CN207418770U - 一种诱导胃癌细胞株sgc-7901耐药的贴壁细胞培养装置 - Google Patents

Abstract

本实用新型公开了一种诱导胃癌细胞株SGC‑7901耐药的贴壁细胞培养装置，包括培养瓶，该培养瓶水平放置于恒温培养箱平板上，该培养瓶的瓶盖上设有加药小孔；多个加药器，该多个加药器的出口分别通过导管与多通管的多个入口连接，并由多通管的一个出口流出给培养瓶加药；加药管，该加药管一端为加药针端，其穿过所述加药小孔给培养瓶加药，另一端另一端与多通管的出口连接；加药管的加药针分为加药针前段和加药针后段，加药针前段和加药针后段所成的夹角为钝角。本实用新型具有效保证细胞的贴壁培养，且能够定时定量的向胃癌细胞株SGC‑7901培养液中加入不同浓度的药物，避免细胞遭受外界污染，可匀速加药，具有极佳的实用性。

Description

一种诱导胃癌细胞株SGC-7901耐药的贴壁细胞培养装置

技术领域

本实用新型涉及生物技术领域，具体涉及一种诱导胃癌细胞株SGC-7901耐药的贴壁细胞培养装置。

背景技术

胃癌(stomach cancer)是全球最常见的消化道恶性肿瘤之一，我们国家、日本、韩国是胃癌的高发地区之一，据报道，我们国家每年新发胃癌病例约40万例，这将会危害我们国家人民身体健康(邹文斌，李兆申.中国胃癌发病率及死亡率研究进展[J].中国实用内科杂志，2014，34(4)：408-415.)，甚至危及我们国家人民的生命安全。

一般而言，针对胃癌开展一系列的治疗，包括化学药物治疗、中医针刺治疗、外科手术治疗等等，其中化学药物治疗是胃癌的常规治疗手段之一(徐向东，张龙，瞿凯泉.含替吉奥联合化疗方案在进展期胃癌治疗中的应用探讨[J].中外医疗，2016，35(14)：152-153+156.)，但是很多化疗药物治疗一段时间后就会产生耐药性，就需要更换其他的化疗药物，另外胃癌患者针对一种化疗药物出现耐药的同时也会出现对其他的化疗药物产生耐药性，这对临床胃癌患者的治疗带来了困境，为此有必要研究胃癌的耐药机制(刚毅.功能封闭性双链RNA在胃癌耐药相关转录因子验证中的应用[D].第四军医大学，2012.)。

目前，研究胃癌耐药机制的最好方法是体外培养胃癌细胞且建立胃癌细胞的耐药细胞株，已经知道SGC-7901是胃癌非常常见的细胞株类型，临床上可以促使胃癌细胞株SGC-7901对阿霉素产生耐药并研究胃癌的耐药分子机制(严慧.化疗药物诱导胃癌SGC7901细胞向肿瘤干细胞转化的EMT机制研究[D].第四军医大学，2013.)。

通常情况下，现有的胃癌细胞株SGC-7901培养技术需要拧开培养瓶瓶盖且培养瓶密封效果不佳，同时建立胃癌细胞株SGC-7901耐药需要的时间会超过5个月，以此经常会遇到细菌、病毒、支原体、衣原体、真菌等等污染情况，如何避免这些微生物污染胃癌细胞株SGC-7901且有效地保证胃癌细胞株SGC-7901常规加药处理，这是现代细胞学、毒理学、生理学、药效学等等学科非常重要的研究课题，为了研究胃癌细胞株SGC-7901培养技术避免污染情况的相关课题，迫切需要开发出新型胃癌细胞株SGC-7901培养瓶且该新型胃癌细胞株SGC-7901培养瓶要保证对不同浓度胃癌细胞株SGC-7901实施加药处理。

针对现有胃癌细胞株SGC-7901培养技术的一些不足，本实用新型提出了一种诱导胃癌细胞株SGC-7901耐药的贴壁细胞培养瓶，该贴壁细胞培养瓶的基本组成包括1个螺口培养瓶、1个恒温培养箱平板、1个时间计量器、1个加药针、1个加药管、1个四通连接塑料管、4个塑料连接软管、8个密封塑料扣、3个匀速加药器，这些设计有助于对胃癌细胞株SGC-7901加入同一种递增浓度药物且保证加药过程匀速化、可控化，有助于对所加药物进行无菌过滤且可以定时控制所加药物的种类，有助于对胃癌细胞株SGC-7901常规中量培养且保持胃癌细胞株SGC-7901处于充足空气供应的贴壁状态，最终实现对胃癌细胞株SGC-7901加药过程的匀速化、时间化、可控化且保证胃癌细胞株SGC-7901常规地、无菌地、透气地培养。

发明内容

为解决上述现有技术的不足，本实用新型提供了一种诱导胃癌细胞株SGC-7901耐药的贴壁细胞培养装置。

本实用新型的技术方案如下：

一种诱导胃癌细胞株SGC-7901耐药的贴壁细胞培养装置，包括

培养瓶，该培养瓶水平放置于恒温培养箱平板上，该培养瓶的瓶盖上设有加药小孔；

多个加药器，该多个加药器的出口分别通过导管与多通管的多个入口连接，并由多通管的一个出口流出给培养瓶加药；

加药管，该加药管一端为加药针端，其穿过所述加药小孔给培养瓶加药，另一端与多通管的出口连接；

加药管的加药针分为加药针前段和加药针后段，加药针前段和加药针后段所成的夹角为钝角。

优选的，所述培养瓶为螺口培养瓶，通过螺纹与培养瓶瓶盖密封连接。

优选的，所述培养瓶的瓶盖包括顶盖和侧盖，该顶盖上设有凹形锁扣，该侧盖上设有凸形锁扣，所述凹形锁扣与所述凸形锁扣紧密咬合使顶盖和侧盖密封连接。

优选的，所述培养瓶的瓶盖内设有双层空气过滤膜，该双层空气过滤膜所对应的局部瓶盖为镂空结构。

优选的，所述加药针的末端为加药针头，加药针头为椭圆形，其内表面设有多个加药针头内口，其外表面设有多个加药针头外口。

优选的，所述加药管上设有两个药液过滤器，每一过滤器内均设有过滤纤维膜。

优选的，所述加药管上设有加药管开关，加药管开关上设有加药管开关旋钮。

优选的，所述加药器为活塞注射器，包括加加药筒和活塞；

该加药筒外表面上设有刻度值；

该活塞包括前端的圆形塞及圆形杆，圆形杆一侧设有波浪状齿条，加药筒末端设有两凸起，其中一个凸起上设有一支撑板，一手动齿轮的固定轴固定于该支撑板上，且该齿轮与圆形杆上的波浪状齿条紧密啮合，转动齿轮，将推动圆形杆运动。

优选的，所述培养瓶一旁设有时间计量器，该时间计量器调节面板上设有显示屏、时间指示灯、小时调节旋钮、分钟调节旋钮、秒调节旋钮、开始/停止旋钮、调零钮及模式调节钮。

优选的，所述多通管的多个入口与多个加药器的出口的连接导管上设有弹簧夹。

优选的，所述各导管及多通管的连接处均通过密封卡扣密封。

优选的，所述培养瓶由聚苯乙烯与聚氯乙烯的混合材料制成。

优选的，所述培养瓶的底面积为76cm²，容积为250mL，培养瓶外表面设有刻度值。

优选的，所述钝角为170°。

优选的，所述加药针的长度为7cm，其中加药针前段为4.5cm，加药针后段为2.5cm。

优选的，所述加药针前段与加药针后段

优选的，所述加药小孔设于培养瓶瓶盖的顶盖上。

本实用新型具有下述优点：

(1)本实用新型的螺口培养瓶由聚苯乙烯与聚氯乙烯混合材料制备而成且该螺口培养瓶底面积为76cm²，容积为250mL，利于胃癌细胞株SGC-7901常规中量培养，且有效地保证细胞贴壁培养。

(2)螺口培养瓶的外表面有螺口培养瓶刻度标识，利于观察胃细胞株培养液含量的多少，但是，观察胃癌细胞株SGC-7901培养液的时候需要直立螺口培养瓶。

(3)螺口培养瓶放于恒温培养箱平板上且在螺口培养瓶一侧设计时间计量器，时间计量器表面有时间显示屏、时间指示灯、小时调节钮、分钟调节钮、秒调节钮、开始/停止按钮、调零钮、模式调节钮，利于对胃癌细胞株SGC-7901培养体系计量时间并确定细胞株加药的时间。

(4)螺口培养瓶瓶颈为倾斜状且顺时针倾斜夹角α为165度，螺口培养瓶瓶盖与螺口培养瓶瓶颈呈现螺纹紧密咬合状态，利于在胃癌细胞株SGC-7901培养过程中培养液不会洒出来且有效封闭细胞株培养体系。

(5)螺口培养瓶瓶盖分为螺口培养瓶瓶盖顶盖与螺口培养瓶瓶盖侧盖且螺口培养瓶瓶盖顶盖与螺口培养瓶瓶盖侧盖通过凸形顶盖锁扣、凹形顶盖锁扣紧密咬合，螺口培养瓶瓶盖内侧有双层空气滤过膜，利于密封的胃癌细胞株SGC-7901培养体系通过双层空气滤过膜进行合理通气，利于胃癌细胞株SGC-7901获得足够的气体供应且对气体进行多层滤过，以此避免微生物污染胃癌细胞株SGC-7901培养体系。

(6)螺口培养瓶瓶盖顶盖中央有圆形乳胶伸缩给药小孔，圆形乳胶伸缩孔有加药针穿过且加药针全长7cm，加药针前段与加药针后段长度比为4.5cm：2.5cm，且加药针前段与加药针后段的顺时针夹角β为170度，有利于密封胃癌细胞株SGC-7901的培养体系且促使加药针前段直接插入胃癌细胞株SGC-7901培养液液面。

(7)加药针前段头部是加药针头，加药针头为椭圆形且加药针头布满加药针头内口、加药针头外口，利于在胃癌细胞株SGC-7901加药过程中减少对胃癌细胞株SGC-7901培养体系的药液冲击。

(8)加药针后面是加药管，加药管上有2个药液过滤器和加药管开关，第1个药液过滤器内有1层0.22μm纤维膜，第2个药液过滤器内有1层0.45μm纤维膜，加药管开关上有加药管开关旋钮，利于在胃癌细胞株SGC-7901加药过程中对所加药物进行过滤，避免胃癌细胞株SGC-7901受到污染，同时还可以手动控制是否加药。

(9)加药管的后面连接塑料连接软管，连接处有密封塑料扣密封且塑料连接软管与四通连接塑料管出口端d连接，连接处有密封塑料扣密封，四通连接塑料管有四个口，依次为四通连接塑料管入口端a、四通连接塑料管入口端b、四通连接塑料管入口端c、四通连接塑料管出口端d，四通连接塑料管入口端a、b、c分别连接于塑料连接软管，连接处有密封塑料扣密封，且塑料连接软管分别连接于加药器出口，连接处有密封塑料扣密封，塑料连接软管上分布弹簧夹，利于在胃癌细胞株SGC-7901加药过程中对胃癌细胞株SGC-7901加入同一种不同浓度的药物且保证加药过程的密封性能。

(10)匀速加药器外表面有匀速加药器刻度标识，利于在胃癌细胞株SGC-7901加药过程中确定对胃癌细胞株SGC-7901加药剂量。

(11)加药器内部有橡胶圆活塞，橡胶圆活塞后面是是塑料圆杆，塑料圆杆一侧是波浪状齿条，塑料圆杆波浪状齿条与圆齿轮齿条紧密咬合，圆齿轮齿条位于圆齿轮上，圆齿轮中央是圆形轴，圆形轴固定于圆形轴支撑板上，圆形轴支撑板的一端固定于匀速加药器的尾部，利于在胃癌细胞株SGC-7901加药过程中对胃癌细胞株SGC-7901进行匀速加药且可以手动控制加药进程。

附图说明

图1为本实用新型的整体结构示意图。

图2a为本实用新型的时间计量器。

图2b为本实用新型的加药针头的结构示意图。

图3为本实用新型的螺口培养瓶瓶盖的结构示意图。

附图标记说明：0-螺口培养瓶刻度标识；1-螺口培养瓶；2-恒温培养箱平板；3-时间计量器；4-加药针头；5-加药针；6-螺口培养瓶瓶盖；7-双层空气滤过膜；8-加药管；9、10-药液过滤器；11-加药管开关；12-加药管开关旋钮；14、18、31、44-塑料连接软管；16-四通连接塑料管；13、15、17、19、30、32、43、45-密封塑料扣；21、34、47-匀速加药器；20、33、46-匀速加药器接头；22、35、48-橡胶圆活塞；23、36、49-塑料圆杆齿条；24、37、50-塑料圆杆；25、38、51-匀速加药器刻度标识；26、39、52-圆形轴支撑板；27、40、53-圆齿轮齿条；28、41、54-圆齿轮；29、42、55-圆形轴；56-时间显示屏；57-时间指示灯；58-小时调节钮；59-分钟调节钮；60-秒调节钮；61-开始/停止按钮；62-调零钮；63-模式调节钮；64-药液；65-加药针头内口；66-加药针头外口；67-圆形乳胶伸缩孔；68-螺口培养瓶瓶盖顶盖；69-螺口培养瓶瓶盖侧盖；70-凹形顶盖锁扣；71-凸形侧盖锁扣。

具体实施方式

现结合实施及图1-3对本实用新型的构造、形状及特点进一步详细的说明。应当理解，本实施例仅用于说明本实用新型，而不用于限定本实用新型的保护范围。

本实施例具体公开了一种诱导胃癌细胞株SGC-7901耐药性的贴壁细胞培养装置，如图1所示，该贴壁细胞培养装置的基本组成包括1个螺口培养瓶1、1个恒温培养箱平板2、1个时间计量器3、1个加药针5、1个加药管8、1个四通连接塑料管16、4个塑料连接软管(14、18、31、44)、8个密封塑料扣(13、15、17、19、30、32、43、45)及3个匀速加药器(21、34、47)。其中螺口培养瓶1由聚苯乙烯与聚氯乙烯混合材料制备而成，该螺口培养瓶1底面积76cm²，容积为250mL，螺口培养瓶1的外表面有螺口培养瓶刻度标识0，螺口培养瓶1放于恒温培养箱平板2上且在螺口培养瓶1一侧设计时间计量器3，如图2所示，时间计量器3表面有时间显示屏56、时间指示灯57、小时调节钮58、分钟调节钮59、秒调节钮60、开始/停止按钮61、调零钮62、模式调节钮63，螺口培养瓶1瓶颈为倾斜状且螺口培养瓶1瓶颈与螺口培养瓶1瓶盖顺时针倾斜夹角α为165度，螺口培养瓶瓶盖6与螺口培养瓶1瓶颈呈现螺纹紧密咬合状态。如图3所示，螺口培养瓶瓶盖6分为螺口培养瓶瓶盖顶盖68与螺口培养瓶瓶盖侧盖69且螺口培养瓶瓶盖顶盖68与螺口培养瓶瓶盖侧盖69通过4个凸形侧盖锁扣71、4个凹形顶盖锁扣70紧密咬合，螺口培养瓶瓶盖6内侧有双层空气滤过膜7，每层均为0.22μm纤维膜，该双层空气过滤膜所对应的局部瓶盖为镂空结构，螺口培养瓶瓶盖顶盖68中央有圆形乳胶伸缩孔67，圆形乳胶伸缩孔67有加药针5穿过且加药针5全长7cm，加药针5前段与加药针5后段长度比为4.5cm：2.5cm且加药针5前段与加药针5后段的顺时针夹角β为170度，加药针5前段头部是加药针头4，加药针头4为椭圆形且加药针头4布满14个加药针头内口65和14个加药针头外口66(如图2所示)，加药针5后面是加药管8，加药管8上有2个药液过滤器(9、10)和加药管开关11，第1个药液过滤器9内有1层0.22μm纤维膜，第2个药液过滤器10内有1层0.45μm纤维膜，加药管开关11上有加药管开关旋钮12，加药管8的后面连接塑料连接软管14，连接处有密封塑料扣13密封，且塑料连接软管14与四通连接塑料管16出口端d连接，连接处有密封塑料扣15密封，四通连接塑料管16有四个口，依次为四通连接塑料管16入口端a、四通连接塑料管16入口端b、四通连接塑料管16入口端c、四通连接塑料管16出口端d，四通连接塑料管16入口端a、b、c分别连接于塑料连接软管(18、31、44)，连接处有密封塑料扣(17、30、43)密封，且塑料连接软管(18、31、44)上设有弹簧夹A、B、C，塑料连接软管(18、31、44)分别连接于匀速加药器接头(20、33、46)，连接处有密封塑料扣(19、32、45)密封，匀速加药器接头(20、33、46)分别连接于匀速加药器(21、34、47)的出口，匀速加药器(21、34、47)外表面分别有匀速加药器刻度标识(25、38、51)，匀速加药器(21、34、47)内部分别有橡胶圆活塞(22、35、48)，橡胶圆活塞(22、35、48)后面分别是塑料圆杆(24、37、50)，塑料圆杆(24、37、50)一侧分别是塑料圆杆齿条(23、36、49)，塑料圆杆齿条(23、36、49)分别与圆齿轮齿条(27、40、53)紧密咬合，圆齿轮齿条(27、40、53)分别位于圆齿轮(28、41、54)上，圆齿轮(28、41、54)中央分别是圆形轴(29、42、55)，圆形轴(29、42、55)分别固定于圆形轴支撑板(26、39、52)上，圆形轴支撑板(26、39、52)的一端分别固定于匀速加药器(21、34、47)的尾部的凸起。

本实用新型的具体使用流程如下：

在本实用新型使用过程中，设计1个螺口培养瓶1、1个恒温培养箱平板2、1个时间计量器3，主要是为了常规无菌培养胃癌细胞株SGC-7901且可以控制胃癌细胞株SGC-7901的培养时间、加药时间，设计1个加药针5、1个加药管8、1个四通连接塑料管16、4个塑料连接软管(14、18、31、44)、8个密封塑料扣(13、15、17、19、30、32、43、45)、3个匀速加药器(21、34、47)主要是为了可以加入同一种不同浓度药物促使胃癌细胞株SGC-7901产生耐药。

一般而言，通常可以对胃癌细胞株SGC-7901加入多种不同类型的化疗药物，促使胃癌细胞株SGC-7901产生耐药性能，以加入不同浓度的阿霉素为例子，不同浓度的阿霉素将会促使胃癌细胞株SGC-7901产生耐药性。

需要实现常规中量培养胃癌细胞株SGC-7901，且在3个匀速加药器(21、34、47)内放入不同浓度的阿霉素50mg/mL、60mg/mL、70mg/mL。

若使用50mg/mL阿霉素处理胃癌细胞株SGC-7901，则需要打开加药管开关旋钮12，松开弹簧夹A且夹紧弹簧夹B、C，此时顺时针手动匀速控制圆齿轮齿条27，圆齿轮齿条27将力量传递给塑料圆杆24，推动橡胶圆活塞22向前运动，50mg/mL阿霉素可以经过匀速加药器21、匀速加药器接头20、塑料连接软管18、四通连接塑料管16入口端a、四通连接塑料管16、四通连接塑料管16出口端d、塑料连接软管14、加药管8(药液过滤器10、药液过滤器9)、加药针5、加药针头4、14个加药针头内口65、14个加药针头外口66至胃癌细胞株SGC-7901培养体系。

若使用60mg/mL阿霉素处理胃癌细胞株SGC-7901，则需要打开加药管开关旋钮12，松开弹簧夹B且夹紧弹簧夹A、C，此时顺时针手动匀速控制圆齿轮齿条40，圆齿轮齿条40将力量传递给塑料圆杆37，推动橡胶圆活塞35向前运动，60mg/mL阿霉素可以经过匀速加药器34、匀速加药器接头33、塑料连接软管31、四通连接塑料管16入口端b、四通连接塑料管16、四通连接塑料管16出口端d、塑料连接软管14、加药管8(药液过滤器10、药液过滤器9)、加药针5、加药针头4、14个加药针头内口65、14个加药针头外口66至胃癌细胞株SGC-7901培养体系。

若使用70mg/mL阿霉素处理胃癌细胞株SGC-7901，则需要打开加药管开关旋钮12，松开弹簧夹C且夹紧弹簧夹A、B，此时顺时针手动匀速控制圆齿轮齿条53，圆齿轮齿条53将力量传递给塑料圆杆50，推动橡胶圆活塞48向前运动，70mg/mL阿霉素可以经过匀速加药器47、匀速加药器接头46、塑料连接软管44、四通连接塑料管16入口端c、四通连接塑料管16、四通连接塑料管16出口端d、塑料连接软管14、加药管8(药液过滤器10、药液过滤器9)、加药针5、加药针头4、14个加药针头内口65、14个加药针头外口66至胃癌细胞株SGC-7901培养体系。

最终本实用新型可以通过对胃癌细胞株SGC-7901加入不同浓度的阿霉素50mg/mL、60mg/mL、70mg/mL，促进胃癌细胞株SGC-7901产生耐药，当这个浓度适应之后，又可以开始新的循环，重新设置不同浓度的阿霉素80mg/mL、90mg/mL、100mg/mL，直到胃癌细胞株SGC-7901对最大浓度的阿霉素产生耐药性。

以上对本实用新型的描述仅是说明性的，而非限制性的，本专业技术人员应当理解，在权利要求限定的精神与范围之内可对其进行许多修改、变化或等效修饰，但是它们都将落入本实用新型的保护范围内。

Claims (10)

1.一种诱导胃癌细胞株SGC-7901耐药的贴壁细胞培养装置，其特征在于，包括:

培养瓶，该培养瓶水平放置于恒温培养箱平板上，该培养瓶的瓶盖上设有加药小孔；

多个加药器，该多个加药器的出口分别通过导管与多通管的多个入口连接，并由多通管的一个出口流出给培养瓶加药；

加药管，该加药管一端为加药针端，其穿过所述加药小孔给培养瓶加药，另一端与多通管的出口连接；

加药管的加药针分为加药针前段和加药针后段，加药针前段和加药针后段所成的夹角为钝角。

2.如权利要求1所述的诱导胃癌细胞株SGC-7901耐药的贴壁细胞培养装置，其特征在于，所述培养瓶为螺口培养瓶，通过螺纹与培养瓶瓶盖密封连接。

3.如权利要求1所述的诱导胃癌细胞株SGC-7901耐药的贴壁细胞培养装置，其特征在于，所述培养瓶的瓶盖包括顶盖和侧盖，该顶盖上设有凹形锁扣，该侧盖上设有凸形锁扣，所述凹形锁扣与所述凸形锁扣紧密咬合使顶盖和侧盖密封连接。

4.如权利要求1所述的诱导胃癌细胞株SGC-7901耐药的贴壁细胞培养装置，其特征在于，所述培养瓶的瓶盖内设有双层空气过滤膜，该双层空气过滤膜所对应的局部瓶盖为镂空结构。

5.如权利要求1所述的诱导胃癌细胞株SGC-7901耐药的贴壁细胞培养装置，其特征在于，所述加药针的末端为加药针头，加药针头为椭圆形，其内表面设有多个加药针头内口，其外表面设有多个加药针头外口。

6.如权利要求1所述的诱导胃癌细胞株SGC-7901耐药的贴壁细胞培养装置，其特征在于，所述加药管上设有两个药液过滤器，每一过滤器内均设有过滤纤维膜。

7.如权利要求1所述的诱导胃癌细胞株SGC-7901耐药的贴壁细胞培养装置，其特征在于，所述加药管上设有加药管开关，加药管开关上设有加药管开关旋钮。

8.如权利要求1所述的诱导胃癌细胞株SGC-7901耐药的贴壁细胞培养装置，其特征在于，所述加药器为活塞注射器，包括加药筒和活塞；

该加药筒外表面上设有刻度值；

该活塞包括前端的圆形塞及圆形杆，圆形杆一侧设有波浪状齿条，加药筒末端设有两凸起，其中一个凸起上设有一支撑板，一手动齿轮的固定轴固定于该支撑板上，且该齿轮与圆形杆上的波浪状齿条紧密啮合，转动齿轮，将推动圆形杆运动。

9.如权利要求1所述的诱导胃癌细胞株SGC-7901耐药的贴壁细胞培养装置，其特征在于，所述培养瓶一旁设有时间计量器，该时间计量器调节面板上设有显示屏、时间指示灯、小时调节旋钮、分钟调节旋钮、秒调节旋钮、开始/停止旋钮、调零钮及模式调节钮。

10.如权利要求1所述的诱导胃癌细胞株SGC-7901耐药的贴壁细胞培养装置，其特征在于，所述多通管的多个入口与多个加药器的出口的连接导管上设有弹簧夹。