CN203465267U

CN203465267U - 一种三氯苯哒唑酶联免疫检测试剂盒

Info

Publication number: CN203465267U
Application number: CN201320581179.5U
Authority: CN
Inventors: 蒋晗; 赵澎涛; 黄光荣
Original assignee: HANGZHOU TIANMAI BIO-TECHNOLOGY Co Ltd
Current assignee: Tianmai Zhilian Hangzhou Testing Technology Service Co ltd
Priority date: 2013-09-18
Filing date: 2013-09-18
Publication date: 2014-03-05
Anticipated expiration: 2023-09-18

Abstract

本实用新型公开了一种三氯苯哒唑酶联免疫检测试剂盒，包括盒体及均位于盒体内的酶标板、酶标盖板、14瓶试剂、托垫、冰袋、若干吸水纸及若干一次性滴管，所述酶标板采用包被有三氯苯哒唑偶联抗原的96孔试剂板作为固相载体，14瓶试剂分别为三氯苯哒唑标准溶液，共6瓶，1ml/瓶；酶标二抗溶液，1瓶，8ml/瓶；三氯苯哒唑抗体溶液，1瓶，1ml/瓶；抗体稀释缓冲液、样品稀释液及洗涤液各1瓶，50ml/瓶；底物溶液、显色液及终止液各1瓶，8ml/瓶，所述托垫上设有用于放置试剂瓶的下凹瓶位，下凹瓶位的数量与试剂瓶数量相同。本实用新型结构简单，使用方便，检测快速准确，灵敏度高，适合于大批量样品的现场快速检测。

Description

一种三氯苯哒唑酶联免疫检测试剂盒

技术领域

本实用新型涉一种检测三氯苯哒唑的试剂盒，尤其是涉及一种主要用于检测肉及肉制品、乳及乳制品中三氯苯哒唑残留量含量的酶联免疫检测试剂盒。

背景技术

三氯苯哒唑（Triclabendazole），化学名称为5-氯-6-(2,3-二氯苯氧基)-2-甲硫基-1H-苯并咪唑，又名三氯苯咪唑、二氧苯咪唑、三氯苯唑等，是一种抗寄生虫剂，广泛应用于反刍动物的防病中。欧盟CVMP (Committee for Medicinal Products for Veterinary Use）对其安全评价认为对人体有一定毒害作用，规定其每日允许摄入量（ADI）值为0.0015mg/kg或0.09mg/人。FAO/WHO食品添加剂联合专家委员会（JECFA）建议的限量标准为牛（脂肪100μg/kg、肾脏400 μg/kg, 肝脏850 μg/kg, 肌肉250 μg/kg）和羊（脂肪100 μg/kg, 肾脏200 μg/kg, 肝脏300 μg/kg，肌肉200 μg/kg），欧盟自2012年起规定乳中三氯苯哒唑残留量限值为10 μg/kg。我国目前尚无肉或乳中三氯苯哒唑的限量标准。

目前关于三氯苯哒唑的检测方法主要有高效液相色谱紫外检测法（检测限5μg/kg）、高效液相色谱质谱检测法（检测限1μg/kg）。但由于这些检测方法前处理和检测时间较长，灵敏度较低，仪器设备昂贵，操作比较复杂，需要专门人员操作，不适合于大批量样品检测。

实用新型内容

本实用新型是为了解决现有三氯苯哒唑的检测方法效率与灵敏度低，检测成本高的问题，提供了一种三氯苯哒唑酶联免疫检测试剂盒，其结构简单，使用方便，检测快速准确，灵敏度高，适合于大批量样品的现场快速检测。

为了实现上述目的，本实用新型采用以下技术方案：

一种三氯苯哒唑酶联免疫检测试剂盒，包括盒体及均位于盒体内的酶标板、酶标盖板、14瓶试剂、托垫、冰袋、若干吸水纸及若干一次性滴管，所述酶标板采用包被有三氯苯哒唑偶联抗原的96孔试剂板作为固相载体，14瓶试剂分别为三氯苯哒唑标准溶液，共6瓶，1ml/瓶；酶标二抗溶液，1瓶，8ml/瓶；三氯苯哒唑抗体溶液，1瓶，1ml/瓶；抗体稀释缓冲液、样品稀释液及洗涤液各1瓶，50ml/瓶；底物溶液、显色液及终止液各1瓶，8ml/瓶，所述托垫上设有用于放置试剂瓶的下凹瓶位，下凹瓶位的数量与试剂瓶数量相同。本实用新型所利用的原理为酶联免疫法，其特异性强、灵敏度高、操作简单，因此可达到快速检测三氯苯哒唑残留量的目的；本实用新型中的酶标板的结构为现有技术，其由外框支撑架及放置在其上的可拆的12条酶标反应微孔条组成，每个可拆装的酶标反应微孔条有8个反应孔，可共进行96次样品的检测，可以进行一次连续多个样品的检测，适合于大批量样品的现场快速检测，可提高检测效率。

作为优选，所述盒体为PVC塑料盒。

作为优选，所述酶标板为用铝箔袋真空包装的聚苯乙烯酶标板。

作为优选，所述酶标盖板为塑料硬膜，其大小与酶标板横切面大小相一致。

作为优选，所述三氯苯哒唑标准溶液、酶标二抗溶液、三氯苯哒唑抗体溶液、抗体稀释缓冲液、样品稀释液、洗涤液、底物溶液、显色液及终止液采用不同颜色旋盖的试剂瓶盛装。不同的试剂采用不同颜色旋盖的试剂瓶盛装，以便于快速识别。

作为优选，三氯苯哒唑标准溶液采用黑色旋盖的玻璃瓶盛装，酶标二抗溶液、三氯苯哒唑抗体溶液、抗体稀释缓冲液、样品稀释液、洗涤液、底物溶液、显色液及终止液分别采用蓝色旋盖、红色旋盖、白色、棕色旋盖、绿色、紫色及黄色的PE塑料瓶盛装。

作为优选，下凹瓶位侧壁上纵向设有限位凸筋，试剂瓶外侧面纵向设有限位凹槽，所述限位凸筋与限位凹槽相配。限位凸筋与限位凹槽的配合，可提高试剂瓶放置时的稳定性及可靠性。

作为优选，所述托垫下部设有前侧开口其余面封闭的置物腔，所述置物腔位于下凹瓶位下方，置物腔与盒体前侧面相配形成用于容纳酶标板、酶标盖板、吸水纸及一次性滴管的密闭空间。置物腔提高了托垫的空间利用率，节省了空间，同时使容纳酶标板、酶标盖板等散件与试剂瓶、冰袋分开放置，盒体内部更为整洁，而且便于容纳酶标板、酶标盖板等散件及试剂的取放，同时还能有效保持吸水纸、容纳酶标板、酶标盖板等散件的干燥状态。

作为优选，所述盒体前侧面的上部设有缺口，所述托垫与缺口对应的位置处设有挖槽。挖槽以便于将托垫从盒体中取出。

作为优选，所述托垫由塑料泡沫制成。塑料泡沫成本低，且重量轻，可降低本实用新型的整体重量。

因此，本实用新型具有如下有益效果：

（1）结构简单，使用方便，检测快速准确，灵敏度高，适合于大批量样品的现场快速检测；

（2）通过限位凸筋与限位凹槽的配合，可提高试剂瓶放置时的稳定性及可靠性；

（3）托垫下部设有前侧开口其余面封闭的置物腔，置物腔提高了托垫的空间利用率，节省了空间，同时使容纳酶标板、酶标盖板等散件与试剂瓶、冰袋分开放置，盒体内部更为整洁，便于容纳酶标板、酶标盖板等散件及试剂的取放，同时还能有效保持吸水纸、容纳酶标板、酶标盖板等散件的干燥状态；

（4）盒体前侧面的上部设有缺口，托垫与缺口对应的位置处设有挖槽，便于将托垫从盒体中取出。

附图说明

图1是本实用新型的一种结构示意图。

图2 是本实用新型中托垫的一种结构图。

图3是本实用新型中试剂瓶的一种结构示意图。

图中：盒体1，托垫2，试剂瓶3，下凹瓶位4，旋盖5，限位凸筋6，

限位凹槽7，置物腔8，缺口9，挖槽10。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施方式对本实用新型做进一步的描述。

如图1、图2所示的实施例中，一种三氯苯哒唑酶联免疫检测试剂盒，包括盒体1及均位于盒体内的酶标板、酶标盖板、14瓶试剂、托垫2、冰袋、若干吸水纸及若干一次性滴管，盒体1为PVC塑料盒，酶标板为为用铝箔袋真空包装的聚苯乙烯酶标板，酶标板采用包被有三氯苯哒唑偶联抗原的96孔试剂板作为固相载体，该试剂板由外框支撑架及放置在其上的可拆的12条酶标反应微孔条组成，每个可拆装的酶标反应微孔条有8个微孔，酶标盖板为塑料硬膜，其大小与酶标板横切面大小相一致，托垫2由塑料泡沫制成，托垫2上设有用于放置试剂瓶3的下凹瓶位4，14瓶试剂分别为三氯苯哒唑标准溶液，共6瓶，1ml/瓶；酶标二抗溶液，1瓶，8ml/瓶；三氯苯哒唑抗体溶液，1瓶，1ml/瓶；抗体稀释缓冲液、样品稀释液及洗涤液各1瓶，50ml/瓶；底物溶液、显色液及终止液各1瓶，8ml/瓶，三氯苯哒唑标准溶液、酶标二抗溶液、三氯苯哒唑抗体溶液、抗体稀释缓冲液、样品稀释液、洗涤液、底物溶液、显色液及终止液采用不同颜色旋盖5的试剂瓶3盛装（见图3），其中，三氯苯哒唑标准溶液采用黑色旋盖的玻璃瓶盛装，酶标二抗溶液、三氯苯哒唑抗体溶液、抗体稀释缓冲液、样品稀释液、洗涤液、底物溶液、显色液及终止液分别采用蓝色旋盖、红色旋盖、白色、棕色旋盖、绿色、紫色及黄色的PE塑料瓶盛装，下凹瓶位4的数量与试剂瓶3数量相同，下凹瓶位4侧壁上纵向设有限位凸筋6，试剂瓶3外侧面纵向开有限位凹槽7，限位凸筋6与限位凹槽7相配，托垫2下部设有前侧开口其余面封闭的置物腔8，置物腔8位于下凹瓶位4下方，置物腔8与盒体1前侧面相配形成用于容纳酶标板、酶标盖板、冰袋、吸水纸及一次性滴管的空间，盒体1前侧面的上部开有缺口9，托垫2与缺口对应的位置处设有挖槽10。

本实用新型的使用方法为：

以鲜乳作为测试样品。

样品前处理

准确移取1.0ml鲜乳样品于离心管中，离心（10000rpm，10min），移取中间非脂肪层0.1ml入样品管中，加入样口稀释液0.9ml，混匀，备用。

实验准备

（1）将本实用新型从冰箱中取出，于室温（25°C左右）平衡半小时，同时将每种使用试剂均摇匀。

（2）洗涤液用蒸馏水稀释20倍，得稀释洗涤液，使用前稀释，该稀释洗涤液可在4°C条件下保存一个月。

（3）三氯苯哒唑抗体工作溶液的配制：在使用前移取0.5ml三氯苯哒唑抗体溶液，准确加入4.5ml抗体稀释缓冲液，混匀，配成三氯苯哒唑抗体工作溶液。

（4）酶标二抗工作溶液的配制：在使用前移取0.5ml酶标二抗溶液，准确加入4.5ml抗体稀释缓冲液，混匀，配成酶标二抗工作溶液。

实验步骤

（1）小孔编号：将样品和三氯苯哒唑标准溶液对应微孔按序号进行编号，设定1号孔为酶标仪调O孔，2-7号为标准三氯苯哒唑溶液对照孔，其余为样品孔位置。

（2）加标/样品溶液：将三氯苯哒唑标准溶液及样品溶液50μl加入到到编号对应的微孔中，然后加入酶标二抗工作溶液50ul/孔，轻微振荡混匀，用盖板膜盖板后于37°C反应60min。

（3）洗板：小心揭开盖板膜，倒掉板中液体，每孔加入250μl稀释洗涤液，注意稀释洗涤液不要溢出，静置1min后，甩掉液体，并在吸水纸上拍干，重复以上洗涤操作三次。

（4）显色：向每个微孔中加入50μl底物溶液和50μl显色液，混匀，在37°C环境中反应15min。

（5）终止：向每个微孔中加入50μl终止液，混匀，使反应终止。

（6）测定：30min内将96孔酶标板置于酶标仪中于450nm下读取吸光度值，根据吸光度值和标准曲线与样品稀释倍数便可直接计算出样品中三氯苯哒唑的残留量数值。

Claims

1. 一种三氯苯哒唑酶联免疫检测试剂盒，包括盒体（1）及均位于盒体（1）内的酶标板、酶标盖板、14瓶试剂、托垫（2）、冰袋、若干吸水纸及若干一次性滴管，其特征在于，所述酶标板采用包被有三氯苯哒唑偶联抗原的96孔试剂板作为固相载体，14瓶试剂分别为三氯苯哒唑标准溶液，共6瓶，1ml/瓶；酶标二抗溶液，1瓶，8ml/瓶；三氯苯哒唑抗体溶液，1瓶，1ml/瓶；抗体稀释缓冲液、样品稀释液及洗涤液各1瓶，50ml/瓶；底物溶液、显色液及终止液各1瓶，8ml/瓶，所述托垫（2）上设有用于放置试剂瓶（3）的下凹瓶位（4），下凹瓶位（4）的数量与试剂瓶（3）数量相同。

2. 根据权利要求1所述的一种三氯苯哒唑酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，所述盒体（1）为PVC塑料盒。

3. 根据权利要求1所述的一种三氯苯哒唑酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，所述酶标板为用铝箔袋真空包装的聚苯乙烯酶标板。

4. 根据权利要求1所述的一种三氯苯哒唑酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，所述酶标盖板为塑料硬膜，其大小与酶标板横切面大小相一致。

5. 根据权利要求1所述的一种三氯苯哒唑酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，所述三氯苯哒唑标准溶液、酶标二抗溶液、三氯苯哒唑抗体溶液、抗体稀释缓冲液、样品稀释液、洗涤液、底物溶液、显色液及终止液采用不同颜色旋盖（5）的试剂瓶（3）盛装。

6. 根据权利要求5所述的一种三氯苯哒唑酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，三氯苯哒唑标准溶液采用黑色旋盖的玻璃瓶盛装，酶标二抗溶液、三氯苯哒唑抗体溶液、抗体稀释缓冲液、样品稀释液、洗涤液、底物溶液、显色液及终止液分别采用蓝色旋盖、红色旋盖、白色、棕色旋盖、绿色、紫色及黄色的PE塑料瓶盛装。

7. 根据权利要求5所述的一种三氯苯哒唑酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，下凹瓶位（4）侧壁上纵向设有限位凸筋（6），试剂瓶（3）外侧面纵向设有限位凹槽（7），所述限位凸筋（6）与限位凹槽（7）相配。

8. 根据权利要求1所述的一种三氯苯哒唑酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，所述托垫（2）下部设有前侧开口其余面封闭的置物腔（8），所述置物腔（8）位于下凹瓶位（4）下方，置物腔（8）与盒体（1）前侧面相配形成用于容纳酶标板、酶标盖板、冰袋、吸水纸及一次性滴管的密闭空间。

9. 根据权利要求1或8所述的一种三氯苯哒唑酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，所述盒体（1）前侧面的上部设有缺口（9），所述托垫（2）与缺口（9）对应的位置处设有挖槽（10）。

10. 根据权利要求9所述的一种三氯苯哒唑酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，所述托垫（2）由塑料泡沫制成。