CN205710770U - 一体式t细胞培养装置 - Google Patents

Abstract

本实用新型涉及一体式T细胞培养装置，包括一立式工作台、设置于立式工作台上且密闭的保温箱、容置于保温箱内且密闭的容器，容器内容置有一个以上的磁珠颗粒，每个磁珠颗粒上附着有抗体；容器的顶部设有一用于引入血液且呈Y型的单向双入口管，容器的底部设有一用于排液的单向双出口管；容器外壁上还贴设有一电磁铁；容器的侧壁上还分别设有用于输入生理盐水的进液管、用于输入空气和CO2的混合气体的进气管和用于输入培养液的输液管，进液管、进气管和输液管上均设有一用于调节输入量的调节阀。本实用新型的有益效果在于：病人与病人之间的细胞在同一个空间之内互相之间没有机会接触和产生可能的交叉污染。

Description

一体式T细胞培养装置

技术领域

本实用新型涉及T细胞培养领域，尤其涉及一体式T细胞培养装置。

背景技术

外周血淋巴细胞培养是一种常见的体外细胞培养技术，其中涉及外周血淋巴细胞的分离，一般采用FICOLL梯度离心吸取淋巴细胞层到一个培养皿中，或者用吸附CD3或CD28抗体的磁珠特异性吸附T淋巴细胞在磁珠表面，然后用普通培养皿里培养，用吸管吸取淋巴细胞到一个培养皿中加入培养液进行培养，这种培养是在一个开放的细胞培养通风厨（洁净工作台）中完成，空间大转移过程容易受到空气中的细菌病毒等微生物的污染，放在37^oC细胞培养箱中培养。在转染时，需要移出来放到通风厨里面换液加转染液，然后再放回到37^oC细胞培养箱中培养，中间还需要反反复复从细胞培养箱里面拿出来到洁净工作台，又从洁净工作台到细胞培养箱中，一直到培养完成。临床上CART细胞培养做这样的操作程序只能一次一个病人，两个病人在同一个细胞培养房内是不允许的，因为无法保证两个病人的血细胞培养不互相交叉污染，因此目前临床级别的血淋巴细胞培养在这种开放培养方式下手续烦琐，效率低下，人力物力消耗很大，成本很高，无法大规模推广。

实用新型内容

本实用新型的目的是针对以上不足之处，提供了一体式T细胞培养装置，成本低，避免交叉感染，并且将细胞分离、培养、扩增和转染融为一体。

本实用新型解决技术问题所采用的方案是：一种一体式T细胞培养装置，包括一立式工作台、设置于立式工作台上且密闭的保温箱、容置于保温箱内且密闭的容器，所述容器内容置有一个以上的磁珠颗粒，每个磁珠颗粒上附着有用于与外周血中T细胞或自然杀伤T细胞结合的抗体；所述容器的顶部设有一用于引入血液且呈Y型的单向双入口管，所述容器的底部设有一用于排液的单向双出口管；所述容器外壁上还贴设有一电磁铁，所述电磁铁与一控制模块电连；所述容器的侧壁上还分别设有用于输入生理盐水的进液管、用于输入空气和CO2的混合气体的进气管和用于输入培养液的输液管，所述进液管、进气管和输液管上均设有一用于调节输入量的调节阀，每个调节阀均与所述控制模块电连；所述单向双入口管、单向双出口管、进液管、进气管和输液管均与所述容器内部相连通。

进一步的，还包括一设置于立式工作台旁侧的辅助工作台，所述辅助工作台上设置有用于容置生理盐水的第一储液罐、容置有T细胞培养液的第二储液罐和混合有空气和CO2气体的气体罐，所述第一储液罐、第二储液罐和气体罐分别与进液管、输液管和进气管相连通。

进一步的，所述辅助工作台上上设置有一操作面板，所述调节阀并排卡设于操作面板上，所述操作面板上还是有用于显示输入量的显示模块，所述显示模块与所述控制模块电连。

进一步的，所述单向双入口管包括位于单向双入口管顶端的血液标本入口和包装病毒转染液入口，所述单向双出口管的底端设置有第一出口和第二出口，所述第一出口与废液袋相连通，所述第二出口与输液袋相连通；所述废液袋容置有少量防腐剂。

进一步的，所述单向双入口管的下端和单向双出口管的上端分别设有一第一单向阀和第二单向阀，所述第一单向阀和第二单向阀均与控制模块电连。

进一步的，所述抗体为CD3单克隆抗体、CD3多克隆抗体或CD28抗体。

进一步的，所述保温箱上设有五个分别与所述单向双入口管、单向双出口管、进液管、进气管和输液管对应配合穿出的通孔。

进一步的，还包括一用于支撑所述电磁铁的机械手，所述机械手设置于所述容器下方且经一电机驱动绕所述容器转动；所述机械手还经一纵向驱动机构上下移动。

进一步的，所述容器的外形为椭圆形或者圆形，所述容器的底面呈水平。

进一步的，所述T细胞培养装置放置于一洁净室内，所述洁净室的入口处自外向内依次设有一更、二更、三更衣服通道以及货物通道，所述洁净室还设置有传递窗。

与现有技术相比，本实用新型有以下有益效果：打开第一单向阀，血样本从单向双入口管内注入至容器中，容器里面充满磁珠，直径为4.5微米，表面附着CD3单克隆抗体，与T细胞发生结合反应，让病人血中T细胞充分与磁珠表面结合30-40分钟（轻轻地摇晃），将电磁铁把磁珠吸附在培养皿的表面，打开容器底部的第二单向阀，让未结合的细胞缓缓流走，用生理盐水冲洗，之后将培养液泵入培养皿进行培养。本实用新型的T细胞培养装置，避免了在细胞培养过程中的烦琐用人工换液，T细胞在容器之内完成所有的细胞分离、培养、转染和扩增的程序，不但节省空间，节省耗材，还节省人力和物力成本。

附图说明

下面结合附图对本实用新型专利进一步说明。

图1为本实用新型实施例的结构示意图。

图中：1- 容器；2-磁珠颗粒；3-单向双入口管；4-单向双出口管；5-进气管；6-进液管；7-输液管；8-电磁铁；9-第一单向阀；10-第二单向阀；11-调节阀；12-保温箱；13-立式工作台；14-辅助工作台；15-第二储液罐；16-第一储液罐；17-气体罐。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施方式对本实用新型进一步说明。

如图1所示，本实施例的一种一体式T细胞培养装置，包括一立式工作台13、设置于立式工作台13上且密闭的保温箱12、容置于保温箱12内且密闭的容器1，所述容器1内容置有一个以上的磁珠颗粒2，每个磁珠颗粒2上附着有用于与外周血中T细胞或自然杀伤T细胞结合的抗体；所述容器1的顶部设有一用于引入血液且呈Y型的单向双入口管3，所述容器1的底部设有一用于排液的单向双出口管4；所述容器1外壁上还贴设有一电磁铁8，所述电磁铁8与一控制模块电连；所述容器1的侧壁上还分别设有用于输入生理盐水的进液管6、用于输入空气和CO2的混合气体的进气管5和用于输入培养液的输液管7，所述进液管6、进气管5和输液管7上均设有一用于调节输入量的调节阀11，每个调节阀11均与所述控制模块电连；所述单向双入口管3、单向双出口管4、进液管6、进气管5和输液管7均与所述容器1内部相连通。空气和CO2的混合气体的比例95%：5%，所述进液管6、进气管5和输液管7的入接口均是无菌无毒容易入接且可以自动可以控制流入量的泵装置，通过调节阀11调节输入量，入接口只可出不可进以防止外面的东西吸入细胞培养液和生理盐水瓶里面去。

从上述可知，本实用新型的有益效果在于：病人新抽取的血标本经过抗血凝处理缓缓地从单向双入口管3注入至容器1中，轻轻摇晃让血中淋巴细胞充分与磁珠颗粒2混合接触，T细胞包括自然杀伤T细胞由于表面有CD3抗原自然而然与磁珠表面的CD3抗体结合将T细胞吸引在磁珠球表面（T细胞分离），而血中的非T细胞成分则用生理盐水缓缓地冲走，T细胞就留在一体化的容器1里面，吸附在磁珠表面生长扩增，2-3天之后，T细胞扩增到5倍或者以上时即可以做下一步转染。通过密闭的容器1，完成一对一的T细胞培养，成本低，而且可以避免交叉感染。

在本实施例中，还包括一设置于立式工作台13旁侧的辅助工作台14，所述辅助工作台14上设置有用于容置生理盐水的第一储液罐16、容置有T细胞培养液的第二储液罐15和混合有空气和CO2气体的气体罐17，所述第一储液罐16、第二储液罐15和气体罐17分别与进液管6、输液管7和进气管5相连通。

在本实施例中，所述辅助工作台14上上设置有一操作面板，所述调节阀11并排卡设于操作面板上，所述操作面板上还是有用于显示输入量的显示模块，所述显示模块与所述控制模块电连。

在本实施例中，所述单向双入口管3包括位于单向双入口管3顶端的血液标本入口和包装病毒转染液入口，所述单向双出口管4的底端设置有第一出口和第二出口，所述第一出口与废液袋相连通，所述第二出口与输液袋相连通；所述废液袋容置有少量防腐剂。废液袋里面加入少量防腐剂，以防止细菌和真菌生长，房间里面为洁净环境，空气要过滤，角落不能有死角，要易于消毒。

在本实施例中，所述单向双入口管3的下端和单向双出口管4的上端分别设有一第一单向阀9和第二单向阀10，所述第一单向阀9和第二单向阀10均与控制模块电连。第一单向阀9只进不出，在血标本输入时打开，其余时间关闭，防止外部空气进入；第二单向阀10只出不进，在排液的过程中打开，其他时间关闭，防止外部空气进入，更好的保证容器1的密闭性。

在本实施例中，所述抗体为CD3单克隆抗体、CD3多克隆抗体或CD28抗体。CD28可以同时与CD3一起粘附在磁珠表面起着刺激T细胞生长作用，也可以将CD28融合蛋白加入到培养液中起到刺激细胞生长的作用。

在本实施例中，所述保温箱12上设有五个分别与所述单向双入口管3、单向双出口管4、进液管6、进气管5和输液管7对应配合穿出的通孔。

在本实施中，还包括一用于支撑所述电磁铁8的机械手，所述机械手设置于所述容器下方且经一电机驱动绕所述容器1转动；所述机械手还经一纵向驱动机构上下移动。所述机械手可以设置于保温箱的下方或周侧，用于摇晃容器，便于T细胞充分分离。所述纵向驱动机构可以为纵向设置的丝杆机构。

在本实施例中，所述容器1的外形为椭圆形或者圆形，所述容器1的底面呈水平。

在本实施例中，所述T细胞培养装置放置于一洁净室内，所述洁净室的入口处自外向内依次设有一更、二更、三更衣服通道以及货物通道，所述洁净室还设置有传递窗。

综上所述，本实用新型提供的一种一体式T细胞培养装置，占用空间小，成本低，可以实现T细胞的一体式培养，避免交叉感染。

上列较佳实施例，对本实用新型的目的、技术方案和优点进行了进一步详细说明，所应理解的是，以上所述仅为本实用新型的较佳实施例而已，并不用以限制本实用新型，凡在本实用新型的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本实用新型的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种一体式T细胞培养装置，其特征在于：包括一立式工作台、设置于立式工作台上且密闭的保温箱、容置于保温箱内且密闭的容器，所述容器内容置有一个以上的磁珠颗粒，每个磁珠颗粒上附着有用于与外周血中T细胞或自然杀伤T细胞结合的抗体；所述容器的顶部设有一用于引入血液且呈Y型的单向双入口管，所述容器的底部设有一用于排液的单向双出口管；所述容器外壁上还贴设有一电磁铁，所述电磁铁与一控制模块电连；所述容器的侧壁上还分别设有用于输入生理盐水的进液管、用于输入空气和CO2的混合气体的进气管和用于输入培养液的输液管，所述进液管、进气管和输液管上均设有一用于调节输入量的调节阀，每个调节阀均与所述控制模块电连；所述单向双入口管、单向双出口管、进液管、进气管和输液管均与所述容器内部相连通。

2.根据权利要求1所述的一体式T细胞培养装置，其特征在于：还包括一设置于立式工作台旁侧的辅助工作台，所述辅助工作台上设置有用于容置生理盐水的第一储液罐、容置有T细胞培养液的第二储液罐和混合有空气和CO2气体的气体罐，所述第一储液罐、第二储液罐和气体罐分别与进液管、输液管和进气管相连通。

3.根据权利要求2所述的一体式T细胞培养装置，其特征在于：所述辅助工作台上设置有一操作面板，所述调节阀并排卡设于操作面板上，所述操作面板上还是有用于显示输入量的显示模块，所述显示模块与所述控制模块电连。

4.根据权利要求1所述的一体式T细胞培养装置，其特征在于：所述单向双入口管包括位于单向双入口管顶端的血液标本入口和包装病毒转染液入口，所述单向双出口管的底端设置有第一出口和第二出口，所述第一出口与废液袋相连通，所述第二出口与输液袋相连通；所述废液袋容置有少量防腐剂。

5.根据权利要求4所述的一体式T细胞培养装置，其特征在于：所述单向双入口管的下端和单向双出口管的上端分别设有一第一单向阀和第二单向阀，所述第一单向阀和第二单向阀均与控制模块电连。

6.根据权利要求1所述的一体式T细胞培养装置，其特征在于：所述抗体为CD3单克隆抗体、CD3多克隆抗体或CD28抗体。

7.根据权利要求1所述的一体式T细胞培养装置，其特征在于：所述保温箱上设有五个分别与所述单向双入口管、单向双出口管、进液管、进气管和输液管对应配合穿出的通孔。

8.根据权利要求1所述的一体式T细胞培养装置，其特征在于：还包括一用于支撑所述电磁铁的机械手，所述机械手设置于所述容器下方且经一电机驱动绕所述容器转动；所述机械手还经一纵向驱动机构上下移动。

9.根据权利要求1所述的一体式T细胞培养装置，其特征在于：所述容器的外形为椭圆形或者圆形，所述容器的底面呈水平。

10.根据权利要求1所述的一体式T细胞培养装置，其特征在于：所述T细胞培养装置放置于一洁净室内，所述洁净室的入口处自外向内依次设有一更、二更、三更衣服通道以及货物通道，所述洁净室还设置有传递窗。