CN205484374U - 检测早期糖尿病肾病的胶体金试纸条 - Google Patents

Abstract

本实用新型提供一种检测早期糖尿病肾病的胶体金试纸条，所述胶体金试纸条包括样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫以及支撑垫，其中，所述样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫首尾相互重叠预设长度，所述金标垫上包被多种生物标志物的单克隆抗体，所述硝酸纤维素膜上设置有多条检测线和一条控制线，每一条检测线包被一种与所述金标垫上相应包被的抗体相配对的另一种单克隆抗体，所述控制线包被一种二抗。本实用新型所述胶体金试纸条可以实现同时定量检测早期糖尿病肾病的多种生物标志物，解决单一生物标志物筛查谱狭窄及预见性较差的问题，从而节省检测早期糖尿病肾病的成本，提高检测的准确性及效率。

Description

检测早期糖尿病肾病的胶体金试纸条

技术领域

本实用新型属于临床医学疾病检测领域，尤其涉及一种检测早期糖尿病肾病的胶体金试纸条。

背景技术

糖尿病肾病是糖尿病最严重的慢性微血管并发症之一，并最终引起终末肾衰竭，是糖尿病患者死亡的主要原因。然而，糖尿病肾病早期很难发现，且临床糖尿病肾病诊断黄金标准肌酐和蛋白尿也只能间接反映肾脏实质性病变，在正常蛋白尿期间无法诊断早期糖尿病肾病。通常当临床确诊时，糖尿病肾病患者错过了最佳的治疗时机，致使疾病急剧恶化，不可逆转。因此，针对糖尿病肾病早期损伤生物标志物早发现、早干预，具有重要的现实意义。

目前研究发现了许多早期糖尿病肾病相关的生物标志物，有些生物标志物可以在此阶段释放到尿液中，尿液中的蛋白种类及含量的高低直接反映了泌尿系统，尤其是肾脏的健康状态，可以预测糖尿病肾病发生、发展及预后的情况。比如足糖萼蛋白(podocalyxin)，是足细胞损伤的早期生物标志物，并与疾病的发展正相关；Ⅳ型胶原蛋白(CollagenⅣ)，在维持细胞基底膜正确装配方面具有重要的作用；肾病蛋白(Nephrin)，在裂空隔膜的装配中发挥重要的作用；肝型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)，是肾小球间质细胞损伤的生物标志物，可以预测糖尿病肾病的发生；中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、胱抑素C(cystatinC)、神经生长因子-1(Netrin-1)是肾小管近端损伤的生物标志物。对这些与疾病发生发展密切相关的生物标志物进行检测，有助于了解糖尿病肾病发生和发展，有效提高对肾病并发症的预测能力。

免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique)是以胶体金作为示踪生物标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术，英文缩写为GICT。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，聚合成为特定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态，称为胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷，可与蛋白质分子的正 电荷基团形成牢固的结合，由于这种结合是静电结合，所以不影响蛋白质的生物特性。胶体金除了与蛋白质结合以外，还可以与许多其它生物大分子结合，如SPA、PHA、ConA等。根据胶体金的一些物理性状，如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应，加上结合物的免疫和生物学特性，因而使胶体金广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。

目前检测早期糖尿病肾病的检测设备中常用的方法是采用酶联免疫技术(ELISA)，其技术缺点如下：检测设备体积大、成本高；检测时间长、重复性不好，不适合临床的快速筛查。然而，目前尚无利用多种生物标志物同时进行定量检测的设备，因此不能实现同时定量检测早期糖尿病肾病的多种生物标志物，从而无法为早期糖尿病肾病临床诊断提供依据。

实用新型内容

本实用新型的主要目的在于提供一种检测早期糖尿病肾病的胶体金试纸条，旨在解决目前检测设备无法同时定量检测早期糖尿病肾病多种生物标志物的问题。

为实现上述目的，本实用新型提供了一种检测早期糖尿病肾病的胶体金试纸条，其特征在于，所述胶体金试纸条包括样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫以及支撑垫，其中，所述样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫首尾相互重叠预设长度，所述金标垫上包被多种生物标志物的单克隆抗体，所述硝酸纤维素膜上设置有多条检测线和一条控制线，每一条检测线包被一种与所述金标垫上相应包被的单克隆抗体相配对的另一种单克隆抗体，所述控制线包被一种二抗。

优选地，所述生物标志物包括足糖萼蛋白、Ⅳ型胶原蛋白、肝型脂肪酸结合蛋白以及中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白。

优选地，所述单克隆抗体包括足糖萼蛋白单克隆抗体、Ⅳ型胶原蛋白单克隆抗体、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白单克隆抗体以及肝型脂肪酸结合蛋白单克隆抗体。

优选地，所述多条检测线设置在所述硝酸纤维素膜的排列顺序是沿着样品垫上的样品层析方向并按照生物标志物分子量从大到小平行等间隔排列。

优选地，所述预设长度为1.5～2mm，所述二抗为羊抗鼠IgG或兔抗鼠 IgG。

相较于现有技术，本实用新型所述检测早期糖尿病肾病的胶体金试纸条采用上述技术方案，达到如下技术效果：可以针对早期糖尿病肾病的多种早期生物标志物进行检测，解决单一生物标志物筛查谱狭窄及预见性较差的问题，可以节省检测成本，提高检测准确性。此外，所述胶体金试纸条可以结合定量检测仪一起使用实现多种生物标志物的同时定量检测，为早期糖尿病肾病临床诊断提供依据，提高检测效率。

附图说明

图1是本实用新型检测早期糖尿病肾病的胶体金试纸条较佳实施例的结构示意图。

本实用新型目的的实现、功能特点及优点将结合实施例，参照附图做进一步说明。

具体实施方式

为更进一步阐述本实用新型为达成上述目的所采取的技术手段及功效，以下结合附图及较佳实施例，对本实用新型的具体实施方式、结构、特征及其功效进行详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本实用新型，并不用于限定本实用新型。

如图1所示，图1是本实用新型检测早期糖尿病肾病的胶体金试纸条较佳实施例的结构示意图。在本实施例中，所述胶体金试纸条包括样品垫1、金标垫2、硝酸纤维素膜3、吸水垫4以及支撑垫5。其中，所述样品垫1、金标垫2、硝酸纤维素膜3、吸水垫4首尾相互重叠预设长度(例如1.5～2mm)并粘贴在所述支撑垫5上。所述金标垫2上包被多种生物标志物的单克隆抗体，所述硝酸纤维素膜3上设置有多条检测线31(例如T1～T4)和一条控制线32，每一条检测线31包被有一种与所述金标垫2上所包被的单克隆抗体相配对的另一种单克隆抗体。所述控制线32包被二抗，例如羊抗鼠IgG或者兔抗鼠IgG。所述二抗是指能和金标垫2上标记的一种单克隆抗体结合，即抗抗体，其主要作用是检测金标试纸条的有效性。本实用新型实施例中所使用的包被一词意为非特异性吸附固定意思，本实用新型实施例中所使用的材料和 试剂除特别说明外，均为普通市售。

在本实施例中，所述多种生物标志物包括，但不限于，足糖萼蛋白(podocalyxin)、Ⅳ型胶原蛋白(CollagenⅣ)、肝型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)。

每一条检测线31包被有一种与所述金标垫2上所包被的抗体相配对的另一种单克隆抗体，所述多条检测线设置在所述硝酸纤维素膜3的排列顺序是沿着样品垫上的样品层析方向6并按照生物标志物分子量从大到小平行等间隔排列。例如，足糖萼蛋白(podocalyxin)、Ⅳ型胶原蛋白(CollagenⅣ)、肝型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)，按照分子量依次大约为55KDa、160KDa、14KDa、21KDa，因此，不同检测线31包被的另一种抗单克隆抗体从左到右依次为抗Ⅳ型胶原蛋白(Collagen Ⅳ)单克隆抗体、抗足糖萼蛋白(podocalyxin)单克隆抗体、抗中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)单克隆抗体及抗肝型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)单克隆抗体。

在本实施例中，所述样品垫1和金标垫2均采用玻璃纤维膜或聚酯膜材料制成，所述样品垫1为待检测的样品(例如尿液)的加样位置。所述金标垫2上标记有针对生物标志物的单克隆抗体。所述检测线31包被的抗体和金标垫2包被的抗体为一种相互配对单克隆抗体。所述控制线32包被的抗体为一种能和金标垫2上标记的一种单克隆抗体结合的二抗，例如，羊抗鼠IgG或兔抗鼠IgG。所述样品垫1、金标垫2、硝酸纤维素膜3、吸水垫4首尾相互重叠预设长度(例如1.5～2mm)并粘贴在所述支撑垫5上。所述吸水垫4采用吸水能力强的吸水纤维或吸水海绵材料制成，能够对所述样品垫1上的样品液体具有强吸引流作用，即样品液体通过所述金标垫2将金标抗体-抗原复合物或者金标抗体复合物沿着样品液体的层析方向6吸附至所述硝酸纤维素膜3上相应的检测线位置或控制线位置。所述支撑垫5为一种硬质塑料底板或PVC支撑底板。

在使用本实用新型利用述胶体金试纸条检测早期糖尿病肾病患者的尿液(样品)时，患者的尿液流经样品垫1，患者尿液中早期糖尿病肾病相关的生物标志物与金标垫2上的相应抗体结合，形成胶体金抗体复合物(即抗原抗体免疫复合物)；该复合物随着样品液体在硝酸纤维膜3上层析流动。当层析 到检测线区域时，则被预先包被有标志物的另一种单克隆抗体捕获截留在检测线31(例如T1～T4)上，捕获的某种标志物越多，在某一条检测线31上颜色越深；同时，在层析过程中，未被截留的胶体金抗体复合物继续前行，当到达控制线32区域，则会被预先包被的二抗(例如羊抗鼠IgG)识别并截留在控制线32上，显示红色。根据不同检测线31上红色的深浅来判断样品中的不同标志物的含量。如果样品中不含有某种标志物，则在相应的检测线上不呈现颜色，如果含有某种标志物，就会在相应的检测线31上呈现不同深浅程度的红色。控制线32上如果没有红色条带出现，则说明胶体金试纸条失效。本实用新型所述胶体金试纸条具有检测容易、应用广泛、携带方便、筛查全面的优点，并可以与颜色采集设备结合实现多种标志物的同时定量检测，提高检测效率。

以上仅为本实用新型的优选实施例，并非因此限制本实用新型的专利范围，凡是利用本实用新型说明书及附图内容所作的等效结构或等效功能变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本实用新型的专利保护范围内。

Claims (5)

1.一种检测早期糖尿病肾病的胶体金试纸条，其特征在于，所述胶体金试纸条包括样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫以及支撑垫，其中，所述样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫首尾相互重叠预设长度，所述金标垫上包被多种生物标志物的单克隆抗体，所述硝酸纤维素膜上设置有多条检测线和一条控制线，每一条检测线包被一种与所述金标垫上相应包被的单克隆抗体相配对的另一种单克隆抗体，所述控制线包被一种二抗。

2.如权利要求1所述的检测早期糖尿病肾病的胶体金试纸条，其特征在于，所述生物标志物包括足糖萼蛋白、Ⅳ型胶原蛋白、肝型脂肪酸结合蛋白和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白。

3.如权利要求2所述的检测早期糖尿病肾病的胶体金试纸条，其特征在于，所述单克隆抗体包括足糖萼蛋白单克隆抗体、Ⅳ型胶原蛋白单克隆抗体、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白单克隆抗体以及肝型脂肪酸结合蛋白单克隆抗体。

4.如权利要求1所述的检测早期糖尿病肾病的胶体金试纸条，其特征在于，所述多条检测线设置在所述硝酸纤维素膜的排列顺序是沿着样品垫上的样品层析方向并按照生物标志物分子量从大到小平行等间隔排列。

5.如权利要求1所述的检测早期糖尿病肾病的胶体金试纸条，其特征在于，所述预设长度为1.5～2mm，所述二抗为羊抗鼠IgG或兔抗鼠IgG。