CN1977921B - 一种治疗肝炎及抗肝衰的中药制剂和制备方法及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗肝炎及抗肝衰的中药制剂和制备方法。该制剂由赤芍、生地和大黄制成，上述原药材中赤芍、制大黄醇提，减压回收至无醇味，药渣和生地水提醇沉，回收乙醇，与上述醇提浓缩液合并，浓缩，加入糊精适量，喷雾干燥成浸膏细粉，加入适量辅料或矫味剂制成颗粒剂、胶囊剂、片剂、丸剂或口服液。经药理试验表明本发明制剂对急、慢性肝炎及肝衰竭有较好的防治作用，具有清热凉血，化瘀解毒，益阴护肝的功效。

Description

一种治疗肝炎及抗肝衰的中药制剂和制备方法及其应用

一、技术领域

本发明涉及中药制剂及制备方法，具体地说是涉及以中药材料为原料而制成的一种治疗肝炎及抗肝衰的中药制剂和制备方法及其在制药中的应用。

二、背景技术

世界卫生组织(WHO)统计全球被乙肝病毒(HBV)感染的人大约20亿，其中3亿为慢性携带者，这些患者中25％病情严重。我国是个肝炎大国，病毒性肝炎发病数位居法定管理传染病的第一位，仅慢性乙型肝炎病毒感染者就达1.3亿，占人口的10％左右，乙肝患者约3000万。慢性乙型肝炎病程迁延，如得不到及时的治疗，将严重危害人类健康，全国每年有30万人被肝病夺去生命。肝衰竭是一切肝脏疾病重症化的共同结局，我国当前存在大量乙型肝炎相关的慢性肝病，病变严重恶化时大多表现为急性肝衰竭过程。

肝细胞凋亡是病毒性肝炎和肝衰竭的重要发病机制之一，是导致器官广泛损伤的触发器。肝细胞凋亡可引起炎症和坏死，当凋亡的肝细胞数量少时，凋亡细胞很快为吞噬细胞所吞噬，不释放花生酸类或细胞因子等炎性介质。如发生大量肝细胞凋亡时，凋亡细胞不能为吞噬细胞及时吞噬，凋亡细胞发生肿胀、裂解并释放其内容物，吸引中性粒细胞释放炎性物质，产生炎症反应，导致细胞坏死。临床研究发现，乙型和丙型肝炎患者肝组织中存在肝细凋亡，且细胞凋亡程度与病情轻重密切相关。细胞凋亡是级联式基因表达的结果，细胞内部的基因直接调控凋亡的发生和发展，细胞外部因素通过信号转导通路影响这些基因的表达，从而间接调控凋亡。

现代医学已从流行病学、分子生物学对病毒性肝炎作了大量研究，但治疗上尚无重大突破，目前国内外尚无满意的治疗方法与特效药物，虽有拉米呋定、干扰素等抗病毒药物问世，但由于治疗周期长、易反跳、费用高等缺陷，尚不能满足临床需要。关于肝衰竭的治疗，随着促肝细胞生长素、人工肝支持系统、肝移植与肝细胞移植疗法的运用，病死率虽有所下降，但仍达50％-70％。近年来研究显示：人工肝支持系统对肝衰竭有肯定的辅助治疗作用，肝移植也已成为国外肝衰竭较为普遍的疗法，但实际疗效并不理想，病死率仍达50％以上。且技术要求高，尤其是肝移植来源困难，费用昂贵，目前国内尚难推广普及。而现有各种类型的肝炎药物疗效均十分有限。

三、发明内容

本发明的目的在于提供了一种治疗肝炎及抗肝衰的中药制剂和在制药中的应用，它具有清热凉血，化瘀解毒，益阴护肝的作用；本发明的另一个目的在于提供该中药制剂的制备方法。

中医药强调辨证施治的整体观念和复方配伍用药，通过多种有效成份对人体多环节、多层次、多靶点的整合调节作用，既符合人体多样性的特点，又符合肝炎及肝衰竭病变的多症候群、整体性和复杂性，治疗肝炎有独特的优势，在肝衰竭治疗中的作用也不可忽视.在保肝利胆、抗病毒、增强免疫、抗肝纤维化、降酶、消除黄疸、乙肝病毒标志物阴转等方面有较好的应用价值.

本发明所述的中药制剂是通过以下技术方案实现的：

一种治疗肝炎及抗肝衰的中药制剂，其特征在于它是由下列重量份配比的原料药所制成的药剂：赤芍100-600份，生地100-400份，制大黄100-300份。

在上述中药制剂的浸膏粉中加入适量辅料或矫味剂，用常规的制剂方法可制成颗粒剂、胶囊剂、片剂、丸剂或口服液。

本发明的中药制剂的制备方法，其制备步骤如下：

(1)取赤芍、制大黄加乙醇回流提取，滤过，将醇提液减压回收乙醇后浓缩至无醇味，得醇提浓缩液和药渣备用；

(2)将上述药渣和生地合并后用水煎煮，煎液过滤，滤液减压浓缩后加乙醇，搅匀、放置后滤过，滤液回收乙醇，得水提醇沉浓缩液，与步骤1的醇提浓缩液合并，浓缩，加入适量糊精后，喷雾干燥成浸膏细粉；

(3)取上述浸膏粉加适量辅料或矫味剂制成颗粒剂、胶囊剂、片剂、丸剂，或将步骤1的醇提浓缩液与步骤2的水提醇沉浓缩液合并，调节pH值，加适量辅料或矫味剂，加纯化水调节总量，制成口服液。

上述的中药制剂的制备方法的步骤1中所加的乙醇量是药材量的10-15倍，浓度为50-80％，分2-3次回流提取，每次提取1-2小时。

上述中药制剂的制备方法的步骤2中所加水的量是药材量的10-15倍，煎煮二次，每次1-2小时，煎液过滤后滤液减压浓缩至相对密度为1.05-1.08，在60℃时测定，浓缩液中加乙醇至含醇量达50％，搅匀，放置24小时，滤过，；滤液回收乙醇与步骤1醇提浓缩液合并后在50℃时浓缩至相对密度1.10-1.15，在进口风温为165-175℃，出口风温85-90℃条件下喷雾干燥。

上述的中药制剂在制备治疗肝炎疾病药物中的应用。

上述的中药制剂在制备防治抗肝衰药物中的应用。

本发明的中药制剂经药理试验结果表明该制剂能减轻肝组织的病理损害，抗肝细胞凋亡，保护肝细胞，具降酶退黄、缩短凝血酶原时间、改善血液流变性等作用，从而降低死亡率，不仅对肝炎有良好的治疗作用，对肝衰竭也有防治作用，因此，开发治疗肝炎和防治肝衰的新药，其市场容量大，其经济效益和社会效益明显。

四、具体实施方式

实施例1：治疗肝炎及抗肝衰的中药制剂，由下列重量份配比的原料药所制成的药剂：

赤芍200份、生地200份、制大黄150份。

实施例2：治疗肝炎抗肝衰的中药制剂，由下列重量份配比的原料药所制成的药剂：

赤芍400份、生地300份、制大黄200份。

实施例3：治疗肝炎及抗肝衰的中药制剂的制备方法如下：

赤芍1.67kg、制大黄1.25kg加15倍量70％乙醇分三次回流提取，每次2.0小时，滤过，合并醇提液，减压回收乙醇并浓缩至无醇味.药渣和生地1.67kg一起加15倍量水分二次煎煮，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.05～1.08(60℃)，加乙醇至含醇量达50％，搅匀，放置24小时，滤过，滤液回收乙醇，与上述醇提浓缩液合并，浓缩至相对密度1.10～1.15(50℃)，加入糊精适量，在进口风温为165～175℃，出口风温85～90℃条件下喷雾干燥成浸膏细粉.取浸膏粉加糖粉、糊精适量混匀进行湿法制粒，干燥(50℃～60℃)，制得颗粒1000g，分装，每袋4g，每克颗粒约相当于4.58生药，4g/次，3次/日，相当于每日服生药55g.

实施例4

赤芍1.11kg、制大黄0.83kg加15倍量70％乙醇分三次回流提取，每次2.0小时，滤过，合并醇提液，减压回收乙醇并浓缩至无醇味。药渣和生地1.11kg一起加15倍量水分二次煎煮，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.05～1.08(60℃)，加乙醇至含醇量达50％，搅匀，放置24小时，滤过，滤液回收乙醇，与上述醇提浓缩液合并，浓缩至相对密度1.10～1.15(50℃)，加入糊精适量，在进口风温为165～175℃，出口风温85～90℃条件下喷雾干燥成浸膏细粉。浸膏粉加糊精适量，混匀进行湿法制粒，干燥(50℃～60℃)，分装入胶囊，即得胶囊1000粒。每粒胶囊相当于3.06g生药，6粒/次，3次/天，相当于每日服生药55g。

实施例5

赤芍1.33kg、制大黄1kg加15倍量70％乙醇分三次回流提取，每次2.0小时，滤过，合并醇提液，减压回收乙醇并浓缩至无醇味。药渣和生地1.33kg一起加15倍量水分二次煎煮，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.05～1.08(60℃)，加乙醇至含醇量达50％，搅匀，放置24小时，滤过，滤液回收乙醇，与上述醇提浓缩液合并，浓缩至相对密度1.10～1.15(50℃)，加入糊精适量，在进口风温为165～175℃，出口风温85～90℃条件下喷雾干燥成浸膏细粉。浸膏粉加干淀粉(1∶0.1)，混匀进行湿法制粒，干燥(50℃～60℃)，干颗粒中加适量干淀粉，混均，压片，即得片剂1000片。每片相当于3.67g生药，5片/次，3次/天，相当于每日服生药55g。

实施例6

赤芍0.67kg、制大黄0.5kg加15倍量70％乙醇分三次回流提取，每次2.0小时，滤过，合并醇提液，减压回收乙醇并浓缩至无醇味。药渣和生地0.67kg一起加15倍量水，分二次煎煮，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.05～1.08(60℃)，加乙醇至含醇量达50％，搅匀，放置24小时，滤过，滤液回收乙醇。取上述醇提浓缩液和水提醇沉浓缩液合并浓缩至相对密度1.25～1.30(60℃)，加水调整至约800ml，调节pH值至5.0～7.0，加入苯甲酸钠适量、单糖浆适量，静置24小时。离心，取上清液，加水调整总量至1000ml，搅匀，灌装成10ml/支，即得口服液1000ml。每毫升口服液相当于1.83g生药，10ml/次，3次/日，相当于每日服生药55g。

实施例7：药理毒理学试验

1.最大耐受量试验

受试动物：ICR小鼠，雌雄各半，体重18-22g，由南京中医药大学实验动物中心提供。

受试药物：本发明配方按工艺要求制备浸膏，药物浓度(含量)26％(4.58g生药/ml)，临用前用蒸馏水配成2g生药/ml浓度。

试验方法：本发明配方制剂因其浓度和体积限制，无法测出LD50，故以最大耐受量试验(MTD)来评价该药的急性毒性。取上述小鼠20只，实验前禁食12小时，以动物所能耐受的最大浓度、最大体积，每次灌胃0.3ml/10g体重，一日3次给药，连续观察7天，记录受试小鼠情况。

试验结果：按0.3ml/10g体重给药的小鼠一周内无死亡，处死后进行尸检，各主要脏器肉眼观察未见异常改变。

安全性评价：试验结果表明该药使用安全，成人用量1.1g生药/kg，其小鼠最大耐受倍数计算为人用等效量的164倍，可以在临床推广。

2.主要药效学试验

(1)对实验性肝损伤防治作用的实验

分别用D-氨基半乳糖(D-GalN)加内毒素(LPS)和α-荼异硫氰酸脂(ANlT)加LPS复制小鼠及大鼠急性肝衰竭模型，针对本发明的防治效果和作用机理进行了多项实验。结果显示：本发明能减轻肝组织的病理损害，保护肝细胞，具降酶退黄、缩短凝血酶原时间、改善血液流变性等作用，并能降低死亡率。研究表明，生地、赤芍、大黄等凉血化瘀药具有广泛的药理作用，能增强巨噬细胞的吞噬功能，加速内毒素在机体内的廓清，减轻组织损害，抗炎、抗感染，改善微循环，抗血栓，保护肝细胞等。

肝功生化检测

治疗组有明显降低急性肝损伤大鼠血清转氨酶和胆红素的作用，治疗组血清ALT、AST、TBIL明显降低，结果见表1。

表1各组大鼠肝功能检测比较(x±S)

*P＜0.001(与模型组比较，经t检验)

凝血功能检测

治疗组能明显改善急性肝损伤大鼠凝血功能，结果见表2。

表2各组大鼠凝血功能检测比较(x±S)

*P＜0.05**P＜0.01(与模型组比较，经t检验)

血粘度检测

治疗组能降低急性肝损伤大鼠的血粘度，结果见表3。

表3各组大鼠血粘度检测比较(x±S)

*P＜0.05**P＜0.01(与模型组比较，经t检验)

生存率比较试验

小鼠染毒24小时内，模型组死亡6只、联苯双脂组死亡4只、肝复康组死亡7只、治疗组死亡1只，治疗组与模型组生存率比较经X²检验有显著差异，见表4。

表4两组小鼠生存率比较

X²＝5.04P＜0.05

病理观察结果

治疗组肝脏总体病变程度在4组中最轻。结论：受试药对D-GaIN+LPS诱导的小鼠肝损伤有一定治疗作用，其疗效较联苯双脂、肝复康为优。半定量分析结果见表5。

表5各组腐理半定量分析结果比较

★P＜0.05(与模型组比较，经t检验)

电镜观察结果：模型组细胞核形态不完整，染色质凝聚，核膜绉缩，线粒体肿胀，嵴紊乱，嵴质空泡化，絮状电子致密物。治疗组(中剂量)细胞结构基本完整，细胞核基本完好，线粒体改变明显减轻，胞质见脂滴。

(2)抗肝细胞凋亡效应及对相关基因表达的试验

本发明能减轻内毒素肝损伤小鼠肝细胞凋亡和下调及延迟肝细胞凋亡相关基因的表达。

HE染色光镜观察

显示模型组有多量凋亡细胞及凋亡小体，核染色质凝聚，部分凋亡细胞呈花瓣状或新月状改变，部分核碎裂或溶解。治疗组及益肝灵对照组凋亡细胞明显减少。各组凋亡细胞阳性率分别为：模型组20.6％、治疗组5.2％、对照组6.2％，结果见表6。

表6各组凋亡细胞数比较(按100个细胞计)：

*P＜0.05(与模型组比较，经方差分析)

原位末端标记(TUNEL)试验：

空白组肝小叶结构清晰，以中央静脉为中轴，肝细胞索呈放射状排列，肝血窦清晰，模型组有多量凋亡阳性细胞表达，治疗组棕色细胞明显减少。各组凋亡细胞数密度分别为：模型组5.93‰、治疗组1.11‰、对照组1.31‰，结果见表7。

表7各组凋亡细胞数密度比较(‰)：

**P＜0.01(与模型组比较，经方差分析)

Claims (3)

1.一种治疗肝炎及抗肝衰的中药制剂，其特征在于它是由如下方法制备而得：

赤芍1.67kg、制大黄1.25kg加15倍量70％乙醇分三次回流提取，每次2.0小时，滤过，合并醇提液，减压回收乙醇并浓缩至无醇味；药渣和生地1.67kg一起加15倍量水分二次煎煮，每次1.5小时，合并煎液，滤过，60℃下滤液减压浓缩至相对密度为1.05～1.08，加乙醇至含醇量达50％，搅匀，放置24小时，滤过，滤液回收乙醇，与上述醇提浓缩液合并，50℃下浓缩至相对密度1.10～1.15，加入糊精适量，在进口风温为165～175℃，出口风温85～90℃条件下喷雾干燥成浸膏细粉；取浸膏粉加糖粉、糊精适量混匀进行湿法制粒，50℃～60℃下干燥，制得颗粒。

2.如权利要求1所述的中药制剂在制备治疗肝炎疾病药物中的应用。

3.如权利要求1所述的中药制剂在制备防治抗肝衰药物中的应用。