CN201293785Y - 三聚氰胺快速检测试剂盒 - Google Patents
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Abstract
一种三聚氰胺检测试剂盒包括塑料壳体、三聚氰胺检测试条和一个附在试剂盒体上的取样吸管。塑料壳体分为前、后两部分。前面部分其上表面下陷形成配放取样吸管凹槽，槽口附有塑料封皮以防试剂盒运输中取样吸管掉落。后面部分包括上、下盖，上盖上开有加样孔、检测显示窗和安装标识孔。后面部分其下盖内部设有试条凹槽，试条安装在该凹槽中。试条顺次设有样品垫、玻璃纤维膜结合垫、具有检测带和质控带的硝酸纤维素膜、强吸水垫和安装标志纸签。试条的玻璃纤维膜结合垫设有胶体金标记的抗三聚氰胺单抗和兔抗体，质控带设有羊抗兔多克隆抗体，检测带设有三聚氰胺抗原。本实用新型检测样品三聚氰胺准确性和可靠性高，检测过程简单，快速，携带方便。
Description
技术领域
本实用新型涉及一种三聚氰胺检测试剂盒及其制备工艺，具体说，是将抗三聚氰胺特异性的抗体制作在检测试剂盒内，用来检测生物样品中是否含有三聚氰胺成分。
背景技术
三聚氰胺是一种含氮化工原料，食品中加入三聚氰胺可提高蛋白检测值但污染食品，人体食用三聚氰胺污染食品后可导致泌尿系统产生结石。当前，一些不法分子为谋取非法利益，在乳制品中加入三聚氰胺以提高乳制品蛋白检测值，给人民生命健康带来了严重危害，给社会造成了恶劣影响。因此，在生物医学样品中尤其食品中开展三聚氰胺成分快速检测具有非常重要的意义。
目前，生物医学样品中尤其是食品卫生安全中三聚氰胺检测尚无快速方法。胶体金免疫层析技术(Gold-Immunochromatography Assay，GICA)是在酶联免疫吸附分析方法(ELISA)的基础上发展起来的一项免疫标记技术，它以微孔滤膜为载体，利用微孔滤膜的毛细管作用，使滴加在膜条一侧的液体样品慢慢向微孔滤膜另一端渗移，若液体中有特异抗原或抗体，它们可以和免疫金结合后再与固定在微孔滤膜上的相应抗体或抗原结合而显示免疫金颜色。该技术简单、快速、不需任何仪器设备，几分钟就能用肉眼观察结果，被誉称为“浓缩的ELISA”。为解决生物医学样品中尤其食品中三聚氰胺检测目前尚无快速方法这一问题，本实用新型提供一种基于胶体金免疫层析技术的三聚氰胺快速检测试剂盒及其试剂盒制备工艺。
实用新型内容
本实用新型要解决的技术问题
鉴于目前生物医学样品中尤其是食品卫生安全中三聚氰胺尚无快速检测方法，为此，本实用新型：
1、提供一种三聚氰胺快速现场检测试剂盒。
2、提供一种三聚氰胺快速现场检测试剂盒的制备工艺。
本实用新型的技术方案为：
所述的三聚氰胺检测试剂盒，包括塑料壳体1、三聚氰胺检测试条13和一个附在试剂盒盒体上的取样管5：
所述塑料壳体1径向上分为壳体前面部分2和壳体后面部分3；所述壳体1前面部分2其上表面下陷形成一凹槽4，供样品检测用的取样吸管5配放于槽内，槽口附有塑料封皮6将取样吸管5封于取样吸管凹槽4内以防试剂盒运输途中取样吸管5掉落；
所述壳体1后面部分3包含可拆卸的上盖7和下盖8，上盖7上依次径向开有加样孔9、检测结果显示窗10和安装标识孔11；下盖8内部径向设有试条凹槽12；所述试条13径向嵌合安装在该试条凹槽12中；
所述试条13顺次设有相互搭接粘贴的样品垫14、玻璃纤维膜结合垫15、具有检测带16和质控带17的硝酸纤维素分析膜18、强吸水垫19和试条安装标志纸签20；
所述试条的玻璃纤维膜结合垫15设置有胶体金标记的抗三聚氰胺的单克隆抗体和胶体金标记的兔抗体；具有检测带16和质控带17的硝酸纤维素分析膜18上的检测带16设置有三聚氰胺抗原，质控带17设置有羊抗兔多克隆抗体；
安装在塑料壳体1后面部分3的下盖内部凹槽12中的三聚氰胺检测试条13，其上的样品垫14、具有检测带16和质控带17的硝酸纤维素分析膜18、和试条安装标志纸签20分别与塑料壳体上盖7的加样孔9、检测结果显示窗10和安装标识孔11对应放置，通过塑料壳体上盖7的安装标识孔11可以看到试条安装标志纸签20，以确定试条13安装是否正确。
样品检测时，撕掉覆盖在取样吸管凹槽4上的塑料封皮6，取出取样吸管5，用该取样吸管5吸取待检样品液，滴加3-4滴待检体样品液于所述试剂盒的样品加样孔9内，3-5分钟即可用肉眼观察检测结果。
本实用新型提供的三聚氰胺检测试剂盒检测样品三聚氰胺成分采用竞争法。
如果样品中不含三聚氰胺成分，试条玻璃纤维膜结合垫15上设置的抗三聚氰胺单克隆抗体金标物随样品渗移到试条硝酸纤维素分析膜的检测带16位置时，胶体金粒子上的抗三聚氰胺单克隆抗体将会与设置在试条硝酸纤维素分析膜检测带16位置的三聚氰胺抗原相结合，并聚集形成一条红色带，此表明检测结果为阴性。
如果样品中含有三聚氰胺成分，它们将与试条硝酸纤维素分析膜的检测带16位置所设置的三聚氰胺抗原一起竞争试条上胶体金标记的有限抗三聚氰胺单克隆抗体，并与其相结合。当待检样品中的三聚氰胺成分的浓度达到或超过一定量时，样品中的三聚氰胺成分将与试条胶体金标记的有限抗三聚氰胺单克隆抗体结合，从而使已设置在试条检测带16上的三聚氰胺抗原无法与胶体金标记的抗三聚氰胺单克隆抗体结合，此时设置有三聚氰胺抗原的检测带16不会出现红色带，此表明该样品中含有三聚氰胺成分，检测结果为阳性。
本实用新型提供的三聚氰胺检测试剂盒的试条的玻璃纤维膜结合垫15设置有兔抗体的胶体金标记物。该标记物随样品一同渗移至质控带17时，可与质控带17设置的羊抗兔多克隆抗体发生反应(该兔抗体的胶体金标记物不会与检测带16设置的三聚氰胺抗原发生反应)，使质控带17位置显示红色带并可被肉眼识别出。当样品检测中由于某组分质量问题无法进行检测试验时，试条设置有羊抗兔多克隆抗体的质控带17位置则不会显色，所以，通过试条质控带17设置的质控物羊抗兔多克隆抗体可对样品三聚氰胺检测进行质量控制。质控带17无红色带显示，检测结果无效。
本实用新型还提供一种三聚氰胺检测试剂盒的制备工艺，其包括以下步骤：
A、用封闭试剂处理样品垫14。所述封闭试剂的配方为：胆酸钠0.1-0.7％、吐温-200.05-1％、聚乙氧基油醇0.5-2％、氯化钠0.5-1.2％、纯水95-99％、磷酸钠(PB)缓冲液0.01-0.03mmol/L；
B、配置胶体金溶液：
用0.2M的碳酸钾或0.1M的盐酸调节胶体金溶液的pH至选定标准；将体积适量、浓度合适的抗三聚氰胺的单克隆抗体和兔抗体快速混合成胶体金溶液；将所配置的胶体金溶液点加到玻璃纤维膜上，形成胶体金标记的玻璃纤维膜结合垫15；
C、配置三聚氰胺抗原溶液和配置羊抗兔抗体溶液，然后用点膜仪将它们相隔一定距离分别喷点到硝酸纤维素分析膜18上形成检测带16和质控带17；
D、分别将样品垫14、点加有胶体金标记物的玻璃纤维膜结合垫15、具有检测带16和质控带17的硝酸纤维素分析膜18、强吸水垫19和试条安装标志纸签20依次相互搭接粘贴到一张不干胶的胶板上，之后切割成一定长度和宽度的试条，并将试条安装到塑料壳体后面部分下盖8内的凹槽12中；
E、真空干燥：真空泵内的温度控制在15-25℃；真空干燥时间控制在2-5小时；真空泵内的大气压控制在0.1毫巴(mba)以下。
F、铝箔密封包装，即完成一个三聚氰胺检测试剂盒制作。
本实用新型有益效果
本实用新型提供的三聚氰胺检测试剂盒及其制备工艺，具有以下优点：
1、所述试剂盒结构简单，易制作，成本低廉，特别适于工业化生产。
2、所述试剂盒用于检测样品三聚氰胺成分快速、准确，操作简便，携带方便。检测不需要任何仪器设备和试剂，适时适地均可使用。操作不需专门学习和培训，专业技术人员和普通人员均适用。样品检测时，操作人员仅需撕去试剂盒表面样品吸管5的塑料封皮6，取出样品吸管5，将吸管5直接用于吸取待检样品并滴加待检样品入试剂盒的加样孔9后，3-5分钟就能获得检测结果。
3、所述试剂盒内的试剂和材料不涉及活性失活，可于室温长期保存。
4、所述试剂盒具有良好实用性和市场推广价值，可用于生物样品，尤其是食品卫生安全中的乳制品等的三聚氰胺成分现场快速检测及大规模筛查。
附图说明
图1为本实用新型所述三聚氰胺检测试剂盒未拆卸塑料壳体后面部分的上盖的结构示意图。
图2为本实用新型所述三聚氰胺检测试剂盒拆卸塑料壳体后面部分的上盖后的结构示意图。
图3为本实用新型所述三聚氰胺检测试剂盒的试条的侧视结构图。
图4为本实用新型所述三聚氰胺检测试剂盒的试条的俯视结构图。
图5为本实用新型所述三聚氰胺检测试剂盒用于检测生物样品的检测结果示意图。图5表示样品不含三聚氰胺。
图6为本实用新型所述三聚氰胺检测试剂盒用于检测生物样品的检测结果示意图。图6表示样品含三聚氰胺。
序号表示如下：1、塑料壳体 2、塑料壳体前面部分 3、塑料壳体后面部分 4、塑料壳体前面部分上表面下陷形成的用于配放取样吸管的凹槽 5、取样吸管 6、塑料封皮 7、塑料壳体后面部分的上盖 8、塑料壳体后面部分的下盖 9、加样孔 10、检测结果显示窗11、安装标识孔 12、试条凹槽 13、三聚氰胺检测试条 14、样品垫 15、玻璃纤维膜结合垫 16、检测带 17、质控带 18、硝酸纤维素分析膜 19、强吸水垫 20、试条安装标志纸签 T：检测带 C：质控带
具体实施方式
以下结合图1-图6，说明本实用新型的较佳实施方式。
本实用新型提供一种三聚氰胺检测试剂盒，它包括塑料壳体1、三聚氰胺检测试条13和一个附在试剂盒盒体上、检测时用于吸取样品的取样吸管5。
如图1和图2所示，所述的塑料壳体1径向上分为壳体前面部分2和壳体后面部分3；所述壳体前面部分2其上表面下陷形成一凹槽4，检测时用于吸取样品的取样吸管5配放槽内，槽口贴有塑料封皮6以防试剂盒运输途中取样吸管5掉落；所述壳体1后面部分3包含可拆卸的上盖7和下盖8，上盖7上依次径向开有加样孔9、检测结果显示窗10和安装标识孔11；图2所示，下盖8内部径向设有试条凹槽12，所述三聚氰胺检测试条13径向嵌合安装在该试条凹槽12中。
如图3和图4所示，所述试条13顺次设有相互搭接粘贴的样品垫14、玻璃纤维膜结合垫15、具有检测带16和质控带17的硝酸纤维素分析膜18、强吸水垫19和试条安装标志纸签20。
所述试条的玻璃纤维膜结合垫15设置有胶体金标记的抗三聚氰胺的单克隆抗体和胶体金标记的兔抗体；具有检测带16和质控带17的硝酸纤维素分析膜18上的检测带16设置有三聚氰胺抗原，质控带17设置有羊抗兔多克隆抗体。
安装在塑料壳体1后面部分3的下盖内部凹槽12中的三聚氰胺检测试条13，其上的样品垫14、具有检测带16和质控带17的硝酸纤维素分析膜18、和试条安装标志纸签20分别与塑料壳体上盖7的加样孔9、检测结果显示窗10和安装标识孔11对应放置，通过塑料壳体上盖7的安装标识孔11可以看到试条安装标志纸签20，以确定试条13安装是否正确。
样品检测时，撕掉覆盖在取样吸管凹槽4上的塑料封皮6，取出取样吸管5，用该取样吸管5吸取待检样品液，滴加3-4滴待检体样品液于所述试剂盒的样品加样孔9内，3-5分钟即可用肉眼观察检测结果。
本实用新型提供的三聚氰胺检测试剂盒检测样品三聚氰胺成分采用竞争法。
如果样品中不含三聚氰胺成分，试条玻璃纤维膜结合垫15上设置的抗三聚氰胺单克隆抗体金标物随样品渗移到试条硝酸纤维素分析膜的检测带16位置时，胶体金粒子上的抗三聚氰胺单克隆抗体将会与设置在试条硝酸纤维素分析膜检测带16位置的三聚氰胺抗原相结合，并聚集形成一条红色带，此表明检测结果为阴性。
如果样品中含有三聚氰胺成分，它们将与试条硝酸纤维素分析膜的检测带16位置所设置的三聚氰胺抗原一起竞争试条上胶体金标记的有限抗三聚氰胺单克隆抗体，并与其相结合。当待检样品中的三聚氰胺成分的浓度达到或超过一定量时，样品中的三聚氰胺成分将与试条胶体金标记的有限抗三聚氰胺单克隆抗体结合，从而使已设置在试条检测带16上的三聚氰胺抗原无法与胶体金标记的抗三聚氰胺单克隆抗体结合，此时设置有三聚氰胺抗原的检测带16不会出现红色带，此表明该样品中含有三聚氰胺成分，检测结果为阳性。
本实用新型提供的三聚氰胺检测试剂盒的试条的玻璃纤维膜结合垫15设置有兔抗体的胶体金标记物。该标记物随样品一同渗移至质控带17时，可与质控带17设置的羊抗兔多克隆抗体发生反应(该兔抗体的胶体金标记物不会与检测带16设置的三聚氰胺抗原发生反应)，使质控带17位置显示红色带并可被肉眼识别出。当样品检测中由于某组分质量问题无法进行检测试验时，试条设置有羊抗兔多克隆抗体的质控带17位置则不会显色，所以，通过试条质控带17设置的质控物羊抗兔多克隆抗体可对样品三聚氰胺检测进行质量控制。质控带17无红色带显示，检测结果无效。
本实用新型还提供一种三聚氰胺检测试剂盒的制备工艺，其包括以下步骤：
A、用封闭试剂处理样品垫14。所述封闭试剂的配方为：胆酸钠0.1-0.7％、吐温-200.05-1％、聚乙氧基油醇0.5-2％、氯化钠0.5-1.2％、纯水95-99％、磷酸钠(PB)缓冲液0.01-0.03mmol/L；
B、配置胶体金溶液
用0.2M的碳酸钾或0.1M的盐酸调节胶体金溶液的pH至选定标准；将体积适量、浓度合适的抗三聚氰胺的单克隆抗体和兔抗体快速混合成胶体金溶液；将所配置的胶体金溶液点加到玻璃纤维膜上，形成胶体金标记的玻璃纤维膜结合垫15；
C、配置三聚氰胺抗原溶液和配置羊抗兔抗体溶液，然后用点膜仪将它们相隔一定距离分别喷点到硝酸纤维素分析膜18上形成检测带16和质控带17；
D、分别将样品垫14、点加有胶体金标记物的玻璃纤维膜结合垫15、具有检测带16和质控带17的硝酸纤维素分析膜18、强吸水垫19和试条安装标志纸签20依次相互搭接粘贴到一张不干胶的胶板上，之后切割成一定长度和宽度的试条，并将试条安装到塑料壳体后面部分下盖8内的凹槽12中；
E、真空干燥：真空泵内的温度控制在15-25℃；真空干燥时间控制在2-5小时；真空泵内的大气压控制在0.1毫巴(mba)以下；
F、铝箔密封包装，即完成一个三聚氰胺检测试剂盒制作。
本实用新型提供的三聚氰胺检测试剂盒及其制备工艺，具有以下优点：
1、所述试剂盒结构简单，易制作，成本低廉，特别适于工业化生产。
2、所述试剂盒用于检测样品三聚氰胺成分快速、准确，操作简便，携带方便。检测不需要任何仪器设备和试剂，适时适地均可使用。操作不需专门学习和培训，专业技术人员和普通人员均适用。样品检测时，操作人员仅需撕去试剂盒表面样品吸管5的塑料封皮6，取出样品吸管5，将吸管5直接用于吸取待检样品并滴加待检样品入试剂盒的加样孔9后，3-5分钟就能获得检测结果。
3、所述试剂盒内的试剂和材料不涉及活性失活，可于室温长期保存。
4、所述试剂盒具有良好实用性和市场推广价值，可用于生物样品，尤其是食品卫生安全中的乳制品等的三聚氰胺成分现场快速检测及大规模筛查。
图5-图6是本实用新型所述试剂盒用于检测生物样品三聚氰胺成分的检测结果示意图。图5表示1号样品不含三聚氰胺；图6表示2号样品含三聚氰胺。
特别需要指出的是，本实用新型所述三聚氰胺检测试剂盒及其制备工艺还可以有一些改进，例如，其中三聚氰胺检测试条的胶体金标记物还可替换为胶体硒标记物等，因此，凡对本实用新型所述三聚氰胺检测试剂盒及其制备工艺采用任何等同替换或等效变换形成的其它技术方案，均落在本实用新型权利要求的保护范围中。
Claims (4)
1、一种三聚氰胺检测试剂盒，包含塑料壳体(1)和三聚氰胺检测试条(13)，其特征在于：
所述的塑料壳体(1)径向上分为前面部分(2)和后面部分(3)；所述前面部分(2)其上表面下陷形成一凹槽(4)，槽内配有样品检测用的取样吸管(5)，槽口附有塑料封皮(6)将取样吸管(5)封于凹槽(4)内以防试剂盒运输途中取样吸管(5)掉落；
所述后面部分(3)包含可拆卸的上盖(7)和下盖(8)；所述后面部分(3)的上盖(7)上径向依次开有加样孔(9)、检测结果显示窗(10)和安装标识孔(11)；所述后面部分(3)的下盖(8)内部径向设有试条凹槽(12)；所述试条(13)径向嵌合安装在该试条凹槽(12)中；
所述试条(13)顺次设有相互搭接粘贴的样品垫(14)、玻璃纤维膜结合垫(15)、具有检测带(16)和质控带(17)的硝酸纤维素分析膜(18)、强吸水垫(19)和试条安装标志纸签(20)。
2、根据权利要求1所述的三聚氰胺检测试剂盒，其特征在于：所述试条的玻璃纤维膜结合垫(15)设置有胶体金标记的抗三聚氰胺的单克隆抗体和胶体金标记的兔抗体。
3、根据权利要求1所述的三聚氰胺检测试剂盒，其特征在于：所述试条的质控带(17)设置有羊抗兔多克隆抗体。
4、根据权利要求1所述的三聚氰胺检测试剂盒，其特征在于：所述试条的检测带(16)设置有三聚氰胺抗原。
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| CNU2008201408249U CN201293785Y (zh) | 2008-10-20 | 2008-10-20 | 三聚氰胺快速检测试剂盒 |
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102128942A (zh) * | 2010-04-30 | 2011-07-20 | 艾康生物技术(杭州)有限公司 | 检测装置 |
| CN101403758B (zh) * | 2008-10-20 | 2013-07-24 | 马义才 | 三聚氰胺快速检测试剂盒 |
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2008
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| C17 | Cessation of patent right | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
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