CN1938040A - 缩宫素控释制剂及其应用方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开的组合物是用于治疗多种疾病。特别是，该组合物提供了以缓释制剂形式的缩宫素和缩宫素类似物。在特定的实施方案中，公开的组合物涉及缩宫素和缩宫素类似物，其中每一种都可以与可生物降解的聚合物结合和/或与亲水性聚合物结合。这些方法包括多种疾病和症状的治疗方法。特别是，这些方法包括性功能障碍和与重复行为相关的障碍如孤独症的治疗。本发明的实用性是将缩宫素、缩宫素类似物及其混合物以延长了其半衰期的药物制剂形式给药，而且也提供了用于缓释的药物制剂。

Description

缩宫素控释制剂及其应用方法

本申请要求保护2003年3月5日提交的、序列号为60/452,001、发明名称为“缩宫素控释制剂”的美国临时申请的利益，在此全部地引入该申请作为参考。

发明领域

本发明的方法和组合物涉及医药化合物领域。更具体地说，所公开的方法和组合物涉及缩宫素、缩宫素类似物或者其混合物，其中的每一种都与可生物降解的聚合物结合，和/或与亲水性聚合物结合。特别是，本发明的化合物是用于治疗多种疾病和症状，包括性功能障碍和与多种重复行为有关的障碍，如孤独症。

发明背景

缩宫素是被最先分离及测定序列的多肽激素之一。它是九肽，含两个半胱氨酸的残基，二者在1位和6位间形成二硫桥，相应的分子式为NH₂-Cys-Tyr-lle-Gln-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-CO NH₂。它是存活期极短且快速起效的激素，由大脑的下丘脑合成，储存于垂体后叶并在需要时释放入血。它刺激某些平滑肌细胞、收缩某些血管并有助于一些组织对其他激素和神经的敏感性。可发生作用的组织包括：子宫(包括子宫内膜和子宫肌层)、阴道、乳房、勃起组织和精囊。对促进分娩和性高潮时子宫肌肉收缩、减少胎盘分离出血的血管收缩、以及哺乳母亲在听到婴儿啼哭时的下奶反射(let-down reflex)，缩宫素都具有特定的作用。

目前，缩宫素的适应症为刺激子宫收缩来诱导分娩，控制胎盘分娩后的产后出血，以及刺激乳汁分泌。目前，缩宫素是通过合成生产的，并以包括Pitocin_(Parke-Davis公司，位于新泽西州的Morris Plains市)和Syntocinon_(诺华制药公司，位于新泽西州东汉诺威市)在内的商品名进行销售。

最近有人曾提出，肽类缩宫素和加压素可能对在孤独症类障碍(autistism spectrum disorder)患者中发现的重复行为的病情发展有作用。一些研究人员曾提出这样的理论，缩宫素在神经通道中的缺乏可以解释孤独症的许多方面，包括其早期的发作和在男孩中突出以及重复行为、认知缺陷、神经发育中变化和遗传负荷的表现。遗憾的是，当通过实际测定孤独症儿童血浆中缩宫素的水平来评价这个理论时，发现较高水平缩宫素与交往能力和日常生活能力低下，以及多种社会认知缺陷相关。

此外，有人曾提出，服用缩宫素可增加女性的性反应。因为已知缩宫素可诱导多种生殖行为，它可能有效治疗女性性功能障碍。许多妇女会经历了一些形式的性障碍，并且现有的药物治疗方法可选择不多。令人感兴趣而且和男性性功能障碍形成对比的是，女性功能障碍在年龄从18至59岁妇女中的发生比例非常地一致。

缩宫素也可作为治疗男性性功能障碍的的治疗选择。据估计，年龄在大约40到70岁之间的男性中，50％患有不同程度的勃起困难。目前，已有几种治疗方法可供选择，包括药物治疗的，例如Viagra_、阴茎注射、尿道插入、真空治疗和血管手术。遗憾的是，这些方法效程较短、价格昂贵而且对除根治疗，费用更为昂贵。

因此，缩宫素在治疗或者预防多种疾病和病情方面是有用的。遗憾的是，天然的缩宫素具有较短的半衰期，并且许多治疗的有益作用可能被限制在治疗的延长期。因此，有必要发明缩宫素的药物制剂，该制剂应能够增加缩宫素的作用的持续时间，且能克服无论人和动物都不期望的频繁给药。已有一些已知的生物活性剂的控释组合物，但是除了用于输注或者鼻喷的短效水溶液之外，尚没有可用的缩宫素或者其类似物的控释制剂。缩宫素缓释制剂的开发将提供了改进的治疗选择，以治疗多种动物和人的疾病，包括孤独症和性功能障碍。

附图的简要说明

下面的附图形成本说明书的一部分，并且被包括在说明书内以便进一步地说明本发明特定的实施方案。通过参考附图并结合详细的描述、实施例和这里提出的权利要求书，可以更好地理解该实施方案。

图1表示按照本发明的一种实施方案，即缩宫素从PLGA微粒中的体外释放。将通过实施例3的方法制备的缩宫素微粒，于37℃缓慢搅拌下悬浮于磷酸盐缓冲的盐水中。定期地通过离心将固体制成小丸。吸走上清液并用新的缓冲液取代。用反相HPLC监测上清液中的缩宫素的含量。该曲线表示总的包囊缩宫素释放累计百分比与时间的关系。

示例性实施方式的描述

本发明提供了缩宫素、缩宫素类似物及其混合物的缓释组合物，以及应用这些组合物的方法。

本发明提供了提高其血浆半衰期的缩宫素、缩宫素类似物及其混合物的组合物。在某些实施方案中，这些组合物包括包囊于可生物降解聚合物中的缩宫素、缩宫素类似物或者其混合物。在其它的实施方案中进一步包括所述的缩宫素、缩宫素类似物或其混合物亲水性的聚合物。在另外的实施方案中，将缩宫素、缩宫素类似物或者其混合物进行改变，以增强稳定性、增加通过血脑屏障的输送或一旦它们被输送，就保留在大脑中、或者上述两种情况的组合。在其它的实施方案中，缩宫素、缩宫素类似物或者其混合物与可生物降解的微粒或纳米粒子、凝胶、水凝胶和植入体相协同。

通过给予治疗量的包囊于可生物降解的聚合物中的缩宫素、缩宫素类似物或者其混合物，本发明也提供了治疗多种疾病的方法。在其它的实施方案中，缩宫素、缩宫素类似物或其混合物进一步包括亲水性聚合物。在另外的实施方案中，将缩宫素、缩宫素类似物或其混合物进行改变，以增强稳定性、增加通过血脑屏障的输送量或者被输送至大脑后的保留作用、或者上述两种情况的组合。在其它的实施方案中，缩宫素、缩宫素类似物或其混合物与可生物降解的微粒或纳米粒子、凝胶、水凝胶和植入体有关。

另外，本发明也提供了通过对人体服用包囊于聚(丙交酯-共-乙交酯)微球体中的缩宫素乙酸酯制剂用于治疗内科疾病的方法。在其它的实施方案中，缩宫素、缩宫素类似物或其混合物进一步包括亲水性聚合物。在另外的实施方案中，将缩宫素、缩宫素类似物或其混合物进行改变，以增强稳定性、增加通过血脑屏障的输送或者被输送至大脑后的保留作用、或者上述两种情况的组合。在其它的实施方案中，缩宫素、缩宫素类似物或者其混合物与可生物降解的微粒或纳米粒子、凝胶、水凝胶和植入体有关。

通过本发明的方法和组合物可能有帮助的内科疾病包括(但不限于此)：性功能障碍、与孤独症有关的有害行为特征、强迫症、饮食失调症、图雷特氏综合症、早老性痴呆和唐氏综合症。性功能障碍包括(但不限于此)：女性唤起障碍、女性性欲障碍和男性勃起功能障碍。与孤独症有关的有害行为特征包括(但不限于此)：重复行为、在社会意识方面的缺陷和在认知能力方面的缺陷。

在本发明中所用的亲水性聚合物可包括(但不限于此)：聚(乙二醇)、聚(丙二醇)和聚(乙二醇)与聚(丙二醇)的共聚物。

在特定的实施方案中，缩宫素类似物选自4-苏氨酸-1-羟基-去氨基缩宫素、9-去酰氨基缩宫素、7-D-脯氨酸缩宫素及其去氨基类似物、(2，4-二异亮氨酸)-缩宫素、去氨基缩宫素类似物、1-去氨基-1-单卡巴-E12-[Tyr(OMe)]-OT(dCOMOT)、卡贝缩宫素(carbetocin)、[Thr4-Gly7]-缩宫素(TG-OT)、催产加压素和去氨基-6-卡巴-缩宫素(dC60)。在另一个特定实施方案中，所述的缩宫素类似物为非肽化合物或者模拟多肽。在其它的特定实施方案中，该缩宫素类似物为缩宫素的片断，例如肽切割产物。

在某些实施方案中，可生物降解的微粒或纳米粒子可包括选自聚(丙交酯)、聚(乙交酯)、聚(丙交酯-共-乙交酯)、聚(乳酸)、聚(羟基乙酸)、聚(乳酸-共-羟基乙酸)、聚己酸内酯、聚碳酸酯、聚酰胺酯、聚酐、聚(氨基酸)、聚原酸酯、聚缩醛、聚氰基丙烯酸酯、聚醚酯、聚(二氧六环酮)、聚(亚烷基烷基化物)、聚乙二醇与聚(丙交酯)或聚(丙交酯-共-乙交酯)的共聚物、可生物降解的聚氨基甲酸乙酯、及其混合物和共聚物。

在某些其它的实施方案中，缩宫素、缩宫素类似物或其混合物被改变以增强稳定性和增加通过血脑屏障的输送。这类变体可通过用甾类化合物或脂肪酸的酯化来实现。一种甾类化合物的例子是胆甾醇。脂肪酸的例子包括棕榈酸和硬脂酸。

在其它的实施方案中，将缩宫素、缩宫素类似物或其混合物进行进一步改变以增强被输送至大脑后的保留作用。这类变体可通过与奎宁、苯醌、萘醌、吲哚醌、硝基杂环或1，4-二氢葫芦巴碱化物的共价结合来实现。

定义

对于本发明的目的而言，下列术语的意义如下：

术语“类似物”及其同源物是指显示缩宫素活性的任何分子。这种分子可以是合成的缩宫素类似物、片断或者缩宫素相似活性的、而非缩宫素的内源性生物分子。总之，缩宫素类似物是指显示的生物活性近似或者大于缩宫素本身。

就本发明的目的而言，术语“可生物降解”是指在特定治疗条件下聚合物在可接受的一段时间内在体内溶解或者降解。在药物曝露于生理的pH和温度之后，例如pH从6到9的范围和温度从25℃到38℃的范围，该时间一般少于5年但通常少于1年。

就本发明的目的而言，术语“包囊有效率”是指最终与微粒或者纳米粒子结合的实药物的实际量相对于制剂中药物的初始量的百分比。

此外，就本发明的目的而言，术语“突释(burst)”是指在对人体给药后微粒或者纳米粒子开始释放的药物量。这种开始的时间可以是从1到36小时的范围。

就本发明的目的而言，术语“载量(coreload)”是指在微粒或者纳米粒子中药物的重量百分比。

就本发明的目的而言，术语“包囊”是指缩宫素、缩宫素类似物或其混合物被结合、混合或包合于聚合物基质内。

此外，就本发明的目的而言，术语“一种”实体是指一个或多个改种实体；例如“一种蛋白”或“一种缩宫素分子”是指一个或多个那些化合物或者至少一个化合物。同样，术语：“一种”“一个或多个”和“至少一个”在这里是可以互换使用。需要说明的是术语“含有”“包括”“具有”也可以互换使用。而且，一种化合物“选自”是指随后列出的一个和多个化合物，包括两个或多个化合物的混合物(例如组合)。根据本发明，一种分离或生物纯的缩宫素化合物或类似物是指从自然环境分离出的化合物。同样，“被分离”和“生物纯”不必反映该化合物被纯化的程度。本发明的一种分离的化合物可以是从自然资源中得到的，也可以是利用分子生物技术制备的，或者通过化学合成制造的。

缩宫素

在本发明的一种实施方案中，缩宫素与可生物降解的微粒或者纳米粒子结合。在某些实施方案中，该可生物降解的微粒或者纳米粒子包含聚(丙交酯)、聚(乙交酯)、聚(丙交酯-共-乙交酯)、聚(乳酸)、聚(羟基乙酸)、聚(乳酸-共-羟基乙酸)、聚己酸内酯、聚碳酸酯、聚酰胺酯、聚酐、聚(氨基酸)、聚原酸酯、聚缩醛、聚氰基丙烯酸酯、聚醚酯、聚(二氧六环酮)、聚(亚烷基烷基化物)、聚乙二醇与聚(丙交酯)或聚(丙交酯-共-乙交酯)的共聚物、可生物降解的聚氨基甲酸乙酯、及其混合物和共聚物。在特定的实施方案中，该可生物降解微粒是聚(丙交酯-共-乙交酯)(PLGA)。

在另一个实施方案中，该可生物降解的聚合物可以是选自凝胶、水凝胶和植入体的物质形式。

在本发明另外的实施方案中，缩宫素可被结合至亲水性聚合物。该亲水性聚合物可选自聚(丙二醇)、聚(乙二醇)、聚(乙二醇)与聚(丙二醇)的共聚物。在特定的实施方案中，该亲水性分子为聚(乙二醇)(PEG)。

在另一实施方案中，缩宫素与可生物降解的微粒或纳米粒子以及亲水性聚合物结合。

在另一实施方案中，将缩宫素进行改变，以增强稳定性，增加通过血脑屏障的输送、增强被输送至大脑的保留作用或者上述情况的组合。为增强稳定性、增加通过血脑屏障输送的而作的改变包括(但不限于此)，用甾类化合物如胆甾醇的酯化，或者用脂肪醇如C-8至C-22醇的酯化。为增强在大脑的保留作用所作的改变包括(但不限于此)，与1，4-二氢葫芦巴碱化物以及其它氧化还原敏感的官能团的共价结合，如醌和衍生物，例如如苯醌、萘醌、吲哚醌、硝基杂环化合物，例如硝基苄基、硝基呋喃基和硝基咪唑衍生物。

本领域的技术人员应当认识到，上面列出的化合物只是示例性的，可以作许多变化。

缩宫素类似物

在某些实施方案中，使用了缩宫素类似物。本发明的方法所使用的特定的缩宫素类似物的例子包括4-苏氨酸-1-羟基-去氨基缩宫素、9-去酰氨基缩宫素，一种含有甘氨酸残基代替甘氨酰胺残基的缩宫素类似物；7-D-脯氨酸缩宫素及其去氨基类似物；(2，4-二异亮氨酸)-缩宫素，一种具有促钠和利尿活性的缩宫素类似物；去氨基缩宫素类似物；一种长效缩宫素(OT)类似物，1-去氨基-1-单卡巴-E12-[Tyr(OMe)]-OT(dCOMOT)；卡贝缩宫素(carbetocin)，一种长效缩宫素类似物；缩宫素类似物[苏氨酰4-甘氨酰7]-缩宫素(TG-OT)；催产加压素，一种与缩宫素和加压素等效的缩宫素类似物；异亮氨酸-conopressin；阿托西班；去氨基-6-卡巴-缩宫素(dC60)，被认为是对一些生理学上重要的酶系统有拮抗性的、强效的缩宫素类似物；等等。此外，缩宫素类似物还可以包括d[Lys(8)(5/6C-Flu)]VT，d[Thr(4)、Lys(8)(5/6C-Flu)]VT、[HO(1)][Lys(8)(5/6C-Flu)]VT、[HO(1)][Thr(4)、Lys(8)(5/6C-Flu)]VT、d[Orn(8)(5/6C-Flu)]VT、d[Thr(4)、Orn(8)(5/6C-Flu)]VT、[HO(1)][Orn(8)(5/6C-Flu)]VT、[HO(1)][Thr(4)、Orn(8)(5/6C-Flu)]VT，等等，这里Flu代表荧光素。其它的缩宫素是非肽类化合物或者“模拟肽”，能产生缩宫素所产生的部分或者全部生物效应。

在另外其它实施方案中，缩宫素类似物是缩宫素的片断，例如肽切割产物。这些片断可以是化学合成的或通过任何已知方式获得的。本发明的缩宫素片断保留的生物活性与缩宫素相近或更大。这些片断可以能够穿过血脑屏障。在本发明的另一方面，缩宫素类似物是保持缩宫素生物活性的合成缩宫素分子。这种类似分子能够以与内源性缩宫素相似的方式发挥作用，包括结合缩宫素受体。这种类型的类似物可以是缩宫素的衍生物或者具有全新的分子结构。

在本发明的一种实施方案中，缩宫素类似物与可生物降解的微粒或纳米粒子结合。在某些实施方案中，该可生物降解的微粒或纳米粒子包括聚(丙交酯)、聚(乙交酯)、聚(丙交酯-共-乙交酯)、聚(乳酸)、聚(羟基乙酸)、聚(乳酸-共-羟基乙酸)、聚己酸内酯、聚碳酸酯、聚酰胺酯、聚酐、聚(氨基酸)、聚原酸酯、聚缩醛、聚氰基丙烯酸酯、聚醚酯、聚(二氧六环酮)、聚(亚烷基烷基化物)、聚乙二醇与聚(丙交酯)或聚(丙交酯-共-乙交酯)的共聚物、可生物降解的聚氨氨基甲酸乙酯、及其混合物和共聚物。在特定的实施方案中，该可生物降解微粒是聚(丙交酯-共-乙交酯)(PLGA)。

在另一种实施方案中，该可生物降解的聚合物可以是选自凝胶、水凝胶和植入体的物质形式。

在本发明另外的实施方案中，缩宫素类似物可被连接至亲水性聚合物。该亲水性聚合物可选自聚(丙二醇)、聚(乙二醇)、聚(乙二醇)与聚(丙二醇)的共聚物。在特定的实施方案中，该亲水性分子为聚(乙二醇)(PEG)。

在另一种实施方式中，可以将缩宫素类似物进行改变，以增强其稳定性，增加通过血脑屏障的输送、增强通过血脑屏障后在大脑的保留作用或上述情况的组合。为增强稳定性、增加通过血脑屏障输送的变体可包括(但不限于此)，用甾类化合物如胆甾醇的酯化，或者用脂肪醇如C-8至C-22醇的酯化。以增强在大脑内保留作用的变体包括(但不限于此)与1，4-二氢葫芦巴碱化物以及其它氧化还原敏感的官能团共价结合，例如醌和衍生物(如苯醌、萘醌、吲哚醌)、硝基杂环化合物(如硝基苄基、硝基呋喃基和硝基咪唑衍生物)。

本领域的技术人员应当认识到上面列出的化合物只是示例性的，根据所用的特定的缩宫素类似物和想得到的生理效果，可以做多种变化。这些变化在本领域中是已知的。

亲水性聚合物

在某些实施方案中，可将亲水性聚合物结合至缩宫素、缩宫素类似物或其混合物。亲水性聚合物是任何的水溶性直链或支化聚合物，其包括(但不限于此)聚乙二醇(PEG)和聚丙二醇以及相似的直链和支化聚合物。在特定的实施方案中，该亲水性聚合物的分子量是从200至40,000道尔顿。

此外，这种亲水性聚合物常常具有活泼的被结合的基团，以通过氨基、羧基、巯基、磷酸酯或者羟基官能团连接至缩宫素或缩宫素类似物。在某些替代的实施方案中，在该亲水性聚合物与缩宫素或缩宫素类似物之间也可是有机连接方式。

在本发明中所用的制备亲水性聚合物的方法在本领域中是已知的。例如，可以将甲氧基加成至该聚合物的一端，而另一端被活化以利于连结至蛋白质、肽、核酸和小分子上的活泼基团。

在特定的实施方案中，将所述的亲水性聚合物共价地结合至缩宫素的或具有游离氨基末端的、缩宫素的肽类似物的氨基末端氮上。在另一种实施方案中，将该亲水性聚合物共价地结合至非肽类的缩宫素类似物。任选的是，在将该亲水性聚合物结合至缩宫素或其类似物中可以包括可水解的连接方式。

所述的亲水性聚合物，例如PEG，增加了缩宫素或缩宫素类似物的半衰期和分子量。较长的半衰期使得可以对患者较少次数地给予较低剂量。当通过可水解方式连接时，缩宫素可从亲水性聚合物中被释放出来。例如，内源性酯酶可引起酯键水解，使缩宫素或者缩宫素类似物通过细胞膜，并发挥药理作用。而一种选择，通过不可水解的键将PEG连接至缩宫素或者缩宫素类似物时，该连接实质上不影响位于其结合点的药物活性。

在另外的实施方案中，将所述的亲水性聚合物连接至缩宫素、缩宫素类似物或其混合物，并进一步包囊于可生物降解的微粒中。

可生物降解的微粒

在某些实施方案中，缩宫素、缩宫素类似物或其混合物是以微粒的形式与可生物降解的聚合物连结的。在特定的实施方案中，微粒具有优选的小于10mm的直径，优选为，1.0至200.0微米之间。微粒包括微球体和微囊两种。微球体一般是近似均匀的微粒，而微囊是除包围的壳之外还有组合物的核的微粒。对于本公开的目的而言，术语微球体、微粒和微囊可以互换使用。

在某些实施方案中，可制成具有多种可生物降解的聚合物的微粒。可生物降解的，如本文所定义的，含义为该聚合物在体内降解或侵蚀以形成更小的化学种类。例如通过酶的、化学的和/或物理的工艺，可产生降解。适合的可生物相容的、可生物降解的聚合物包括，例如，聚(丙交酯)、聚(乙交酯)、聚(丙交酯-共-乙交酯)、聚(乳酸)、聚(羟基乙酸)、聚(乳酸-共-羟基乙酸)、聚己酸内酯、聚碳酸酯、聚酰胺酯、聚酐、聚(氨基酸)、聚原酸酯、聚缩醛、聚氰基丙烯酸酯、聚醚酯、聚(二氧六环酮)、聚(亚烷基烷基化物)、聚乙二醇与聚(丙交酯)或聚(丙交酯-共-乙交酯)的共聚物、可生物降解的聚氨基甲酸乙酯、及其混合物和共聚物。在曝露于pH值为6与8之间、温度为大约25℃与38℃之间的生理溶液之后，可生物降解的聚合物应在期望的一段时间内溶解或者降解，通常该时间少于大约5年，优选地，在少于1年之内。

在另一种实施方案中，所述的微粒是由聚(丙交酯-共-乙交酯)(PLGA)制成。当曝露于生理pH值时PLGA降解，并水解形成乳酸和羟基乙酸，其是细胞代谢的正常副产物。PLGA聚合物的崩解速度将根据该聚合物的分子量、在聚合物链中丙交酯与乙交酯单体的比例以及该单体次单元的立构规整性而变化。通过可破坏聚合物的结晶性的L和D立体异构体的混合物，可增加聚合物的崩解速度。此外，微球可含有不同分子量和/或单体比例的两种或多种可生物降解的聚合物的混合物。

在可选择的实施方案中，可使用衍生的可生物降解的微粒，包括被结合至PLGA的亲水性聚合物，以形成微球体。

本发明的一个目的是提供用于缩宫素、缩宫素类似物或者其混合物在可生物降解的微粒中高效包囊的方法。

尽管已经通过本领域已知的各种方法将肽类药物包囊于PLGA微粒，但是难于取得大于5％的载量和/或大于50％的包囊效率。在本发明的特定实施方案中，含有缩宫素、缩宫素类似物或其混合物的微粒药物载量大于5％、包囊效率大于50％，在最初24小时内药物的释放小于50％，或者在30天后才大于75％。(参见实施例3和图1)

可利用本领域已知的任何技术制造微球体。在某些实施方案中，通过单一或者乳化步骤然后除去溶剂，可生产微球体。在选择的实施方案中，可利用其它已知的方法如喷雾干燥、溶剂蒸发、相分离和凝聚，以制造微球体。这些技术在本领域中是熟知的。

在一种实施方案中，通过将大约20mg的缩宫素、缩宫素类似物或其混合物溶解在最小量，如0.2-2mL，的甲醇或DMSO中，生产微球体。然后通过溶解将本发明的可生物降解的聚合物(～180mg)溶解在最小量，例如0.5-2mL的乙酸乙酯或者二氯甲烷中，制备聚合物溶液。然后将该两种溶液混合以生产油相或“有机”相。

然后，将该缩宫素、缩宫素类似物或其混合物和聚合物混合溶液加入水或者“水”相中。在特定的实施方案中，该水相为5％的聚(乙烯醇)(PVA)水溶液，其中该水溶液的体积是所述组合的缩宫素、缩宫素类似物或其混合物/聚合物溶液总体积的2-2.5倍。此外，该水相可含有无机盐，例如双羟萘酸二钠盐(～10mM)。

然后用旋转混合器将该组合的油和水相混合以生产乳液。随后将得到的乳液加入大体积(～100-150mL)的酸中，恒定搅拌3-4小时。在特定的实施方案中，该酸是缓冲的水(pH～5.5)或者0.3％的PVA。

然后，通过真空过滤、用水冲洗和隔夜干燥，收集硬化的微球体。通过反相HPLC分析该干燥粒子的肽含量(载量)，通过激光扫描分析粒度，通过气相色谱分析残余溶剂和通过标准方法分析溶解速度。

在某些实施方案中，缩宫素、缩宫素类似物或者其组合可以是以微粒的形式存在。利用水包油乳液/溶剂蒸发-萃取技术，可制备这种微粒。该油相可选自(但不限于此)含有PLGA的乙酸乙酯、含有PLGA的二氯甲烷、含有PLGA-聚(乙二醇)块(block)共聚物的乙酸乙酯以及含有可生物降解的聚合物的乙酸乙酯与苄醇的混合物。在特定的实施方案中，该油相为180mL含有180mgPLGA(丙交酯/乙交酯比例50∶50，MW24,000Da，具有未封端的聚合物末端基团)的乙酸乙酯。该水相可选自(但不限于此)含有乳化剂的水溶液、含有乳化剂和有机酸的水溶液、含有聚(乙烯醇)(PVA)的水溶液以及含有PVA和双羟萘酸二钠盐的水溶液。在特定的实施方案中，该水相是含有10mM双羟萘酸二钠盐的1％PVA。将所述的油和水相组合，以产生稳定的乳液。在特定的实施方案中，在内管乳化器中将它们组合。在另一个特定实施方案中，以油相速度为1.0mL/分和水相为2.0mL/分将它们组合。

从得到的乳液中将部分或全部溶剂除掉。在一种实施方案中，通过蒸发将溶剂除掉。在另一个实施方案中，在减压的条件下将溶剂部分地除掉，然后将该乳液加入萃取介质中。所述的萃取介质可选自水、含有一种或多种溶剂的水、含有乳化剂的水、和醇。在某些实施方案中，所述的萃取介质为在水中的PVA溶液。在特定的实施方案中，所述的萃取介质为在水中的0.3％PVA溶液，并且将该乳液和PVA室温搅拌4小时。通过本领域已知的任何方法收集微粒。在特定的实施方案中，通过真空过滤和过夜干燥，收集硬化的微球体。

实施例3说明了根据上述的方法生产微粒的过程。在利用其中一种本发明的方法进行生产之后，分析该微粒的多种特征。通过反相HPLC的分析显示8.9％(w/w)的肽含量(载量)，即为89％的包囊效率。通过激光扫描的分析显示在得到的微粒中144μm的平均粒度。此外，图1表示了35天后缩宫素从微球体中的释放。在最初的24小时内有21％的药物释放，剩余的79％可在随后的一个多月内释放。

在本领域中其它已知的方法和上述的变化也是已知的，并且也可用在本发明中。

可生物降解的纳米粒子

在某些实施方案中，将具有或不具有连接亲水性聚合物的缩宫素、缩宫素类似物或其混合物与可生物降解的亚微米粒子相结合，以控制释放缩宫素分子。纳米粒子具有的直径范围为从20.0纳米至约2.0微米，并且典型地为100.0纳米和1.0微米之间。

通过本领域中已知的任何技术可制造纳米粒子。除了使用高速混合或者均质化以将聚合物/生物活性物质乳液的粒径缩小至小于2.0微米和优选小于1.0微米之外，其他方法和生产微粒的方式相同。这些方法在本领域中是熟知的。

治疗应用

下面是对几种病症的简要讨论，以示例得益于本发明组合物和方法的多种疾病及症状。

I.性功能障碍的治疗

在美国，性功能障碍很快地变成流行病并且影响两性。常常将女性性功能障碍划分类为与性欲、性唤起、性快感缺乏和性交疼痛，包括性交困难和阴道痉挛相关。尽管对与性高潮和性交疼痛相关的疾病已经有有效的心理学治疗方法，但是，对于妇女无性欲或者唤起困难等病症目前尚无有效的医学治疗方法供选择。男性的性功能障碍主要包括勃起障碍。尽管对于这种疾病已有几种治疗方法可供选择，但是它们适用面窄、费用昂贵且效果一般。

女性性欲缺乏症是难于治疗的，可能继发于生活方式的因素例如职业或者孩子、药物、或者另外的性功能障碍(如疼痛或者性高潮障碍)。已知许多常见的药物治疗方法，例如精神兴奋药物、心血管或者抗高血压的药物治疗、激素以及组胺H2-受体阻滞剂或者促进剂，均可导致妇女的性欲降低。目前，还没有可用的特异性方法来治疗这种疾病。

在接近绝经和绝经后的妇女中，激素和性欲间的关系还没有被确定。雌激素替代疗法曾表现出与性的活跃性、快感和幻想呈正相关，但是对于许多妇女而言这并不是上佳的治疗选择，原因是家族史的生殖癌症。对于接受雌激素替代疗法的妇女，常常给予黄体酮，这已显示出降低性欲以及雄激素。尽管雄激素如睾丸酮可能对女性的性欲具有直接的作用，但却是一种受争议的治疗选择。对于在妇女中睾丸酮的基线水平还没有医学标准，许多人发展为高密度脂蛋白的水平较低、粉刺、多毛症、阴蒂肥大和声音变粗。目前，对于患有近期或早期乳癌、非控制性高脂血症、肝病、粉刺或者多毛症的患者，目前不推荐这种受争议的治疗选择。

第二种普遍的女性的性障碍与唤起有关。这种障碍的起因还没有确定，尽管已知许多常用的药物治疗是引发剂，包括抗胆碱能药、抗组胺药、抗高血压药、对精神起作用的药物治疗、苯并二氮杂_、选择性5-羟基色胺摄入抑制剂、单胺氧化酶抑制剂以及三环类抗抑郁药。目前对性唤起障碍患者的治疗限于使用市售的或者合成的润滑剂，这没有直接地针对潜在的生理问题。在绝经后的妇女中，泌尿生殖器的萎缩是性唤起障碍的最常见的原因，雌激素替代是有效的治疗。遗憾的是，如上面所提到的，这种方法并不适合于所有的妇女。患有唤起障碍的绝经前期妇女、对雌激素疗法无响应的妇女以及不能或不愿意接受雌激素疗法的妇女，由于可用的治疗选择很少，因此属与难治人群。数个研究者正致力于阴道和阴蒂的小血管动脉粥状硬化症的领域，但是截至今日，尚未提出或者验证血管活性的药物治疗。

男性性功能障碍几乎都包括勃起障碍(ED)，ED被定义为男性不具备这样的能力，即获得和/或维持阴茎勃起以足够插入阴道。据估计，在美国有1到2千万的男性患有勃起障碍，而且3千万男性遭遇部分地或者暂时性的勃起障碍，并随着年龄的增长发生率提高。在20个年龄为40岁的男性中大约有1个患有此种疾病，而所有65岁以上的男性中大约有15至25％的患有ED。

勃起功能障碍的起因可以是生理上的也可以是心理上的。心理上的因素，如焦虑、抑郁、自信心和伴侣关系都是对ED起重要作用的因素，虽然有人认为所有的病理也都同时存在一些生理起因成分。生理因素包括血管疾病、糖尿病、高血压、某些药物治疗、神经系统疾病、如多发性硬化、慢性酒精中毒、长期重度吸烟、骨盆创伤、脊髓损伤、骨盆手术、如非神经保守型前列腺根除术(non-nerve-sparing radical prostatectomy)、胆囊切除术、直肠切除术、佩罗尼病，激素异常和其他的内科或外科的疾病。

遗憾的是，能用于患有ED男性的治疗选择并不多。通过性或者行为疗法可说明ED的生理方面，该疗法集中于患者教育和减轻表现焦虑。可给予激素如睾丸酮，但是通常不是非常有效并且有时候引起严重的副作用，如前列腺增大和不育。目前市场上没有有效的口服药物治疗，而且所有的激素必须注射给药。

为实现完全勃起，可以直接将血管活性药物，例如盐酸罂粟碱、甲磺酸酚妥拉明或者前列腺素E-1，注射到阴茎内以增加进入阴茎的血流，同时减少流出阴茎的血流。遗憾的是，有些男性经历了在注射部位的创伤、疼痛和结节发生，和/或勃起后持续数小时等情况后，使得这种治疗选择不理想。

目前已经可用几种利用真空收缩的医疗设备，作为用于ED的治疗选择。它们是非手术的外用设备，通过应用负压该设备诱导勃起，以使阴茎充血，而且通过使用在阴茎根部周围放置的橡胶圈以将其保持在阴茎内。遗憾的是，这种治疗方法常常伴有疼痛、麻痹、患者或者伴侣的不接受和/或不能插入的摇摆勃起(dangling erection)。患有血液学疾病的患者也不推荐使用。

对于患有ED的患者而言，最终的诉求常常是阴茎假体。阴茎假体是非常简单的半刚性设备，可以产生持久的勃起。更昂贵的型号包括可膨胀气筒，通过可手动调节弹性。尽管半刚性假体很昂贵，但它们产生持续的勃起，这在一些时间是令人厌烦或者令人难堪。当膨胀时，这种型号产生良好的勃起，但是这些设备可能源自手术植入以及源自机械失败而产生问题。遗憾的是，这些设备是昂贵的，而且通常不属保险涵盖的范围。

对于患有创伤事故导致ED的年轻健康患者而言，微血管手术是一种选择。这种方法纠正了阴茎内的血流异常。

在治疗女性或者男性的性功能障碍中，根据本发明，将治疗有效量的缩宫素、缩宫素类似物或者它们的组合给予表现女性性欲缺乏或唤起障碍或者与男性ED相关的症状的个体。在选择的实施方案中，可以将缩宫素、缩宫素类似物或者它们的组合与亲水性聚合物和/或可生物降解的组合物组合，并给予表现性欲缺乏或唤起困难的女性或者表现ED的男性。

II.孤独症的治疗

孤独症影响大脑在社交和沟通技巧领域中的正常发育。患有孤独症的儿童和成人典型地具有语言和非语言交流、社交及其闲暇或者游戏活动方面的困难。这种障碍使得他们难于与他人和涉及的外部世界沟通。在有些情况中，可能存在好斗的和/或自我损伤的行为。患孤独症者表现重复身体动作(手拍动，摇动)，对人不同寻常的反应或者对物体的依恋以及对日常变化的抵制。有的人也可能在视觉、听觉、触觉、嗅觉和味觉的五种感觉方面敏感。

孤独症是一种广泛的疾病，并且孤独症的症状和特征可自身存在于各种各样的组合中，从轻度至重度。尽管通过某组行为来定义孤独症，但是儿童和成人可表现为具有许多不同程度严重性的行为的多种组合。两个儿童，具有相同的诊断结果，可彼此表现的非常不同，技能也有不同。

因此，没有标准的孤独症患者。医学专业人员曾试图基于诊断标准把孤独症划分为几种类型。一种标准的类型是孤独症障碍(Autistic Disorder)，其个体表现为那些3岁前在社交互动、沟通和想象游戏方面存在障碍，根据刻板行为、兴趣和活动来归类。第二种类型是Asperger氏障碍，其特征是在社交互动存在障碍和表现为受限的兴趣和活动。患有Asperger氏障碍的儿童或成人通常在语言方面没有显著的临床延迟，而且具有平均水平到高于平均水平的智力。第三种类型，非典型性孤独症或广泛性发育障碍，是一种当儿童没有达到特定的诊断标准但是在特定行为方面表现严重的、普遍的障碍所作出的诊断。

Rett氏障碍是一种仅在女孩中观察到的进行性障碍。该疾病被分类为一段时间内正常发育和随后早期获得技能的丧失、手的目的性使用的丧失和极端的重复手的运动代替了手正常的运动。这些疾病通常开始于1至4岁间。一种两性都发生的类似疾病被称作儿童期崩解障碍，其特征是至少在生命的前两年正常发育，其后不久就丧失前期获得的技能。

由于疾病的许多表现被称作孤独症，所以本发明使用的术语“孤独症”是指上述的所有障碍。

从医学的意义上讲，导致孤独症的大脑差别是无法治愈的。当前的治疗方法包括适应性身体训练、职业治疗、特殊训练和语言障碍矫正。从低龄开始向孤独症儿童传授日常的生活技能，也推荐进行职业培训。

有多种类型的精神药理学的药剂，包括镇定药、镇静药、抗抑郁药和抗惊厥药，可用于减轻与孤独症相关的症状。许多这种药物有严重的副作用，需要小心地监测。另外，与其它药物许多的相互作用，使得治疗给药成为均衡作用来预防毒性反应。目前所用的药物还不能取代适当训练和行为控制的需要。

在根据本发明治疗孤独症时，给予缩宫素、缩宫素类似物或者它们的组合，其中每一种可结合至亲水性聚合物和/或可生物降解的微粒或者纳米粒子。

在选择的实施方案中，患者可以给予缩宫素或者缩宫素类似物，其中每一种可结合至亲水性聚合物和/或结合至可生物降解的微粒或者纳米粒子，和至少一种其它的治疗孤独症的药剂。这些药剂可以是精神药理学的药剂，例如镇定药、镇静药、抗抑郁药或者抗惊厥药。治疗的实现可通过给予单一组合物或者包括两种药剂的药理学上的制剂，或者通过同时或者以间隔的时间给予患者两种不同的组合物，其中一种组合物包括具有结合亲水性聚合物和/或与可生物降解的聚合物结合的缩宫素、缩宫素类似物或者它们的组合，而另一个包括其它药剂。

III.包括重复行为特征的其它障碍

除了孤独症外，许多其它类型的障碍包括相似的行为特征。这种障碍包括，例如，强迫症(OCD)、各种类型的饮食失调症、图雷特氏综合症、早老性痴呆和唐氏综合症。患有这些疾病的患者没有有效的药物治疗方法供选择。本发明的组合物和方法也可用于患有这些疾患的人群。

药物组合物和给药途径

本发明的含水组合物含有治疗有效量的缩宫素、缩宫素类似物或其组合，其中每一种可结合至亲水性聚合物和/或与可生物降解的微粒或者纳米粒子、小片、结晶、凝胶、水凝胶、脂质体、植入体、阴道环结合，刺激剂、抑制剂等，溶解或者分散于药学上可接受的载体或含水介质。短语“药学上的或者药理学上可接受的”是指，当对适用的动物或者人体给药时，分子实体和组合物不产生副反应、过敏反应或者其它不利的反应。

本发明的含水组合物含有有效量的该化合物，溶解或者分散于药学上可接受的载体或者含水的介质。这种组合物也可以是指接种物。如本文所用的，“药学上可接受的载体”包括任何和所有的溶剂、分散介质、包衣、抗菌和抗真菌剂、等渗和吸收延迟剂等。在本领域中这些介质用于药物活性物质是熟知的。除了那些与活性成分不相容的常规介质或者试剂外，将其用在治疗组合物中是可考虑到的。也可以将补充的活性成分加入该组合物。对于人体用药，产品应符合如FDA以及其他管理机构标准所要求的无菌、热源性、一般的安全性以及纯度标准。

通常将活性化合物制成用于非胃肠道给药，例如，制成通过静脉、肌肉内、皮下、损伤器官内(intralesional)或者腹膜内的途径的注射液。本领域的技术人员根据本发明公开的内容，就可知道含有活性组分或成份的含水组合物的制备。典型地，可将这种组合物制成可注射的液体溶液或者混悬液；也可制成这样的固体形式，适合用于注射前通过加入液体来配制溶液或者混悬液，以及也可乳化制备。

适合于可注射使用的药物形式包括无菌的水溶液或者分散液，包括麻油、花生油或者含水聚丙二醇，和用于无菌注射溶液或分散液的临时配制的无菌粉末。无论在何种情况下，该形式必须是无菌的并且必须是流动的。在制造和储存条件下必须是稳定的，而且必须是防腐的，防止微生物如细菌和真菌的污染作用。

在与表面活性剂如羟丙纤维素适合地混合的水中，可制备活性化合物的溶液。在甘油、液体聚乙二醇及其混合物中以及在油中，也可制备分散液。在一般的储存和使用条件下，这些制剂含有防腐剂，以防止微生物的生长。所述的载体也可以是溶剂或者分散液介质，该介质包括含有水、乙醇、多元醇(例如，甘油、丙二醇、液态聚乙二醇等)及其适当的混合物和植物油。例如通过使用包衣如卵磷脂、通过在分散液的情况下维持需要的粒径以及通过使用表面活性剂，可保持适当的流动性。在有微粒的情况下，含水的悬浮介质可任选地包含粘度增加剂如羧甲基纤维素钠和任选地表面活性剂如吐温-20。通过多种抗菌和抗真菌剂，例如对羟基苯甲酸酯类、氯丁醇、苯酚、山梨酸、硫柳汞等，可产生防止的微生物作用。在许多情况下，更好的是包括等渗剂，例如，糖或者氯化钠。通过在组合物中使用延迟吸收的试剂，例如。单硬脂酸铝和明胶，可导致可注射组合物的延长吸收。

通过将要求量的活性化合物与上面列举多种其它成分，如需要的情况下，加入适当的溶剂中，然后过滤灭菌，制备无菌可注射的溶液。一般地，通过将多种已灭菌的活性成分加入无菌载体，该载体含有基本的分散液介质以及上面列出的需要的其它成分，制备分散液。对于用作制备无菌可注射溶液的无菌粉末，优选的制备方法是真空干燥和冻干技术，该技术可从之前其无菌过滤的溶液产生活性成分以及任何想要添加的成分的粉末。也可考虑制备用于直接注射的更高或者高的浓溶液，这里，使用DMSO作为溶剂被视为可导致非常快速的渗透，将高浓度的活性物质传输至较小的区域。

就制剂而言，将溶液以与剂量制剂相适合的方式以及以治疗有效的量给药。该制剂以多种剂量形式，例如上述的可注射溶液的类型，易于给药，但是，也可利用药物释放的胶囊和类似的剂型。

对于以水溶液形式的非胃肠道给药，例如，如果需要的话，该溶液应当适于被缓冲，而且液体稀释剂首先与足量的盐或者葡萄糖产生等渗。这些特殊的水溶液特别适合于静脉、肌肉内、皮下和腹腔膜内给药。在这种关系中，本领域的技术人员根据本发明的公开知道可利用无菌含水的介质。例如，可将一定剂量溶解于1ml等渗的NaCl溶液中，然后加入1000ml的皮下输注流体中，或者注射在建议的灌注位点。(参见，例如，“雷明顿的制药学”第15版，1035-1038和1570-1580页)。

术语“单位剂量”是指适合用于人体中的身体分散单位，每一个单位包含计算可产生预期反应的和预定数量的治疗组合物，上面已经讨论了与其给药有关，例如，适当的途径和治疗方案。给药的数量，根据治疗的数目和单位剂量，依赖于被治疗的患者、患者的状态和需要的保护。负责给药的人员，在任何情况下，都可确定用于患者的适当剂量。

缩宫素的活性以USP的单位来表达，如在生物检验垂体后叶萃取物的子宫刺激效力中定义的。一个USP单位与大约2μg纯的肽是等效的。

可将活性治疗物质制成混合物内含有约0.0001至1.0毫克、或约0.001至0.1毫克、或约1.0至100毫克或者甚至约.01至1.0克每一剂量左右。也可以多剂量给药。

除了将所述的化合物制成用于非胃肠道给药，例如静脉或者肌肉内注射，的制剂外，也可使用本发明给药的其它替代方法，包括(但不限于此)皮内给药、肺部给药、口腔给药、透皮给药和经粘膜给药。所有这些方法在本领域中都是熟知的。

本发明也可以经鼻腔给药，例如采用鼻用溶液或喷雾剂、气雾剂或吸入剂。鼻用溶液通常为水溶液，被设计成以液滴或者喷雾给药至鼻道。制备鼻用溶液，目的是它们在许多方面与鼻分泌物相似。因此，含水鼻用溶液通常是等渗的和稍稍被缓冲以维持5.5至6.5的pH值。此外，如果需要的话，在该制剂中也可包含与在眼用制剂使用的那些相似抗菌的防腐剂和合适的药物稳定剂。已知有多种上市的鼻用制剂，包括，例如，抗生素和抗组胺药，并且用于哮喘的预防。

适合其它模式给药的另外制剂包括栓剂和棒剂。也可使用直肠或阴道的棒剂或者栓剂。栓剂是多种重量和形状的固体剂量形式，通常用药是插入阴道、直肠或者尿道。在插入后，栓剂软化，溶化或者溶解在腔液中。对于栓剂而言，常规的粘合剂和载体一般包括，例如，聚烯烃乙二醇或者甘油三酯；这种栓剂可形成含有0.5％至10％，优选1％-2％，活性成分的混合物。

口服制剂包括这些常用的赋形剂例如药用级的甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、纤维素、碳酸镁等。这些组合物可采用的形式为溶液、混悬液、片剂、丸剂、胶囊、缓释制剂或者粉末。在某些特定的实施方案中，口服药物制剂可包括惰性的稀释剂或可吸收的食用载体，或者将它们封闭于硬壳或者软壳的明胶胶囊中，或者将它们压成片剂，或者将它们与规定食物直接地混合。对于口服治疗给药而言，可以将活性化合物与赋形剂结合，并以可食片、口腔片、锭剂、胶囊、酏剂、混悬剂、糖浆、薄饼等形式使用。这种组合物和制剂应当含有至少0.1％的活性化合物。组合物和制剂的这种百分比当然是变化的，而且通常是在约2至约75％的单位重量范围之间，或者优选在25-60％之间。在这种治疗有用的组合物中的活性化合物的量以使获得适宜剂量为宜。

片剂、锭剂、丸剂、胶囊等也可包括下列物质：粘合剂，如黄耆树胶、阿拉伯胶、玉米淀粉或者明胶；赋形剂，如磷酸二钙；崩解剂，如玉米淀粉、马铃薯淀粉、褐藻酸等；润滑剂，如硬脂酸镁；和甜味剂，如蔗糖、乳糖或者也可加入糖精，或者调味剂，如薄荷、冬青油或者樱桃调味剂。当剂量单位形式是胶囊时，除了上面类型的物质之外，它可含有液体载体。多种其它物质可以用作包衣或者以其它方式来改变剂量单位的物理形式。例如，可用虫胶、蔗糖或两者来包衣片剂、丸剂或者胶囊。酏剂的糖浆可含有活性化合物蔗糖作甜味剂，对羟基苯甲酸甲酯和丙酯作为防腐剂，染料及调味剂如樱桃或橙味。

此外，也可使用本发明适当替代的组合物，其包括(但不限于此)水凝胶、阴道环、贴剂(patches)、结晶、凝胶、脂质体和植入体。所有这些组合物在本领域中都是熟知的。

实施例

本发明包括下面的实施例，以说明本发明优选的实施方案。本领域的技术人员应当认识到，在随后的实施例中公开的技术代表了发明者发现的技术，以在实施本发明中很好地发挥作用，因此，可以被认为组成了特别优选的实施。尽管如此，本领域的技术人员应当认识到根据本发明的公开，在公开的特定实施方案中是可以做许多变化的，并且可以得到类似或者相近的结果，而这些均没有离开本发明的精神和范围。

实施例1.包囊于聚(丙交酯-共-乙交酯)(PLGA)微球体中的缩宫素的制备

制备含有缩宫素的PLGA微球体使用水包油乳液/溶剂萃取技术。简要地说，在不停地搅拌下，将20mg缩宫素的乙酸酯溶解于0.10mL甲醇中。然后将该缩宫素溶液加入0.90mL含有180mg已溶解PLGA(丙交酯/乙交酯比例50∶50，MW24,000Da，具有未封端的聚合物末端基团)的乙酸乙酯，以形成油(有机)相。然后将该缩宫素/PLGA溶液(1mL)加入至2mL1％聚(乙烯醇)(PVA)的水(水相)中，而且用旋转式混合器混合以产生乳液。然后将该乳液加入150mL水中，控制pH值为5.5，温度为4℃，并搅拌4小时。通过真空过滤收集硬化的微球体，用水冲洗，并室温或者真空条件下干燥过夜。通过反相HPLC分析该干燥粒子的肽含量(载量)，通过激光扫描测定粒度，通过气相色谱分析残留溶剂和通过标准方法测量崩解度。通过这种方法制备的微球体，缩宫素含量平均为2.0％(w/w)，粒径为46μm。

实施例2.包囊于聚(丙交酯-共-乙交酯)(PLGA)微球体中的缩宫素的制备

使用水包油乳液/溶剂萃取技术可制备含有生物活性剂缩宫素的PLGA微球体。简要地说，将20mg缩宫素乙酸酯溶解于0.20mL DMSO中。将该缩宫素溶液加入1.80mL含有180mg已溶解PLGA(丙交酯/乙交酯比例50∶50，MW24,000Da，具有未封端的聚合物末端基团)的二氯甲烷中。将该缩宫素/PLGA溶液(2mL)加入5mL1％聚(乙烯醇)(PVA)的水(水相)中，而且用旋转式混合器混合以产生乳液。然后将该乳液室温下加入100mL 0.3％PVA。将得到的混合物搅拌20分钟，并加入200mL 2％异丙醇(IPA)。然后室温搅拌该混合物3小时。通过真空过滤收集硬化的微球体，用水冲洗，并在室温或者真空条件下干燥过夜。通过反相HPLC分析该干燥粒子的肽含量(载量)，通过激光扫描测定粒度，通过气相色谱测定残留溶剂和通过标准方法测定崩解度。通过这种方法多次制备的微球体含有平均4.4％(w/w)的缩宫素(44％包囊效率)，粒径为46μm。

实施例3.使用管内乳化器制备包囊于聚(丙交酯-共-乙交酯)(PLGA)微球体中的缩宫素

使用在管内乳化器技术可制备含有缩宫素的PLGA微球体。简要地说，将20mg缩宫素乙酸酯溶解于0.20mL甲醇中。然后将该缩宫素溶液加入1.8mL含有180mg已溶解PLGA(丙交酯/乙交酯比例50∶50，MW24,000Da，具有未封端聚合物末端基团)的乙酸乙酯中，以形成油相。然后将该缩宫素/PLGA溶液(1mL)加入2mL1％聚(乙烯醇)(PVA)的水(水相)，而且用旋转式混合器混合以产生乳液。然后制备水的或水相，在本特定实施例中还包括10mM双羟萘酸二钠盐的1％PVA。然后将油相(1.0mL/分)与水相(2.0mL/分)在管内乳化器中混合，以生产稳定的乳液。然后将这种稳定的乳液室温加入150mL 0.3％PVA溶液，并搅拌4小时。通过真空过滤收集硬化的微球体，用水冲洗，并室温或者真空条件下干燥过夜。通过反相HPLC分析该干燥粒子的肽含量(载量)，通过激光扫描测定粒度，通过气相色谱测定残留溶剂和通过标准方法测定崩解度。通过这种方法制备的多批微球体显示，缩宫素含量为8.9％(w/w)，平均粒径为144μm。图1表示的是从本方法制备的微粒缩宫素在体外试验中的释放情况。24小时后这种肽大约21％的被释放，30天后超过80％被释放。

实施例4.缩宫素的聚乙二醇(PEG)轭合物

将聚乙二醇(MW 2000 Da)共价地轭合至缩宫素的氨基末端。简要地说，将200mg mPEG丙酸N-羟基琥珀酰胺加入100mg缩宫素溶于含有1％三乙胺的1mL DMF溶液中。使反应进行1小时，之后加入10mL水并将样品冻干。在水中将该冻干反应混合物再生，并用反相HPLC制备柱纯化该PEG-肽轭合物。

实施例6.PEG-缩宫素的PLGA微球体包囊

使用水包油乳液/溶剂蒸发技术可制备含有聚合物结合的生物活性剂缩宫素-2K PEG的PLGA微球体。简要地说，将实施例5中制备的20mg缩宫素-2K PEG溶解于0.20mL二氯甲烷中。将该缩宫素-2K PEG溶液加入1.80mL含有180mg已溶解PLGA(丙交酯/乙交酯比例50∶50，MW24,000Da，具有未封端的聚合物末端基团)的二氯甲烷中。将该缩宫素-2K PEG/PLGA溶液(2mL)加入5mL 1％PVA的水中，而且用旋转式混合器混合以产生乳液。然后将该乳液室温加入到100mL 0.3％PVA中。将得到的混合物搅拌20分钟，并加入200mL 2％IPA(异丙醇)。然后室温搅拌该混合物3小时。通过真空过滤收集硬化的微球体，用水冲洗，并室温或者真空条件下干燥过夜。通过反相HPLC分析该干燥粒子的肽含量(载量)，通过激光扫描测定粒度，通过气相色谱测定残留溶剂，通过标准方法测定溶解速度。在通过这种方法制备的微粒中PEG-缩宫素含量平均为1.7％(w/w)，平均粒径为37μm。

实施例7.PEG-缩宫素的PLGA微球体包囊

使用水包油乳液/溶剂蒸发技术可制备含有聚合物结合的生物活性剂缩宫素-2K PEG的PLGA微球体。简要地说，将实施例5中制备的20mg缩宫素-2K PEG溶解于0.10mL二氯甲烷中。然后将该缩宫素-2K PEG溶液加入0.90mL含有180mg已溶解PLGA(丙交酯/乙交酯比例50∶50，MW24,000Da，具有未封端的聚合物末端基团)的乙酸乙酯中。将该缩宫素-2K PEG/PLGA溶液(1mL)加入2mL 1％PVA的水中，而且用旋转式混合器混合以产生乳液。然后将该乳液加入150mL水中，控制pH值为5.5，温度为4℃。将反应混合物搅拌4小时。通过真空过滤收集硬化的微球体，在室温和真空条件下干燥过夜。通过反相HPLC分析该干燥粒子的肽含量(载量)，通过激光扫描测定粒度，通过气相色谱测定残留溶剂和通过标准方法测定溶解速度。通过这种方法制备的微粒中PEG-缩宫素含量平均为2.2％(w/w)，平均粒径为43μm。

根据本发明公开的内容，就可以实施本文公开和权利要求要求保护的所有方法和组合物，并且无需常规的实验即可制造。尽管本发明的组合物和方法以特定的实施方案来描述的，然而对本文描述的组合物、方法和方法的步骤或步骤顺序进行改变，都没有离开本发明的概念、精神和范围，这对于本领域的技术人员而言是显而易见的。更明确地说，当取得相同或相近结果时，很显然，这里描述的试剂可以被与化学和生理学上都相关的某些试剂替代。所有这些相似的替代和变化，对于本领域技术人员是显而易见的，都视为在如附加的权利要求书所定义的精神、范围和概念内。

Claims (51)

1.一种物质组合物，其包括：

(a)包囊于可生物降解的聚合物内的缩宫素、缩宫素类似物或者其混合物。

2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述的可生物降解的聚合物选自聚(丙交酯)、聚(乙交酯)、聚(丙交酯-共-乙交酯)、聚(乳酸)、聚(羟基乙酸)、聚(乳酸-共-羟基乙酸)、聚己酸内酯、聚碳酸酯、聚酰胺酯、聚酐、聚(氨基酸)、聚原酸酯、聚缩醛、聚氰基丙烯酸酯、聚醚酯、聚(二氧六环酮)、聚(亚烷基烷基化物)、聚乙二醇与聚(丙交酯)或聚(丙交酯-共-乙交酯)的共聚物、可生物降解的聚氨基甲酸乙酯、及其混合物和共聚物。

3.根据权利要求2所述的组合物，其中所述的可生物降解的聚合物是聚(丙交酯-共-乙交酯)。

4.根据权利要求1所述的组合物，其中所述的缩宫素类似物选自4-苏氨酸-1-羟基-去氨基缩宫素、9-去酰氨基缩宫素、7-D-脯氨酸缩宫素及其去氨基类似物、(2，4-二异亮氨酸)-缩宫素及其去氨基缩宫素类似物、1-去氨基-1-单卡巴-E12-[Tyr(OMe)]-OT、卡贝缩宫素、[苏氨酰4-甘氨酰7]-缩宫素、催产加压素，去氨基-6-卡巴-缩宫素、L-371，257以及缩宫素片断。

5.根据权利要求1所述的组合物，其中所述的缩宫素、缩宫素类似物或者其混合物进一步提供亲水性聚合物。

6.根据权利要求1所述的组合物，其中所述的亲水性聚合物是选自聚(乙二醇)、聚(丙二醇)和聚(乙二醇)与聚(丙二醇)的共聚物。

7.根据权利要求6所述的组合物，其中所述的亲水性聚合物是聚(乙二醇)。

8.根据权利要求1所述的组合物，其中所述的可生物降解的聚合物是选自可生物降解的微粒、可生物降解纳米粒子、凝胶、水凝胶和植入体的物质形式。

9.根据权利要求1所述的组合物，其中所述的缩宫素、缩宫素类似物或其混合物进一步包含一种变体，以增加稳定性和增强其通过血脑屏障的输送。

10.根据权利要求9所述的组合物，其中所述的以增加其稳定性和增强其通过血脑屏障输送的变体选自用甾类化合物酯化和用脂肪醇酯化的物质。

11.根据权利要求1所述的组合物，其中所述的缩宫素、缩宫素类似物或其混合物进一步包括一种变体，以增强其被输送通过血脑屏障后缩宫素、缩宫素类似物或者其混合物在大脑中的保留作用。

12.根据权利要求11所述的组合物，其中所述的缩宫素、缩宫素类似物或者其混合物被输送通过血脑屏障后在大脑中的保留作用选自共价结合的奎宁、苯醌、萘醌、吲哚醌、硝基杂环和1，4-二氢葫芦巴碱化物。

13.一种组合物，其包括：包囊于聚(丙交酯-共-乙交酯)微球体内的缩宫素乙酸酯。

14.根据权利要求13所述的组合物，其中所述的缩宫素乙酸酯包囊于聚(丙交酯-共-乙交酯)微球体内是通过选自乳液/溶剂萃取、乳液/溶剂蒸发-萃取、水包油乳液/溶剂蒸发以及在管内乳化的技术实现的。

15.根据权利要求13所述的组合物，其中所述的缩宫素乙酸酯进一步包括亲水性聚合物。

16.根据权利要求13所述的组合物，其中所述的亲水性聚合物选自聚(乙二醇)、聚(丙二醇)、及聚(乙二醇)与聚(丙二醇)的共聚物。

17.根据权利要求16所述的组合物，其中所述的亲水性聚合物是聚(乙二醇)。

18.根据权利要求13所述的组合物，其中所述的缩宫素、缩宫素类似物或者其混合物进一步包括一种变体，以增加稳定性和增强通过血脑屏障的输送。

19.根据权利要求18所述的组合物，其中所述的以增加稳定性和增强通过血脑屏障输送的变体选自用甾类化合物酯化和用脂肪醇的酯化的物质。

20.根据权利要求13所述的组合物，其中所述的缩宫素、缩宫素类似物或其混合物进一步包括一种变体，以增强缩宫素、缩宫素类似物或其混合物被输送通过血脑屏障后在大脑中的保留作用。

21.根据权利要求20所述的组合物，其中所述的以增强缩宫素、缩宫素类似物或其混合物被输送通过血脑屏障在大脑中保留作用的变体选自共价结合奎宁、苯醌、萘醌、吲哚醌、硝基杂环和1，4-二氢葫芦巴碱化物。

22.一种治疗患有内科疾病患者的方法，其包括：

(a)对患者给予治疗有效量的、被包囊于可生物降解的聚合物中的缩宫素、缩宫素类似物及其混合物。

23.根据权利要求22所述的方法，其中所述的内科疾病选自性功能障碍、与孤独症有关的有害行为特征、强迫症、饮食失调症、图雷特氏综合症、早老性痴呆和唐氏综合症。

24.根据权利要求23所述的方法，其中所述的性功能障碍选自女性性唤起障碍、女性性欲障碍和男性勃起功能障碍。

25.根据权利要求23所述的方法，其中所述的与孤独症有关的有害行为特征是选自重复行为、在社交意识方面的缺陷和在认知技能方面的缺陷。

26.根据权利要求22所述的方法，其中所述的可生物降解的聚合物选自聚(丙交酯)、聚(乙交酯)、聚(丙交酯-共-乙交酯)、聚(乳酸)、聚(羟基乙酸)、聚(乳酸-共-羟基乙酸)、聚己酸内酯、聚碳酸酯、聚酰胺酯、聚酐、聚(氨基酸)、聚原酸酯、聚缩醛、聚氰基丙烯酸酯、聚醚酯、聚(二氧六环酮)、聚(亚烷基烷基化物)、聚乙二醇与聚(丙交酯)或聚(丙交酯-共-乙交酯)的共聚物、可生物降解的聚氨基甲酸乙酯，及其混合物和共聚物。

27.根据权利要求26所述的方法，其中所述的可生物降解的聚合物是聚(丙交酯-共-乙交酯)。

28.根据权利要求22所述的方法，其中所述的缩宫素类似物选自4-苏氨酸-1-羟基-去氨基缩宫素、9-去酰氨基缩宫素、7-D-脯氨酸缩宫素及其去氨基类似物、(2，4-二异亮氨酸)-缩宫素及其去氨基缩宫素类似物、1-去氨基-1-单卡巴-E12-[Tyr(OMe)]-OT、卡贝缩宫素、[苏氨酰4-甘氨酰7]-缩宫素、催产加压素、去氨基-6-卡巴-缩宫素、L-371，257以及缩宫素片断。

29.根据权利要求22所述的方法，其中所述的缩宫素、缩宫素类似物或其混合物进一步包括亲水性聚合物。

30.根据权利要求29所述的方法，其中所述的亲水性聚合物选自聚(乙二醇)、聚(丙二醇)和聚(乙二醇)与聚(丙二醇)的共聚物。

31.根据权利要求30所述的方法，其中所述的亲水性聚合物是聚(乙二醇)。

32.根据权利要求22所述的组合物，其中所述的可生物降解的聚合物选自可生物降解的微粒、可生物降解纳米粒子、凝胶、水凝胶和植入体的物质形式。

33.根据权利要求22所述的方法，其中所述的缩宫素、缩宫素类似物或者其混合物进一步包括一种变体，以增强稳定性和增加通过血脑屏障的输送。

34.根据权利要求33所述的组合物，其中所述的以增加稳定性和增强通过血脑屏障输送的变体是选自用甾类化合物酯化和用脂肪醇酯化的物质。

35.根据权利要求22所述的组合物，其中所述的缩宫素、缩宫素类似物或其混合物进一步包括一种变体，以增强缩宫素、缩宫素类似物或其混合物被转运通过血脑屏障在大脑中的保留作用。

36.根据权利要求35所述的组合物，其中所述的以延长缩宫素、缩宫素类似物或者其混合物被输送通过血脑屏障在大脑中保留作用的变体选自共价结合的奎宁、非苯醌、萘醌、吲哚醌、硝基杂环和1，4-二氢葫芦巴碱化物。

37.一种治疗患有内科疾病患者的方法，其包括：

(a)将被包囊于聚(丙交酯-共-乙交酯)微球体内的缩宫素乙酸酯制成制剂，用于给所述的患者给药；

(b)对所述的个体患者给予有效量的所述制剂，以治疗所述的内科疾病。

38.根据权利要求37所述的方法，其中所述的内科疾病选自性功能障碍、与孤独症有关的有害行为特征、强迫症、饮食失调症、图雷特氏综合症、早老性痴呆和唐氏综合症。

39.根据权利要求38所述的方法，其中所述的性功能障碍选自女性性唤起障碍、女性性欲障碍和男性勃起功能障碍。

40.根据权利要求38所述的方法，其中所述的与孤独症有关的有害行为特征选自重复行为、在社交意识方面的缺陷和在认知技能方面的缺陷。

41.根据权利要求37所述的方法，其中所述的可生物降解的聚合物选自聚(乙交酯)、聚(丙交酯)、聚(丙交酯-共-乙交酯)、聚(乳酸)、聚(羟基乙酸)、聚(乳酸-共-羟基乙酸)、聚己酸内酯、聚碳酸酯、聚酰胺酯、聚酐、聚(氨基酸)、聚原酸酯、聚缩醛、聚氰基丙烯酸酯、聚醚酯、聚(二氧六环酮)、聚(亚烷基烷基化物)、聚乙二醇与聚(丙交酯)或聚(丙交酯-共-乙交酯)的共聚物、可生物降解的聚氨基甲酸乙酯，及其混合物和共聚物。

42.根据权利要求41所述的方法，其中所述的可生物降解的聚合物是聚(丙交酯-共-乙交酯)。

43.根据权利要求37所述的方法，其中所述的缩宫素类似物选自4-苏氨酸-1-羟基-去氨基缩宫素、9-去酰氨基缩宫素、7-D-脯氨酸缩宫素及其去氨基类似物、(2，4-二异亮氨酸)-缩宫素及其去氨基缩宫素类似物、1-去氨基-1-单卡巴-E12-[Tyr(OMe)]-OT、卡贝缩宫素、[苏氨酰4-甘氨酰7]-缩宫素、催产加压素、去氨基-6-卡巴-缩宫、L-371,257以及缩宫素片断。

44.根据权利要求37所述的方法，其中所述的缩宫素、缩宫素类似物或其混合物进一步包括亲水性聚合物。

45.根据权利要求44所述的方法，其中所述的亲水性聚合物选自聚(丙二醇)、聚(乙二醇)和聚(乙二醇)与聚(丙二醇)的共聚物。

46.根据权利要求45所述的方法，其中所述的亲水性聚合物是聚(乙二醇)。

47.根据权利要求37所述的组合物，其中所述的可生物降解的聚合物选自可生物降解的微粒、可生物降解纳米粒子、凝胶、水凝胶和植入体的物质形式。

48.根据权利要求37所述的方法，其中所述的缩宫素、缩宫素类似物或其混合物进一步包括一种变体，以增加稳定性和增强通过血脑屏障的输送。

49.根据权利要求48所述的组合物，其中所述的以增加稳定性和增强通过血脑屏障输送的变体是选自用甾类化合物酯化和用脂肪醇酯化的物质。

50.根据权利要求37所述的组合物，其中所述的缩宫素、缩宫素类似物或其混合物进一步包括一种变体，以增强缩宫素、缩宫素类似物或其混合物被输送通过血脑屏障在大脑中的保留作用。

51.根据权利要求50所述的组合物，其中所述的以增强缩宫素、缩宫素类似物或其混合物被输送通过血脑屏障在大脑中保留作用的变体选自共价结合的奎宁、苯醌、萘醌、吲哚醌、硝基杂环和1，4-二氢葫芦巴碱化物。

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