CN202433386U - 一种外斐氏试验卡 - Google Patents
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Abstract
本实用新型公开了一种用于快速检测斑疹伤寒外斐氏试验卡,其目的在于解决现有临床检测斑疹伤寒仍然采用经典的外斐氏试验存在的操作繁琐、耗时长的缺陷。本实用新型包括衬垫,所述衬垫上由左至右依次固定有具有吸水性能的样品垫、喷涂有带标记彩色胶乳颗粒的玻璃纤维垫、层析膜和具有吸水性能的吸收垫,样品垫右端搭接在玻璃纤维垫上,玻璃纤维垫的右端搭接在层析膜左端上,吸收垫的左端搭接在层析膜右端上,层析膜上设有由外斐氏反应抗原构成的试验线,试验线右侧的层析膜上还设有对照线。本实用新型能快速检测斑疹伤寒,检测操作简便,生产成本低。
Description
技术领域
本实用新型涉及免疫检测技术领域,特别涉及一种用于快速检测斑疹伤寒外斐氏试验卡。
背景技术
目前临床检测斑疹伤寒仍然采用经典的外斐氏试验,该试验将外斐氏试剂(包括变形杆菌OX19诊断菌液、变形杆菌OX2诊断菌液及变形杆菌OXK诊断菌液)中的三种诊断菌液(菌体抗原)分别与病人血清样品进行试管凝集试验检测血清中的相应抗体,37℃放置16-18小时后判定结果,观察试管底部凝集沉淀情况,凝集效价≥1:80以上者为阳性,如大同地区533名健康人肥达氏及外斐氏凝集试验结果初步调查报告(鲍季缚等,山西医药杂志,1978年第1期,42-44)记载的即是上述方法。
该方法存在的技术问题:1、操作繁琐:先将外斐氏试剂的三种诊断菌液分别用生理盐水10倍稀释;病人样品用生理盐水按1:20、1:40、1:80、1:160、1:320、1:640、1:1280倍比稀释,平行稀释3份;将平行稀释好的每个稀释度样品与相应已稀释的三种诊断菌液进行等量混合。2、耗时长:混合好的样品需在37℃放置16-18小时后才能判定结果。整个试验需要耗时20小时。
发明内容
本实用新型的目的在于解决现有临床检测斑疹伤寒仍然采用经典的外斐氏试验存在的操作繁琐、耗时长的缺陷,提供一种外斐氏试验卡,它能快速检测斑疹伤寒,检测操作简便,生产成本低。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是: 一种外斐氏试验卡,包括衬垫,所述衬垫上由左至右依次固定有具有吸水性能的样品垫、喷涂有带标记彩色胶乳颗粒的玻璃纤维垫、层析膜和具有吸水性能的吸收垫,样品垫右端搭接在玻璃纤维垫上,玻璃纤维垫的右端搭接在层析膜左端上,吸收垫的左端搭接在层析膜右端上,层析膜上设有由外斐氏反应抗原构成的试验线,试验线右侧的层析膜上还设有对照线。
外斐氏反应抗原为变形杆菌OX19、变形杆菌OX2及变形杆菌OXK三种菌体中的一种,所述试验线为变形杆菌OX19、变形杆菌OX2及变形杆菌OXK三种菌体中的一种固定在层析膜上形成的试验线。变形杆菌属的X19,X2,Xk菌株的菌体O抗原与斑疹伤寒立克次体和恙虫病立克次体有共同抗原,故可用OX19,OX2,OXk代替立克次体作为抗原与相应患者血清进行交叉凝集反应,此称外斐试验,辅助诊断立克次体病。本发明实用的变形杆菌OX19、变形杆菌OX2及变形杆菌OXK均为菌体,而非菌液,这样检测的灵敏度高。
作为优选,所述衬垫的主体为塑料垫,塑料垫的表面涂覆有不干胶,样品垫、玻璃纤维垫、层析膜和吸收垫均与衬垫粘接固定。
作为优选,样品垫、玻璃纤维垫、层析膜和吸收垫的宽度均与衬垫相配。
作为优选,所述玻璃纤维垫为喷涂有带SPA标记的彩色胶乳颗粒的玻璃纤维垫,所述对照线为SPA固定在层析膜上形成的对照线。
带标记彩色胶乳颗粒的标记选择SPA标记或鼠抗人IgG单克隆抗体标记。金黄色葡萄球菌A蛋白(Staphylococal Protein A,SPA)是一种从金黄色葡萄球菌细胞壁分离的蛋白质。早在1940年,Vevwey发现在某些金黄色葡萄球菌中,含有一种物质,在双向扩散试验中能与正常人血清形成沉淀。Jensen也发现类似现象,并将其命名为A抗原。直到1963年Lofkvist等分离了该抗原,并证明它是一种蛋白质。为将A与糖相区别,Grov将其命名为金黄色葡萄球菌A蛋白,简称SPA或蛋白A。由于SPA的一些免疫特性,它已引起广大免疫学者的兴趣,并发展成为免疫学上一种极为有用的工具。
作为优选,所述玻璃纤维垫为喷涂有带鼠抗人IgG单克隆抗体标记的彩色胶乳颗粒的玻璃纤维垫,所述对照线为羊抗鼠IgG抗体固定在层析膜上形成的对照线。羊抗鼠IgG(免疫球蛋白)多克隆抗体在胶体金法快速体外诊断产品中用来固定于硝酸纤维膜(固定相)上,与胶体金标记的单克隆抗体发生特异性免疫反应并显示一定的颜色,形成控制线进行免疫诊断。
本实用新型中样品垫、吸收垫均为市售的滤纸制成,优选吸水性能较强的定性滤纸,这样利于检测,增加检测速度。层析膜采用市售硝酸纤维素膜,硝酸纤维素膜又称为NC膜, 在胶体金试纸中用做C/T线的承载体,同时也是免疫反应的发生处。采用的硝酸纤维素膜型号135s、170s或180s(以秒为单位的定义:每4cm膜,水的层析时间是多少s)。玻璃纤维垫是玻璃纤维制品的一种。玻璃纤维是一种性能优异的无机非金属材料。英文原名为:glassfiber。成分为二氧化硅、氧化铝、氧化钙、氧化硼、氧化镁、氧化钠等。它是以玻璃球或废旧玻璃为原料经高温熔制、拉丝、络纱、织布等工艺。最后形成各类产品,玻璃纤维单丝的直径从几个微米到二十几米个微米,相当于一根头发丝的1/20-1/5,每束纤维原丝都有数百根甚至上千根单丝组成,通常作为复材料中的增强材料,电绝缘材料和绝热保温材料,电路基板等,广泛应用于国民经济各个领域。
玻璃纤维垫上均匀喷涂有带标记的彩色胶乳颗粒,彩色胶乳颗粒一般采用红色的胶乳颗粒,这样显色明显;彩色胶乳颗粒带的标记可以与人血清中的IgG抗体结合,试验线上是抗原,本实用新型的检测是在层析作用的推动下完成的。当血清样品被添加至样品垫上后,通过层析作用到达玻璃纤维垫,血清样品中的IgG抗体与带标记的彩色胶乳颗粒结合形成结合颗粒,然后进一步至层析膜上,在层析膜的层析作用下,结合颗粒向前移动,如血清中含有抗变形杆菌OX19、变形杆菌OX2及变形杆菌OXK的抗体时(即病变时),与相应的试验线的抗原结合,呈现颗粒的颜色线条,未结合的颗粒会继续向前移动,与对照线结合呈现颗粒的颜色线条,即显示试验线和对照线两条颜色线;如血清中不含有抗变形杆菌OX19、变形杆菌OX2及变形杆菌OXK的抗体时,颗粒与相应的试验线的抗原无法结合,试验线不显色,未结合的颗粒会继续向前移动,与对照线结合呈现颗粒的颜色线条,即只显示对照线一条颜色线。
因膜层析速度较快,几分钟内带标记的彩色胶乳颗粒即可移动完整个层析膜条,立刻可以判定结果,如试验线和对照线均显色,血清抗体为阳性;只有对照线一条线显色,血清抗体为阴性。
本实用新型的有益效果是:只需要将病人样品做1:100稀释,直接加到本发明上即可,操作十分简便;样品加到本发明上,10分钟肉眼即可观测检测结果,进行判定, 整个检测耗时约30分钟,耗时短。
附图说明
图1是本实用新型的一种俯视图;
图2是本实用新型的一种剖视分解图。
图中:1、样品垫,2、玻璃纤维垫,3、试验线,4、对照线,5、层析膜,6、吸收垫,7、衬垫。
具体实施方式
下面通过具体实施例,并结合附图,对本实用新型的技术方案作进一步的具体说明。
实施例1
一种外斐氏试验卡,包括衬垫7,衬垫7的主体为塑料垫,塑料垫的表面涂覆有不干胶,所述衬垫7上由左至右依次粘接固定有具有吸水性能的样品垫1(滤纸,上海金标生物技术有限公司)、玻璃纤维垫2(Ahlstrom 8964玻纤,上海杰一生物技术有限公司,型号JY-J101)、层析膜5(硝酸纤维素膜,Millipore公司,型号135s)和具有吸水性能的吸收垫6(滤纸,上海金标生物技术有限公司),玻璃纤维垫2上均匀喷涂有带SPA标记的红色胶乳颗粒(红色聚苯乙烯胶乳颗粒,上海杰一生物技术有限公司,型号 PSR030N ),胶乳颗粒进行标记的方法为本领域公知技术,在此不做赘述,样品垫1右端搭接在玻璃纤维垫2上,玻璃纤维垫2的右端搭接在层析膜5左端上,吸收垫6的左端搭接在层析膜5右端上,层析膜5中部的左侧有试验线3,试验线3是将变形杆菌OX19菌体(市售,购买自中国食品药品检定研究院下属的中国医学细菌保藏管理中心,购买的产品编号是49101)固定在层析膜5上形成,层析膜5中部的右侧有对照线4,对照线4是将SPA(市售,郑州百基生物技术有限公司)固定在层析膜5上形成,变形杆菌OX19、SPA的固定方法均为本领域公知技术,在此不做赘述。
本实施例各组件规格:样品垫长宽:20mm×4mm;玻璃纤维垫长宽:10mm×4mm;层析膜长宽:25mm×4mm;吸收垫长宽:20mm×4mm;衬垫长宽厚:30mm×4mm×1mm。
实施例2
一种外斐氏试验卡,包括衬垫7,衬垫7的主体为塑料垫,塑料垫的表面涂覆有不干胶,所述衬垫7上由左至右依次粘接固定有具有吸水性能的样品垫1(滤纸,上海金标生物技术有限公司)、玻璃纤维垫2(Ahlstrom 8964玻纤,上海杰一生物技术有限公司,型号JY-J101)、层析膜5(硝酸纤维素膜,Millipore有限公司,型号180s)和具有吸水性能的吸收垫6(滤纸,上海金标生物技术有限公司),玻璃纤维垫2上均匀喷涂有带SPA标记的红色胶乳颗粒,样品垫1右端搭接在玻璃纤维垫2上,玻璃纤维垫2的右端搭接在层析膜5左端上,吸收垫6的左端搭接在层析膜5右端上,层析膜5中部的左侧有试验线3,试验线3是将变形杆菌OX2菌体(市售,购买自中国食品药品检定研究院下属的中国医学细菌保藏管理中心,购买的产品编号是49102)固定在层析膜5上形成,层析膜5中部的右侧有对照线4,对照线4是将SPA(市售,郑州百基生物技术有限公司)固定在层析膜5上形成,变形杆菌OX2、SPA的固定方法均为本领域公知技术,在此不做赘述。
本实施例各组件规格:样品垫长宽:18mm×4mm;玻璃纤维垫长宽:10mm×4mm;层析膜长宽:25mm×4mm;吸收垫长宽:18mm×4mm;衬垫长宽厚:30mm×4mm×0.8mm。
实施例3
一种外斐氏试验卡,包括衬垫7,衬垫7的主体为塑料垫,塑料垫的表面涂覆有不干胶,所述衬垫7上由左至右依次粘接固定有具有吸水性能的样品垫1(滤纸,上海金标生物技术有限公司)、玻璃纤维垫2(Ahlstrom 8964玻纤,上海杰一生物技术有限公司,型号JY-J101)、层析膜5(硝酸纤维素膜,美国Pall公司,型号Pall Vivid 170s)和具有吸水性能的吸收垫6(滤纸,上海金标生物技术有限公司),玻璃纤维垫2上均匀喷涂有带鼠抗人IgG单克隆抗体(市售,上海博耀生物科技有限公司)标记的红色胶乳颗粒,样品垫1右端搭接在玻璃纤维垫2上,玻璃纤维垫2的右端搭接在层析膜5左端上,吸收垫6的左端搭接在层析膜5右端上,层析膜5中部的左侧有试验线3,试验线3是将变形杆菌OXK菌体(市售,购买自中国食品药品检定研究院下属的中国医学细菌保藏管理中心,购买的产品编号是49103)固定在层析膜5上形成,层析膜5中部的右侧有对照线4,对照线4是将羊抗鼠IgG抗体(市售,上海川翔生物科技有限公司)固定在层析膜5上形成,变形杆菌OXK、羊抗鼠IgG抗体的固定方法均为本领域公知技术,在此不做赘述。
本实施例各组件规格:样品垫长宽:20mm×4mm;玻璃纤维垫长宽:10mm×4mm;层析膜长宽:25mm×4mm;吸收垫长宽:20mm×4mm;衬垫长宽厚:30mm×4mm×1.2mm。
此外需要说明的是本实用新型各组件的规格可根据实际需求做出相应调整,发明人在此不做一一列举。
本实用新型使用时,只需要将病人样品做1:100稀释,直接加到本发明上即可,操作十分简便;样品加到本发明上,10分钟肉眼即可观测检测结果,进行判定,如试验线3和对照线4均显色,血清抗体为阳性;只有对照线4一条线显色,血清抗体为阴性, 整个检测耗时约30分钟,耗时短。
以上所述的实施例只是本实用新型的一种较佳的方案,并非对本实用新型作任何形式上的限制,在不超出权利要求所记载的技术方案的前提下还有其它的变体及改型。
Claims (5)
1. 一种外斐氏试验卡,其特征在于:包括衬垫(7),所述衬垫(7)上由左至右依次固定有具有吸水性能的样品垫(1)、喷涂有带标记彩色胶乳颗粒的玻璃纤维垫(2)、层析膜(5)和具有吸水性能的吸收垫(6),样品垫(1)右端搭接在玻璃纤维垫(2)上,玻璃纤维垫(2)的右端搭接在层析膜(5)左端上,吸收垫(6)的左端搭接在层析膜(5)右端上,层析膜(5)上设有由外斐氏反应抗原构成的试验线(3),试验线(3)右侧的层析膜(5)上还设有对照线(4)。
2.根据权利要求1所述的一种外斐氏试验卡,其特征在于:所述衬垫(7)的主体为塑料垫,塑料垫的表面涂覆有不干胶,样品垫(1)、玻璃纤维垫(2)、层析膜(5)和吸收垫(6)均与衬垫(7)粘接固定。
3.根据权利要求1或2所述的一种外斐氏试验卡,其特征在于:样品垫(1)、玻璃纤维垫(2)、层析膜(5)和吸收垫(6)的宽度均与衬垫(7)相配。
4.根据权利要求1或2所述的一种外斐氏试验卡,其特征在于:所述玻璃纤维垫(2)为喷涂有带SPA标记的彩色胶乳颗粒的玻璃纤维垫(2),所述对照线为SPA固定在层析膜(5)上形成的对照线(4)。
5.根据权利要求1或2所述的一种外斐氏试验卡,其特征在于:所述玻璃纤维垫(2)为喷涂有带鼠抗人IgG单克隆抗体标记的彩色胶乳颗粒的玻璃纤维垫(2),所述对照线为羊抗鼠IgG抗体固定在层析膜(5)上形成的对照线(4)。
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CN102590500A (zh) * | 2012-01-16 | 2012-07-18 | 宁波天润生物药业有限公司 | 外斐氏试验卡 |
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