CN1939421A - 一种抗菌、抗病毒的中药组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种抗菌，抗病毒的中药组合物，主要包括高含量的金银花提取物、黄芩提取物和连翘提取物。它可以被制成任何一种经肠道或肠道外的给药形式。本发明的中药组合物具有纯度高，疗效好，毒性小，不良反应低的特点。

Description

一种抗菌、抗病毒的中药组合物

技术领域

本发明涉及一种抗菌，抗病毒的中药组合物，具体地说是一种包括金银花提取物、黄芩提取物、连翘提取物的药物组合物。

背景技术

双黄连是一种抗菌、抗病毒的中药制剂，有针剂、气雾剂、片剂等多种剂型，主要成份为双花(金银花)2500g、黄芩2500g、连翘5000g、取这三种中药名的第一个字，故叫做双黄连。

双花就是金银花，性寒味甘、气味芒香、既可清风温之热，又可解血中之毒，适用于温病发热、斑疹、咽痛。

黄连味苦性寒，泻心中之余火，清肠中湿热，适用于心火旺盛，肠胃湿热、湿热瘟毒。

连翘性凉味苦，清心泻火，去上焦各种热症，适用于温病初起、头痛、发热、烦渴，以及热毒郁结引起的痈疮肿痛、丹毒、斑疹等。

根据现代药理研究和动物实验证实，这三种中药都有抗菌作用，对金黄色葡萄球菌、肺炎球菌、溶血性链球菌、痢疾杆菌等有一定的抑制作用。三药合用制成双黄连，可以清热解毒、轻宣透邪，用于治疗风湿邪在肺卫或风热闭肺引起的发热、微恶风寒或不恶寒、咳嗽气促、咯痰色黄、咽红肿痛等症，以及上呼吸道感染、急性支气管炎、急性扁桃腺炎、轻型肺炎等。临床使用较广泛，疗效可靠。

此外双黄连中有些成分有免疫增强作用、抗过敏作用。近年有关双黄连临床应用较为广泛。

呼吸道合胞病毒(RSV)：引起的急性下呼吸道感染：用双黄连粉针剂以蒸馏水稀释成20mg/ml的雾化液，RSV感染的肺炎或毛细支气管炎的患儿，每次雾化吸入时间为40min，每天三次，症状体征缓解较明显；血氧分压的改善显著；肺部X线检查结果也改善明显；鼻咽分泌物病毒检出率较低。对于急性支气管炎、慢性支气管炎急性发作、肺炎，使用双黄连粉针剂每天60mg/kg，溶入5％或10％葡萄糖注射液250ml中静滴，每日一次，7天为一疗程。

病毒性心肌炎：在常规药物治疗的基础上，加用双黄连粉剂静脉滴注，60mg/(kg.d)连用2周，患儿临床症状、体征及免疫功能的恢复均有显著改善。

单纯病毒性角膜炎：用生理盐水500ml加用双黄连注射液3.6g静滴，每天一次，14次为一疗程。同时用病毒唑注射液30mg，隔天一次球结膜下注射，病毒唑及诺氟沙星眼药水滴眼，并对症处理。效果较好。

婴幼儿秋季腹泻：运用双黄连粉针剂每天60mg/kg溶于36℃生理盐水5ml中灌肠，保留1h以上。治疗72h后大便SIgA含量和大便轮状病毒转阴率均明显改善。

婴幼儿霉菌感染：用双黄连粉针剂60mg/(kg.d)加入5％葡萄糖液150～250ml，每日一次静滴，或双黄连口服液3～5ml，制霉菌素溶液涂口腔，每日三次，疗程7～10天。鹅口疮、霉菌性肺炎、霉菌性肠炎等均有非常显著的改善。

褥疮：在局部皮肤清创消毒后，根据褥疮大小和轻重程度，用双黄连粉针剂0.6～2.4g均匀涂在褥疮面上，盖无菌纱布，每日一次，10天为一疗程。

干燥综合征：用双黄连注射液静滴配合甲硝唑可以预防干燥综合征。

手足口病：主要由柯萨奇病毒A5、A9、A10、A16型引起，尤以A16多见。用双黄连的清热解毒的功效，治疗手足口病有显著效果。

流行性肌痛：流行性肌痛或流行性胸痛大多数由柯萨奇B群病毒引起。主要表现为发热和阵发性肌痛，可累及全身肌肉，而以胸腹部多见，尤膈肌最易受累。静滴双黄连治疗，疗程为5～7天，效果显著。

根据近年来的一些临床资料表明，双黄连亦有不良反应。以变态反应最为多见，包括皮疹，过敏性哮喘，热原反应；次为消化系统反应，出现腹部不适，腹胀等；个别患者还可能产生剧烈头痛、过敏性休克。

双黄连不良反应大多数在用药中出现，少数为用完药后发生，最常见于用药后20-30分钟，且以首次用药发生率高，占全部病例的80％。

静脉用药的不良反应最多见，即使是必需静脉用药，亦应从剂量、滴速上加以注意、密切观察，一旦有反应立即停药并对症处理。其次对于有过敏史的患者必须禁用。对属于特敏体质者，以及儿童和体弱的患者慎用。

中国药典2000年版和2005年版唯一收载的注射液品种是双黄连粉针，说明双黄连粉针在质量上是比较优的。但是仔细研究各药厂投料发现：金银花、黄芩、连翘三种提取物中，只有黄芩提取物中黄芩苷含量达90％以上。金银花提取物中绿原酸含量为10％，连翘提取物中连翘苷仅1％。其他大部分成份都是未知的。并且连翘原药材所占比例又是最多的。总之双黄连粉针中约75％都是未知的成分，可能都是无效成分。

目前还没有含量不少于50％的金银花提取物(以绿原酸计)和连翘提取物(连翘苷和连翘酯苷计)作成的制剂。

本发明的目的就是针对双黄连的不良反应高的缺点(首次用药发生率占全部病例的80％)，提高有效成分绿原酸，连翘苷和连翘酯苷的含量，去掉无效成分而作的新的制剂，从而降低其毒性作用和副作用，提高患者的用药顺应性。

本发明的另一目的是提供了制备高含量的金银花提取物、连翘叶提取物和黄芩提取物的方法。

金银花提取物制备工艺：取金银花水煎2次，煎液减压浓缩至1∶2.5，缓缓加入20％的石灰乳至pH10，离心得沉淀物。沉淀物加2倍量乙醇研成稀浆状，搅拌下滴加50％硫酸至pH3充分搅拌，离心得酸醇液，酸醇液用浓碱调pH6，减压烘干得粗提物。粗提物溶于2～3倍水中，用盐酸调至pH2，再用乙酸乙酯提取数次，分离得乙酸乙酯液，用活性炭脱色，过滤。滤液浓缩后分次加入适量氯仿，滤取固体物，减压干燥得金银花提取物。(从不同乙酸乙酯提取数次，到干燥可以得到不同纯度的提取物)。

连翘叶提取物制备工艺：取连翘叶粉末，拌少量碳酸钙粉，加水煮提5次，每次2h，过滤，药液减压浓缩得浸膏状，用热乙醇提取2次，得醇提液，减压浓缩得残留物，使其溶于热水中，加煅制氧化镁拌匀，放置1h。得到固体物，用乙醇提取数次，得提取液，浓缩，放置，过滤，得到结晶，用乙醇重结晶，得纯品连翘提取物。(从不同乙醇提取数次，到重结晶可以得到不同纯度的提取物)。

黄芩提取物制备工艺：酸沉法：取原料的水煎浓缩液，加盐酸调pH2，加热80℃，保温0.5h，静置12h，抽滤得沉淀物，加水适量混悬，用20％氢氧化钠溶液调至pH6.5，充分搅拌至全溶，调节适量体积后，加等量95％乙醇充分搅拌后，抽滤得滤液，加浓硫酸调pH1.5，水浴50℃保温30min，冷后，抽虑沉淀用50％乙醇100ml洗涤。得滤液和沉淀物。滤液回收乙醇。沉淀物在80℃以下干燥6h，得到黄芩提取物。

以下通过药效学和毒性试验来进一步阐述本发明所述药物的有益效果。

一：本发明药物药效学试验

1、材料与方法

1.1实验动物

昆明种小鼠，20g土2g，♀♂各半，由四川省医学科学院实验动物研究所提供。

1.2药品与试剂本专利组合物(以下简称“组合物”)，实验中所用剂量均指生药量；注射用双黄连，哈药集团中药二厂；MH(Mueller-Hinton)培养基，上海东海医化试剂公司产品；琼脂粉，北京博赛药品公司产品；大肠杆菌、福氏痢疾杆菌、普通变形杆菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌(ATCC)、大肠杆菌(ATCC)菌株由华西医科大学第一附属医院提供并鉴定。

1.3方法

1.3.1体外抗菌活性最小抑菌浓度(MIC)的测定将保存的实验菌种分别接种于牛肉汤琼脂固体培养基或血肉琼脂培养基，球菌如链球菌在固体培养基中还需加8％兔血。在37℃孵箱中培养16-18h后，调整菌液浓度为1×10¹¹CFU/L，采用多点接种至不同浓度的药物平板，接种量为1×10¹¹CFU/L 0.05ml，实验菌于37℃恒温培养24h观察结果，以完全无细菌生长的最低浓度作为药物对该茵的MIC，并记录MIC值。

1.3.2体外抗菌活性最小杀菌浓度(MBC)的测定采用肉汤倍比稀释活菌计数法，即在倍比稀释的药物溶液中加入一定浓度的菌液，混匀后于37℃恒温培养24h，先测出MIC值，再依次将未见细菌生长的各管培养液分别吸出0.1ml，进行平板活菌计数，其中菌落数不少于5个的平板所对应的最低药物浓度，即为该药物的MBC值。

1.3.3体内抗菌活性的测定经过实验预试，选用金黄色葡萄球菌(1×10¹¹CFU/L)，大肠杆菌(1×10¹¹CFU/L)为实验菌株。

1.3.3.1对金黄色葡萄球菌感染小鼠的影响取小鼠100只，体重18-20g，♀♂各半，将其随机分为5组，每组20只，即对照组、阳性对照(注射用双黄连)组、组合物(20、10、5g/kg)，ig给药，连续7d，于第7天给药后1h，小鼠腹腔注射金黄色葡萄球菌(1×10¹¹个/L)0.5ml，然后观察2周内小鼠的一般状况及死亡与否。

1.3.3.2对大肠杆菌感染小鼠的影响取小鼠100只，体重18-20g，♀♂各半，将其随机分为5组，每组20只，即对照组、注射用双黄连组、组合物(20、10、5g/kg)，腹腔给药，连续7d，于第7天给药后1h，小鼠腹腔注射大肠杆菌(1×10¹¹CFU/L)0.5ml，然后观察2周内小鼠的一般状况及死亡与否。1.3.3.3对小鼠流感病毒性肺炎的作用取昆明种小鼠(20±2)g，雌雄各半，随机分5组，每组10只。于感染前一天开始腹腔给药，连续5d。阳性药物组腹腔注射10g/kg注射用双黄连，本专利组合物高、中、低剂量组分别腹腔注射液本组合物20g/kg、10g/kg、5g/kg，正常对照组与模型组腹腔注射等容积蒸馏水。除正常对照组外，其余各组小鼠乙醚浅麻醉下滴鼻感染流感病毒FM₁株10LD₅₀。，感染后96h处死动物，取肺称质量，计算肺指数和抑制率，进行t检验。结果见表1。

肺指数＝肺质量/体重×100％

肺指数抑制率＝(模型组平均肺指数-实验组平均肺指数)/模型组平均肺指数×100％

1.4统计方法计数资料组间比较采用Fisher x²检验。资料组间比较用成组t检验。

2、结果

2.1体外抗茵活性MIC的测定表1实验结果表明，在体外，本专利组合物对4种实验所用细菌均有不同程度的抑茵和杀菌作用。

2.2对金葡菌、大肠杆菌感染小鼠的影响表2实验表明，本专利组合物(20g/kg)能明显降低金葡菌和大肠杆菌感染小鼠的死亡率，对小鼠有一定的保护作用，与阳性药物注射用双黄连的作用强度相当，两者比较无统计学意义。

与对照组比较，*P＜0.05

2.3对小鼠流感病毒性肺炎的作用表3实验表明，本专利组合物高、中、低剂量组和注射用双黄连组肺指数明显低于模型组，表明本专利组合物和双黄连对小鼠流感病毒具有抑制作用。本专利组合物高、中、低剂量组肺指数抑制率分别为30.72％、24.84％、16.34％，表明对小鼠流感病毒所引起的肺炎具有抑制或减轻作用；其作用与阳性对照药注射用双黄连相当。

与模型组比较，*p＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001

二：本发明药物毒性试验

LD₅₀的测定：(孙氏综合法)

1.预试验设200ml/kg、133ml/kg、67ml/kg、34ml/kg四个组，测得本发明药和上市药(“多多”双黄连注射液，黑龙江省佳木斯晨星药业有限责任公司，批准文号：国药准字Z23020795，产品批号：200507061)最大剂量(Dm)约110ml/kg，最小剂量(Dn)约为40ml/kg。

2.正式实验发明药组和上市药组各分5个剂量组，Dm取100ml/kg，组间按九折等比，每组10只小鼠，雌雄各半。

3.结果如下：

发明药LD₅₀测定结果

通过计算机软件计算：

发明药LD₅₀＝85.2128，置信系数a＝0.05时的置信区间为：82.7720≤LD₅₀≤87.7256，0.0126。

上市药LD₅₀＝69.544，置信系数a＝0.05时的置信区间为：66.8873≤LD₅₀≤72.3071，0.0169。

结论：本发明药LD₅₀大于上市药。

以上药效学和毒性试验证明，本发明药物与已上市的注射用双黄连相比，药效作用相当，但是毒性有显著降低。

具体实施例

以下通过实施例来进一步阐述本发明药物的制备方法。

实施例1：滴丸处方及工艺

处方         (按1000粒计)

金银花提取物    12g

黄芩提取物      170g

连翘提取物      1.5g

聚乙二醇6000    200g

制成              1000粒

提取方法同上。成型工艺为：取聚乙二醇6000于油浴上加热至90-100℃，待全部溶解后，加入提取物、搅拌至溶解，转移至贮液瓶重，密闭并保温再80-90℃，调节滴定液定量阀门，滴入10-15℃的液体石蜡中，将形成的滴丸沥干并擦除液体石蜡，干燥。

实施例2：粉针处方及工艺

处方           (按1000瓶计)

金银花提取物      12g

黄芩提取物        170g

连翘提取物        1.5g

甘露醇            200g

注射用水          加至2000ml

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制成              1000瓶

提取方法实施例1。成型工艺为：取处方量提取物、甘露醇、80％处方量注射用水溶解；初滤后再用0.2um微孔滤膜精滤；补足注射用水至全量；分装；冻干；包装。

Claims (7)

1.一种抗菌、抗病毒的中药组合物，其特征在于该药物组合物的配方为：金银花提取物1-97％、黄芩提取物3-99％、连翘提取物0-96％。

2.根据权利要求1所述的抗菌、抗病毒的中药组合物，其特征在于该药物组合物的配方为：金银花提取物5-70％、黄芩提取物30-95％、连翘提取物0-65％。

3.根据权利要求1所述的抗菌、抗病毒的中药组合物，其特征在于该药物组合物的配方为：金银花提取物2-10％、黄芩提取物86-94％、连翘提取物0-4％。

4.一种抗菌、抗病毒的含金银花提取物、黄芩提取物、连翘提取物的中药组合物，其特征在于该药物组合物所涉及的金银花提取物中有效部位(以绿原酸计)的含量大于50％，黄芩提取物中有效部位(以黄芩苷计)的含量大于50％，连翘提取物中有效部位(以连翘苷和连翘酯苷计)的含量大于50％。

5.根据权利要求4所述的抗菌、抗病毒的中药组合物，其特征在于该药物组合物所涉及的金银花提取物中有效部位(以绿原酸计)的含量大于80％，黄芩提取物中有效部位(以黄芩苷计)的含量大于80％，连翘提取物中有效部位(以连翘苷和连翘酯苷计)的含量大于80％。

6.按照权利要求4所述的抗菌、抗病毒的中药组合物(制剂)的制备方法，其特征在于：它的剂型是适合临床应用的肠道给药剂型。乳剂、丸剂、滴丸、片剂(包括普通片、分散片、口崩片、包衣片、肠溶衣片等)、缓控释剂型(缓释片、控释片、缓释胶囊、控释胶囊)、胶囊剂(包括硬胶囊、软胶囊、液体胶囊、肠溶胶囊等)、颗粒剂(包括肠溶颗粒)、散剂、口服液(合剂)、糖浆剂等药剂学上可以接受的剂型中的任何一种药物剂型。

7.按照权利要求5所述的抗菌、抗病毒的中药组合物(制剂)的制备方法，其特征在于：它的剂型是适合临床应用的非肠道给药剂型。软膏剂(包括乳膏剂、霜剂、糊剂、油膏等)、贴剂(包括贴膏剂、膜剂、透皮贴剂等)、凝胶剂、栓剂、滴眼剂、滴耳剂、滴鼻剂、吸入剂(包括喷剂、气雾剂、喷鼻剂、喷粉剂、喷雾剂、雾化吸入剂、雾化溶液剂、雾化吸入液、吸入性粉剂、干粉剂、干粉吸入剂、吸入性溶液剂等)、注射液(包括小水针、大输液、注射用无菌粉、注射用冻干粉)等药剂学上可以接受的剂型中的任何一种药物剂型。