CN1960735B

CN1960735B - 药物组合在治疗胰岛素抗性中的应用

Info

Publication number: CN1960735B
Application number: CN200580016223.6A
Authority: CN
Inventors: 韦恩·W·劳特
Original assignee: Diamedica Inc
Current assignee: Saimar LLC
Priority date: 2004-05-20
Filing date: 2005-05-20
Publication date: 2015-07-29
Anticipated expiration: 2025-05-20
Also published as: AU2005245240A1; US20090233995A1; EP1758597B1; WO2005112949A1; JP5000493B2; EP1758597A1; AU2005245240B2; CN1960735A; EP1758597A4; HK1098700A1; JP2007538015A; NZ551128A; CA2566873A1; US8673964B2; CA2566873C

Abstract

本发明提供药物组合物，其包含：(a)肝副交感神经紧张调节剂，(b)至少一种糖尿病药物，和(c)药物可接受的载体。一种用以上药物组合物治疗和/或预防胰岛素抗性、II型糖尿病、葡萄糖不耐受损伤、和其他相关疾病的方法。本发明也提供一种药盒，其包含药物组合物及其使用说明。

Description

药物组合在治疗胰岛素抗性中的应用

技术领域

本发明涉及用于治疗胰岛素抗性的联合药物疗法，尤其是用于调节肝交感神经和副交感神经作用的联合疗法。

背景技术

餐后，肝副交感神经提供许可信号给肝脏，调节胰岛素刺激从肝脏释放激素HISS的能力。HISS选择性地刺激葡萄糖摄入和在骨骼肌中储存为糖原并且占整个身体葡萄糖消耗的超过一半，这先前已被假定为是胰岛素的直接作用。肝交感神经阻断副交感神经信号，从而阻止HISS的释放并导致胰岛素的葡萄糖消耗作用降低50％。这种状况被称为HISS依赖性胰岛素抗性(HDIR)。

HISS作用可以通过测定在禁食状态和其后再进食中对胰岛素的应答而临床诊断。进食和禁食状态中测定的注射胰岛素对葡萄糖处理作用的差异代表胰岛素作用的HISS依赖性部分。禁食状态中产生的葡萄糖消耗独立于HISS，然而餐后胰岛素大致加倍的作用是由于胰岛素作用的HISS依赖性和HISS非依赖性部分，两种状态之间的差异被定义为胰岛素作用的HISS依赖性部分。

HISS依赖性和HISS非依赖性胰岛素作用可以用快速胰岛素敏感度试验(RIST)很容易地定量，这是瞬时血糖钳(euglycemic clamp)对推注施用胰岛素的反应。通常注射胰岛素刺激葡萄糖从血液中移入储存部位，导致发生血糖水平降低。RIST方法用可变的葡萄糖输入速率来维持血糖水平恒定。维持血糖基线需要施用的葡萄糖量是胰岛素敏感度的指数并被称为RIST指数。通过这个方法产生的RIST指数由HISS依赖性部分和HISS非依赖性部分组成，这可以通过在对照进食状态中测验然后在以许多方式中任一种阻断HISS释放后重复这个测验，所述方式包括肝脏的外科去神经支配、阻断肝蝇蕈碱受体、阻断肝一氧化氮生成、或阻断肝环氧合酶。通过任何这些方法消除HISS作用导致RIST指数在进食状态中降低大约55％。即，葡萄糖消耗作用先前被归结于胰岛素对各种组织的直接作用，实际上这在很大程度上是通过早先不了解的肝胰岛素敏化过程介导的。这个领域最近已被综述(Lautt，1999；Lautt，2003)。阻断HISS释放导致HDIR。如果HDIR是对禁食产生的生理反应，那么这些干涉不产生胰岛素作用的任何进一步减少。

HDIR是对禁食的正常和基本的反应。胰岛素释放甚至出现在禁食状态中并发挥许多生长调节功能。全天以脉冲方式释放胰岛素，仅仅约50％的胰岛素释放是通过食物摄取调节(Beyer et al.，1990)。在禁食状态中，这对胰岛素引起葡萄糖从血液大量转移到骨骼肌糖原储备中是不利的。对注射胰岛素作出反应的葡萄糖消耗作用通过24小时的禁食逐渐降低到不显著。对胰岛素作出反应的这种降低代表在HISS依赖性部分中生理调整的降低，这由以下现象观察证明：胰岛素作用的HISS非依赖性(在阿托品后或在肝的去神经支配后)部分在进食和24小时禁食的大鼠中是相似的。

在立即餐后状态，胰岛素推注施用的大约55％总葡萄糖消耗作用在宽生理范围(5-100 mu/kg)是由于HISS。经过18小时禁食，Sprague Dawley大鼠显示出HISS依赖性胰岛素作用，其仅仅占26％的总胰岛素作用(Lautt et al.，2001)。在禁食18个小时后由HISS作用引起的胰岛素作用的比例在猫中是35％(Xie&Lautt，1995)和在狗中是25％(Moore et al.，2002)。兔中HISS作用占大约44％的胰岛素作用，尽管距离进食的时间没有被指出(Porszasz et al.，2002)。小鼠中禁食引起胰岛素作用降低45％(Latour&Chan，2002)。初步结果指出人类在进食状态中62％的胰岛素作用是由于HISS作用。HDIR的这种生理调节是对禁食的适当反应并且，由此HDIR是有用的生理状态。

尽管禁食状况下HDIR是有用的生理状态，但是在进食状态中不能释放HISS和由此导致的HDIR被认为引起II型糖尿病和胰岛素抗性的很多其它状况中所见的主要代谢紊乱。根据这种模型，餐后营养处理过程通常导致从饮食中所吸收葡萄糖中约80％被存储在身体的大骨骼肌实体中。尽管HISS从肝脏释放，但是它选择性地刺激葡萄糖摄入进入骨骼肌中糖原储备。缺乏HISS作用导致胰岛素的葡萄糖消耗作用严重受损，因此导致餐后高血糖。在2型糖尿病中对葡萄糖升高作出反应而释放更多胰岛素从而导致餐后高胰岛素血症。胰岛素刺激葡萄糖摄入进入脂肪组织和进入有限的肝脏储存。当肝脏中糖原储存达到饱和时，剩余的葡萄糖被转化成脂类从而导致II型糖尿病中餐后高血脂。高血糖的生化作用包括产生自由基，这些作用被认为引起糖尿病常见的主要的非代谢性病理，包括内皮细胞功能紊乱、动脉粥样硬化斑块沉积、失明、肾衰、神经损伤、中风和后肢切除(Brownlee，2001)。HDIR已经显示出现在慢性肝脏疾病、胎儿期暴露于酒精的成体(fetal alcohol exposedadults)、肥胖、饲喂蔗糖的大鼠、高血压、怀孕和外伤中。

本发明人提议HDIR是以下疾病的主要原因：II型糖尿病、葡萄糖耐受性受损、受损的空腹血糖、高胰岛素血症、高脂血症、肥胖、餐后高血糖和其他胰岛素抗性状态。对于患这些疾病的患者，当前可用的仅仅被批准的治疗形式是胰岛素和某些口服药物。口服药物分成五个主要的种类：磺酰脲、双胍剂、α-葡萄糖苷酶抑制剂、格列奈类(meglitinide)剂、噻唑烷二酮剂。

这些药物只有当结合限制饮食和定期锻炼时获得最好的结果。然而，即使如此该治疗并不是对所有患者都是成功的。血糖水平降低但很多从来没有看到降到正常范围内的水平，并且口服药物由于未知原因而自动停止工作。此外，对于已患II型糖尿病超过10年的个体成功率是非常低的。口服药物通常对于治疗的前三年是成功的，但就这一点来说50％患II型糖尿病的人需要额外的治疗。在9年后，75％的人需要联合疗法以保持他们的糖尿病受控制(Tuener et al.，JAMA281：2005-2012，1999)。

有些情况下当单一治疗被证明是无效时，会开包含两种糖尿病药物的联合疗法的处方。然而，口服治疗的联合是受限的，并且仅仅某些组合可以被同时给予。磺酰脲和格列奈类剂可以一起施用，但是可能引起低血糖。双胍类剂和噻唑烷二酮剂不能与胰岛素分泌剂一起服用，阿卡波糖是通常处方的α-葡萄糖苷酶抑制剂，它不能与任何其他抗糖尿病剂联合使用。这些联合最常见的结果是低血糖和体重增加。

因此，需要更有效和更安全的联合疗法用于治疗糖尿病和其他胰岛素抗性状态。同样，还需要治疗来解决参与餐后高血糖的特定机制，即HDIR。

发明内容

在第一个方面，本发明提供一种药物组合物，其包含：(a)肝副交感神经紧张调节剂，(b)至少一种糖尿病药物，和(c)药物可接受的载体。

在根据本发明的药物组合物的一个实施方案中，肝副交感神经紧张调节剂是NO供体。

在根据本发明的药物组合物的另一个实施方案中，肝副交感神经紧张调节剂是胆碱能激动剂且所述至少一种糖尿病药物是增加谷胱甘肽的化合物。

在本发明的另一个实施方案中，根据本发明的药物组合物，肝副交感神经紧张调节剂是氨甲酰甲胆碱且所述至少一种糖尿病药物是N-乙酰半胱氨酸或α-硫辛酸。

在第二个方面，本发明提供一种药物组合物，其包含：(a)乙酰胆碱酯酶拮抗剂，(b)增加谷胱甘肽的化合物和(c)药物可接受的载体。

在第三个方面，本发明提供一种药物组合物，其包含：(a)磷酸二酯酶拮抗剂，(b)增加谷胱甘肽的化合物和(c)药物可接受的载体。

在第四个方面，本发明提供根据本发明的药物组合物的应用，用于治疗或预防选自以下的疾病：II型糖尿病、胰岛素抗性、葡萄糖不耐受性受损、高血糖、高血脂、高胰岛素血症、葡萄糖代谢受损、肥胖、糖尿病性视网膜病、糖尿病性肾病、肾小球性肾炎、X综合征、高血压、心脏疾病、心血管疾病、中风、内皮细胞功能紊乱、充血性心力衰竭、绞痛、外周动脉的疾病、慢性肾衰、外周动脉疾病和急性肾衰。

在第五个方面，本发明提供一种治疗或预防选自以下疾病的方法：II型糖尿病、胰岛素抗性、葡萄糖不耐受性受损、高血糖、高血脂、高胰岛素血症、葡萄糖代谢受损、肥胖、糖尿病性视网膜病、糖尿病性肾病、肾小球性肾炎、X综合征、高血压、心脏疾病、心血管疾病、中风、内皮细胞功能紊乱、充血性心力衰竭、绞痛、外周动脉的疾病、慢性肾衰、急性肾衰和外周动脉疾病，其包括施用治疗有效量的根据本发明的药物组合物。

在第六个方面，本发明提供一种治疗或预防选自以下疾病的方法：II型糖尿病、胰岛素抗性、葡萄糖不耐受性受损、高血糖、高血脂、高胰岛素血症、葡萄糖代谢受损、肥胖、糖尿病性视网膜病、糖尿病性肾病、肾小球性肾炎、X综合征、高血压、心脏疾病、心血管疾病、中风、内皮细胞功能紊乱、充血性心力衰竭、绞痛、外周动脉的疾病、慢性肾衰、急性肾衰和外周动脉疾病，其包括施用治疗有效量的肝交感神经紧张调节剂和治疗有效量的至少一种糖尿病药物。

在第七个方面，本发明提供一种治疗或预防选自以下疾病的方法：II型糖尿病、胰岛素抗性、葡萄糖不耐受性受损、高血糖、高血脂、高胰岛素血症、葡萄糖代谢受损、肥胖、糖尿病性视网膜病、糖尿病性肾病、肾小球性肾炎、X综合征、高血压、心脏疾病、心血管疾病、中风、内皮细胞功能紊乱、充血性心力衰竭、绞痛、外周动脉的疾病、慢性肾衰、急性肾衰和外周动脉疾病，其包括施用治疗有效量的乙酰胆碱酯酶拮抗剂和治疗有效量的增加谷胱甘肽的化合物。

在第八个方面，本发明提供一种治疗或预防选自以下疾病的方法：II型糖尿病、胰岛素抗性、葡萄糖不耐受性受损、高血糖、高血脂、高胰岛素血症、葡萄糖代谢受损、肥胖、糖尿病性视网膜病、糖尿病性肾病、肾小球性肾炎、X综合征、高血压、心脏疾病、心血管疾病、中风、内皮细胞功能紊乱、充血性心力衰竭、绞痛、外周动脉的疾病、慢性肾衰、急性肾衰和外周动脉疾病，其包括施用治疗有效量的磷酸二酯酶拮抗剂以及治疗有效量的增加谷胱甘肽的化合物。

在第九个方面，本发明提供一种药盒，其以组合包含：根据权利要求1-30中任一项的药物组合物和给药方案说明，用于施用所述组合物以改善选自以下疾病的症状：II型糖尿病、胰岛素抗性、葡萄糖不耐受性受损、高血糖、高血脂、高胰岛素血症、葡萄糖代谢受损、肥胖、糖尿病性视网膜病、糖尿病性肾病、肾小球性肾炎、X综合征、高血压、心脏疾病、心血管疾病、中风、内皮细胞功能紊乱、充血性心力衰竭、绞痛、慢性肾衰、外周动脉疾病和急性肾衰。

在本发明的一个实施方案中，肝副交感神经紧张调节剂是胆碱能激动剂，选自：氨甲酰甲胆碱、乙酰胆碱、杜尼匹次、单满吖啶氨、腾喜龙、地美卡林、吡啶斯的明、扎那哌齐、碘磷灵、敌百虫、新斯的明、苯羟基丙氨酸(phenserine)和加兰他敏、胆碱能激动剂、乙酰甲胆碱、BIBN 99、DIBD、SCH-57790、SCH-217443、SCH-72788、槟榔碱、槟榔碱类似物、占诺美林、alvameline、米拉美林、RU47213、沙可美林(sabcomeline)、PD-151832、CDD-0034-C、CDD-0102、aspriopiperidine、a spiroquinuclidine、毒蕈碱、顺二氧戊环、RS86、AF30、 ocvimeline、AF150(S)、AF267B、SDZ 210-086、YM-796、乙酰胆碱刚性类似物、acclidine、tasaclidine、氧特莫林、氧特莫林类似物、毛果芸香碱、毛果芸香碱类似物、硫代毛果芸香碱、及其亚硝酰基化衍生物。

在本发明的一个实施方案中，肝副交感神经紧张调节剂是NO供体，选自：有机硝酸酯/盐、有机亚硝酸酯/盐、金属-NO络合物、N-亚硝胺、N-羟基亚硝胺、亚硝基硫醇、C-硝基化合物、二氧化二氮杂环丁烯、呋喃唑酮(furoxan)、苯并呋喃唑酮、噁三唑-6-亚胺、sydonoimine、oximine、羟胺、N-羟基胍、羟基脲、其亚硝酰基化衍生物、其药用盐、及其混合物。

在本发明的一个实施方案中，所述至少一种糖尿病药物选自：增加谷胱甘肽的化合物、抗氧化剂、胰岛素或胰岛素类似物、α-肾上腺素能受体拮抗剂、β-肾上腺素能受体拮抗剂、非选择性肾上腺素能受体拮抗剂、磺酰脲、双胍类剂、苯甲酸衍生物、α-葡萄糖苷酶抑制剂、噻唑烷二酮、磷酸二酯酶抑制剂、胆碱脂酶拮抗剂、GLP-1类似物及其药用盐。

在本发明的一个实施方案中，乙酰胆碱酯酶抑制剂选自：苯羟基丙氨酸、杜尼匹次、加兰他敏、雷司替明、单满吖啶氨、毒扁豆碱、新斯的明、腾喜龙、吡啶斯的明、地美卡林、碘磷灵、敌百虫、扎那哌齐、美斯的明及其组合。

在本发明的一个实施方案中，磷酸二酯酶抑制剂选自阿那格雷、他达那非、双嘧达莫、二羟丙茶碱、伐地那非、西落它唑、米力农、茶碱、西地那非、咖啡碱及其组合。

附图说明

附图1举例说明多种胆碱能激动剂的化学结构。

附图2举例说明多种槟榔碱类似物胆碱能激动剂的化学结构。

附图3举例说明多种具有胆碱能活性的spriopiperdine和spiroquinuclidine的化学结构。

附图4举例说明多种具有胆碱能活性的乙酰胆碱刚性类似物的化学结构。

附图5举例说明多种氧特莫林和毛果芸香碱胆碱能激动剂的化学结构。

附图6是图表，比较在对照饮食和蔗糖饮食大老鼠中氨甲酰甲胆碱和N-乙酰胆碱联合疗法对膳食诱导的胰岛素敏化的作用。

附图7举例说明肝脏中副交感神经信号传递的机理性途径。

具体实施方式

虽然本发明不限于特定的模型或作用机制，但它似乎副交感神经对进食的反应导致乙酰胆碱的释放，这激活肝脏中的蝇蕈碱受体。这种激活导致一氧化氮生成增加，这刺激鸟苷酸环化酶活性，导致环鸟苷单磷酸水平增加，其作用刺激HISS的释放。进食也导致肝谷胱甘肽水平升高。该体系任何部分的中断可导致副交感神经对进食的反应减少或消除。因此，胰岛素抗性和相关疾病不仅可以是异常副交感神经活动的结果，而且可以是异常交感神经活动的结果。因此本发明提供药物组合物及其用于缓解胰岛素抗性和相关疾病及疾病的应用，这纠正了肝交感神经和副交感神经的功能。

在一些情况下，作为对进食反应的副交感神经功能由于乙酰胆碱产生或释放的减少而受损。在另一些情况下，副交感神经功能由于一氧化氮产生的减少而受损。发明人先前公开了胆碱能激动剂的应用(见例如，美国专利No.5,561,165)，一氧化氮供体的应用(见例如，WO00/19992)，用于治疗胰岛素抗性和糖尿病。

发明人现已经发现，如图7流程图所示，施用通过肝机制作用的药剂，与现有用于胰岛素抗性、糖尿病和HDIR的治疗具有协同性。此后我们已经添加。例如，与包括共同施用两种或更多种口服糖尿病药物的常规联合疗法相比较，包括共同施用胆碱能激动剂与一或多种糖尿病药物、或共同施用一氧化氮供体与一或多种糖尿病药物、或以上两种一起与糖尿病药物共同施用的联合疗法显著更有效。发明人也已发现包括胆碱能激动剂或一氧化氮供体与糖尿病药物的联合疗法表现出比常规联合疗法显著更少的副作用。发明人已发现包括胆碱能激动剂或一氧化氮供体与糖尿病药物的联合疗法与更少和更不严重发生低血糖、水肿、体重增加和肝损伤相关。此外，发明人发现，相比于传统联合疗法，需要更低剂量的糖尿病药物来提供血糖控制。

尤其是，发明人已发现共同施用胆碱能激动剂和谷胱甘肽增加剂导致胰岛素敏感度的协同性改善。谷胱甘肽(GSH)是广泛存在的三肽，它参与多种关键的细胞过程，包括解毒和猝灭自由基。又很多药剂可用于增加谷胱甘肽，包括谷胱甘肽本身(或其酯)、α-硫辛酸和半胱氨酸前体和GSH生物合成的限速剂、N-乙酰半胱氨酸或氧杂噻唑烷-4-羧酸(oxathiazolidine-4-carboxylic acid)。发明人已发现使用胆碱能激动剂如氨甲酰甲胆碱联合N-乙酰半胱氨酸或α-硫辛酸或氧杂噻唑烷--4-羧酸的治疗，相比于单独使用胆碱能激动剂或谷胱甘肽增加剂的治疗，导致胰岛素敏感度的协同性改善。此外，联合疗法与胃肠道副作用发生率降低相关(即恶心、肚子痛、呕吐)，这一般与单独使用氨甲酰甲胆碱、N-乙酰半胱氨酸或α-硫辛酸的治疗相关。

本发明人已发现通过联合施用胆碱能激动剂氨甲酰甲胆碱以及谷胱甘肽补充剂如N-乙酰半胱氨酸来激活副交感神经途径，对于治疗肥胖和糖尿病，几种继发性并发症的治疗是特别有用的，并且尤其是炎症(Hsu et al，2004)。全身性炎症与病态肥胖和糖尿病高度相关，并可能是造成这些疾病一些相关病理的原因。实际上，甚至高血糖的瞬间发作，例如这可能出现在餐后，这可以引起肝的氧化压力和释放炎症细胞因子如TNF-α和IL-1(Ling et al，2004，Hsu et al，2004)。发明人已经确定氨甲酰甲胆碱联合N-乙酰半胱氨酸可有效向患者提供这些并发症的缓解、提高肝GSH和改善HISS反应。

本发明人首次确定在控制胰岛素反应中副交感神经反应和GSH状态之间至关重要的关系。

本发明提供新的药物组合物，其包含(a)肝副交感神经紧张调节剂，(b)至少一种糖尿病药物，和(c)药物可接受的载体。本文中所用的“肝副交感神经紧张调节剂”是正面地影响肝副交感神经功能的任何化合物。肝副交感神经紧张调节剂可以调节涉及肝副交感神经途径中的任何部分(见图7)。这些调节剂通常可以被分为两类：(1)调节胆碱能受体的化合物，例如胆碱能激动剂和乙酰胆碱酯酶拮抗剂，和(2)调节胆碱能受体下游信号传递部分的化合物，例如NOS刺激剂、NO供体、和磷酸二酯酶拮抗剂。

在本发明的一个优选实施方案中，一种新的药物组合物包含：(a)一氧化氮供体， (b)至少一种糖尿病药物，和(c)药物可接受的载体。

如本文中所用，如果：(a)在向患者施用的剂量和方法中，它不是急性毒性的，并且不导致与从治疗中所获得的治疗受益不成比例的慢性毒性，和(b)向患者施用的剂量和方法降低患者中胰岛素抗性，则任何药物化合物或组合物被认为是“药物可接受的”

如本文中所用，短语“肝副交感神经紧张调节剂”意思是选自以下的化合物：胆碱能激动剂、NO供体、NOS刺激剂、氨甲酰甲胆碱、乙酰胆碱、杜尼匹次、单满吖啶氨、腾喜龙、地美卡林、吡啶斯的明、扎那哌齐、碘磷灵、敌百虫、新斯的明、苯羟基丙氨酸和galathamine、胆碱能激动剂、乙酰甲胆碱、BIBN 99、DIBD、SCH-57790、SCH-217443、SCH-72788、槟榔碱、槟榔碱类似物、占诺美林、alvameline、米拉美林、RU 47213、sabcomeline、PD-151832、CDD-0034-C、CDD-0102、spriopiperdine、spiroquinuclidine、毒蕈碱、顺二氧戊环、RS86、AF-30、ocvimeline、AF150(S)、AF267B、SDZ 210-086、YM-796、乙酰胆碱的刚性类似物、acclidine、tasaclidine、氧特莫林、氧特莫林类似物、毛果芸香碱、毛果芸香碱类似物、硫代毛果芸香碱、及其亚硝酰基化衍生物、有机硝酸酯/盐、有机亚硝酸酯/盐、金属-NO络合物、亚硝胺、N-羟基亚硝胺、亚硝基硫醇、C-硝基化合物、二氧二氮杂环丁烯、呋喃唑酮、苯并呋喃唑酮、噁三唑-6-亚胺、sydonoimine、oximine、羟胺、N-羟基胍、羟基脲、其亚硝酰基化衍生物、其药用盐、及其混合物。

任何适合的一氧化氮供体或其药物可接受的盐可用于实施本发明。适合的一氧化氮供体的实例，包括但不限于：有机硝酸酯/盐、有机亚硝酸酯/盐、金属-NO络合物、N-亚硝胺、N-羟基亚硝胺、亚硝基硫醇、C-硝基化合物、二氧二氮杂环丁烯、呋喃唑酮、苯并呋喃唑酮、噁三唑-6-亚胺、sydonoimine、oximine、羟胺、N-羟基胍、羟基脲。

本文中所用的术语“糖尿病药物”指可用于治疗或预防胰岛素抗性和糖尿病的本领域已知的任何组合物。可用于实施本发明的糖尿病药物的实例包括但不限于：

(a)抗氧化剂，例如维生素E、维生素C、异黄酮、锌、硒、依布硒啉、类胡萝卜素；

(b)胰岛素或胰岛素类似物，例如常规胰岛素、慢胰岛素、半慢胰岛素、特慢胰岛素、NPH或速效胰岛素(humalog)；

(c)α-肾上腺素能受体拮抗剂，例如哌唑嗪、多沙唑嗪、酚苄明、特拉唑嗪、酚妥拉明、rauwoscine、yohimine、妥拉唑林、坦索罗辛、或特拉唑嗪；

(d)β-肾上腺素能受体拮抗剂，例如醋丁洛尔、阿替洛尔、倍他洛尔、布诺洛尔、卡替洛尔、艾司洛尔、美托洛尔、纳多洛尔、喷布洛尔、吲哚洛尔、普萘洛尔、噻吗洛尔、盐酸多巴酚丁胺、烯丙洛尔、布诺洛尔、布拉洛尔、卡拉洛尔、依泮洛尔、moloprolol、氧烯洛尔、帕马洛尔、他林洛尔、替普洛尔、妥拉洛尔、或托利洛尔；

(e)非选择性肾上腺素能受体拮抗剂，例如卡维地洛或拉贝洛尔；

(f)第一代磺酰脲，例如妥拉磺脲、tolubtuamide、氯磺丙脲、醋磺己脲；

(g)第二代磺酰脲，例如格列本脲、格列吡嗪、和格列美脲；

(h)双胍类剂，例如二甲双胍；

(i)苯甲酸衍生物，例如瑞格列奈；

(j)α-葡萄糖苷酶抑制剂，例如阿卡波糖和米格列醇；

(k)噻唑烷二酮，例如罗格列酮、吡咯列酮或曲格列酮；

(l)磷酸二酯酶抑制剂，例如阿那格雷、tadalfil、双嘧达莫、甘油茶碱、伐地那非、西洛地唑、米力农、茶碱、或咖啡碱；

(m)胆碱酯酶拮抗剂，例如杜尼匹次、单满吖啶氨、腾喜龙、地美卡林、吡啶斯的明、扎那哌齐、碘磷灵、敌百虫、新斯的明、或galathamine；和

(n)增加谷胱甘肽的化合物，例如N-乙酰半胱氨酸、半胱氨酸酯、L-2-氧噻唑烷--4-羧酸盐(L-2-oxothiazolidine-4-carboxolate，OTC)、γ-谷氨酰半胱氨酸、和它的乙酯盐、谷胱甘肽乙酯、谷胱甘肽异丙基酯、硫辛酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、或S-腺苷甲硫氨酸。

(o)GLP和胰高血糖素样肽类似物，例如exanitide、DAC：GLP-1(CJC-1131)、Liraglutide、ZP10、BIM51077、LY315902、LY307161(SR)。

在本发明的一个实施方案中，所述药物组合物包含作为一氧化氮供体的 3-morpholinosyndnonimine(SIN-1)和作为糖尿病药物的磺酰脲。在本发明的一个优选实施方案中，磺酰脲是格列吡嗪。

在本发明的另一个实施方案中，所述药物组合物包含作为一氧化氮供体的3-morpholinosyndnonimine(SIN-1)和作为糖尿病药物的α-葡萄糖苷酶抑制剂。在本发明的一个优选实施方案中，α-葡萄糖苷酶抑制剂是阿卡波糖。

在本发明进一步的实施方案中，所述药物组合物包含作为一氧化氮供体的3-morpholinosyndnonimine(SIN-1)和作为糖尿病药物的双胍类剂。在本发明的一个优选实施方案中，双胍类剂是二甲双胍。

在本发明仍进一步的实施方案中，所述药物组合物包含作为一氧化氮供体的3-morpholinosyndnonimine(SIN-1)和作为糖尿病药物的噻唑烷二酮。在本发明的一个优选实施方案中，噻唑烷二酮是吡咯列酮。

所述药物组合物包含作为一氧化氮供体的3-morpholinosyndnonimine(SIN-1)和作为糖尿病药物的双胍类剂。在本发明的一个优选实施方案中，双胍类剂是二甲双胍。

在本发明仍进一步的实施方案中，所述药物组合物包含作为一氧化氮供体的3-morpholinosyndnonimine(SIN-1)和作为糖尿病药物的苯甲酸衍生物。在本发明的一个优选实施方案中，苯甲酸衍生物是瑞格列奈。

在本发明仍进一步的实施方案中，所述药物组合物包含作为一氧化氮供体的3-morpholinosyndnonimine(SIN-1)和作为糖尿病药物的谷胱甘肽再生剂。在本发明的一个优选实施方案中，苯甲酸衍生物是N-乙酰半胱氨酸。

在本发明另一个实施方案中，提供所述药物组合物，其包含：(a)胆碱能激动剂，(b)至少一种糖尿病药物，和(c)药物可接受的载体。

任何适合的胆碱能激动剂可被用于实施本发明。适合的胆碱能激动剂的实例包括，但不限于：乙酰胆碱、乙酰甲胆碱、氨甲酰甲胆碱、BIBN 99(图1)、DIBD(图1)、SCH-57790(图1)、SCH-217443(图1)、SCH-72788(图1)、槟榔碱(图2)、槟榔碱类似物(图2)、占诺美林(图2)、毒蕈碱(图2)、米拉美林(图2)、RU 47213(图2)、sabcomeline、PD-151832(图2)、CDD-0034-C(图2)、 CDD-0102(图2)、spiropiperidine(图3)、spiroquinuclidine(图3)、毒蝇碱(图3)、顺二氧戊环(图3)、RS86(图3)、AF-30(图3)、ocvimeline(图3)、AF150(S)(图3)、AF267B(图3)、SDZ 210-086(图3)、YM-796(图3)、乙酰胆碱的刚性类似物(图4)、acclidine(图4)、tasaclidine(图4)、氧化震颤素(图5)、氧化震颤素类似物(图5)、毛果芸香碱(图5)、毛果芸香碱类似物(图5)、硫代毛果芸香碱(图5)。任何这些化合物的亚硝酰基化形式可以被使用。

优选地，胆碱能激动剂是毒蕈碱受体激动剂，和更优选地胆碱能激动剂是乙酰胆碱，和最优选地胆碱能激动剂是氨甲酰甲胆碱。

与胆碱能激动剂一起使用的糖尿病药物可以是上面所讨论的糖尿病药物中的任何一种。

在本发明的一个实施方案中，药物组合物包含作为胆碱能激动剂的氨甲酰甲胆碱和作为糖尿病药物的增加谷胱甘肽的化合物。在优选实施方案中，药物组合物包含氨甲酰甲胆碱和N-乙酰半胱氨酸作为糖尿病药物。在另一个优选实施方案中，药物组合物包含氨甲酰甲胆碱和α-硫辛酸作为糖尿病药物。

在本发明另一个实施方案中，药物组合物包含氨甲酰甲胆碱作为胆碱能激动剂和磺酰脲作为糖尿病药物。在本发明的一个优选实施方案中，磺酰脲是格列吡嗪。

在本发明另一个实施方案中，药物组合物包含氨甲酰甲胆碱作为胆碱能激动剂和α-葡萄糖苷酶抑制剂作为糖尿病药物。在本发明的一个优选实施方案中，α-葡萄糖苷酶抑制剂是阿卡波糖。

在本发明进一步的实施方案中，药物组合物包含氨甲酰甲胆碱作为胆碱能激动剂和双胍类剂作为糖尿病药物。在本发明的一个优选实施方案中，双胍类剂是二甲双胍。

在本发明仍进一步的实施方案中，药物组合物包含氨甲酰甲胆碱作为胆碱能激动剂和噻唑烷二酮作为糖尿病药物。在本发明的一个优选实施方案中，噻唑烷二酮是吡格列酮。

在本发明仍进一步的实施方案中，药物组合物包含氨甲酰甲胆碱作为胆碱能激动剂和苯甲酸衍生物作为糖尿病药物。在本发明的一个优选实施方案中，苯甲酸衍生物是瑞格列奈。

在本发明另一个实施方案中，药物组合物包含氨甲酰甲胆碱作为胆碱能激动剂和GLP-1类似物作为糖尿病药物。在本发明的一个优选实施方案中，GLP-1是exanatide。

在本发明另一个实施方案中，药物组合物包含氨甲酰甲胆碱作为胆碱能激动剂和α-肾上腺素能受体拮抗剂作为糖尿病药物。在本发明的一个优选实施方案中，α-肾上腺素能受体拮抗剂是哌唑嗪。

在本发明另一个实施方案中，药物组合物包含氨甲酰甲胆碱作为胆碱能激动剂和β-肾上腺素能受体拮抗剂作为糖尿病药物。在本发明的一个优选实施方案中，β-肾上腺素能受体拮抗剂是阿替洛尔。

在本发明另一个实施方案中，药物组合物包含氨甲酰甲胆碱作为胆碱能激动剂和非选择性肾上腺素能受体拮抗剂作为糖尿病药物。在本发明的一个优选实施方案中，非选择性肾上腺素能受体拮抗剂是卡维地洛。

在本发明仍进一步的实施方案中，药物组合物包含胆碱能激动剂、一氧化氮供体和糖尿病药物如格列吡嗪、阿卡波糖、二甲双胍、砒格列酮、或瑞格列奈。

在第二个方面，本发明提供一种药物组合物，其包含(a)乙酰胆碱酯酶拮抗剂，(b)增加谷胱甘肽的化合物和(c)药物可接受的载体。可用于制备药物组合物的乙酰胆碱酯酶拮抗剂的实例包括，但不限于：苯羟基丙氨酸、多奈哌齐、加兰他敏、rivastigme、单满吖啶氨、毒扁豆碱、新斯的明、腾喜龙、吡啶斯的明、地美卡林、碘磷灵、敌百虫、扎那哌齐、美斯的明及其组合。增加谷胱甘肽的化合物可以是以上所述化合物中的任一种。在本发明的一个优选实施方案中，增加谷胱甘肽的化合物是N-乙酰半胱氨酸。

在第三个方面，本发明提供一种药物组合物，其包含(a)磷酸二酯酶拮抗剂，(b)增加谷胱甘肽的化合物和(c)药物可接受的载体。可用于制备药物组合物的乙酰胆碱酯酶抑制剂的实例包括，但不限于：阿那格雷、他达那非、双嘧达莫、甘油茶碱、伐地那非、西洛地唑、米力农、茶碱、西地那非、咖啡碱及其组合。增加谷胱甘肽的化合物可以是以上所述化合物中的任一种。在本发明的一个优选实施方案中，增加谷胱甘肽的化合物是N-乙酰半胱氨酸。

本发明的药物组合物可以通过本身已知的方式制造，例如通过常规混合、溶解、造粒、制糖衣丸、水磨、乳化、胶囊化、包埋或冻干工艺。

根据本发明使用的药物组合物因此可以按常规方式用一或多种生理可接受的载体包括赋形剂和助剂进行配制，这些载体促进降活性化合物加工成可药用的制剂。适当的制剂依赖于所选择的施用途径。

本发明组合物的施用可以通过多种适合途径进行，包括口服、局部(包括透皮、口腔或舌下)、经鼻、吸入、和胃肠道外(包括腹膜内、皮下、静脉内、皮内或肌肉内注射)，通常优选口服或胃肠道外。也应当理解优选的施用方法和剂量可以例如随病况和接受者年龄而变化。

为了注射，本发明的药剂可以配制在水溶液中，优选地在生理兼容的缓冲液中，例如Hanks’溶液、Ringer’s溶液、或生理盐水缓冲液。

为了口服施用，化合物可简单地通过组合活性化合物和本领域公知的药物可接受载体进行配制。这些载体能使本发明的化合物配制成片、丸、糖衣丸、胶囊、液体、凝胶、糖浆、淤浆、悬液等，由待治疗患者经口服摄入。用于口服使用的药物制剂可通过固体赋形剂获得，任选地碾碎所得混合物，和加工颗粒混合物，在添加适合的助剂后，如果期望，可获得片或糖衣丸核心。适合的赋形剂是，尤其是，填充剂，例如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇、或山梨醇，或纤维素制剂例如，玉米淀粉、小麦淀粉、稻米淀粉、土豆淀粉、明胶、黄芪胶、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、和/或聚乙烯吡咯烷酮。如果期望，可以加入崩解剂，例如交联的聚乙烯吡咯烷酮、琼脂、或褐藻酸或其盐如藻酸钠。

为通过吸入物或气溶胶施用，组合物可根据药物制剂领域内公知的技术制备。组合物可制备为盐水溶液，其中使用苯甲醇或其他适合的防腐剂和吸收促进剂以增强生物利用度，氟碳化合物或本领域已知的其他增溶剂或分散剂。本发明的组合物以来自加压包装或喷雾器中气溶胶喷雾形式方便地被递送，其中使用适合的抛射剂，例如，二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他适合的气体。在加压气溶胶的情况下剂量单位可以通过提供递送计量数量的阀而确定。用于吸入器或呼出器中的例如明胶的胶囊和药包可配制成含化合物和适合的粉末基如乳糖或淀粉的粉末混合物。

透皮递送系统可以是被动透皮递送系统，或者可以包括使用皮肤渗透增强剂或者“渗透增强剂”，以增加皮肤渗透性，以及非化学模式例如使用离子电渗、电穿孔或超声波。

本发明的药物组合物也可包括多种其他组分，以提供额外的治疗利益、影响药物组合物的治疗作用，或预防可能由施用所述药物组合物造成的任何潜在的副作用。可用于相关情况下的药物可接受组分或助剂的实例包括抗氧化剂、自由基清除剂、肽、生长因子、抗生素、细菌抑制剂、免疫抑制剂、抗凝剂、缓冲剂、抗炎剂、退热剂、时间控制释放粘合剂、麻醉剂、类固醇、维生素、和矿物质。

根据本发明的药物组合物可用于治疗或预防胰岛素抗性和糖尿病。所述药物组合物也可用于治疗或预防与胰岛素抗性相关的其他疾病，例如葡萄糖不耐受性损伤、高血糖、高血脂、高胰岛素血症、葡萄糖代谢受损、肥胖、糖尿病性视网膜病、糖尿病性肾病、肾小球性肾炎、X综合征、高血压、心脏疾病、心血管疾病、中风、内皮细胞功能紊乱、充血性心力衰竭、绞痛、慢性肾功能衰竭、急性肾功能衰竭和外周动脉疾病。

任何本发明药物组合物的精确剂量取决于许多因素，这些因素对本领域技术人员并参考本文公开内容是显而易见的。这些因素尤其包括：所施用化合物、剂型、所用施用途径、患者性别、年龄、和体重、和待治疗病况的严重程度。确定剂量和毒性的方法在本领域内是公知的，研究通常从动物中开始，如果没有观察到明显的动物毒性然后再对人进行研究。剂量的适当性可以通过用Lautt et al，1998设定的RIST方案来监测胰岛素抗性进行评估。经至少三天治疗后，如果所提供剂量没有引起胰岛素抗性下降到正常或可耐受水平，可以增加剂量。也应该监测患者中的药物不利反应和毒性，特别是与肝脏和心血管功能相关的。

对于包含一氧化氮供体的药物组合物，根据所使用的具体一氧化氮供体，一氧化氮供体的每日剂量为0.01mg/kg-100mg/kg。如果一氧化氮供体是SIN-1，每日剂量为0.01mg/kg-40mg/kg并优选0.15mg/kg。糖尿病药物的每日剂量取决于所用的具体药物。如果药物是格列吡嗪(glizpide)时，每日剂量为0.1mg/kg-10mg/kg，并且更优选为1mg/kg-5mg/kg。如果糖尿病药物是阿卡波糖，每日剂量为1mg/kg-100mg/kg，并且优选10mg/kg-40mg/kg。如果糖尿病药物是二甲双胍，每日剂量为10mg/kg-1000mg/kg，并且优选50mg/kg-200mg/kg。如果糖尿病药物是吡咯列酮，每日剂量为0.1mg/kg-10mg/kg，并且优选为0.5mg/kg-5mg/kg。如果糖尿病药物是瑞格列奈，每日剂量为0.1mg/kg-10mg/kg，并且优选为0.5mg/kg-5mg/kg。

对于包含胆碱能激动剂的药物组合物，胆碱能激动剂的每日用量取决于所用的具体胆碱能激动剂。如果胆碱能激动剂是氨甲酰甲胆碱，单个剂量为0.01mg-100mg并且优选为0.1mg-10mg。如果胆碱能激动剂是氨甲酰甲胆碱，单个剂量为0.01mg-10mg并且优选为0.1mg-10mg。糖尿病药物的量类似于上面所讨论的量。如果糖尿病药物是N-乙酰半胱氨酸，单个剂量为100mg-5g，优选为500mg-1g。可以施用药物组合物使得当血糖高时它具有峰值，例如在饭后，以允许在那时摄入葡萄糖。药物组合可以配制成相同药丸，其包含胆碱能激动剂和/或一氧化氮供体和糖尿病药物。作为替代，所使用的药盒可以包含多个药丸，其具有适当剂量的糖尿病药物和/或胆碱能激动剂和一氧化氮供体，例如，但不限于，“气泡眼包装”，还包括印刷在包装或与之相连的说明或指导。

本发明的药物组合物可以靶向患者的肝脏从而消除有害的全身性作用。药物组合物可以结合到胆汁盐或白蛋白从而优先递送到肝脏。作为替代，所述药物组合物可以包裹在脂质体内以优先靶向肝脏。本发明的药物组合物可以以活性形式或者作为前体施用，所述前体在肝脏中被酶代谢成为活性形式。当药物组合物靶向肝脏时，可以减少剂量。

尽管本发明已经参考例证性实施方案而描述，但是应当明白本发明不局限于这些准确的实施方案，本领域技术人员可以对其进行多种变化或修饰。所有这些变化和修饰也包括在所附权利要求中。

实施例

实施例1-在经饲喂高蔗糖而产生的胰岛素抗性大鼠中氨甲酰甲胆碱和N-乙酰半胱氨酸对胰岛素敏感度的作用

动物分组-雄性Sprage Dawley大鼠，具有≥220.0g的起始体重(Charles River，St.Constant，Quebec，Canada)，喂食正常饮食和常规自来水，在2周时间内暴露和不暴露于35％液体蔗糖溶液。六组动物在下列处理下建立：(1)对照饮食，盐水处理(n＝6)；(2)对照饮食，氨甲酰甲胆碱(0.5μg/kg ipv)和N-乙酰-L-半胱氨酸(200mg/kg)处理(n＝8)；(3)对照饮食，氨甲酰甲胆碱(0.5μg/kg ipv)(n＝5)；(4)对照饮食，N-乙酰-L-半胱氨酸(200mg/kg)(n＝4)；(5)蔗糖饮食，盐水处理(n＝4)；(6)蔗糖饮食，氨甲酰甲胆碱(0.5μg/kg ipv)和N-乙酰-L-半胱氨酸(200mg/kg)处理(n＝5)；(7)蔗糖饮食，氨甲酰甲胆碱(0.5μg/kg ipv)(n＝6)；和(8)蔗糖饮食，N-乙酰-L-半胱氨酸(200mg/kg)(n＝3)。

方法-所有动物禁食24小时。用标准RIST外科准备来准备这些动物。用腹膜内注射戊巴比妥钠麻痹大鼠(65mg kg-1；Somnotol，MTC Pharmaceutical，Ont)通过颈静脉中套管连续输注戊巴比妥钠的实验来维持麻醉(0.5mg.ml-1盐水以50μl.min-1给予)，需要时用0.65mg(0.01ml)推注法补充。大鼠被置于控温的手术台上(Harvard Apparatus，Kent，England)，监测直肠温度并维持在37-37.5℃。通过气管自发的呼吸。

如前述建立动静脉的分流(Lautt WW et al.Can J Physiol Pharmacol.1998；76(12)：1080-6.)，用于监测平均动脉血压(MAP)、血糖水平和用于药物递送。简要地说，两个导管(聚乙烯管PE60)，一个被插入右股动脉和另一个插入右股静脉，被连接到由与硅胶管连接的T形管组成的三通血管回路的两个开口。回路的第三个开口连接到压力传感器用于记录分流压力，当经钳夹关闭与回路的静脉侧连接硅胶管时，代表全身性动脉血压。从分流通道的动脉侧取血液样本用于葡萄糖测量。分流通道内血液流动保证血糖浓度的实时测量，这对如下所述的血糖夹测试是必要的。一个输注线被插入到环的静脉侧用于药物递送。另一个输注线连接颈静脉以建立葡萄糖输注。动物被肝素化(100IU.kg-1)以避免在血管内凝固。

除了标准的RIST外科准备，用门静脉穿刺(21g×3/4英寸)和IG穿刺(22号，1英寸iv导管被插入胃中并粘合上)实施剖腹手术。

对照RIST按先前描述实施(Lautt WW et al.Can J Physiol Pharmacol.1998；76(12)：1080-6.)。简要地说，手术完成以后，动物被给予30分钟稳定期。然后通过5分钟间隔所取样本来确定基线葡萄糖水平，并持续直到得到三个连续稳定的测定。这三个数据点的平均值被认为是RIST的基线。为了实施RIST，人胰岛素(50mU.kg-1在0.5ml盐水中)以0.1ml.min-1的速度输入到股静脉持续5分钟。在胰岛素输注1分钟后，测定第一个测试葡萄糖样本并开始多变的葡萄糖输注(10％)。每2分钟取血液样本，并调节葡萄糖输注速率以维持血糖。RIST指数是当不再需要输注葡萄糖时而终止的测试期间(约30分钟)中输注以维持血糖的葡萄糖的量(mg.kg-1)。在RIST结束时，动物处在测试前的血糖水平。

根据测试组，氨甲酰甲胆碱或等价体积的盐水被施用ipv(0.5ml推注，0.05ml/分钟的速率加上0.03ml导管死腔体积)。根据测试组，N-乙酰半胱氨酸或等价体积的盐水然后被施用iv(1.0ml推注，0.1ml/分钟的速率)。从药物施用开始动物被给予60分钟的休息。动物通过胃内输注(1.0ml/分钟，加0.1ml测试饮食以对应导管死腔体积)而向其施用混合的液体饮食(10ml/kg)。在最少90分钟时间中每5分钟取血糖样本以绘制血糖对测试饮食应答的特征谱。一旦实现稳定的血糖，进行第二个RIST。取肝脏样本用于谷胱甘肽测定。

结果-如表1和图5中显示，相比于对照老鼠，用氨甲酰甲胆碱和N-乙酰半胱氨酸处理的大鼠在RIST中显示出最大的增强。联合疗法对于在用蔗糖喂养的大鼠中恢复胰岛素敏感度比单独使用氨甲酰甲胆碱或N-乙酰半胱氨酸更有效。

表1-氨甲酰甲胆碱(Bch)和N-乙酰半胱氨酸(NAC)联合疗法在蔗糖喂食的大鼠中对饮食诱导的胰岛素敏化的作用。所有数值指与对照相比RIST的增强百分比。

实施例2-在通过喂食高水平蔗糖所产生的胰岛素抗性的大鼠中，氨甲酰甲胆碱和格列吡嗪对胰岛素敏感性的作用

本试验按实施例1所述用格列吡嗪代替N-乙酰半胱氨酸来完成。联合疗法对于在饲喂蔗糖的大鼠中恢复胰岛素敏感性比单独使用氨甲酰甲胆碱或格列吡嗪更有效。

实施例3-在通过喂食高水平蔗糖所产生的胰岛素抗性的老鼠中，氨甲酰甲胆碱和阿卡波糖对胰岛素敏感性的作用

本试验按实施例1所述用阿卡波糖代替N-乙酰半胱氨酸来完成。联合疗法对于在饲喂蔗糖的大鼠中恢复胰岛素敏感性比单独使用氨甲酰甲胆碱或阿卡波糖更有效。

实施例4-在通过喂食高水平蔗糖所产生的胰岛素抗性的大鼠中，氨甲酰甲胆碱和二甲双胍对胰岛素敏感度的作用

本试验按实施例1中所述用二甲双胍代替N-乙酰半胱氨酸来完成。联合疗法对于在饲喂蔗糖的大鼠中恢复胰岛素敏感度比单独使用氨甲酰甲胆碱或二甲双胍更有效。

实施例5-在通过喂食高水平蔗糖所产生的胰岛素抗性的大鼠中，氨甲酰甲胆碱和吡格列酮对胰岛素敏感度的作用

本试验按实施例1所述用吡格列酮代替N-乙酰半胱氨酸来完成。联合疗法对于在饲喂蔗糖的大鼠中恢复胰岛素敏感度比单独使用氨甲酰甲胆碱或吡格列酮更有效。

实施例6-在通过喂食高水平蔗糖所产生的胰岛素抗性的大鼠中，氨甲酰甲胆碱和瑞格列奈对胰岛素敏感度的作用

本试验按实施例1所述用瑞格列奈代替N-乙酰半胱氨酸来完成。联合疗法对于在饲喂蔗糖的大鼠中恢复胰岛素敏感度比单独使用氨甲酰甲胆碱或瑞格列奈更有效。

实施例7-在通过喂食高水平蔗糖所产生的胰岛素抗性的大鼠中，新斯的明和N-乙酰半胱氨酸对胰岛素敏感度的作用

本试验按实施例1所述用新斯的明代替氨甲酰甲胆碱来完成。联合疗法对于在饲喂蔗糖的大鼠中恢复胰岛素敏感度比单独使用新斯的明或N-乙酰半胱氨酸更有效。

实施例8-在通过喂食高水平蔗糖所产生的胰岛素抗性的大鼠中，SIN-1和格列吡嗪对胰岛素敏感度的作用

本试验按实施例1所述用SIN-1代替氨甲酰甲胆碱和用格列吡嗪代替N-乙酰半胱氨酸来完成。联合疗法对于在饲喂蔗糖的大鼠中恢复胰岛素敏感度比单独使用SIN-1或格列吡嗪更有效。

实施例9-在通过喂食高水平蔗糖所产生的胰岛素抗性的大鼠中，SIN-1和阿卡波糖对胰岛素敏感度的作用

本试验按实施例1所述用SIN-1代替氨甲酰甲胆碱和用阿卡波糖代替N-乙酰半胱氨酸来完成。联合疗法对于在饲喂蔗糖的大鼠中恢复胰岛素敏感度比单独使用SIN-1或阿卡波糖更有效。

实施例10-在通过喂食高水平蔗糖所产生的胰岛素抗性的大鼠中，SIN-1和二甲双胍对胰岛素敏感度的作用

本试验按实施例1所述用SIN-1代替氨甲酰甲胆碱和用二甲双胍代替N-乙酰半胱氨酸来完成。联合疗法对于在饲喂蔗糖的大鼠中恢复胰岛素敏感度比单独使用SIN-1或二甲双胍更有效。

实施例11-在通过喂食高水平蔗糖所产生的胰岛素抗性的大鼠中，SIN-1和吡格列酮对胰岛素敏感度的作用

本试验按实施例1所述用SIN-1代替氨甲酰甲胆碱和用吡格列酮代替N-乙酰半胱氨酸来完成。联合疗法对于在饲喂蔗糖的大鼠中恢复胰岛素敏感度比单独使用SIN-1或吡格列酮更有效。

实施例12-在通过喂食高水平蔗糖所产生的胰岛素抗性的大鼠中，SIN-1和瑞格列奈对胰岛素敏感度的作用

本试验按实施例1所述用SIN-1代替氨甲酰甲胆碱和用瑞格列奈代替N-乙酰半胱氨酸来完成。联合疗法对于在饲喂蔗糖的大鼠中恢复胰岛素敏感度比单独使用SIN-1或瑞格列奈更有效。

实施例13-在通过喂食高水平蔗糖所产生的胰岛素抗性的大鼠中，托普司特和N-乙酰半胱氨酸对胰岛素敏感度的作用

本试验按实施例1所述用托普司特代替氨甲酰甲胆碱来完成。联合疗法对于在饲喂蔗糖的大鼠中恢复胰岛素敏感度比单独使用托普司特或N-乙酰半胱氨酸更有效。

实施例14-在通过肝的去神经支配所产生的胰岛素抗性的大鼠中，SIN-1和氨甲酰甲胆碱对胰岛素敏感度的作用

动物按实施例1准备。进行对照RIST。反应在正常范围内。然后在通过外科手术解除沿肝动脉到达肝的肝神经支配以后进行RIST，并且该指数显示胰岛素抗性。在施用胰岛素前10分钟开始并持续整个测试期以2.5mg/kg/分钟的速率经输注向门静脉施用氨甲酰甲胆碱。所得RIST指数显示胰岛素抗性被逆转。

在第二个动物上，进行对照RIST。反应在正常范围内。然后在外科去神经支配后进行RIST并且RIST指数显示显著的胰岛素抗性。以10.0mg/kg/分钟的速率持续2分钟时间经输注向门静脉施用SIN-1。所得RIST指数显示胰岛素抗性被逆转。

在第三个动物上进行对照RIST。反应在正常范围内。然后在外科去神经支配后进行RIST并且RIST指数显示显著的胰岛素抗性。如上述首先施用氨甲酰甲胆碱。在测试期结束前5分钟以10.0mg/kg/分钟的速率持续2分钟时间经输注向门静脉施用SIN-1。所得RIST指数显示比分别单独使用氨甲酰甲胆碱和SIN-1时胰岛素抗性被逆转更多。

实施例15-在通过肝的去神经支配所产生的胰岛素抗性的大鼠中，SIN-1、氨甲酰甲胆碱和5mg/kg格列吡嗪对胰岛素敏感度的作用

动物按实施例1准备。进行对照RIST。反应在正常范围内。然后在手术去神经支配以后进行RIST。在施用胰岛素前10分钟开始并持续整个测试期以2.5mg/kg/分钟的速率经输注向门静脉施用氨甲酰甲胆碱。所得RIST指数显示胰岛素抗性被逆转。

在第二个动物上，进行对照RIST。反应在正常范围内。然后在手术去神经支配后进行RIST并且RIST指数显示显著的胰岛素抗性。以10.0mg/kg/分钟的速率持续2分钟时间经输注向门静脉施用SIN-1。所得RIST指数显示胰岛素抗性被逆转。

在第三个动物上进行对照RIST。反应在正常范围内。然后在手术去神经支配后进行RIST并且RIST指数显示显著的胰岛素抗性。如上述首先施用氨甲酰甲胆碱。在测试期结束前5分钟以10.0mg/kg/分钟的速率持续2分钟时间经输注向门静脉施用SIN-1。在测试期结束前30秒推注给予5mg/kg格列吡嗪。获取RIST且结果是比单独氨甲酰甲胆碱或SIN-1时更大的胰岛素抗性。

实施例16-在通过肝的去神经支配所产生的胰岛素抗性的大鼠中，SIN-1、氨甲酰甲胆碱和2.5mg/kg格列吡嗪对胰岛素敏感度的作用

在第三个动物上进行对照RIST。反应在正常范围内。然后在手术去神经支配后进行RIST并且RIST指数显示显著的胰岛素抗性。如上述首先施用氨甲酰甲胆碱。在测试期结束前5分钟以10.0mg/kg/分钟的速率持续2分钟时间经输注向门静脉施用SIN-1。在测试期结束前30秒推注给予2.5mg/kg格列吡嗪。获取RIST且结果是比单独氨甲酰甲胆碱或SIN-1时更大的胰岛素抗性。

实施例17-在通过肝的去神经支配所产生的胰岛素抗性的大鼠中，SIN-1、氨甲酰甲胆碱和2.5mg/kg格列吡嗪对胰岛素敏感度的作用

在第二个动物上，进行对照RIST。反应在正常范围内。然后在手术去神经支配后进行RIST并且RIST指数显示显著的胰岛素抗性。以10.0mg/kg/分钟的速率持续 2分钟时间经输注向门静脉施用SIN-1。所得RIST指数显示胰岛素抗性被逆转。

在第三个动物上进行对照RIST。反应在正常范围内。然后在手术去神经支配后进行RIST并且RIST指数显示显著的胰岛素抗性。如上述首先施用氨甲酰甲胆碱。在测试期结束前5分钟以10.0mg/kg/分钟的速率持续2分钟时间经输注向门静脉施用SIN-1。在测试期结束前30秒推注给予1.25mg/kg格列吡嗪。获取RIST且结果是比单独氨甲酰甲胆碱或SIN-1时更大的胰岛素抗性。

实施例18-在通过肝的去神经支配所产生的胰岛素抗性的大鼠中，SIN-1、氨甲酰甲胆碱和阿卡波糖对胰岛素敏感度的作用

在第三个动物上进行对照RIST。反应在正常范围内。然后在手术去神经支配后进行RIST并且RIST指数显示显著的胰岛素抗性。如上述首先施用氨甲酰甲胆碱。在测试期结束前5分钟以10.0mg/kg/分钟的速率持续2分钟时间经输注向门静脉施用SIN-1。在测试期结束前30秒推注给予40mg/kg、20mg/kg或10mg/kg阿卡波糖。获取RIST且结果是比单独氨甲酰甲胆碱或SIN-1时更大的胰岛素抗性。较低剂量的阿卡波糖与较高剂量的同样有效。

实施例19-在通过肝的去神经支配所产生的胰岛素抗性的大鼠中，SIN-1、氨甲酰甲胆碱和二甲双胍对胰岛素敏感度的作用

在第三个动物上进行对照RIST。反应在正常范围内。然后在手术去神经支配后进行RIST并且RIST指数显示显著的胰岛素抗性。如上述首先施用氨甲酰甲胆碱。在测试期结束前5分钟以10.0mg/kg/分钟的速率持续2分钟时间经输注向门静脉施用SIN-1。在测试期结束前30秒推注给予200mg/kg、100mg/kg或50mg/kg格列吡嗪。获取RIST且结果是比单独氨甲酰甲胆碱或SIN-1时更大的胰岛素抗性。较低剂量的二甲双胍与较高剂量的同样有效。

实施例20-在通过肝的去神经支配所产生的胰岛素抗性的大鼠中，SIN-1、氨甲酰甲胆碱和吡格列酮对胰岛素敏感度的作用

在第三个动物上进行对照RIST。反应在正常范围内。然后在手术去神经支配后进行RIST并且RIST指数显示显著的胰岛素抗性。如上述首先施用氨甲酰甲胆碱。在测试期结束前5分钟以10.0mg/kg/分钟的速率持续2分钟时间经输注向门静脉施用SIN-1。在测试期结束前30秒推注给予3mg/kg、1.5mg/kg和0.75mg/kg吡格列酮。获取RIST且结果是比单独氨甲酰甲胆碱或SIN-1时更大的胰岛素抗性。较低剂量的吡格列酮与较高剂量的同样有效。

实施例21-在通过肝的去神经支配所产生的胰岛素抗性的大鼠中，SIN-1、氨甲酰甲胆碱和瑞格列奈对胰岛素敏感度的作用

在第三个动物上进行对照RIST。反应在正常范围内。然后在手术去神经支配后进行RIST并且RIST指数显示显著的胰岛素抗性。如上述首先施用氨甲酰甲胆碱。在测试期结束前5分钟以10.0mg/kg/分钟的速率持续2分钟时间经输注向门静脉施用SIN-1。在测试期结束前30秒推注给予3mg/kg、1.5mg/kg和0.75mg/kg瑞格列奈。获取RIST且结果是比单独氨甲酰甲胆碱或SIN-1时更大的胰岛素抗性。较低剂量的瑞格列奈与较高剂量的同样有效。

实施例22-在通过肝的去神经支配所产生的胰岛素抗性的大鼠中，氨甲酰甲胆碱、NAC和瑞格列奈对胰岛素敏感度的作用

在第二个动物上，进行对照RIST。反应在正常范围内。然后在手术去神经支配后进行RIST并且RIST指数显示显著的胰岛素抗性。以0.1mL/分钟的速率持续2分钟时间经输注向门静脉施用NAC(200mg/mL)。所得RIST指数显示胰岛素抗性被逆转。

在第三个动物上进行对照RIST。反应在正常范围内。然后在手术去神经支配后进行RIST并且RIST指数显示显著的胰岛素抗性。如上述首先施用氨甲酰甲胆碱。在测试期结束前5分钟以0.1mL/分钟的速率持续2分钟时间经输注向门静脉施用NAC。在测试期结束前30秒推注给予3mg/kg、1.5mg/kg和0.75mg/kg瑞格列奈。获取RIST且结果是比单独氨甲酰甲胆碱或NAC时更大的胰岛素抗性。较低剂量的瑞格列奈与较高剂量的同样有效。

实施例23-在未服用过药物的糖尿病前男性中用氨甲酰甲胆碱和N-乙酰半胱氨酸控制高血糖

目的-确定氨甲酰甲胆碱和N-乙酰半胱氨酸(NAC)联合疗法在控制餐后高血糖中的有效性。

研究设计内容-本研究是开放性标记研究。研究对象是40-60岁的前/糖尿病男性，试验包括至少20名男性并在至少12周治疗中跟踪他们。患者优选在他们的三次主餐之前一小时服用所述两种化合物。进行调查的结果是HbA1c水平降低＞0.9％或低于7.5％、空腹血糖减少到＜110mg/dL、高血糖/高血脂的餐后控制改善、脂质特征谱(游离脂肪酸、TG和HDL/LDL胆固醇)改善、血压降低、体重减轻和对肝脏功能的影响。

入选标准-研究对象是40-60岁之间的男性对象，能给予知情同意，具有轻度至中度2型糖尿病(具有HBA1c水平＞8％，空腹血糖水平＞110mb/dL)，在其他方面健康状况良好，没有其他明显疾病，血压160/90，没有已知的靶器官损伤。

终末器官损伤包括下列各项：增殖性视网膜病、血清肌苷大于2、缺血性心脏病、充血性心力衰竭、外周血管性疾病和外周神经病变。

排除标准-排除标准包括以下各项：明显的消化异常，例如吸收不良或慢性腹泻；明显的器官功能异常，包括(但不限于)肝病、肺部疾病、缺血性心脏病、心力衰竭、中风、外周血管性疾病、高血压(BP大于160/90)、和贫血(红细胞压积小于30)、其它严重或慢性疾病、严重或慢性疾病史、任何显著的糖尿病并发症，例如肾损伤(肾功能不全、血清肌苷大于2)、眼损伤(增殖性视网膜病)、糖尿病性神经病、冠状动脉病、或外周血管性疾病；吸烟、酒精或药物滥用；胰岛素治疗；HIV或(乙型或丙型)肝炎筛选测验阳性(向对象通报这些测验结果)。

在抗高血压药物治疗中的患者被排除，即使血压得到很好的控制，因为抗高血压药物治疗在测验餐攻击中可能影响血糖，因此引入导致混淆的变量。

研究设计-在12周研究中患者访问诊室四次。第一次访问(试验开始之前)患者的基线水平通过抽血测量。所作检验是：空腹血糖、TGs、AST、ALT、总胆红素、碱性磷酸酶、HDL、LDL、总胆固醇、游离脂肪酸、空腹胰岛素、C-肽和HbA1c。然后用标准罐装Vanilla Boost作为模型饮食(237ml，含10g蛋白质、4g脂肪和41g碳水化合物)使患者接受饮食耐受试验。通过置入性导管收集血样并送去分析。时间安排如下：

T＝-1∶10(禁食) 葡萄糖

T＝-1∶00 葡萄糖

患者等待一小时

T＝0∶00 葡萄糖、胰岛素、C-肽、乳酸、游离脂肪酸(FFA)、胰高血糖素、甘油三酯(TGL)

患者消费BOOST液体饮食

T＝0∶10 葡萄糖、胰岛素、乳酸、FFA

T＝0∶20 葡萄糖、胰岛素、乳酸、FFA

T＝0∶30 葡萄糖、胰岛素、乳酸、FFA

T＝0∶45 葡萄糖、胰岛素、乳酸、FFA

T＝1∶00 葡萄糖、胰岛素、C-肽、胰高血糖素、乳酸、FFA、TGL

T＝1∶30 葡萄糖、胰岛素、乳酸、FFA

T＝2∶00 葡萄糖、胰岛素、C-肽、胰高血糖素、乳酸、FFA、TGL

T＝3∶00 葡萄糖、胰岛素、C-肽、胰高血糖素、乳酸、FFA、TGL

T＝4∶00 葡萄糖、胰岛素、C-肽、胰高血糖素、乳酸、FFA、TGL

患者接受药物带回家。药物(氨甲酰甲胆碱和N-乙酰半胱氨酸)在早饭、午饭和晚饭前1小时服用。

第二次访问发生在开始日后四周。医生检查患者血压、体重和葡萄糖。患者填写简单的调查表以确定是否在他们的生活方式中出现任何其他主要改变。任何剩下的药物返还给医生并被计数，然后给予新药持续接下来的四周。

访问三发生在8周后。在安全性访问中医生再次检查患者血压、体重和葡萄糖。患者填写简单的调查表以确定是否在他们的生活方式中出现任何其他主要改变。旧的剩下的药物返还给医生并被计数，然后给予新药用于接下来的四周。

访问四是在12周，重复第一次访问的整个程序。在从患者中抽血之前，他接受联合疗法然后喝下液体测验餐。患者也填写调查表。

结果-当餐前服用时联合疗法至少对终点有积极影响。

参考文献

Beyer J，Krause U，Dobronz A，Fuchs B，Delver JR & Wagner R(1990).Assessment of Insulin Needs In Insulin-Dependent Diabetics and Healthy VolunteersUnder Fasting Conditions，Horm Metab Res Suppl 24，71-77.

Brownlee M(2001).Biochemistry and molecular cell biology of diabeticcomplications.Nature 414，813-819.

Hsu CC，Yen HF，Yin MC，Tsai CM，Hsieh CH.Five cysteine-containingcompounds delay diabetic deterioration in Balb/cA mice.J Nutr.2004Dec；134(12)：3245-9.

Latour MG & Chan CC(2002).A Rapid Insulin Sensitivity Test(RIST)inthe Anesthetized Mice(Abstract).Diabetes 51(Suppl.2)，A422.

Lautt WW(1999).The Hiss Story Overview：A Novel HepaticNeurohumoral Regulation of Peripheral Insulin Sensitivity in Health and Diabetes.Can J Physiol Pharmacol 77，553-562.

Lautt WW(2003).New Paradigm for Insulin Resistance：The HissStory.In：Atherosclerosis，Hypertenslon and Diabetes.Eds：G.N.Pierce，M.Nagano，P.Zahradka，And N.S.Dhalla.Kluwer Academic Publishers，Bost.Chapter21，pp.263-276.

Lautt WW，Macedo MP，Sadri P，Takayama S，Ramos FD&Legare DJ(2001).Hepatic Parasympathetic Nerve-Dependent Control Of.Peripheral InsulinSensitivity Is Deterrnined By Feeding And Fasting：Dynamic Control Of Hiss-Dependent Insulin Action.Am J Physlol 281，G29-G36.

Lautt，W.W.，Wang，X.，Sadri，P.，Legare，D.J.，And Macedo，M.P.(1998).Rapid Insulin Sensitivity Test(RIST).Can.J.Physiol.Pharmacol.76：1080-1086.

Ling PR，Muelier C，Smith RJ，Bistrian BR.Hyperglycemia induced byglucose infusion causes hepatic oxidative stress and systemic inflammation，but notSTAT3 or MAP kinase activation in liver in rats.Metabolism.2003 Jul；52(7)：868-74.

Moore MC，Satake S，Baranowski B，Hsieh PS，Neal DW&CherringtonAd(2002).Effect of Hepatic Denervation on Peripheral Insulin Sensitlvity InConscious Dogs.Am J Physiol Endocrinol Metab 282，E286-E296.

Porszasz R，Legvari G，Nemeth J，literati P，Szolcsanyi J & Szilvassy Z(2002).The Sensory Nitrergic Nature of The Hepatic Insulin Sensitizing SubstanceMechanism In Conscious Rabbits.Eur J Pharmacol 443，211-212.

Xie H & Lautt WW(1995).Induction of insulin resistance by cholinergicblockade with atropine in the cat.J auton pharmacol 15，361-369.

Claims

1.一种药物组合物，其包含：(a)肝副交感神经紧张调节剂，(b)至少一种糖尿病药物，和(c)药物可接受的载体，其中所述肝副交感神经紧张调节剂是氨甲酰甲胆碱且所述糖尿病药物是N-乙酰半胱氨酸。

2.权利要求1的药物组合物，进一步包含药物可接受的靶向肝脏的物质。

3.权利要求2的药物组合物，其中所述靶向肝脏的物质选自：白蛋白、脂质体、和胆盐。

4.权利要求1-3中任一项药物组合物用于制备治疗或预防选自以下的疾病的药物的用途：II型糖尿病、胰岛素抗性和高血糖。

5.一种制备治疗或抑制选自以下疾病的药物的方法：II型糖尿病、胰岛素抗性和高血糖，包括制备治疗有效量的权利要求1-3中任一项的药物组合物。

6.一种药盒，其以组合包含：权利要求1-3中任一项的药物组合物和给药方案说明，用于施用所述组合物以改善选自以下疾病的症状：II型糖尿病、胰岛素抗性和高血糖。

7.权利要求6的药盒，其中所述说明包括与餐食一起施用药物组合物的说明。

8.权利要求6的药盒，其中所述说明包括在餐前30分钟施用组合物的说明。