调节器的外侧自下而上设有“0”和“1”两个刻度。本实用新型通过微量玻璃化冷冻保护剂的匀速添加。

Description

一种微量玻璃化冷冻保护剂匀速添加装置

技术领域

本实用新型涉及一种微量玻璃化冷冻保护剂匀速添加装置。

背景技术

随着国家全面“二孩”政策的放开，国内符合二孩标准的夫妻大约在9000万对，其中有6000万女性在35岁以上，这部分高龄妇女若想怀孕，很多都需借助辅助生殖(试管婴儿)技术。但由于环境污染、工作生活压力大、年龄增大以及不良生活方式等因素的叠加影响，根据中国人口协会、国家计生委联名发布的《中国不孕不育现状调研报告》显示，中国的不孕不育发病率在12.5％-15％，患者人数超过4000万，即意味着每7-8对夫妇中就有1对患有不孕不育问题，这些都不得不借助辅助生殖手段。

而在胚胎实验室行IVF-ET(体外受精——胚胎移植)时，经常会碰到需要对暂时不移植的多余优质胚胎或暂时不受精的卵母细胞进行冷冻保存的操作。目前，胚胎或卵母细胞的冷冻主要分为程序化冷冻和玻璃化冷冻。玻璃化冷冻相较于程序化冷冻因不需要购置昂贵的程序化冷冻仪，且具有操作简单、省时、冷冻效果好等优点而被大多数胚胎实验室所采用。

但现有的玻璃化冷冻操作往往在三孔板或四孔板中进行，且往往每间隔1-3分钟，实验人员需要用毛细玻璃管对卵母细胞/胚胎进行不同浓度冷冻保护剂间的转移操作，即卵母细胞/胚胎需经历非连续性的浓度由低到高的骤变，且为了保证卵母细胞/胚胎能与冷冻保护剂充分进行细胞膜内外的物质交换，需要用毛细玻璃管将卵母细胞/胚胎置于不同的液层并进行反复的抽吸吹打，同时还需来回搅动液面。而卵母细胞/胚胎的冷冻过程本身就是细胞急剧皱缩-回胀-再皱缩的过程，处于一个非自然生理的较为脆弱的状态，而此时再用毛细玻璃管对胚胎进行抽吸、吹打、搬运、搅动等的操作，势必存在影响卵母细胞/胚胎后续发育的风险，且不同孔之间的频繁转移的操作也存在将微小的卵母细胞/胚胎搬丢的风险，此外反复高频的操作也增加了实验人员的工作强度。

因此，尽可能减少体外环境或操作对胚胎的应激性刺激影响，让卵母细胞或胚胎在玻璃化冷冻过程中经历的冷冻保护剂的浓度变化更趋于渐进和柔和，对胚胎的体外生长发育及子代的安全性都是有益的。

发明内容

本实用新型要克服现有技术的上不足，提供能够微量玻璃化冷冻保护剂匀速添加装置。

本实用新型能通过微量玻璃化冷冻保护剂的匀速添加，使得所要冷冻的卵母细胞或胚胎在体外能处于一个冷冻液浓度连续性渐变的环境，且免去了实验人员对胚胎反复抽吸、吹打、转移、搅动等的操作的兼具结构简单、成本低廉、操作方便特点的。

本实用新型解决上述问题的技术方案是：

一种微量玻璃化冷冻保护剂匀速添加装置，包括储输液管、滴速调节器、吸液器、出液针以及固定支架。所述储输液管为一医用塑料材质的透明细长软管，根据其内腔容积的大小自下而上设有微量容积刻度，其下端固接出液针，储输液管最大刻度以上部位套接有滴速调节器，且该滴速调节器外侧自下而上设有分别代表完全关闭状态的“0”的下刻度和代表100ul/min匀速出液的“1”的上刻度，而储输液管顶部插接有吸液器，所述储输液管与出液针的连接部以及储输液管与吸液器的连接部都被固定支架的水平延伸夹所固定。

进一步，所述滴速调节器为一上下两端开孔且直角边开槽的倒梯形中空模件，与直角边平行的模件内侧设有两条竖槽，而中央带有凸轴的圆饼形滑轮可沿着竖槽做竖直上下滑动。

进一步，所述储输液管所设刻度自下而上分别为100ul、200ul、300ul、400ul、500ul、600ul、700ul、800ul、900ul、1000ul。

进一步，所述出液针为直径为0.7mm的医用注射针。

进一步，所述吸液器为仅保留芯杆、活塞和外套的5ml标准医用注射器。

本发明是根据玻璃化冷冻的长期实践操作进行的设计，目前常用的商品化玻璃化冷冻保护剂根据其成分、配比、组合的不同而存在差异，但应用到的冷冻原理和方法均是一致的：卵母细胞/胚胎需先于浓度渐次增高的渗透性冷冻保护剂中进行细胞膜内外液的置换，再于高浓度非渗透性冷冻保护剂中进行最终的脱水处理，并在极短时间内投入到-196℃的液氮中使得卵母细胞/胚胎处于玻璃化(介于固态和液态之间)的状态进行超低温保存。但我们发现，无论何种商品化冷冻保护剂，其渗透性冷冻保护剂的浓度设置只有有限的2-4个，这就使得卵母细胞/胚胎在冷冻过程中不得不经历非连续性的浓度由低到高的骤变，而本发明通过储输液管、滴速调节器、吸液器、出液针以及固定支架的共同配合，能够向单个盛放孔内连续匀速滴定添加同一浓度的冷冻保护剂，使得整个浓度变化的过程更趋于渐进和柔和(规避了浓度骤变的发生)；因卵母细胞/胚胎的体积极其微小，故平时所用到的冷冻保护剂的体积也处于微量水平(300ul-1000ul)，因此储输液管外刻度设为100ul、200ul、300ul、400ul、500ul、600ul、700ul、800ul、900ul、1000ul是与冷冻保护剂的用量相匹配的，而管子设为细长则利于刻度间距的拉开，管子同时为透明材质则便于观察具体的液体输出量；出液针的直径选为0.7mm，则使得常温条件下从针尖滴出的每滴玻璃化冷冻保护剂的体积为10ul，而要使得整个冷冻保护剂的出液速度达到100ul/min，只需计算两滴保护剂滴出的间隔时间是否为6s，方便了观察和对滴速进行进一步的验证性监测；滴速调节器则是依靠滑轮位置的变换与收窄的倒梯形斜边共同给予细长软管向里的压力，而随着软管挤压变扁，其下方的液滴滴出速度也随之减缓，且通过大量的重复试验，我们给出了100ul/min的匀速出液刻度所在位置，即当滑轮的下缘与“1”刻度相切时，恰好保证出液针口的玻璃化冷冻保护剂能以100ul/min的速度匀速滴出；吸液器保证了冷冻操作前液体预先向上的抽吸，固定支架则使得整个装置处于垂直于超净工作台的状态。

本实用新型具有结构简单、成本低廉、操作方便的特点，通过微量玻璃化冷冻保护剂的匀速添加，使得所要冷冻的卵母细胞或胚胎在体外能处于一个冷冻液浓度连续性渐变的环境，且免去了实验人员对胚胎反复抽吸、吹打、转移、搅动等的操作，有效减少了体外环境及人为操作对卵母细胞或胚胎应激性刺激的影响，也提高了整体操作的工作效率。

与现有技术相比，本实用新型的有益效果为：本实用新型通过储输液管、滴速调节器、吸液器、出液针以及固定支架的共同配合，使得微量玻璃化冷冻保护剂能以合理的速度添加到盛有平衡液(无冷冻保护剂)的皿孔内，从而使得卵母细胞/胚胎处于一个冷冻保护剂浓度连续性渐变的环境，且免去了实验人员对胚胎反复抽吸、吹打、转移、搅动等的操作，有效减少了体外环境及人为操作对胚胎应激性刺激的影响，有益于胚胎的远期发育和子代安全，同时也减轻了实验人员的工作强度，提高了工作效率。

附图说明

图1是本实用新型的结构示意图。

具体实施方式

参照图1，一种微量玻璃化冷冻保护剂匀速添加装置，包括储输液管3、滴速调节器2、吸液器1、出液针4以及固定支架5。所述储输液管3为一医用塑料材质的透明细长软管，根据其内腔容积的大小自下而上设有100ul、200ul……1000ul(间隔为100ul)的微量容积刻度31，其下端固接直径为0.7mm的出液针4，储输液管3最大刻度以上部位套接有滴速调节器2，而储输液管3顶部活动插接有吸液器1(仅保留芯杆、活塞和外套的5ml标准医用注射器)，此外，储输液管3与出液针4的连接部以及储输液管3与吸液器1的连接部都被固定支架的水平延伸夹51所固定；所述滴速调节器2为一上下两端开孔且直角边开槽的倒梯形中空模件，与直角边平行的模件内侧设有两条竖槽21，而中央带有凸轴221的圆饼形滑轮22可沿着竖槽21做竖直上下滑动，滑轮22通过位置的移动与倒梯形的斜边23相配合共同给予细长软管3向里的压力，而随着软管3挤压变扁，其下方的液滴滴出速度也随之减缓；所述滴速调节器2的外侧自下而上设有“0”和“1”两个刻度，当滑轮的下缘与“0”下刻度24相切时，储输液管处于夹紧关闭状态，此时不会有液体从管内滴下，而当滑轮的下缘与“1”上刻度25相切时，则恰好保证出液针4头部的玻璃化冷冻保护剂能以100ul/min(在20℃、0.7mm出液孔径的条件下，每滴玻璃化冷冻保护剂的体积为10ul，且两滴液体间隔6s向下滴出)的速度匀速滴出。

所述储输液管所设刻度自下而上分别为100ul、200ul、300ul、400ul、500ul、600ul、700ul、800ul、900ul、1000ul。

所述出液针为直径为0.7mm的医用注射针。

所述吸液器为仅保留芯杆、活塞和外套的5ml标准医用注射器。在进行卵母细胞/胚胎玻璃化冷冻前,通过吸液器1抽取800ul左右(须略多于所要添加的实际量，因冷冻保护剂在接近滴尽的情况下，由于其自身粘滞阻力的影响，其流速会出现下降)的渗透性玻璃化冷冻保护剂，并向独立单孔内加入300ul平衡液(无冷冻保护剂)，使渗透性冷冻保护剂和平衡液在室温环境下静置平衡30min；此时，将滴速调节器2上的滑轮22调至“0”刻度24，再小心拔下吸液器1；当玻璃化冷冻开始时，向独立单孔内加入所要冷冻的卵母细胞或胚胎，再将滴速调节器2上的滑轮22调至“1”刻度25，使得储输液管3内的渗透性冷冻保护剂以100ul/min的速度匀速滴出；6min后，再将滴速调节器2上的滑轮22调至“0”刻度24，结束渗透性冷冻保护剂的添加；此时，再并用吸管向独立单孔内加入400ul的非渗透性冷冻保护剂，最后用毛细玻璃管将卵母细胞或胚胎转移到玻璃化冷冻载杆上，并迅速投入-196℃的液态氮中完成整个玻璃化冷冻过程。

本说明书实施例所述的内容仅仅是对发明构思的实现形式的列举，本发明的保护范围不应当被视为仅限于实施例所陈述的具体形式，本发明的保护范围也及于本领域技术人员根据本发明构思所能够想到的等同技术手段。

Claims (5)

1.一种微量玻璃化冷冻保护剂匀速添加装置，其特征在于：包括储输液管、滴速调节器、吸液器、出液针以及固定支架；所述储输液管为一医用塑料材质的透明细长软管，根据其内腔容积的大小自下而上设有微量容积刻度，其下端固接出液针，储输液管最大刻度以上部位套接有滴速调节器，且该滴速调节器外侧自下而上设有分别代表完全关闭状态的“0”的下刻度和代表100ul/min匀速出液的“1”的上刻度，而储输液管顶部活动插接有吸液器，所述储输液管与出液针的连接部以及储输液管与吸液器的连接部都被固定支架的水平延伸夹所固定。

2.如权利要求1所述的一种微量玻璃化冷冻保护剂匀速添加装置，其特征在于：所述滴速调节器为一上下两端开孔且直角边开槽的倒梯形中空模件，与直角边平行的模件内侧设有两条竖槽，而中央带有凸轴的圆饼形滑轮可沿着竖槽做竖直上下滑动。

3.如权利要求1所述的一种微量玻璃化冷冻保护剂匀速添加装置，其特征在于：所述储输液管所设刻度自下而上分别为100ul、200ul、300ul、400ul、500ul、600ul、700ul、800ul、900ul、1000ul。

4.如权利要求1所述的一种微量玻璃化冷冻保护剂匀速添加装置，其特征在于：所述出液针为直径为0.7mm的医用注射针。

5.如权利要求1所述的一种微量玻璃化冷冻保护剂匀速添加装置，其特征在于：所述吸液器为仅保留芯杆、活塞和外套的5ml标准医用注射器。