CN1957925A - 木瓜蛋白酶纳米脂质体制备及其形态控制方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及生物技术领域的一种木瓜蛋白酶纳米脂质体的制备及其形态控制方法。本发明的木瓜蛋白酶纳米脂质体由木瓜蛋白酶、磷脂和各种功能助剂通过乙醇注入法制备而成；其形态可通过调节磷脂的浓度和超声时间等制备条件进行控制。本发明制得的木瓜蛋白酶纳米脂质体颗粒大小易于控制、呈规则的双层膜结构、形态规整。
Description
技术领域
本发明属药物制剂或化妆品技术领域，具体涉及一种木瓜蛋白酶纳米脂质体制备及其形态控制方法。
背景技术
木瓜蛋白酶(Papain)，又称木瓜酶是采用现代生物工程技术提炼而成的纯天然生物酶制品。木瓜蛋白酶是世界上产量最大、用途最广的植物蛋白酶。近10多年来，木瓜蛋白酶生物技术研究尤为迅猛，已逐步从组织水平深入到细胞水平和分子水平的研究。广泛应用于医药、食品、化妆、饲料、制革以及造酒工业。
国内外有很多关于木瓜蛋白酶的医疗和化妆品应用的专利申请。美国专利US5814328公开了一种利用木瓜蛋白酶和还原剂制备胶原质的方法，美国专利US4814433公开了一种木瓜蛋白酶自由碎片的制备方法，美国专利US 5670358公开了一种抑止木瓜蛋白酶与动物体内多糖反应的方法，中国专利CN1597946公开了一种制备木瓜蛋白酶的方法。中国专利CN01124102.0公开了一种木瓜蛋白酶酶解全蛋分离蛋白粉多肽的方法。中国专利CN1377705公开了以木瓜蛋白酶(木瓜素或称木瓜提取物)作主要原料配之以辅料制得的润喉口含(糖)片的方法。
目前有关木瓜蛋白酶的研究工作已有很多报道，但大多集中于固定化木瓜蛋白酶的应用开发上，对于木瓜蛋白酶脂质体制剂，目前国内外尚未见报道。脂质体作为一种药物载体，可以降低药物的毒副作用，并且做为药物储库，产生持久的治疗作用。纳米材料的小尺寸效应、表面效应使其具有良好的溶解性和扩散渗透性，因而药物脂质体制剂的纳米化可以大大减少药物的用量、增加吸收度、降低或消除毒副反应。
发明内容
本发明的目的是公开一种木瓜蛋白酶纳米脂质体制备及其形态控制的方法，旨在通过木瓜蛋白酶纳米脂质体的纳米化，提高木瓜蛋白酶纳米脂质体的生物利用度和药物靶向性能。
本发明公开的是通过改变影响脂质体粒径的主要因素磷脂的浓度和超声时间来控制木瓜蛋白酶纳米脂质体的粒径。
本发明所选择的制备方法为乙醇滴入法。
本发明通过下述制备方法实现：
(1)通过乙醇注入法制备木瓜蛋白酶纳米脂质体：精确称取一定量的木瓜蛋白酶、磷脂、稳定剂、柔性辅料、表面活性剂、加入一定量有机溶剂，超声至混悬液均匀；将均匀混悬液按一定速度滴入保持恒温的水合介质，得脂质体初悬液；脂质体初悬液再经水浴超声一定时间，即得木瓜蛋白酶纳米脂质体混悬液。
(2)根据(1)的制备方法，通过改变磷脂的浓度和脂质体初悬液水浴超声时间，制备木瓜蛋白酶纳米脂质体，比较其粒径大小。
本发明所述的磷脂是大豆卵磷脂。
本发明选用稳定剂来稳定脂质体结构，减少卵磷脂的氧化，降低药物的泄漏。所述稳定剂包括胆固醇和维生素E。
本发明选用的表面活性剂是Tween-80。
本发明的磷脂浓度为5～15mg/ml；磷脂和胆固醇的质量比为4∶1～2∶1；木瓜蛋白酶的的浓度为0.2～1.0mg/ml；维生素E与磷脂的质量比为1∶10～1∶20；柔性辅料的浓度为0.5～1.5mg/ml；表面活性剂的浓度为2.0～4.0mg/ml。
本发明中脂质体初悬液水浴超声时间为15～30min。
本发明所述的有机溶剂是无水乙醇。本发明所用的水合介质是蒸馏水以及根据中国药典2000版标准配制的pH6.8的磷酸盐缓冲溶液。本发明中水合介质和有机溶剂的体积比为9∶1。
采用本发明方法获得的木瓜蛋白酶纳米脂质体粒径为51.3nm～98.9nm。
附图说明
图1为乙醇注入-超声法制备的木瓜蛋白酶纳米脂质体，其卵磷脂浓度5mg/mL，超声15min，平均粒径为85.0nm。
图2为乙醇注入-超声法制备的木瓜蛋白酶纳米脂质体，其卵磷脂浓度5mg/mL，超声30min，平均粒径为51.3nm。
图3为乙醇注入-超声法制备的木瓜蛋白酶纳米脂质体，其卵磷脂浓度7mg/mL，超声30min，平均粒径为63.5nm。
图4为乙醇注入-超声法制备的木瓜蛋白酶纳米脂质体，其卵磷脂浓度10mg/mL，超声30min，平均粒径为98.9nm。
图5木瓜蛋白酶纳米脂质体透射电镜图片。
具体实施方式
通过下面实施例说明本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围，不局限于此。
实施例1 乙醇滴入法制备木瓜蛋白酶纳米脂质体
称取处方量的卵磷脂、胆固醇、木瓜蛋白酶、维生素E、去氧胆酸钠、Tween-80等，向其中加入适量无水乙醇，超声至悬液均匀，得类脂混悬液；水合介质置于恒温磁力搅拌器上以保持规定的温度和搅拌速度；将类脂混悬液慢慢滴入其中，得含乙醇浓度为10％的脂质体初悬液。置于水浴式超声仪超声一定时间，即得木瓜蛋白酶纳米脂质体悬液。改变磷脂浓度和脂质体初悬液水浴超声时间，制备木瓜蛋白酶纳米脂质体，用动态光散射纳米粒度分析仪测其粒径，如图2～5。其中图1为卵磷脂浓度5mg/mL，超声15min，粒径为85.0nm。图2为卵磷脂浓度5mg/mL，超声30min，粒径为51.3nm。图3为卵磷脂浓度7mg/mL，超声30min，粒径为63.5nm。图4为卵磷脂浓度10mg/mL，超声30min，粒径为98.9nm。
实施例2 木瓜蛋白酶纳米脂质体形态学观察
形态观察：取适量产物以蒸馏水稀释至较低浓度，滴于铜网上放置至成膜均匀，多余液体挥干，透射电镜下观察产物形态。从图5木瓜蛋白酶纳米脂质体透射电镜图片可以看出，产物为球形或者椭圆形脂质体颗粒，彼此分散、独立。
Claims (12)
1.木瓜蛋白酶纳米脂质体制备及其形态控制方法，其特征在于：用乙醇注入法制备木瓜蛋白酶纳米脂质体，通过控制磷脂浓度、超声时间等影响脂质体粒径的工艺条件，来控制木瓜蛋白酶纳米脂质体的粒径。
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述乙醇注入法制备方法如下：精确称取一定量木瓜蛋白酶、磷脂、稳定剂、柔性辅料、表面活性剂，加入一定量有机溶剂，超声至混悬液均匀；将均匀混悬液按一定速度滴入保持恒温的水合介质，得脂质体初悬液；脂质体初悬液再经水浴超声一定时间，即得木瓜蛋白酶纳米脂质体混悬液。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述磷脂是大豆卵磷脂。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述稳定剂包括胆固醇和维生素E。
5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的柔性辅料是去氧胆酸钠。
6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的表面活性剂为Tween-80。
7.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的有机溶剂为无水乙醇。
8.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的磷脂浓度为5～15mg/ml；木瓜蛋白酶的的浓度为0.2～1.0mg/ml；柔性辅料的浓度为0.5～1.5mg/ml；表面活性剂的浓度为2.0～4.0mg/ml。
9.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的稳定剂胆固醇与磷脂的质量比为1∶4～1∶2，稳定剂维生素E与磷脂的质量比为1∶10～1∶20。
10.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的水合介质是pH＝6.8的磷酸盐缓冲溶液。
11.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的水合介质和有机溶剂的体积比为9∶1。
12.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的脂质体初悬液水浴超声时间为15～30min。
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Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8062663B2 (en) * | 2008-05-23 | 2011-11-22 | National Health Research Instittues | Methods and compostions for enhancing transdermal drug delivery |
| CN105213207A (zh) * | 2015-09-23 | 2016-01-06 | 上海应用技术学院 | 一种磷脂表面活性剂多重结构脂质体及其制备方法 |
| CN106975075A (zh) * | 2016-01-18 | 2017-07-25 | 云南白药集团无锡药业有限公司 | 木瓜蛋白酶脂质体凝胶剂制备方法及用途 |
| WO2020103832A1 (zh) * | 2018-11-19 | 2020-05-28 | 奥维嘉生物科技（北京）有限公司 | 一种制备柔性脂质体的方法 |
| CN114533637A (zh) * | 2022-02-20 | 2022-05-27 | 浙江工业大学 | 一种珍珠粉水解液自组装脂质体及其制备方法 |
-
2006
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Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8062663B2 (en) * | 2008-05-23 | 2011-11-22 | National Health Research Instittues | Methods and compostions for enhancing transdermal drug delivery |
| CN105213207A (zh) * | 2015-09-23 | 2016-01-06 | 上海应用技术学院 | 一种磷脂表面活性剂多重结构脂质体及其制备方法 |
| CN106975075A (zh) * | 2016-01-18 | 2017-07-25 | 云南白药集团无锡药业有限公司 | 木瓜蛋白酶脂质体凝胶剂制备方法及用途 |
| WO2020103832A1 (zh) * | 2018-11-19 | 2020-05-28 | 奥维嘉生物科技（北京）有限公司 | 一种制备柔性脂质体的方法 |
| CN114533637A (zh) * | 2022-02-20 | 2022-05-27 | 浙江工业大学 | 一种珍珠粉水解液自组装脂质体及其制备方法 |
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