CN1928073A - 酪酸菌加嗜酸乳杆菌联合发酵工艺 - Google Patents
酪酸菌加嗜酸乳杆菌联合发酵工艺 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1928073A CN1928073A CN 200610107225 CN200610107225A CN1928073A CN 1928073 A CN1928073 A CN 1928073A CN 200610107225 CN200610107225 CN 200610107225 CN 200610107225 A CN200610107225 A CN 200610107225A CN 1928073 A CN1928073 A CN 1928073A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- acid bacteria
- fermentation process
- lactobacillus acidophilus
- clostridiumbutyricumand
- lactobacterium acidophilum
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明涉及一种采用一次性发酵获得多株益生菌的酪酸菌加嗜酸乳杆菌联合发酵工艺，酪酸菌和嗜酸乳杆菌开始分别摇床培养、增菌培养、种子罐培养合并，选择对双方都适宜的培养基，控制初始pH值，37℃经过36小时联合厌氧发酵，加入碳酸钙，离心，收集菌泥，40℃通风干燥，检测合格后，成品一次性包装入库，节省了时间，降低了成本，提高了发酵指数，缩短了两株益生菌到达人体后的“磨合期”，酪酸菌和嗜酸乳杆菌通过联合发酵，互生共生，到达人体胃肠道后，避免了象其他菌种之间的竞争，排斥作用，二者可以发挥更好地协同医疗作用。
Description
技术领域
本发明涉及一种以酪酸菌、嗜酸乳杆菌两种菌种为原料，采用一次性发酵获得多株益生菌的酪酸菌加嗜酸乳杆菌联合发酵工艺。
背景技术
酪酸菌又称丁酸菌或酪酸梭状芽孢杆菌，1933年由日本千叶医科大学宫入近治首先发现并报告，因此又名宫入菌。该菌广泛存在于土壤、动物和人类的肠道中，细菌学分类属梭菌属，为革兰氏阳性厌氧杆菌。由于酪酸菌为人体正常菌株之一。在肠道内能抑制有害菌和腐败群生长繁殖，近半世纪以来，酪酸菌制剂在日本、韩国、台湾等亚洲地区广泛应用于消化、小儿、外科、肿瘤、妇产科等各种原因引起的肠道菌群紊乱、急慢性腹泻、肠易激综合症、抗生素相关性肠炎、慢性肝炎和辅助治疗幽门螺旋杆菌引起的消化性溃疡及伪膜性肠炎等。我国从九十年代初引入酪酸菌制剂后，在北京、上海、重庆、哈尔滨等大城市医院临床应用，也取得了很好的效果。嗜酸乳杆菌(乳酸菌)是属革兰氏阳性球菌，专性厌氧，上世纪末被发现，对人体具有调整胃肠、帮助消化、提高免疫、降低血脂、减少肠内腐败菌产生胺、吲哚等有害物质，产生多种生理功能，市场上许多酸奶中便含有嗜酸乳杆菌。
文献报道，酪酸菌与嗜酸乳杆菌、双歧杆菌益生菌在肠道有增殖共生作用，而这种增殖共生的结果是对侵入人体的有害菌形成海陆空集团军作战的效应，使益生菌对人体有益的生理作用大大提高。临床上常见的酪酸菌制剂都先以单菌株发酵生产，经过离心干燥，收集菌粉等步骤，在做成复方制剂时，才将单一菌粉混合，制成多菌株制剂(胶囊、片剂等)，如国内生产的“常乐康”等。既然酪酸菌与嗜酸乳杆菌等其他益生菌有增殖效果的协同作用，那我们为什么不能在工业化生产中选择合适的微生物培养基来联合发酵生产呢？传统上的微生物发酵方法，一般都是采纯种培养法，以期获得较高的发酵单位而分离到较多细菌的代谢产物。如世界各地抗生素的生产，几乎无一例外。实验表明酪酸菌与嗜酸乳杆菌具有共生作用，可以通过联合发酵获得更高的发酵单位和产量，此外，酪酸菌与嗜酸乳杆菌在发酵过程中(一般24～36小时)无论在时间或空间上已经过了充分的“磨合、协调”，若直接拿菌粉作成一种制剂(如胶囊剂或片剂)两者可以不经过“磨合期”(事实上任何多种微生物在一起都存在营养、空间、时间的竞争，最终达到平衡)，而直接发挥协同作用，对疾病起到更快更好的治疗效果。
原工艺条件为酪酸菌和乳酸菌(嗜酸乳杆菌)种分别进行摇瓶培养，增菌培养、种子罐培养后加入不同的培养基分别进行大罐发酵24-36小时，温度控制在36℃和37℃，初始PH7.0，结束PH分别为4.5和3.5，分别离心，收集菌泥，酪酸菌60℃以下通风干燥，乳酸菌40℃以下通风干燥，检验合格后，成品分别包装入库。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术中存在的不足而提供一种将传统上酪酸菌和嗜酸乳杆菌单一纯菌种培养，实现为联合发酵培养，以达到简化生产工艺，降低生产成本，提高发酵活菌总数，增强临床使用效果，进一步扩大使用用途的酪酸菌加嗜酸乳杆菌联合发酵工艺，本发明的多株联合发酵工艺，是一次性发酵获得多株益生菌，降低了生产成本，避免了生产中多次混合的麻烦，减少了杂菌污染环节。
本发明的目的是这样实现的：
本发明的具体工艺如下：
第一步，制作含酪酸菌和嗜酸乳杆菌的混合菌液，
第二步，制作联合培养基，联合培养基为：在每100克蒸馏水中含葡萄糖1％、胰蛋白胨1％、酵母膏0.5％、牛肉浸膏0.3％、氯化钠0.2％、硫酸铵0.1％、磷酸氢二钾0.4％、硫酸亚铁0.1％、硫酸镁0.05％、硫酸锰0.02％、碳酸氢钠0.1％，钙酸钙0.1％，Tween.80 0.02％，121℃流通蒸汽灭菌30分钟，凉至室温，
第三步，将步骤1的混合菌液加入到步骤2的联合培养基中，用10％稀盐酸或5％氨水调控初始PH值在7.0～7.4之间，搅拌5分钟，在37℃密闭厌氧发酵36小时，
第四步，按发酵液总体积的5％加入药用碳酸钙，搅拌，离心，收集菌泥，在40℃以下通风干燥，成为成品。
在步骤1和2中，制作含酪酸菌和嗜酸乳杆菌的混合菌液具体为将菌液浓度均为1.0×108CFU/ml的酪酸菌和嗜酸乳杆菌按1∶1的体积比，分别摇床培养、增菌培养、种子罐培养，合并后成为混合菌液，混合菌液与联合培养基按1∶50的体积比配置。
在步骤3中，在37℃密闭厌氧发酵36小时后，取样检测活菌总数，保证在1.0×109～5.0×109CFU/ml，观察菌体生长情况，以菌体粗壮、生长良好为标准，用25型酸度计检测PH值，保证在4.0～3.5之间。
在步骤4中，菌泥在40℃以下通风干燥，水分控制在5％，粉碎过100目钢筛，检测合格后，成品一次性包装入库。
本发明具有如下积极效果：
1、节省了时间，降低了成本。原工艺大罐生产为两次分别发酵，现合并为一次发酵，时间缩短了24小时，能耗降低50％；
2、提高了发酵指数5倍，原工艺大罐发酵嗜酸乳杆菌一般为1.0×108CFU/ml，酪酸菌一般为1.0×109CFU/ml，提高了5倍。这与文献报道的其“互生”作用一致。
3、缩短了两株益生菌到达人体后的“磨合期”，更好地发挥协同医疗作用。酪酸菌和嗜酸乳杆菌通过联合发酵，互生共生，当作为同一制剂口服，到达人体胃肠道后，避免了象其他菌种之间的竞争，排斥作用，二者可以发挥更好地协同医疗作用。
本发明通过酪酸菌与嗜酸乳杆菌的两株联合发酵工艺，提高了发酵单位，增加了产量，增强了临床效果，降低了生产成本，使该产品在市场上更具竞争力，使物美价廉的复合酪酸菌扩大使用范围提供了可能。
本发明工艺与传统工艺经中试(150L)发酵检测如下：
| 发酵时间 | 发酵温度 | PH值 | 活菌总数 | ||
| 原工艺(二次发酵法) | S菌 | 36h | 37℃ | 3.5 | 1.0×108 |
| L菌 | 36h | 37℃ | 4.0 | 1.0×109 | |
| 新工艺(一次发酵法) | L菌+S菌 | 36h | 37℃ | 3.5 | 5.0×109 |
注：S菌表示嗜酸乳杆菌.L菌表示酪酸菌
本发明动物药效学实验报告：
成份：酪酸菌+乳杆菌(每g样活菌≥50亿CFU)
实验目的：本发明对仔猪腹泻效果
实验地点：河南杞县圈镇万头猪场
实验时间：2006、6、1~2006、7、15
实验方法：选择20~50日龄腹泻(下痢)仔猪28头，随机分为AB组，每组各14头。A组为本发明治疗组，B组为氟哌酸对照组。
A组仔猪按每天每Kg体重0.5g口服给药(罐服)，经过3天观察有13头仔猪已不拉稀，粪便成型，另一头仍为溏稀便，又经两天给药后，全部痊愈。
B组仔猪每天每Kg喂氟哌酸5mg，连灌3天，发现有10头停止拉稀，另4头又连服两天，仍有3头未见好转，且有一头死亡。
小结：本发明治疗组三天治疗有效率为92.85％，5天治疗有效率和治愈率均为100％，而化学抗菌药物氟哌酸治疗对照组3天有效率为71.43％，5天治疗有效率和治愈率分别为92.85％和78.57％，且有一头死亡，死亡率为7.14％。从AB两组实验数据可以看出，P≤0.5％，差异性及其显著。
此外，从治愈后三个月的增重情况来看，A仔猪比B组仔猪平均增重提高8~11％左右。这可能是抗生素在治疗过程中对小动物免疫系统抑制有关，而本发明微生态制剂则无此现象。
附图说明
图1为本发明的工艺流程图。
具体实施方式
实施例：如图1所示，本发明的具体工艺如下：
第一步，制作含酪酸菌和嗜酸乳杆菌的混合菌液，制作含酪酸菌和嗜酸乳杆菌的混合菌液具体为将菌液浓度均为1.0×108CFU/ml的酪酸菌和嗜酸乳杆菌按1∶1的体积比，分别摇床培养、增菌培养、种子罐培养，合并后成为混合菌液。
第二步，选择对双方都适宜的联合培养基，制作联合培养基具体为：在每100克蒸馏水中含葡萄糖1％、胰蛋白胨1％、酵母膏0.5％、牛肉浸膏0.3％、氯化钠0.2％、硫酸铵0.1％、磷酸氢二钾0.4％、硫酸亚铁0.1％、硫酸镁0.05％、硫酸锰0.02％、碳酸氢钠0.1％，钙酸钙0.1％，Tween.80 0.02％，121℃流通蒸汽灭菌30分钟，凉至室温。
第三步，将步骤1的混合菌液按1∶50的体积比加入到步骤2的联合培养基中，联合培养基放置在大发酵罐中，用10％稀盐酸或5％氨水调控初始PH值在7.0～7.4之间，搅拌5分钟，在37℃密闭厌氧发酵36小时，在37℃密闭厌氧发酵36小时后，取样检测活菌总数，保证在1.0×109～5.0×109CFU/ml，观察菌体生长情况，以菌体粗壮、生长良好为标准，用25型酸度计检测PH值，保证在4.0～3.5之间。
第四步，开启搅拌泵，按发酵液总体积的5％加入药用碳酸钙(吸收剂)，搅拌，经高速离心机离心，收集菌泥，在40℃以下通风干燥，水分控制在5％，粉碎过100目钢筛，检测合格后，成品一次性包装入库。
Claims (4)
1、一种酪酸菌加嗜酸乳杆菌联合发酵工艺，其特征在于：
第一步，制作含酪酸菌和嗜酸乳杆菌的混合菌液，
第二步，制作联合培养基具体为：在每100克蒸馏水中含葡萄糖1％、胰蛋白胨1％、酵母膏0.5％、牛肉浸膏0.3％、氯化钠0.2％、硫酸铵0.1％、磷酸氢二钾0.4％、硫酸亚铁0.1％、硫酸镁0.05％、硫酸锰0.02％、碳酸氢钠0.1％，钙酸钙0.1％，Tween.80 0.02％，121℃流通蒸汽灭菌30分钟，凉至室温，
第三步，将步骤1的混合菌液加入到步骤2的联合培养基中，用10％稀盐酸或5％氨水调控初始PH值在7.0～7.4之间，搅拌5分钟，在37℃密闭厌氧发酵36小时，
第四步，按发酵液总体积的5％加入药用碳酸钙，搅拌，离心，收集菌泥，在40℃以下通风干燥，成为成品。
2、根据权利要求1所述的酪酸菌加嗜酸乳杆菌联合发酵工艺，其特征在于：在步骤1和2中，制作含酪酸菌和嗜酸乳杆菌的混合菌液具体为将菌液浓度均为1.0×108CFU/ml的酪酸菌和嗜酸乳杆菌按1∶1的体积比，分别摇床培养、增菌培养、种子罐培养，合并后成为混合菌液，混合菌液与联合培养基按1∶50的体积比配置。
3、根据权利要求1所述的酪酸菌加嗜酸乳杆菌联合发酵工艺，其特征在于：在步骤3中，在37℃密闭厌氧发酵36小时后，取样检测活菌总数，保证在1.0×109～5.0×109CFU/ml，观察菌体生长情况，以菌体粗壮、生长良好为标准，用25型酸度计检测PH值，保证在4.0～3.5之间。
4、根据权利要求1所述的酪酸菌加嗜酸乳杆菌联合发酵工艺，其特征在于：在步骤4中，菌泥在40℃以下通风干燥，水分控制在5％，粉碎过100目钢筛，检测合格后，成品一次性包装入库。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNB2006101072252A CN100523170C (zh) | 2006-09-29 | 2006-09-29 | 酪酸菌加嗜酸乳杆菌联合发酵工艺 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNB2006101072252A CN100523170C (zh) | 2006-09-29 | 2006-09-29 | 酪酸菌加嗜酸乳杆菌联合发酵工艺 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1928073A true CN1928073A (zh) | 2007-03-14 |
| CN100523170C CN100523170C (zh) | 2009-08-05 |
Family
ID=37858206
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CNB2006101072252A Active CN100523170C (zh) | 2006-09-29 | 2006-09-29 | 酪酸菌加嗜酸乳杆菌联合发酵工艺 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN100523170C (zh) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102240303A (zh) * | 2010-05-12 | 2011-11-16 | 杜灵广 | 一种防治肠癌的复合益生菌的生产方法 |
| CN102440375A (zh) * | 2010-09-30 | 2012-05-09 | 杜涵 | 一种儿童服用的益生菌及其制备方法 |
| CN108004191A (zh) * | 2018-01-22 | 2018-05-08 | 湖北华扬科技发展有限公司 | 一种嗜酸乳杆菌和丁酸梭菌混合发酵方法及其发酵设备 |
| CN108676739A (zh) * | 2018-04-10 | 2018-10-19 | 凯磊（北京）科技有限公司 | 一种酪酸梭菌与嗜酸乳杆菌联合发酵制备复合益生菌制剂的方法 |
| CN110353099A (zh) * | 2019-09-02 | 2019-10-22 | 河南牧业经济学院 | 一种丁酸梭菌及丁酸梭菌饲料添加剂的生产方法 |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102499340B (zh) * | 2011-12-21 | 2013-11-13 | 王建鹏 | 一种益生菌制剂及其制备方法 |
-
2006
- 2006-09-29 CN CNB2006101072252A patent/CN100523170C/zh active Active
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102240303A (zh) * | 2010-05-12 | 2011-11-16 | 杜灵广 | 一种防治肠癌的复合益生菌的生产方法 |
| CN102240303B (zh) * | 2010-05-12 | 2013-01-09 | 杜灵广 | 一种防治肠癌的复合益生菌的生产方法 |
| CN102440375A (zh) * | 2010-09-30 | 2012-05-09 | 杜涵 | 一种儿童服用的益生菌及其制备方法 |
| CN108004191A (zh) * | 2018-01-22 | 2018-05-08 | 湖北华扬科技发展有限公司 | 一种嗜酸乳杆菌和丁酸梭菌混合发酵方法及其发酵设备 |
| CN108676739A (zh) * | 2018-04-10 | 2018-10-19 | 凯磊（北京）科技有限公司 | 一种酪酸梭菌与嗜酸乳杆菌联合发酵制备复合益生菌制剂的方法 |
| CN110353099A (zh) * | 2019-09-02 | 2019-10-22 | 河南牧业经济学院 | 一种丁酸梭菌及丁酸梭菌饲料添加剂的生产方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN100523170C (zh) | 2009-08-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN1243101C (zh) | 一种食品功能因子γ－氨基丁酸的制备方法 | |
| CN104371960B (zh) | 复合菌剂及所采用的复合微生物的连续发酵法 | |
| CN101338283B (zh) | 一种干酪乳杆菌及其在固态发酵中的应用 | |
| CN103627656B (zh) | 一种丁酸梭菌与凝结芽孢杆菌混菌固态发酵方法 | |
| CN102948621A (zh) | 一种益生肽生物饲料添加剂及其制备方法和应用 | |
| CN106754619A (zh) | 一种在谷物培养基中添加中药组分促进益生菌生长的方法 | |
| CN105543126A (zh) | 一种植物乳杆菌jm113及其应用 | |
| CN103013879A (zh) | 一株具有高产γ-氨基丁酸能力的菌株 | |
| CN100523170C (zh) | 酪酸菌加嗜酸乳杆菌联合发酵工艺 | |
| CN110521939A (zh) | 一种调节肠道健康的益生菌发酵食品及其制备方法 | |
| CN1273838A (zh) | 含有死的益生菌共生发酵培养物的营养组合物 | |
| CN107151638B (zh) | 一株改善肝功能的植物乳杆菌zy001及其在发酵乳中的应用 | |
| CN107164295A (zh) | 一种富硒微生物其制备方法及应用 | |
| CN116676225B (zh) | 一株具有安神助眠功效的鼠李糖乳杆菌lr-28菌株、发酵产物、嘉眠菌群组合剂及应用 | |
| CN105994941A (zh) | 一种微生物发酵制备的无抗饲料 | |
| CN1916028A (zh) | 干酪乳杆菌胞外多糖及其粗品、制备方法和应用 | |
| CN113122467A (zh) | 一种副干酪乳杆菌及其组合物 | |
| CN111228316B (zh) | 用于改善糖尿病的复合益生菌 | |
| CN113462605A (zh) | 一种戊糖片球菌368菌剂及其制备方法和应用 | |
| CN113397170B (zh) | 一种用于调节人体肠道菌群的海洋益生元组合物的应用 | |
| CN114392282A (zh) | 一种高后生元含量的制剂及其制备方法和应用 | |
| CN1180700C (zh) | 一种多功能发酵奶及其制造方法 | |
| CN111011839A (zh) | 一种模拟粪便移植的生态食品及其制备方法与用途 | |
| CN115176874B (zh) | 一种饲料添加剂及其制备方法与应用 | |
| CN116970536B (zh) | 一株具有降尿酸功能的戊糖片球菌及其后生元和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| EE01 | Entry into force of recordation of patent licensing contract |
Assignee: Zhengzhou jinbaihe Biological Engineering Co., Ltd. Assignor: Du Lingguang Contract record no.: 2010410000139 Denomination of invention: Combination fermentation process of clostridiumbutyricum and lactobacillus acidophilus Granted publication date: 20090805 License type: Exclusive License Open date: 20070314 Record date: 20101009 |
|
| C41 | Transfer of patent application or patent right or utility model | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20160318 Address after: 456150, Tangyin County, Henan Province Industrial Zone, prosperous road and revitalization Avenue intersection southeast corner (volts Road) Patentee after: HENAN JINBAIHE BIOTECHNOLOGY CO., LTD. Address before: 450001 No. 920, No. 2, building No. 96, Ruida Road, Zhengzhou hi tech Development Zone, Henan, Patentee before: Du Lingguang |