CN201857394U - 一种用于胰岛干细胞分离全程温度控制系统 - Google Patents
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Abstract
本实用新型提供一种用于胰岛干细胞分离全程温度控制系统,由左右罐盖锁扣、循环液体出入口、不锈钢消化罐、温度传感器、温度传感器连接线、半导体变温元件、散热风机连接线、功率输出电路板、散热风机、控制箱电源开关、液晶显示屏、输入键盘、控制箱、不锈钢消化罐罐盖、循环液体出口、链接插座、散热片、功率输出电路板链接电缆和固定螺丝组成。该系统利用热电冷却器的快速调温功能,通过控制变温元件两端的电压极性实现制冷和制热,并利用单片机调节PID参数,从而实现对目标温度的调控。实验结果表明,该系统能够达到升降温温度过冲小于0.4℃,恒温精度±0.3℃,胰岛干细胞分离的数量和活性均有显著的提高。
Description
技术领域
本实用新型属医疗仪器,主要涉及一种用于胰岛干细胞分离全程温度控制系统。
背景技术
糖尿病(Diabetes mellitus,DM)是一种严重威胁人类健康的常见病和多发病。目前全球糖尿病患者人数2.23亿,预计到2025将增至3.33亿,增长率高达73%,其中亚洲的增长率为91%。我国糖尿病患者约2000万,由于糖尿病是一种终身疾病,并发症较多,因此成为致死率仅次于癌症及心血管疾病的第3号杀手。糖尿病正严重威胁人类的健康。
糖尿病的防治措施主要包括:糖尿病的系统教育、糖尿病的饮食疗法、正确而适当的运动疗法、血糖的监测、药物治疗包括口服药物与注射胰岛素以及外科治疗。饮食疗法、运动疗法只能有限程度的控制Ⅱ型糖尿病患者的血糖,不是糖尿病患者控制血糖的主要治疗方法。口服降糖药物和胰岛素注射治疗不能实时有效的控制糖尿病患者的血糖,因此都无法避免糖尿病并发症的发生。胰腺器官移植虽然可以有效地控制血糖代谢提高生活质量。但胰腺移植手术创伤大、并发症多,还受到供体短缺,术后大剂量免疫抑制剂应用等限制。因此这些治疗方法都不是理想的根治糖尿病的方法。胰腺及胰岛干细胞移植作为一种全新的糖尿病的根治方法,它具有移植手术风险小,成功率高,并发症少,可重复移植,免疫抑制剂用量小,可达到胰腺移植相似的治疗效果。通过胰岛干细胞移植可以动态控制患者的血糖代谢,从而实现根治糖尿病,胰岛移植是目前最理想的糖尿病治疗方法,因此引起了全球医学研究人员的极大兴趣。
2000年,加拿大EDMONTON报告了使用2~4个胰腺进行分离,多次移植,使1型糖尿病患者完全摆脱胰岛素的方法。目前成人胰岛细胞移植作为治疗糖尿病的一种新方法,已经展现出极其广阔的临床应用前景及巨大的社会与经济效益。
目前胰岛移植细胞分离温度控制的主要方法:一种方法是通过冰袋的冷却,在酶灌注时将温度维持在4℃,当进行酶消化时再用电热丝加热至37℃;另外一种方法是在水浴箱上实现4℃和37℃的控制。用这两种方法来进行胰岛分离的温度控制效果都不很理想。用第一种方法进行温控时,由于电热丝的热惯性很大,经常发生温度过冲,温控精度不够,严重影响了胰岛细胞的分离数量和存活质量。第二种方法虽然可以比较好地实现温度控制的要求,但是水浴加热升温缓慢,升温速率不高。酶的消化有时间性,过长的加热过程会降低酶对胰腺的催化效果,而且水浴方法需要管路连接,在管路上会有热量散发,不能保证酶进入消化罐时的温度为37℃。
发明内容
本实用新型的目的是提供一种用于胰岛干细胞分离全程温度控制系统,由左右罐盖锁扣、循环液体入口、不锈钢消化罐、温度传感器、温度传感器连接线、半导体变温元件、散热风机连接线、功率输出电路板、散热风机、控制箱电源开关、液晶显示屏、输入键盘、控制箱、不锈钢消化罐罐盖、循环液体出口、链接插座、散热片、功率输出电路板链接电缆、固定螺丝组成,不锈钢消化罐罐盖通过左罐盖锁扣和右罐盖锁扣紧密盖在不锈钢消化罐上,循环液体入口和循环液体出口连接外接循环泵,温度传感器通过温度传感器连接线连接功率输出电路板和功率输出电路板链接电缆,半导体变温元件安装在功率输出电路板上,散热片、功率输出电路板、半导体变温元件和不锈钢消化罐的底部通过固定螺丝紧密接触,散热风机通过散热风机连接线与功率输出电路板相连,功率输出电路板通过链接插座和功率输出电路板链接电缆连接到控制箱,控制箱上设置控制箱电源开关、液晶显示屏输入键盘。控制箱电源开关用于开启系统的电源,液晶显示屏用于显示系统工作状态,输入键盘用于系统的各种信息输入。
系统的控制电路主要由温度传感器、线性校正与放大电路、CPU、光耦隔离、PWM脉宽调制电路、功率输出电路、不锈钢消化罐体、显示器、键盘等组成。本实用新型的温度控制对象是胰岛及胰腺干细胞分离的消化罐,通过键盘输入消化罐工作温度设定值,高灵敏度的热敏电阻温度传感器所测量的温度信号,经CPU(STC12C5A60AD/S2)的A/D口进行A/D转换,CPU把所测的温度值送LCD液晶屏显示,同时将其与键盘设定的温度值进行比较,将差值进行PID处理后通过PWM脉宽调制控制功率输出电路,实现对半导体制冷器的精确控制,从而构成了实时闭环温度控制系统。
本实用新型的有益之处是:胰岛干细胞分离的数量和活性是胰岛干细胞移植成功的关键,用于胰岛干细胞分离的复合胶原酶的催化效率和温度是密切相关的,胰岛干细胞分离过程需要精确的温度控制。本实用新型对传统的胰岛分离温度控制方式进行了全面的改进,提出了一种简便且精度高、控制速度快的温度控制系统。本实用新型系统利用热电冷却器的快速调温功能,通过控制变温元件两端的电压极性实现制冷和制热,并利用单片机调节PID参数,从而实现对目标温度的调控。实验结果表明,该系统能够达到升降温温度过冲小于0.4℃,恒温精度±0.3℃,对实验小鼠胰岛干细胞分离的数量和活性均有显著的提高。本实用新型设计合理,所述系统主要用于医院胰岛干细胞移植手术的胰岛干细胞分离过程的温度精确控制,提高胰岛干细胞的分离数量和质量,为胰岛干细胞移植手术提供安全保障。
附图说明
图1为本实用新型系统的结构示意图。
图2为温度控制系统工作框图。
图3为STC12C5A60AD/S2单片机应用电路图。
图4为温度检测与放大电路图。
图5为开关电源总电路图。
图6为功率输出控制总图。
图7为串口通讯电路图。
图8为键盘接口电路图。
图9为串行EEPROM电路图。
图10为LCD显示电路图。
图11为开关电源电路与控制电路的PCB板设计图。
图12为CPU及外围电路的PCB板设计图。
图13为PID控制系统框图。
图14为PID参数自整定流程图。
图15为降温过程温度与时间的二维图。
图16为升温过程温度与时间的二维图。
图17为系统应用前后胰岛分离效果对照图。
具体实施方案
本实用新型结合附图和实施例作进一步的说明。
实施例1
参见图1,一种用于胰岛干细胞分离全程温度控制系统,主要由左罐盖锁扣1和右罐盖锁扣15、循环液体入口2、不锈钢消化罐3、温度传感器4、温度传感器连接线5、8块半导体变温元件6(marlow100)、散热风机连接线7、功率输出电路板8、散热风机9、控制箱电源开关10、液晶显示屏11、输入键盘12、控制箱13、不锈钢消化罐罐盖14、循环液体出口16、链接插座17、散热片18、功率输出电路板链接电缆19、固定螺丝20组成。
不锈钢消化罐罐盖14通过左罐盖锁扣1和右罐盖锁扣15紧密盖在不锈钢消化罐3上,循环液体入口2和循环液体出口16连接外接循环泵,温度传感器4通过温度传感器连接线5连接功率输出电路板8和功率输出电路板链接电缆19,温度传感器4把不锈钢消化罐3内的温度信号通过温度传感器连接线5、功率输出电路板8、功率输出电路板链接电缆19输入到控制箱13内,半导体变温元件6安装在功率输出电路板8上,散热片18、功率输出电路板8、半导体变温元件6和不锈钢消化罐3的底部通过固定螺丝20紧密接触,半导体变温元件6在制冷时其热端产生热量通过散热片18散发热量,散热风机9通过散热风机连接线7与功率输出电路板8相连,主要是对散热片18吹风降温,功率输出电路板8通过链接插座17和功率输出电路板链接电缆19连接到控制箱13,控制箱13上设置控制箱电源开关10、液晶显示屏11和输入键盘12。控制箱电源开关10用于开启系统的电源,液晶显示屏11用于显示系统工作状态,输入键盘12用于系统的各种信息输入。
使用时,打开控制箱电源开关10,通过输入键盘12设定消化罐的开始温度(4℃),等消化罐3的温度达到4℃并恒温时,把离体的胰腺放入不锈钢消化罐3内,通过消化罐的循环液体入口2外接循环泵的入口,通过消化罐的循环液体出口16连接到外接循环泵的出口,通过左右罐盖锁扣1、15盖好不锈钢消化罐罐盖14,启动外接循环泵进行胰腺的复合胶原酶的灌注。灌注结束后,通过输入键盘12设定系统的目标温度为37℃,系统马上会加温,大约5分钟后不锈钢消化罐3的温度达到37℃并恒温,把不锈钢消化罐3放入振荡器进行振荡消化,消化结束后,通过输入键盘12设定系统的目标温度为4℃,结束供体胰腺的灌注与消化。
实施例2温度控制系统的主要电路设计与说明:
参见图2,系统的控制电路主要由温度传感器、线性校正与放大电路、CPU、光耦隔离、PWM脉宽调制电路、功率输出电路、不锈钢消化罐体、显示器、键盘等组成。本实用新型的温度控制对象是胰岛及胰腺干细胞分离的消化罐,通过键盘输入消化罐工作温度设定值,高灵敏度的热敏电阻温度传感器所测量的温度信号,经CPU(STC12C5A60AD/S2)的A/D口进行A/D转换,处理器把所测的温度值送LCD液晶屏显示,同时将其与键盘设定的温度值进行比较,将差值进行PID处理后通过PWM脉宽调制控制功率输出电路,实现对半导体制冷器的精确控制,从而构成了实时闭环温度控制系。
1.CPU(STC12C5A60AD/S2)的应用电路设计
STC12C5A60AD/S2是单时钟、机器周期为1T的单片机,它是具有高速、低功耗和超强抗干扰能力的新一代8051单片机,它的指令代码完全兼容传统8051单片机的指令代码,但它的运行速度要比传统8051单片机快8-12倍。
STC12C5A60AD/S2内部集成MAX810专用复位电路,2路PWM输出,8路10位A/D转换(250K/S)。STC12C5A60AD/S2芯片功能全面,抗干扰能力强,要求系统的外围电路简单,适合胰岛及胰腺干细胞分离的消化罐温度控制系统的应用。
在本实用新型的STC12C5A60AD/S2单片机的应用电路参见图3。
2.温度检测与放大电路的设计
在胰岛干细胞分离过程中,需要温控系统升温阶段升温速率高,恒温阶段控温精度高,系统对整个温度测量和控制系统的要求很高。采用10K的热敏电阻温度传感器可以较好的满足系统的要求。系统的温度检测与放大电路参见图4。J2插座的1、2脚是接10K热敏电阻温度传感器,由IC1、R24组成对数放大电路,线性校正10K热敏电阻的R-T曲线,再由IC3运放放大。由IC2、Y3等构成消除温度对反向的影响。
3.电源电路的设计
本实用新型的开关电源的电路图参见图5,本实用新型的开关电源主要由MOSFET功率开关管、UC3844脉宽调制芯片、稳压器TL431、光耦等元件构成。
图5中的MOSFET功率开关管的源极并联联接的R18、R19、R20是电流取样电阻,变压器原边电感电流流经该电阻产生的电压经滤波后送入UC3844的脚5,构成电流控制闭环。当脚5电压超过1V时,PWM锁存器将封锁脉冲,对电路启动过流保护功能;UC3844的脚14与脚7间电阻R23及脚7的接地电容C22决定了芯片内部的振荡频率,由于UC3844内部有个分频器,所以驱动MOSFET功率开关管的方波频率为芯片内部振荡频率的一半;变压器原边并联的RCD缓冲电路是用于限制高频变压器漏感造成的尖峰电压。变压器副边整流二极管并联的RC回路是为了减小二极管反向恢复期间引起的尖峰。
MOSFET功率管旁边的RCD缓冲电路是为了防止MOSFET功率管在关断过程中承受大反压。缓冲电路的二极管选择快速恢复二极管,而变压器二次侧的整流二极管选择超快恢复二极管。
当输出电压升高时,经两电阻R14、R15分压后接到TL431的参考输入端(误差放大器的反向输入端)的电压升高,与TL431内部的基准参考电压2.5V作比较,使得TL431阴阳极间电压Vka降低,进而光耦二极管的电流If变大,于是光耦集射极动态电阻变小,集射极间电压变低,也即UC3844的脚1的电平变低,经过内部电流检测比较器与电流采样电压进行比较后输出变高,PWM锁存器复位,或非门输出变低,于是关断开关管,使得脉冲变窄,缩短MOSFET功率管的导通时间,于是传输到次级线圈和自馈线圈的能量减小,使输出电压Vo降低。反之亦然,总的效果是令输出电压保持恒定,不受电网电压或负载变化的影响,达到了实现输出闭环控制的目的。
因为此电源设计输出主要是用于变温元件的功率输出,本实用新型设计的温度控制系统实现精确温度控制是通过单片机软件编程实现PID控制的,所以变温元件的功率输出的电源要受CPU的控制。脉宽调制控制信号为高电平时,D3截止,开关电源不受影响,电源电压输出最大;当脉宽调制控制信号为低电平时,D3导通,光耦二极管导通,集射极间电压变低,也即UC3844的脚1的电平变低,经过内部电流检测比较器与电流采样电压进行比较后输出变高,PWM锁存器复位,或非门输出变低,于是关断开关管,使得脉冲变窄,缩短MOSFET功率管的导通时间,于是传输到次级线圈和自馈线圈的能量减小,使输出电压Vo降低。光耦隔离电路功能是使输入和输出地隔离,防止输出端大电流通过地流入输入端,对弱电部分造成干扰。由D7、D13、C14组成的倍压电路输出电压V2,V2是供给功率输出管的开启电压。D7、C16、C17、C18、C19、L3组成半导体变温元件的工作电压(6-20V可控)。D6、C10、三端稳压7812、C11等输出+12V,C12、三端稳压7805、C13构成+5V电压输出。
4.功率输出与控制电路设计
系统的功率输出与控制电路参见图6。胰岛干细胞分离过程要求系统有制冷和制热的功能,需要对半导体变温元件的功率输出电压极性进行变换。本实用新型采用H桥驱动控制电路来实现半导体变温元件两端的电压极性的变换。H桥驱动控制电路主要是把控制电平调整到H桥需要的电平,保证MOS管工作在开关状态。TEC连接在接插件J1的两端。当需要加热时,CPU输出控制信号使Q1与Q4导通,Q2与Q3截止,TEC的1端为高电平,电流通过TEC的1脚流过TEC到2脚,TEC处于加热状态。当需要制冷时,CPU输出控制信号使Q2与Q3导通,Q1与Q4截止,TEC的2端为高电平,电流通过TEC的2脚流过TEC到1脚,TEC处于制冷状态。通过对脉宽的控制开关电源的输出电压就可以调节加热制冷升降温速率,即可以控制TEC的温度。
CPU输出的控制信号通过接插件JP1的8、10脚分别控制光偶U5、U6的导通与关闭,两路控制信号有四种情况出现。本论文只要求半导体变温元件TEC加热或者制冷两种工作状态,本论文设计U5、U6全导通与全关闭时半导体变温元件TEC不工作,U5、U6为10时TEC制冷,U5、U6为01时TEC加热。
(1)U5、U6全导通:二极管D9、D10导通,导致Q15、Q18同时导通,Q15、Q18的c极电压下降,Q1、Q3截止,半导体变温元件TEC无电压输出,因此TEC不工作。
(2)U5、U6全关闭:D8、D11截止,则Q9导通,Q9e极电压下降,导致Q12截止,则Q13、Q14均导通,Q2、Q4不工作,半导体变温元件TEC无电压输出,因此TEC不工作。
(3)U5、U6为1、0时:因为U5导通,D8、D9导通,所以导致Q18导通,因为Q9是截止的,所以Q12导通,Q12、Q18导通导致Q3截止,因为此时Q13也是导通的,所以Q2截止;因为U6截止,D10、D11截止,Q15不导通,所以Q1导通,因为Q14导通,所以Q13被锁定不导通,则Q4导通,因此工作电压由V1→Q1→J1的1脚→TEC的正极→TEC的负极→J1的2脚→Q4→R42、R43→地。半导体变温元件TEC正向导通,因此TEC加热。
(4)U5、U6为0、1时:因为U6导通,D10、D11导通,所以导致Q15导通,因为Q9是截止的,所以Q12导通,Q12、Q15导通导致Q1截止,因为此时Q14也是导通的,所以Q4截止;因为U5截止,D8、D9截止,Q18不导通,所以Q2导通,因为Q13导通,所以Q14被锁定不导通,则Q2导通,因此工作电压由V1→Q2→J1的2脚→TEC的负极→TEC的正极→J1的1脚→Q2→R42、R43→地。半导体变温元件TEC反向导通,因此TEC制冷。
保护电路的设计:
(1)过流保护电路:当流过TEC的电流不断增大时,通过R10流过U7A运放3脚的电流也不断增加,U7A运放3脚的电压不断上升,U7A运放3脚的电压大于它2脚的设定电压时,U7A运放1脚输出高电压,导致U7B的7脚输出高电平。则Q15、Q18导通,Q1、Q3截止,半导体变温元件TEC无电压输出,保护电路起作用,TEC不工作。
(2)CPU工作电压检测保护电路:当CPU的+5V的工作电压正常时,+5V电压通过Q10加到光耦U2上,U2导通,CPU收到+5V电源正常的信号;当CPU的+5V的工作电压没有的时候,没有电压加到光耦U2上,U2截止,CPU收到+5V电源不正常的信号,CPU不工作。
(3)PWM控制电路:CPU计算出的PID控制信号通过光耦U4控制Q8的导通与否,再通过U7B和C5组成的积分放大电路把PWM控制信号转换成模拟控制量,经R16和D3控制开关电源的输出电压。
6.其它相关电路
(1)串口通讯电路设计参见图7。
(2)键盘接口电路的设计参见图8。
(3)串行EEPROM电路的设计参见图9。
(4)LCD显示电路的设计参见图10。
7.电路的PCB板的设计
开关电源电路与控制电路的PCB板设计参见图11,CPU及外围电路的PCB板设计参见图12。
8.系统温度控制策略
系统温度控制采用PID控制,PID器是一种比例、积分、微分并联负反馈控制器。本实用新型的PID控制系统框图参见图13。
PID控制的参数整定采用增量式PID参数整定。PID控制系统参数自整定流程图参见图14。
实施例3
糖尿病病人进行胰岛干细胞移植手术时,首先需要从供体的胰腺中分离出一定数量和质量的胰岛干细胞,从供体中分离出高活性和高数量的胰岛干细胞是成人胰岛干细胞移植成功的关键。用于胰岛干细胞分离的复合胶原酶的活性和温度是密切相关的,温度对胰岛干细胞分离效果影响很大,因此胰岛干细胞分离过程需要精确的温度控制。本实用新型使用方便,操作简单。使用时打开控制箱电源开关(10),通过输入键盘(12)设定好不锈钢消化罐(3)的开始温度(4℃),等不锈钢消化罐(3)的温度达到4℃并恒温时,把经过修整的供体的胰腺放入不锈钢消化罐(3)内,把供体胰腺的主胰动脉连接到不锈钢消化罐(3)的循环液体入口(2)的消化罐内端,把供体的主胰静脉连接到消化罐内的循环液体出口(16),盖好不锈钢消化罐罐盖(14),启动外接循环泵进行胰腺的复合胶原酶的灌注。灌注结束后,通过键盘设定系统的目标温度为37℃,系统马上会加温,大约5分钟后不锈钢消化罐(3)的温度达到37℃并恒温,把不锈钢消化罐(3)放入振荡器进行振荡消化,消化结束后,通过输入键盘(12)设定系统的目标温度为4℃,结束供体胰腺的灌注与消化。
测试结果
我们在实验时采用200ml生理盐水代替胰腺与胶原酶混合物。模拟胰腺的灌注与消化过程,对系统温度进行监测。测温采用精度为0.1℃的电子温度计,测温的传感器放置在消化罐内部中央,8块热电冷却器变温元件放置在消化罐的底部。开始测量前消化罐内的水温19.7℃,环境温度20.5℃。我们首先要测试系统由环境温度降到4.0℃降温速率与保持4.0℃恒温的效果,然后测试系统由4.0℃升到37.0℃升温速率与保持37.0℃恒温的效果。系统在消化罐内的水温19.7℃时开始降温,降到4℃,所用的时间约为5分钟,恒温温度波动小于0.3℃,降温过程温度与时间的二维图参见图15。系统在消化罐内的水温4.0℃时开始升温,升到37.0℃,所用时间约为8分钟,恒温温度波动小于0.3℃,升温过程温度与时间的二维图参见图16。测试结果表明,在升降温速度、升降温过冲效应以及恒温效果方面,本系统都达到了既定的目标和要求。
我们通过对实验小鼠的胰腺灌注与消化过程的温度控制来对比本实用新型的优越性。采用水浴法来控制胰腺的灌注与消化过程的温度控制,实验小鼠的分离纯化后获得的胰岛数量比较少,统计小鼠获得胰岛量为60~120IEQ,分离出胰岛干细胞的活性约60-70%;本实用新型投入使用后,统计获得胰岛的量为200~230IEQ,胰岛细胞活率>90%。图17是本系统投入应用前后,实验小鼠胰岛分离效果,图17(A)是系统使用前的小鼠胰岛干细胞分离后的图片,胰岛干细胞分离的数量和质量都很差;图17(B)是系统使用后的小鼠胰岛干细胞分离后的图片,胰岛干细胞的数量和质量都有明显的提高,结果表明应用该系统进行分离,效果显著。
Claims (2)
1.一种用于胰岛干细胞分离全程温度控制系统,其特征在于,由左罐盖锁扣(1)、右罐盖锁扣(15)、循环液体入口(2)、不锈钢消化罐(3)、温度传感器(4)、温度传感器连接线(5)、半导体变温元件(6)、散热风机连接线(7)、功率输出电路板(8)、散热风机(9)、控制箱电源开关(10)、液晶显示屏(11)、输入键盘(12)、控制箱(13)、不锈钢消化罐罐盖(14)、循环液体出口(16)、链接插座(17)、散热片(18)、功率输出电路板链接电缆(19)、固定螺丝(20)组成,不锈钢消化罐罐盖(14)通过左右罐盖锁扣(1)和右罐盖锁扣(15)紧密盖在不锈钢消化罐(3)上,循环液体入口(2)和循环液体出口1(16)连接外接循环泵,温度传感器(4)通过温度传感器连接线(5)连接功率输出电路板(8)和功率输出电路板链接电缆(19),半导体变温元件(6)安装在功率输出电路板(8)上,散热片(18)、功率输出电路板(8)、半导体变温元件(6)和不锈钢消化罐(3)的底部通过固定螺丝(20)紧密接触,散热风机(9)通过散热风机连接线(7)与功率输出电路板(8)相连,功率输出电路板(8)通过链接插座(17)和功率输出电路板链接电缆(19)连接到控制箱(13),控制箱(13)上设置控制箱电源开关(10)、液晶显示屏(11)和输入键盘(12)。
2.根据权利要求1所述的一种用于胰岛干细胞分离全程温度控制系统,其特征在于,设置8块半导体变温元件(6)。
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