CN203148948U - 喹乙醇免疫层析快速检测试纸条 - Google Patents

Abstract

本实用新型公开了一种喹乙醇免疫层析快速检测试纸条，所述试纸条包括样品处理垫、吸水纸、层析膜、底衬以及配套微孔金；在层析膜上包被喹乙醇抗原的检测线和质控线，层析膜的起始端粘贴样品处理垫，层析膜的末端粘贴吸水纸；所述层析膜粘贴在底衬上；所述微孔金是含有金标记抗喹乙醇抗体的微孔；试纸条的样品处理垫插入该微孔中进行检测。本实用新型不需要专门设备，操作简单快速，10分钟可完成检测，适合生猪养殖、饲料和猪肉及制品加工厂的普及使用，该试纸条具有操作简便、测试快速、反应灵敏、价格低廉、特异性强的特点。

Description

喹乙醇免疫层析快速检测试纸条

技术领域

本实用新型涉及一种检测试纸条，尤其涉及一种喹乙醇免疫层析快速检测试纸条,应用免疫学原理，通过胶体金的免疫反应再借助免疫层析技术达到检测喹乙醇目的，应用于快速检测饲料中的喹乙醇。 

背景技术

喹乙醇为广谱抗菌药，对革兰阳性菌和革兰阴性菌中众多细菌敏感，对致病性溶血大肠杆菌、变形杆菌、沙门菌等有选择性抑制作用，对猪痢疾有极好的疗效。喹乙醇同时通过抗菌与蛋白同化作用而发挥促进生长的作用。在饲料行业喹乙醇被用于饲料生长促进剂，用作猪、牛鸡等促进生长。但由于喹乙醇有中度至明显的蓄积毒性，对大多数动物有明显的致畸作用，对人也有潜在的三致性，即致畸形，致突变，致癌。因此喹乙醇在美国和欧盟都被禁止用作饲料添加剂，我国也明确规定，喹乙醇禁止用于家禽及水产养殖。但出于利益，很多饲料厂家违禁使用喹乙醇。 

检测饲料中残留的喹乙醇的常用方法为高效液相色谱法和酶联免疫法。高效液相色谱法，灵敏度较高，但由于其仪器昂贵，操作程序较繁琐，因此适用性不强。酶联免疫法灵敏度低，特异性不高，需要检测仪器，且操作需要在专业实验室中，因此不适合基层单位的使用。 

实用新型内容

本实用新型要解决的技术问题是提供一种喹乙醇免疫层析快速检测试纸条，用来检测饲料和猪尿中喹乙醇的添加情况，是现今敏感度、特异性最好的喹乙醇残留筛查方法，而且不需要专门设备，操作简单快速，10分钟可完成检测，适合基层生产现场的普及使用，该试纸条具有操作简便、测试快速、反应灵敏、价格低廉、特异性强的特点。 

为解决上述技术问题，本实用新型提供一种喹乙醇免疫层析快速检测试纸条，所述试纸条包括样品处理垫、层析膜、吸水纸、底衬以及配套微孔金；在层析膜上包被喹乙醇抗原的检测线和质控线，层析膜的起始端粘贴样品处理垫，层析膜的末端粘贴吸水纸；所述层析膜粘贴在底衬上；所述微孔金是含有金标记抗喹乙醇抗体的微孔；试纸条的样品处理垫插入该微孔中进行检测。 

进一步地，所述吸水纸上还设有标签，所述样品处理垫上设有箭头方向标签。 

进一步地，所述层析膜粘贴在底衬中间。 

进一步地，所述微孔底部附着金标记抗喹乙醇抗体。 

本实用新型是通过以下技术方案和工作原理实现的。抗喹乙醇抗体标记在指示剂颗粒上，标记物附着在微孔底部；将喹乙醇完全抗原包被并固定层析膜的检测线（T）上，层析膜粘贴在底衬上，始端粘贴样品处理垫以处理样品，末端粘贴吸水纸助层析完成。将试纸条插入加有检测液的微孔中，由于被测样本中喹乙醇抗原和复溶的金标记抗体发生了免疫反应，此时混合液层析到检测区上时包被抗原无法竞争到标记抗体，检测区内没有出现检测线，即阳性，相反如被测样本没有喹乙醇抗原，则标记的抗体层析到检测区时和包被膜上的抗原结合形成紫红线，即阴性。为了证明试纸条有效性和易判读，分别在质控线（C）包被羊抗兔IgG为质控线，所以不管结果怎样质控线C始终出现。 

与现有技术相比，本实用新型的有益效果在于：本实用新型的喹乙醇免疫层析快速检测试纸条与仪器检测同样具有高灵敏度和高特异性，但不需要专门设备，操作简单快速，10分钟可完成检测，检测成本低廉，适合饲料厂的普及使用。用免疫层析法生产喹乙醇快速检测试纸条，用来检测饲料中喹乙醇的添加情况以及猪尿中残留情况，是现今敏感度、特异性最好的喹乙醇快速筛查方法，本方法具有操作简便、测试快速、反应灵敏度高、价格低廉、特异性强、假阳性、假阴性率低的特点，无需特殊仪器及专业技术人员，检测快速，检测结果易于观察，检测费用低廉，贮存和运输方便等优点。十分适合各类检验机构及生产企业在现场快速筛查喹乙醇的违法添加情况。 

附图说明

图1是本实用新型的实施例的结构示意图。 

图2是本实用新型的实施例的检测结果示意图；其中，图2A代表检测结果为阴性的示意图；图2B代表检测结果为阳性的示意图；图2C代表检测结果为无效的示意图。 

图中附图标记说明如下： 

1.底衬、2.样品处理垫、3.层析膜（即硝酸纤维素膜，nitrocellulose filter membrane）、4.检测线、5.质控线、6.吸水纸、7.微孔、8.金标记抗喹乙醇抗体颗粒。 

具体实施方式

下面结合附图和实施例对本实用新型作进一步详细说明。 

实施例  喹乙醇免疫层析快速检测试纸条 

在图1中，将层析膜3黏贴在底衬1中间，在层析膜3上包被检测线4和质控线5，层析膜3的起始端粘贴样品处理垫2，层析膜3的末端粘贴吸水纸6。吸水纸6上还设有标签，样品处理垫2上设有箭头方向标签。 

本实用新型喹乙醇免疫层析快速检测试纸条的制备及检测方法，包括如下步骤： 

1.将一定浓度的喹乙醇偶联结合物（即喹乙醇抗原）和羊抗兔IgG分别包被于硝酸纤维素膜（即层析膜3）上的检测线T（即检测线4）和质控线C（即质控线5）的位置。例如，将喹乙醇单克隆抗体稀释至浓度1mg/ml，将羊抗鼠IgG稀释至浓度2mg/ml，将两种溶液划线于层析膜上的检测区和质控区，形成检测线T（即检测线4）和质控线C（即质控线5）。 

2.金标记抗喹乙醇抗体聚酯纤维膜的制备 

用柠檬酸三钠还原四氯化金（即氯金酸）制备粒径40～60nm胶体金，调节pH后每毫升胶体金和15μg抗喹乙醇抗体混合进行标记并在260nm下测OD。将OD稀释到4，并加入到微孔7中烘干，微孔7底部即附着金标记抗喹乙醇抗体颗粒8(见图1)。 

3.将包被完成的硝酸纤维素膜（层析膜3）、样品处理垫2、吸水纸6分别粘贴在底衬1上。并切成3mm的试纸条。 

4.检测步骤： 

a.饲料样本：称取一定量的饲料，用稀释液进行溶解，离心取上清液，即得待检样品。猪尿样本：直接取猪尿作为检测样本，若浑浊，则离心取上清液。 

b.取出微孔7，平放在桌面上。 

c.用刻度吸管吸取混合均匀的待检样品，滴加200μl于加微孔7中，溶解2分钟。 

d.将试纸条按样品处理垫2的箭头方向插入微孔7中，反应5分钟。 

e.结果判定：图2中，阳性结果为质控线C位置出现红色线条，而检测线T位置不显示红色线条时，说明被检样品中有喹乙醇，判为阳性（见图2B）；阴性结果为质控线C位置出现红色线条，检测线T位置也出现红色线条，说明被检样品中没有喹乙醇存在，判为阴性（见图2A）；如果检测线T位置和质控线C位置均不显示红色线条，则判为检测无效（见图2C）。 

7.性能指标 

灵敏度：应用本实施例，喹乙醇浓度在0.1ng/ml以上为阳性。 

使用目的：本品用于筛查喹乙醇在用于饲料和猪尿的现场快速筛查，保障饲料安全。 

Claims (4)

1.一种喹乙醇免疫层析快速检测试纸条，其特征在于，所述试纸条包括样品处理垫、吸水纸、层析膜、底衬以及配套微孔金；在层析膜上包被喹乙醇抗原的检测线和质控线，层析膜的起始端粘贴样品处理垫，层析膜的末端粘贴吸水纸；所述层析膜粘贴在底衬上；所述配套微孔金为含有金标记抗喹乙醇抗体的微孔；试纸条的样品处理垫插入该微孔中进行检测。

2.如权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述吸水纸上还设有标签，所述样品处理垫上设有箭头方向标签。

3.如权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述层析膜粘贴在底衬中间。

4.如权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述微孔底部附着金标记抗喹乙醇抗体。

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