CN1894264A - 吲唑的有机磷衍生物及其作为蛋白质激酶抑制剂的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及新型化合物，特别涉及新型有机磷吲唑衍生物，涉及含有该化合物的组合物及其作为用于治疗癌症的药物方面的应用。
Description
本发明特别涉及一种新型化合物，具体涉及新型吲唑有机磷衍生物，含有该化合物的组合物及其作为药物的应用。
更具体说，本发明涉及通过调制蛋白质活性，特别是调制激酶的活性而具有抗癌活性的新型特殊吲唑。
迄今为止，大多数用于化疗的已商品化化合物都是细胞毒类物质，它们都具有副作用和病人耐受性的严重问题。这些副作用在使用的药物对癌细胞具有选择性作用，而排斥健康细胞的范围内能够受到限制。因此，对不希望的化疗副作用进行限制的方法包括使用涉及到代谢途径的药物，或者涉及这些途径的构成要素的药物，主要在癌细胞中表达，而在健康细胞中将不表达或很少表达。
蛋白质激酶是一类对蛋白质特定残基，比如酪氨酸、丝氨酸或苏氨酸残基的羟基进行磷酸化催化的酶。这样的磷酸化能够大幅度地改变蛋白质的功能，因此蛋白质激酶在调节各式各样的细胞过程中起着重要的作用，这些过程特别包括代谢、细胞增生、细胞分化、细胞迁移和细胞存活等。在涉及到蛋白质激酶激活的各种细胞功能中，某些过程对于治疗癌类疾病以及其它疾病来说，代表了有吸引力的目标。
因此，本发明的目的是提供一种特别涉及到通过激酶而具有抗癌活性的组合物。在对于其活性调节进行研究的激酶中，优选是Aurora 2激酶和Tie 2激酶。
在分离染色体和集聚纺锤体时涉及到的许多蛋白质都在酵母和果蝇中被鉴别出。这些蛋白质的破坏导致染色体不分离和纺锤体单极或破坏。在这些蛋白质中，某些激酶对于染色体分离和中心体分离是有意义的，其中Aurora和lpl 1分别来源于果蝇和S.cerevisiae。最近，酵母lpl 1的人类似物已经被不同的实验室克隆并被表征。这些激酶被命名为aurora 2、STK 15或BTAK，属于丝氨酸/苏氨酸家族。Bischoff等人证明了Aurora 2是致癌基因，在人类结肠癌中被扩增(EMBO J，1998，17，3052-3065)。在涉及到上皮肿瘤比如乳腺癌的癌症中也对其进行了举例说明。
在本发明的产物涉及到的其它激酶中，可以举出FAK、KDR、Src、Tie 2和细胞周期蛋白依存激酶(CDK)。
FAK是在由整联蛋白转导传递信号时起着重要作用的胞质酪氨酸激酶，是一类细胞粘着异源双体受体。FAK和整联蛋白都位于被称为粘着斑的围膜结构中。在许多类型的细胞中显示出，FAK的活化及其对酪氨酸残基的磷酸化作用，特别是其对酪氨酸397的自动磷酸化与整联蛋白与其细胞外配体的键有关，因此是当细胞粘着时诱发的[Kornberg L等人J.Biol.Chem.267(33)：23439-442]。FAK对酪氨酸397的自动磷酸化表示通过其SH2区域对于另一种酪氨酸激酶Src的键合点[Schaller等人，Mol.Cell.Biol.14：1680-1688.1994；xing等人，Mol.Cell.Biol.5：413-421，1994]。此时Src可以使FAK对酪氨酸925磷酸化，如此就吸收适应蛋白Grb2，并在某些细胞中诱使Ras通道和在控制增生时涉及的MAP激酶活化[Schlaepfer等人，Nature；372：786-791，1994；Schlaepfer等人，Prog.Biophy.Mol.Biol.71：435-478，1999；Schlaepfer和Hunter，J.Biol.Chem.，272：13189-13195，1997]。FAK的活化还可以诱发Jun NH2端基激酶(JNK)信号作用通道，并导致细胞进展到细胞周期的G1期[Oktay等人，J.Cell.Biol.，145：1461-1469，1999]。磷脂酰肌醇-3-羟基激酶(Pl3-激酶)也与FAK对酪氨酸397的作用有关，此相互作用对于Pl3-激酶的活化可能是必需的[Chen和Guan，Proc.Nat.Acad.Sci.USA，91：10148-10152，1994；Ling等人，J.Cell.Biochem.，73：533-544，1999]。复合的FAK/Src使不同的底物，比如在成纤维细胞中的桩蛋白和p130CAS磷酸化[Vuori等人，Mol.Cell.Biol.，16：2606-2613]。
许多研究的结果都支持一个假说，即FAK抑制剂可以用于癌的治疗当中。研究使人想到，FAK可能在细胞在生体外的增生和/或存活起着重要的作用。比如，某些作者证实在CHO细胞中，p125FAk的过度表达会导致G1向S转移的加速，这就暗示着p125FAK有助于细胞增生[Zhao J.-H等人，J.Cell Biol.，143：1997-2008，1998]。其它作者们证实，用FAK的反义寡核苷酸治疗的肿瘤细胞失去了其粘着，并进入凋亡进程(Xu等人，Cell.Growth Differ.4：413-418.1996)。还证实FAK促进细胞在生体外的迁移。比如，缺损成纤维细胞对于FAK的表达(小白鼠对FAK的“剔除”)具有圆形的形态，即使细胞迁移对趋药信号响应的缺陷，此缺陷是被FAK的再表达来消除的[DJ.Sieg等人，J.Cell Science，112：2677-91，1999]。FAK的C端基区的过度表达(FRNK)完全阻断了粘着细胞，在生体外减少了细胞迁移[RichardsonA.和Parsons J.T.，Nature，380：538-540，1996]。在CHO、COS细胞或在人类星形细胞瘤细胞中FAK的过度表达有助于细胞的迁移。在生体外FAK介入许多类型细胞中促进细胞增生和迁移，提醒我们FAK在肿瘤进展的过程中有潜在的作用。最近的研究确实显示出，在人类星形细胞瘤的细胞中诱发FAK表达以后，在生体内有肿瘤细胞增生[Cary L.A等人，J.Cell Sci.109：1787-94；Wang D等人，J.Cell Sci.，113：4221-4230，2000]。再有，人类活组织免疫组织化学研究表明，FAK在前列腺癌、乳腺癌、甲状腺癌、结肠癌、黑色素瘤、脑癌和肺癌中都过度表达，与肿瘤直接相关的FAK表达水平表现出最有威胁性的表现型[Weiner TM等，Lancet.342(8878)：1024-1025，1993；Owens等人，Cancer Research，55：2752-2755，1995；Maung K等人，Oncogene，18：6824-6828，1999；Wang D等人，J.Cell Sci.，113：4221-4230，2000]。
KDR(激酶插入区受体)也称为VEGF-R2(血管内皮生长因子受体2)，只在内皮细胞中表达。这种受体固定在血管生成因子VEGF上，其作用是通过其细胞内激酶区的活化而作为具有转导信号的介体。直接抑制激酶VEGF-R2的活性能够减少在外源VEGF(血管内皮生长因子)存在下的血管生成现象(Strawn等人，Cancer Research，1996，vol.56，p.3540-3545)。此过程特别借助于VEGF-R2突变体来显示(Millauer等人，Cancer Research，1996，vol.56，p.1615-1620)。对于成人来说，只与VEGF的血管生成活性有关，受体VEGF-R2似乎没有任何其它功能。因此，VEGF-R2激酶活性的选择性抑制剂只应显示出很小的毒性。
除了在血管生成动力学过程中此中心作用之外，最近的结果显示出，VEGF的表达有助于在化疗和放疗之后肿瘤细胞的存活，强调出KDR的潜在抑制剂和其它试剂的协同作用(Lee等人，CancerResearch，2000，vol.60，p.5565-5570)。
Tie-2(TEK)是酪氨酸激酶受体族的一个成员，对内皮细胞是有特异性的。Tie2是具有酪氨酸激酶活性的第一个受体，是与刺激受体的自动磷酸化和细胞的信号作用的兴奋剂(促血管生成素1或Ang1)[S.Davis等人(1996)Cell 87，1161-1169]和拮抗剂(促血管生成素2或Ang2)[P.C.Maisonpierre等人，(1997)Science 277，55-60]同时知道的。在新生血管生成的最后阶段，促血管生成素1可以与VEGF协同作用[Ashara T.，Circ.Res.(1998)233-240]。Tie2或Ang1表达的剔除经验和转基因操作导致动物表现出血管形成的缺陷[D.J.Dumont等人，(1994)Genes Dev.8，1897-1909和C.Suri(1996)Cell87，1171-1180]。Ang1与其受体连接导致Tie2的激酶区自动磷酸化，这对于新血管生成以及对于血管与周皮细胞和平滑肌细胞的补充和相互作用都是很关键的；这些现象有助于新形成的血管成熟和稳定[P.C.Maisonpierre等人(1997)Science 277，55-60]。Lin等人(1997)，J.Clin.Invest.100，8：2072-2078；Lin P.(1998)PNAS 95，8829-8834证实了当在乳腺癌和黑色素瘤模型中进行腺病毒感染或从细胞外区注入Tie2(Tek)时，对肿瘤生长和形成血管的抑制以及降低肺转移的作用。Tie2抑制剂可用于新生血管不适当形成的位置(这就是说在糖尿病的视网膜病、慢性炎症、牛皮癣、卡波西肉瘤、由于黄斑变性造成的慢性新生血管形成、类风湿关节炎、新生儿血管瘤和癌当中)。
细胞周期的进展经常是由于与细胞周期蛋白(CDK)有关的激酶管理的，CDK由于在其族系中的平衡而被活化，由于底物磷酸化，最后由于细胞分裂而使活化终止。再有，被活化的CDK的内源抑制剂(INK4和KIP/CIP族系)以负面的方式调节CDK的活性。正常细胞的生长一般是由于在CDK(细胞周期蛋白)活化剂和CDK内源抑制剂之间的平衡。在许多种类的癌症当中，都描述了细胞周期多个成分的异常表达或活性。
细胞周期蛋白E使激酶Cdk2活化，随后Cdk2发生作用使pRb磷酸化，而pRb是进入细胞的不可逆分裂和向S期转变而得到的(PLToogood，Medicinal Research Reviews(2001)，21(6)；487-498)，按照这些作者的看法，激酶CDK2和CDK3对于在G1期中的进展和进入S期都可能是必需的。当与细胞周期蛋白E形成复合物时，它们维持pRb的过度磷酸化以有助于从G1期向S期的进展。在与细胞周期蛋白A的复合物中，CDK2在使E2F失活方面起有作用，对于实现S期是必需的(TD.Davies等人，(2001)Structure 9，389-3)。
CDK1/细胞周期蛋白B复合物调节细胞周期在G2期和M期之间的进展。CDK/细胞周期蛋白B的负向调节阻止正常的细胞在正确和完全实现G2期之前进入S期(K.K.Roy和E.A.Sausville，CurrentPharmaceutical Design，2001，7，1669-1687)。
存在着CDK活性的调节水平。与激酶(CAK)有关的细胞周期蛋白活化剂对CDK的调节具有正向活性。CAK使CDK对苏氨酸残基磷酸化，以赋予靶酶完全的活性。
在介入细胞周期的分子中存在的缺陷导致CDK活化和周期的进展，一般希望抑制CDK酶的活性，以阻断癌性细胞的生长。
本发明涉及新型吲唑有机磷衍生物。本发明还涉及吲唑在5位的有机磷衍生物作为激酶抑制剂，更特别作为抗癌剂的应用。其中，本发明优选涉及5-磷酰基和5-膦化(phosphino)吲唑。本发明还涉及所述衍生物用来制备用于人类治疗的药物的应用。
在至今已知的叙述5-磷酰基吲唑的先有技术中，可以举出以WO93/18008的序号出版的专利申请书，该申请叙述了如下通式的化合物：
其中：X＝N、CR14(R14＝H、烷基等)；R1＝H或卤素；R2＝H、NO2、卤素、烷基等；R3＝H、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、CN、NH2；R4～R6＝H、NO2、卤素、烷基等、烷基磺酰胺基、P(＝L)(Q)(M)；L＝O、S；M、Q＝烷氧基、烷基、(烷基)n氨基、OH、H、烯氧基、(烯基)n氨基、炔氧基、(炔基)n氨基；R7＝H、卤素、烷基、NO2和R8＝H、卤素。
只有化合物147、161和163是在5位被含磷基团取代的吲唑，因此它们不包括在本发明中。反之，这些化合物作为药物构成本发明的一部分。
在此申请中提出权利要求的化合物在农艺学中具有用途，而本发明的化合物具有药物学的用途。
按照本发明的第一方面，涉及如下通式(I)的化合物：
其中：
—W表示选自共价键或O的基团；
—X表示共价键、基团-C＝O-NRa-、NRa-C＝O、-(CH2)n-、-CH＝CH-、-C≡C-、-NRa-、S、O、-SO2-、-SO、-CO、-COO，其中Ra表示H或基团(C1～C4)烷基，其可任选与R1形成环，而且其中n＝0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12；
—R1表示H(除了当X＝-SO2-、-SO-时)、烷基、环烷基、芳基、杂芳基；其中R1可任选被取代；
—R和R2相同或不同，表示H或选自烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、羟基、烷氧基和芳氧基的基团，其中R和R2任选被取代；
—Y表示共价键或选自-C＝O-NRa-、-C＝O-O-、-C＝O-、-(CH2)n-、-SO2-的基团，其中Ra选自H、(C1～C4)烷基和与R3相连接以形成环的(C1～C4)烷基；
—R3选自H(除了当Y是-C＝O-O-或-SO2-时)、烷基、环烷基、芳基和杂芳基；R3可任选被取代；
—R4、R6和R7相同或不同，可独立地选自H、卤素、(C1～C4)烷基、(C1～C4)烷氧基、氰基、-N(Rb)Rc、-C＝O-N(Rb)Rc、-N(Rb)-CO-Rc-，其中Rb和Rc独立地选自H、(C1～C4)烷基和(C3～C6)环烷基；
只是不包括如下化合物：
W优选是O。
优选的芳基和杂芳基独立地选自：
(i)含有0～4个选自O、N和S的杂原子的单环基团，和
(ii)含有如下成分的稠合(condensé)双环基团：
(a)含有5、6、7或8个链节并含有0～4个选自O、N和S的杂原子的单环基团，此基团与下面的(b)稠合
(b)含有5或6个链节并含有0～3个选自O、N和S的杂原子的另外的环。
更优选地，芳基或杂芳基独立地选自苯基、吡啶基、嘧啶基、三嗪基、吡咯基、咪唑基、噻唑基、呋喃基、噻吩基、吲哚基、吲唑基、氮杂吲唑基、异苯并呋喃基、异苯并噻吩基、苯并咪唑基、苯并唑基、苯并噻唑基、芳基亚乙烯基、芳基酰胺基、芳基甲酰胺基、芳烷基胺、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、喹唑啉基、萘啶基、三唑基或四唑基。
很优选的芳基或杂芳基独立地选自苯基、吡咯基、任选取代的吲哚基和芳基亚乙烯基。
对于通式(I)产物的定义，当X表示共价键而R1表示杂环基特别是吲哚基时，特别有利地实施本发明。
优选的取代基R2是(C1-C4)烷基。
优选地，Y有利地是键，而R3是H。
按照本发明的第二方面，涉及按照其第一方面的产物在人类治疗方面的应用，特别是用来治疗与出现癌相关的激酶比如Tie2、Aurora-2的不规律有关的疾病。
按照本发明的第三方面，涉及作为药物的如下通式(I)的化合物：
其中：
—W表示选自共价键或O的基团；
—X表示共价键、基团-C＝O-NRa-、NRa-C＝O、-(CH2)n-、-CH＝CH-、-C≡C-、-NRa-、S、O、-SO2-、-SO、-CO、-COO，其中Ra表示H或基团(C1～C4)烷基，其可任选与R1形成环，而且其中n选自区间[0～12](包含两个端值)；
—R1表示H(除了当X＝-SO2-、-SO-时)、烷基、环烷基、芳基、杂芳基；其中R1可任选被取代；
—R和R2相同或不同，表示H或选自烷基、环烷基、芳基、杂芳基、羟基、烷氧基和芳氧基的基团，其中R和R2任选被取代；
—Y表示共价键或选自-C＝O-NRa-、-C＝O-O-、-C＝O-、-(CH2)n-、-SO2-的基团，其中Ra选自H、(C1～C4)烷基和与R3相连接以形成环
的(C1～C4)烷基；
—R3选自H(除了当Y是C＝O-O或-SO2-时)、烷基、环烷基、芳基和杂芳基；R3可任选被取代；
—R4、R6和R7相同或不同，可独立地选自H、卤素、(C1～C4)烷基、(C1～C4)烷氧基、氰基、-N(Rb)Rc、-C＝O-N(Rb)Rc、-N(Rb)-CO-Rc，其中Rb和Rc独立地选自H、(C1～C4)烷基和(C3～C6)环烷基；
在符合通式(I)的化合物中可以举出如下的化合物：
1)甲基膦酸甲酯3-[5-(2-吗啉-4-基乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基酯
2)甲基膦酸甲酯3-{5-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)-乙氧基]-1H-吲哚-2-基}-1H-吲唑-5-基酯
3)苯基膦酸甲酯3-噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基酯
4)(2-甲磺酰基苯基)-膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯
5)丙基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯
6)叔丁基膦酸3-(1-H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯
7)环己基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯
8)(2-甲氧基苯基)膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯
9)(2-甲基硫(Methylsulfanyl)苯基)膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯
10)(2，6-二甲基苯基)膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯
11)(2-三氟甲氧基苯基)膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯
12)噻吩-2-基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯
13)呋喃-2-基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯
14)甲基膦酸3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯
15)苯基膦酸3-((E)苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯
16)苯基膦酸3-噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基酯甲酯
17)甲基膦酸3-噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基酯甲酯
18)甲基膦酸3-(1H-吡咯-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯
19)甲基膦酸3-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基酯甲酯
20)苯基膦酸3-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基酯甲酯
21)苯基膦酸3-(5-甲氧基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯
22)甲基膦酸3-(5-甲氧基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯
按照本发明的化合物的制备方法可以按照如下方式进行：
按照本发明的化合物可用于人类的治疗，更特别用于癌症的治疗，更特别用于对Aurora-2和Tie2抑制剂敏感的癌症的治疗。
将借助于下面的实施例更完整地叙述本发明，这些实施例不应被看作对本发明的限制。
分析LC/MS
在与设备HP 1100相连接的型号为LCT的Micromass设备上进行LC/MS分析。借助于具有HP G1315A二极管探针的检出器在200～600nm波长的范围内和具有Sedex 65光散射的检出器测量产物的丰度。在180～800的范围内获得质谱。使用Micromass MassLynx软件对数据进行分析。在3μm(50×4.6mm)的Hypersil BDS C18柱子上，用含有0.05vol％三氟乙酸(TFA)的乙腈在含有0.05vol％TFA的水中以5～90％的线性梯度进行洗脱，在1mL/min的流量下，在3.5min内进行分离。包括柱子再平衡期在内的总分析时间为7min。
用制备LC/MS提纯
使用由型号600的Waters梯度泵、型号515的Waters再生泵、Waters Reagent Manager稀释泵、型号2700的Waters自动注射器、两个型号LabPro的Rheodyne阀门、型号996的Waters带有二极管探针检出器、型号ZMD的Waters质谱仪和型号204的Gilson馏分收集器组成的Waters FractionLynx系统，通过LC/MS对产物进行提纯。用Waters FractionLynx对系统进行控制。在两个Waters Symmetry柱子(C18，5μm，19×50mm，分类号186000210)上交替进行分离，一个柱子在用含有0.07vol％三氟乙酸的水/乙腈(95/5，v/v)混合物进行再生的过程中，同时另一个柱子进行分离。使用含有0.07vol％三氟乙酸的乙腈在含有0.07vol％三氟乙酸的水中的乳液，以5～95％的线性梯度进行柱子洗脱，流量是10mL/min。在分离柱子的出口处，由LCPacking Accurate以0.5mL/min的流量分离用甲醇稀释的千分之一的流出物，并送向检出器，以75％送向具有二极管探针的检出器，25％送向质谱仪。其余的流出物(999/1000)被送向馏分收集器，在这里流出物作为不打算被软件FractionLynx检出的产物而除去。由软件FractionLynx提供所需产物的分子式，当检出的质量信号相当于离子[M+H]+和/或[M+Na]+时，软件就启动产物的收集。在某些情况下，取决于LC/MS分析的结果不同，当检测出相当于[M+2H]++的强离子时，软件FractionLynx也提供相当于计算分子量一半(MW/2)的值。在这些条件下，当检测出[M+2H]++和/或[M+Na+H]++离子质量信号时，也会启动收集。产物被搜集在称量了皮重的玻璃管中。在收集之后，在Savant AES 2000型或Genevac HT8型离心蒸发器中将溶剂蒸发，对蒸发溶剂之后玻璃管称重就得到产物的质量。
用快速色谱提纯：在0.5bar的氩气压力下，在颗粒度15～35μm的二氧化硅上对粗产物进行快速色谱提纯。收集相当于所需产物的馏分，在旋转蒸发器中减压浓缩。
中间体A按照方案1分4步制备5-苄氧基-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
方案1
步骤1：制备4-苄氧基-2-甲基-苯胺
在50g4-苄氧基-2-甲基-1-硝基苯和46g锌的混合物中滴加在300mL乙醇中的190mL浓盐酸溶液。通过流经冰浴将溶液冷却到大约45℃。在环境温度下搅拌介质3h。加入500mL饱和碳酸钾溶液将溶液的pH值调节到大约8。过滤出沉淀，并用5×500mL的乙酸乙酯洗涤沉淀。合并有机相，用2×1L的蒸馏水洗涤，然后用1L饱和氯化钠溶液洗涤。在用硫酸镁干燥之后，在旋转蒸发器中减压蒸出溶剂。用快速色谱(二氧化硅，35～70μm)提纯反应粗产物，洗脱液：乙酸乙酯/环己烷80∶20；75∶25；70∶30。分离出30.81g 4-苄氧基-2-甲基苯胺。
核磁共振谱1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：2.04(s：3H)；4.40(s宽：2H)；4.95(s：2H)；6.55(d，J＝8.5Hz：1H)；6.61(dd，J＝8.5et 2.5Hz：1H)；6.68(d，J＝2.5Hz：1H)；7.25至7.55(mt：5H).
步骤II：制备1-(5-苄氧基-吲唑-1-基)-乙酮
在7.14g4-苄氧基-2-甲基-苯胺在26mL甲苯中的溶液里通入10.5mL醋酸酐。将介质加热到大约90℃，在溶液中滴加9.28mL亚硝酸叔丁酯。在大约90℃下加热反应介质2h。在旋转蒸发器中将反应粗产物浓缩至干。在乙酸乙酯中对固体进行再处理然后过滤，用异丙基醚淋洗，回收3.41g 1-(5-苄氧基-吲唑-1-基)-乙酮
NMR谱：1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：2.72(s：3H)；5.21(s宽：2H)；7,34(dd，J＝9和2.5Hz：1H)；7.35至7.50(mt：3H)；7.47(d，J＝2.5Hz：1H)；7.51(dd宽，J＝7.5和1.5Hz：2H)；8.23(d，J＝9Hz：1H)；8.39(d，J＝1Hz：1H).
步骤III：程序A-制备5-苄氧基-3-碘-1H-吲唑
在28.24g 1-(5-苄氧基-吲唑-1-基)-乙酮在620mL二甲基甲酰胺中的溶液里加入68.84g碘，然后加入23g氢氧化钾。在环境温度下搅拌反应介质大约3h。再加入23g氢氧化钾，再在环境温度下搅拌48h。用600mL硫代硫酸钠溶液(100g硫代硫酸钠在250mL蒸馏水中)、600mL蒸馏水和1L乙酸乙酯处理介质。将介质搅拌几分钟然后倾析。用4×600mL乙酸乙酯萃取水相。用1L饱和氯化钠溶液洗涤合并的有机相，然后用硫酸镁干燥。在旋转蒸发器中减压蒸出溶剂。在二氯甲烷中重新处理反应粗产物，过滤出固体，用二氯甲烷和乙醚漂洗。回收20.8g5-苄氧基-3-碘-1H-吲唑
NMR谱：1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：5.19(s宽：2H)；6.90(d，J＝2Hz：1H)；7.18(dd，J＝9和2Hz：1H)；7.35(t宽，J＝7.5Hz：1H)；7.43(t宽，J＝7.5Hz：2H)；7.50(d，J＝9Hz：1H)；7.52(d宽，J＝7.5Hz：2H)；13.00至13.70(mf非常展开：1H).
LC/MS：[M+H]+＝351.10；保留时间：3.97分钟.
步骤IV：程序B-制备5-苄氧基-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯
在19.54g5-苄氧基-3-碘-1H-吲唑、36.50g二碳酸二叔丁酯、23.30mL三乙胺在550mL二氯甲烷中的溶液里加入1.70g4-二甲基氨基吡啶。观察到很强的气体释放。在环境温度下搅拌溶液过夜。用2×500mL蒸馏水洗涤有机相，用硫酸镁干燥，过滤并在旋转蒸发器中减压浓缩。在乙腈中重新处理粗的固体。过滤固体，用乙腈和乙醚漂洗固体。回收19.43g5-苄氧基-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯。用快速色谱提纯过滤液(二氧化硅，70～200μm)，洗脱液：乙酸乙酯/环己烷3/97，回收3.05g5-苄氧基-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
LC/MS：[M+H]+＝451.08；保留时间：4.91min。
中间体B按照方案2由中间体A分两步制备5-苄氧基-3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑：
方案2
程序C
步骤1a：按照在E.Vasquez的文章J.Org.Chem.，
67，7551-7552(2002)中叙述的程序制备2-[4-(1-叔丁氧基羰基-2，3-二氢-1H-吲哚-2-基)-1，3，2，4-二氧杂二硼-2-基(diboretan-2-yl)]-吲哚-1-羧酸叔丁酯
在13gN-Boc吲哚在50mL无水THF的溶液中滴加21mL硼酸三异丙酯。将反应介质冷却到大约5℃。滴加50mL的LDA1.5M在THF中的溶液，并保持温度在大约5℃。在此温度下搅拌溶液90min，然后用40mL的2N盐酸水溶液处理介质。过滤悬浮液，用2×40mL的THF洗涤固体。倾析过滤液。用80mL乙酸乙酯萃取水相，然后用硫酸镁干燥合并的有机相并过滤。在旋转蒸发器中减压蒸出溶剂。得到19g橙色油状物的2-[4-(1-叔丁氧基羰基-2，3-二氢-1H-吲哚-2-基)-1，3，2，4-二氧杂二硼-2-基]-吲哚-1-羧酸叔丁酯。
LC/MS：[M+H]+＝487.19；保留时间：3.30min。
步骤Ib：将3.23g 5-苄氧基-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯、7.31g2-[4-(1-叔丁氧基羰基-2，3-二氢-1H-吲哚-2-基)-1，3，2，4-二氧杂二硼-2-基]-吲哚-1-羧酸叔丁酯、2.07g四(三苯基膦)钯和11mL饱和碳酸氢钠水溶液的悬浮液回流加热大约2h，然后在环境温度下过夜。用滤纸过滤反应介质，然后用150mL乙酸乙酯稀释过滤液。用200mL蒸馏水洗涤有机相。用2×150mL乙酸乙酯萃取水相。合并有机相并用饱和氯化钠水溶液洗涤，用硫酸镁干燥并过滤。在旋转蒸发器中在真空下蒸发溶剂。在70～200μm的二氧化硅上用快速色谱提纯反应粗产物，洗脱液：环己烷/乙酸乙酯95∶5～70∶30梯度洗脱，得到1.97g5-苄氧基-3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑。
NMR谱：1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：5.28(s宽：2H)；7.03(t分裂，J＝7.5和1.5Hz：1H)；7.12(t分裂，J＝7.5和1,5Hz：1H)；7.12(s宽：1H)；7.19(dd，J＝9和2.5Hz：1H)；7.36(t宽，J＝7.5Hz：1H)；7.44(t宽，J＝7.5Hz：2H)；7.47(d宽，J＝7.5Hz：1H)；7.54(d，J＝9Hz：1H)；7.58(d宽，J＝7.5Hz：2H)；7.62(d宽，J＝7.5Hz：1H)；7.65(d，J＝2.5Hz：1H)；11.50(mf：1H)；12.90至13.40(mf非常展开：1H).
LC/MS：[M+H]+＝340.24；保留时间：4.23分钟。
步骤II：程序D制备3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-醇
将2.54g 3-(1H-吲哚-2-基)-5-苯氧基-1H-吲唑、2.83g甲酸铵和2.54g10％的碳载钯在150mL乙醇中的溶液回流加热1h。用滤纸过滤出催化剂并用乙醇漂洗。将过滤液浓缩至干。得到1.74g3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-醇
NMR谱：1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：6.90(d，J＝1,5Hz：1H)；6.95至7.05(mt：1H)；7.01(dd，J＝9和2.5Hz：1H)；7.10(t分裂，J＝7.5和1.5Hz：1H)；7.39(d，J＝2.5Hz：1H)；7.40至7.50(mt：2H)；7.60(d宽，J＝7.5Hz：1H)；9.26(s宽：1H)；11.48(s宽：1H)；13.05(s宽：1H).
分析LC/MS：：[M+H]+＝250.22；保留时间：3.16分钟。
按照程序C的步骤Ib，由300mg5-苄氧基-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯、197mg硼酸E-苯基乙烯酯、192mg四(三苯基膦)钯在12mL二甲基甲酰胺中的悬浮液和0.61mL饱和碳酸氢钠溶液制备5-苄氧基-3((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑。如上所述处理反应粗产物，回收150mg5-苄氧基-3((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑。
NMR谱：1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：5.24(s宽：2H)；7.14(dd，J＝9和2Hz：1H)；7.30(t宽，J＝7.5Hz：1H)；7.30至7.50(mt：5H)；7.38(d，J＝16.5Hz：1H)；7.49(d，J＝9Hz：1H)；7.56(d，J＝16.5Hz：1H)；7.56(d宽，J＝7.5Hz：2H)；7.68(d，J＝2Hz：1H)；7.73(d宽，J＝7.5Hz：2H)；12.50至13.50(mf非常展开：1H).
IR(KBr)：3178；3153；2924；1587；1497；1228；1075；957；947；812；787；758和691cm-1
分析LC/MS ：：[M+H]+＝327.24；保留时间：4.74分钟。
制备3-苯乙烯基-1H-吲唑-5-醇：在氩气下搅拌652mg5-苄氧基-3((E)-苯乙烯基)-1-吲唑在60mL乙腈中的溶液。在惰性气体的气氛中滴加1.13mL碘三甲基硅烷。在大约50℃下搅拌悬浮液3h，然后在环境温度下搅拌过夜。将介质加热到大约50℃，然后加入1.2mL碘三甲基硅烷。在搅拌3小时后，加入0.8ml碘三甲基硅烷。在搅拌大约4h以后，用10mL甲醇处理介质，并在环境温度下搅拌15min。用滤纸过滤悬浮液，在旋转蒸发器中在真空下浓缩过滤液。在50mL乙酸乙酯中重新处理反应粗产物，用2×50mL硫代硫酸钠溶液、2×50mL饱和碳酸氢钠溶液、50mL饱和氯化钠溶液洗涤有机相。用硫酸镁干燥有机相，然后在旋转蒸发器中真空浓缩。在二氧化硅(Varian20g柱子)上用快速色谱提纯反应粗产物，洗脱液：乙酸乙酯/环己烷5∶95～35∶65梯度洗脱，得到265.4mg3-苯乙烯基-1H-吲唑-5-醇。
NMR谱：1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：7.08(dd，J＝9和2Hz：1H)；7.30～7.50(mt：4H)；7.31(t宽，J＝7.5Hz：1H)；7.38(d，J＝17Hz：1H)；7.49(d，J＝17Hz：1H)；7.69(d宽，J＝7.5Hz：2H)；9.20(s：1H)；12.41(mf：1H).
IR(KBr)：3397；3261；3058；2923；1629；1490；1222；1071；952；846；804；787；760；742；691；564cm-1
分析LC/MS：[M+H]+＝237.27；保留时间：3.16分钟。
程序E：按照DS Tawfik在Synthesis，968-972(1993)；S Gobec，Tetrahedron lett.，43，167-170(2002)中的叙述制备p-硝基苯酚酯。
按照如下方法制备甲基苯基次膦酸4-硝基苯酯：在氩气下，在环境温度下搅拌173mgNaH的50％(油中)在2mL无水四氢呋喃中的悬浮液。在环境温度下滴加500mg4-硝基苯酚在2mL无水四氢呋喃中的溶液。在环境温度下搅拌大约1h之后，在10min内滴加630mg甲基苯基次膦酰氯在2mL无水四氢呋喃中的溶液。在搅拌大约2h以后，用20mL蒸馏水稀释反应介质，用2×20mL二氯甲烷萃取水相。用硫酸镁干燥合并的有机相，过滤并在旋转蒸发器中减压浓缩。得到995mg纯度50％的甲基苯基次膦酸4-硝基苯酯。
分析LC/MS：[M+H]+＝278.1；保留时间：3.16min。
实施例1：制备甲基苯基次膦酸3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基酯
在环境温度下搅拌20mg3-苯乙烯基-1H-吲唑-5-醇、5.76mg咪唑、20.7mg甲基苯基次膦酰氯在5mL二氯甲烷中的溶液。在搅拌大约1h之后加入5.76mg咪唑和20.7mg甲基苯基次膦酰氯。在环境温度下搅拌此悬浮液大约18h。加入10g咪唑和70mg甲基苯基次膦酰氯。在环境温度下30h以后，用10mL蒸馏水处理反应介质。用2×10mL二氯甲烷萃取水相。用硫酸镁干燥有机相并在旋转蒸发器中减压浓缩。用制备LC/MS提纯反应粗产物，回收9.1mg甲基苯基次膦酸(phosphonic)3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基酯。
NMR谱：1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：1,93(d，J＝14.5Hz：3H)；7.23(ddd，J＝9-2和1Hz：1H)；7.31(d，J＝17Hz：1H)；7.32(t宽，J＝7.5Hz：1H)；7.43(t宽，J＝7.5Hz：2H)；7.50(d，J＝17Hz：1H)；7.50(d，J＝9Hz：1H)；7.50～7.65(mt：3H)；7.70(d宽，J＝7.5Hz：2H)；7.82(mt：1H)；7.95(ddd，J＝12-7.5和1.5Hz：2H)；13.21(mf：1H).
IR(KBr)：3427；3056；2921；1487；143；1211；1183；1124；1070；959；911；806；783；761；745；693cm-1
分析LC/MS：：[M+H]+＝375.22；保留时间：3.45分钟。
实施例2：制备二苯基次膦酸3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基酯
在环境温度下搅拌70mg3-苯乙烯基-1H-吲唑-5-醇、300mg咪唑、273μL二苯基次膦酰氯在15mL二氯甲烷中的溶液。在搅拌大约90min之后，用30mL蒸馏水处理介质。用2×30mL二氯甲烷萃取水相，然后用硫酸镁干燥有机相，过滤并在旋转蒸发器中减压浓缩。用乙酸乙酯重新处理粗产物。在烧结玻璃上过滤出固体，用乙酸乙酯漂洗。在旋转蒸发器中减压浓缩过滤液，在35～70μm的二氧化硅上用快速色谱进行提纯。洗脱液：环己烷/乙酸乙酯，80∶20～70∶30梯度洗脱，回收143mg黄色固体。用制备LC/MS提纯此化合物，回收47.3mg二苯基次膦酸3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基酯。
NMR谱：1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：7.31(d，J＝17Hz：1H)；7.32(t宽，J＝7.5Hz：1H)；7.23(dd宽，J＝9和2Hz：1H)；7.44(t宽，J＝7.5Hz：2H)；7.50(d，J＝17Hz：1H)；7.50(d，J＝9Hz：1H)；7.50～7.70(mt：6H)；7.70(d宽，J＝7.5Hz：2H)；7.97(mt：1H)；8.00(ddd，J＝12-8和2Hz：4H)；13.24(mf展开：1H).
IR(KBR)：3433；3174；3057；1484；1439；1226；1130；1072；962；755；734；692和565cm-1
分析LC/MS：[M+H]+＝437.16；保留时间：3.89分钟。
实施例3：制备甲基苯基次膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯
程序F：
在环境温度下搅拌497mg纯度50％的甲基苯基次膦酸4-硝基苯酯在8mL中的溶液。滴加403mg3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-醇和268μL1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯在12mL二氯甲烷中的悬浮液。在环境温度下搅拌反应介质过夜，然后在旋转蒸发器中减压蒸发至干。在50g15～35μm的二氧化硅柱子上用快速色谱提纯反应粗产物。回收300mg甲基苯基次膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯，用乙酸乙酯重结晶。分离出220mg甲基苯基次膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯。
NMR谱：1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：1.95(d，J＝14.5Hz：3H)；6.87(s宽：1H)；7.04(t分裂，J＝7.5和1Hz：1H)；7.13(t分裂，J＝7.5和1Hz：1H)；7.26(dd宽，J＝8.5和2Hz：1H)；7.46(d宽，J＝8.5Hz：1H)；7.50～7.70(mt：5H)；7.81(mt：1H)；7.97(ddd，J＝12-8和2Hz：2H)；11.57(mf：1H)；13.00～13.70(mf展开：1H).
实施例4：制备二苯基次膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯
按照程序D，由800mg5-苄氧基-3-(1-叔丁氧基羰基-1H-吲哚-2-基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯、560mg甲酸铵、800mg10％的碳载钯在30mL无水乙醇中制备3-(1-叔丁氧基羰基-2，3-二氢-1H-吲哚-2-基)-5-羟基-吲唑-1-羧酸叔丁酯。回收700mg3-(1-叔丁氧基羰基-2，3-二氢-1H-吲哚-2-基)-5-羟基-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
NMR谱：1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：1.20(mf：9H)；1.63(s：9H)；3.09(dd宽，J＝16.5和5Hz：1H)；3.79(dd，J＝16.5和11Hz：1H)；5.79(dd，J＝11和5Hz：1H)；6.62(d，J＝2Hz：1H)；6.95～7.10(mt：2H)；7.20～7.35(mt：2H)；7.81(mf：1H)；7.91(d，J＝9Hz：1H)；9.57(mf：1H).
制备3-(1-叔丁氧基羰基-2，3-二氢-1H-吲哚-2-基)-5-(二苯基次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
在140mg3-(1-叔丁氧基羰基-2，3-二氢-1H-吲哚-2-基)-5-羟基-吲唑-1-羧酸叔丁酯在15mL二氯甲烷中的溶液里加入90mg咪唑和250μL二苯基次膦酰氯。在环境温度下搅拌反应介质过夜。在用10mL二氯甲烷和10mL蒸馏水稀释之后，倾析介质。用硫酸镁干燥有机相，过滤并在旋转蒸发器中减压浓缩。在二氯甲烷-甲醇混合物中重新处理粗产物，过滤出固体。在减压浓缩之后，用快速色谱提纯过滤液，洗脱液：环己烷/乙酸乙酯8∶2，得到200mg3-(1-叔丁氧基羰基-2，3-二氢-1H-吲哚-2-基)-5-(二苯基次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
分析LC/MS：[M+H]+＝652.14；保留时间：4.74min。
制备二苯基次膦酸3-(2，3-二氢-1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯
在环境温度下搅拌200mg3-(1-叔丁氧基羰基-2，3-二氢-1H-吲哚-2-基)-5-(二苯基次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯在4mL二烷中的溶液和1mL盐酸在二烷中的4M溶液。在1h以后加入1mL盐酸在二烷中的4M溶液。在环境温度下搅拌反应介质过夜。在烧结玻璃上过滤悬浮液。用乙醚漂洗固体。在200mL二氯甲烷和8mL2N氢氧化钠水溶液中重新处理固体。将此溶液搅拌几分钟，然后倾析。用硫酸镁干燥有机相，过滤并减压浓缩，得到114mg二苯基次膦酸3-(2，3-二氢-1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯
分析LC/MS：[M+H]+＝452.20；保留时间：3.35min。
制备二苯基次膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯
在100℃下，在二甲基亚砜中搅拌170mg二苯基次膦酸3(2，3-二氢-1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯10h。在30℃下减压蒸出溶剂。在二氧化硅(8g的interchim柱子)上快速色谱提纯反应粗产物，洗脱液：环己烷/乙酸乙酯4∶6，2∶8，乙酸乙酯/甲醇9/1。得到23mg二苯基次膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯。
NMR谱：1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：6.90(s宽：1H)；7.04(t宽，J＝7.5Hz：1H)；7.13(t宽，J＝7.5Hz：1H)；7.45(mt：2H)；7.50～7.70(mt：8H)；7.99(mt：1H)；8.02(dd宽，J＝12和7.5Hz：4H)；11.57(mf：1H)；13.00～13.70(mf展开：1H).
分析LC/MS：[M+H]+＝450.19；保留时间：4.06分钟。
中间体C按照方案3，可分5步制备3-[1-叔丁氧基羰基-5-(2-吗啉-4-基乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-5-羟基吲唑-1-羧酸叔丁酯。
方案3
步骤I：程序G
制备5-苄氧基-3-(1-叔丁氧基羰基-5-叔丁基甲硅氧基-1H-吲哚-2-基)吲唑-1-羧酸叔丁酯
在10g5-苄氧基-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯在156mL二烷中的溶液里加入13g1-(叔丁基二甲基甲硅氧基)-5-吲哚-2-硼酸、28.9g碳酸铈、906.4mg与二氯甲烷络合的[1，1’-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)和51mL水。搅拌反应介质并在88℃下加热45min，然后冷却到环境温度。然后倾析反应混合物，在旋转蒸发器中减压蒸出有机相。用250mL二氯甲烷溶解反应粗产物，然后用每次50mL水洗涤得到的溶液3次。使洗涤水的pH值从11到7。
在用硫酸镁干燥有机相之后，在旋转蒸发器中减压蒸出溶剂。用快速色谱(40～63μm二氧化硅)提纯反应粗产物，洗脱液：环己烷/二氯甲烷40∶60，分离出13.4g5-苄氧基-3-(1-叔丁氧基羰基-5-叔丁基甲硅氧基-1H-吲哚-2-基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
NMR谱：1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：0.26(s：6H)；1.02(s：9H)；1.17(s：9H)；1.67(s：9H)；5.16(s宽：2H)；7.00(dd，J＝9和2.5Hz：1H)；7.06(s：1H)；7.17(d，J＝2.5Hz：1H)；7.30～7.50(mt：3H)；7.32(d，J＝2.5Hz：1H)；7.38(dd，J＝9和2.5Hz：1H)；7.47(d宽，J＝7.5Hz：2H)；8.08(d，J＝9Hz：2H).
步骤II：程序G1-制备5-苄氧基-3-(1-叔丁氧基羰基-5-羟基-1H-吲哚-2-基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯
在13.4g5-苄氧基-3-(1-叔丁氧基羰基-5-叔丁基甲硅氧基-1H-吲哚-2-基)吲唑-1-羧酸叔丁酯在140mL四氢呋喃的溶液中加入6.15g四丁基氟化铵。在环境温度下搅拌介质30min。用每次25mL水洗涤反应粗产物3次，然后用硫酸镁干燥有机相，过滤并在旋转蒸发器中减压蒸出溶剂。得到14.4g粗产物，用快速色谱(40～63μm)将其提纯，洗脱液：二氯甲烷/甲醇98∶2。
分离出8.54g5-苄氧基-3-(1-叔丁氧基羰基-5-羟基-1H-吲哚-2-基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯
LC/MS：[M+H]+＝556.35；保留时间：4.76min。
步骤III：程序G2-制备5-苄氧基-3-[5-(2-溴-乙氧基)-1-叔丁氧羰基-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯
在80℃下加热2.22g5-苄氧基-3-(1-叔丁氧基羰基-5-羟基-1H-吲哚-2-基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯、3.90g碳酸铈在22mL1，2-二溴乙烷中的悬浮液40h，然后将其冷却到环境温度，并在旋转蒸发器中减压蒸出。用快速色谱(40～63μm二氧化硅)提纯反应粗产物，洗脱液：二氯甲烷，分离出2g5-苄氧基-3-[5-(2-溴-乙氧基)-1-叔丁氧羰基-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
NMR谱：1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：1.17(s：9H)；1.67(s：9H)；3.85(t宽，J＝5.5Hz：2H)；4.41(t宽，J＝5.5Hz：2H)；5.16(s：2H)；7.07(s：1H)；7.11(dd，J＝9和2.5Hz：1H)；7.29和7.30(2d，J＝2.5Hz：2H全部)；7.30～7.50(mt：6H)；8.08和8.11(2d，J＝9Hz：2H全部).
LC/MS：[M+H]+＝664.22；保留时间：5.67分钟。
步骤IV：制备5-苄氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯
在80℃下加热2.0g5-苄氧基-3-[5-(2-溴-乙氧基)-1-叔丁氧羰基-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯和498mg碘化钾在90mL乙腈中的悬浮液7h。然后加入394μL吗啉、150mg碘化钾和1.24g碳酸钾，并在80℃下加热15h。将反应混合物冷却到环境温度，然后过滤。在旋转蒸发器中减压蒸发过滤液，得到1.90g5-苄氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
LC/MS：[M+H]+＝669.43；保留时间：3.99min。
步骤V：制备3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-5-羟基-吲唑-1-羧酸叔丁酯
在70℃下加热740mg5-苄氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯、328mg甲酸铵和234mg10％的碳载钯在56mL乙醇中的溶液35min。然后将反应混合物冷却到环境温度。用滤纸过滤出催化剂并用大量乙醇洗涤。得到533mg粗化合物：3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-5-羟基-吲唑-1-羧酸叔丁酯
LC/MS：[M+H]+＝579.32；保留时间：3.92min
制备3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-5-(甲基苯基次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯
在27mg3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-5-羟基-吲唑-1-羧酸叔丁酯在2mL二氯甲烷中的溶液里加入16mg咪唑和40.5mg甲基苯基次膦酰氯。在环境温度下搅拌得到的溶液。在搅拌15小时之后，再次加入16mg咪唑和40.5mg甲基苯基次膦酰氯，并在环境温度下再搅拌3.5h以使反应完成。然后过滤反应混合物并在旋转蒸发器中减压蒸发。用LC/MS提纯得到的残渣。分离出10.5mg3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-5-(甲基苯基次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
LC/MS：[M+H]+＝717.41；保留时间：3.61min
实施例5：制备甲基苯基次膦酸3-[5-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基酯
在环境温度下搅拌10.5mg3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-5-(甲基苯基次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯在500μL二氯甲烷和500μL三氟乙酸中的溶液4h。在氮气流下蒸发反应混合物，然后将其重新溶解于1.4mL的DMSO中。在60℃下搅拌得到的溶液3天，然后用LC/MS提纯。分离出5.1mg甲基苯基次膦酸3-[5-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基酯。
LC/MS：[M+H]+＝517.35；保留时间：2.64min
实施例6：制备苯基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯
步骤I：按照程序E，由0.345g在3mL无水四氢呋喃中的氢化钠和1g 4-硝基苯酚在5mL四氢呋喃中的溶液和0.701g苯基次膦酰二氯制备苯基膦酸二(4-硝基苯基)酯。得到1.46g苯基膦酸二(4-硝基苯基)酯。
步骤II：按照程序F，从230mg苯基膦酸二(4-硝基苯基)酯在4mL二氯甲烷中的溶液，通过在其中加入120mg 3(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-醇和72μL的1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯在4mL二氯甲烷中的溶液来制备苯基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯。在环境温度下搅拌2h之后，用4×50mL的饱和碳酸氢钠溶液处理介质，然后用2×50mL饱和氯化钠溶液处理。用硫酸镁干燥有机相，然后浓缩至干。得到粗的苯基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯。
步骤III：按照程序F，从200mg在4mL二氯甲烷中的粗苯基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯、95μL甲醇、72μL1，8-二氮杂双环[5.4.0]-十一碳-7-烯和4mL二氯甲烷制备苯基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯。在旋转蒸发器中减压浓缩之后，用8g颗粒度15～35μm的二氧化硅interchim快速柱子提纯粗产物。用在环己烷中的15～50％乙酸乙酯对产物进行梯度洗脱。得到70mg不纯的产物，用制备LC/MS再次提纯。将得到的产物溶解并在Jouan RC1010蒸发器中浓缩至干。得到34mg黄色固体状苯基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯。
NMR谱：1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：3.86(d，J＝11Hz：3H)；6.93(s宽：1H)；7.04(t宽，J＝7.5Hz：1H)；7.13(t宽，J＝7.5Hz：1H)；7.31(d宽，J＝9Hz：1H)；7.46(d宽，J＝7.5Hz：1H)；7.55～7.65(mt：4H)；7.73(t很宽，J＝7.5Hz：1H)；7.86(s宽：1H)；7.93(dd宽，J＝13.5和7.5Hz：2H)；11.59(mf：1H)；13.41(mf：1H).
分析LC/MS：[M+H]+＝404.19；保留时间：3.62分钟。
实施例7
按照程序F，从在5mL二氯甲烷中的100mg粗苯基膦酸二(4-硝基苯基)酯、150L异丙醇、30μL1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯可制备苯基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯异丙酯。在将反应介质浓缩之后，用制备LC/MS提纯粗产物。回收21.5mg化合物。
NMR谱：1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：1.29(d，J＝6Hz：3H)；1.33(d，J＝6Hz：3H)；4.84(mt：1H)；6.90(d，J＝1.5Hz：1H)；7.04(t宽，J＝7.5Hz：1H)；7.14(t宽，J＝7.5Hz：1H)；7.30(dd宽，J＝8.5et 1.5Hz：1H)；7.46(d，J＝8.5Hz：1H)；7.50～7.65(mt：4H)；7.70(mt：1H)；7.86(s宽：1H)；7.91(mt：2H)；11.58(s宽：1H)；13.39(s宽：1H).
实施例8
按照程序F，从被戊烯稳定的150mg苯基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯4-硝基苯基酯(按照程序F制备)在2mL二氯甲烷中的溶液、310μL苄醇和44μL1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯可制备苯基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯苄酯。用制备LC/MS提纯反应粗产物，回收16.9mg苯基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯苄酯。
NMR谱：1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：5.28(d，J＝8Hz：2H)；6.87(d，J＝1.5Hz：1H)；7.04(t宽，J＝7.5Hz：1H)；7.14(t宽，J＝7.5Hz：1H)；7.20～7.75(mt：12H)；7.86(s宽：1H)；7.94(mt：2H)；11.58(s宽：1H)；13.40(s宽：1H).
实施例9：制备甲基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯
步骤I：按照程序E，从1g 4-硝基苯酚、12mL THF、345mg在油中的50％氢化钠和478mg甲基膦酰氯制备甲基膦酸二(4-硝基苯基)酯。得到1.07g粗的甲基膦酸二(4-硝基苯基)酯。
步骤II：按照程序F，从150mg甲基膦酸二(4-硝基苯基)酯、4mL二氯甲烷、100mg3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-醇、67μL1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯和4mL二氯甲烷制备甲基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯。在搅拌3h之后，滴加100μL甲醇在2mL二氯甲烷中的溶液。将反应介质置于搅拌下大约16小时，然后减压浓缩至干。用5g颗粒度15～35μm的二氧化硅Interchim快速色谱柱将得到的油状物提纯。洗脱液：30％的乙酸乙酯在环己烷中的溶液，然后是80％的乙酸乙酯在甲醇中的溶液。在减压下蒸出溶剂，用乙酸乙酯将得到的产物进行结晶。得到36mg白色结晶状甲基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯。
NMR谱：1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：1.72(d，J＝17.5Hz：3H)；3.80(d，J＝11Hz：3H)；7.04(t宽，J＝7.5Hz：1H)；7.07(s宽：1H)；7.13(t宽，J＝7.5Hz：1H)；7.35(d宽，J＝9Hz：1H)；7.47(d宽，J＝7.5Hz：1H)；7.63(d宽，J＝7.5Hz：1H)；7.65(d，J＝9Hz：1H)；7.95(s宽：1H)；11.59(mf：1H).
实施例10：在4个步骤中制备3-碘-5-(甲氧基-苯基-次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯，即中间体D：
步骤I：制备1-(5-羟基-吲唑-1-基)-乙酮。在大约50℃下加热939mg1-(5-苄氧基-吲唑-1-基)-乙酮、1.33g甲酸铵和939mg10％的碳载钯在100mL无水乙醇中的悬浮液30min。当停止释放气体时，用滤纸过滤出催化剂并用无水乙醇漂洗。在旋转蒸发器中减压浓缩过滤液。回收571.1mg1-(5-羟基-吲唑-1-基)-乙酮。
NMR谱：1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：2.69(s：3H)；7.11(dd，J＝9和2Hz：1H)；7.14(d，J＝2Hz：1H)；8.15(d，J＝9Hz：1H)；8.31(d，J＝1Hz：1H)；9.40～9.90(mf展开：1H).
步骤II：按照程序F，从200mg苯基膦酸二(4-硝基苯基)酯、88mg1-(5-羟基-吲唑-1-基)-乙酮、74.7μL 1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯和8mL二氯甲烷制备苯基膦酸1-乙酰基-1H-吲唑-5-基酯4-硝基苯基酯。在用0.1M的碳酸氢钠溶液洗涤有机相以后，用硫酸镁干燥，过滤并在旋转蒸发器中减压浓缩过滤液，回收219mg粗苯基膦酸1-乙酰基-1H-吲唑-5-基酯4-硝基苯基酯并无须提纯用于下一步的步骤中。
步骤III：按照程序F从219mg苯基膦酸1-乙酰基-1H-吲唑-5-基酯4-硝基苯基酯、5mL二氯甲烷、74.8μL 1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯和202μL甲醇制备苯基膦酸1H-吲唑-5-基酯甲酯(实施例10)。在颗粒度35～70μm的二氧化硅上对粗产物进行快速色谱提纯。洗脱液：环己烷，然后是环己烷/乙酸乙酯80∶20。回收15mg无色油状物苯基膦酸1H-吲唑-5-基酯甲酯。
NMR谱：1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：3.82(d，J＝11Hz：3H)；7.19(dd宽，J＝9和2.5Hz：1H)；7.50～7.75(mt：4H)；7.53(d宽，J＝9Hz：1H)；7.86(dd宽，J＝13.5和8Hz：2H)；8.05(s宽：1H)；13.13(mf：1H).
IR(CCl4)：3232；3064；2953；1500；1440；1247；1133；1044；964；943；907；693和559cm-1
分析LC/MS：[M+H]+＝289.18；保留时间：2.84分钟
步骤IV：按照程序A从76mg苯基膦酸1H-吲唑-5-基酯甲酯、134mg碘、30.6mg预先在3mL二甲基甲酰胺中研制的氢氧化钾制备苯基膦酸3-碘-1H-吲唑-5-基酯甲酯。在颗粒度15～35μm的二氧化硅上对粗产物进行快速色谱提纯。洗脱液：乙酸乙酯/环己烷1∶1。回收77.6mg苯基膦酸3-碘-1H-吲唑-5-基酯甲酯。
NMR谱：1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：3.83(d，J＝11Hz：3H)；7.19(t，J＝2Hz：1H)；7.27(ddd，J＝9-2和1Hz：1H)；7.50～7.65(mt：2H)；7.56(d，J＝9Hz：1H)；7.72(tq，J＝7.5和2Hz：1H)；7.88(ddd，J＝13.5-7.5和1.5Hz：2H)；13.20～13.90(mf展开：1H).
IR(CH2Cl2)：3444；3184；2853；1494；1440；1165；1133；1045；958；906；817和559cm-1
分析LC/MS：[M+H]+＝415.04；保留时间：3.24分钟
步骤V：按照程序B从77.6mg苯基膦酸3-碘-1H-吲唑-5-基酯甲酯、122.7mg二碳酸二叔丁酯、78.1μL三乙胺、5.7mg4-二甲基氨基吡啶在2.4mL二氯甲烷中的溶液制备3-碘-5-(甲氧基-苯基-次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯，即中间体D。在颗粒度15～35μm的二氧化硅上对反应粗产物进行快速色谱提纯。洗脱液：环己烷/乙酸乙酯80∶20，然后是50∶50。回收66.3mg3-碘-5-(甲氧基-苯基-次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
分析LC/MS：[M+H]+＝515.02；保留时间：4.13min
按照程序G从66.34mg3-碘-5-(甲氧基-苯基-次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯、54.44mg硼酸2-吡咯-1-(叔丁氧羰基)、5.28mg1，1’-二(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)、168mg碳酸铈、328μL水和1mL二烷制备3-(1-叔丁氧羰基-1H-吡咯-2-基)-5-(甲氧基-苯基-次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯。在颗粒度15～35μm的二氧化硅上对粗产物进行快速色谱提纯。洗脱液：乙酸乙酯/环己烷20∶80，然后是30∶70。回收35.3mg3-(1-叔丁氧羰基-1H-吡咯-2-基)-5-(甲氧基-苯基-次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
分析LC/MS：[M+H]+＝554.18；保留时间：4.42min。
实施例11：制备苯基膦酸3-(1H-吡咯-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯
将39mg3-(1-叔丁氧羰基-1H-吡咯-2-基)-5-(甲氧基-苯基-次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯溶解于0.5mL二氯甲烷中，然后加入0.5mL三氟乙酸。在环境温度下搅拌溶液大约2h。在旋转蒸发器中减压蒸出溶剂。用制备LC/MS提纯反应粗产物。得到19mg呈三氟乙酸盐形式的苯基膦酸甲酯3-(1H-吡咯-2-基)-1H-吲唑-5-基酯
NMR谱：1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：3.84(d，J＝11.5Hz：3H)；6.20(q，J＝3Hz：1H)；6.52(mt：1H)；6.83(mt：1H)；7.24(ddd，J＝9-2.5和1.5Hz：1H)；7.51(d，J＝9Hz：1H)；7.50～7.65(mt：2H)；
7.65～7.75(mt：2H)；7.89(ddd，J＝13.5-8和1.5Hz：2H)；11.33(s宽：1H)；13.02(s宽：1H).
分析LC/MS：[M+H]+＝354.19；保留时间：3.23分钟
按照方案4，经一步制备三氟甲磺酸3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基酯：
方案4
在氩气气氛下，在200mg预先冷却到0℃、用戊烯稳定的3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-醇在20mL二氯甲烷中的溶液里滴加171μL三氟甲磺酸酐，然后滴加512μL吡啶。搅拌反应介质并在0℃下保持4h，然后在环境温度下于搅拌下放置48h。然后用2×20mL水洗涤反应混合物。用3×30mL二氯甲烷萃取水相。用硫酸镁干燥有机相，然后过滤并伴随着加入10mL甲苯，在旋转蒸发器中减压蒸出溶剂，得到343.8mg粗产物。
LC/MS：[M+H]+＝369.13；保留时间：4.98min。
实施例12：制备[3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸二甲酯
程序H，按照方案5：
方案5
在氩气气氛下将40.7μL(1.09eq；0.444mmol)亚磷酸二甲酯、61.9μL(1.09eq；0.444mmol)三乙胺和18.8mg(0.04eq；0.016mmol)的四(三苯基膦)钯(0)搅拌15min。加入150mg(1eq；0.407mmol)三氟甲磺酸3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基酯在5mL二甲基甲酰胺中的溶液。在85℃下加热介质过夜。在介质中加入41μL亚磷酸二甲酯、62μL三乙胺和20mg四(三苯基膦)钯(0)，再加热2h。然后在介质中加入100μL亚磷酸二甲酯、100μL三乙胺和30mg四(三苯基膦)钯(0)，并在105℃下加热过夜。在用滤纸过滤出催化剂以后，在旋转蒸发器中减压蒸出溶剂。用LC/MS提纯反应粗产物。分离出8.6mg[3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸二甲酯和27.2mg[3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸单甲酯。
描述[3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸二甲酯
LC/MS：[M+H]+＝329.20；保留时间：3.20min。
NMR谱：1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：3.71(d，J＝11.5Hz：6H)；7.32(t宽，J＝7.5Hz：1H)；7.43(t宽，J＝7.5Hz：2H)；7.45～7.70(mt：4H)；7.78(d宽，J＝7.5Hz：2H)；8.57(d，J＝14Hz：1H)；13.52(s宽：1H).
描述[3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸单甲酯
LC/MS：[M+H]+＝315.18；保留时间：2.66min。
实施例13：制备[3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸单甲酯
将18.5mg[3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸二甲酯溶解于500μL 1M苛性钠在甲醇中的1M溶液里。在环境温度下搅拌介质4h。向在环境温度下搅拌了15min的混合物中加入100μL2N的盐酸。用3mL乙酸乙酯萃取有机相。在离心蒸发器中真空蒸出溶剂。得到18mg产物。
NMR谱：1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：3.20(d，J＝10.5Hz：3H)；7.31(t宽，J＝7.5Hz：1H)；7.35～7.50(mt：3H)；7.45(d，J＝17Hz：1H)；7.58(d，J＝17Hz：1H)；7.62(d，J＝9Hz：1H)；7.72(d宽，J＝7.5Hz：2H)；8.33(d，J＝13Hz：1H)；13.10(mf：1H).
LC/MS：[M+H]+＝315.18；保留时间：2.73分钟。
实施例14：制备[3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸二乙酯
按照程序H，加入70mg(1eq；0.190mmol)溶解于3mL二甲基甲酰胺的三氟甲磺酸3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基酯、26.7μL(1.09eq；0.207mmol)亚磷酸二乙酯、8.9mg(0.04eq；0.0076mmol)四(三苯基膦)钯(0)和28.8μL(1.09eq；0.207mmol)三乙胺。逐次加入27μL亚磷酸二乙酯、29μL三乙胺、10mg四(三苯基膦)钯(0)，然后是50μL亚磷酸二乙酯、50μL三乙胺、20mg四(三苯基膦)钯(0)，最后加入27μL亚磷酸二乙酯、29μL三乙胺和9mg四(三苯基膦)钯(0)。分离出22mg[3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸二乙酯和8.7mg[3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸单乙酯。
描述[3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸二乙酯
LC/MS：[M+H]+＝357.19；保留时间：3.63分钟。
NMR谱：1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：1.28(t，J＝7Hz：6H)；4.07(mt：4H)；7.33(t宽，J＝7.5Hz：1H)；7.43(t宽，J＝7.5Hz：2H)；7.45～7.75(mt：2H)；7.53(d，J＝16.5Hz：1H)；7.72(d，J＝16.5Hz：1H)；7.78(d宽，J＝7.5Hz：2H)；8.56(d，J＝14Hz：1H)；13.50(mf：1H).
描述[3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸单乙酯
LC/MS：[M+H]+＝329.17；保留时间：3.00min。
按照方案6分4步制备反应中间体E，即5-(二甲氧基-磷酰基)-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
方案6
步骤I：程序I-制备三氟甲磺酸1-乙酰基-1H-吲唑-5-基酯
在氩气气氛下，在预先冷却到0℃，被戊烯稳定的98mg(1eq；0.556mmol)1-(5-羟基-吲唑-1-基)乙酮在10mL二氯甲烷中的溶液里滴加112μL(1.2eq；0.667mmol)三氟甲磺酸酐和337μL(17.5eq；49.557mmol)吡啶。在氩气气氛下搅拌介质并在0℃下保持过夜。在介质中加入112μL三氟甲磺酸酐和337μL吡啶，然后在0℃下搅拌2h。然后再加入112μL三氟甲磺酸酐和337μL吡啶，接着再在0℃下搅拌介质3h。用10mL水洗涤反应混合物。用2×10mL二氯甲烷处理水相。用硫酸镁干燥有机相，然后过滤并在旋转蒸发器中减压蒸出溶剂。得到168.9mg三氟甲磺酸1-乙酰基-1H-吲唑-5-基酯。
NMR谱：1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：2.76(s：3H)；7.77(dd，J＝9和2.5Hz：1H)；8.17(d，J＝2.5Hz：1H)；8.47(d，J＝9Hz：1H)；8.60(s：1H).
步骤II：制备(1-乙酰基-1H-吲唑-5-基)-膦酸二甲酯
在氩气气氛下，搅拌291μL(1.09eq；3.172mmol)亚磷酸二甲酯、442μL(1.09eq；3.172mmol)三乙胺和134mg(0.04eq；0.116mmol)四(三苯基膦)钯(0)15min。将897mg(1eq；2.91mmol)三氟甲磺酸1-乙酰基-1H-吲唑-5-基酯溶解于60mL二甲基甲酰胺中。在氩气气氛下在105℃加热介质4h。在加入40mL甲苯的同时，在旋转蒸发器中减压蒸出溶剂。在40mL乙酸乙酯中重新处理反应粗产物，然后用50mL水洗涤。用硫酸镁干燥有机相，然后过滤并在旋转蒸发器中减压蒸出溶剂。得到973.6mg粗产物。通过快速色谱(35～70μm二氧化硅)提纯反应粗产物，洗脱液：乙酸乙酯/环己烷80∶20。分离出430.5mg(1-乙酰基-1H-吲唑-5-基)-膦酸二甲酯
LC/MS：[M+H]+＝269.18；保留时间：2.79min。
步骤III：制备(3-碘-1H-吲唑-5-基)-膦酸二甲酯
在430mg(1eq；1.603mmol)(1-乙酰基-1H-吲唑-5-基)-膦酸二甲酯在20mL二甲基甲酰胺中的溶液里加入814mg(2eq；3.206mmol)碘和180mg(2eq；3.206mmol)研磨的氢氧化钾。在环境温度下搅拌介质48h。向介质中加入814mg碘和180mg氢氧化钾，并在环境温度下将其搅拌3h。加入20mL饱和硫代硫酸钠溶液，搅拌介质10min。用40mL水洗涤反应混合物。用4×50mL乙酸乙酯处理水相。用硫酸镁干燥有机相，然后过滤并在旋转蒸发器中减压蒸出溶剂。得到458mg(3-碘-1H-吲唑-5-基)-膦酸二甲酯。
分析LC/MS：[M+H]+＝353.06；保留时间：2.65min。
步骤IV：制备5-(二甲氧基-磷酰基)-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯
在458mg(1eq；1.301mmol)(3-碘-1H-吲唑-5-基)-膦酸二甲酯在10mL二氯甲烷中的溶液里加入851.7mg(3eq；3.903mmol)二碳酸二叔丁酯、39.7mg(0.25eq；0.325mmol)4-二甲基氨基吡啶和544μL(3eq；3.903mmol)三乙胺。在环境温度下搅拌介质过夜。用20mL水，然后用10mL饱和氯化钠溶液洗涤反应混合物。用4×20mL乙酸乙酯处理水相。用硫酸镁干燥有机相，然后过滤并在旋转蒸发器中减压蒸出溶剂。得到415mg粗化合物。
LC/MS：[M+H]+452.99；保留时间：3.61min。
实施例15：制备[3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸单甲酯
在130mg(1eq；0.287mmol)5-(二甲氧基-磷酰基)-3-碘-1-吲唑-1-羧酸叔丁酯中加入82.9mg(0.25eq；0.072mmol)四(三苯基膦)钯(0)、150.1mg(2eq；0.575mmol)1-boc-吲哚-2-硼酸、5mL二甲基甲酰胺和250μL饱和碳酸氢钠溶液。在130℃下搅拌介质5h。用滤纸过滤反应介质，在旋转蒸发器中减压蒸出溶剂。用LC/MS提纯反应粗产物。分离出41mg[3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸单甲酯。
NMR谱：1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：3.58(d，J＝11Hz：3H)；7.05(t分裂，J＝7.5和1Hz：1H)；7.08(s宽：1H)；7.16(t分裂，J＝7.5和1Hz：1H)；7.49(d宽，J＝7.5Hz：1H)；7.60～7.75(mt：2H)；7.67(d宽，J＝7.5Hz：1H)；8.51(d，J＝14Hz：1H)；11.69(s宽：1H)；13.62(mf：1H).
LC/MS：[M+H]+＝328.17；保留时间：2.57分钟。
实施例16：制备(3-噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-膦酸单甲酯
在70mg(1eq；0.155mmol)5-(二甲氧基-磷酰基)-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯中加入44.8mg(0.25eq；0.039mmol)四(三苯基膦)钯(0)、39.6mg(2eq；0.310mmol)2-噻吩硼酸、3mL二甲基甲酰胺和150μL饱和碳酸氢钠溶液。在130℃下搅拌介质5h。在滤纸上过滤反应介质并在旋转蒸发器中减压蒸出溶剂。用LC/MS提纯反应粗产物。得到2mg(3-噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-膦酸二甲酯(用NMR得到纯度40％)和12.9mg(3-噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-膦酸单甲酯
NMR谱：1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：3.53(d，J＝11Hz：3H)；7.26(dd，J＝5.5和3Hz：1H)；7.65(dd，J＝5.5和1Hz：1H)；7.65～7.75(mt：2H)；7.68(d 宽，J＝3Hz：1H)；8.41(d，J＝14Hz：1H)；13.49(mf：1H).
实施例17：制备[3-(1H-吡咯-2-基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸单甲酯
在70mg(1eq；0.155mmol)5-(二甲氧基-磷酰基)-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯中加入44.8mg(0.25eq；0.039mmol)四(三苯基膦)钯(0)、65.3mg(2eq；0.310mmol)1-boc-吡咯-2-硼酸、3mL二甲基甲酰胺和150μL饱和碳酸氢钠溶液。在130℃下搅拌介质5h。在滤纸上过滤反应介质并在旋转蒸发器中减压蒸出溶剂。用LC/MS提纯反应粗产物。得到4.10mg[3-(1H-吡咯-2-基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸单甲酯。
NMR谱：1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)：3.55(d，J＝11Hz：3H)；6.24(q，J＝3Hz：1H)；6.66(mt：1H)；6.91(mt：1H)；7.65(mt：2H)；8.36(d，J＝14.5Hz：1H)；11.46(mf：1H)；13.24(mf：1H).
实施例18：制备二甲基次膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯
按照程序E从500mg二甲基次膦酰氯、214mg氢化钠(油中的50％)、618mg对硝基苯酚在10mL四氢呋喃中的溶液制备试剂二甲基次膦酸4-硝基苯基酯。得到700mg所需产物。
收率＝26％
按照程序F从230mg3-(1H-吲哚-2-基)-H-吲唑-5-醇(中间体B)和在其中加入了170μL 1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)在2mL二氯甲烷中溶液的245mg二甲基次膦酸4-硝基苯基酯在5mL二氯甲烷的溶液制备化合物二甲基次膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯。在环境温度下搅拌24后蒸出溶剂并用制备LC/MS提纯粗产物。在浓缩馏分之后得到结晶，用乙酸乙酯将其洗涤，然后用异丙基醚洗涤。回收129mg所需产物。
收率＝43％
NMR谱的化学位移(δ单位ppm)-在溶剂二甲基亚砜中，参考d6(DMSO-d6)在2.50ppm：
1.65(d，J＝15.0Hz，6H)；7.00～7.06(m，.2H)；7.13(t宽，J＝8.0Hz，1H)；7.30(d宽，J＝8.0Hz，1H)；7.46(d宽，J＝8.0Hz，1H)；7.58～7.65(m，2H)；7.91(m，1H)；11.6(m宽，1H)；13.4(s宽，1H).
实施例19：制备3-[5-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基膦酸甲酯
按照如下的方案分6步制备此化合物：
步骤I：按照程序G从5-苄氧基-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯和如在WO 2003/020699A2中所述得到的[5-(叔丁基-二甲基硅烷氧基)-吲哚-1-羧酸叔丁酯]-2-硼酸制备5-苄氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
步骤II：按照程序G1制备5-苄氧基-3-(1-叔丁氧羰基-5-羟基-1H-吲哚-2-基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
步骤III：按照程序G2制备5-苄氧基-3-[5-(2-溴-乙氧基)-1-叔丁氧羰基-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
步骤IV：按照如下的方法制备5-苄氧基-3-[5-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑三氟乙酸酯：
在85℃下搅拌600mg5-苄氧基-3-[5-(2-溴-乙氧基)-1-叔丁氧羰基-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯、442mg碳酸钾、272mg哌啶在30mL乙腈中的悬浮液5h。在返回到20℃以后，减压蒸发反应混合物，然后在乙酸乙酯(100mL)和水(100mL)的混合物中重新处理残渣。在倾析和用乙酸乙酯(1×50mL)萃取之后，合并有机萃取液，用硫酸镁干燥，然后进行减压蒸发。蒸发后得到的化合物在15mL二氯甲烷和5mL三氟乙酸的混合物中重新处理，然后在20℃下搅拌1h。在减压下蒸发反应混合物，在乙酸乙酯(50mL)和10％的碳酸氢钠(50mL)的混合物中重新处理残渣。在倾析和用乙酸乙酯(2×50mL)萃取之后，合并有机萃取液，用硫酸镁干燥，然后减压蒸发。在二氧化硅(20g二氧化硅DC0210，InterChrom柱子；洗脱液：二氯甲烷/甲醇9∶1，v/v，15mL/min)上进行色谱提纯如此得到的粗化合物。合并含有所需化合物的馏分进行减压蒸发。分离出360mg5-苄氧基-3-[5-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑三氟乙酸酯。
步骤V：按照如下的方法制备3-[5-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-醇：
在90℃的温度下，在置于微波场(Synthwave 402)中辐照下的反应器中将360mg5-苄氧基-3-[5-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑、916mg甲酸铵和120mg钯在10mL乙醇中的悬浮液放置30min，然后在硅藻土床上过滤反应混合物。在减压下蒸发过滤液，然后在乙酸乙酯(150mL)和水(50mL)混合物中重新处理残渣。加入30％的氢氧化铵溶液，使pH值到10。在倾析和用乙酸乙酯(1×50mL)萃取之后合并有机萃取液，用硫酸镁干燥，然后减压蒸发。分离并鉴定193mg3-[5-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-醇。
步骤VI：制备3-[5-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-5吲唑-基膦酸甲酯：
在193mg 3-[5-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-1H-2-基]-1H-吲唑-5-醇和173.5mg甲基膦酸二(4-硝基苯基)酯在10mL二氯甲烷中的溶液里加入77μL 1，8-二氮杂双环[5.4.0]-十一碳-7-烯，然后让其在20温度下反应。反应3h以后，加入300μL甲醇，再加入77μL1，8-二氮杂双环[5.4.0]-十一碳-7-烯，继续在20℃下反应16h。此时在二氯甲烷(150mL)和饱和碳酸氢钠溶液(100mL)的混合物中重新处理反应介质。在倾析和用二氯甲烷(50mL)萃取之后合并有机萃取液，用硫酸镁干燥，然后减压蒸发。在二氧化硅(20g二氧化硅DC0210，InterChrom柱子；洗脱液：二氯甲烷/甲醇9/1，v/v，15mL/min)上进行色谱提纯如此得到的粗化合物。合并含有所需化合物的馏分并减压蒸发。分离并鉴定89mg3-[5-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基膦酸甲酯：
分析LC/MS：[M+H]+＝469.25；保留时间：3.02min。
实施例20：制备甲基膦酸单-{3-[5-(2-哌嗪-1-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基}酯
按照如下的方案，分6步制备化合物：
步骤I：程序J-按照如下方法制备5-苄氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-氯-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯：
在72mg四丁基溴化铵和270μL2N氢氧化钠在5mL蒸馏水中的水溶液中混合100mg5-苄氧基-3-(1-叔丁氧羰基-5-羟基-1H-吲哚-2-基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯和132μL 1-溴-2-氯乙烷在5mL二氯甲烷中的溶液。在20℃下将反应混合物置于剧烈搅拌之下6天。在倾析和用水(4×5mL)洗涤之后，合并有机萃取液，用硫酸镁干燥，然后减压蒸发。用制备LC/MS提纯得到的粗化合物。合并含有所需化合物的馏分并减压蒸发。分离并鉴定18.1mg5-苄氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-氯-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯：
分析LC/MS：[M+H]+＝618.15；保留时间：5.56min。
步骤II：按照如下方法制备5-苄氧基-3-{1-叔丁氧羰基-5-[2-(4-叔丁氧羰基-哌嗪-1-基)-乙氧基]-1H-吲哚-2-基}-吲唑-1-羧酸叔丁酯：
在85℃下搅拌330mg5-苄氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-氯-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯、442mg碳酸钾、133mg碘化钾和596mgN-1-Boc-哌嗪在15mL乙腈中的悬浮液48h。在返回到20℃以后，减压蒸发反应混合物，然后在乙酸乙酯(15mL)和水(15mL)的混合物中重新处理残渣。在倾析和用乙酸乙酯(1×15mL)萃取之后，合并有机萃取液，用硫酸镁干燥，然后减压蒸发。在二氧化硅(AIT柱子，BPSUP20～40μm，25g二氧化硅；洗脱液：环己烷∶乙酸乙酯1∶1v/v)上对如此得到的粗化合物进行色谱提纯。合并含有所需化合物的馏分并在减压下蒸发。将如此得到的化合物溶解于10mL二氯甲烷中，然后用350mL二碳酸二叔丁酯和10mg二甲基氨基吡啶在20℃下处理3h。在减压下蒸发反应混合物，分离和鉴定220mg5-苄氧基-3-{1-叔丁氧羰基-5-[2-(4-叔丁氧羰基-哌嗪-1-基)-乙氧基]-1H-吲哚-2-基}-吲唑-1-羧酸叔丁酯，无须提纯即可使用。
分析LC/MS：[M+H]+＝768.39；保留时间：4.00min。
步骤III：按照如下方法制备3-{1-叔丁氧羰基-5-[2-(4-叔丁氧羰基-哌嗪-1-基)-乙氧基]-1H-吲哚-2-基}-5-羟基-吲唑-1-羧酸叔丁酯
在剧烈搅拌的同时放置在80℃下的反应器中放置220mg 5-苄氧基-3-{1-叔丁氧羰基-5-[2-(4-叔丁氧羰基-哌嗪-1-基)-乙氧基]-1H-吲哚-2-基}-吲唑-1-羧酸叔丁酯、108mg甲酸铵和29.8mg钯在30mL乙醇中的悬浮液。在4h以后，用硅藻土床过滤反应混合物。再使过滤液与108mg甲酸铵和29.8mg钯反应4h。此时在硅藻土床上过滤反应混合物，在减压下蒸发，然后在乙酸乙酯(20mL)和饱和碳酸氢钠溶液(20mL)混合物中重新处理残渣。在倾析和用乙酸乙酯(2×20mL)萃取之后，合并有机萃取液，用硫酸镁干燥，然后在减压下蒸发。
在用微波炉中(90℃)辐照的同时，在38mg甲酸铵和12mg钯存在下，在30mL乙醇中使得到的化合物(60mg)经历反应的第三期30min。在硅藻土床上过滤反应混合物，在减压下蒸发。分离出含有3-{1-叔丁氧羰基-5-[2-(4-叔丁氧羰基-哌嗪-1-基)-乙氧基]-1H-吲哚-2-基}-5-羟基-吲唑-1-羧酸叔丁酯的粗化合物，在下面的步骤中不经提纯就将其使用。
分析LC/MS：[M+H]+＝678.74；保留时间：3.31min。
步骤IV：3-{1-叔丁氧羰基-5-[2-(4-叔丁氧羰基-哌嗪-1-基)-乙氧基]-1H-吲哚-2-基}-5-(羟基-甲基-次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯
在冰浴中冷却34mg 3-{1-叔丁氧羰基-5-[2-(4-叔丁氧羰基-哌嗪-1-基)-乙氧基]-1H-吲哚-2-基}-5-羟基-吲唑-1-羧酸叔丁酯在1.5mL二氯甲烷中的溶液。加入16.9mg按照程序E制备的甲基膦酸二(4-硝基苯基)酯和7.6mg 1，8-二氮杂双环[5.4.0]-十一碳-7-烯在500μL二氯甲烷中的混合物并在20℃下继续反应3h。用2×3mL饱和碳酸氢钠溶液，然后用蒸馏水3mL洗涤反应介质。在倾析之后用硫酸镁干燥有机萃取液，然后在减压下蒸发。分离出39mg主要含有3-{1-叔丁氧羰基-5-[2-(4-叔丁氧羰基-哌嗪-1-基)-乙氧基]-1H-吲哚-2-基}-5-(羟基-甲基-次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯的混合物，不经提纯就将其用于下一步。
分析LC/MS：[M+H]+＝756.76；保留时间：3.45min。
步骤V：甲基膦酸单-{3-[5-(2-哌嗪-1-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基}酯：
在20℃下将39mg主要含有3-{1-叔丁氧羰基-5-[2-(4-叔丁氧羰基-哌嗪-1-基)-乙氧基]-1H-吲哚-2-基}-5-(羟基-甲基-次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯的上述混合物在1mL二氯甲烷和200μL三氟乙酸中的溶液搅拌4h，然后在减压下蒸发反应混合物。用制备LC/MS提纯得到的粗化合物，合并含有分子量455化合物的馏分并在减压下蒸发。分离并鉴定4mg甲基膦酸单-{3-[5-(2-哌嗪-1-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基}酯：
分析LC/MS：[M+H]+＝456.33；保留时间：1.85min。
实施例21和22：按照下面的方案，可分4步制备化合物甲基膦酸单-{3-[5-(2-二乙基氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基}酯和甲基膦酸3-[5-(2-二乙基氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基}酯甲酯：
实施例21 实施例22
步骤I：制备5-苄氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-二乙基-氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯
在80℃下加热含有1.5g按照程序J制备的5-苄氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-氯-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯、1g碳酸钾、600mg碘化钾和761μL乙胺在75mL乙腈中的溶液18h。在此时期之后，加入1.5mL乙胺，在80℃下再继续反应18h。在另外18h之后重新进行此操作，然后在减压下蒸发反应混合物。在乙酸乙酯(80mL)和水(80mL)的混合物中重新处理得到的棕色油状物。在倾析和用乙酸乙酯(80mL)萃取之后，合并有机萃取液，用水(100mL)和盐水(100mL)洗涤，用硫酸镁干燥，然后在减压下蒸发。分离出1.15g5-苄氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-二乙基-氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯，将其原样用于下一步。
步骤II：制备{2-[2-(5-苄氧基-1H-吲唑-3-基)-1H-吲哚-5-基氧]-乙基}-二乙基胺
在20℃下搅拌含有1.15g 5-苄氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-二乙基氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯和4mL三氟乙酸在5mL二氯甲烷中的溶液2h。在减压下蒸发反应混合物，用色谱(NucléodurC18柱子，100-10，250mm×40mm，编号No762020，系列号3051180，批号2023，洗脱液A：水/三氟乙酸0.07％，洗脱液B：乙腈/三氟乙酸0.07％，组成梯度A/B 95％/5％～5％/95％，流量75mL/min，在52min，检出300nm)提纯如此得到的粗化合物。合并含有所需化合物的馏分并在减压下蒸发。在乙酸乙酯(20mL)中重新处理该化合物，用硫酸镁干燥，然后减压蒸发。分离并鉴定320mg{2-[2-(5-苄氧基-1H-吲唑-3-基)-1H-吲哚-5-基氧]-乙基}-二乙基胺
步骤III：制备3-[5-(2-二乙基氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-醇
在75℃下，以5％的功率在在大气压下的Synthwave 402微波炉中辐照320mg{2-[2-(5-苄氧基-1H-吲唑-3-基)-1H-吲哚-5-基氧]-乙基}-二乙基胺、32mg 10％的碳载钯、180mg甲酸铵的悬浮液35min，然后在20％的功率下辐照10min。在硅藻土床上过滤出催化剂，在减压下蒸发过滤液。在乙酸乙酯(20mL)和饱和碳酸氢钠溶液(20mL)中重新处理得到的化合物，倾析，用硫酸镁干燥，然后在减压下蒸发。分离和鉴定115mg3-[5-(2-二乙基氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-醇
分析LC/MS：[M+H]+＝365.29；保留时间：2.33min。
步骤IV：制备甲基膦酸单-{3-[5-(2-二乙基-氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基}酯和甲基膦酸3-[5-(2-二乙基-氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基酯甲酯
在20℃下搅拌115mg3-[5-(2-二乙基氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-醇在3mL二氯甲烷中的悬浮液，同时加入107mg甲基膦酸二(4-硝基苯基)酯(按照程序E制备)和48μL 1，8-二氮杂双环[5.4.0]-十一碳-7-烯。在此温度下18h之后，加入在1mL四氢呋喃中的128μL甲醇和50μL 1，8-二氮杂双环[5.4.0]-十一碳-7-烯并继续反应4h。在减压下蒸发反应混合物。分离300mg化合物，用色谱(Nucléodur C18柱子，100-10，250mm×40mm，编号No762020，系列号3051180，批号2023，洗脱液A：水/三氟乙酸0.07％，洗脱液B：乙腈/三氟乙酸0.07％，组成梯度A/B 95％/5％～5％/95％，流量75mL/min，在52min，检出300nm)将其提纯。
合并含有甲基膦酸单-{3-[5-(2-二乙基-氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基}酯(MM 442)的馏分，并在减压下蒸发。
合并含有甲基膦酸3-[5-(2-二乙基-氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基酯甲酯(MM 456)的馏分，并在减压下蒸发。
在500μL甲醇中重新处理如上分离分每一种化合物，然后将其沉积在SCX型柱子(Varian，500mg)上。在沉积之后，首先用甲醇淋洗该柱子，然后用甲醇和2M氨的混合物进行洗脱。在减压下蒸发流出液。用制备LC/MS提纯得到的化合物。
合并含有分子量442化合物的馏分，并在减压下蒸发。分离出22.9mg甲基膦酸单-{3-[5-(2-二乙基-氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基}酯(实施例21)，用分析LC/MS对其鉴定。
分析LC/MS：[M+H]+＝442.18；保留时间：2.43min。
合并含有分子量456化合物的馏分，并在减压下蒸发。分离出12.8mg甲基膦酸3-[5-(2-二乙基-氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基酯甲酯(实施例22)，用LC/MS对其进行鉴定。
分析LC/MS：[M+H]+＝456.19；保留时间：2.76min。
实施例23：制备苯基膦酸乙酯3-(5-甲氧基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-2-基)-1H-吲唑-5-基酯
按照下面的方案，分6步制备此化合物：
程序K相当于步骤I～V。
步骤I：制备苯基膦酸乙酯3-(5-甲氧基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-2-基)-1H-吲唑-5-基酯
按照在合成中间体A的步骤2中叙述的方法制备1-(5-苄氧基-吲唑-1-基)乙酮。
将1g 1-(5-苄氧基-吲唑-1-基)-乙酮、1.42g甲酸铵和0.59g 10％碳载钯在乙醇中的悬浮液回流加热16h。在恢复到20℃之后，在硅藻土床上过滤反应混合物，在减压下蒸发过滤液。在10mL二异丙基醚中研制如此得到的粗化合物，然后过滤并减压干燥。分离并鉴定400mg1-(5-羟基-吲唑-1-基)乙酮。
步骤II：制备苯基膦酸1-乙酰基-1H-吲唑-5-基酯4-硝基苯基酯
在冰浴中冷却2.36g苯基膦酸二(4-硝基苯基)酯(按照程序E制备)在60mL二氯甲烷中的溶液。在其中加入在40mL二氯甲烷中的1.041g1-(5-苄氧基-吲唑-1-基)乙酮和900mg 1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯，在20℃下继续反应2h。用饱和碳酸氢钠溶液洗涤反应介质，直至使有机相脱色。在倾析之后用硫酸镁干燥有机萃取液，然后在减压下蒸发。分离出2.4g苯基膦酸1-乙酰基-1H-吲唑-5-基酯4-硝基苯基酯，不经提纯就将其用于下一步。
步骤III：制备苯基膦酸1H-吲唑-5-基酯甲酯
在20℃下搅拌2.4g苯基膦酸1-乙酰基-1H-吲唑-5-基酯4-硝基苯基酯在30mL被乙醇稳定化的二氯甲烷中的溶液。在其中加入在30mL二氯甲烷中的3.78mL甲醇和836mg 1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯。在此温度下继续反应过夜。在减压下蒸发反应混合物，然后在二氧化硅(AIT BP-SUP 20～40μm，洗脱液二氯甲烷/甲醇90/10)上用色谱提纯如此得到的粗化合物。合并含有所需化合物的馏分，在减压下蒸发。分离并鉴定980mg苯基膦酸1H-吲唑-5-基酯甲酯
分析LC/MS：[M+H]+＝289.13；保留时间：2.83min。
此化合物被没有分离的苯基膦酸1H-吲唑-5-基酯乙酯污染。
分析LC/MS：[M+H]+＝303.0；保留时间：3.01min。
步骤IV：制备苯基膦酸3-碘-1H-吲唑-5-基酯甲酯
请注意，在此反应的进程中，使用了在步骤III中叙述的含有25％乙酯异构体的原料，这使得也能够分离出相应的碘衍生物。
在20℃和激烈搅拌下放置980mg被苯基膦酸1H-吲唑-5-基酯乙酯污染的苯基膦酸1H-吲唑-5-基酯甲酯在二甲基甲酰胺中的溶液。在其中加入1.72g碘和381.5mg氢氧化钾，然后让其反应16h。在乙酸乙酯(60mL)和饱和硫代硫酸钠溶液(40mL)的混合物中稀释反应介质。在20℃下搅拌10min以后，倾析反应介质，用蒸馏水(40mL)洗涤，合并有机萃取液，用硫酸镁干燥，然后在减压下蒸发。如此分离出1.08g粗化合物，用色谱(Nucléodur C18柱子，100-10，250mm×40mm，编号No762020，系列号3051181，批号2023，洗脱液A：水/三氟乙酸0.07％，洗脱液B：乙腈/三氟乙酸0.07％，组成梯度A/B95％/5％～5％/95％，流量75mL/min，在52min)将其提纯。
合并含有分子量414化合物的馏分并在减压下蒸发。分离并鉴定510mg苯基膦酸3-碘-1H-吲唑-5-基酯甲酯。
合并含有分子量428化合物的馏分并在减压下蒸发。分离并鉴定80mg苯基膦酸3-碘-1H-吲唑-5-基酯乙酯。
步骤V：制备5-(乙氧基-苯基-次膦酰氧基)-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯
在20℃下搅拌80mg苯基膦酸3-碘-1H-吲唑-5-基酯乙酯在2mL二氯甲烷中的溶液。在其中加入40mg二碳酸二叔丁酯和22mg二甲基氨基吡啶，并在20℃下继续反应16h。在减压下蒸发反应混合物，分离并鉴定60mg5-(乙氧基-苯基-次膦酰氧基)-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯，该化合物原样使用。
分析LC/MS：[M+H]+＝529.06；保留时间：4.29min。
步骤VI：制备5-甲氧基-吡咯并[3，2-b]吡啶-2-硼酸1-羧酸叔丁酯
如在下面所述，分两步从5-甲氧基-吡咯并[3，2-b]吡啶制备此化合物。
步骤VIa：制备5-甲氧基-吡咯并[3，2-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯
在20℃和磁性搅拌下，在4.50g 5-甲氧基-吡咯并[3，2-b]吡啶(如在Liebigs Ann.Chem.，1988，203-208中所述制备)和10.7g二碳酸二叔丁酯在10mL无水二氯甲烷中的溶液里加入102mg4-二甲基氨基吡啶。在环境温度下搅拌得到的溶液过夜，然后用75mL水，再用75mL盐水洗涤反应介质。用硫酸镁干燥有机萃取液，然后在减压下蒸发。在二氧化硅上用二氯甲烷洗脱，然后用二氯甲烷和乙酸乙酯90/10的混合物洗脱对如此得到的粗化合物进行色谱提纯，得到7.06g呈琥珀色油状物的5-甲氧基-吡咯并[3，2-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯。用NMR对其进行鉴定。
NMR谱：1H NMR[300Mhz，(CD3)2SO]：δ8.21(d，J＝9Hz，1H)，7.85(d，J＝4Hz，1H)，6.76(d，J＝9Hz，1H)，6.70(d，J＝4Hz，1H)，3.89(s，3H)，1.63(s，9H).
步骤VIb：引入硼酸
保持在干燥的氮气流下，在4.66g 5-甲氧基-吡咯并[3，2-b]-吡啶-1-羧酸叔丁酯(如上制备)在85mL无水四氢呋喃中的溶液里分批加入15mL叔丁基锂在戊烷中的1.5M溶液。在-78℃搅拌如此得到的反应介质40min，然后在2min内加入8mL硼酸三异丙酯溶液(37.7mmol)，然后搅拌反应介质并在-78℃下保持20min。在2.5h内将反应介质加热到0℃，然后加入50mL水。在20℃下搅拌1h以后，在减压下蒸发四氢呋喃。加入5N氢氧化铵将得到的水相碱化，然后用乙酸乙酯(30mL)洗涤两次。将水性萃取液冷却到0℃，然后用硫酸钾水溶液处理直至pH值为4。在0℃下搅拌反应介质15min。过滤分离出带有孔隙的固体，将其干燥得到2.48g白色粉末状5-甲氧基-吡咯并[3，2-b]吡啶-2-硼酸1-羧酸叔丁酯
NMR谱：[300Mhz，(CD3)2SO]：δ8.28(s，2H)，8.23(d，J＝9Hz，1H)，6.70(d，J＝9Hz，1H)，6.58(s，1H)，3.87(s，3H)，1.60(s，9H).
步骤VII：制备苯基膦酸乙酯3-(5-甲氧基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-2-基)-1H-吲唑-5-基酯
在100℃下加热50mg 5-(乙氧基-苯基-次膦酰氧基)-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯、55.3mg 5-甲氧基-吡咯并[3，2-b]吡啶-2-硼酸-1-羧酸叔丁酯、3.78mg1，1’-二(二苯基膦基(phosphino))二茂铁-氯化钯(ii)和123.4mg碳酸铈在800μL二烷水和250μL水的混合物中的悬浮液45min。在恢复到20℃之后，用3mL乙酸乙酯稀释反应介质，然后用1.5mL蒸馏水洗涤两次。在倾析以后，用硫酸镁干燥有机萃取液，然后在减压下蒸发。用制备LC/MS提纯得到的粗化合物。合并含有所需化合物的馏分并在减压下蒸发。分离并鉴定16.7mg苯基膦酸乙酯3-(5-甲氧基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-2-基)-1H-吲唑-5-基酯
分析LC/MS：[M+H]+＝449.17；保留时间：3.05min。
实施例24：程序L-制备苯基膦酸3-(5-甲氧基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯
在反应器中放入由50mg按照程序K得到的3-碘-5-(甲氧基-苯基-次膦酰氧基)吲唑-1-羧酸叔丁酯、3.9mg 1，1’-二(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(ii)、56.81mg 5-甲氧基-吡咯并[3，2-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯2-硼酸、126mg碳酸铈、260μL二烷和813μL蒸馏水，然后在100℃下加热反应混合物45min。在恢复到20℃以后，用4mL乙酸乙酯稀释反应介质，然后用2×3mL蒸馏水洗涤。在倾析以后，用硫酸镁干燥有机相，然后在减压下蒸发。用制备LC/MS提纯得到的粗化合物。合并含有所需化合物的馏分，在减压下蒸发。
将如此得到的中间体化合物置于在300μL 1M盐酸二烷中形成溶液，在20℃下搅拌2h，然后在减压下蒸发反应混合物。用制备LC/MS提纯得到的粗化合物。合并含有所需化合物的馏分并在减压下蒸发。
分离并鉴定3mg苯基膦酸3-(5-甲氧基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯
分析LC/MS：[M+H]+＝435；保留时间：2.95min。
实施例25：制备苯基膦酸甲酯3-苯乙烯基-1H-吲唑-5-基酯
按照程序L由28.78mg反式-β-苯乙烯硼酸制备此化合物。分离并鉴定3mg苯基膦酸甲酯3-苯乙烯基-1H-吲唑-5-基酯。
分析LC/MS：[M+H]+＝391；保留时间：3.66min。
实施例26：制备苯基膦酸3-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基酯甲酯
按照程序L，由24.89mg噻吩-2-硼酸制备此化合物。分离并鉴定3mg苯基膦酸3-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基酯甲酯。
分析LC/MS：[M+H]+＝371；保留时间：3.41min。
实施例27：苯基膦酸3-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基酯甲酯
按照程序L，由30mg3-碘-5-(甲氧基-苯基-次膦酰氧基)吲唑-1-羧酸叔丁酯、21.2mg苯并[b]噻吩-2-硼酸、2.23mg 1，1’-二(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(ii)、71mg碳酸铈在500μL二甲基甲酰胺中制备此化合物。分离0.7mg苯基膦酸3-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基酯甲酯
分析LC/MS：[M+H]+＝421.18；保留时间：3.86min。
实施例28：制备甲基-膦酸甲酯3-[5-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基酯
由中间体A分7步制备此化合物。
步骤I：制备5-苄氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯(程序M)
在10g 5-苄氧基-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯(中间体A)在156mL二烷中的溶液里相继加入13g1-(叔丁基-二甲基硅烷氧基)-5-吲哚-2-硼酸、28.9g碳酸铈、906.5mg 1，1’-二(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)与二氯甲烷的络合物，然后加入51mL蒸馏水。由预先加热到100℃的油浴加热反应混合物45min。用水浴将此混合物冷却到环境温度。倾析介质。除去下相(大约50mL)在真空下浓缩有机相。将得到的棕色胶状物溶解于250mL二氯甲烷中，用3×50mL水洗涤有机相。用硫酸镁和活性炭干燥有机相，然后在滤纸上过滤并在旋转蒸发器中浓缩。在500g40～63μm的二氧化硅上对反应粗产物进行快速色谱提纯，洗脱液是环己烷/二氯甲烷40/60混合物。分离出13.4g5-苄氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯
步骤II：制备5-苄氧基-3-(1-叔丁氧羰基-5-羟基-1H-吲哚-2-基)吲唑-1-羧酸叔丁酯
在环境温度下搅拌13.4g 5-苄氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(叔丁氧羰基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯和6.15g四丁基氟化铵在140mL无水四氢呋喃中的溶液30min。在真空下蒸发溶剂。用50mL二氯甲烷重新处理反应粗产物。用25mL蒸馏水洗涤有机相两次。用硫酸镁干燥有机相。在过滤和真空浓缩之后，在450g40～63μm的二氧化硅上对反应粗产物进行快速色谱提纯。用100％的二氯甲烷，然后用二氯甲烷/甲醇98/2，然后用95/5的混合物洗脱。分离出8.54g 5-苄氧基-3-(1-叔丁氧羰基-5-羟基-1H-吲哚-2-基)吲唑-1-羧酸叔丁酯
分析LC/MS：Tr＝4.75min；[M+H]+＝446.34。
步骤III：制备5-苄氧基-3-[5-(2-溴-乙氧基)-1-叔丁氧羰基-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯
在80℃下(油浴的温度)，在22mL二氯甲烷中搅拌2.22g 5-苄氧基-3-(1-叔丁氧羰基-5-羟基-1H-吲哚-2-基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯、7.8g碳酸铈48h。在烧结玻璃上过滤反应混合物，用20mL二氯甲烷淋洗固体。在真空下浓缩过滤液。在160g二氧化硅上对反应粗产物进行快速色谱提纯。洗脱液是100％的二氯甲烷。分离出2g 5-苄氧基-3-[5-(2-溴-乙氧基)-1-叔丁氧羰基-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯
步骤IV：制备5-苄氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯(程序N)
在90mL乙腈中搅拌2.0g 5-苄氧基-3-[5-(2-溴-乙氧基)-1-叔丁氧羰基-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯。加入498mg碘化钾并在80℃下加热悬浮液。在7h20min以后，逐次加入如下试剂：394μL吗啉、1.24g碳酸钾、150mg碘化钾。在80℃下加热悬浮液过夜。过滤出不溶物并在真空下浓缩过滤液。在50mL二氯甲烷中重新处理反应粗产物。用2×25mL蒸馏水洗涤有机相。用硫酸镁干燥有机相并过滤。在旋转蒸发器中蒸发溶剂。分离出1.90g5-苄氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
分析LC/MS：Tr＝3.99min；[M+H]+＝669.43。
步骤V：制备5-苄氧基-3-[5-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑
在环境温度下，在6mL的4M盐酸在二烷中的溶液里搅拌1.0g 5-苄氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯16h。在烧结玻璃上过滤产物，用二烷淋洗。回收692.4mg5-苄氧基-3-[5-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑。
分析LC/MS：Tr＝3.05min；[M+H]+＝469.34。
步骤VI：制备3-[5-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-醇
在55mL无水乙醇中溶解1.12g 5-苄氧基-3-[5-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑，然后相继加入424mg碳载钯、587mg甲酸铵、227μL三乙胺。在67℃(悬浮液内温)下搅拌反应介质。观察到释放出大量气体。在搅拌1h以后，在滤纸上过滤介质，用无水乙醇淋洗催化剂。在真空下浓缩过滤液。回收558mg3-[5-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-醇。
分析LC/MS：Tr＝2.29min；[M+H]+＝379.37。
步骤VII：制备甲基膦酸甲酯3-[5-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基酯
在环境温度下搅拌170mg甲基膦酸二(4-硝基苯基)酯(按照程序E制备)和189.7mg 3-[5-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-醇在17mL二氯甲烷(用戊烯稳定化)中的悬浮液。在10min内滴加在500μL二氯甲烷中的75μL DBU的溶液。保持一夜搅拌。在同时加入204μL甲醇和75μL DBU。搅拌此溶液24h。在真空下浓缩反应介质，然后用25mL乙酸乙酯重新处理粗产物，再用4×25mL蒸馏水洗涤。用硫酸镁干燥有机相，过滤并在真空下浓缩。在5g 40～63μm的二氧化硅上对反应粗产物进行快速色谱提纯，洗脱液：二氯甲烷/甲醇98/2，然后是95/5。回收95mg甲基膦酸甲酯3-[5-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基酯。
分析LC/MS：Tr＝2.25min；[M+H]+＝471.11。
实施例29：制备甲基膦酸3-[6-(2-二乙基氨基乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基酯甲酯
按照如下方案7分10步制备此化合物：
方案7
步骤I：制备6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲哚
在环境温度下搅拌3.52g 6-羟基吲哚、4.78g叔丁基二甲基氯硅烷、4.5g咪唑在16mL二甲基甲酰胺中的溶液过夜。用乙酸乙酯稀释反应介质，然后用2×50mL蒸馏水洗涤有机相。用硫酸镁干燥有机相，过滤并在旋转蒸发器中蒸出溶剂。回收6.5g6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲哚。
分析LC/MS：Tr＝4.55min；[M+H]+＝248.30。
步骤II：制备6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-吲哚-1-羧酸叔丁酯
在环境温度下搅拌6.5g 6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲哚、9.23g二碳酸二叔丁酯、646mg4-二甲基氨基吡啶在65mL二氯甲烷中的溶液。在搅拌4h以后，在旋转蒸发器中蒸出溶剂，并在35～70μm的二氧化硅上对反应粗产物进行快速色谱提纯，洗脱液：环己烷。分离出9.20g黄色油状物的6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-吲哚-1-羧酸叔丁酯。
分析LC/MS：Tr＝6.0min；[M+H]+＝348.3。
步骤III：制备6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-吲哚-1-羧酸叔丁基-3-硼酸
用丙酮干冰浴将8.20g 6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-吲哚-1-羧酸叔丁酯在120mL无水四氢呋喃中的溶液冷却到-78℃。在40min内滴加19mL叔丁基锂在戊烷中的1.5M溶液。在-78℃搅拌溶液30min。此时加入5.3mL硼酸三甲酯。在将介质重新加热到0℃以后，在此温度下搅拌溶液2h。加入75mL饱和氯化铵水溶液和200mL乙醚。在环境温度下搅拌介质20min。在用60mL 10％的硫酸氢钠水溶液和2mL浓硫酸将介质酸化之后，倾析有机相并先后用120mL蒸馏水和120mL饱和氯化钠水溶液洗涤。在用硫酸镁干燥并过滤后蒸出溶剂。在用环己烷洗涤得到的固体并在烧结玻璃上弄干。回收5.79g6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-吲哚-1-羧酸叔丁基-3-硼酸。
步骤IV：制备5-苄氧基-3-[1-叔丁氧羰基-6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯
按照程序M，从5.12g中间体A、5.79g 6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-吲哚-1-羧酸叔丁基-3-硼酸、466mg[1，1’-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)与二氯甲烷的络合物、14.82g碳酸铈在水(30mL)和二烷(70mL)混合物中的悬浮液制备此化合物。在105℃加热反应介质1h30min。在处理之后，在35～70μm的二氧化硅上对反应粗产物进行快速色谱提纯，洗脱液：环己烷。回收5.56g5-苄氧基-3-[1-叔丁氧羰基-6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
步骤V：制备5-苄氧基-3-(1-叔丁氧羰基-6-羟基-1H-吲哚-2-基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯
在环境温度下搅拌1.50g 5-苄氧基-3-[1-叔丁氧羰基-6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯在35mL四氢呋喃和770mg水合四丁基氟化铵中的溶液。在搅拌1h30min之后，用二氯甲烷稀释介质，然后用蒸馏水洗涤有机相。在用硫酸镁干燥之后进行过滤，在旋转蒸发器中真空蒸出溶剂。回收1.05g5-苄氧基-3-(1-叔丁氧羰基-6-羟基-1H-吲哚-2-基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
分析LC/MS：Tr＝4.73min；[M+H]+＝556.06。
步骤VI：制备5-苄氧基-3-[6-(2-溴-乙氧基)-1-叔丁氧羰基-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯
在环境温度下搅拌1.05g 5-苄氧基-3-(1-叔丁氧羰基-6-羟基-1H-吲哚-2-基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯在10.4mL二溴乙烷中的溶液。加入1.85g碳酸铈并在80℃加热介质24h。蒸出溶剂并用水/乙酸乙酯的混合物重新处理粗产物。用硫酸镁干燥有机相。在过滤之后，在旋转蒸发器中蒸出溶剂。在50g二氧化硅的柱子上，通过梯度的环己烷/乙酸乙酯95/5～65/35在60min内对反应粗产物进行快速色谱提纯。回收1.23g5-苄氧基-3-[6-(2-溴-乙氧基)-1-叔丁氧羰基-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
分析LC/MS：Tr＝5.43min；[M+H]+＝664.04。
步骤VII：按照程序N，从1.23g 5-苄氧基-3-[6-(2-溴乙氧基)-1-叔丁氧羰基-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯、50mL乙腈、401mg碘化钾、204mg二乙胺和770mg碳酸铈制备化合物5-苄氧基-3-[1-叔丁氧羰基-6-(2-二乙基-氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯。在处理之后，在20g二氧化硅柱子上对反应粗产物进行色谱提纯；洗脱液：二氯甲烷/甲醇98/2，95/5，92/8。回收390mg 5-苄氧基-3-[1-叔丁氧羰基-6-(2-二乙基氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
分析LC/MS：Tr＝4.62min；[M+H]+＝655.45。
步骤VIII：按照如下方法制备化合物{2-[2-(5-苄氧基-1H-吲唑-3-基)-1H-吲哚-6-基氧基]-乙基}-二乙胺：在环境温度下搅拌390mg 5-苄氧基-3-[1-叔丁氧羰基-6-(2-二乙基氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯在5mL二氯甲烷和2mL三氟乙酸中的溶液20h。在旋转蒸发器中真空蒸出溶剂。回收480mg三氟乙酸盐形式的{2-[2-(5-苄氧基-1H-吲唑-3-基)-1H-吲哚-6-基氧基]-乙基}-二乙胺。
分析LC/MS：Tr＝3.87min；[M+H]+＝455.51。
步骤IX：按照如下方法制备化合物3-[6-(2-二乙基氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-醇：在100mg碳载钯和1.1g甲酸铵存在下，在90℃的大气压力下的微波炉中加热990mg{2-[2-(5-苄氧基-1H-吲唑-3-基)-1H-吲哚-6-基氧基]-乙基}-二乙胺在15mL无水乙醇中的溶液30min。在硅藻土上过滤反应粗产物，用无水乙醇淋洗催化剂，在真空下浓缩过滤液。在80mL乙酸乙酯中重新处理反应粗产物，用2×50mL的饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。在用硫酸镁干燥之后，将有机相浓缩至干。用二氯甲烷和异丙基醚洗涤得到的固体。回收280mg3-[6-(2-二乙基氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-醇。
步骤X：如下所述制备化合物甲基膦酸3-[6-(2-二乙基氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基酯甲酯：在环境温度下搅拌100mg3[6-(2-二乙基氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-醇在4mL二氯甲烷和93mg甲基膦酸二-(4-硝基苯基)酯(按照程序E制备)中的溶液。滴加41μL 1，8-二氮杂双环[5.4.0]-十一碳-7-烯(DBU)在1mL二氯甲烷中的溶液。在环境温度下搅拌溶液过夜。当加完41μL DBU时然后加入115μL甲醇。在搅拌4h15min之后重复此操作。在环境温度下再搅拌1h以后，蒸发出溶剂，并在25g二氧化硅柱子上对粗产物进行快速色谱提纯，洗脱液是二氯甲烷/甲醇90/10逐步到60/40。浓缩得到的馏分并用制备LC/MS提纯。回收30mg无色油状物甲基膦酸3-[6-(2-二乙基氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基酯甲酯。
NMR谱：0.99～1.18(m，6H)；1.70(d，J＝17.0Hz，3H)；2.63(m宽，4H)；2.85(m宽，2H)；3.78(d，J＝11.0Hz，3H)；4.05(m宽，2H)；6.78(d宽，J＝9.0Hz，1H)；6.97(m宽，2H)；7.30(d宽，J＝9.0Hz，1H)；7.48(d，J＝9.0Hz，1H)；7.60(d，J＝9.0Hz，1H)；7.89(m宽，1H)；11.4(m宽，1H)；13.3(s宽，1H).
实施例30：制备乙基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯
按照程序E，从528mg乙基膦酰二氯、1g对硝基苯酚、345mg氢化钠(在油中的50％)和10mL四氢呋喃制备中间体乙基膦酸二(硝基苯基)酯。回收1.29g乙基膦酸二(硝基苯基)酯。
按照程序F，从282.5mg乙基膦酸二(硝基苯基)、200mg 3-(1H-吲哚-2-基)-H-吲唑-5-醇(中间体B)在10mL二氯甲烷中的溶液、120μL 1，8-二氮杂双环[5.4.0]-十一碳-7-烯(DBU)制备化合物乙基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯。在环境温度下7h以后加入120μL DBU和144.5μL甲醇，并让其在环境温度下过夜。在浓缩之后，用50g二氧化硅柱子对粗产物进行色谱提纯。洗脱液：环己烷/乙酸乙酯9/1逐渐到乙酸乙酯/甲醇9/1。浓缩含有所需化合物的馏分得到固体，用乙酸乙酯然后用乙醚洗涤，回收83mg乙基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯。
在400MHz下在溶剂二甲基亚砜中用BRUKER AVANCE DRX-400上进行1H核磁共振的化学位移(δ单位ppm)谱，参考d6(DMSO-d6)在2.50ppm：
1.17(td，J＝7.0和20.0Hz，3H)；1.95～2.07(m，2H)；3.77(d，J＝11.0Hz，3H)；6.98～7.07(m，2H)；7.15(t宽，J＝8.0Hz，1H)；7.33(d宽，J＝8.0Hz，1H)；7.46(d宽，J＝8.0Hz，1H)；7.58～7.65(m，2H)；7.92(s宽，1H)；11.6(m宽，1H)；13.45(m展开，1H).
实施例31：制备甲基硫代膦酸O-[3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基]酯O-甲酯
按照程序E，从536mg甲基硫代膦酰二氯、345mg氢化钠(油中的50％)、1g对硝基苯酚、10mL四氢呋喃制备中间体甲基硫代膦酸O，O-二(4-硝基苯基)酯。回收1.19g所需化合物。
按照程序F，从200mg 3-(1H-吲哚-2-基)-H-吲唑-5-醇(中间体B)和284mg甲基硫代膦酸O，O-二(4-硝基苯基)酯在6mL二氯甲烷(用戊烯稳定化)中的溶液，在其中加入120μL 1，8-二氮杂双环[5.4.0]-十一碳-7-烯(DBU)在1mL二氯甲烷中的溶液来制备化合物甲基硫代膦酸O-[3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基]酯O-甲酯。在环境温度下搅拌4h30min以后，加入325μL甲醇和120μL DBU在1mL二氯甲烷中的溶液。在环境温度下过夜之后，蒸出溶剂，用35～70μm的二氧化硅对粗产物进行快速色谱提纯，洗脱液：环己烷/乙酸乙酯90/10直至50/50。浓缩得到的馏分并用制备LC/MS提纯，回收47.7mg甲基硫代膦酸O-[3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基]酯O-甲酯。
在400MHz下在溶剂二甲基亚砜中用BRUKER AVANCE DRX-400上进行1H核磁共振的化学位移(δ单位ppm)谱，参考d6(DMSO-d6)在2.50ppm：
2.11(d，J＝15.0Hz，3H)；3.81(d，J＝14.0Hz，3H)；7.02(t宽，J＝9.0Hz，1H)；7.07～7.14(m，2H)；7.28(d宽，J＝9.0Hz，1H)；7.44(d宽，J＝9.0Hz，1H)；7.58～7.65(m，2H)；7.49(m，1H)；11.6(m宽，1H)；13.35(s宽，1H).
实施例32：制备环己基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯
按照程序E，从722mg环己基膦酰二氯、1g对硝基苯酚、345mg氢化钠(油中的50％)和10mL四氢呋喃制备中间体环己基膦酸二(硝基苯基)酯。回收1.47g所需化合物。
收率＝定量
按照程序F，从200mg 3-(1H-吲哚-2-基)-H-吲唑-5-醇(中间体B)和325mg环己基膦酸二(硝基苯基)酯在6mL二氯甲烷(用戊烯稳定化)中的溶液，在其中加入120μL 1，8-二氮杂双环[5.4.0]-十一碳-7-烯(DBU)在1mL二氯甲烷中的溶液来制备化合物环己基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯。在环境温度下搅拌4h30min之后，加入325μL甲醇在1mL二氯甲烷中的溶液。在环境温度下过夜之后蒸出溶剂，并在35～70μm二氧化硅上对粗产物进行快速色谱提纯，洗脱液：环己烷/乙酸乙酯90/10直至50/50。浓缩得到的馏分并用制备LC/MS提纯，回收64.5mg环己基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯。
NMR谱：化学位移(δ单位ppm)-在溶剂二甲基亚砜中-d6(DMSO)在2.50ppm：
1.20～1.50(m，6H)；1.62～1.83(m，3H)；1.93～2.15(m，2H)；3.75(d，J＝11.0Hz，3H)；6.96～7.05(m，2H)；7.11(t宽，J＝8.0Hz，1H)；7.31(d宽，J＝9.0Hz，1H)；7.45(d宽，J＝9.0Hz，1H)；7.59～7.64(m，2H)；7.40(m，1H)；11.6(m宽，1H)；13.5(m展开，1H).
实施例33：制备化合物苯基膦酸单-[3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基]酯
为了制备化合物[3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基甲基]-苯基-次膦酸N-乙基酰胺，在环境温度下搅拌150mg苯基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯4-硝基苯基酯(按照程序E制备)和1.5mL二乙胺(在四氢呋喃中的2M溶液)在二氯甲烷(用戊烯稳定化)中的溶液。加入44μL 1，8-二氮杂双环[5.4.0]-十一碳-7-烯(DBU)并在环境温度下搅拌介质过夜。在旋转蒸发器中蒸出溶剂，并用制备LC/MS提纯反应粗产物，以分离质量[M+H]+＝390与所需产物不符合的化合物。回收23mg灰色固体，被鉴定为苯基膦酸单-[3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基]酯
分析LC/MS：Tr＝2.72min；[M+H]+＝390.27
NMR谱：化学位移(δ单位ppm)-在溶剂二甲基亚砜中-d6(DMSO)在2.50ppm：
对于混合物中的主要产物(70％)，具有如下谱线：
6.82(s宽，1H)；7.02(t宽，J＝8.5Hz，1H)；7.11(t宽，J＝8.5Hz，1H)；7.21(d宽，J＝9.0Hz，1H)；7.43(d宽，J＝9.0Hz，1H)；6.90～7.62(m，5H)；7.76(s宽，1H)；7.82(dd宽，J＝8.5和12.5Hz，2H)；11.55(m宽，1H)；13.3(s宽，1H).
在生物化学中的实验操作步骤
1.FAK
通过使用时间分辨的(résolue dans le temps)荧光(HTRF)测试测定对酶自动磷酸化的抑制来确定化合物对FAK的抑制活性。
人类FAK的完全cDNA，其N-端基的标志是组氨酸，在杆状病毒的表达载体pFastBacHTc中克隆此DNA。将蛋白质表达并以大约70％的均匀度(homogénéité)提纯。
在37℃下，在50mM pH值＝7.5的Hepes缓冲液、5％的甘油、0.03％的Triton x-100、50mM的NaCl、1mM的DTT、5mM的MgCl2、5μM的ATP、最后1％的DMSO当中，用不同浓度的待测试化合物培养酶(4.6μg/mL)10min来测定激酶的活性。加入320mM的EDTA来终止酶反应，在4℃下，通过在缓冲液中加入用XL665标记的抗组氨酸抗体和与铕穴合物(Eu-K)结合的酪氨酸磷特异性单克隆抗体，在含有0.8mM KF、0.2％BSA的pH值＝7.5的100mM Hepes缓冲液中进行标记过夜。在G.Mathis等人的Anticancer Research，1997，17，3011-3014中得到两种荧光团的特征。在被激发的铕穴合物向XL665受体之间的能量传递正比于FAK的自动磷酸化程度。在PackardDiscovery平板计数器中测量XL-665特定长寿命的信号。全部实验都以两个实例进行，计算出两次实验的平均值。用本发明的化合物抑制FAK自动磷酸化活性的效果，以相对于对照组的抑制百分数来表示，对照组的活性是在没有测试化合物存在的情况下测试的。为了计算出抑制的％，考虑了比值[在665nm的信号/在620nm的信号]。
2.KDR
使用闪烁技术(96孔平板，NEN)，在生体外对由酶KDR使底物磷酸化的测试中测定化合物的抑制剂效果。
在以在杆状病毒的表达载体pFastBac中融合GST的形式克隆人类KDR酶的胞质区。在SF21细胞中表达此蛋白质，并以大约60％的均匀度进行提纯。
在10mM MgCl2、100μM Na3VO4、1mM NaF存在下，在pH值＝7.2的20mM的MOPS、10mM的氯化镁、10mM的MnCl2、1mM的DTT、2.5mM的EGTA、10mM的b-甘油磷酸酯中测定KDR的激酶活性。在4℃下在70μL含有100ngKDR酶的激酶缓冲液中加入10μL化合物。加入20μL含有2μg底物(以融合GST蛋白质的形式表达的PLCγ的SH2-SH3片段)、2μCiγ33P[ATP]和2μM冷ATP的溶液开始反应。在37℃下培养1h以后，加入1体积(100μL)的200mMEDTA终止反应。去掉培养缓冲液，用300μL PBS洗涤孔3次。使用Top Count NXT(Packard)放射性计数器在每个孔中测量放射性。
在含有放射性ATP和只含底物的4个不同孔中，通过测量放射性来确定本底噪音。
在含有各种试剂(γ33P-[ATP]、KDR和底物PLCγ)但不含化合物的4个不同孔中测定对照的总活性。
用本发明的化合物对KDR活性的抑制表示为对没有化合物的情况下测定的对照组活性抑制的百分比。
化合物SU5614(Calbiochem)(1μM)作为抑制的对照组包括在每个板中。
3.Aurora 2
通过使用螯合镍的放射性闪烁测试来确定化合物对激酶Aurora 2的抑制效果。
完全重组的Aurora 2酶，其N-端基是被组氨酸标记的，在E.coli中表达此酶，并提纯直至接近均匀的质量。
在E.coli中表达NuMA(与有丝分裂器相连的核蛋白)的C-端基片段(Q1687-H2101)，其N-端基是由组氨酸标记的，在螯合镍上用色谱对其提纯，并在激酶Aurora 2测试中用作底物。
为了测定激酶的活性，在添加了10vol％甘油和0.05wt/vol％的NP40的缓冲液(50mM Tris-HCl、pH＝7.5、50mM的氯化钠、10mM氯化镁)中，在PD10Pharmacia柱子上通过色谱使底物NuMA平衡。
通过使用螯合镍(New England Nuclear，型号SMP 107)的闪烁测试来测定Aurora 2的激酶活性。每个孔装有100μL如下的溶液：0.02μM的Aurora 2、0.5μM的底物NuMA、1μM的ATP加入0.5μCi的ATP-[33P]。在37℃下培养溶液30min。然后除去测试的缓冲液，再用300μL激酶缓冲液淋洗孔两次。借助于Packard型号TopCount NXT的计数器测量每个孔的放射性。
从通过在装有只含包括与其它试样同样处理的缓冲激酶的放射性ATP的孔中的两次实验测定的放射性减去本底噪音。
通过两次测量全部测试物(ATP、Aurora 2和底物NuMA)但不合测试化合物的混合物中的放射性得到对照组的活性。
用本发明的化合物对Aurora 2活性的抑制效果用对没有测试化合物的对照组活性抑制的百分比来表示。在每个板中加入星形胞菌素(staurosporin)作为抑制的对照。
4.CDK2/细胞周期蛋白E：
用IMAC(固定金属亲合性色谱)提纯CDK2/细胞周期蛋白E-(His)6络合物
使用两种分别带有对CDK2和细胞周期蛋白E(后者在C-端基上带有六-组氨酸的标记)人类编码序列的重组杆状病毒，用来对昆虫细胞Sf21进行协同感染。在开始协同感染之后2～3天，通过离心收集这些细胞，然后保存在-40℃下直至使用。在使细胞解冻和机械溶解之后，用在镍上的亲合性色谱(IMAC)提纯上清液中存在的络合物并将其保存在-80℃。
在96孔规格的板上进行CDK2/细胞周期蛋白E的闪烁板试验
使用涂有链酶抗生物素(streptavidine)的96孔规格板来测定化合物对CDK2/细胞周期蛋白E激酶的活性。
为了进行此试验，将生物素化的肽底物，即蛋白质片段pRb，(生物素酰基-SACPLNLPLQNNHTAADMYLSPVRSPKKKGSTTROH)以1mM的浓度溶解于激酶缓冲液(HEPES/NaOH 50mM、NaCl 1mM、MgCl25mM，pH值7.5)中，以构成在-20℃下以110μL一份的形式保存的基础溶液。试验这一天，将一份此溶液解冻并在含有1mM的二硫苏糖醇的激酶缓冲液中稀释，立即加入到缓冲液中，得到14.3μM的浓度。将70μL此溶液加入到闪烁板的每个孔中，得到最终的底物浓度为10μM，此时酶反应导致反应介质的最终体积为100μL(参见下面)。
在分离管中，在DMSO中从浓度10mM的基础溶液制备具有不同浓度的抑制剂(本发明的化合物)的中间稀释液。如此将其稀释到1000μM、333.3μM、111.1μM、37.03μM、12.35μM、4.11μM和1.37μM。将这些溶液中每一种1μL(或对于对照组是1μL DMSO)转移到测试板的孔中。
然后在每个孔中加入19μL三磷酸腺苷(ATP)和ATPy33P混合物在ATP总浓度为5.26μM，33P的浓度为52.6μCi/mL的激酶缓冲液中的溶液。每个孔中加入10μL CDK2/细胞周期蛋白E在含有1mM二硫苏糖醇(或对于反应空白是10μL含有1mM二硫苏糖醇的激酶缓冲液)激酶缓冲液中的200nM溶液来激发酶反应。
在加入每一种试剂之后，每个孔的最终体积是100μL，底物的最终浓度是10μM，抑制剂的最终浓度是10μM、3.33μM、1.11μM、0.37μM、0.123μM、0.041μM和0.014μM(按照中间稀释液浓度不同)，ATP的最终浓度是1μM，33P的最终量是1μCi/孔，CDK2/细胞周期蛋白E络合物的最终浓度是20nM。
在加入各种试剂之后，在650rpm的轨道搅拌下于30℃下培养测试板。
当培养结束时，每个孔用300μL的PBS(磷酸盐缓冲盐水，pH值＝7.4，没有Ca和Mg，编号10010-015，Gibco BRL)洗涤3次。使用Packard Topcount.NXT设备通过闪烁计数对加入到肽中的33P进行定量。通过测定能够将酶的活性降低50％的抑制剂浓度(Cl50)来评价本发明产物的抑制活性。
5.Tie2
使用从作为模型的人胎盘中分离的cDNA，通过PCR方法产生与胞内区776-1124的氨基酸相应的人类Tie2编码序列。将此序列引入呈融合GST蛋白质形式的杆状病毒的表达载体pFastBacGT中。
在提纯到大约80％均匀度的GST-Tie 2存在下，在通过Tie 2使PLC磷酸化的测试中确定分子的抑制剂效果。底物由以融合GST形式表达的PLC的SH2-SH3片段构成。
在含有10mM的MgCl2、10mM的MnCl2、1mM的DTT、10mM的甘油磷酸酯的20mM pH值7.2的MOPS缓冲液中测定Tie2的激酶活性。在保持在冰中的96孔闪烁板中，每个孔放入由70μL含有100ngGST-Tie 2酶的激酶缓冲液构成的反应混合物。然后加入10μL在DMSO稀释到最大浓度10％的待测试分子。对于给定的浓度，每一次测试进行4次试验。通过加入20μL含有2μg GST-PLC、2μM冷ATP和1μCi33P[ATP]的溶液引发反应。在37℃下培养1h以后，加入200mM的一个体积(100μL)的EDTA使反应终止。在除去培养缓冲液之后，孔用300μL PBS洗涤3次。用MicroBeta 1450 Wallac测量放射性。
计算出Tie2活性的抑制能力，表示为相对于在没有化合物的情况下测定的对照组活性的抑制能力的百分数。
按照本发明实施例的产物一般对各种激酶都具有活性，特别是对Tie 2和Aurora-2，据估计抑制激酶活性50％的浓度为3～500nM。
| 实施例 | Au2IC50(nM) | CDK2IC50(nM) | FAKIC50(nM) | KDRIC50(nM) | TIE2IC50(nM) |
| 01 | 37 | 234 | 279 | 158 | 40 |
| 02 | 75 | 991 | 3525 | 508 | 518 |
| 03 | 20 | 142 | 816 | 310 | 3 |
| 04 | 99 | 586 | 2896 | 1634 | 22 |
| 05 | 15 | 394 | 48 | 141 | 11 |
| 06 | 15 | 184 | 740 | 288 | 48 |
| 07 | 24 | 959 | 9639 | 2048 | 162 |
| 08 | 53 | 3700 | 8300 | 5400 | 130 |
| 09 | 27 | 54 | 3019 | 344 | 138 |
| 10 | 9130 | ＞10000 | ＞10000 | ＞10000 | |
| 11 | 90 | 199 | 1136 | 1250 | 229 |
| 12 | 140 | 290 | 10000 | 2033 | 2307 |
| 13 | 69 | ||||
| 14 | 76 | 780 | 5881 | 1660 | 290 |
| 15 | 108 | 2260 | ＞10000 | ＞10000 | 4084 |
| 16 | 2200 | ＞10000 | ＞10000 | ＞10000 | 2211 |
| 17 | 770 | ||||
| 18 | 20 | 33 | 7570 | 228 | 33 |
| 19 | 55 | 113 | 121 | 33 |
| 20 | 96 | 7772 | 1415 | 96 | |
| 21 | 74 | 4467 | 133 | 214 | |
| 22 | 64 | 152 | 174 | 44 | |
| 23 | 24 | 249 | 442 | 30 | |
| 24 | 24 | 142 | 364 | 22 | |
| 25 | 41 | 578 | |||
| 26 | 730 | 3236 | |||
| 27 | 134 | 7561 | 1883 | 353 | |
| 28 | 25 | 74 | 1444 | 205 | 119 |
| 29 | 17 | 128 | 122 | 13 | |
| 30 | 15 | 87 | 4539 | 215 | 90 |
| 31 | 19 | 125 | 9990 | 296 | 99 |
| 32 | 26 | 1496 | 10000 | 999 | 119 |
| 33 | 10 | 291 | 316 | 577 | 17 |
Claims (11)
1.如下通式(I)的产物：
其中：
-W表示选自共价键或O的基团；
-X表示共价键、基团-C＝O-NRa-、NRa-C＝O、-(CH2)n-、-CH＝CH-、-C≡C-、-NRa-、S、O、-SO2-、-SO、-CO、-COO，其中Ra表示H或基团(C1～C4)烷基，其可任选与R1形成环，而且其中n＝0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12；
-R1表示H(除了当X＝-SO2-、-SO-时)、烷基、环烷基、芳基、杂芳基；其中R1可任选被取代；
-R和R2相同或不同，表示H或选自烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、羟基、烷氧基和芳氧基的基团，其中R和R2任选被取代；
-Y表示共价键或选自-C＝O-NRa-、-C＝O-O-、-C＝O-、-(CH2)n-、-SO2-的基团，其中Ra选自H、(C1～C4)烷基和与R3相连接以形成环的(C1～C4)烷基；
-R3选自H(除了当Y是-C＝O-O-或-SO2-时)、烷基、环烷基、芳基和杂芳基；R3可任选被取代；
-R4、R6和R7相同或不同，可独立地选自H、卤素、(C1～C4)烷基、(C1～C4)烷氧基、氰基、-N(Rb)Rc、-C＝O-N(Rb)Rc、-N(Rb)-CO-Rc-，其中Rb和Rc独立地选自H、(C1～C4)烷基和(C3～C6)环烷基；
只是不包括如下化合物：
2.按照权利要求1的产物，其特征在于W是O。
3.按照前面各项权利要求中任何一项的产物，其特征在于，该芳基和杂芳基独立地选自：
(i)含有0～4个选自O、N和S的杂原子的单环基团，和
(ii)含有如下成分的稠合双环基团：
(a)含有5、6、7或8个链节并含有0～4个选自O、N和S的杂原子的单环基团，此基团与下面的(b)稠合
(b)含有5或6个链节并含有0～3个选自O、N和S的杂原子的另外的环。
4.按照权利要求3的产物，其特征在于，该芳基或杂芳基独立地选自：苯基、吡啶基、嘧啶基、三嗪基、吡咯基、咪唑基、噻唑基、呋喃基、噻吩基、吲哚基、吲唑基、氮杂吲唑基、异苯并呋喃基、异苯并噻吩基、苯并咪唑基、苯并唑基、苯并噻唑基、芳基亚乙烯基、芳基酰胺基、芳基甲酰胺基、芳烷基胺、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、喹唑啉基、萘啶基、三唑基或四唑基。
5.按照权利要求4的产物，其特征在于，该芳基或杂芳基独立地选自：苯基、吡咯基、任选取代的吲哚基和芳基亚乙烯基。
6.按照权利要求1的产物，其中X表示共价键，R1表示杂环基，特别是吲哚基。
7.按照权利要求1的产物，其中R2表示(C1～C4)烷基。
8.按照权利要求1的产物，其中Y是键，R3是H。
9.按照前面各项权利要求中之一项的产物在人类治疗方面的应用。
10.按照权利要求9的产物，在用来治疗与出现癌相关的激酶比如Tie2、Aurora-2的不规律有关的疾病的应用。
11.作为药物的如下通式(I)的产物：
其中：
-W表示选自共价键或O的基团；
-X表示共价键、基团-C＝O-NRa-、NRa-C＝O、-(CH2)n-、-CH＝CH-、-C≡C-、-NRa-、S、O、-SO2-、-SO、-CO、-COO，其中Ra表示H或基团(C1～C4)烷基，其可任选与R1形成环，而且其中n选自区间[0～12]，包括两个端值；
-R1表示H(除了当X＝-SO2-、-SO-时)、烷基、环烷基、芳基、杂芳基；其中R1可任选被取代；
-R和R2相同或不同，表示H或选自烷基、环烷基、芳基、杂芳基、羟基、烷氧基和芳氧基的基团，其中R和R2任选被取代；
-Y表示共价键或选自-C＝O-NRa-、-C＝O-O-、-C＝O-、-(CH2)n-、-SO2-的基团，其中Ra选自H、(C1～C4)烷基和与R3相连接以形成环
-R3选自H(除了当Y是C＝O-O或SO2时)、烷基、环烷基、芳基和杂芳基；R3可任选被取代；
-R4、R6和R7相同或不同，可独立地选自H、卤素、(C1～C4)烷基、(C1～C4)烷氧基、氰基、-N(Rb)Rc、-C＝O-N(Rb)Rc、-N(Rb)-CO-Rc-，其中Rb和Rc独立地选自H、(C1～C4)烷基和(C3～C6)环烷基。
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