CN1871015A - 免疫调节性寡糖 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种增强哺乳动物尤其是新生儿中的免疫系统以及治疗和/或预防免疫系统相关病症的方法，所述方法包括给予酸性寡糖和中性寡糖。本发明还提供适用于上述方法的食物组合物。

Description

免疫调节性寡糖
发明领域
本发明涉及治疗和/或预防免疫疾病的方法，所述方法包括给予寡糖。
发明背景
免疫系统具有不同的与抗原反应的可能方式。对于免疫反应类型的决定性步骤是不同T细胞亚群的刺激。所谓的Th1细胞主要产生刺激细胞免疫反应的细胞因子(IFN-γ、IL-12、IL-2)。相反，Th2细胞主要产生IL-4、IL-5和IL-10。这些细胞因子增强IgE介导的变态反应和炎症，并认为其也参与嗜酸性粒细胞(即接受伊红染色的白细胞)的募集、增殖、分化、维持和存活，这能导致嗜酸性粒细胞增多。嗜酸性粒细胞增多是许多Th2介导的疾病例如哮喘、变态反应和特应性皮炎的标志。Th1和Th2相关细胞因子起拮抗作用，在正常生理情况下Th1/Th2反应处于良好控制的平衡中。Th1和Th2反应都不占优势。如果失衡，Th1或Th2免疫反应之一占主导则在一些病理状态中起作用或者是造成这些病理状态的原因。
过度的Th1免疫反应最终可能导致自身免疫，个体自身物质的分解，如胰岛素依赖型糖尿病、多发性硬化病、克隆氏病、寻常天疱疮、自身免疫性血小板减少性紫癜、自身免疫性溶血性贫血。
过度的Th2反应导致对不应该导致任何免疫反应的外来成分的极度敏感，例如变态反应及相关疾病如特应性皮炎、哮喘、职业性哮喘、食物过敏(例如牛奶过敏、苹果过敏、花生和其它坚果过敏、羽扇豆过敏)、过敏性鼻炎(例如花粉过敏)、尘螨过敏和其它形式的超敏反应如全身性变态反应和急性荨麻疹。
已发现在任何类型的应激情况下均有Th2反应增加和/或Th1反应减少的相对改变，因此其导致了向Th2反应的偏移。这些相对改变例如在免疫衰老、癌症患者、慢性感染、运动过度、社会冲突或高工作负荷、接触毒性成分或辐射和代谢性应激导致的营养不良、恶病质或食欲缺乏引起的营养不良中观察到。(Janeway(2001)Immunobiology 5th edition，Garland publishing ISBN 0-8153-3642-x；Roitt等(2001)Immunology 6th edition，Harcourt publishing limited，ISBN-0-7234-31892)。
双歧(Bifidogenic)作用被认为是例如减少和/或预防细菌感染的原因。已知寡糖能显示双歧作用。
已描述酸性寡糖具有有利的作用。WO 02/42484描述了酯化果胶水解产物用于治疗感染和/或预防有害物质与真核细胞的粘附。DE4223613描述了通过厌氧发酵使用例如果胶酶从果胶样物质中制备不饱和糖醛酸苷(uronide)的方法。该制备可用于重金属中毒的医学治疗。
酸性和中性寡糖的组合物也已被描述。EP 1105002描述了包含反式半乳寡糖、菊糖和半乳糖醛酸寡糖的益生元(prebiotic)组合物。US 6576251描述了用于预防与生物体粘附有关的症状例如流行性感冒的唾液酸寡糖(二唾液酸乳-N-四糖(disialolacto-N-tetraose))和半乳寡糖的组合。WO 01/60378描述了用于防止病原体与上皮表面粘附的不饱和果胶水解产物与中性寡糖的混合物。
已知包含脂类、蛋白质、糖类、维生素和选自含有半乳糖的二糖或多糖及其衍生物、含有N-乙酰神经氨酸的糖类及其衍生物中至少一种的婴儿制剂(EP 1332759)。
发明内容
至今，认为给予(酸性)寡糖通过刺激双歧菌群和防止病原体与上皮组织的粘附而提供有利的作用。
本发明的发明人现已令人惊奇地发现，免疫系统功能的全身性标记物受给予(酸性)寡糖的影响。该发现开辟了寡糖应用的新领域，尤其是用于至多能通过免疫系统调节来治疗的疾病。“调节(modulation或modulating)”是指特定的特性、质量、活性、物质或反应的增加或降低。换言之，令人惊奇地发现酸性寡糖和中性寡糖能够刺激全身性免疫反应。
本发明的发明人还令人惊奇地发现，不同的寡糖对免疫系统有不同的刺激作用。已发现酸性寡糖的给予(相对地)刺激Th1反应并降低Th2细胞因子的释放(例如IL-10、IL-4和IL-5)。还发现酸性寡糖和中性寡糖的组合给予协同刺激免疫系统，尤其是通过降低Th2反应和增加Th1反应来协同刺激免疫系统。
在本发明的另一方面，发现寡糖可有利地用于恢复Th1/Th2反应的失衡，并用于治疗和预防与Th1/Th2失衡相关的病症。
尤其是，令人惊奇地发现任选与中性寡糖组合的酸性寡糖的给予能够恢复Th1/Th2失衡和/或维持有利的Th1/Th2平衡。还发现优选与中性寡糖组合的酸性寡糖能够刺激Th1反应。本发明的发明人还认为，酸性和中性寡糖的给予刺激Th3，即增强调控性T细胞活性。认为刺激Th1反应部分地通过抑制Th2反应实现。
因此，本发明提供用于如下的方法：
-调节免疫系统；
-刺激免疫系统的发育，尤其是在年龄为0-1岁的人中；
-增强全身性免疫反应；
-治疗和/或预防Th1/Th2失衡；和/或
-治疗和/或预防至多能通过免疫系统调节治疗的疾病；
其中所述方法包括给予酸性寡糖，优选酸性和中性寡糖，更优选酸性寡糖和两种在化学上不同的中性寡糖。
换言之，因此可以说，酸性寡糖对炎症细胞因子(Th1反应)具有有益作用。另外，酸性寡糖和中性寡糖的组合对炎症细胞因子(Th2反应)具有有益作用。
具体实施方式
本发明涉及治疗和/或预防哺乳动物中免疫系统相关病症的方法，所述方法包括给予所述哺乳动物包含治疗有效量的酸性寡糖和中性寡糖的组合物，即酸性寡糖和中性寡糖在生产组合物中的用途，所述组合物用于治疗和/或预防哺乳动物中免疫系统相关病症。
另一方面，本发明涉及酸性寡糖和中性寡糖在生产用于增强哺乳动物中免疫反应的组合物中的用途和/或调节免疫反应的方法中的用途。
另一方面，本发明涉及包含5-50en％脂类、10-60en％蛋白质、15至90en％碳水化合物、酸性寡糖和中性寡糖并优选热量密度为0.5-2kcal/ml的食物组合物，其中所述酸性寡糖包含至少一个末端糖醛酸单元；并且所述中性寡糖选自纤维二糖、纤维糊精、B-环糊精、不消化的糊精、龙胆寡糖、葡寡糖、异麦芽寡糖、异麦芽糖、异麦芽三糖(isomaltriose)、潘糖、明串珠菌二糖、帕拉金糖(palatinose)、theanderose、D-塔格糖、D-来苏-己酮糖、乳蔗糖、α-半乳寡糖、β-半乳寡糖、反式半乳寡糖、乳果糖、4′-半乳糖基乳糖(4′-galatosyllactose)、合成的半乳寡糖、左聚糖型果聚糖、菊糖型果聚糖、1f-β-呋喃果糖基霉菌赤藓醛糖(1f-β-fructofuranosylnystose)、木寡糖(xylooligosaccharide)、lafinose、乳蔗糖和阿拉伯寡糖(arabinooligosaccharide)。
另一方面，本发明涉及治疗和/或预防免疫系统相关病症的方法，所述病症选自自身免疫性病症、遗传或条件诱导的免疫缺陷、接种支持(support for vaccination)、1型变态反应、2型变态反应和3型变态反应，所述方法包括给予所述哺乳动物包含治疗有效量的酸性寡糖的组合物。
一些认为相当大部分地由Th2免疫反应、IL-4/IL-5细胞因子诱导和/或嗜酸性粒细胞增多(以及对根据本发明的治疗的相应反应)引起/介导的疾病包括哮喘、过敏性鼻炎、系统性红斑狼疮、Ommen氏综合征(嗜酸性粒细胞增多综合征)。这些是非病毒和非肿瘤性Th2介导的疾病的实例，它们用本发明的方法有效治疗显然不可能已被预见。特别优选的本发明的方法用于治疗与嗜酸性粒细胞增多相关的疾病，例如哮喘和过敏性鼻炎。
对特定病症的治疗有效量可由本领域技术人员经剂量探索试验(dose-finding study)常规地确定。
免疫系统相关病症
现已发现，给予优选与中性寡糖组合的酸性寡糖给个体提供有益的全身作用。全身是指作为血液和/或淋巴(全身)循环的结果来影响整个机体。
一方面，本发明提供调节和/或增强免疫系统的方法，所述方法包括给予酸性和中性寡糖。该方法可合适地用于平衡Th1/Th2反应的方法，尤其是通过刺激Th1反应而平衡Th1/Th2反应的方法。因此，包含本发明寡糖的组合物是本发明的一部分，认为所述寡糖例如刺激免疫系统成熟、通过增强免疫系统来增强对病原体的抵抗力和/或支持免疫系统。
另一方面，本发明提供治疗和/或预防免疫系统相关病症的方法，所述方法包括给予所述哺乳动物包含治疗有效量的酸性寡糖的组合物。
另一方面，本发明提供增强哺乳动物中免疫反应的方法，所述方法包括给予哺乳动物包含任选与中性寡糖组合的酸性寡糖的组合物。
尤其令人惊奇地，肠道给予本发明寡糖提供有益的全身作用。因此，本发明的方法优选包括肠道给予，更优选口服给予酸性寡糖或酸性和中性寡糖。
在另外的实施方案中，本发明的方法涉及将寡糖给予婴儿，优选年龄0-6岁的人，优选年龄0至1岁的人。由于该群体中有特定的Th1/Th2比率失衡(在许多病例中Th2占优势)，所以本发明的方法可适用于恢复该群体中的失衡。还认为给予优选与中性寡糖组合的酸性寡糖促进新生儿(胃)肠道成熟，使得本发明的方法和组合物尤其适于给予早产婴儿。在优选实施方案中，本发明的方法涉及刺激0-6岁，优选0至1岁的人个体中免疫系统的成熟。
下面描述可合适地用于本发明方法的组合物的其它优选组分特征，例如蛋白质、碳水化合物、脂类、重量克分子渗透浓度、粘度和热量密度。
免疫系统相关病症优选选自自身免疫性病症、遗传或条件诱导的免疫缺陷、接种支持、1型变态反应、2型变态反应、3型变态反应和4型变态反应。
可合适地治疗的自身免疫性病症包括系统性红斑狼疮、慢性肾小球肾炎、结节性多动脉炎、链球菌感染后(poststreotococcal)急性肾小球肾炎、格雷夫斯病、重症肌无力、胰岛素抵抗性糖尿病、桥本氏甲状腺炎、溶血性贫血、恶性贫血、肺出血肾炎综合征、寻常天疱疮、自身免疫性血小板减少性紫癜、急性风湿热、混合型原发性冷球蛋白血症、自身免疫性恶性(preniciopus)贫血、自身免疫性阿狄森氏病、白癜风、低血糖症、新生儿狼疮疹、IDDM(胰岛素依赖型糖尿病)、类风湿性关节炎、多发性硬化病、银屑病、硬皮病、克隆氏病、IBD(炎症性肠病)、神经病变，优选胰岛素抵抗性糖尿病。
可合适地治疗的遗传或条件诱导的免疫缺陷病症包括免疫衰老、孤独症、慢性疾病例如癌症、COPD(慢性阻塞性肺病)、AIDS、关节炎、糖尿病、食欲缺乏、恶病质、吞咽困难、肾衰竭、放射引起的营养不良、患慢性溃疡和应激尤其是社会压力后应激的患者、慢性感染或吸烟、空气污染、放射、化学治疗。
由于在患有获得性免疫缺陷综合征(AIDS)和/或人免疫缺陷病毒(HIV)感染的个体中刺激免疫系统尤其重要，所以在优选实施方案中，本发明特别提供治疗和/或预防AIDS和/或HIV感染的方法，所述方法包括肠道给予本发明的酸性寡糖，优选与本发明的中性寡糖组合。本发明还提供治疗和/或预防患有AIDS和/或HIV感染的个体中的腹泻的方法，所述方法包括肠道给予本发明的酸性寡糖，优选与本发明的中性寡糖组合。本发明的(酸性)寡糖优选在营养基质，即包含脂类、蛋白质和碳水化合物的组合物中提供给患有AIDS和/或HIV感染的个体。
可合适地治疗的变态反应包括1型变态反应：遗传性过敏症、哮喘、花粉症、湿疹、食物过敏、药物过敏；2型变态反应：新生儿溶血症、自身免疫性溶血性贫血、强直性脊柱炎、急性前葡萄膜炎；3型变态反应：阿图斯反应、血清病；4型变态反应：迟发型超敏反应、接触性过敏、乳糜泻。
还发现本发明的方法可合适地用于支持接种处理，例如增强接种处理的效果。这些包括在术语免疫系统相关病症中。在接种前、接种时和/或接种后优选(经口)给予优选与中性寡糖组合的酸性寡糖。尤其是白喉-破伤风-百日咳(diptheria-tetanu-spertussis)、脊髓灰质炎疫苗、麻疹/腮腺炎/风疹、肺炎球菌缀合物、嗜血杆菌B缀合物、乙型肝炎、甲型肝炎、水痘、流感的接种效果可合适地被增强。
优选地，本发明的方法涉及治疗和/或预防营养不良、遗传性过敏症、哮喘或COPD。
本发明还涉及酸性寡糖在生产组合物中的用途，所述组合物用于治疗和/或预防选自自身免疫性病症、遗传或条件诱导的免疫缺陷(优选不是AIDS)、接种支持、1型变态反应、2型变态反应和3型变态反应的免疫系统相关病症。
酸性寡糖
术语酸性寡糖是指包含至少一个酸性基团的寡糖，该酸性基团选自N-乙酰神经氨酸、N-乙醇酰神经氨酸、游离或酯化的羧酸、硫酸基团和磷酸基团。该酸性寡糖优选是聚己糖。优选地，至少一个前述的酸性基团位于酸性寡糖的末端己糖。优选地，酸性寡糖具有如图1所示的结构，其中末端己糖(左侧)优选包含双键。优选地，酸性寡糖含有在末端己糖单元的羧酸，其中所述羧酸基团可为游离的或酯化的。WO 01/60378和/或WO 02/42484中提供了制备可合适地用于本发明的方法和组合物中的酯化果胶水解产物的方法，这两篇文献在此引入本文作为参考。
除了末端己糖单元外，己糖单元优选是糖醛酸单元，更优选是半乳糖醛酸单元。在这些单元上的羧酸基团可以是游离的或(部分)酯化的，优选至少10％是甲基化的(参见下文)。
图1聚合的酸性寡糖
Figure A20048003124300131
其中：
R优选选自氢、羟基或酸性基团，优选羟基；且
选自R2、R3、R4和R5中的至少一个表示N-乙酰神经氨酸、N-乙醇酰神经氨酸、游离或酯化的羧酸、硫酸基团和磷酸基团，而R2、R3、R4和R5中其余的表示羟基和/或氢。优选选自R2、R3、R4和R5中的一个表示N-乙酰神经氨酸、N-乙醇酰神经氨酸、游离或酯化的羧酸、硫酸基团和磷酸基团，其余的表示羟基和/或氢。更优选地，选自R2、R3、R4和R5中的一个表示游离或酯化的羧酸，而R2、R3、R4和R5中其余的表示羟基和/或氢；且
n是整数，指己糖单元的数目(参见下文的聚合度)，其可以是任意己糖单元。合适地，n是1-5000的整数。
优选地，己糖单元是糖醛酸单元。
最优选地，R1、R2和R3表示羟基，R4表示氢，R5表示羧酸，n是1-250，优选1-10的任意整数，并且己糖单元是半乳糖醛酸。
在本发明方法中使用的优选酸性寡糖的检测、测量和分析已在本发明申请人的涉及酸性寡糖的在先专利申请即WO 0/160378中给出，该文献在此引入本文作为参考。
优选地，酸性寡糖具有一个末端糖醛酸单元，优选两个末端糖醛酸单元，其可以是游离的或酯化的。优选地，末端糖醛酸单元选自半乳糖醛酸、葡糖醛酸、古洛糖醛酸(guluronic acid)、艾杜糖醛酸、甘露糖醛酸、核酮糖醛酸(riburonic acid)和alturonic acid。这些单元可以是游离的或酯化的。在更优选的实施方案中，末端己糖单元具有双键，其优选位于末端己糖单元的C4和C5位置之间。优选地，末端己糖单元之一包含双键。末端己糖(例如糖醛酸)优选具有图2的结构。
图2优选的末端己糖酸基团
其中：
R优选选自氢、羟基或酸性基团，优选羟基(见上文)；且
选自R2、R3、R4和R5中的至少一个表示N-乙酰神经氨酸、N-乙醇酰神经氨酸、游离或酯化的羧酸、硫酸基团和磷酸基团，而R2、R3、R4和R5中其余的表示羟基和/或氢。优选地，选自R2、R3、R4和R5中的一个表示N-乙酰神经氨酸、N-乙醇酰神经氨酸、游离或酯化的羧酸、硫酸基团和磷酸基团，而R2、R3、R4和R5中其余的表示羟基和/或氢。更优选地，选自R2、R3、R4和R5中的一个表示游离或酯化的羧酸，而R2、R3、R4和R5中其余的表示羟基和/或氢；且n是整数，指己糖单元的数目(参见下文的聚合度)，其可以是任意己糖单元。合适地，n是1-5000的整数，表示己糖单元的数目，所述己糖单元优选是糖醛酸，更优选是半乳糖醛酸单元。在这些单元上的羧酸基团可以是游离的或(部分)酯化的，优选至少部分甲基化的。更优选地，R2和R3表示羟基，R4表示氢，而R5表示游离或酯化的羧酸。
在另外的实施方案中，使用酸性寡糖的混合物，其具有不同的DP和/或包含不饱和和饱和的末端己糖单元。酸性寡糖的末端己糖单元优选至少5％，更优选至少10％，更优选至少25％是不饱和的己糖单元(参见例如图2)。由于每个单个的酸性寡糖优选仅包含一个不饱和的末端己糖单元，所以优选不超过50％的末端己糖单元是不饱和的己糖单元(即包含双键)。
酸性寡糖的混合物优选含有以己糖单元总量计2-50％的不饱和己糖单元，优选10至40％。
在本发明方法中使用的酸性寡糖的聚合度(DP)为1至5000，优选为1至1000，更优选为2至250，更优选为2至50，最优选2至10。如果使用具有不同聚合度的酸性寡糖的混合物，该酸性寡糖混合物的平均DP优选为2至1000，更优选为3至250，更优选为3至50。参见图1，其中“n”和末端单元的总和(即n+1)表示聚合度。现已发现，如果酸性寡糖以液体形式给予，较低DP的寡糖改善口味，并导致粘度下降的产物。酸性寡糖可以是同质或异质的碳水化合物。
本发明中使用的酸性寡糖优选由果胶、果胶酸盐、藻酸盐、软骨素、透明质酸、肝素、乙酰肝素、细菌糖类(bacterial carbohydrate)、唾液酸聚糖(sialoglycan)、岩藻聚糖、岩藻寡糖或角叉菜胶制备，优选由果胶或藻酸制备。酸性寡糖可通过WO 01/60378中描述的方法制备，该文献在此引入作为参考。
藻酸盐是包含β-(1→4)-连接D-甘露糖醛酸和α-(1→4)-连接L-古洛糖醛酸残基的线性非支链聚合物，其具有宽的平均分子量范围(100-100000个残基)。藻酸盐的合适来源包括海藻和细菌性藻酸盐。
果胶分为两大类：高甲氧基化果胶，其特征在于甲氧基化度超过50％，以及低甲氧基化果胶，其特征在于甲氧基化度低于50％。如本文使用的“甲氧基化度”(也称作DE或“酯化度”)用于指聚半乳糖醛酸链中包含的游离羧酸基团被酯化(例如通过甲基化)的程度。本发明的酸性寡糖优选由高甲氧基化果胶制备。
酸性寡糖的特征优选为甲氧基化度大于20％，优选大于50％，更优选大于70％。优选地，酸性寡糖的甲基化度大于20％，优选大于50％，更优选大于70％。
酸性寡糖优选以每日10mg至100g的量给予，更优选每日100mg至50g，更优选每日0.5-20g。
中性寡糖
本发明所用的术语中性寡糖是指聚合度为超过2个单糖单元的糖类，更优选为超过3个，更优选为超过4个，最优选为超过10个，其通过人上消化道(小肠和胃)中的酸或消化酶的作用在肠道中不被或仅部分被消化，但通过人肠道菌群而发酵，并优选不含酸性基团。中性寡糖在结构上(化学上)不同于酸性寡糖。
本发明所用的术语中性寡糖优选指聚合度低于60个单糖单元的糖类，优选低于40个，更优选低于20个，最优选低于10个。
术语单糖单元是指具有闭环结构的单元，优选己糖，例如吡喃糖或呋喃糖形式。
中性寡糖优选包含以其中所包含的单糖单元的总数计至少90％，更优选至少95％的选自如下的单糖单元：甘露糖、阿拉伯糖、果糖、岩藻糖、鼠李糖、半乳糖、β-D-吡喃半乳糖、核糖、葡萄糖、木糖及其衍生物。
合适的中性寡糖优选通过肠道菌群发酵。优选地，寡糖选自纤维二糖(4-O-β-D-吡喃葡糖基-D-葡萄糖)、纤维糊精((4-O-β-D-吡喃葡糖基)n-D-葡萄糖)、B-环糊精(α-1-4-连接D-葡萄糖环状分子；α-环糊精六聚物、β-环糊精七聚物和γ-环糊精八聚物)、不消化的糊精、龙胆寡糖(β-1-6连接葡萄糖残基，一些是1-4连接的混合物)、葡糖寡糖(α-D-葡萄糖的混合物)、异麦芽寡糖(线性α-1-6-连接葡萄糖残基，具有一些1-4连接)、异麦芽糖(6-O-α-D-吡喃葡糖基-D-葡萄糖)、异麦芽三糖(6-O-α-D-吡喃葡糖基-(1-6)-α-D-吡喃葡糖基-D-葡萄糖)、潘糖(6-O-α-D-吡喃葡糖基-(1-6)-α-D-吡喃葡糖基-(1-4)-D-葡萄糖)、明串珠菌二糖(5-O-α-D-吡喃葡糖基-D-吡喃果糖苷)、帕拉金糖或异麦酮糖(isomaltulose)(6-O-α-D-吡喃葡糖基-D-果糖)、theanderose(O-α-D-吡喃葡糖基-(1-6)-O-α-D-吡喃葡萄糖-(1-2)-B-D-呋喃果糖苷)、D-塔格糖、D-来苏-己酮糖、乳蔗糖(O-β-D-吡喃半乳糖基-(1-4)-O-α-D-吡喃葡糖基-(1-2)-β-D-呋喃果糖苷)、包括棉子糖、木苏糖和其它大豆寡糖的α-半乳寡糖(O-α-D-吡喃半乳糖基-(1-6)-α-D-吡喃葡糖基-β-D-呋喃果糖苷)、β-半乳寡糖或反式半乳寡糖(β-D-吡喃半乳糖基-(1-6)-[β-D-吡喃葡糖基]n-(1-4)α-D葡萄糖)、乳果糖(4-O-β-吡喃半乳糖基-D-果糖)、4’-半乳糖基乳糖(O-D-吡喃半乳糖基-(1-4)-O-β-吡喃葡糖基-(1-4)-D-吡喃葡萄糖)、合成的半乳寡糖(新半乳二糖、异半乳二糖、galsucrose、异乳糖I、II和III)、左聚糖型果聚糖(β-D-(2→6)-呋喃果糖基)nα-D-吡喃葡萄苷)、菊糖型果聚糖(β-D-(2→1)-呋喃果糖基)nα-D-吡喃葡萄苷)、1f-β-呋喃果糖基霉菌赤藓醛糖(β-D-(2→1)-呋喃型果糖基)nB-D-呋喃果糖苷)、木寡糖(B-D-(1→4)-木糖)n)、lafinose、乳蔗糖和阿拉伯寡糖。
根据进一步的优选实施方案，中性寡糖选自果聚糖、果寡糖(fructooligosaccharide)、不消化的糊精、半乳寡糖(包括反式半乳寡糖)、木寡糖、阿拉伯寡糖、葡寡糖、甘露寡糖、岩藻寡糖(fucooligosaccharide)及其混合物。最优选的中性寡糖选自果寡糖、半乳寡糖和反式半乳寡糖。
合适的寡糖及它们的生产方法在Laere K.J.M.(Laere，K.J.M.，Degradation of structurally different non-digestible oligosaccharides byintestinal bacteria：glycosylhydrolases of Bi.adolescentis.PhD-thesis(2000)，Wageningen Agricultural University，Wageningen，TheNetherlands)中有进一步的描述，其全部内容在此引入作为参考。
例如，反式半乳寡糖(TOS)以商标VivinalTM(Burculo DomoIngredients，Netherlands)出售。
不消化的糊精，其可通过玉米淀粉的热解生产，包含如在天然淀粉中存在的α(1→4)和α(1→6)糖苷键，并包含1→2和1→3连接和左旋葡聚糖。由于这些结构特征，不消化的糊精含有形成良好的并被人消化酶部分水解的支链颗粒。
许多其它不消化的寡糖的商业来源是容易得到并为本领域技术人员熟知。例如，反式半乳寡糖可从Yakult Honsha Co.Tokyo，Japan得到。大豆寡糖可从由Ajinomoto U.S.A.Inc.，Teaneck，N.J.配销的Calpis Corporation获得。
在另外的优选实施方案中，本发明的方法包括给予两种在化学上不同的寡糖。现已发现酸性寡糖与两种在化学上不同的中性寡糖组合给予提供最佳的作用。优选地，本发明的方法包括给予下述物质：
-酸性寡糖(参见上文)；
-半乳糖基中性寡糖(＞50％的单糖单元是半乳糖)，优选选自半乳寡糖和反式半乳寡糖；和
-果糖和/或葡糖基中性寡糖(＞50％的单糖单元是果糖和/或葡萄糖，优选果糖)，优选菊糖、果聚糖和/或果寡糖，最优选长链果寡糖(平均DP为10至60)。
该组合物尤其适合给予0至1岁的婴儿。
在另外的实施方案中，本发明的方法包括给予两个在结构上(在化学上)不同的寡糖，其中两个在结构上(在化学上)不同的寡糖的差别在于它们的糖苷连接类型。
优选地，所述方法包括给予两种在化学上不同的中性寡糖，所述在化学上不同的寡糖具有不同的DP和/或不同的平均DP，优选不同的平均DP。在另一个实施方案中，给予具有不同平均DP的在化学上不同的中性寡糖提供更优的免疫调节作用。优选地，半乳糖基中性寡糖的平均DP为2至10，果糖和/或葡糖基中性寡糖的平均DP为10至60。
中性寡糖优选以每日10mg至100g的量给予，优选每日100mg至50g，更优选每日0.5至20g。
酸性和中性寡糖的协同作用
已发现酸性和中性寡糖具有协同免疫刺激作用。因此，优选地，本发明的方法包括给予治疗有效量的酸性寡糖和中性寡糖。
酸性和中性寡糖的混合物优选以每日10mg至100g的量给予，优选每日100mg至25g，更优选每日0.5至20g。
酸性寡糖和中性寡糖的优选组合包含图2的酸性寡糖，其中R表示氢、羟基或酸性基团，优选羟基；且选自R2、R3、R4和R5中的一个表示游离或酯化的羧酸，而R2、R3、R4和R5中其余的表示羟基和/或氢；和半乳寡糖和/或反式半乳寡糖。
优选地，酸性和中性寡糖以重量比0.01∶1至1∶0.01给予，优选以重量比0.1∶1至1∶0.1给予。
LCPUFA
在优选的实施方案中，本发明的方法还包括给予长链多不饱和酸(LCPUFA)。由于认为寡糖与LCPUFA的组合通过不同于酸性寡糖或中性寡糖的机制作用于免疫系统，所以认为寡糖与LCPUFA的组合协同起作用。本发明的方法优选包括每日给予0.1至100g的LCPUFA，更优选每日给予1至25g的LCPUFA。
食物
发现酸性寡糖尤其是酸性和中性寡糖的协同混合物可有利地应用于食物，例如婴儿食物和临床食物。这些食物优选包含脂类、蛋白质和碳水化合物，并且优选以液体形式给予。在本发明中使用的术语“液体食物”包括干食物(例如粉末状食物)，其附有关于混合所述干食物混合物与合适的液体(例如水)的说明书。
因此，本发明还涉及营养组合物，所述营养组合物优选包含5-50en％脂类、10-60en％蛋白质、15-90en％碳水化合物以及本发明的优选与中性寡糖组合的酸性寡糖。优选地，本发明的营养组合物优选包含10至30en％脂类、15至40en％蛋白质和25至75en％碳水化合物(en％是能量百分数的缩写，表示各个组分占制剂总热量的相对量)。
这些食物优选是液体形式并具有有限的粘度。发现包含任选与中性寡糖组合的酸性寡糖的食物提供足够低粘度的液体营养物，这使得它可以作为例如可通过管子或吸管喂食，同时保持低粘度的液体婴儿食物和临床食物应用。在优选的实施方案中，本发明组合物的粘度在20℃和剪切速率为100s-1下低于600mPas，优选低于250mPas，更优选低于50mPas，最优选低于25mPas。无论在本文中何时使用到术语粘度，其指根据下面的方法测定的物理参数：
粘度可使用Carri-Med CSL流变仪测定。所使用的几何体为圆锥形(6cm 2deg丙烯酸圆锥体)，在板与几何体之间的间距设置为55μm。使用的线性连续斜线剪切速率为20秒内从0至150s-1。
优选使用植物脂类。植物脂优选至少一种选自大豆油、棕榈油、椰子油、红花油、向日葵油、玉米油、低芥酸菜子油(canola oil)和卵磷脂。如果需要，也可加入动物脂例如乳脂。
在营养制剂中使用的蛋白质优选选自非人动物蛋白质(例如乳蛋白质、肉蛋白质和卵蛋白质)、植物蛋白质(例如大豆蛋白质、小麦蛋白质、米蛋白质和豌豆蛋白质)、游离氨基酸及其混合物。尤其优选牛乳蛋白质例如酪蛋白和乳清蛋白。
可将可消化碳水化合物源加入营养制剂中。它优选提供该营养组合物的约40％至约80％的能量。可使用任何合适的碳水化合物(源)，例如蔗糖、乳糖、葡萄糖、果糖、玉米糖浆干粉和麦芽糖糊精及其混合物。
本发明的组合物优选基本上不含有活性的双歧菌(bifinogenicbacteria)。
在接受液体食物的许多婴儿和患病个体中，大便不规则(例如硬便、便量不足、腹泻)是主要问题。发现通过给予于液体食物中的本发明的寡糖可减少大便问题，它们的重量克分子渗透浓度为50至500m Osm/kg，更优选100至400m Osm/kg。
鉴于以上，液体食物不具有过多的热量密度但是仍提供足够的热量给个体也是重要的。因此，液体食物优选具有0.1至2.5kcal/ml热量密度，更优选具有0.5至1.5kcal/ml热量密度。
婴儿制剂
发现本发明的组合物可有利地应用于婴儿制剂。这些婴儿制剂优选包含脂类、蛋白质和碳水化合物，并优选以液体形式给予。在本发明中使用的术语“液体食物”包括干食物(例如粉末状食物)，其附有关于混合所述干食物混合物与合适的液体(例如水)的说明书。
因此，本发明还涉及婴儿制剂，所述婴儿制剂优选包含5至60en％脂类、5至40en％蛋白质、15至90en％碳水化合物以及本发明的寡糖和LC-PUFA的组合。优选地，本发明的婴儿制剂包含30至60en％脂类、6至15en％蛋白质和25至75en％碳水化合物(en％是能量百分数的缩写，表示各个组分占制剂总热量的相对量)。
优选使用植物脂和选自鱼油和含ω-3的植物油、藻类油或细菌油中至少一种的组合。
在营养制剂中使用的蛋白质优选选自非人动物蛋白质(例如乳蛋白质、肉蛋白质和卵蛋白质)、植物蛋白质(例如大豆蛋白质、小麦蛋白质、米蛋白质和豌豆蛋白质)、游离氨基酸及其混合物。尤其优选牛乳蛋白质例如酪蛋白和乳清蛋白。
可将可消化碳水化合物源加入营养制剂中。它优选提供该营养组合物的约40％至约80％的能量。可使用任何合适的碳水化合物(源)，例如蔗糖、乳糖、葡萄糖、果糖、玉米糖浆干粉和麦芽糖糊精及其混合物。
根据特别优选的实施方案，本发明的婴儿制剂包含7至12en％蛋白质、40至55en％碳水化合物和35至50en％脂肪。由于该组合物尤其适合用于减少婴儿中的变态反应，所以婴儿制剂中的蛋白质优选选自水解的乳蛋白质(例如水解的酪蛋白或水解的乳清蛋白)、植物蛋白质和/或氨基酸。这些蛋白质的使用进一步减少婴儿的变态反应。
在接受液体食物的许多婴儿和患病个体中，大便不规则(例如硬便、便量不足、腹泻)是主要问题。发现通过给予于液体食物中的本发明的寡糖可减少大便问题，它们的重量克分子渗透浓度为50至500m Osm/kg，更优选100至400m Osm/kg。
在特别优选的实施方案中，本发明还提供特别适合在本发明方法中使用的组合物。该组合物与天然人乳在功能和分子结构上具有高的相似性。因此，该组合物尤其适合作为婴儿制剂。本发明的组合物包含脂肪、碳水化合物、蛋白质；且每100ml液体产品含有0.5至1g可溶性不消化的寡糖，优选0.7至0.9g/100ml。而且，本发明的组合物每100ml液体产品包含0.4至0.7g反式半乳寡糖(含有β-连接糖的不消化的[半乳糖]n-葡萄糖；其中n是1至60的整数，即2、3、4、5、6、……、59、60；优选n选自2、3、4、5、6、7、8、9或10)；和0.01至0.1g的菊糖(含有至少10个β-连接果糖单元链的不消化的多糖碳水化合物)；和0.04至0.3g如图2所示的酸性寡糖。本发明的液体产品适合于由消费者从粉末状产品制备。本发明的液体产品优选含有这些成分，并具有如本文中所描述的特征，且可有利地在本文所述的方法中使用。
寡糖
酸性寡糖优选以组合物总干重计以超过0.1重量％，优选超过0.2重量％，更优选超过0.5重量％，更优选超过1重量％的量包含在根据本发明的组合物中。尽管给予相当大量的寡糖一般不会导致不希望的副作用，不过本发明组合物中的寡糖含量优选低于20重量％，更优选低于10重量％，更优选低于5重量％。
中性寡糖以组合物总干重计以超过0.1重量％，优选超过0.2重量％，更优选超过0.5重量％，更优选超过1重量％的量包含在根据本发明的组合物中。尽管给予相当大量的寡糖一般不会导致不希望的副作用，不过本发明组合物中的寡糖含量优选低于20重量％，更优选低于10重量％，更优选低于5重量％。
发现本发明的组合物协同刺激免疫系统。因此，本发明的组合物可合适地用于治疗和/或预防感染的方法，所述方法包括口服给予人优选婴儿本发明的组合物。通过刺激免疫系统和促进健康肠道菌群，本发明的组合物还具有全身性抗感染作用。因此，优选与本发明的中性寡糖组合的本发明的酸性寡糖可有利地用于治疗和/或预防肠道感染和/或呼吸道感染。在另外的实施方案中，所述寡糖以在上文所述的食物基质中的形式口服给予。
因为免疫系统的刺激在患有癌症的个体中，尤其是经受或已经经受化疗、放疗的患者和(如在癌症晚期通常发生的)恶病质患者中特别重要，因此本发明提供治疗这些个体的方法，所述方法包括肠道给予本发明的酸性寡糖，优选与本发明的中性寡糖组合。本发明的(酸性)寡糖优选以营养基质即包含脂肪、蛋白质和碳水化合物的组合物的形式提供给这些个体。
                         实施例
实施例1
实验建立
测试含有任选与中性寡糖组合的酸性寡糖的饮食对迟发型超敏(DTH)反应的作用，迟发型超敏反应是Th1免疫反应的参数，通过局部抗原激发后测量耳肿胀的增加来确定。
所用的平均DP为2至10的酸性寡糖(AcO1)通过WO 02/42484中描述的方法(参见实施例1)获得。对含有以饮食总重计1重量％、2.5重量％、5重量％和10重量％AcO1的饮食进行测试。含有半乳寡糖(GOS)(Vivinal-GOSTM(Borculo Domo Ingredients，Netherlands)和果寡糖(FOS)(Raftiline HPTM，Orafti，Tienen，Belgium)的中性寡糖混合物以GOS∶FOS的重量比为9∶1使用。对含有以饮食总重计1、2.5和5重量％GF的饮食进行测试。用含有以饮食总重计1重量％GF和1重量％AcO1的饮食测试酸性和中性寡糖(GF和AcO1)组合的作用。
所有的数据表示作相对于对照值的百分数，即补充寡糖组与接受对照饮食(不含寡糖)组相比的相对值。
动物与饮食
雌性6周龄C57B1/6小鼠(Harlan Nederland BV，Horst，theNetherlands)在规律的12小时光/暗条件下分组豢养。组的大小为每组10只，阴性对照组3只动物。给予动物半合成饮食(Research DietServices，Wijk bij Duurstede，the Netherlands)。对照饮食按照AIN93G说明制备(Reeves等人(1993)Development and Testing of the AIN93purified diets for rodents：results on growth kidney calcification and bonemineralisation in rats and mice.J Nutrition 123(11)：1923-31)，补充有寡糖的饮食以这些说明为基础。通过以重量计用总碳水化合物交换寡糖来保持补充饮食中碳水化合物含量的恒定。单独的碳水化合物成分按照它们在饮食中的通常比例分别被替换。通常饮食中的碳水化合物由玉米淀粉(总重的40％)、糊精化玉米淀粉(13.2％)、蔗糖(10％)和纤维素(5％)组成。
接种实验方案
在适应新的豢养和饮食2至4周后，开始接种。在第0日，在接种前收集血样。在第1日，通过皮下给予进行第一次接种。3周后收集血样(第21日)，并进行加强接种(第22日)。在加强注射九日(第31日)，用Digimatic外径测微器测量基础(basal)耳厚(Mitutoyo，Veenendaal，the Netherlands)，并通过在小鼠耳缘i.c.(皮内)注射抗原溶液诱导迟发型超敏(DTH)反应。24小时后(第32日)，测量DTH反应，取血样并处死小鼠。分离脾并制备以用于离体再刺激。
接种液由抗原溶液和Stimune佐剂(Specol，Cedi-diagnostics BV，Lelystad，the Netherlands)1∶1混合组成，100μl i.c.(皮内)注射。抗原溶液为Influvac 2002/2003(Solvay Pharmaceuticals，Weesp，theNetherlands)在PBS中的1∶100稀释液。Influvac是三价蛋白疫苗，其包含三种不同流感株的3×30μg/ml血细胞凝集素。
对于DTH反应，在小鼠双耳i.c.注射25μl透析的Influvac作为DTH激发。
细胞培养
使用细筛细胞过滤器(Becton Dickinson，Erembodegem，Belgium)从脾中分离脾细胞。通过在冰上温育5分钟溶解红细胞。用不含酚红的培养基洗涤后，进行细胞计数(Coulter Counter，Beckman Coulter，theNetherlands)，并保存在冰上。用0.1μg/ml透析的Influvac作为刺激物进行培养。将细胞以每孔1*106个细胞接种于96孔培养板中。培养基由具有HEPES缓冲液的RPMI-1640和具有10％胎牛血清(FCS)的2mML-谷氨酰胺(Invitrogen，Merelbeke，Belgium)组成。在37℃和5％CO2下培养5日。然后收集上清液并在-80℃下冷冻至分析。利用3H-胸苷掺入测定平行培养物中的细胞增殖，3H-胸苷在最后18小时以0.4μCu/孔加入培养物中。5日后，用Filtermate收集器(Perkin Elmer，Zaventem，Belgium)收集细胞，并用Micro-Beta计数器计数。每孔测量放射性衰变1分钟，并且记录每分钟的计数(cpm)作为增殖速度的量度。
细胞因子用Influvac刺激的培养物的上清液进行分析。使用Bio-Plex系统测量IL-2、IL-5、IL-10和IL-γ，该系统具有针对所提及的细胞因子的常规混合的珠组(beadset)(Bio-Rad，Veenendaal，theNetherlands)。根据制造商的说明书测量细胞因子。根据制造商的说明书，使用Pharmingen OptEIA小鼠IL-4试剂盒(Becton Dickinson，Erembodegem，Belgium)通过ELISA测量IL-4。
结果
酸性寡糖的DTH反应
含有剂量1重量％、2.5重量％和5重量％AcO1的饮食诱导DTH反应统计学显著性增加，显示剂量依赖性增加(见表1)。所观察到的效果表明酸性寡糖在本发明方法中的有利用途。
                          表1
  饮食中酸性寡糖的重量％  DTH反应(％)
  0(对照)  100
  1  122
  2.5  136*
  5  140*
*表示与对照组有显著性差异(P＜0.05)
酸性和中性寡糖的DTH反应
1重量％GF和1重量％AcO1的组合诱导DTH统计学显著性增加(见表2)。由于比单独含有酸性或中性寡糖的饮食的DTH反应相比效果显著提高，因此这些结果表明给予酸性和中性寡糖提供协同作用。所观察到的效果表明酸性和中性寡糖的组合在本发明方法中的有利用途。
                          表2
  饮食中寡糖的重量％  DTH反应(％)
  0(对照)  100
  1重量％GF  132*
  1重量％AcO1  122
  2.5重量％GF  129*
  2.5重量％AcO1  136*
  1重量％GF和1重量％AcO1  159*
*表示与对照组有显著性差异(P＜0.05)
酸性寡糖的Influvac特异性增殖
给予含有2.5重量％和5重量％酸性寡糖(AcO1)的饮食诱导对离体Influvac特异性增殖的显著性降低作用(见表3)。所观察到的效果表明酸性寡糖在本发明方法中的有利用途。
酸性和中性寡糖的组合的Influvac特异性增殖
给予1％GF和1重量％AcO1的组合诱导对抗原特异性增殖的显著性降低作用(见表3)。由于与单独含有酸性或中性寡糖的饮食的DTH反应相比效果显著改善，因此这些结果表明给予酸性和中性寡糖提供协同作用。所观察到的效果表明酸性和中性寡糖的组合在本发明方法中的有利用途。减少的增殖表明本发明方法的降低Th2反应的作用和Th1/Th2平衡作用。
                          表3
  饮食中寡糖的重量％   Influvac特异性增殖(％)
  0(对照)   100
  1重量％GF   100
  1重量％AcO1   92
  2.5重量％AcO1   61*
  5重量％AcO1   54*
  1重量％GF和1重量％AcO1   50*
*表示与对照组有显著性差异(P＜0.05)
Th1/Th2平衡：给予酸性寡糖后细胞因子的特征(profile)
细胞因子的特征用influvc特异性脾细胞培养物上清液进行测量。数据表示作相对于接种对照组(即未接受寡糖)的百分数。与对照组相比，含有2.5重量％和5重量％AcO1的饮食导致Th2相关细胞因子IL-4、IL-5和IL-10的减少，而Th1相关细胞因子IL-2增加，INF-γ没有显著性下降(见表4)。这些结果表明酸性寡糖的Th1/Th2平衡作用，并表明酸性寡糖在本发明方法中例如用于治疗和/或预防相对低Th1免疫性的疾病的有利用途。
Th1/Th2平衡：给予酸性和中性寡糖后细胞因子的特征
与对照组相比，给予1重量％GT和1重量％AcO1的组合导致Th2相关细胞因子IL-4、IL-5和IL-10减少，而Th1相关细胞因子IL-2和INF-γ没有下降(见表4，其中数据表示作相对于接种对照组(即未接受寡糖)的百分数)。这些结果表明酸性和中性寡糖组合的Th1/Th2平衡作用，并表明酸性寡糖在本发明方法中例如用于治疗和/或预防相对低Th1免疫性的疾病的有利用途。特别是IL-4/IFN比例反映Th2/Th1平衡。换言之，低比例表明对Th1的刺激和/或对Th2的抑制，且在任何情况下均表明本发明的寡糖的Th1-Th2平衡作用。
                          表4
  饮食中寡糖的重量％                                细胞因子
  IFN-γ(％)   IL2(％)   IL10(％)   IL4(％)   IL5(％)   TL4/IFN-γ比例
  0(对照)   100   100   100   100   100   100
  1重量％AcO1   100   196*   70   83   72   85
  2.5重量％AcO1   75   116   58*   55   66   75
  5重％AcO1   69   161*   44*   33*   56*   51*
  1重量％GF和1重量％AcO1   93   123   45*   44*   55*   45*
*表示与对照组有显著性差异(P＜0.05)

Claims (22)

1、酸性寡糖和中性寡糖在生产组合物中的用途，所述组合物用于用以治疗和/或预防哺乳动物中免疫系统相关病症的方法中，所述方法包括给予所述哺乳动物包含治疗有效量的酸性寡糖和中性寡糖的组合物。
2、酸性寡糖和中性寡糖在生产组合物中的用途，所述组合物用于用以增强哺乳动物中免疫反应的方法和/或用以调节哺乳动物中免疫系统的方法中，所述方法包括给予所述哺乳动物包含酸性寡糖和中性寡糖的组合物。
3、根据权利要求1的用途，其中所述免疫系统相关病症选自自身免疫性病症、遗传或条件诱导的免疫缺陷、接种支持、1型变态反应、2型变态反应、3型变态反应和4型变态反应。
4、根据前述权利要求之任一项的用途，其中所述酸性寡糖包含至少一个末端糖醛酸单元。
5、根据权利要求4的用途，其中所述糖醛酸单元选自半乳糖醛酸、葡糖醛酸、古洛糖醛酸、艾杜糖醛酸、甘露糖醛酸、核酮糖醛酸和alturonic acid。
6、根据前述权利要求之任一项的用途，其中所述末端己糖单元具有下述结构：
Figure A2004800312430002C1
其中：
R选自氢、羟基或酸性基团；且选自R2、R3、R4和R5中的至少一个表示N-乙酰神经氨酸、N-乙醇酰神经氨酸、游离或酯化的羧酸、硫酸基团和磷酸基团，而R2、R3、R4和R5中其余的表示羟基和/或氢；且n为1-5000的整数。
7、根据权利要求4的用途，其中所述末端糖醛酸具有如权利要求7中所示的结构，并且其中R表示选自氢、羟基或酸性基团中的一个；且选自R2、R3、R4和R5中的一个表示游离或酯化的羧酸；而R2、R3、R4和R5中其余的表示羟基和/或氢。
8、根据前述权利要求之任一项的用途，其中所述酸性寡糖的聚合度为1至250，优选1至10。
9、根据前述权利要求之任一项的用途，其中所述中性寡糖选自纤维二糖、纤维糊精、B-环糊精、不消化的糊精、龙胆寡糖、葡寡糖、异麦芽寡糖、异麦芽糖、异麦芽三糖、潘糖、明串珠菌二糖、帕拉金糖、theanderose、D-塔格糖、D-来苏-己酮糖、乳蔗糖、α-半乳寡糖、β-半乳寡糖、反式半乳寡糖、乳果糖、4′-半乳糖基乳糖、合成的半乳寡糖、左聚糖型果聚糖、菊糖型果聚糖、1f-β-呋喃果糖基霉菌赤藓醛糖、木寡糖、lafinose、乳蔗糖和阿拉伯寡糖。
10、根据权利要求9的用途，其中所述中性寡糖选自半乳寡糖、果寡糖和反式半乳寡糖。
11、根据前述权利要求之任一项的用途，其中所述组合物包含两种在化学上不同的中性寡糖，一种选自半乳糖基中性寡糖，而另一种选自果糖基寡糖和/或葡糖基寡糖。
12、权利要求11的用途，其中所述组合物包含果寡糖和选自反式半乳寡糖和半乳寡糖中的至少一种。
13、根据前述权利要求之任一项的用途，其中所述方法包括肠道给予所述组合物。
14、根据前述权利要求之任一项的用途，其中将所述组合物给予0-1岁的人。
15、一种食物组合物，所述食物组合物包含5至50en％脂类、10至60en％蛋白质、15至90en％碳水化合物、酸性寡糖和中性寡糖，其中所述酸性寡糖包含至少一个末端糖醛酸单元，所述中性寡糖选自纤维二糖、纤维糊精、B-环糊精、不消化的糊精、龙胆寡糖、葡寡糖、异麦芽寡糖、异麦芽糖、异麦芽三糖、潘糖、明串珠菌二糖、帕拉金糖、theanderose、D-塔格糖、D-来苏-己酮糖、乳蔗糖、α-半乳寡糖、β-半乳寡糖、反式半乳寡糖、乳果糖、4′-半乳糖基乳糖、合成的半乳寡糖、左聚糖型果聚糖、菊糖型果聚糖、1f-β-呋喃果糖基霉菌赤藓醛糖、木寡糖、lafinose、乳蔗糖和阿拉伯寡糖。
16、根据权利要求14的组合物，其中所述酸性寡糖具有下式结构：
Figure A2004800312430004C1
其中：
R选自氢、羟基或酸性基团；且选自R2、R3、R4和R5中的至少一个表示游离或酯化的羧酸，而R2、R3、R4和R5中其余的表示羟基和/或氢，n为1-5000的整数：表示己糖单元的数目，所述己糖单元为糖醛酸。
17、根据权利要求14或15之任一项的组合物，其中所述组合物的热量密度为0.1至2.5kcal/ml。
18、根据权利要求14-17之任一项的组合物，其中所述组合物的粘度在20℃和剪切速率为100s-1下低于250mPas。
19、液体组合物，所述液体组合物包含脂肪、碳水化合物和蛋白质，且每100ml所述液体组合物包含0.5至1g可溶性不消化的寡糖，包含0.4至0.7g含有β-连接糖的不消化的[半乳糖]n-葡萄糖；其中n是1至60的整数，即2、3、4、5、6、......、59、60；0.01至0.1g的包含至少10个β-连接果糖单元链的不消化的多糖碳水化合物；和0.04至0.3g酸性寡糖，所述酸性寡糖具有如权利要求16中定义的结构。
20、酸性寡糖在生产组合物中的用途，所述组合物用于用以治疗和/或预防哺乳动物中免疫系统相关病症的方法中，所述免疫系统相关病症选自自身免疫性病症、遗传或条件诱导的免疫缺陷、接种支持、1型变态反应、2型变态反应和3型变态反应，所述方法包括给予所述哺乳动物包含治疗有效量的如权利要求22中定义的酸性寡糖的组合物。
21、酸性寡糖在生产组合物中的用途，所述组合物用于用以治疗和/或预防患有癌症的个体，尤其是经受或已经经受化疗、放射的癌症患者和恶病质癌症患者的方法中，所述方法包括给予所述个体包含治疗有效量的如权利要求22中定义的酸性寡糖的组合物。
22、具有下式的酸性寡糖在生产组合物中的用途，所述组合物用于治疗和/或预防AIDS和/或HIV感染，
Figure A2004800312430005C1
其中：
R选自氢、羟基或酸性基团；且
选自R2、R3、R4和R5中的至少一个表示N-乙酰神经氨酸、N-乙醇酰神经氨酸、游离或酯化的羧酸、硫酸基团和磷酸基团，而R2、R3、R4和R5中其余的表示羟基和/或氢；且
n为1-5000的整数。
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