CN208636326U - 一种层析联检试剂盒 - Google Patents
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Abstract
本实用新型公开了一种层析联检试剂盒,包括联检试剂盒体;联检试剂盒壳体内设置有四条单个层析检测试纸条,四条并列设置的层析检测试纸条的检测项目分别为轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及便隐血;或者所述联检试剂盒壳体内设置有三条层析检测试纸条,三条并列设置的层析检测试纸条的检测项目共包含轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及便隐血,且三条中的其中一条层析检测试纸条的检测项目包含轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及便隐血中的任意两项组合。本方案结构简单,能将轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白和隐血胶体金试纸条一次取样检测,将更大地方便检验人员,提高工作效率。
Description
技术领域
本实用新型属于试剂检测领域,尤其涉及一种层析联检试剂盒。
背景技术
感染性腹泻病是一组广泛分布并流行世界各地的肠道传染性疾病,其发病率高,传播性快,对儿童的健康危害尤其严重,其中以细菌性腹泻和病毒(主要包括轮状病毒和腺病毒)感染性腹泻居多。
对儿童的感染性腹泻,临床上一般要对病原体进行鉴别诊断,以便做出相应的治疗。目前常用的检测手段,如粪便常规、培养和免疫学检测;粪便常规一般包括粪便的颜色、形态、粪便细胞、隐血等指标,而培养法主要是针对一些细菌性感染;免疫学检测则主要是轮状病毒、腺病毒等指标。
在临床应用中,轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及隐血三项指标对儿童腹泻的鉴别诊断意义重大,轮状病毒和腺病毒阳性代表了腹泻是由这两种病毒感染所致,一般症状较轻,病程较短,对儿童的危害较小;而钙卫蛋白和隐血阳性则说明是出血性肠炎或者炎症性肠病,病程长,危害大。对儿童腹泻的鉴别诊断意义重大。
临床上广泛应用胶体金或乳胶凝集法对轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白和隐血进行快速检测,一般只需10分钟左右即可对儿童腹泻的病原体进行诊断。目前已有轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白和隐血胶体金试纸条,或者轮状病毒、腺病毒联检的胶体金试纸条,极大地方便了临床诊断;但尚未发现轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白和隐血胶体金试纸条 4项指标或者钙卫蛋白和隐血胶体金试纸条2项指标联检的产品或者报道。
如能将轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白和隐血胶体金试纸条一次取样检测,将更大地方便检验人员,提高工作效率。
发明内容
发明目的:为了克服现有技术中存在的不足,本实用新型提供一孔加样,四联检测的一种层析联检试剂盒。
技术方案:为实现上述目的,本实用新型的一种层析联检试剂盒,包括联检试剂盒体;所述联检试剂盒壳体内设置有四条单个层析检测试纸条,四条并列设置的层析检测试纸条的检测项目分别为轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及便隐血;
或者所述联检试剂盒壳体内设置有三条层析检测试纸条,三条并列设置的层析检测试纸条的检测项目共包含轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及便隐血,且三条中的其中一条层析检测试纸条的检测项目包含轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及便隐血中的任意两项组合;
或者所述联检试剂盒壳体内设置有两条单个层析检测试纸条,两条并列单个层析检测试纸条的检测项目共包含轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及便隐血,且两条中的其中一条层析检测试纸条的检测项目包含轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及便隐血中任意两项或三项组合;
或者所述联检试剂盒壳体内设置有一条单个层析检测试纸条,一条单个层析检测试纸条的检测项目共同包含轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及便隐血。
进一步的,所述联检试剂盒体中设置两条单个层析检测试纸条、三条单个层析检测试纸条、四条单个层析检测试纸条的状态下,各所述单个层析检测试纸条的样品垫上表面共同桥接覆盖一层膜,所述试剂盒上设置有一个加样孔,所述膜置于所述加样孔下方,膜可接住从加样孔中滴下的样品液并将样品液分配到四条或三条或二条样品垫上。
进一步的,所述联检试剂壳体上还镂空设有若干结果显示窗和若干防错窗,每个显示窗和防错窗对应一个层析检测试纸条。
进一步的,所述层析检测试纸条沿长度方向依次包括样品垫、结合垫、层析膜和吸水垫;所述层析膜的一端通过所述结合垫与所述样品垫结合连接;所述层析膜的另一端与所述吸水垫结合连接。
进一步的,所述联检试剂盒体内还包括PVC底板,各所述层析检测试纸条分别贴合于所述PVC底板表面。
进一步的,所述联检试剂盒体包括上壳体和下壳体,所述上壳体和下壳体可拆卸扣合连成盒体结构,所述显示窗设置于所述上壳体上,所述显示窗上设置有透明保护膜。
有益效果:本方案结构简单,能将轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白和隐血胶体金试纸条一次取样检测,将更大地方便检验人员,提高工作效率,采用多个试纸条相互平行状态的基础上实现了一孔加样,采用玻璃纤维素膜结构,使加样孔中加入的样品液分配到各试纸条的样品垫上,避免了多孔加样,操作麻烦的特点。
附图说明
附图1为联检试剂盒体内设置一条至四条检测试剂条的整体和内部试纸条分布示意图;
附图2为联检试剂盒体内设置单个层析检测试纸条的检测试纸条示意图;
附图3为联检试剂盒体内并列设置两个层析检测试纸条的检测试纸条示意图;
附图4为联检试剂盒体内并列设置三个层析检测试纸条的检测试纸条示意图;
附图5为联检试剂盒体内并列设置四个层析检测试纸条的检测试纸条示意图。
附图标记说明:其中1是样品垫;2是结合垫;3是第一检测线(包被抗人轮状病毒抗体);4是第二检测线(包被抗人腺病毒抗体);5是第三检测线(包被抗人钙卫蛋白抗体);6是第四检测线(包被抗人血红蛋白抗体或抗人转铁蛋白抗体或抗人红细胞基质抗体或抗人白蛋白抗体);7是质控线;8是层析膜;9是吸水垫;10是PVC底板; 12是下壳体;10a是防错窗;11a是显示窗;12a为加样孔;13a为加样台;5a为膜(玻璃纤维);16a为单个试纸条。
具体实施方式
下面结合附图对本实用新型作更进一步的说明,
如图1至5所示的一种层析联检试剂盒,包括联检试剂盒体;
所述联检试剂盒壳体内设置有四条单个层析检测试纸条,四条并列设置的层析检测试纸条的检测项目分别为轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及便隐血;
或者所述联检试剂盒壳体内设置有三条层析检测试纸条,三条并列设置的层析检测试纸条的检测项目共包含轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及便隐血,且三条中的其中一条层析检测试纸条的检测项目包含轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及便隐血中的任意两项组合;
或者所述联检试剂盒壳体内设置有两条单个层析检测试纸条,两条并列单个层析检测试纸条的检测项目共包含轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及便隐血,且两条中的其中一条层析检测试纸条的检测项目包含轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及便隐血中任意两项或三项组合;
或者所述联检试剂盒壳体内设置有一条单个层析检测试纸条,一条单个层析检测试纸条的检测项目共同包含轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及便隐血。
所述联检试剂盒体中设置两条单个层析检测试纸条、三条单个层析检测试纸条、四条单个层析检测试纸条的状态下,各所述单个层析检测试纸条的样品垫上表面共同桥接覆盖一层膜,所述试剂盒上设置有一个加样孔,所述膜置于所述加样孔下方,膜可接住从加样孔中滴下的样品液并将样品液分配到四条或三条或二条样品垫上;本实施例中的膜采用的是玻璃纤维素膜,这样样品分配过程更加均匀。
所述联检试剂壳体上还镂空设有若干结果显示窗和若干防错窗,每个显示窗和防错窗对应一个层析检测试纸条;在实际操作过程中,试纸条的吸水垫处的颜色和其他地方不同,因此一旦装错,其防错窗就会显示不同的颜色,这样便于区分。
所述层析检测试纸条沿长度方向依次包括样品垫、结合垫、层析膜和吸水垫;所述层析膜的一端通过所述结合垫与所述样品垫结合连接;所述层析膜的另一端与所述吸水垫结合连接。
所述联检试剂盒体内还包括PVC底板,各所述层析检测试纸条分别贴合于所述PVC底板表面。
所述联检试剂盒体包括上壳体和下壳体,所述上壳体和下壳体可拆卸扣合连成盒体结构,所述显示窗设置于所述上壳体上,所述显示窗上设置有透明保护膜;
为了更加充分的解释该专利内容,本实施例中还对该方案进行如下充分说明:
联检试剂盒体内设置有单个层析检测试纸条,或所述联检试剂盒体内设置有两个并列设置的层析检测试纸条,或所述联检试剂盒体内设置有三个并列设置的层析检测试纸条;或所述联检试剂盒体内设置有四个并列设置的层析检测试纸条;
所述层析检测试纸条沿长度方向依次包括样品垫、结合垫、层析膜和吸水垫;所述层析膜的一端通过所述结合垫与所述样品垫结合连接;所述层析膜的另一端与所述吸水垫结合连接;
其中所述联检试剂盒体内的两个并列设置的层析检测试纸条分别为轮状病毒及腺病毒免疫层析检测试纸条和钙卫蛋白及隐其中所述联检试剂盒体内设置的单个层析检测试纸条为轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及隐血免疫层析检测试纸条;
其中所述联检试剂盒体内的三个并列设置的层析检测试纸条分别为轮状病毒及腺病毒免疫层析检测试纸条、钙卫蛋白免疫层析检测试纸条和隐血免疫层析检测试纸条。
其中所述联检试剂盒体内的四个并列设置的层析检测试纸条分别为轮状病毒免疫层析检测试纸条、腺病毒免疫层析检测试纸条、钙卫蛋白免疫层析试纸条及隐血免疫层析检测试纸条。
所述轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及隐血免疫层析检测试纸条的结合垫上具有轮状病毒免疫标记抗体、腺病毒免疫标记抗体、钙卫蛋白免疫标记抗体和隐血免疫标记抗体,所述轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及隐血免疫层析检测试纸条的层析膜上包被有轮状病毒检测抗体、腺病毒检测抗体、钙卫蛋白检测抗体和隐血检测抗体;
所述轮状病毒免疫层析检测试纸条的结合垫上具有轮状病毒免疫标记抗体,所述轮状病毒免疫层析检测试纸条的层析膜上包被有轮状病毒检测抗体,所述腺病毒免疫层析检测试纸条的结合垫上具有腺病毒免疫标记抗体,所述腺病毒免疫层析检测试纸条的层析膜上包被有腺病毒检测抗体,所述钙卫蛋白免疫层析检测试纸条的结合垫上具有钙卫蛋白免疫标记抗体,所述钙卫蛋白免疫层析检测试纸条的层析膜上包被有钙卫蛋白检测抗体。所述隐血免疫层析检测试纸条的结合垫上具有隐血免疫标记抗体,所述隐血免疫层析检测试纸条的层析膜上包被有隐血检测抗体;
所述轮状病毒及腺病毒免疫层析检测试纸条的结合垫上具有轮状病毒和腺病毒免疫标记抗体,所述轮状病毒及腺病毒免疫层析检测试纸条的层析膜上包被有轮状病毒和腺病毒检测抗体,所述钙卫蛋白及隐血免疫层析检测试纸条的结合垫上具有钙卫蛋白免疫标记抗体和隐血免疫标记抗体,所钙卫蛋白及隐血免疫层析检测试纸条的层析膜上包被有钙卫蛋白检测抗体和隐血检测抗体;
所述轮状病毒及腺病毒免疫层析检测试纸条的结合垫上具有轮状病毒免疫标记抗体和腺病毒免疫标记抗体,所述轮状病毒及腺病毒免疫层析检测试纸条的层析膜上包被有轮状病毒检测抗体和腺病毒检测抗体,所述钙卫蛋白免疫层析检测试纸条的结合垫上具有钙卫蛋白免疫标记抗体,所述钙卫蛋白免疫层析检测试纸条的层析膜上包被有钙卫蛋白检测抗体,所述隐血免疫层析检测试纸条的结合垫上具有隐血免疫标记抗体,所述隐血免疫层析检测试纸条的层析膜上包被有隐血检测抗体。
所述轮状病毒免疫标记抗体是抗人轮状病毒免疫标记抗体,所述轮状病毒检测抗体是抗人轮状病毒抗体,所述腺病毒免疫标记抗体是抗人腺病毒免疫标记抗体,所述腺病毒检测抗体是抗人腺病毒抗体,所述钙卫蛋白免疫标记抗体是抗人钙卫蛋白免疫标记抗体,所述钙卫蛋白检测抗体是抗人钙卫蛋白抗体,所述隐血免疫标记抗体是抗人血红蛋白免疫标记抗体或抗人转铁蛋白免疫标记抗体或抗人红细胞基质免疫标记抗体或抗人白蛋白免疫标记抗体,所述隐血检测抗体是抗人血红蛋白免疫标记抗体或抗人转铁蛋白免疫标记抗体或抗人红细胞基质免疫标记抗体或抗人白蛋白免疫标记抗体。
所述轮状病毒免疫标记抗体是轮状病毒胶体金标记抗体或轮状病毒乳胶标记抗体,所述腺病毒免疫标记抗体是腺病毒胶体金标记抗体或腺病毒乳胶标记抗体,所述钙卫蛋白免疫标记抗体是钙卫蛋白胶体金标记抗体或钙卫蛋白乳胶标记抗体,所述隐血免疫标记抗体是隐血胶体金标记抗体或隐血乳胶标记抗体。
本实施例中的钙卫蛋白检测检测试纸条选用低灵敏度配对抗体,在结合垫中加入游离抗钙卫蛋白抗体0.1-4mg/ml,更佳的,在结合垫中加入游离抗钙卫蛋白抗体 0.5-2mg/ml,采用较小颗粒10-40nm胶体金或乳胶颗粒标记钙卫蛋白抗体,更佳的采用较小颗粒15-25nm胶体金或乳胶颗粒标记钙卫蛋白抗体。
本实用新型的轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及隐血联检试剂盒还可以包括免疫层析检测试剂盒的其它常见试剂,例如样品缓释液等等。
本实用新型的轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及隐血联检试剂盒的检测试纸条的制备过程简述如下,应理解,这些实施例仅用于说明本实用新型而不用于限制本实用新型的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照常规条件,例如Sambrook等人,分子克隆:实验室手册(New York:Cold Spring Harbor Laboratory Press,1989)中所述的条件,或按照制造厂商所建议的条件。
用于轮状病毒检测的抗体(抗轮状病毒抗体)胶体金标记方法如下:用碳酸钾溶液调节100ml胶体金溶液pH值至8.0;在搅拌的条件下,逐滴缓慢将1ml的1mg/ml 待标记抗轮状病毒抗体加入上述胶体金溶液中,混匀,室温静置30min;将12.5ml 10%BSA封闭液缓慢加入上述胶体金溶液中,混匀,室温静置30min;10000g4℃离心 1h,去上清,留疏松沉淀;沉淀用5ml胶体金抗体重悬液重悬,4℃保存。
用于腺病毒诊断的抗体(抗腺病毒抗体),用于钙卫蛋白诊断的抗体(抗人钙卫蛋白抗体)和用于隐血诊断的抗体(抗人血红蛋白抗体或抗人转铁蛋白抗体或抗人红细胞基质抗体或抗人白蛋白抗体)胶体金标记方法同上。
实施例2胶体金垫的喷点
用于轮状病毒诊断的抗体(抗轮状病毒抗体)胶体金垫的喷点方法如下:胶体金抗体溶液稀释:用胶体金抗体重悬液将上述制备的胶体金抗体结合物稀释2倍;设定点膜仪,开启点膜仪的电源,设定喷点程序,喷点量为4ul/cm;1号管道为喷点通道;点膜仪初始化:将1号管道置于胶体金抗体重悬溶液中,选择初始化程序,初始化6个循环;喷点:将金标垫按固定位置平放在点膜仪上,按控制面板上“GO”键开始喷点,点完后取下,检查喷点好的金标垫,喷点的胶体金抗体条带均匀、连续和贯通整个金标垫的直线为合格喷点品,两条直线中出现断点为不合格喷点品;每放一片金标垫,按一次控制面板上的“GO”键为喷点一次(一片);喷点结束,将喷点的金标垫置于烘箱中37℃干燥12小时。
用于腺病毒诊断的抗体(抗腺病毒抗体),用于钙卫蛋白诊断的抗体(抗钙卫蛋白抗体和用于隐血诊断的抗体(抗人血红蛋白抗体或抗人转铁蛋白抗体或抗人红细胞基质抗体或抗人白蛋白抗体)胶体金垫喷点方法同上。
实施例3层析膜的制备
用于轮状病毒诊断的抗体(抗轮状病毒抗体)层析膜制备方法如下:取鼠抗人轮状病毒抗体1mg,加到2ml刻度离心管中,抗体稀释液至1ml,容器标记T标志。取羊抗鼠IgG抗体1mg,加到2ml刻度离心管中,抗体稀释液至1ml,容器标记C标志。设定点膜仪,开启点膜仪的电源,设定喷点程序,喷点量为1ul/cm;1号管道为检测带喷点通道,2号管道为对照带喷点通道;点膜仪初始化:将1号管道置于检测带溶液中,将2号管道置于对照带溶液中,选择初始化程序,初始化6个循环;喷点:将层析膜按固定位置平放在点膜仪上,按控制面板上“GO”键开始喷点,点完后取下,检查喷点好的层析膜,检测带和对照带为两条均匀、连续和贯通整个层析膜的直线为合格喷点品,两条直线中出现断点为不合格喷点品;每放一片层析膜,按一次控制面板上的“GO”键为喷点一次(一片);喷点结束,将喷点的层析膜置于烘箱中37℃干燥12小时,膜上应看不到喷点痕迹。
用于腺病毒诊断的抗体(抗腺病毒抗体),用于钙卫蛋白诊断的抗体(抗钙卫蛋白抗体)和用于隐血诊断的抗体(抗人血红蛋白抗体或抗人转铁蛋白抗体或抗人红细胞基质抗体或抗人白蛋白抗体)层析膜制备方法同上。
实施例4贴膜、切膜
将底板上较宽部分的保护纸除去,沿上面保护纸的下边缘,将划好线的层析膜,以C线在上方的方式贴到底板板上;将胶体金垫贴在T线下方,与NC膜少许接触;将样品垫贴在胶体金垫下方,与胶体金垫少许接触;接着除去上方保护纸,将吸水垫贴在NC膜的上方,与NC膜少许接触;将保护纸及指示带纸逐一贴在组装好的试纸条外面,组装成大板,接通切割机电源,设定切膜程序,设定切割宽度为4mm;将大板合格品平放入切割机平台轨道中,正面朝上,按操作面板上“GO”键,开始切割;每放一片大板合格品,按操作面板上“GO”键一次,直至切割完所有大板合格品;切割完成后,分别将用于检测轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白和隐血的试纸条并列安装于塑料底板上,盖上上盖压紧,组成并列式的轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白和隐血联检试纸条。
实施例5试剂盒组装
取铝箔袋和干燥剂;打开热封机,预热;将待装袋的试纸卡、1袋干燥剂装入铝箔袋中;用热封机封好铝箔袋;贴上标签。
实施例6临床样本验证
将上述的试纸条,用临床样本进行验证。
试纸条检测端(图3中试纸条的左端)带有吸水垫,反应时将样品滴加在样品孔中。
检测时如果C区出现条带即质控线6,则T区出现条带即表示样品为阳性;未出现条带则表示阴性。
检测时如果C区未出现条带,则表示试纸条失效。
检测结果如下:
该试纸条的检测灵敏度为:(18+27+35+41)/(18+27+35+41)×100%=100%;
该试纸条的检测特异性为:(21+70+79++125+138)/(21+70+79++125+138)×100%=100%。
上述实施例结果表明本胶体金检测的准确率非常高,满足临床应用。
同时检测轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及隐血四个指标非常必要,通过本实用新型的使用,对轮状病毒和腺病毒所致的儿童腹泻,因症状较轻,病程较短,对儿童的危害较小,所以只进行一般治疗即可;而钙卫蛋白隐血阳性则说明是炎症性肠病或出血性肠炎,病程长,危害大,需进行及时而有效的治疗。
综上,本实用新型的轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及隐血联检试剂盒可以通过一次取样同时诊断轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及隐血,应用简便,联检结果为下一步准确治疗提供了有力依据,适于大规模推广应用。
以上所述仅是本实用新型的优选实施方式,应当指出:对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本实用新型的保护范围。
Claims (5)
1.一种层析联检试剂盒,其特征在于:包括联检试剂盒体;
所述联检试剂盒壳体内设置有四条单个层析检测试纸条,四条并列设置的层析检测试纸条的检测项目分别为轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及便隐血;
或者所述联检试剂盒壳体内设置有三条层析检测试纸条,三条并列设置的层析检测试纸条的检测项目共包含轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及便隐血,且三条中的其中一条层析检测试纸条的检测项目包含轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及便隐血中的任意两项组合;
或者所述联检试剂盒壳体内设置有两条单个层析检测试纸条,两条并列单个层析检测试纸条的检测项目共包含轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及便隐血,且两条中的其中一条层析检测试纸条的检测项目包含轮状病毒、腺病毒、钙卫蛋白及便隐血中任意两项或三项组合;
所述联检试剂盒体中设置两条单个层析检测试纸条、三条单个层析检测试纸条、四条单个层析检测试纸条的状态下,各所述单个层析检测试纸条的样品垫上表面共同桥接覆盖一层膜,所述试剂盒上设置有一个加样孔,所述膜置于所述加样孔下方,膜可接住从加样孔中滴下的样品液并将样品液分配到四条或三条或二条样品垫上。
2.根据权利要求1所述的一种层析联检试剂盒,其特征在于:所述联检试剂壳体上还镂空设有若干结果显示窗和若干防错窗,每个显示窗和防错窗对应一个层析检测试纸条。
3.根据权利要求2所述的一种层析联检试剂盒,其特征在于:所述层析检测试纸条沿长度方向依次包括样品垫、结合垫、层析膜和吸水垫;所述层析膜的一端通过所述结合垫与所述样品垫结合连接;所述层析膜的另一端与所述吸水垫结合连接。
4.根据权利要求3所述的一种层析联检试剂盒,其特征在于:所述联检试剂盒体内还包括PVC底板,各所述层析检测试纸条分别贴合于所述PVC底板表面。
5.根据权利要求4所述的一种层析联检试剂盒,其特征在于:所述联检试剂盒体包括上壳体和下壳体,所述上壳体和下壳体可拆卸扣合连成盒体结构,所述显示窗设置于所述上壳体上,所述显示窗上设置有透明保护膜。
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CN201820487039.4U CN208636326U (zh) | 2018-04-08 | 2018-04-08 | 一种层析联检试剂盒 |
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GR01 | Patent grant | ||
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