CN201378220Y - 多功能培养观察池 - Google Patents

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CN201378220Y CN200920099313U CN200920099313U CN201378220Y CN 201378220 Y CN201378220 Y CN 201378220Y CN 200920099313 U CN200920099313 U CN 200920099313U CN 200920099313 U CN200920099313 U CN 200920099313U CN 201378220 Y CN201378220 Y CN 201378220Y
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周晋
王巍
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Abstract

一种多功能培养观察池,它涉及一种培养观察池。本实用新型的目的是为了解决现有的激光扫描共聚焦显微镜专用培养观察皿存在的实验精度低、易产生虹吸现象、细胞贴壁所需时间长,且无法使血液原代细胞和悬浮细胞贴壁以及实验时间长的问题。本实用新型的皿底板的上端面上开有培养观察槽,皿底板的上端面上还开有两个灌流槽,两个灌流槽沿培养观察槽的轴线对称设置,两个灌流槽均与培养观察槽连通,且两个灌流槽的深度h均小于培养观察槽的深度H,每个培养观察皿均安装在固定台上开设的相应的安装槽内,培养观察槽的底面上涂有细胞生长基质涂层。本实用新型提高了实验精度,避免了虹吸现象的发生,促使血液原代细胞和悬浮细胞贴壁并缩短了实验时间。

Description

多功能培养观察池
技术领域
本实用新型涉及一种培养观察池。
背景技术
目前,医学界普遍采用的激光扫描共聚焦显微镜专用培养观察皿是在底板1上开一个直径为10mm左右的圆孔1-1,再用胶粘上一个0.13mm~0.17mm厚盖玻片2,圆孔1-1的壁与盖玻片2之间形成圆柱形空槽用于观察细胞,荧光探针标记也在圆柱形空槽中进行(如图1所示)。上述培养观察皿存在如下缺点:一、培养观察皿的深度较浅,定量加入的观察液极易流出来,而后向观察液中加入药物,因观察液流出使预先计算好的药物浓度发生改变,从而降低了实验精度;二、培养观察皿的深度较浅还会在灌流时产生虹吸现象;三、细胞贴壁所需时间长,且无法使血液原代细胞和悬浮细胞贴壁;四、实验时间长。
实用新型内容
本实用新型的目的是为了解决现有的激光扫描共聚焦显微镜专用培养观察皿存在的实验精度低、易产生虹吸现象、细胞贴壁所需时间长,且无法使血液原代细胞和悬浮细胞贴壁以及实验时间长的问题,进而提供一种多功能培养观察池。
本实用新型的技术方案是:多功能培养观察池由至少两个培养观察皿和固定台组成,每个培养观察皿包括皿壁板、皿底板和细胞生长基质涂层,所述皿壁板和皿底板由上至下制成一体构成皿体,所述皿底板的上端面上沿培养观察皿的轴向开有培养观察槽,所述皿底板的上端面上沿培养观察皿的轴向还开有两个灌流槽,所述两个灌流槽沿培养观察槽的轴线对称设置,所述两个灌流槽均与培养观察槽连通,且两个灌流槽的深度h均小于培养观察槽的深度H,所述培养观察槽的底面到皿底板的下端面的距离δ为0.1mm~1mm,每个培养观察皿分别安装在固定台上开设的相应的安装槽内,所述培养观察槽的底面上涂有细胞生长基质涂层。
本实用新型与现有技术相比具有以下有益效果:本实用新型的培养观察槽与两个灌流槽连通,可定时或随时对培养观察皿进行灌流更换观察液,控制观察液量,避免了细胞观察液的流失,给细胞生长提供一个良好环境,从而保证了预先计算好的药物浓度恒定,提高了实验精度;本实用新型的培养观察槽与两个灌流槽连通还有效避免了虹吸现象的发生;本实用新型的培养观察槽的底面上的细胞生长基质涂层,缩短了细胞贴壁所需的时间,促使血液原代细胞和悬浮细胞完全贴壁;另外本实用新型还避免了激光扫描共聚焦显微镜的反复对焦,缩短了实验时间。
附图说明
图1是现有的激光扫描共聚焦显微镜专用培养观察皿的结构示意图,图2是本实用新型的主视剖视图,图3是图2的俯视图,图4是图2的a处局部放大图。
具体实施方式
具体实施方式一:(参见图2~图4)本实施方式的多功能培养观察池由至少两个培养观察皿8和固定台7组成,每个培养观察皿8包括皿壁板4、皿底板5和细胞生长基质涂层9,所述皿壁板4和皿底板5由上至下制成一体构成皿体3,所述皿底板5的上端面上沿培养观察皿8的轴向开有培养观察槽5-1,所述皿底板5的上端面上沿培养观察皿8的轴向还开有两个灌流槽5-2,所述两个灌流槽5-2沿培养观察槽5-1的轴线对称设置,所述两个灌流槽5-2均与培养观察槽5-1连通,且两个灌流槽5-2的深度h均小于培养观察槽5-1的深度H,所述培养观察槽5-1的底面到皿底板5的下端面的距离δ为0.1mm~1mm,每个培养观察皿8分别安装在固定台7上开设的相应的安装槽7-1内,所述培养观察槽5-1的底面上涂有细胞生长基质涂层9。
具体实施方式二:(参见图4)本实施方式的培养观察槽5-1的底面到皿底板5的下端面的距离δ为0.13mm。如此设置,实验精度更高,激光扫描共聚焦显微镜下的观察图清晰。其它组成和连接关系与具体实施方式一相同。
具体实施方式三:(参见图4)本实施方式的培养观察槽5-1的底面到皿底板5的下端面的距离δ为0.17mm。如此设置,实验精度更高,激光扫描共聚焦显微镜下的观察图清晰。其它组成和连接关系与具体实施方式一相同。
具体实施方式四:(参见图4)本实施方式的培养观察槽5-1的底面上的细胞生长基质涂层9为多聚赖氨酸涂层。分子量为7~30ku多聚赖氨酸(poly-lysine)可以使细胞贴壁时间缩短至1小时,急性分离细胞贴壁时间缩短至30分钟;并促使血液原代细胞、悬浮细胞完全贴壁,血液原代细胞及悬浮细胞的贴壁时间在10小时以内。其它组成和连接关系与具体实施方式一相同。
具体实施方式五:(参见图4)本实施方式的培养观察槽5-1的底面上的细胞生长基质涂层9为纤维连接蛋白涂层。纤维连接蛋白(fibronectin)可以使贴壁细胞贴壁时间缩短至4小时,急性分离细胞贴壁时间缩短至30分钟;并促使血液原代细胞、悬浮细胞完全贴壁,悬浮细胞的贴壁时间在12小时以内,血液原代细胞贴壁时间在11小时以内。其它组成和连接关系与具体实施方式一相同。
具体实施方式六:(参见图4)本实施方式的培养观察槽5-1的底面上的细胞生长基质涂层9为层黏蛋白涂层。层黏蛋白(laminin)可以使贴壁细胞贴壁时间缩短至3.5小时,急性分离细胞贴壁时间缩短至1小时;并促使血液原代细胞、悬浮细胞完全贴壁,悬浮细胞的贴壁时间在7小时以内,血液原代细胞贴壁时间在8小时以内。其它组成和连接关系与具体实施方式一相同。
具体实施方式七:(参见图4)本实施方式的培养观察槽5-1的底面上的细胞生长基质涂层9为胶原涂层。胶原可以使贴壁细胞贴壁时间缩短至3.5小时,急性分离细胞贴壁时间缩短至25分钟;并促使血液原代细胞、悬浮细胞完全贴壁,悬浮细胞的贴壁时间在8小时以内,血液原代细胞贴壁时间在9小时以内。其它组成和连接关系与具体实施方式一相同。
具体实施方式八:(参见图4)本实施方式的培养观察槽5-1的底面上的细胞生长基质涂层9为韧黏素涂层。韧黏素(tenascins)可以使贴壁细胞贴壁时间缩短至5小时,急性分离细胞贴壁时间缩短至30分钟;并促使血液原代细胞、悬浮细胞完全贴壁,悬浮细胞的贴壁时间在9小时以内,血液原代细胞贴壁时间在12小时以内。其它组成和连接关系与具体实施方式一相同。
具体实施方式九:(参见图4)本实施方式的培养观察槽5-1的底面上的细胞生长基质涂层9为层粘蛋白涂层。层粘蛋白(vitronectin)可以使贴壁细胞贴壁时间缩短至4.5小时,急性分离细胞贴壁时间缩短至30分钟;并促使血液原代细胞、悬浮细胞完全贴壁,悬浮细胞的贴壁时间在8小时以内,血液原代细胞贴壁时间在9小时以内。其它组成和连接关系与具体实施方式一相同。
具体实施方式十:(参见图4)本实施方式的培养观察皿8还增加有皿盖6,所述皿盖6盖装在皿体3的上端面上。如此设置,有效的防止了药物的挥发,避免了预先计算好的药物浓度因药物挥发而发生改变,使得实验精度更精准。其它组成和连接关系与具体实施方式一、二、三、四、五、六、七、八或九相同。
采用现有的培养观察皿及本实用新型在相同的条件下对急性早幼粒细胞白血病NB4细胞,用台氏液洗涤两次,然后用5μmol/L的Fluo-3/AM染色,再加入0.03%PluronicF-127在37℃恒温水浴中孵育45min,然后用台氏液再洗涤两次去除细胞外残留的Fluo-3/AM,最后在激光扫描共聚焦显微镜下观察。所述激光扫描共聚焦显微镜由日本奥林巴斯株会社(Olympus)生产,其型号为Fluoview-FV300。采用现有的培养观察皿得到的图像模糊,而且其中的细胞移动明显;采用本实用新型得到的图像清晰,细胞移动不明显,可见细胞已经完全贴在培养观察皿壁上。

Claims (5)

1、一种多功能培养观察池,它由至少两个培养观察皿(8)和固定台(7)组成,其特征在于:每个培养观察皿(8)包括皿壁板(4)、皿底板(5)和细胞生长基质涂层(9),所述皿壁板(4)和皿底板(5)由上至下制成一体构成皿体(3),所述皿底板(5)的上端面上沿培养观察皿(8)的轴向开有培养观察槽(5-1),所述皿底板(5)的上端面上沿培养观察皿(8)的轴向还开有两个灌流槽(5-2),所述两个灌流槽(5-2)沿培养观察槽(5-1)的轴线对称设置,所述两个灌流槽(5-2)均与培养观察槽(5-1)连通,且两个灌流槽(5-2)的深度h均小于培养观察槽(5-1)的深度H,所述培养观察槽(5-1)的底面到皿底板(5)的下端面的距离δ为0.1mm~1mm,每个培养观察皿(8)分别安装在固定台(7)上开设的相应的安装槽(7-1)内,所述培养观察槽(5-1)的底面上涂有细胞生长基质涂层(9)。
2、根据权利要求1所述多功能培养观察池,其特征在于:所述培养观察槽(5-1)的底面到皿底板(5)的下端面的距离δ为0.13mm。
3、根据权利要求1所述多功能培养观察池,其特征在于:所述培养观察槽(5-1)的底面到皿底板(5)的下端面的距离δ为0.17mm。
4、根据权利要求1所述多功能培养观察池,其特征在于:培养观察槽(5-1)的底面上的细胞生长基质涂层(9)为多聚赖氨酸涂层、纤维连接蛋白涂层、层黏蛋白涂层、胶原涂层、韧黏素涂层或层粘蛋白涂层。
5、根据权利要求1、2、3或4所述多功能培养观察池,其特征在于:所述培养观察皿(8)还包括皿盖(6),所述皿盖(6)盖装在皿体(3)的上端面上。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110982686A (zh) * 2019-12-27 2020-04-10 珠海迪尔生物工程有限公司 微生物观测测试卡、观测系统和观测方法

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