CN1863550A - 促分泌素样生长素释放肽在癌症恶病质中以及在刺激食欲方面的应用 - Google Patents

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CN1863550A
CN1863550A CNA2004800292358A CN200480029235A CN1863550A CN 1863550 A CN1863550 A CN 1863550A CN A2004800292358 A CNA2004800292358 A CN A2004800292358A CN 200480029235 A CN200480029235 A CN 200480029235A CN 1863550 A CN1863550 A CN 1863550A
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伯吉特·H·兰格
克里斯琴·汉森
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Abstract

一个方面，本发明涉及促分泌素化合物用于制备药剂的用途，所述药剂用于在需要这种治疗的个体中预防或治疗癌症恶病质。另一方面，本发明涉及生长素释放肽样化合物用于制备药剂的用途，通过为个体施用皮下剂量的所述药剂在个体中预防或治疗恶病质。又一方面，本发明涉及生长素释放肽样化合物或其药学上可接受的盐用于制备药剂的用途，通过为个体施用皮下剂量的所述药剂在个体中刺激食欲。此外，本发明涉及一些新的生长素释放肽样化合物及其用途，以及包含所述新的生长素释放肽样化合物的药物组合物和药盒。

Description

促分泌素样生长素释放肽在癌症恶病质中 以及在刺激食欲方面的应用
本申请中所引用的所有专利和非专利文献此处以其整体引入本文作为参考。
技术领域
第一个方面，本发明涉及促分泌素如生长素释放肽(生长素释放肽)样化合物用于生产药剂的用途，所述药剂用于治疗或预防恶病质、刺激食欲、进食和/或增重，还涉及通过给需要的个体施用促分泌素如生长素释放肽样化合物，以治疗或预防恶病质，刺激食欲、进食和/或增重的方法。
另一方面，本发明涉及促分泌素如生长素释放肽样化合物用于生产药剂的用途，所述药剂用于治疗或预防癌症恶病质，还涉及通过给需要的个体施用促分泌素如生长素释放肽样化合物，以治疗或预防癌症恶病质的方法。
另一方面，本发明涉及促分泌素如生长素释放肽样化合物用于生产药剂的用途，所述药剂用于治疗或预防脂肪代谢障碍，还涉及通过给需要的个体施用促分泌素如生长素释放肽样化合物，以治疗或预防脂肪代谢障碍的方法。
另一方面，本发明涉及生长素释放肽样化合物、包含生长素释放肽样化合物的药物组合物、和包含所述药物组合物的医药包装制品。
背景技术
生长素释放肽是一种生物活性肽，有关生长素释放肽的最早描述涉及GH分泌的控制，但后来发现它是食欲、进食和自稳平衡(homeostasis)的主要调节物(1；2)。类似于许多其它的生物活性肽，生长素释放肽可能同时作为激素、旁分泌物质和神经递质起作用。
以独特的“反向”顺序弄清了生长素释放肽、其受体和通过该受体起作用的合成化合物的故事。在80年代，发现来自一系列阿片样肽的合成六肽能够从分离的垂体细胞释放生长激素(GH)(3)。由于此活动独立于生长激素释放激素受体，因而几家制药公司以该六肽GH促分泌素(GHS)及其推定受体为基础，从事药物开发项目。结果在90年代中期，描述了若干个系列的有效的肽及非肽GH促分泌素(4-6)。而仅仅几年后，就最终克隆了这些人工GH促分泌素赖以通过其起作用的受体，并显示其为7TM G蛋白连接的受体家族成员(7；8)。1999年，最终发现了该受体的内在配体，激素生长素释放肽(9)。产生生长素释放肽的主要位置是胃，在胃黏膜的传统内分泌细胞中发现了这些肽。
生长素释放肽在进餐前状态下由此处分泌，产生急速而短暂的生长素释放肽血浆水平升高，在进餐开始前1-2小时开始，进餐开始后持续短暂的时间。由于生长素释放肽是唯一在外周产生的食欲(食欲促进)物质，相信生长素释放肽血浆水平的升高对进餐的启动是至关重要的。
在其作为关键的食欲启动物的角色中，从GI道黏膜的自分泌细胞释放的生长素释放肽同时作为局部旁分泌物质和中枢激素起作用，就像此后在涉及癌症恶病质部分所讨论的那样。
先前，曾通过连续灌输270分钟的方式施用生长素释放肽，其显示可以通过静脉施用生长素释放肽来获得食物摄入的增加。剂量为5pmol/kg/min(Wren等，JCEM 2001；86(12)5992-5995)。最近，显示在癌症恶病质患者中，灌输生长素释放肽90分钟可以使进食增加30％。(Abstract P09 DigestiveHormones，Appetite and Energy Balance，Baylis and Starling meeting，London，June 2003)。
这些研究显示生长素释放肽的肠胃外施用可以使正常个体和丧失食欲的患者增加食欲。然而，鉴于实际操作的原因和生理学方面的原因，长时间灌输的方案很显然不是最佳的施用方式。
发明概述
本发明人已发现，皮下施用尤其是在进餐前皮下施用时，获得足够的生长素释放肽效果是可能的，其确保了对进餐前状态的最相似的模拟。
相应地，本发明涉及生长素释放肽样化合物用于制备药剂的用途，所述药剂用在个体中，通过给所述个体施用皮下剂量的所述药剂以
a)预防或治疗恶病质，和/或
b)刺激食欲，
其中所述生长素释放肽样化合物包含式I所定义的结构
Z1-(X1)m-(X2)-(X3)n-Z2，其中
Z1为任选存在的保护基，
每个X1独立地选自氨基酸，其中所述的氨基酸选自天然的和合成的氨基酸，
X2是选自天然的和合成的氨基酸的任意的氨基酸，所述的氨基酸用大疏水基优选酰基或者脂肪酸修饰，
每个X3独立地选自氨基酸，其中所述的氨基酸选自天然的和合成的氨基酸，
其中一个或多个的X1和X3任选可由大疏水基优选酰基或者脂肪酸修饰，
Z2为任选存在的保护基，
m为1-10的整数
n为0或1-35的整数。
另一方面，本发明涉及促分泌素化合物用于制备药剂的用途，所述药剂用于在个体中通过在进餐前或进餐期间给所述个体施用所述药剂剂量以
a)预防或治疗恶病质，和/或
b)治疗或预防脂肪代谢障碍，和/或
c)刺激食欲，和/或
d)刺激进食，和/或
e)刺激增重，和/或
f)增加身体脂肪量，
包括上述的任何组合，
所述的药剂剂量包含相当于0.3μg至600mg生长素释放肽量的促分泌素或其盐，所述的促分泌素为生长素释放肽样化合物，其包含上述式I所定义的结构。
优选组合为：a)；b)；c)；d)；e)；和f)单独；以及a)+b)；a)+c)；a)+d)；a)+e)；a)+f)；b)+c)；b)+d)；b)+e)；b)+f)；a)+c)+d)；a)+c)+e)；a)+c)+f)；a)+d)+e)；a)+d)+f)；a)+e)+f)；a)+c)+d)+e)；a)+c)+d)+f)；a)+d)+e)+f)；a)+c)+d)+e)+f)；b)+c)+d)；b)+c)+e)；b)+c)+f)；b)+d)+e)；b)+d)+f)；b)+e)+f)；b)+c)+d)+e)；b)+c)+d)+f)；b)+d)+e)+f)；和b)+c)+d)+e)+f)。
本发明进一步涉及为所述个体皮下施用有效剂量的包含促分泌素的药剂以
a)预防或治疗恶病质，和/或
b)刺激食欲，
的方法，其中促分泌素优选为生长素释放肽样化合物，更优选为包含上述式I所定义的结构的生长素释放肽样化合物。
在另一方面，本发明涉及在个体中于进餐前为所述个体施用有效剂量的包含促分泌素的药剂，以
a)预防或治疗恶病质，和/或
b)刺激食欲，
的方法，其中促分泌素优选为生长素释放肽样化合物，更优选为包含上述式I所定义的结构的生长素释放肽样化合物。
另一方面，本发明进一步涉及促分泌素，尤其是生长素释放肽样化合物，包括人生长素释放肽在治疗或预防尤其是由癌症亚型引起的癌症恶病质中的用途，所述癌症亚型诱导REE升高的高度恶病质，例如肺癌、胰腺癌。在优选实施方案中，本发明涉及促分泌素如生长素释放肽样化合物，如包含上述式I所定义的生长素释放肽样化合物用于制备药剂的用途，所述药剂用于治疗或预防癌症恶病质。
本发明显著降低了发展为癌症恶病质的风险，而与其起因无关，例如与癌症恶病质的特定治疗学起因或引起癌症恶病质的治疗学因素无关。
另一方面，本发明涉及用于监测根据本发明的生长素释放肽样化合物的使用效果的标志物的用途。相应地，在优选实施方案中，本发明涉及监测施用本发明的生长素释放肽样化合物的效果的方法，包括测定一种或多种标志物，尤其是选自IGF-I、IGFBP-3、ALS(酸标记的)、甲状腺激素、性激素和白蛋白的标志物，更优选选自IGF-I、IGFBP-3、ALS(酸标记的)的标志物，更优选为IGF-I。这些标志物在恶病质患者体内含量均较低，而预期在用生长素释放肽治疗后将会升高。
另一方面，本发明进一步涉及促分泌素，尤其是生长素释放肽样化合物，包括人生长素释放肽在治疗或预防脂肪代谢障碍中的用途，无论是获得性的还是先天性的，局部性的还是全身性的。在优选的实施方案中，本发明涉及促分泌素，如生长素释放肽样化合物，如包含式I(如上所述)所定义的结构的生长素释放肽样化合物用于制备药剂的用途，所述药剂用于治疗或预防脂肪代谢障碍。本发明显著降低了发展为脂肪代谢障碍的风险，而与其起因无关，例如与脂肪代谢障碍的特定治疗学起因或引起脂肪代谢障碍的治疗学因素无关。因此，本发明也扩展到以抗逆转录病毒试剂的方式对HIV/AIDS患者进行治疗。方便起见，术语“抗逆转录病毒的治疗”此处用于指以抗逆转录病毒试剂的方法对HIV/AIDS患者进行治疗，所述抗逆转录病毒试剂通常包括这些试剂的组合，所述制剂通常是用于治疗此情况的那些制剂。
在本发明的另一个方面，本发明涉及与此处所指出的治疗和预防相关指征的新的化合物。相应地，另一个方面，本发明涉及生长素释放肽样化合物，其中所述的生长素释放肽样化合物由式I所定义
Z1-(X1)m-(X2)-(X3)n-Z2，其中
Z1为任选存在的保护基
每个X1独立地选自氨基酸，其中所述的氨基酸选自天然的和合成的氨基酸，
X2是选自天然的和合成的氨基酸的任意的氨基酸，所述的氨基酸被酰基所修饰，其中所述酰基选自C7酰基，C9酰基，和C11酰基，例如选自C9酰基和C11酰基。
每个X3独立地选自氨基酸，其中所述的氨基酸选自天然的和合成的氨基酸，
Z2为任选存在的保护基，
其中一个或多个的X1和X3任选可由大疏水基优选酰基或者脂肪酸修饰，
m为或1-10的整数
n为0或1-35的整数。
另外，本发明涉及包含上述定义的生长素释放肽样化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体、媒介和/或赋形剂的药物组合物，以及所述化合物用于制备药剂的用途，该药剂尤其用于
a)恶病质的预防或治疗，和/或
b)脂肪代谢障碍的预防或治疗，和/或
c)刺激食欲，和/或
d)刺激进食，和/或
e)刺激增重，和/或
f)增加身体脂肪量，
包括上述的任何组合，
其中优选组合为：a)；b)；c)；d)；e)；和f)单独；以及a)+b；a)+c)；a)+d)；a)+e)；a)+f)；b)+c)；b)+d)；b)+e)；b)+f)；a)+c)+d)；a)+c)+e)；a)+c)+f)；a)+d)+e)；a)+d)+f)；a)+e)+f)；a)+c)+d)+e)；a)+c)+d)+f)；a)+d)+e)+f)；a)+c)+d)+e)+f)；b)+c)+d)；b)+c)+e)；b)+c)+f)；b)+d)+e)；b)+d)+f)；b)+e)+f)；b)+c)+d)+e)；b)+c)+d)+f)；b)+d)+e)+f)；和b)+c)+d)+e)+f)。
在本发明的优选方面，所述生长素释放肽样化合物与能够增加生长素释放肽样化合物半衰期的物质一起施用，例如通过将生长素释放肽样化合物掺入到脂质体、微团(micelle)、免疫刺激化合物(iscom)、和/或微球(microsphere)或者其它转运分子，尤其是来保护修饰的氨基酸不被脱酰基化。相应地，本发明进一步涉及包含上述定义的化合物或其药学上可接受盐以及药学上可接受的载体、媒介和/或赋形剂的药物组合物，所述的组合物进一步包含转运分子，例如脂质体、微团、和/或微球。
另一个方面，本发明涉及包含一个或多个剂量单位的药物组合物的医药包装制品，所述药物组合物包含上述定义的化合物或其药学上可接受盐以及药学上可接受的载体、媒介和/或赋形剂。
在优选实施方案中，所述医药包装制品包含具有预确定剂量单位量的上述定义的药物组合物。
一个方面，本发明涉及包含药物组合物的医药包装制品，所述药物组合物包含如上定义的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体、媒介和/或赋形剂，所述包装制品具有1至3个剂量单位。
另一个方面，本发明涉及包含药物组合物的医药包装制品，所述药物组合物包含如上定义的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体、媒介和/或赋形剂，所述的包装制品具有7至28个剂量单位。
在本发明的所有实施方案中，所述药剂可以通过药团注射(bolusinjection)或通过快速连续灌输施用，例如优选持续少于120分钟的灌输，例如少于90分钟，例如少于60分钟，例如少于45分钟，例如少于30分钟，例如少于25分钟，例如少于20分钟，例如少于15分钟，例如少于12分钟，例如少于10分钟，例如少于8分钟，例如少于6分钟，例如少于5分钟，例如少于4分钟，例如少于3分钟，例如少于2分钟，例如少于1分钟。
Y-形的导液管可用于快速灌输。可通过一个导液管入口注射生长素释放肽样化合物溶液，如果需要的话，可选通过其它的入口注射盐水(saline)。
可以在进餐前或进餐期间按照下述更详细的方法进行药团注射或快速连续灌输。在一个优选实施方案中，所述药剂作为药团施用。优选皮下施用所述药团。
发明详述
定义
亲合力(affinity)：受体与其配体之间结合的力量，例如抗体与其抗原之间结合的力量。
氨基酸残基：由多肽在其肽键处化学消化(水解)而形成的氨基酸。这里所述的氨基酸残基优选为“L”异构形式。然而，所述氨基酸包括每种氨基酸例如L-氨基酸、D-氨基酸、α-氨基酸、β-氨基酸、λ-氨基酸、天然氨基酸和合成的氨基酸或类似物，只要所述多肽保留了所需的功能特性。NH2指存在于多肽氨基端的游离氨基。COOH指存在于多肽羧基端的游离羧基。与标准多肽一致，氨基酸残基的缩写列于下面的对应表：
符号对应表
1-字母    3-字母    氨基酸
            Y         Tyr        酪氨酸
            G         Gly        甘氨酸
            F         Phe        苯丙氨酸
            M         Met        蛋氨酸
            A         Ala        丙氨酸
            S         Ser        丝氨酸
            I         Ile        异亮氨酸
            L         Leu        亮氨酸
T    Thr    苏氨酸
V    Val    缬氨酸
P    Pro    脯氨酸
K    Lys    赖氨酸
H    His    组氨酸
Q    Gln    谷氨酰胺
E    Glu    谷氨酸
Z    Glx    Glu和/或Gln
W    Trp    色氨酸
R    Arg    精氨酸
D    Asp    天冬氨酸
N    Asn    天冬酰胺
B    Asx    Asn和/或Asp
C    Cys    半胱氨酸
X    Xaa    未知或其它的
需指出，此处所有由公式代表的氨基酸残基序列具有从左到右的走向为氨基端到羧基端的传统方向。另外，短语“氨基酸残基”是广义概念，包括对应表中列出的氨基酸和修饰及非天然产生的氨基酸。此外，需指出，氨基酸残基序列起始端或末端的破折号指与具有一个或多个氨基酸残基的其它序列之间的肽键，或者指与氨基端基团如NH2或乙酰基之间或与羧基端基团如COOH之间的共价键。
抗肿瘤治疗：治疗的目的是中断或减少个体中异常的组织生长(例如肿瘤)。这种治疗的例子包括癌症治疗，例如放疗或化疗。
食欲：通过测量消化食物的量和评估个体吃的欲望来评估个体的食欲。典型地，通过对随机个体每周数次的短的问卷调查来评估食欲(例如，饥饿)。典型地，用从1，一点不，到5，非常，的相似程度，通过回答问题来鉴定对象饥饿、总想吃食物、想吃更多和不同类型的食物的程度。
BMI测量你的身高/体重比。其通过以千克计的体重除以以米计的身高的平方来确定。BMI的“正常”范围是19-22。
身体脂肪量：可以通过例如脂肪褶皱技术(fat fold technique)测量身体脂肪量：在该技术中，用钳型测径器通过测定身体代表性位置的皮肤褶皱厚度来测量皮下脂肪。然后，将不同的测量数值相加，以该数值代表个体相对肥胖程度，或者用所开发的数学方程中的测量值来预测身体脂肪百分数，依据这些方法来用这些皮肤褶皱测量值计算身体脂肪。
等效浓度(concentration equivalent)：等效浓度即等效剂量，其定义为，在体外和/或体内，具有与由野生型生长素释放肽的剂量反应曲线评估所得反应相同的生长素释放肽样化合物的剂量。
解离常数，Kd：描述受体与其配体例如抗体与其抗原之间的结合能力(或亲合力(affinity)或亲和力(avidity))的值。Kd越小结合能力越强。
融合多肽：包含至少两个多肽的多肽，用连接序列可操作地将两个多肽连接成一个连续的多肽。连接为一个融合多肽的两个多肽典型地来自各自独立的来源，因此包含两个连接的多肽的融合多肽正常情况下不会发现在天然状态下其连接在一起。
生长素释放肽：如Kojima M，Hosoda H，Date Y，Nakazato M，Matsuo H，Kangawa K 1999生长素释放肽is a growth-hormone-releasing acylatedpeptide from stomach.Nature 402：656-660中所述的多肽。人28个氨基酸的生长素释放肽具有SEQ ID NO：1的氨基酸。
生长素释放肽样化合物：此处使用的术语“生长素释放肽样化合物”指模拟野生型生长素释放肽功能的任何化合物，尤其是野生型人生长素释放肽，特别是在生长素释放肽功能方面得到此处所述的预期治疗效果，例如刺激食欲和/或治疗和/或预防恶病质，其由式I所定义：
Z1-(X1)m-(X2)-(X3)n-Z2，其中
Z1为任选存在的保护基
每个X1单独选自氨基酸，其中所述氨基酸选自天然产生的和合成的氨基酸，
X2是选自天然产生的和合成的氨基酸的任何氨基酸，所述的氨基酸由大疏水基优选酰基或脂肪酸所修饰，
每个X3单独选自氨基酸，其中所述氨基酸选自天然产生的和合成的氨基酸，
其中一个或多个X1和X3任选可由大疏水基优选酰基或脂肪酸所修饰，
Z2为任选存在的保护基，
m为1-10的整数
n为0或1-35的整数
GHS：生长激素促分泌素
GHS-R 1a：GHS的受体。GHS-R 1a也以GHS 1a表示。
免疫学区别：短语免疫学区别指以抗体特异性结合其中一个多肽而不能特异性地结合另一个多肽的能力为基础来区别两个多肽的能力。
HAART：高活性抗逆转录病毒治疗。
个体：活的动物或容易患尤其是本文定义的恶病质病症的人。在优选实施方案中，所述对象是哺乳动物，包括人和非人哺乳动物例如狗、猫、猪、牛、绵羊、山羊、马、大鼠和小鼠。在最优选的实施方案中，对象是人。
分离物：用于描述本文公开的不同生长素释放肽样化合物、多肽和核苷酸，其由其天然环境下的成分中鉴定并分离和/或回收。其天然环境下的污染成分是通常会干扰多肽的诊断或治疗应用的物质，可能包括酶、激素、以及其它的蛋白质类或非蛋白质类溶质。在优选的实施方案中，多肽将被纯化。
修饰的氨基酸：其任意基团被化学修饰的氨基酸。尤其是，在α-氨基酸的α-碳原子位置被化学修饰的修饰氨基酸是优选的。
单克隆抗体：不同语法形式的短语单克隆抗体指只包含一种能够与特定抗原发生免疫反应的抗体结合位点的抗体分子群体。
非酰化生长素释放肽样化合物：不包含附着于其任何构成性氨基酸的酰基的本文所定义的生长素释放肽样化合物。
缓解性治疗：减轻或缓和疾病或紊乱症状但不能治愈的治疗。
多克隆抗体：多克隆抗体是识别特定给定抗原的抗体分子的混合，因此多克隆抗体可以识别所述抗原中的不同表位。
多肽：短语多肽指包含氨基酸残基的分子，所述氨基酸残基与相邻的氨基酸残基之间不包含除酰胺键之外的键。
受体：受体是例如蛋白质、糖蛋白等类似的能够特异地(非随机地)结合另一分子的分子。
REE：静息能量消耗(resting energy expenditure)。
促分泌素：生长激素促分泌素，例如刺激生长激素释放的物质如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物。根据本发明的促分泌素可以例如选自下组：
L-692-429，L-692-585(Benzoelactam化合物)
MK677(螺茚满(Spiroindaner))
G-7203，G-7039，G-7502(异哌啶甲酸肽模拟物(isonipecotic acidpeptidomimetic))
NN703，ipamorelin。
特定地，所述促分泌素是生长素释放肽样化合物，包括28个氨基酸的人生长素释放肽。在一个实施方案中所述促分泌素可以是非酰基化的，例如非酰化形式的生长素释放肽或非酰化形式的生长素释放肽样化合物。
表面活性剂分子：包含疏水性部分和亲水性部分的分子，例如能够存在于亲脂相和亲水相之间的分子。
指征
本发明涉及促分泌素例如生长素释放肽样化合物在治疗或预防例如涉及病理性体重或脂肪减少的病症中的应用，包括
a)恶病质的预防或治疗，和/或
b)脂肪代谢障碍的治疗或预防，和/或
c)刺激食欲，和/或
d)刺激进食，和/或
e)刺激增重，和/或
f)增加身体脂肪量。
特别地，本发明涉及恶病质的治疗或预防和/或刺激食欲，最优选恶病质的预防或治疗。
恶病质
词语恶病质来源于希腊语kakos，意思是“坏的”，和hexis，意思是“状况”。恶病质是几种严重疾病的最痛苦且最具破坏性的病症，所述疾病例如癌症，该病症剥夺人们的能量、健康感和生活质量，增加其对别人的依赖。恶病质经常伴随胰腺、胃、食道、肺和肠恶性疾病。
恶病质最早的征光是体重减轻，不仅是脂肪组织，还有肌肉组织甚至是骨骼的重量的丢失。该非脂肪组织也被称为“瘦体重(lean body mass)”。此外，还有食欲丧失(厌食)、虚弱(衰弱)和血红蛋白水平降低(贫血)。
恶病质的治疗不是简单地多吃一些。即使人们想吃，即使他或她试图吃，即使通过胃管或静脉给予人们营养，正常情况下症状也不会逆转。
最近的研究显示，现在所述症状被视为对存在的潜在疾病的身体反应的一部分。最近的研究还表明，在一些案例中，肿瘤本身产生了诱导恶病质的物质。
发现恶病质，或者也可以叫作消瘦，伴随几种疾病，例如AIDS、癌症、髋骨折后遗症、慢性心力衰竭、慢性肺病如COLD、COPD、肝硬化、肾衰竭、自身免疫疾病如类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis)和系统性红斑狼疮、脓毒症、和严重感染。另外，在老化过程中也可见消瘦。
发现恶病质是许多不同临床病症的最后状态或者存在于慢性疾病如癌症、感染、AIDS、充血性心力衰竭、风湿性关节炎、肺结核、髋骨折后遗症、囊肿性纤维化和克罗恩氏病(Crohn’s disease)中。也可以发生在没有任何明显疾病症状的老年人中。虽然恶病质显示出在这些患者中所看到的复杂的代谢综合症，但一般通过伴随脂肪组织和骨骼肌热量存储损耗的渐进性体重减轻来识别。
癌症恶病质
癌症恶病质综合症的核心涉及渐进性肿瘤生长和传统抗肿瘤治疗的代谢副反应问题。这两个现象在神经-内分泌系统中引发改变，引发多种促炎症细胞因子的产生和癌症特异性恶病质因子的释放。反过来，这些媒介物导致进食减少、代谢异常或两者兼有。
据报道，癌症恶病质发生在大约一半癌症患者中，与超过20％的癌症死亡相关(Tisdale MJ.Nat Rev Cancer 2002，2：862871)。这种症状经常发生于晚期癌症期间，尤其是在体内存在转移性肿瘤时。恶病质在儿童和老年患者中也更为常见。
还一致证实在特定癌症中癌症恶病质发病率特别高：
●上GI癌(包括：胰腺、胃、食管和肝)(Bruera E.BMJ1997；315：1219-1222.(8 November)；(Palesty JA等，Dig Dis 2003；21：198-213)
●肺癌(www.oxandrin.com)，尤其是小细胞肺癌
●头颈部癌(www.oxandrin.com)
●结肠直肠癌
●其它实体瘤(Bruera E.BMJ 1997；315：1219-1222.(8November)
例如，网址Oxandrin(www.oxandrin.com)指出，“在从事晚期癌症中体重减轻的影响的东方合作肿瘤学小组(Eastern Cooperative Oncology Group，ECOG)的研究中，IWL(不自觉的体重减轻)与大约50％的存活率下降和癌症治疗耐受力下降有关。与最具体重减轻风险相关的癌症的位置是那些影响气道消化道(肺、脑和颈、以及食道)和肠胃系统的癌症，特别是胰腺、胃和肝的癌症。”
另外，在诊断时，80％的上GI道癌症患者和60％的肺癌患者已经经历了大幅度的体重减轻(Bruera 1219-22)。平均起来，死亡前恶病质的流行从50％增加到超过80％，且在超过20％的患者中，恶病质是主要的死亡原因(Bruera 1219-22)。
癌症恶病质的检测：通过临床评估、人体测量学测试(体重、皮肤褶皱厚度和胳膊中部周长)和影像检查(DEXA扫描、MR扫描、CT扫描和生物电阻抗测量)的组合来评价营养状况。如果发现在六个月时间里不自觉的体重减轻大于病前体重的5％，特别是当与肌肉消耗结合时，则通常怀疑是恶病质。
最常用的实验室参数是血清白蛋白。但它是非特异性参数。其它的标志物是具有短半衰期的蛋白，也使用转铁蛋白和转甲状腺素蛋白。
其它的恶病质标志物为IGF-1、IGFBP-3、ALP(碱性磷酸酶)和睾丸激素。
癌症和癌症恶病质的关系
癌症可以通过多种机制导致恶病质，包括如下所述的诱导厌食和/或代谢增强或改变：
厌食：已显示体重不稳定的癌症患者能量的摄入大幅减少。癌症患者经常遭受GI道的物理阻塞、疼痛、抑郁、便秘、吸收障碍、衰弱或例如安眠治疗、放疗或化疗的副作用，这些都可以减少进食(Barber，Ross，and Fearon133-41)。癌症相关的高血钙也可以导致恶心、呕吐和食欲丧失。然而还有大量的癌症患者没有进食减少的明显临床原因。
癌症诱导的厌食和恶病质的中心机制是复杂的，包括许多不同的细胞因子、激素和由癌细胞产生的其它因子。
瘦素(leptin)：由于体重下降导致瘦素水平与身体脂肪的损失成比例地下降，因而在正常的生理学状况下，瘦素在引发针对饥饿的适应性反应中扮演重要角色。然而，在癌症患者中，由癌细胞产生的细胞因子(IL-1，IL-6，TNF-α，INF-γ)水平的升高可以刺激瘦素的表达和/或释放。细胞因子的另一个可能机制是他们模拟源于瘦素的下丘脑过度负反馈信号，从而阻止对有关进食和体重的正常补偿机制。
NPY(神经肽Y)：下丘脑NPY系统是重要的神经通路之一，其在由IL-1或其它细胞因子所诱导的厌食中被破坏。所述细胞因子降低了对NPY的敏感度。
黑素皮质素(melanocortin)：异常的黑素皮质素信号可能是引发厌食和恶病质的因子。尽管明显的体重减轻在正常情况下预期将下调使食欲减退的黑素皮质素信号系统，以此作为保存能量储备的方法，但黑素皮质素系统在癌诱导的恶病质期间仍然保持活性。在揭示此系统的病原角色的动物模型中，AgRP或其它拮抗剂对中心黑素皮质素的阻断逆转了厌食和恶病质(Wisse，Schwartz，和Cummings 275-81)。
新陈代谢：高代谢定义为静息能量消耗(REE)的提高，是恶病质的主要特征。总的能量消耗包括REE(约70％)、主动的能量消耗(约25％)和消化中的能量消耗(5％)。在恶病质中主动能量消耗可能降低，其在临床上可能表现为冷淡、疲劳和抑郁。
已知增进食欲和使食欲减退的信号分别减弱和增强交感神经活动，其在啮齿类动物的褐色脂肪组织中以及可能在人肌肉中通过激活产热作用调节REE，通过诱导线粒体解偶联蛋白(UCP)进行。已经显示，在肌肉和白色脂肪组织中，通过细胞因子激活UCP可能是分子机制之一，此分子机制是产热和肌肉消耗增加的基础(Inui 72-91；Fearon and Moses 73-81)。
还描述了癌症患者中被改变的营养代谢。实体瘤产生大量的乳酸，乳酸通过使用大量ATP且能效极低的过程再转化为葡萄糖，这样进一步增加了能量消耗。另外，已经显示肿瘤来源的脂类动员因子(lipid mobilizingfactor，LMF)直接作用于脂肪细胞，导致脂分解作用增强，引起游离脂肪酸和甘油的释放(参考：Islam-Ali等.Br J Cancer.2001 Sep 1；85(5)：758-63)。还显示升高的细胞因子水平可能通过影响肌肉的修复进程间接地诱导肌肉蛋白分解。
在癌症恶病质治疗中使用促分泌素的基本原理
不受理论的束缚，用促分泌素尤其是生长素释放肽化合物进行治疗的基本原理以下述为基础：
从GI道黏膜中的内分泌细胞释放的生长素释放肽可以作为旁分泌物质在局部起作用，也可以作为激素在中枢起作用。在局部，生长素释放肽可以作为例如迷走神经传入神经元中的传入活性引发剂起作用。这样的神经元将把生长素释放肽刺激物传递到CNS的中央例如孤束核(NTS)，孤束核进一步与食欲和能量自稳平衡调控中枢例如下丘脑中的室旁核和弓形核进行通讯联系。作为激素，据信生长素释放肽作用于中枢食欲调节POMC和NPY/AGRP神经元，其表达生长素释放肽受体。这样的弓形核中的大多数这些神经元都位于血脑屏障的内部，因此不易受血液来源的信使如生长素释放肽的影响。然而，在中央突(median eminence)，室周器官(circumventricular organ)的邻近发现了一些POMC和NPY/AGRP神经元，其明显位于血脑屏障的外部，因此是从GI道以激素方式传递的生长素释放肽的目标。然而，最近又指出生长素释放肽跨越血脑屏障转运(Banks等，822-27)。在中央食欲调节中枢，例如在NPY/AGRP神经元即控制食欲的刺激分支中的第一水平神经元，生长素释放肽通过刺激性生长素释放肽受体起作用是唯一已知的外围刺激输入，注意到这一点是重要的。在这个重要的“食欲门卫(appetite gate-keeping)”中心，所有其它的激素和神经递质：瘦素、胰岛素、PYY3-36、a-MSH等都作为抑制剂作用于NPY/AGRP神经元。由于NPY系统在癌症诱导的恶病质中处于下调控中，因而对该系统的生长素释放肽刺激可能能够使病症正常化。类似地，在癌症诱导的恶病质期间活跃的黑素皮质素可以通过刺激AgRP而被生长素释放肽抑制。
还显示了生长素释放肽的增加增强了ATCH，并因此使皮质醇水平升高。这个作用可能具有对治疗恶病质的重要的有益暗示，因为皮质醇降低了细胞因子(IL-1β，IL-6，TNF-α，IFN-α)的水平。施用糖皮质激素已广泛用于癌症相关症状的减缓治疗手段(Inui 72-91)。
另外，已知生长素释放肽的ICV注射已经显示降低啮齿动物的核心体温，其代表REE的降低(Lawrence CB，Endocrinology.2002Jan；143(1)：155-62)。不受理论的束缚，再次预期生长素释放肽将使REE升高逆转，如上所述，REE升高是恶病质的重要特征。
考虑到对预期癌症进程以及抗肿瘤治疗方案的认知，可以用任何适当的方案施用促分泌素尤其是生长素释放肽样化合物。
在一个实施方案中，应可想象，依据本发明，所述促分泌素可以施用于遭受任何癌症类型的任何个体以减轻或阻止癌症恶病质，而与病因无关。因此，在一个优选实施方案中，用促分泌素例如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物治疗或阻止由一个或多个下述癌症类型所引起的癌症恶病质：
●急性淋巴细胞白血病
●急性髓性白血病
●肾上腺皮质癌
●AIDS相关癌
●AIDS相关淋巴瘤
●肛癌
●儿童小脑星形细胞瘤
●儿童大脑星形细胞瘤
●基底细胞癌
●肝外胆管癌
●膀胱癌
●骨癌，骨肉瘤/恶性纤维组织细胞瘤
●脑干胶质瘤
●脑瘤
●乳腺癌
●男性乳腺癌
●支气管腺瘤/类癌
●Burkitt′s淋巴瘤
●类癌性(carcinoid tumor)肿瘤
●原始不明原因的肿瘤
●原始中枢神经系统淋巴瘤
●大脑星形细胞瘤/恶性胶质瘤
●宫颈癌
●儿童癌症
●慢性淋巴细胞白血病
●慢性髓性白血病
●慢性骨髓增生性疾病
●结肠癌
●皮肤T细胞淋巴瘤
●子宫内膜癌
●儿童室管膜瘤
●食道癌
●Ewing′s家族肿瘤
●儿童颅外生殖细胞肿瘤(Extracranial Germ Cell Tumor)
●性腺外生殖细胞肿瘤
●眼癌，眼内黑素瘤
●眼癌，视网膜母细胞瘤
●胆囊癌
●胃癌
●胃肠类癌性肿瘤
●妊娠滋养细胞肿瘤
●胶质瘤
●多毛细胞白血病
●头颈癌
●肝细胞(肝)癌
●霍奇金淋巴瘤
●下咽部癌
●儿童下丘脑和视通路胶质瘤，
●眼内黑素瘤
●胰岛细胞癌(内分泌胰腺的癌)
●Kaposi肉瘤
●肾(肾细胞)癌
●喉癌
●唇及口腔癌
●非小细胞肺癌
●小细胞肺癌
●AIDS相关淋巴瘤
●Burkitt′s淋巴瘤
●皮肤T细胞淋巴瘤
●非Hodgkin′s淋巴瘤
●Waldenstrm′s巨球蛋白血症
●骨恶性纤维组织细胞瘤/骨肉瘤
●儿童成神经管细胞瘤
●黑素瘤
●Merkel细胞癌
●成年人恶性间皮瘤
●儿童间皮瘤
●不明原因的转移性鳞状颈癌(Metastatic Squamous Neck Cancer WithOccult primary)
●儿童多发性内分泌瘤形成综合症(Mutiple Endocrine NeoplasiaSyndrome)
●多发性骨髓瘤/浆细胞瘤
●蕈样肉芽肿
●骨髓发育不良综合症
●骨髓发育不良/骨髓增生性疾病
●多发性骨髓瘤
●慢性骨髓增生性疾病
●鼻腔和鼻窦癌
●鼻咽癌
●儿童鼻咽癌
●成神经细胞瘤
●口咽癌
●骨肉瘤/骨恶性纤维组织细胞瘤
●儿童卵巢癌
●卵巢上皮癌
●卵巢生殖细胞肿瘤
●卵巢低恶性潜能瘤
●胰腺癌
●胰腺癌
●鼻窦和鼻腔癌
●甲状旁腺癌
●阴茎癌
●嗜铬细胞瘤
●儿童松果体母细胞瘤(pineoblastoma)和颅内幕上原始神经外胚层肿瘤(Supratentorial Primitive Neuroectodermal Tumors)
●垂体瘤
●胸膜肺胚细胞瘤
●前列腺癌
●肾盂和输尿管过渡型细胞癌
●视网膜母细胞瘤
●儿童横纹肌肉瘤
●唾液腺癌
●成年期发病型软组织肉瘤
●儿童软组织肉瘤
●子宫癌
●Sezary综合症
●皮肤癌(非黑素瘤)
●Merkel细胞皮肤癌
●小肠癌
●儿童颅内幕上原始神经外胚层肿瘤
●皮肤T细胞淋巴瘤
●睾丸癌
●胸腺瘤和胸腺癌
●甲状腺癌
●肾盂和输尿管过渡型细胞癌
●妊娠期滋养层肿瘤
●输尿管和肾盂过渡型细胞癌
●尿道癌
●子宫内膜子宫癌
●子宫肉瘤
●阴道癌
●儿童视通路和下丘脑胶质瘤
●Waldenstrm′s巨球蛋白血症
●Wilms肿瘤
如上所讨论的，癌症恶病质可能归因于代谢疾病，例如上述的高代谢状态，或者起因于渐进性肿瘤增生，或者起因于抗癌治疗的代谢副作用。然而，癌症恶病质也可能归因于厌食疾病，例如当患癌症的个体没有食欲或者肿瘤的位置减少了食物的摄入时即是如此。
因此，在本发明的一个实施方案中，用促分泌素如生长素释放肽样化合物进行治疗是针对代谢疾病引起的癌症恶病质的治疗或预防。当所述癌症是GI道癌症，尤其是上GI道癌症(应理解此处的术语“上GI道癌症”也包含胰腺癌)、肺癌，尤其是小细胞肺癌、肝癌(应理解此处的术语“肝癌”也包含肝中的转移性癌症过程)。
在本发明的另一实施方案中，所述用促分泌素如生长素释放肽样化合物进行的治疗是针对由厌食病引起的癌症恶病质的治疗或预防。
在另一个实施方案中，所述用促分泌素例如生长素释放肽样化合物进行的治疗是针对癌症恶病质的治疗或预防，该恶病质不依赖于癌症诱导恶病质方式的，所述治疗也针对由代谢疾病和厌食病共同引起的恶病质。
在本发明的另一优选实施方案中，所述用促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物进行的治疗是针对由实体瘤引起的癌症恶病质治疗或预防。
另一癌症亚组是由下丘脑中中央食欲调节中枢的调节障碍引起的伴随有厌食症的癌症，其中排除了其它可能导致进食减少的原因。尤其是处于不可能进行进一步的癌症治疗的晚期癌症状态的个体，将会得益于作为缓解治疗的生长素释放肽治疗，以增加食物摄入，改善消化和代谢。
因此，本发明的第三个方法涉及对处于晚期癌症状态的需要的个体进行缓解治疗，例如其中所说的个体患进展阶段癌症，优选晚期癌症。
与上述一致，本发明尤其适于在患有下述的上消化道癌症形式的个体中治疗或预防恶病质：
●胰腺癌
●上GI道癌，例如胃癌和/或食道癌
●头颈癌，尤其是甲状腺癌或唾腺癌。
●肺癌，尤其是小肺细胞癌。
在本发明的另一优选实施方案中，用促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物进行的治疗，是针对由下GI癌例如结直肠癌，尤其是结肠癌所引起的癌症恶病质的治疗或预防。
在本发明的另一优选实施方案中，用促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物进行的治疗，是针对由内分泌癌例如个体身体的内分泌器官中的癌症引起的癌症恶病质的治疗或预防。
本发明用于治疗患下述癌症形式的个体也是有用的：
●卵巢癌
●乳腺癌。
在本发明的又一优选实施方案中，用促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物进行的治疗，是针对全部或部分由抗癌治疗例如化疗或放疗或其组合引起癌症恶病质的治疗或预防。
有本发明的一个优选实施方案中，实施癌症恶病质治疗的个体是老年人，例如60-120岁，更优选70-120岁，例如80-120岁，例如90-120岁。同样优选地，所述个体是儿童，例如0-20岁，例如0-15岁，例如0-10岁，例如0-5岁，例如0-1岁，例如小于两个月的新生儿。
在一个实施方案中，优选预防性地施用促分泌素例如生长素释放肽样化合物以防止恶病质状况。在这个实施方案中，可以在任何抗肿瘤治疗起始之前开始治疗。可以在抗肿瘤治疗过程中连续施用，或者也可以间隔一定时间施用，例如在抗肿瘤治疗间期。在抗肿瘤治疗过程中尤其是抗肿瘤治疗间期施用时，由于健康状况较好，接受治疗的个体被感染或引起其它并发症的风险可能会减小。
用促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物进行的治疗可以通过任何本领域已知的施用方法完成。优选地，可以通过本文所述的任何方法完成，更优选地，通过i.v.或者皮下施用完成，最优选通过皮下施用方法完成。
脂肪代谢障碍
另一方面，本发明涉及如上定义的促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物用于治疗脂肪代谢障碍综合症，或者用于制备药剂的用途，所述药剂用于治疗脂肪代谢障碍综合症。脂肪代谢障碍综合症包含以部分或全身的脂肪组织存储损耗为特征的不同类别的罕见疾病[Am J Med 2000108，143-152]。有几种不同类型的脂肪代谢障碍，脂肪损耗的程度可以从非常小的下陷区域直至脂肪组织几乎完全消失。一些患者仅仅是表面问题，而其它患者可能还有严重的代谢并发症如血脂异常、肝脂肪变性以及严重胰岛素抵抗[Trend Endo Meta 200011：410-416]。这些疾病可以遗传(家族性或遗传性脂肪代谢障碍)或者可以由不同类型的疾病或药物而发生(获得性脂肪代谢障碍)。
遗传性脂肪代谢障碍由基因突变(改变或点突变)所致。已知鉴定了几个负责不同类型的遗传性脂肪代谢障碍的基因。包括AGPAT2(1-甘油酯-3-磷酸-O-酰基转移酶2)、先天性全身性脂肪代谢障碍(CGL)中的BSCL2(贝拉迪内利-塞普(Berardinelli-Seip)先天性脂肪代谢障碍2)、家族性部分脂肪代谢障碍Dunnigan种类中的Lamin A/C(LMNA)基因、以及家族性部分脂肪代谢障碍中的PPARG(过氧化物酶体增长因子活化受体Gamma)基因。目前正在研究对于其它种类的遗传性脂肪代谢障碍而言的其它几种候选基因。
获得性脂肪代谢障碍为；HIV感染的患者(LD-HIV)中由HAART/HIV诱导的脂肪代谢障碍、获得性全身脂肪代谢障碍(AGL)、获得性部分脂肪代谢障碍(APL)和局限性脂肪代谢障碍。获得性脂肪代谢障碍没有直接的遗传学基础。反而涉及许多的机制。一个这样的机制可能是破坏正常脂肪细胞的自身免疫反应。
HAART/HIV诱导的脂肪代谢障碍已成为广义脂肪代谢障碍的最普遍形式。用蛋白酶抑制剂治疗12-18个月后，这些身体异常总的影响范围为约50％。归因于例如反转录病毒治疗的类型和持续时间等复杂因素，这些报道之间的差异在18％至83％。已经提示与蛋白酶抑制剂相关的脂肪代谢障碍综合症可能是因为脂质和脂肪细胞调节蛋白与蛋白酶抑制剂所结合的HIV-1蛋白酶催化位点之间的部分相似性(Carr et al lancet 1998，351，1881-83)。
局限性脂肪代谢障碍定义为小面积或部分肢体皮下脂肪的局部损耗。可能具有一处的或多处身体损害。它以对应于皮下脂肪损耗的下陷区域为特征。在一些病例中，它可能与皮肤中轻微的疼痛结节相关联。它通常发生在糖尿病患者的胰岛素注射部位。一些患者的脂肪损耗从经常遭受压力的区域发生。例如靠在桌子边压迫大腿的位置的脂肪损耗。
脂肪代谢障碍的发病机理在很大程度上还是未知的。然而，越来越多的证据指向以线粒体缺陷为主要原因的对脂肪细胞凋亡诱导的增加。几种由HIV-1编码的蛋白质通过诱导线粒体膜的渗透性而引发凋亡。临床上用于HIV-1治疗的几种核苷类似物抑制线粒体DNA(mtDNA)的复制和/或增加mtDNA突变的频率。这两个因素都导致严重的线粒体病并引发脂肪代谢障碍。能够抑制脂肪细胞凋亡的治疗可能是非常有用的脂肪代谢障碍的治疗，尤其是阻止脂肪代谢障碍发展的治疗-特别是HIV/HAARD所诱导的形式中。
脂肪代谢障碍的代谢结果对全身健康和存活极为重要。肥胖或者脂肪代谢障碍能够导致胰岛素的抗性和随后发展为糖尿病的事实反映了脂肪组织在碳水化合物和脂质代谢中至关重要的作用。在缺乏足够的脂肪细胞容量的情况下，过多的热量无法转化为其正常的储存；而是在肝脏、骨骼肌和心肌、以及胰腺β细胞内聚积为更多的甘油三酸酯。此通过至今未明的方式进行的额外脂肪性脂质的聚积与减弱的胰岛素活动相关，也常常与糖尿病相关。
除了其作为储藏库的被动角色外，正常的脂肪细胞分泌许多可以影响胰岛素敏感性和/或能量平衡的肽(″脂肪细胞素(adipokines)″(Kahn JCI andTEM 2002)。这些包括潜在的胰岛素光敏剂，如瘦素和Acrp30(也称为脂联素(adiponectin))，胰岛素拮抗剂，包括TNF-α、IL-6、还可能包括抵抗素(resistin)。因此脂肪代谢障碍的胰岛素抗性可能是脂质变化被扰乱和/或脂肪细胞素分泌异常的结果。
已经报道在少量患者中，用rhGH治疗导致′水牛肚′的尺寸和躯体脂肪减少。然而，脂肪损耗和脂质异常没有改善，且血糖控制恶化。
可以使用任何本领域已知的施用方法用促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物治疗脂肪代谢障碍。优选地，可以用本文描述的任何施用方法实施，更优选采用i.v.或者皮下施用方法，最优选采用皮下施用方法。
生活质量
在本发明的所有实施方案中，优选本发明所述的治疗方法和/或药物组合物和/或化合物能够给接受这种治疗的个体提供改善的生活质量(QOL)，例如通过改善食欲和/或增加体重和/或改善营养状况来达到。如此，一个方面，本发明涉及用上述的促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物改善生活质量。在另一个实施方案中，使用“生活质量”调查问卷来评价所述的个体生活质量的改善，这是本领域熟练技术人员已知的。
首选用于评价通过施用本发明的化合物而得到的经改善的生活质量的两个有效生活质量调查如下：
(i)医学结果研究简易健康调查(Medical Outcomes Study Short-FormHealth Survey)(SF-36)。SF-36包含36个问题，评价患者QOL的八个方面；身体机能(PF)、身体作用(role-physical functioning)(RP)、躯体疼痛(BP)、整体健康(GH)、活力(VT)、社会机能(SF)、情感作用(role emotionalfunctioning)(RE)、和精神健康(MH)。按照手册和指南将数值范围内的对问题的回答相加并线性转化，以测算从0(代表健康状况差)至100(代表最佳健康状况)的数值。瑞典版本已经使用，并提供了用于瑞典人群的标准化数据(Sullivan MKJ，Ware J.Hlsoenkt：svensk manual och tolkningsguide(SF-36Health Survey.Swedish manual and interpretation guide).Gteborg：SahlgrenskaUniversity Hospital；1994.)。
(ii)EORTC QLQ-C30(+3)调查/问卷。EORTC QLQ-C30(版本1.0)为具有30项要点的调查问卷，目的是评价患者的QOL，此工具由EORTC生活质量研究小组开发。第一版已用于癌症患者并出版了用于一般人群的参考数据。该调查问卷包含5项机能指标：身体机能(5个问题)、作用机能(rolefunctioning)(2个问题)、情感机能(4个问题)、认知机能(2个问题)和社会机能(2个问题)。有三项症状指标：疲劳(3个问题)、恶心、呕吐(2个问题)和疼痛(2个问题)，有6个有关呼吸困难、失眠、丧失食欲、便秘、腹泻和经济困难的单一项目。还将询问患者两个整体性的问题，患者的健康状况和总体QOL。所有的指标和单项测量值的分数范围从1至100。机能指标和整体健康状况和QOL分数高代表机能/健康状况和QOL水平高。症状/项目指标分数高代表症状/问题水平高。可以依据EORTC QLQ-C 30评分手册计算QOL分数。
实施例8A、8B和8C给出了用于评价经过一种或多种促分泌素化合物治疗后患者改善的生活质量的优选调查问卷。
在本发明的优选实施方案中，对具有所述病症的患者进行治疗使患者的生活质量显著改善。优选地，通过用于测试生活质量的任何方法，包括但不限于以上提到的调查问卷，来测定所述生活质量时，所述治疗使生活质量显著增加，例如生活质量分数或综合生活质量分数的增加，其适合于所述个体测定工具，或者是涉及所述症状和/或问题的分数的降低。此增加或降低分别优选高于治疗起始前得到的分数的1％，更优选2％，再优选5％，例如10％，再优选高于治疗前分数的20％、50％或者70％。在另一实施方案中，所述治疗产生可测量的生活质量分数增加，从而使治疗后的分数等于可比较的健康对象群体中所得的分数，或者接近于这样的“正常”分数，即是该分数的50％以上，更优选是该分数的60％以上，再优选是该分数的75％以上。另外，在另一实施方案中，所述治疗使涉及症状和/或问题的分数降低至少1％，更优选3％，再优选5％或者更优选比治疗开始前的分数降低10％、20％、30％或50％。这些增加或减少可以分别指个体生活质量测定方式的一个、几个或者所有方面，或者当适合时为综合分数。
刺激食欲、进食、增重、身体脂肪量的增加
如上所述，促进尤其是遭受病理性体重减轻的个体增加体重或者保持体重，不仅仅是刺激食欲和/或进食，而更应纠正能量摄入和能量消耗即总体身体新陈代谢的不平衡。
然而，一些个体仍然会从刺激食欲中受益，尤其对于那些病理学进程致使食欲降低的个体来说，这自然会导致不健康的体重减轻。因此，一个方面，本发明涉及通过施用促分泌素例如生长素释放肽样化合物来刺激食欲。可以用例如实施例8C所述的测量食欲、饥饿感或过饱水平的可视性类似指标测定食欲的刺激。在本发明的优选实施方案中，所述刺激比治疗前至少高5％，例如高10％，更优选高20％，或者再优选高30％、40％或者50％。
刺激食欲并不必然导致进食量的增加，因此，本发明进一步涉及另一方面：通过施用促分泌素如生长素释放肽样化合物刺激进食。可以使用多种技术包括采用如日记或调查问卷自我报告、测量自助餐的热量摄入、食物摄入前称重、或者称重并分析成对量的食物的方法测定进食。可以以一餐、一日、一周或者一个月为基础测定进食。在本发明的优选实施方案中，所述治疗使进食增加1％，例如增加2％，更优选3％，或者5％或7％，更加优选高于治疗起始前的平均进食10％。在另一个实施方案中，由于所摄取的食物的量可能不是与所摄取的热量直接相关的，所述治疗导致热量摄入的增加，而与进食变化无关，因为每一数量的不同的食物类型例如脂肪、碳水化合物和蛋白质包含不同数量的热量。在本发明优选实施方案中，所述治疗使热量摄入增加1％，例如增加2％，更优选3％，或者5％或7％，更加优选热量摄入增加10％。
本发明的第三个方面涉及通过施用生长素释放肽样化合物刺激增重或者保持稳定的体重。
优选地，所述促分泌素，例如生长素释放肽样化合物可用于刺激进食和增重，更优选所述促分泌素，例如生长素释放肽样化合物可用于刺激增重或者可用于保持稳定的体重。
如以下所讨论的，优选在进餐前，例如餐前180分钟内，如餐前150分钟内，如餐前120分钟内，如餐前100分钟内，如餐前80分钟内，如餐前60分钟内，如餐前45分钟内，如餐前30分钟内，如餐前15分钟内施用所述的促分泌素如生长素释放肽样化合物。此外，皮下施用所述的生长素释放肽样化合物是优选的。
此外，可以施用促分泌素如生长素释放肽样化合物以促进在例如正在从大的外科手术如插入髋部假肢、切断手术、骨折中恢复的个体中维持身体机能，和/或恢复身体机能。
特别地，本发明在治疗体重过轻的对象，或者阻止体重减轻以至进入体重过轻(under weight)阶段是有用的。体重过轻的对象包括那些体重低于正常体重范围或体重指数下限(“BMI”)约3％、5％或更少、10％或更少、20％或更少、或30％或更少的对象。“正常”体重范围在本领域是熟知的，其考虑了例如患者的年龄、身高、体型因素。此外，本发明适合于治疗在治疗开始前患过不自觉体重减轻的患者，例如每个月体重减轻1％、每个月2％或更少、每6个月5％或更少。
增加的体重或食欲对患有影响体重或食欲的疾病或者正在接受影响体重或食欲的治疗的患者是有用的。另外，可以处理例如，畜牧动物如猪、牛和鸡以增重。
熟练人员可以很容易地利用许多现有技术发展水平的技术评测个体身体脂肪量的增加。在一个实施方案中，本发明涉及不用个体整体增重而增加身体脂肪量。本发明的一个优选实施方案使身体脂肪与治疗起始前相比有2％的增加，更优选4％，例如5％，8％，和10％，再优选高于治疗前数值的20％或40％。
个体中更多能够依据本发明来治疗的病症为易饿病(bulimia nervosa)、厌食、男性勃起功能障碍、女性性功能障碍、缺血性神经或肌肉损害的改善、以及系统性红斑狼疮。
皮下施用
注意到除了GH产生细胞和控制食欲等的下丘脑中枢之外生长素释放肽受体发现于生物体中的许多位置是重要的。在CNS中，这些受体经调节以接收来自局部的包含生长素释放肽的神经元的信号。由于血脑屏障，外周分泌或者人工施用的生长素释放肽不会到达这些位置，然而目前可得到的小的有机化合物GH促分泌素如MK-0677会通过血脑屏障，也能到达这些位置-因此有引起不希望的副作用的危险。因此这样的确实具有例如口服活性的化合物用于模拟天然的餐前生长素释放肽上升、食欲诱导的生长素释放肽上升不是最佳的，因为基本上他们将到达体内的所有生长素释放肽受体。与此相比，通过使用天然肽，生长素释放肽本身或其同源物，并在外周施用-像本发明的优选实施方案中那样-保证只到达并刺激相关的食欲调节生长素释放肽受体。
任何确保生长素释放肽受体暴露于足够水平的生物活性形式的生长素释放肽以确保得到强烈而适当的食欲刺激，而不会导致系统脱敏的肠胃外施用方式都可以是本发明的一部分，其中所述的生长素释放肽受体正常情况下为餐前状态外周产生的生长素释放肽的目标。然而，考虑到要接受治疗的个体可能将不得不接受很长时期的治疗，例如数周或数月，优选与其相适应的施用方式。
因此，优选依据本发明以皮下方式施用所述的促分泌素如生长素释放肽样化合物，所施用的量足以允许足够水平的生物活性形式的生长素释放肽如酰化形式，及时到达受体，例如在将要进餐之前。
本发明优选涉及以尽可能接近地模拟生理学上的餐前状态的方式施用促分泌素如生长素释放肽的方法，为需要增加进食的患者例如老年性易骨折患者、术后患者、象例如由癌症、心脏病等导致的部分恶病质一样的丧失食欲的患者提供对其食欲调节生长素释放肽受体的足够的额外刺激，正常情况下生长素释放肽在餐前状态下到达所述生长素释放肽受体。
药团注射施用
另外，从分子药理学的观点来看，注意到已经发现正常情况下生长素释放肽受体与浓度短暂上升的天然激动剂配体生长素释放肽接触是重要的。GHS-R 1a受体属于所谓的G蛋白偶联的受体或7TM受体类别，这样的受体一旦持续地与激动剂接触将被脱敏化、内在化并被下调控。这些对所有信号转导系统来说固有的机制包括例如抑制性蛋白如arrestin(其在空间上阻断信号转导分子如G蛋白的结合)的受体磷酸化(其本质上降低受体对激动剂的亲合力)。激动剂介导的脱敏化进程的另一部分是受体内在化(例如将受体从其能够结合激动剂的细胞表面物理去除)以及受体下调控(例如减少的受体生产/表达)。在受体与激动剂短暂接触后，可以紧随受体内在化而出现再敏感化进程，此进程中受体脱磷酸化并再循环到细胞表面而再次使用。不受理论的束缚，相信一旦刺激延长，受体下调控进程将确保靶细胞在其信号转导系统中等被调整到这个状态，所述刺激延长可以在例如长期连续灌输激动剂过程中发生。
本发明提供了给患者施用生长素释放肽的最佳方法以获得最大的反应并避免例如脱敏化机制。
因此，本发明一个方面涉及药团方式施用促分泌素如生长素释放肽样化合物，优选每个主餐之前的药团。已经发现，与之前技术中冗长的施用过程相反，药团施用不仅刺激食欲，还刺激进食，更重要的是刺激增重。
不受理论的束缚，相信餐前皮下注射、静脉注射或者短期灌输适当剂量的促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽化合物将确保获得诱导食欲的生长素释放肽受体的强烈刺激，而对患者的活动等的限制最小。这样，可以在术后状态下于餐前期以及需要的话在进餐期间以此治疗例如髋骨骨折的患者，而患者能够自由移动并享用重要的术后身体治疗方案。
在本发明的一个优选实施方案中，团注施用相当于10μg每kg体重量的促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物。
生长素释放肽样化合物
任何的促分泌素，例如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物均可用于本发明。此处描述的一种根据本发明的优选生长素释放肽样化合物类型为包含式I定义的结构的化合物：
式I：Z1-(X1)m-(X2)-(X3)n-Z2，其中
Z1任选存在的保护基，
每个X1独立地选自氨基酸，其中所述的氨基酸选自天然的和合成的氨基酸，
X2是选自天然的和合成的氨基酸的任意的氨基酸，所述的氨基酸用大疏水基修饰，优选酰基或者脂肪酸，
每个X3独立地选自氨基酸，其中所述的氨基酸选自天然的和合成的氨基酸，
其中一个或多个的X1和X3任选可由大疏水基修饰，优选酰基或者脂肪酸修饰，
Z2为任选存在的保护基，
m为1-10的整数
n为0或1-35的整数。
因此，术语“促分泌素”包括天然发生的28个氨基酸的人生长素释放肽，其氨基酸如SEQ ID NO：1所示、以及天然发生27氨基酸的人生长素释放肽，其氨基酸如SEQ ID NO：2所示。如此，本发明涉及生长素释放肽或其同源肽的用途。Kojima在Nature(1999)，vol.402，656-660中描述了生长素释放肽。
本发明包括非对映异构体(diastereomers)及其消旋和拆分(resolved)的对映异构体(enantiomerically)纯形式。促分泌素可以包含D-氨基酸、L-氨基酸、α-氨基酸、β-氨基酸、γ-氨基酸、天然氨基酸和合成氨基酸或者类似的氨基酸或其组合。优选地，存在于生长素释放肽样化合物中的氨基酸是L-对映体。
生长素释放肽样化合物优选包含大疏水基修饰的氨基酸。修饰的氨基酸的N端氨基酸的数量优选在1-9范围内。因此，m优选为1-9范围内的整数，例如1-8、例如1-7，例如1-6、例如1-5，例如1-4，例如1-3，例如1-2，例如2。
更优选修饰的氨基酸的N端氨基酸的数量更少，例如1-3，例如1-2。最优选2个氨基酸位于所述修饰的氨基酸的N端。
在优选实施方案中，(X1)m在序列的N端部分具有Gly残基。因此，在优选实施方案中，(X1)m选自序列：
Gly，Gly-Ser，Gly-Cys，Gly-Lys，Gly-Asp，Gly-Glu，Gly-Arg，Gly-His，Gly-Asn，Gly-Gln，Gly-Thr，和Gly-Tyr。
更优选(X1)m选自，Gly-Ser，和Gly-Cys，最优选选自Gly-Ser。
换句话说，在优选实施方案中，生长素释放肽样化合物选自化合物
式II Z1-Gly-(X1)m-1-(X2)-(X3)n-Z2，
式III Z1-Gly-Ser-(X2)-(X3)n-Z2，和
式IV Z1-Gly-(X2)-(X3)n-Z2。
更优选所述生长素释放肽样化合物具有式III。
如上所述，X2可以是大疏水基修饰的任何氨基酸。尤其是X2选自修饰的Ser，Cys，Asp，Lys，Trp，Phe，Ile，和Leu的组。更优选X2选自修饰的Ser、修饰的Cys和修饰的Lys，最优选X2是修饰的Ser。
此外，(X1)m-(X2)优选为Gly-Xaa-Ser*，或Gly-Xaa-Cys*，其中Xaa为任何的氨基酸，更优选(X1)m-(X2)是Gly-Ser-Ser*，或Gly-Ser-Cys*，其中*指氨基酸残基由大疏水基所修饰。
(X3)n优选包含为生长素释放肽如人生长素释放肽片段的序列。因此，(X3)n优选包含选自如下所示序列中的一个或多个的序列：
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln
Phe Leu Ser Pro Glu His
Phe Leu Ser Pro Glu
Phe Leu Ser Pro
Phe Leu Ser
Phe Leu
Phe
在优选实施方案中，生长素释放肽样化合物的长度与人生长素释放肽的长度基本相似，例如27或28个氨基酸。因此，n优选为1-25范围内的整数，例如1-24，例如1-15，例如1-10，例如10-25，例如10-24，例如15-25，例如15-24。
最优选生长素释放肽样化合物包括天然发生的28个氨基酸的人生长素释放肽，其氨基酸如SEQ ID NO：1所示，以及天然发生的27个氨基酸的人生长素释放肽，其氨基酸如SEQ ID NO：2所示。
(X3)n可以选自生长素释放肽如人生长素释放肽的任何片段，因此，(X3)n可以选自下述序列中的一个或多个或其同源物：
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys ProPro Ala Lys Leu Gln Pro Arg
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys ProPro Ala Lys Leu Gln Pro
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys ProPro Ala Lys Leu Gln
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys ProPro Ala Lys Leu
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys ProPro Ala Lys
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys ProPro Ala
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys ProPro
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys Pro
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln
Phe Leu Ser Pro Glu His
Phe Leu Ser Pro Glu
Phe Leu Ser Pro
Phe Leu Ser
Phe Leu
Phe
或者选自
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Val  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys ProPro Ala Lys Leu Gln Pro Arg
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Val  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys LysPro Pro Ala Lys Leu Gln Pro
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Val  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys LysPro Pro Ala Lys Leu Gln
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Val  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys LysPro Pro Ala Lys Leu
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Val  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys LysPro ProAla Lys
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Val  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys LysPro Pro Ala
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Val  Gln Gln Arg LYs Glu Ser Lys LysPro Pro
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Val  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys LysPro
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Val  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Val  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Val  Gln Gln Arg Lys Glu Ser
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Val  Gln Gln Arg Lys Glu
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Val  Gln Gln Arg Lys
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Val  Gln Gln Arg
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Val  Gln Gln
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Val  Gln
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Val
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys
或者选自
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Ala  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys LysPro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Ala  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys LysPro Pro Ala Lys Leu Gln Pro
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Ala  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys LysPro Pro Ala Lys Leu Gln
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Ala  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys LysPro Pro Ala Lys Leu
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Ala  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys LysPro Pro Ala Lys
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Ala  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys LysPro Pro Ala
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Ala  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys LysPro Pro
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Ala  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys LysPro
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Ala  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Ala  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Ala  Gln Gln Arg Lys Glu Ser
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Ala  Gln Gln Arg Lys Glu
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Ala  Gln Gln Arg Lys
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Ala  Gln Gln Arg
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Ala  Gln Gln
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Ala  Gln
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Ala
或者选自
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Ala  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys LysPro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Ala  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys LysPro Pro Ala Lys Leu Gln Pro
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Ala  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys LysPro Pro Ala Lys Leu Gln
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Ala  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys LysPro Pro Ala Lys Leu
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Ala  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys LysPro Pro Ala Lys
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Ala  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys LysPro Pro Ala
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Ala  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys LysPro Pro
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Ala  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys LysPro
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Ala  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Ala  Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Ala  Gln Gln Arg Lys Glu Ser
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Ala  Gln Gln Arg Lys Glu
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Ala  Gln Gln Arg Lys
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Ala  Gln Gln Arg
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Ala  Gln Gln
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Ala  Gln
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Ala
在另一实施方案中，(X3)n包含选自以下序列的序列或由选自以下序列的序列组成
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln
Phe Leu Ser Pro Glu His
Phe Leu Ser Pro Glu
Phe Leu Ser Pro
Phe Leu Ser
Phe Leu
Phe
功能性
此处所述的促分泌素对上述的GHS受体，例如受体GHS-R 1a具备活性。所述化合物能够结合到该受体，优选地，刺激受体活性。
可以用不同的技术例如探测受体的细胞内构型、G-蛋白偶联活性、和/或细胞内信使物的变化来测定受体活性。
测量生长素释放肽样化合物激活生长素释放肽受体的能力的一个简单测定方法是测量其EC50，即化合物能够将受体的信号激活至该化合物的最大效应的一半的剂量。可以将受体内源性表达于原代细胞培养物上，例如垂体细胞，或者可以异源表达于用所述生长素释放肽受体转染的细胞上。根据测试的类型，可以使用全细胞测试或者使用由这些细胞类型中的任意一种制备的膜的测试。
由于一般相信所述受体首先偶联于Gq信号通路，因而可以使用任何监测Gq/G11信号通路的适合的测试，例如：
1)通过例如测定GTPgS结合和例如抗G-α-q或-11抗体沉淀的组合来测定Gq/G11活化作用，以提高信噪比。该测试也可以探测与除Gq/11外的G-蛋白的偶联。
2)通过例如测定磷酸肌醇的累积以测定通路中其中一个第一下游效应分子磷脂酶C(PLC)的活性的测试，其中磷酸肌醇是PLC的其中一个产物。
3)信号级联中的更多下游是来自细胞内存储的钙动员。
4)也可以测定更多的下游信号分子例如不同类型的MAP激酶(p38、jun等等)的活性、NF-κ-B迁移和CRE驱动的基因转录。
5)荧光标记的arrestin与活化的生长素释放肽受体的结合。
实施例5给出了用于测定促分泌素功能性的适当方案的例子。
在一个实施方案中，可以通过使用本文上述的测试来测定化合物与受体GHS-R 1A的结合。
当用本文上述的测试测定时，根据本发明的生长素释放肽样化合物相对于28个氨基酸的人生长素释放肽优选具有至少约50％，至少约60％，至少约70％，至少约80％，或者至少约90％的功能活性，和/或具有大于约1,000，大于约100，或者大于约50，或者大于约10的EC50。大于指效力，如此则表明需要较小的量即可获得结合抑制。
在本发明的一个实施方案中，所述化合物具有针对GHS-R 1A小于500nM的效力。在另一实施方案中，所述化合物具有针对GHS-R 1A小于100nM的效力，例如小于80nM，例如小于60nM，例如小于40nM，例如小于20nM，例如小于10nM，例如小于5nM，例如小于1nM，例如小于0.5nM，例如小于0.1nM，例如小于0.05nM，例如小于0.01nM的效力。
在另一实施方案中，所述化合物的解离常数(Kd)小于500nM。在又一实施方案中，所述配体的解离常数(Kd)小于100nM，例如小于80nM，例如小于60nM，例如小于40nM，例如小于20nM，例如小于10nM，例如小于5nM，例如小于1nM，例如小于0.5nM，例如小于0.1nM，例如小于0.05nM，例如小于0.01nM。
可以使用存在于不同环境中的重组生产的受体多肽进行结合测试。这样的环境包括，例如，包含由重组核酸或者天然发生的核酸表达的受体多肽的细胞提取物和纯化的细胞提取物；也包括，例如，使用通过重组方式或者由导入到不同环境中的天然发生的核酸生产的纯化的GHS受体多肽。
使用重组表达的GHS受体有几个优势例如在指定细胞系统中表达受体的能力，以使所述受体对化合物的反应能够更容易地与其它受体的反应区分开。例如，所述受体可以通过表达载体在通常不在其中表达的细胞系例如HEK 293、COS 7、和CHO中表达，其中不含表达载体的相同细胞系可以作为对照。
同一性和同源性
术语“同一性”或者“同源性”应解释为指在比对序列并引入空位后且不把任何的保守性取代视为序列同一性部分情况下，候选序列中与同其相比较的相应序列的残基一致的氨基酸残基的百分比，如果需要的话获得整个序列的同一性百分数。N或C端延伸和插入都不应解释为减小同一性或同源性。比对的方法和计算机程序是本领域熟知的。可以用序列分析软件(例如，序列分析软件包(Sequence Analysis Software Package)，Genetics ComputerGroup，University of Wisconsin Biotechnology Center，1710 University Ave.，Madison，Wis.53705)测量序列同一性。该软件针对不同的取代、删除和其它修饰而对同源性程度赋值来匹配相似的序列。
当与所述指定的序列比较时，此处描述的序列中的一个或多个的生长素释放肽同源物可以有一个或多个氨基酸的差异，但能够行使同样的功能，例如同源物可以视为预先指定序列的功能等价物。
生长素释放肽同源物优选为以上定义的生长素释放肽样化合物。
如上所述，此处任何预先指定的序列的同源物可以定义为：
i)包含能够由抗体识别的氨基酸序列的同源物，所述抗体也识别28个氨基酸(aa)的人生长素释放肽，优选酰化的28个氨基酸人生长素释放肽，和/或
ii)包含能够选择性地结合GHS-R 1a的氨基酸序列的同源物，和/或
iii)具有与28aa人生长素释放肽，优选酰化的28aa人生长素释放肽，基本相似的或者更高的与GHS-R 1a的结合亲合力的同源物。
在以上的例子中，所述28aa人生长素释放肽具有SEQ ID NO：1所示的序列，并且当酰化时在位置3酰化。
此处所用的抗体可以是结合生长素释放肽的N端部分或生长素释放肽的C端部分的抗体，优选生长素释放肽的N端部分。所述抗体可以是如Ariyasu等“Delayed short-term secretory regulation of生长素释放肽in obeseanimals:Evidensed by a specific RIA for the active form of生长素释放肽，Endocrinology 143(9)：3341-3350，2002中所述的抗体。
同源物的例子包含一个或多个保守性氨基酸取代，包括在同一预先指定的氨基酸组中的一个或多个保守性氨基酸取代，或者包含许多的保守性氨基酸取代，其中每个保守性取代都通过在不同的预先指定的氨基酸组内的取代产生。
这样同源物可以包含相互独立的保守性取代，其中所述同源物的至少一个甘氨酸(Gly)独立地被选自由Ala，Val，Leu和Ile所组成的组的氨基酸所取代，同源物，其中所述其同源物的至少一个所述的丙氨酸(Ala)独立地被选自由Gly，Val，Leu和Ile所组成的组中的氨基酸所取代，同源物，其中所述其同源物的至少一个缬氨酸(Val)独立地被选自由Gly，Ala，Leu和Ile所组成的组中的氨基酸所取代，其同源物，其中所述其同源物的至少一个所述的亮氨酸(Leu)独立地被选自由Gly，Ala，Val和Ile所组成的组中的氨基酸所取代，其同源物，其中所述其同源物的至少一个异亮氨酸(Ile)独立地被选自由Gly，Ala，Val和Leu所组成的组的氨基酸所取代，其同源物，其中所述其同源物的至少一个所述的天冬氨酸(Asp)独立地被选自由Glu，Asn，和Gln所组成的组中的氨基酸所取代，其同源物，其中所述其同源物的至少一个所述的苯丙氨酸(Phe)独立地被选自由Tyr、Trp、His、Pro所组成的组的氨基酸所取代，优选独立地选自Tyr和Trp所组成的组，其同源物，其中所述其同源物的至少一个所述的酪氨酸(Tyr)独立地被选自Phe，Trp，His，Pro所组成的组的氨基酸所取代，优选独立地选自Phe和Trp所组成的组，其同源物，其中所述片段的至少一个所述的精氨酸(Arg)独立地被选自Lys和His所组成的组的氨基酸所取代，其同源物，其中所述其同源物的至少一个赖氨酸(Lys)独立地被选自由Arg和His所组成的组的氨基酸所取代，其同源物，其中所述其同源物的至少一个所述的天冬酰胺(Asn)独立地被选自由Asp，Glu，和Gln所组成的组的氨基酸所取代，其同源物，其中所述其同源物的至少一个谷氨酰胺(Gln)独立地被选自由Asp，Glu，和Asn所组成的组的氨基酸所取代，其同源物，其中所述其同源物的至少一个脯氨酸(Pro)独立地被选自由Phe，Tyr，Trp，和His所组成的组的氨基酸所取代，其同源物，其中所述其同源物的至少一个所述的半胱氨酸(Cys)被选自由Asp，Glu，Lys，Arg，His，Asn，Gln，Ser，Thr，和Tyr所组成的组的氨基酸所取代。
保守性取代可以引入到优选的预先指定序列的任何位置。然而也可能希望引入非保守性取代，特定地但非限定性地，在任何一个或多个位置的非保守性取代。
非保守性取代所导致产生的此处所述序列的功能性等价同源物将例如i)在极性上有本质的差异，例如带有非极性侧链的残基(Ala，Leu，Pro，Trp，Val，Ile，Leu，Phe或Met)取代带有极性侧链的残基如Gly，Ser，Thr，Cys，Tyr，Asn，或Gln或带电的氨基酸如Asp，Glu，Arg，或Lys，或者用带电的或极性残基取代非极性的残基；和/或ii)在多肽骨架方向上在其作用方面有本质的差异，用其它的残基取代Pro或Gly；和/或iii)在电荷上有本质的差异，例如负电荷残基如Glu或Asp取代正电荷残基如Lys，His或Arg(反之亦然)；和/或iv)在空间大小上有本质的差异，例如大的残基如His，Trp，Phe或Tyr取代具有较小侧链的残基，如Ala，Gly或Ser(反之亦然)。
在一个实施方案中，可以以其疏水性和亲水性值和氨基酸侧链取代物的相对相似性，包括电荷、大小等类似性质为基础实施氨基酸取代。将前述不同特征考虑在内的例示性氨基酸取代是本领域熟练技术人员所熟知的，其包括：精氨酸和赖氨酸；谷氨酸和天冬氨酸；丝氨酸和苏氨酸；谷氨酰胺和天冬酰胺；以及缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸之间的取代。
在优选实施方案中，结合结构域包含具有与SEQ ID NO 1有至少60％同源性的氨基酸序列的同系物。
更优选与SEQ ID NO 1的同源性为至少65％，例如至少70％同源性，例如至少75％同源性，例如至少80％同源性，例如至少85％同源性，例如至少90％同源性，例如至少95％同源性，例如至少98％同源性。
在更优选的实施方案中，上述提到的百分比涉及与SEQ ID NO 1相比时，同源物序列的同一性。
SEQ ID NO：1的同系物可以是27个氨基酸(aa)的人生长素释放肽SEQID NO：2、大鼠生长素释放肽SEQ ID NO：3。另外的优选序列列于EP 1197496(Kangawa)。
其它的同系物为EP 1197496(Kangawa)中所述的变体，此处一并作为参考。
大疏水基
根据本发明的促分泌素的大疏水基是任何能够提供具有对GHS-R 1a的结合亲合力的脱酰化28个氨基酸的人生长素释放肽或其类似物的大疏水基。任意适合的氨基酸都可以用任何适合的大疏水基修饰；在优选实施方案中，用大疏水基修饰Ser残基(优选氨基酸链中的第3号氨基酸)。
当被修饰的氨基酸在其侧链包含作为取代基的例如-OH、-SH、-NH或-NH2时，通过酰化这样的取代基而形成的组是优选的。这样，连接的方式可以选自酯、醚、硫酯、硫醚、酰胺和脲组成的组。
例如，如果修饰的氨基酸是丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸或羟基脯氨酸，所述氨基酸在其侧链具有羟基。如果修饰的氨基酸是半胱氨酸，所述氨基酸在其侧链具有巯基。如果修饰的氨基酸是赖氨酸、精氨酸、组氨酸、色氨酸、脯氨酸或羟基脯氨酸，其在侧链具有氨基或亚氨基。
这样，上述的羟基、疏基、氨基和亚氨基可以是被化学修饰的。也就是说，羟基或巯基可以被醚化、酯化、硫醚化或者硫酯化。亚氨基可以被亚氨醚化、亚氨硫醚化或烷基化。氨基可以被酰胺化、硫代酰胺化或者甲酰胺化。
进一步，疏基可以被二硫化，亚氨基可以被酰胺化或硫代酰胺化，氨基可以被烷基化或硫代甲酰胺化。
在优选实施方案中，所述修饰的氨基酸是通过酯键与疏水性基团偶联的Ser。
所述疏水性基团可以是带有包含一个或多个碳原子的饱和或不饱和烷基或酰基的任何基团。在一个实施方案中，所述大疏水基是酰基，包括通过从有机羧酸、有机磺酸或有机磷酸上去除羟基而形成的基团。有机羧酸包括例如脂肪酸，其碳原子的数目优选1-35。在有机磺酸或有机磷酸中，其碳原子的数目优选1-35。
因此，酰基优选选自C1-C35酰基，例如C1-C20酰基，例如C1-C15酰基，例如C6-C15酰基，例如C6-C12酰基，例如C8-C12酰基。
更优选酰基选自C7酰基、C8酰基、C9酰基、C10酰基、C11酰基和C12酰基。这样的酰基可以由辛酸(优选羊脂酸)、癸酸(优选羊蜡酸)、或十二酸(优选月桂酸)及其单烯或多烯脂肪酸形成。
在一个实施方案中，酰基选自C8酰基和C10酰基。这样的酰基可以由辛酸(优选羊脂酸)、或癸酸(优选羊蜡酸)形成。
在另一个实施方案中，酰基选自C7酰基、C9酰基、C11酰基，例如选自C9酰基和C11酰基。
此外，所述修饰的氨基酸可以是其中的基团如EP 1 197 496(Kangawa)所述被修饰的氨基酸，此处将其一并作为参考。
保护基
根据本发明的生长素释放肽样化合物可以在N端或C端或两端都包含保护基。
共价连接到N端氨基的保护基降低了氨基端在体内条件下的反应性。氨基保护基包括-C1-10烷基、-C1-10取代烷基、-C2-10链烯基、-C2-10取代烯烃基、芳基、-C1-6烷基芳基、-C(O)-(CH2)1-6-COOH、-C(O)-C1-6烷基、-C(O)-芳基、-C(O)-O-C1-6烷基、或-C(O)-O-芳基。优选地，氨基保护基是乙酰基、丙基、琥珀酰基、苄基、苄氧羰基或叔丁氧羰基(tbutyloxycarbonyl)。
共价连接到C端羧基的保护基降低了羧基端在体内条件下的反应性。羧基端保护基优选附着于最后一个氨基酸的a-羰基。羰基端保护基包括酰胺、甲酰胺和乙酰胺。
偶联物
本发明所使用的促分泌素如生长素释放肽样化合物可以以促分泌素偶联物，如包含偶联于另一实体的促分泌素的分子的形式提供。
其它的实体可以是任何能够赋予促分泌素以改善的特性的物质，例如在改善的稳定性、半衰期等方面。适合的实体的例子在以下描述。
例如促分泌素可以偶联于肽，例如具有针对孤啡肽受体ORL1的效应的肽。在一个实施方案中，所述偶联物是生长素释放肽或其衍生物或同源物与具有针对ORL1的效应的肽的偶联物，例如肽Ac-RYY(RK)(WI)RK)-NH2，其中的骨架显示出可容许的氨基酸变化。其它的适合的肽的例子可在US专利申请2003040472和US2002004483，以及US专利5869046中找到。
在本发明的另一实施方案中，促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物偶联于多聚体分子。所述多聚体分子可以是任何适合的多聚体分子，例如天然的或合成的多聚体，典型地具有约1-100kDa分子范围的分子量，例如约3-20kDa，例如5-10kDa。所述多聚体附着在存在于促分泌素中的反应性基团上，例如胺基或巯基。
合适的多聚体分子的例子包括选自由聚亚烷基氧化物(PAO)，包括聚亚烷基二醇(PAG)，例如线性或支链聚乙二醇(PEG)和聚丙二醇(PPG)、聚乙烯醇(PVA)、聚羧酸酯、聚-(乙烯基吡咯烷酮)、乙烯马来酸酐共聚物、苯乙烯马来酸酐共聚物、右旋糖苷，包括羧甲基右旋糖苷组成的组的多聚体分子。优选地，多聚体分子是PEG分子，尤其是单功能PEG，例如甲氧基聚乙二醇(mPEG)。适合的活化PEG分子可由Nektar Therapeutics Inc.(HuntsvilleAlabama，US)或由Valentis，Inc.，Burlingame，CA U.S.A.获得。可选地，可以用本领域已知的传统方法如WO 90/13540所公开的方法活化多聚体分子。活化PEG多聚体的特定例子包括下述的线性PEG：NHS-PEG(例如，SPA-PEG，SSPA-PEG，SBA-PEG，SS-PEG，SSA-PEG，SC-PEG，SG-PEG，andSCM-PEG)，和NOR-PEG)，BTC-PEG，EPOX-PEG，NCO-PEG，NPC-PEG，CDI-PEG，ALD-PEG，TRES-PEG，VS-PEG，IODO-PEG，和MAL-PEG，以及支链PEG例如PEG2-NHS和U.S.Pat.No.5,932,462和U.S.5,643,575中所公开的，两者此处均一并作为参考。
按照已制定的程序，如下述文献中(其中也描述了活化多聚体分子的适当方法)所描述的程序实施PEG化(例如促分泌素多肽与活化多聚体分子的接合)：R.F.Taylor，(1991)，″Protein immobilisation.Fundamental andapplications″，Marcel Dekker，N.Y；S.S.Wong，(1992)，″Chemistry of ProteinConjugation and Crosslinking″，CRC Press，Boca Raton；G.T.Hermanson et al.，(1993)，″Immobilized Affinity Ligand Techniques″，Academic Press，N.Y.)。
根据本发明，也可预期通过连接物将多聚体分子与促分泌素偶联。适合的连接物是熟练技术人员所熟知的。优选的例子是三聚氯氰(Abuchowskiet al.，(1977)，J.Biol.Chem.，252，3578-3581；U.S.Pat.No.4,179,337；Shafer etal.，(1986)，J.Polym.Sci.Polym.Chem.Ed.，24，375-378。
在另一实施方案中，促分泌素接合到寡糖分子，例如右旋糖苷、多聚糖、转铁蛋白等。可以根据已建立的技术如Neose Technologies，Inc.Horsham，PA中的那些技术实施这样的接合。
在另一实施方案中，促分泌素接合于IgG分子的Fc区，典型地以融合蛋白的形式。例如将IgG的Fc区(例如免疫球蛋白同种型IgG的Fc部分)补救受体结合表位合并至促分泌素以增加其循环半衰期，而不失去其生物学活性。这可以通过任何方式产生，例如通过突变促分泌素中的适当区域以模拟Fc区或者通过将表位合并至肽标签然后将其融合至促分泌素的任一端或中间，或者通过DNA或肽合成。
补救受体结合表位是本领域技术人员已知的任何这种适当的表位，其属性将依赖于例如被修饰的促分泌素的类型。将表位导入促分泌素以使促分泌素的生物学活性得到保持，例如所述表位不会反过来影响促分泌素的构型或影响其与赋予其生物学活性的配体的结合。
可选地以偶联物的形式提供促分泌素，可以修饰促分泌素使其包括适当的反应基团，这样修饰的促分泌素在体内能够以此反应基团通过与有可用反应功能性的血液成分的共价结合而形成偶联物(施入个体后)。本发明也涉及如此修饰的促分泌素，以及使用此促分泌素的方法。本发明还涉及体外形成的上述修饰的促分泌素与血液成分的偶联物。与相应的非修饰促分泌素相比，预期根据该实施方案形成的偶联物具有增加的体内半衰期。
依据该实施方案，所述促分泌素由化学反应基团(反应实体)所修饰。所述反应实体可以选自例如多种活性羧基，特定地指，其中羟基部分是生理学上可接受的。这样的基团可以选自由N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)、N-羟基-磺基琥珀酰亚胺(sulfo-NHS)、马来酰胺-苯甲酰-琥珀酰亚胺(MBS)、γ-马来酰亚胺-丁酰氧-琥珀酰亚胺酯(GMBS)以及马来酰亚胺丙酸(MPA)所组成的组。这组实体基团的主要目标是血液成分上的低级胺。另一组活性实体由含马来酰亚胺的基团如MPA和γ-马来酰胺-丁酰胺(GMBA)构成。这些实体组与存在于血液成分上的巯基反应。
修饰的促分泌素经设计用于同所述血液成分反应，所述的血液成分可以是任何具有可用的目标基团如胺基或巯基的血液成分，其适合用作在体内结合修饰的促分泌素的载体，并因此延长了其循环半衰期。这样的血液成分的例子为血清白蛋白和IgG。
如以上所提到的，修饰的促分泌素与血液成分的共价结合可以在体内通过直接给患者施用所述的修饰促分泌素来完成。可以以任何适当的方式施用，例如以药团的方式或者通过使用计量流量的灌输随时间的流逝缓慢导入或者其它类似的方式。可选地，也可以在体外通过将血液与修饰的促分泌素合并来制备促分泌素/血液成分偶联物，允许修饰的促分泌素与血液成分上的反应功能位共价结合，然后将偶联物血液返回或施用至个体。另外，也可以通过首先纯化个体血液成分或者有限数目的成分例如血红细胞、免疫球蛋白、血清白蛋白或类似的成分，然后在体外将所述成分或有限数目的成分与化学反应性促分泌素组合来完成上述操作。
生产方法
可以用本领域熟知的技术生产生长素释放肽样化合物。例如可以化学或生化合成并修饰生长素释放肽样化合物的多肽区域。多肽化学合成的技术是本领域所熟知的。(参见如，Vincent，Peptide and Protein Drug Delivery，New York，N.Y.，Dekker，1990.)。Ausubel，Current Protocols in MolecularBiology，John Wiley，1987-1998，和Sambrook等，Molecular Cloning，ALaboratory Manual，2 d Edition，Cold Spring Harbor Laboratory Press，1989中提供了涉及将核酸导入细胞并表达核酸的用于生化合成的例子。
药物组合物
尽管以原料化学药品来施用本发明的化合物或其盐是可能的，但优选以药物组合物的形式提供。因此，本发明的一个方面涉及包含式I所定义的生长素释放肽样化合物的药物组合物。
在一个优选实施方案中，所述大疏水基为选自C7酰基、C9酰基、和C11酰基的基团，例如选自C9酰基和C11酰基。
在另一实施方案中，本发明涉及包含至少两种不同的生长素释放肽样化合物的混合物的药物组合物，例如C8酰基酰化的生长素释放肽样化合物与C10酰基酰化的生长素释放肽样化合物的混合物。不受理论的束缚，相信这样的混合物将具有更长的血浆半衰期。
在又一实施方案中，所述药物组合物包含酰化的生长素释放肽样化合物，可选地，化合物具有不同的酰基链长度，优选选自C7酰基、C9酰基、和C11酰基，例如选自C9酰基和C11酰基，进一步，任选与脱酰化生长素释放肽样化合物组合。
另一方面，本发明涉及包含任何促分泌素的药物组合物，例如如上定义的任何生长素释放肽样化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体、媒介和/或赋形剂，所述的组合物进一步包含转运分子。转运分子在初期加入，目的是增加酰化化合物的半衰期，阻止过早脱酰化，因为脱酰化的生长素释放肽对GHS-R 1a没有活性。
转运分子通过掺入至或锚定至根据本发明的化合物起作用。
可以使用任何本领域技术人员已知的适当的转运分子。转运分子的例子为偶联物部分所描述的那些。其它的优选例子为脂质体、微团和/或微球。
常规的脂质体典型地由磷脂(中性或负电荷的)和/或胆固醇组成。所述脂质体是脂质双层围绕水性间隔为基础的小泡结构。他们在物理化学特性如大小、脂质成分、表面电荷电量以及磷脂双层的流动性上有所不同。脂质体构成中最常用的脂质为：1，2-二月桂酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DLPC)、1，2-二肉豆蔻酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DMPC)、1，2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DPPC)、1，2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DSPC)、1，2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DOPC)、1，2-二肉豆蔻酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DMPE)、1，2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DPPE)、1，2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DOPE)、1，2-二肉豆蔻酰-sn-甘油-3-磷酸盐(单钠盐)(DMPA)、1，2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸盐(单钠盐)(DPPA)、1，2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸盐(单钠盐)(DOPA)、1，2-二肉豆蔻酰-sn-甘油-3-[磷酸-rac-(1-甘油)](钠盐)(DMPG)、1，2-二棕榈酰-sn-甘油-3-[磷酸-rac-(1-甘油)](钠盐)(DPPG)、1，2-二油酰-sn-甘油-3-[磷酸-rac-(1-甘油)](钠盐)(DOPG)、1，2-二肉豆蔻酰-sn-甘油-3-[磷酸-L-丝氨酸](钠盐)(DMPS)、1，2-二棕榈酰-sn-甘油-3-[磷酸-L-丝氨酸](钠盐)(DPPS)、1，2-二油酰-sn-甘油-3-[磷酸-L-丝氨酸](钠盐)(DOPS)、1，2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-(戊二酰)(钠盐)和1，1′，2，2′-四肉豆蔻酰心磷脂(铵盐)。由DPPC与其它脂质或脂质体修饰剂一起组成的配制品是优选的，例如与胆固醇和/或卵磷脂相组合的。
循环寿命长的脂质体以其在血管壁渗透性增强的身体位置的渗出能力为特征。生产循环寿命长的脂质体的最普遍方法是将亲水聚合物聚乙二醇(PEG)共价附着于脂质体的外表面。一些优选的脂质是：1，2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧(聚乙二醇)-2000](铵盐)、1，2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-5000](铵盐)、1，2-二油酰-3-三甲铵-丙烷(氯盐)(DOTAP)。
Avanti，Polar lipids，Inc，Alabaster，AL提供了可用于脂质体的可能脂质。此外，脂质体悬浮物可以包括脂质保护性试剂，在储存时其保护脂质不受自由基和脂质过氧化破坏。亲脂性自由基淬火剂，例如α-生育酚和水溶性铁特异性螯合剂，如ferrioxianine是优选的。
多种方法均可用于制备脂质体，例如Szoka等，Ann.Rev.Biophys.Bioeng.9：467(1980)，U.S.Pat.Nos.4,235,871,4,501,728和4,837,028中所述，此处一并作为参考。实施例9描述了一个方法。另外一个方法生产不同大小的多层囊泡。该方法中，形成囊泡的脂质溶解于适当的有机溶剂或溶剂系统中，在真空或惰性气体中干燥，形成薄的脂质膜。需要的话，所述膜可以再次溶解于适当的溶剂中，例如叔丁醇中，然后将其冻干形成更多不同的脂质混合物，其为更易于与水结合的类似粉末的形式。用目标药物和目标成分的水溶液覆盖此膜，典型地通过搅拌15-60分钟以上使其与水结合。通过在更加剧烈的搅拌条件下使脂质结合水或者通过加入增溶性去垢剂如脱氧胆酸盐，能够使所得多层囊泡的大小分布向更小的大小改变。另外，脂质体悬浮物可以包括脂质保护性试剂，其保护脂质在储存时不受自由基和脂质过氧化破坏。亲脂性自由基淬火剂例如α-生育酚和水溶性铁特异性螯合剂，如ferrioxianine是优选的。
微团在水溶液中通过表面活性剂(包含疏水性部分和一个或多个离子的或者强亲水性基团的分子)形成。当固体表面活性剂的浓度升高时，空气/水或玻璃/水表面吸收的表面活性剂单层被紧紧地塞满了，使得进一步的占据需要已经存在于两个单层中的表面活性剂分子的更多压缩。超出那个浓度之外的溶解的表面活性剂数量的进一步增加产生与聚集至微团中的新分子相等的量。此进程从称为“临界微团浓度”的特征性浓度开始。
在稀释的表面活性剂溶液中形成的微团的形状近似于球形。表面活性剂分子的极性头部基团排列于球壳的外部，而其烃链朝向中心，构成微团的球形核心。烃链随机地卷曲缠绕，微团内部具有非极性、液体样的特征。在聚氧乙烯化非离子去垢剂的微团中，聚氧乙烯部分朝外并充满了水。这样的排列是非常有好处的，因为亲水性的头部基团与水接触，烃部分远离水介质并部分地被极性头部基团所屏蔽而不与水接触。位于微团内部的表面活性剂分子的烃尾巴通过微弱的范德华力相互作用。
微团的尺寸或者其聚集体的数目主要由几何学因素控制。烃核心的半径不能超过表面活性剂分子的伸长的烃链的长度。因此，增加链的长度或者提高同源性系列增加了球形微团的聚集体的数目。如果将表面活性剂的浓度增加到超过百分之几并加入电解液(非离子化表面活性剂的情况下)或者提高温度，微团尺寸增加。在这些条件下，微团太大而不能保持球形，变成了椭球状、圆柱状或者最终变成薄片状。
本领域熟练技术人员所熟知的常见表面活性剂可用于本发明的微团中。适当的表面活性剂包括月桂酸钠、油酸钠、月桂醇硫酸钠、八聚氧乙烯醇单十二烷基醚、辛苯昔醇(octoxynol)9和PLURONIC F-127(WyandotteChemicals Corp.)。优选的表面活性剂为可与如TWEEN-80、PLURONICF-68、n-辛基-β-D-葡萄糖苷等类似的IV注射剂兼容的非离子聚氧乙烯和聚氧丙烯去垢剂。此外，如所述的用于生产脂质体的磷脂也可以用于形成微团。
在另一优选实施方案中，按文献所述配制本发明的化合物以用于选自下述的施用途径：口腔输送、舌下输送、经皮输送、吸入和无针注射，例如使用Powderiet所开发的方法。
用于吸入时，可以用本领域技术人员已知的方法将本发明的化合物配制成例如气溶胶、干粉或者溶解于微滴，优选置于用于这种输送的装置中(例如商业上可由Aradigm、Alkerme或Nektar获得的)。
施用
不同化合物的定量摄入和本发明的方法优选考虑本领域熟知的因素来确定，这些包括：剂量给药的对象的类型；对象的年龄、体重、性别和医学状况；施用途径；对象的肾和肝功能；所需的效果；以及所使用的特定化合物。
获得产生功效但不产生毒性的药物浓度范围的最佳精度需要以药物到达目标位置的可行性动力学为基础的方案。其涉及药物的分布、平衡和消除方面的考虑。
如上所述，在本发明的一个方面，皮下施用所述的促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物。
另一方面，作为餐前药团施用所述的促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物，其中施用方式可以是任何适合的肠胃外方式。
在优选实施方案中，以餐前药团皮下施用所述的促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物。
也可以作为药团在进餐期间施用所述的促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物。进餐期间的施用方式包括皮下施用，例如皮下施用的药团。
用于肠胃外施用的药物组合物包括消毒的可注射的水或非水溶液、分散剂、悬浮液或乳剂，以及使用前在消毒的可注射溶液或分散剂中重建的消毒粉末。
其它适合的施用方式包括栓剂、喷剂、药膏、霜、凝胶、吸入剂、透皮贴片、植入物、药丸、药片、含片、胶囊。
根据本发明使用的化合物的典型剂量为相当于10ng至10mg生长素释放肽每kg体重的量。此处以一定量的生长素释放肽的等价物方式给出浓度和量，其中生长素释放肽是28aa人gherlin。可以按照以上“功能性”部分所述来测试等价物。
在优选实施方案中，以相当于0.1μg至1mg生长素释放肽每kg体重的量施用所述药剂，例如0.5μg至0.5mg生长素释放肽每kg体重，例如1.0μg至0.1mg生长素释放肽每kg体重，例如1.0μg至50μg生长素释放肽每kg体重，1.0μg至10μg生长素释放肽每kg体重。
如上所述，优选作为药团施用所述的促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物。因此，在一个实施方案中，所述药剂在餐前作为药团施用，所述的药团包含相当于0.3μg至600mg生长素释放肽的促分泌素或其盐。更优选地，所述药剂在餐前作为药团施用，所述的药团包含相当于2.0μg至200mg生长素释放肽的促分泌素或其盐，例如5.0μg至100mg生长素释放肽，例如10μg至50mg生长素释放肽，例如10μg至5mg生长素释放肽，例如10μg至1.0mg生长素释放肽。
应注意到餐前发生的正常的生长素释放肽反应为生长素释放肽血浆浓度的短期上升，并且由于此肽相对短的半衰期，生长素释放肽的i.v.注射将确保能够得到类似的短期生长素释放肽浓度高峰。施用途径必须确保非降解的、生物活性形式的肽在循环中是主要形式，其将到达生长素释放肽受体并刺激这些受体。这样，为了获得所述药剂的最大效果，优选每天施用一至三次，每次施用在进餐45分钟之内，例如进餐30分钟之内，例如进餐25分钟之内，例如进餐20分钟之内，例如进餐15分钟之内，例如进餐10分钟之内，例如进餐5分钟之内。更优选在每次主餐之前施用，例如每天施用三次。
可以配制本发明的化合物用于鼻腔施用。以传统方式将溶液或悬浮液直接用于鼻腔，例如用点滴器、吸液管或者喷射。可以以单一剂量或多剂量形式提供所述组合物。在用点滴器或吸液管的后一种情况时，可以通过给患者施用适当的、预定量的溶液或悬浮液来完成。喷射时，可以通过例如计量雾化喷雾机的方式来实现。
可以将本发明的化合物配制为气溶胶施用于特别是呼吸道，包括鼻内施用。化合物一般具有例如5微米或更小的小颗粒尺寸。可以以本领域已知的方式获得这样的颗粒尺寸，例如以微粉化方式。以具有适合的推进物例如氯氟烃(CFC)如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、或二氯四氟甲烷、二氧化碳或者其它适合的气体的加压包装的方式提供活性成分。气溶胶也可以方便地含有表面活性剂如卵磷脂。可以用计量阀控制药物的剂量。可选地，可以以干粉例如化合物混合于适合的粉末基料如乳糖、淀粉、淀粉衍生物如羟基丙基甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)的粉末的形式提供所述活性成分。粉末载体将在鼻腔中形成凝胶。可以以单位剂量的形式例如以明胶或泡状包装胶囊或药筒的形式提供粉末组合物，由此可以通过吸入器施用粉末。
通过气溶胶施用的组合物可以作为如盐水中的溶液制备，使用苄基醇或其它的合适的防腐剂，增强生物利用度的吸收促进剂，使用碳氟化合物，和/或使用其它的增溶或分散剂。
口服组合物
可以以大范围的口服剂量形式配制那些能够在口服后的个体中保持生物学活性的促分泌素类型。药物组合物和剂量形式可以包含作为活性成分的本发明的化合物或其药学上可接受盐或其晶体形式。药学上可接受的载体可以为固体也可以为液体。固体形式的制品包括粉末、药片、药丸、胶囊、胶囊(cachet)、栓剂、和可分散颗粒。固体载体可以为一种或多种物质，这些物质也可以作为稀释剂、调味剂、增溶剂、润滑剂、悬浮剂、粘结剂、防腐剂、润湿剂、药片分散剂、或者胶囊形成物质起作用。
优选地，所述组合物以重量计本发明的化合物为约0.5％至75％，其余部分由适合的药物赋形剂组成。口服时，这样的赋形剂包括甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、滑石、纤维素、葡萄糖、凝胶、蔗糖、碳酸镁等类似的药物组分。
在粉末中，载体为分散良好的固体，其与分散良好的活性成分组成混合物。在药片中，活性成分以适当的比例与具有所需结合能力的载体混合，压实为所需的形状和尺寸。粉末和药片优选包含百分之一至约七十的活性化合物。适合的载体为碳酸镁、硬脂酸镁、滑石、糖、乳糖、胶质、糊精、淀粉、凝胶、黄芪胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、低熔点蜡、可可油等类似物质。术语“制品”规定为包括具有作为载体并提供胶囊的胶囊形成物质的活性化合物的组合物，在胶囊中具有或不具有载体的活性成分被载体所包围，载体与其相联结。类似地，包括胶囊(cachet)和含片。药片、粉末、胶囊、药丸、胶囊(cachet)和含片可以为适于口服的固体形式。
根据本发明的滴液可以包含消毒或未消毒的水或油溶液或悬浮液，可以通过将活性成分溶解于适当的水溶液中来制备，任选包括杀细菌和/或杀真菌的试剂和/或任何其它的适当防腐剂，任选包括表面活性试剂。此后所得的溶液可以过滤澄清，转入适当的容器，然后封口，并通过高压灭菌和保持在98-100℃半小时消毒。可选地，可以将溶液过滤消毒并在无菌条件下转入容器中。适合于包括在滴液中的杀细菌和杀真菌试剂的例子为硝酸苯汞或乙酸苯汞(0.002％)、苯甲烷铵氯化物(benzalkonium chloride)(0.01％)和醋酸洗必太(chlorhexidine acetate)(0.01％)。用于制备油溶液的适合的溶剂包括甘油、稀释的乙醇和丙烯乙二醇。
还包括固体形式的制品，在使用前不久将其转变为液体形式的制品以用于口服。这样的液体形式包括溶液、悬浮液和乳剂。这些制品除了活性成分之外还可包含着色剂、香料、稳定剂、缓冲液、人工和天然甜味料、分散剂、增稠剂、增溶剂等类似物质。
适于口服的其它形式包含液体形式制品，包括乳剂、糖浆、酏剂、水溶液、水悬浮液、牙膏、凝胶洁牙剂(gel dentrifrice)、香口胶，或固体形式制品，在使用前不久将其转变为液体形式制品。可以以溶液形式将乳剂制备于丙二醇水溶液中，或者乳剂可以包含乳化剂如卵磷脂、山梨糖醇单油酸酯、或阿拉伯树胶。可以通过将活性成分溶解于水中并添加适当的着色剂、香料、稳定剂和增稠剂来制备水溶液。可以通过将分散良好的活性成分分散于水中，与粘性物质如天然或合成树胶、树脂、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、和其它熟知的悬浮剂一起制备水悬浮液。固体形式的制品包括溶液、悬浮液、乳剂，除了活性成分之外，还可包含着色剂、香料、稳定剂、缓冲液、人工和天然甜味料、分散剂、增稠剂、增溶剂等类似物质。
肠胃外施用的组合物
本发明的化合物可以配制用于肠胃外施用(例如，通过注射，如药团注射或连续灌输)，可以以安瓿瓶中的单位剂量形式、预填充注射器、小容量灌输或者在添加有防腐剂的多剂量容器中提供。组合物可以采用这些形式，作为油或水媒介中的悬浮液、溶液或乳剂，例如聚乙二醇水溶液中的溶液。油或非水载体、稀释剂、溶剂或媒介的例子包括丙二醇、聚乙二醇、植物油(例如橄榄油)、可注射有机酯(如，油酸乙酯)，可以包含制备性试剂如防腐、润湿、乳化或悬浮、稳定和/或分散剂。可选地，活性成分可以为粉末形式，通过消毒固体的无菌分离或由溶液冻干而获得，在使用前用适当的媒介如消毒的无热原水配制。必要时应适当缓冲水溶液，首先用足够的盐水或葡萄糖等张液体稀释剂。水溶液尤其适于静脉、肌肉、皮下和腹腔施用。所使用的无菌水介质可以很容易地利用本领域熟练技术人员所熟知的标准技术获得。
生长素释放肽或生长素释放肽样化合物或其药学上可接受的盐的溶液，(以及例如抗原性表位和蛋白酶抑制剂)可以在水或盐中制备，任选地与非毒性表面活性剂混合。用于静脉内或动脉内施用的组合物可以包括无菌水溶液，其也可以包含缓冲液、脂质体、稀释剂和其它适合的添加剂。
可用于肠胃外组合物的油包括石油(petroleum)、动物、植物或合成油。可用于这些组合物的油的特定例子包括花生油、大豆油、芝麻油、棉籽油、谷物油、橄榄油、蜡油和矿物油。用于肠胃外组合物的合适的脂肪酸包括油酸、硬脂酸和异硬脂酸。油酸乙酯和豆蔻酸异丙酯为适合的脂肪酸酯的例子。
用于肠胃外组合物的适合的皂类包括碱金属脂肪酸、铵、三乙醇胺盐，适合的去垢剂包括(a)阳离子去垢剂例如二甲基二烷基铵卤化物、和烷基吡啶卤化物；(b)阴离子去垢剂如烷基、芳基和石蜡磺酸盐，烷基、石蜡、醚和甘油单酸酯硫酸盐，和磺基琥珀酸盐，(c)非离子去垢剂如脂肪酸胺氧化物、脂肪酸链烷醇酰胺，聚氧乙烯聚丙烯共聚物，(d)两性去垢剂如烷基-β-氨基丙酸酯，2-烷基-咪唑啉季铵盐，和(e)其混合物。
在溶液中，肠胃外组合物典型地将包含以重量计约0.5至约25％的活性成分。可以使用防腐剂和缓冲液。为了最小化或避免注射位置的刺激，这样的组合物可以包含一种或多种具有约12至约17的亲水-亲脂平衡(HLB)的非离子表面活性剂。典型地，这些组合物中的表面活性剂的量以重量计为约5至约l5％。适当的表面活性剂包括聚乙烯山梨糖醇脂肪酸酯，例如山梨糖醇单油酸酯和具有疏水基础的高分子量乙烯氧加合物，其通过丙烯氧与丙二醇的浓缩而形成。可以将肠胃外组合物提供于单位剂量或多剂量封口容器中，例如安瓿和小瓶，可以储藏在冷冻干燥(冻干)条件下，只需在马上要使用前添加无菌液体赋形剂，例如水，以用于注射。临时的注射液和悬浮液可以由前述的无菌粉末、颗粒和药片之类制备。
适于注射或灌输的药物剂量形式可以包括包含活性成分的无菌水溶液或者分散剂，其封装于脂质体中，适合于施用。在所有情况下，在生产和储藏条件下最终的剂量形式必须是无菌的、流动性的、和稳定的。
可以通过将所需量的适当溶剂中的生长素释放肽或生长素释放肽样化合物或其药学上可接受盐与以上列举的各种其它成分混合，需要的话随后进行过滤消毒，来制备消毒的可注射溶液。
局部施用组合物
也可以局部递送本发明的化合物。局部施用区域包括皮肤表面，还有直肠、鼻、口腔和咽喉的黏膜组织。通过皮肤和黏膜局部施用的组合物不应引起刺激征兆，例如水肿或发红。
局部组合物可以包括适于局部施用的药学上可接受的载体。这样，所述组合物可以为例如悬浮液、溶液、药膏、洗液、霜、泡沫、气溶胶、喷剂、栓剂、植入物、吸入剂、药片、胶囊、干粉、糖浆、香膏(balm)或含片等形式。制备这样的组合物的方法在制药工业上是熟知的。
可以将本发明的化合物配制为药膏、霜或洗液、或者透皮贴片用于表皮的局部施用。例如可以用水或油基料加上适当的增稠剂和/或胶凝剂配制药膏和霜。可以用水或油基料配制洗液，通常会包含一种或多种乳化剂、稳定剂、分散剂、悬浮剂、增稠剂或者颜色试剂。适于口腔内局部施用的组合物包括在香味基料中含有活性试剂的含片，香味基料通常为蔗糖和阿拉伯树胶或黄芪胶；在惰性基料如凝胶和甘油或蔗糖和阿拉伯树胶中含有活性成分的锭剂；在适合的液体载体中含有活性成分的漱口水。
根据本发明的霜、药膏或糊为含有活性成分的外用半固体组合物。其可以通过在适合的机械协助下，将分散良好的或粉末形式的活性成分单独或者以水或非水流体中的溶液或悬浮液形式与油脂或非油脂基料混合来制得。所述基料可以包含碳氢化合物如硬、软或流体石蜡、甘油、蜂蜡、金属皂；粘液；天然来源的油如杏仁、谷物、花生、蓖麻或橄榄油；羊毛脂或其衍生物或脂肪酸如硬脂酸或油酸与醇如丙二醇或大粒凝胶的混合。组合物可以与任何适合的表面活性试剂剂如阴离子、阳离子或非离子表面活性剂如山梨糖醇酯或其聚氧乙烯衍生物混合。也可以包括悬浮试剂如天然胶、纤维素衍生物或无机物质如硅烷硅石，和其它成分如羊毛脂硅石。
根据本发明的洗液包括适合用于皮肤或眼睛的那些洗液。眼睛洗液可以包含无菌水溶液，其可选含有杀菌剂，可以用类似制备滴液的方法制备。用于皮肤的洗液或擦剂可以包括加速干燥以及使皮肤凉爽的试剂，例如酒精或丙酮，和/或潮湿剂如甘油或油如蓖麻油或花生油。
可以经皮肤施用此处描述的药物制剂-化学修饰剂复合物。经皮肤施用典型地涉及药物通过皮肤进入患者的系统循环的药物制剂的递送。皮肤位置包括经皮肤施用药物的解剖学区域，包括前臂、腹部、胸部、背部、臀部、乳突区等类似位置。
通过将所述复合物源与患者的皮肤接触较长时间来完成经皮肤的递送。透皮贴片具有提供受控的向身体递送药物制剂-化学修饰剂复合物的额外优势。参见Transdermal Drug Delivery：Developmental Issues and ResearchInitiatives，Hadgraft和Guy(eds.)，Marcel Dekker，Inc.，(1989)；Controlled DrugDelivery：Fundamentals and Applications，Robinson和Lee(eds.)，MarcelDekker Inc.，(1987)；以及Transdermal Delivery of Drugs，Vols.1-3，Kydonieus和Berner(eds.)，CRC Press，(1987)。可以通过溶解、分散、或者将药物制剂-化学修饰剂复合物加至适当的介质，如弹性基质材料中来制备这样的剂量形式。也可以使用吸收增强剂增加化合物跨皮肤的流量。可以通过提供速率控制膜或者通过将化合物分散于多聚体基质或胶中来控制此流量的速率。
可以发现许多类型的透皮贴皮将用于此处所述的方法中。例如，可以由支持材料和丙烯酸酯粘合剂制备简单的粘性贴片。将药物制剂-化学修饰剂复合物和任何的增强剂配制成粘性浇铸溶液，并使之彻底混合。将溶液直接浇铸于支持材料上，在烤箱中蒸发浇铸溶剂，留下粘性膜。可以附着上释放衬垫来完成系统。
可选地，可以使用聚氨酯基质贴片来递送药物制剂-化学修饰剂复合物。此贴片的层包含支持材料、聚氨酯药物/增强剂基质、膜、粘合剂和释放衬垫。通过室温加工聚氨酯预聚物来制备聚氨酯基质。向预聚物添加水、酒精和复合物，形成有些粘的牢固的弹性体，其可以单独直接浇铸支持材料。
本发明的另一实施方案将采用水凝胶基质贴片。典型地，水凝胶基质将包含酒精、水、药物和几种亲水性多聚体。可以将此水凝胶基质加至透皮贴片的支持材料和粘性层之间。
也会发现液体蓄水贴片用于此处描述的方法中。此贴片包含非渗透或半渗透的可热封支持材料、可热封膜、丙烯酸酯为基础的压力敏感性皮肤粘合剂、和硅化释放衬垫。将支持材料热封至膜上形成蓄水部分，然后可以用复合体、增强剂、凝胶化试剂和其它赋形剂的溶液填充蓄水部分。
除了将凝胶化的药物制剂-化学修饰剂溶液局限于薄泡沫层，典型地聚氨酯中之外，泡沫基质贴片在设计和成分上与液体蓄水系统类似。此泡沫层处于支持材料和膜之间，膜被热封于贴片的外围。
对于被动递送系统，释放速率典型地由位于蓄水部分和皮肤之间的膜所控制，通过从整体装置的扩散或者通过皮肤自身作为递送系统中的速率控制屏障来完成。参见U.S.Pat.Nos.4,816,258；4,927,408；4,904,475；4,588,580,4,788,062；或类似文献。药物递送速率将部分地依赖于膜的性质。例如药物在体内通过膜的递送速率通常高于通过皮肤屏障的递送速率。将复合物从装置递送至膜的速率通过使用限速膜来控制最为方便，限速膜位于蓄水部分和皮肤之间。假设皮肤足以让复合体透过(例如，通过皮肤的吸收大于通过膜的通过率)，将使用膜来控制给予患者的剂量速率。
可以以所需的渗透性程度、复合体的性质、和涉及构建装置的机械方面的考虑为基础来选择适合的可渗透膜材料。例示性的可渗透膜材料包括种类广泛的天然和合成多聚体，如聚二甲基硅氧烷(硅树脂橡胶)、乙烯乙烯基醋酸酯共聚物(ethylenevinylacetate copolymer，EVA)、聚氨酯、聚氨酯聚醚(polyurethane-polyether copolymers)、聚乙烯、聚酰胺、聚氯乙烯(PVC)、聚丙烯、聚碳酸酯、聚四氟乙烯(PTFE)、纤维素材料、例如，三乙酸纤维素和硝酸/醋酸纤维素，和水凝胶，例如，2-羟乙基甲基丙烯酸酯(HEMA)。
依赖于所需装置的特征，装置中可以包含其它项目，例如治疗产品中的其它传统组分。例如，根据本发明的组合物也可以包括一种或多种防腐剂或杀菌剂，如甲基羟基苯甲酸乙酯、丙基羟基苯甲酸乙酯、氯甲酚、苯扎氯铵(benzalkonium chlorides)及类似物质。这些药物组合物也可以包含其它的活性成分如抗菌剂，特别是抗生素、麻醉剂、止痛剂和止痒剂。
作为栓剂施用的组合物
本发明的化合物可以配制为栓剂施用。低熔点蜡，例如首先将脂肪酸甘油酯或可可油的混合物熔化，并通过如搅拌均匀地分散活性成分。然后将熔化的均质混合物注入尺寸方便的模子中，使之冷却，凝固。
可以将活性化合物配制成例如含约0.5％至约50％本发明的化合物的栓剂，在聚乙二醇(PEG)载体(如，PEG 1000[96％]和PEG 4000[4％])中处理。
制剂
在优选方面，本发明预期药物组合物将用于实施此处所述的治疗方法。本发明的药物组合物包含生理学上可耐受的载体以及至少一种促分泌素如此处所述的生长素释放肽或生长素释放肽样化合物，溶解或分散于其中作为活性成分。在优选的实施方案中，当施用于人类个体以用于治疗目的时，所述的药物组合物不是免疫原性的，除非其目的是为了诱导免疫反应。
一个方面，本发明涉及包含至少一种如以上式I所定义的促分泌素例如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物的药物组合物。在优选实施方案中，所述药物组合物包含至少两种不同的如以上所定义的生长素释放肽样化合物以增强治疗效果。差异可以是例如具有以上所讨论的不同酰化的化合物。
如此处所使用的，术语“药学上可接受的”、“生理学上可耐受的”及其语法上的不同形式，当其指组合物、载体、稀释剂和药剂时可互换使用，表明这些材料能够施用到或施用于人而不产生例如恶心、眩晕、反胃等类似的不希望的生理学效应。
包含溶解或分散于其中的活性成分的药理学组合物的制备是本领域所容易理解的。典型地，将这样的组合物制备为液体溶液或悬浮液、水性或非水性形式的无菌注射剂，然而也可以制备成使用前适合于在液体中形成溶液或悬浮液的固体形式。也可以将制品乳化。
可以将活性成分与赋形剂混合在一起，所述赋形剂是药学上可接受的，能够与所述的活性成分兼容，并且用量适合于用于此处所述的治疗方法中。适合的赋形剂为例如水、盐、右旋糖、甘油、乙醇等类似物质及其组合。此外，如果需要的话，所述组合物可以包含少量的辅助性物质例如润湿剂或乳化剂，pH缓冲剂等类似物质，其增强活性成分的效力。优选所述制剂具有3.5-8范围内的pH，例如在4.5-7.5范围内，例如在5.5-7范围内，例如在6-7.5范围内，最优选约7.3。然而，如本领域熟练技术人员所理解的，pH的范围可以根据所治疗的个体和施用方法来调整。例如，某些促分泌素如生长素释放肽和生长素释放肽同系物，在较低的pH下容易稳定化，因此，在本发明的另一优选实施方案中，所述制剂具有3.5-7范围内的pH，例如4-6，例如5-6，例如5.3-5.7，例如5.5。
本发明的药物组合物中可以包括所述化合物的药学上可接受盐。这些盐为在用于制药用途时可接受的盐。由此，意味着这些盐在应用中或用于治疗疾病时将保留母体化合物的生物学活性，不会具有不想要的或有害的影响。
药学上可接受的盐以标准的方法制备。如果母体化合物为碱，用适当溶剂中的过量的有机或无机酸处理。如果母体化合物是酸，用适当溶剂中的无机或有机碱处理。
可以与药学上可接受的载体或稀释剂即时、同时或一起，以其碱金属或碱土金属盐的形式施用有效量的本发明的化合物，特别地或优选地以其药物组合物的形式施用，无论是通过例如口服、直肠途径还是通过肠胃外(包括皮下)途径施用。
用于本发明的药物组合物的药学上可接受的酸加成盐的例子包括例如衍生于无机酸如盐酸、溴化氢、磷酸、偏磷酸、硝酸、硫酸，和有机酸例如酒石酸、醋酸、柠檬酸、苹果酸、乳酸、富马酸(fumaric acid)、苯甲酸、羟基乙酸、葡萄糖酸、琥珀酸、对甲苯磺酸、和芳基磺酸的盐。
其它适合的药学上可接受的盐包括酸加成盐(与多肽的游离氨基所形成)。盐的其它例子包括药学上可接受的酸加成盐、药学上可接受的金属盐、铵盐和烷基化铵盐。酸加成盐包括无机酸以及有机酸的盐。适合的无机酸的代表性例子包括盐酸、溴化氢、碘化氢、磷酸、硫酸和硝酸等类似的酸。适合的有机酸的代表性例子包括甲酸、乙酸、三氯乙酸、三氟乙酸、丙酸、苯甲酸、肉桂酸、柠檬酸、富马酸、羟基乙酸、乳酸、马来酸、丙二酸、苦杏仁酸、苦味酸、丙酮酸、水杨酸、琥珀酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、酒石酸、抗坏血酸、双羟萘酸、二亚甲基水杨酸、乙烷二磺酸(ethanedisulfonic)，葡萄糖酸、柠康酸、天冬氨酸、硬脂酸、棕榈酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、对氨基苯甲酸、谷氨酸、苯磺酸、对甲苯磺酸等类似的酸。更多的药学上可接受的无机或有机酸加成盐的例子包括J.Pharm.Sci.1977，66，2中所列举的药学上可接受的盐，此处将其一并作为参考。金属盐的例子包括锂、钠、钾、镁盐和类似的金属盐。
铵盐和烷基化铵盐的例子包括铵、甲铵、二甲铵、三甲铵、乙铵、羟乙铵、二乙铵、丁铵(butylammonium)和四甲铵(tetramethylammonium)盐等类似的盐。
与游离羧基形成的盐也可以衍生于无机碱如钠、钾、铵、钙或者铁氢氧化物，以及衍生于如异丙胺、三甲胺、2-乙氨基乙醇、组氨酸、普鲁卡因(procaine)以及类似的有机碱。
在本发明的上下文中，化合物或其药学上可接受的酸加成盐的任何的氢氧化物(水合形式)都包括在化合物或其药学上可接受的酸加成盐的范围内。
肠胃外施用时，可以使用本发明的化合物溶解于无菌水溶液、水合丙二醇或芝麻油或花生油中所得的溶液。需要的话，这样的溶液应适当地缓冲，首先用足够的盐或葡萄糖等张液体稀释液。水溶液尤其适合于静脉、肌肉、皮下和腹腔施用。所使用的无菌水介质均可很容易地由本领域普通技术人员已知的标准方法获得。
液体组合物还可以包含除水之外的其它液相，或包含不含水的液相。这样的额外液相的例子为甘油、植物油如棉籽油、有机酯如油酸乙酯、以及水-油乳剂。
适合的药学载体包括惰性固体稀释物或填充物，无菌水溶液和各种有机溶剂。固态载体的例子为乳糖、白土(terra alba)、蔗糖、环式糊精、滑石粉、食用胶、琼脂、胶质、阿拉伯树胶、硬脂酸镁、硬脂酸或纤维素的低级烷醚。液态载体的例子为糖浆、花生油、橄榄油、磷脂、脂肪酸、脂肪酸胺、聚氧乙烯或水。经鼻施用的气溶胶或吸入制剂可以制备为例如盐溶液，使用苯甲醇或其它适合的防腐剂、吸收促进剂以增加生物可用性，使用碳氟化合物，和/或使用其它的增溶或分散试剂。
然后，通过将本发明的化合物与药学上可接受的载体结合而形成的药物组合物可以很容易地以适合于所公开的施用途径的各种剂量形式施用。可以通过制药领域已知的方法方便地以单位剂量形式提供所述制剂。
在本发明的优选实施方案中，所述制剂包含冻干物形式的促分泌素或其盐，所述制剂进一步包含溶剂，所述的冻干物和所述的溶剂在施用前处于分开的间格中。
在另一实施方案中，所述制剂为促分泌素或其盐的溶液。
在两个实施方案中，所述溶剂可以是任何适合的溶剂，例如此处所述的，优选溶剂为盐水。
本发明还涉及制备包含本发明化合物的药剂或药物组合物的方法，包括将如上述式I所定义的至少一种生长素释放肽样化合物与生理学上可接受的载体混合。
另一个方面，本发明涉及包含作为活性成分的如以上式I所定义的化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体的药物组合物。
因此，所述制剂可以进一步包括上述的转运分子。
联合治疗
在本发明的另一个方面，可以将本发明的化合物与更多的药理学活性物质或治疗方法或其它的药理学活性材料组合施用，此处短语与另一(些)物质和/或治疗方法“组合(in combination)”意思是在用促分泌素治疗个体之前、期间(包括同时)和/或之后将所述的另一(些)物质和/或治疗方法施用于个体来进行治疗。在此处所述的所有组合治疗的案例中，可以以部件式试剂盒系统的方式组合，其中组合的活性物质可以用于同时，顺序或分开施用。在所有案例中，优选此处提到的任何药剂均以药学上有效量施用，例如包括施用足以显示出对患者有意义的益处的药剂或药物组合物或方法的每种有效成分的总量。
在下面的部分，用于本发明的优选实施方案中的组合治疗分组如下：
1)其中均为调节食欲的药剂或者以其它方式用于治疗恶病质的活性成分的组合
2)促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物与对治疗疾病有活性的成分或疗法的组合，所述疾病由促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物所治疗的疾病或病症所导致或与其相关。
3)促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物与抵抗相关症状的活性成分或治疗的组合，所述的相关症状是与促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物所治疗的疾病或病症相关的症状。
当然，上述几个组的组合也在本发明的范围之内。
其中均为调节食欲的药剂或者以其它方式用于治疗恶病质和/或脂肪代谢障碍的活性成分的组合。
根据本发明的促分泌素可以与其它调节食欲的药剂组合施用，其它调节食欲的药剂包括多于一种类型的生长激素促分泌素，例如另一种生长素释放肽样化合物，如包含此处所述的由式I所定义的结构的生长素释放肽样化合物。其它适于与另一种促分泌素化合物组合施用的促分泌素为此处所述的任何的促分泌素化合物。在本发明的一个优选实施方案中，野生型生长素释放肽(最优选人野生型生长素释放肽)与不同的生长素释放肽样化合物组合施用，预期该组合将增强和/或延长促分泌素对生长素释放肽受体的作用。在本发明的另一个优选实施方案中，非野生型的生长素释放肽与不同的非野生型生长素释放肽样化合物组合施用-再次预期该组合将增强和/或延长促分泌素对生长素释放肽受体的作用。以类似的方法，可以将几种不同的促分泌素对个体施用以增强对生长素释放肽受体的功效-例如大于2种不同的促分泌素类型，例如3种，例如4种，例如5种，例如6种，例如7种，例如大于8种不同的促分泌素类型。也可以将根据本发明的促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物与药学上有效量的生长激素包括hGH组合施用。
在本发明的一个优选实施方案中，可以将促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物IGF-1，IGFBP-3，或ALS，优选与IGF-1组合施用。该组合治疗背后的基本原理是提高IGF-1，IGFBP-3，和/或ALS的水平，发现其水平在恶病质个体中较低。
在本发明的又一实施方案中，可以将促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物与已知的刺激食欲的化合物组合施用，这些化合物为例如黑素皮质素受体拮抗剂、神经肽Y受体激动剂包括神经肽Y受体个体亚型选择性激动剂、瘦素或瘦素受体激动剂、大麻碱(cannabinoids)包括大麻和大麻衍生物、抗精神病药(antipsychotics)、特别是非典型的抗精神病药如舍吲哚(sertindole)、舒必利(sulpirid)、氯噻平(Clozapine)、利培酮(Risperidone)、奎硫平(quetiapin)、氨磺必利(amisulpride)、Ziprasidon、和奥氮平(Olanzapine)。
促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物与对治疗疾病有活性的成分或疗法的组合，所述疾病由促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物所治疗的疾病或病症所导致或与其相关。
尤其是涉及癌症恶病质时，促分泌素如生长素释放肽样化合物的施用可以与任何的抗癌治疗组合使用，包括抗肿瘤化学治疗、放射治疗和手术治疗。尤其是与化学治疗和放射治疗组合使用。这样，在一个实施方案中，本发明涉及包含实施有效量的放射治疗和施用有效量的根据本发明的促分泌素如生长素释放肽样化合物以治疗癌症的方法。用促分泌素如生长素释放肽样化合物的治疗可以在放疗开始之前开始。其可以在放疗期间连续施用或者在例如放疗间期间隔施用。
在另一个实施方案中，本发明涉及包含施用有效量的抗肿瘤化学治疗和有效量的根据本发明的促分泌素如生长素释放肽样化合物来治疗癌症的方法。用促分泌素如生长素释放肽样化合物的治疗可以在化学治疗开始之前开始。其可以在化疗期间连续施用或者在例如化疗间期间隔施用。
另外，所述组合治疗可以将促分泌素如生长素释放肽样化合物和抗肿瘤化学治疗剂共配制成联合制剂(co-formulations)。
根据本发明的促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物也可以与药学上有效量的糖皮质激素类固醇和促动力(prokinetic)治疗以及其它癌症疗法中的治疗组合施用。如此，在本发明的另一优选实施方案中，根据本发明的促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物(s)与药学上有效量的一种或多种下述的药物组合施用：
妊娠前药物，如甲地孕酮(megastrol)和/或
赛庚啶(cyproheptadine)(和/或其它的5-HT受体拮抗剂)，和/或
支链氨基酸，和/或
oxandralin和/或
抗-TNF-α试剂，例如英夫利昔单抗(infliximab)、依那西普(etanercept)、或阿达木单抗(Adalimumab)和/或
睾丸素(Testosterone)和/或
包含免疫营养(immunonutrition)、抗氧化剂和COX-2抑制剂的“鸡尾酒”和/或
大麻碱，和/或
二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid)和/或
褪黑素(melatonin)和/或
thalidomide和/或
β2肾上腺素药物；最优选用于恶病质如癌症恶病质的治疗。
在另外一个实施方案中，促分泌素如生长素释放肽样化合物与抗炎化合物，优选NSAID，如吲哚美辛(Indomethacin)，和COX1抑制剂COX2抑制剂，和/或抗-TNF-α化合物如英夫利昔单抗(infliximab)、依那西普(etanercept)或阿达木单抗(adalimumab)组合施用。另一组合可以是与促红细胞生成素(erythropoietin)/EPO的组合。另一组合可以是与血管收缩素II减弱试剂，如Vitor的组合。另一组合可以是与选择性雄激素受体调控剂的组合。另一组合可以是与一种或多种瘦素、肾素-血管收缩素系统的激动剂、阿片样受体激动剂或者过氧化物酶体增殖激活受体γ激动剂的组合。
在涉及脂肪代谢障碍的治疗方面，本发明在另一实施方案中涉及促分泌素如生长素释放肽，更优选生长素释放肽样化合物与脂肪代谢障碍治疗例如此处所述的适于治疗脂肪代谢障碍综合症的一种或多种治疗或化合物组合施用的治疗。
这样，在本发明的方法中，其它可以与所述的促分泌素如生长素释放肽样化合物组合施用的药理学活性物质包括：
a)瘦素：瘦素已经显示出具有针对与脂肪代谢障碍相关的代谢异常的正面影响。已经证实该治疗对患有低瘦素血浆水平和具有正常水平的那些患者均是有益的。
b)过氧化物酶体增殖激活受体(PPAR-γ)激动剂：在几个研究中，已经显示PPAR-γ对脂肪细胞代谢和代谢综合症来讲是重要的，提示PPAR-γ激动剂会减轻脂肪代谢障碍的症状。
c)肾素-血管收缩素系统的激动剂：已经显示用HAART治疗增强了ACE在T-细胞中的活性，这意味着肾素-血管收缩素系统的激动剂可以改善HAART诱导的脂肪代谢障碍。
d)阿片样受体拮抗剂：已经显示阿片样受体拮抗剂如纳洛酮(Naloxone)和纳曲酮(naltrexone)延长从蛋白酶抑制剂治疗到发展出首次脂肪代谢障碍症状的时间。
e)脱酰生长素释放肽：发现生长素释放肽与脱酰生长素释放肽的组合减小胰岛素抗性，胰岛素抗性为脂肪代谢障碍的重要特征。
f)Adiponectin和抗糖尿病治疗，抗糖尿病治疗包括其它用于治疗和/或预防胰岛素抗性和病理生理学机制为胰岛素抗性的疾病的化合物。
g)已报道用rhGH治疗使‘水牛肚’，身体脂肪尺寸减小，并在少数患者中使身体变瘦。然而，脂肪损失和脂质异常没有改善，血糖控制恶化。用hGH治疗的综合症的例子包括HIV、AIDS和癌症。不受理论的束缚，相信用生长素释放肽或其类似物治疗将会保持和/或增加用hGH治疗的患者的身体脂肪，因此有效地抵消或至少减少由hGH引起的脂肪代谢障碍。因此，在一个优选的实施方案中，本发明涉及在感染HIV或AIDS和/或癌症恶病质的个体中，与生长激素组合使用生长素释放肽或其类似物。所述用生长素释放肽或其类似物的治疗可以在个体用生长激素治疗之前、期间和/或之后进行。所述的生长激素优选hGH。
h)用上述1)下面所述的不同促分泌素的组合进行治疗。
促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物与抵抗相关症状的活性成分或治疗的组合，所述的相关症状是与促分泌素如生长素释放肽或生长素释放肽样化合物所治疗的疾病或病症相关的症状。
本发明进一步涉及组合治疗，其中，组合中的一种成分用于治疗患恶病质的个体所患的症状或病症。因此，包括施用根据本发明的促分泌素如生长素释放肽样化合物的用途或组合治疗也可以包括与下述的一种或多种的组合治疗：
a)临床抑郁的预防和/或缓解和/或治疗，其中组合治疗进一步包含施用抗抑郁剂、其前药、或所述抗抑郁剂或所述前药的药学上可接受盐。在上述的组合治疗中，所述抗抑郁剂优选为去甲肾上腺素(norepinephrine)再摄取抑制剂(NERI)、选择性血清素(serotonin)再摄取抑制剂(SSRI)、单胺氧化酶抑制剂(MAO)、NERI/SSRI组合、或者非典型的抗抑郁剂、所述抗抑郁剂的前药或所述抗抑郁剂或其前药的药学上可接受盐。
一种优选的抗抑郁剂是选择性血清素(serotonin)再摄取抑制剂(SSRI)、其前药或所述的SSRI或其前药的药学上可接受盐。SSRI优选西酞普兰(citalopram)、依地普仑(escitalopram)、非莫西汀(femoxetine)、氟西汀(fluoxetine)、氟伏沙明(fluvoxamine)、吲达品(indalpine)、茚洛秦(indeloxazine)、米那普仑(milnacipran)、帕罗西汀(Paroxetine)、舍曲林(sertraline)、西布曲明(sibutramine)或齐美定(zimeldine)，所述SSRI的前药或所述SSRI或其前药的药学上可接受盐。其中的西酞普兰和依地普仑，其前药或其药学上可接受盐在根据本发明的组合治疗的特定实施方案中是优选的。
b)呕吐症状包括反胃和呕吐的预防和/或缓解和/或治疗，其中组合治疗进一步包含施用止吐药，其前药，或所述止吐药或其前药的药学上可接受盐。用于根据本发明的组合治疗中的优选止吐药包括盐酸美其敏(meclizine)、普鲁氯嗪(prochlorperazine)、普鲁米近(promethazine)、盐酸曲美苄胺(trimethobenzamide)和盐酸昂丹司琼(ondansetron)。
尤其是呕吐可能由癌症所引起，或者起因于抗癌治疗或者起因于这样的癌症疾病。
c)精神病症状的预防和/或缓解和/或治疗，其中组合治疗进一步包含施用抗精神病药、其前药或所述抗精神病药或其前药的药学上可接受盐。用于根据本发明的组合治疗的优选抗精神病药包括氯丙嗪(chlorpromazine)、氟哌啶醇(haloperidol)、氯噻平、洛沙平(loxapine)、盐酸吗茚酮(molindone)、替沃塞吨(thiothixene)、奥氮平、齐拉西酮(ziprasidone)、盐酸齐拉西酮、丙氯拉嗪(prochlorperazine)、奋乃静(perphenazine)、盐酸三氟拉嗪(trifluoperazine)和利培酮。
d)焦虑的预防和/或缓解和/或治疗，其中组合治疗进一步包含施用抗焦虑药、其前药或所述抗焦虑药或其前药的药学上可接受盐。用于根据本发明的组合治疗的优选抗焦虑药包括阿普唑仑(alprazolam)、氯硝西泮(clonazepam)、劳拉西泮(lorazepam)、奥沙西泮(oxazepam)、盐酸氯氮卓(chlordiazepoxide)、地西泮(diazepam)、盐酸丁螺环酮(buspirone)、盐酸多塞平(doxepin)、双羟萘酸羟嗪(hydroxyzine pamoate)和氯硝西泮(clonazepam)。
医药包装产品
本发明的化合物可以以单一剂量或多剂量的形式单独施用或者与药学上可接受的载体或赋形剂组合施用。可以方便地通过本领域普通技术人员已知的方法以单位剂量形式提供制剂。
优选以试剂盒的方式提供根据本发明的化合物。这样的试剂盒典型地包含用于施用的剂量形式的活性化合物。剂量形式包含足够量的活性化合物，从而在一天或更多天的过程中施用于对象时能够获得所需的效果，优选在一天的至少一餐前施用，更优选在每个主餐前，例如一天三次。
这样，优选医药包装制品包含相应于有关剂量方案的剂量单位量。相应地，在一个实施方案中，所述医药包装制品包含含有如上定义的化合物或其药学上可接受盐和药学上可接受载体、媒介和/或赋形剂的药物组合物，所述的包装具有7至21个剂量单位，或其综合，因此具有施用一周或数周的剂量单位。
在一个实施方案中，所述医药包装制品用于在一周中每天施用一次，包含7个剂量单位，在另一实施方案中，所述医药包装制品用于每天施用两次，包含14个剂量单位。在又一更优选的实施方案中，所述医药包装制品用于每天施用三次，包含21个剂量单位。
所述剂量单位如以上所定义的，例如剂量单位优选包含相当于0.3μg到600mg生长素释放肽的生长素释放肽样化合物或其盐，例如相当于2.0μg至200mg生长素释放肽，例如相当于5.0μg至100mg生长素释放肽，例如相当于10μg至50mg生长素释放肽，例如相当于10μg至5mg生长素释放肽，例如相当于l0μg至1.0mg生长素释放肽。
所述医药包装制品可以为用于肠胃外尤其是皮下施用的任何适合的形式。在优选实施方案中，所述包装为药筒形式，例如用于注射笔的药筒，所述注射笔为例如胰岛素治疗中已知的注射笔。
当所述医药包装制品包含多于一个剂量单位时，优选为所述医药包装制品提供将每次施用调整为只有一个剂量单位的机械装置。
优选地，试剂盒含有指导使用所述剂量形式以获得所需的效果以及在特定时期服用剂量形式的量的说明。相应地，在一个实施方案中，所述医药包装制品包含施用药物组合物的说明。尤其是所述说明可以包括涉及在进餐期间或者优选餐前至多45分钟，例如餐前至多30分钟，例如餐前至多25分钟，例如餐前至多20分钟，例如餐前至多15分钟，例如餐前至多10分钟，例如餐前至多5分钟施用所述的药物组合物的说明。
监测生长素释放肽和/或生长素释放肽样化合物治疗效果的方法
另一方面，本发明涉及监测施用本发明的促分泌素如生长素释放肽样化合物的效果的方法，在本发明的方法中，包含测量一种或多种标记，尤其是选自IGF-I、IGFBP-3、ALS(酸标记的)、甲状腺素、性激素，和白蛋白的标记，更优选选自IGF-I、IGFBP-3、ALS(酸标记的)，更优选IGF-1。这些标记在恶病质患者体内含量均较低，预期在用生长素释放肽治疗后将升高。因此本发明涉及监测用本文所述的促分泌素对个体进行任何治疗的效果的方法，所述的方法包含测量所述个体下述一种或多种标记的血液水平：
(i)IGF-1和/或
(ii)IGFBP-3和/或
(iii)ALS和/或
(iv)一种或多种甲状腺素和/或
(v)一种或多种性激素和/或
(vi)白蛋白
或者，更优选地，一种或多种：
(i)IGF-1和/或
(ii)IGFBP-3和/或
(iii)ALS。
测量物质的个体血液水平的方法是本领域熟知的。作为例子，可以通过例如Western印迹法或者通过酶联测试(ELISA)检验分离的血液样品。
附图详述
图1A-D：A)给小鼠皮下注射(箭头)12和24nmol的生长素释放肽增加了血浆生长素释放肽浓度(每个组中n＝6)。
B)注射12nmol的生长素释放肽6小时后血浆生长素释放肽仍然是升高的。
C)受12nmol生长素释放肽的影响，活性(辛酰化的)生长素释放肽的血浆浓度大幅提高，且
D)注射6h后仍然保持高浓度。平均值+/-S.E.M(n＝4)。
图2：假手术或胃切除术8周后每天施用或不施用生长素释放肽(12nmolsc)的小鼠体内的生长素释放肽浓度。胃切除术降低了血浆生长素释放肽浓度。注射生长素释放肽后16-18h后血浆生长素释放肽浓度提高。平均值+/-S.E.M.(n＝10)。
图3：假手术或胃切除术8周后每天施用或不施用生长素释放肽(12nmolsc)的小鼠体内的生长素释放肽浓度。胃切除术降低了血浆生长素释放肽浓度。注射生长素释放肽后16-18h后血浆生长素释放肽浓度提高。平均值+/-S.E.M.(n＝10)。
图4：胃切除术和/或每天施用生长素释放肽(12nmol sc)对小鼠体内脂肪储存的影响。研究持续时间为8周。胃切除术减少了脂肪量，施用生长素释放肽使脂肪储存正常化。施用生长素释放肽增加了接受假手术的大鼠的脂肪量。平均值+/-S.E.M.(n＝10-12)。
图5：接受假手术或胃切除术的每天施用或不施用生长素释放肽(12nmol sc)的小鼠体重的减轻。胃切除术减轻了瘦体重(lean body mass)，施用生长素释放肽使该效应反转。在接受盐或生长素释放肽的两组假手术的小鼠之间其瘦体重没有差异。*p＜0.05，**p＜0.01。平均值+/-S.E.M.(n＝10-12)。
图6：临床试验的总曲线图，所述临床试验用于评估在4个健康志愿者和4个癌症恶病质患者中施用生长素释放肽的急性影响。V0a和V0b代表在患者接受相关的测试或对照化合物治疗期间的访问。
图7：临床试验的总曲线图，所述临床试验用于评估给患癌症恶病质的患者施用低剂量或高剂量生长素释放肽的长期影响。
图8：用于实施例11所述的临床试验中的评估患者症状的患者评价表。
图9A-C：显示不同的生长素释放肽制剂在大鼠体内的药代动力学的附图(参见实施例9和10中的描述)。
图10：研究生长素释放肽制剂药代动力学的动物研究的总结(参见实施例9和10中的进一步描述)。
图11：显示皮下施用生长素释放肽对生长激素水平影响的曲线图。这些结果显示生长激素水平明显升高超过5倍。
实施例
实施例1
竞争性结合实验
转染一天后将转染的COS-7细胞转移到培养板上，使密度为每孔1×105个细胞/每孔，目的是达到5-8％的放射性配体结合率。转染两天后，在4？下用25pM的125I-生长素释放肽(Amersham，Little Chalfont，UK)进行3个小时的竞争性结合实验。结合测试在补充有1mM的CaCl2，5mM的MgCl2和0.1％(w/v)的牛血清白蛋白，40mg杆菌肽/ml的pH7.4，0.5ml的50mMHepes缓冲液中进行。在存在1微摩尔未标记生长素释放肽的情况下测定非特异性结合。将细胞在0.5ml的冰冷缓冲液中洗两次，再加入0.5-1ml的裂解缓冲液(8M脲，2％NP40溶解于3M醋酸中)，然后计算结合放射活性。重复测定一次。最初实验表明在这些条件下用放射性配体达到稳态结合。
实施例2
生长素释放肽样化合物的合成生产
氨基酸衍生物和合成试剂可由商业来源获得。可以用Perkin Elmer生产的Applied Biosystem 433A合成仪延伸肽链，用Boc或Fmoc方法构建被保护的多肽衍生物树脂。在对甲基苯酚存在的下用无水氟化氢(HF)对由Boc方法得到的保护肽树脂脱保护，从而释放多肽，然后将其纯化。用三氟醋酸(TFA)或含有多种净化剂稀释的TFA对由Fmoc方法得到的保护肽树脂脱保护，纯化释放的多肽。在C4或C18柱上的反相HPLC中纯化。可以用反相HPLC确定纯化产物的纯度，可以通过氨基酸成分分析和质谱分析确定其结构。
可以通过传统的肽合成方法生产本发明的多肽。特别地，酰化或烷基化肽的合成举例如下。进一步，人源生长素释放肽(此后可以将其简称为hGhrrlin)或大鼠源生长素释放肽(此后可以将其简称为r Ghrrlin)与胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶或两种酶相继反应而产生如下生长素释放肽片段：19.生长素释放肽(16-28)，20.h Ghrrlin(1-15)，21.r Ghrrlin(1-15)，23.h Ghrrin(1-11)，24.r Ghrrlin(1-11)，25.生长素释放肽(1-10)，26.生长素释放肽(1-9)，27.生长素释放肽(1-8)，30.生长素释放肽(1-4)。然后，通过分析性HPLC分离这些片段并测定其活性。可以用N-乙酰琥珀酰亚胺处理生长素释放肽(1-10)的常见方式制备41.[N-乙酰基]-生长素释放肽(1-10)。也可以通过使用天然材料制备人和大鼠的生长素释放肽。
缩写词
HMP树脂：4-羟甲基-苯氧甲基树脂
Fmoc酰胺树脂：4-(2’，4’-二甲氧苯基-Fmoc-氨甲基)苯氧乙酰胺基-乙基树脂
PAM树脂：聚乙酰胺甲基树脂(phenylacetoamidomethyl resin)
HBTU：2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸酯
TBTU：2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲四氟硼酸酯
HOBt：1-羟基苯并三唑
DCC：二环己基碳二亚胺
DIPCI：二异丙基碳二亚胺
TFA：三氟乙酸
DIPEA：二异丙基乙基胺
TIPS：三异丙基硅烷
Fmoc：芴甲氧羰基
Boc：t-丁氧羰基
Trt：三苯甲基
Bu：t-丁基
Pmc：2，2，5，7，8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基
Prl：丙酰基
PhPrl：苯丙酰基
Bzl：苄基
Bom；苄氧甲基
Tos：甲苯磺酰基
Cl-Z：2-氯-苄氧羰基
Pis：2-苯异丙基
Mtt：4-甲基三苯甲基
DMF：N，N-二甲基甲酰胺
NMP：N-甲基吡咯烷酮
DMAP：4-二甲基氨基吡啶
HOSu：N-羟基琥珀酰亚胺
Adod：2-氨基十二酸
Aib：2-氨基异丁酸
Ape：5-氨基戊酸
Cha：环己基丙氨酸
Dap：2，3-二氨基丙酸
Nal：萘丙氨酸(naphtylalanine)
Nle：正亮氨酸
可用于合成中的保护性氨基酸
Fmoc法：
Boc-Gly，Fmoc-Gly，Fmoc-Ser(Bu)，Fmoc-Ser(Trt)，Fmoc-Glu(OBu)，Fmoc-His(Boc)，Fmoc-Gln(Trt)，Fmoc-Arg(Pmc)，Fmoc-Lys(Boc)，Fmoc-Pro，Fmoc-Leu，Fmoc-Ala，Fmoc-Val，Fmoc-Phe，Fmoc-Phe，Fmoc-Ser(n-C8H17)，Fmoc-Ser(n-C8H17)，Fmoc-Cys(n-C8H17)，Fmoc-Asp(OPis)，Fmoc-Ser(Bzl)，Fmoc-Cys(Trt)，Fmoc-Dap(Octanoyl)，Fmoc-2-Nal，Fmoc-2-Nal，Fmoc-Nle，Fmoc-Lys(Mtt)，Fmoc-Aib-OH，Fmoc-Asp(O-C7H15)
Boc法：
Boc-Gly，Boc-Ser(Bzl)，Boc-Ser(Ac)，Boc-Ser(Prl)，Boc-Glu(OBzl)，Boc-His(Bom)，Boc-Gln，Boc-Arg(Tos)，Boc-Lys(Cl-Z)，Boc-Pro，Boc-Leu，Boc-Ala，Boc-Val，Boc-Phe，Boc-Cys(n-C8H17)，Boc-Ape Boc-Ser(n-C8H17)
使用的设备
(a)分析性HPLC系统
设备：Shimadzu LC-10A系统
柱：YMC PROTEIN-RP(4.6mm phi×150mm)
柱温度：40 DEG C
洗脱：在0.1％三氟醋酸中用0到50％的乙腈线性梯度洗脱20分钟
流速：1ml/min
检测：UV(210nm)
注射体积：10-100mul
(b)制备性HPLC系统
设备：Waters 600 Multisolvent Delivery System
柱：
YMC-Pack-ODS-A(5mum，20mm×250mm)
YMC-Pack-PROTEIN-RP(5mum，C4，10mm×250mm)
YMC-Pack PROTEIN-RP(5mum，C4，20mm×250mm)
YMC PROTEIN-RP(4.6mm phi×150mm)
洗脱：在0.1％三氟醋酸中适合的乙腈浓度的线性梯度
流速：10ml/min.(适于内径为20mm的柱)，3ml/min.(适于内径为10mm的柱)，1ml/min.(适于内径为4.6mm的柱)检测：210nm，260nm
注射：10-2000mul(通过泵注射2000mul或更多)
(c)质谱仪
设备：Finigen MAT TSQ700
离子源：ESI
检测离子模式：阳性
喷射电压：4.5kV
毛细管温度：250 DEG C
流动相：0.2％醋酸和甲醇(1∶1)的混合物
流速：0.2mL/min
扫描范围：m/z 300-1,500
(d)氨基酸序列分析
设备：Perkin Elmer生产的Applied Biosystem 477A、492型测序仪
(e)氨基酸成分分析
设备：Hitachi，Co.，Ltd生产的L-8500型氨基酸分析仪
样品：除非特殊说明，将样品于密封试管中在110 DEG C下用6M HCl水解24小时。
合成具有酰基丝氨酸的衍生物(Fmoc法，羧基端酰胺衍生物)的例子
h生长素释放肽：GSS(CO-C7H15)FLSPEHQRVQQRKESKKPPAKLQPR
用20％哌嗪处理Fmoc-Arg(Pmc)-HMP-树脂(403mg，0.25mmol，ABICo.，Ltd)20分钟，并用HBTU/HOBt重复引入Fmoc氨基酸，接下来用哌嗪除去Fmoc，得到Fmoc-Ser(Bu)-Ser(Trt)-Phe-Leu-Ser(tBu)-Pro-Glu(OBu)-His(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pmc)-Val-Gln(Trt)-Gln(Trt)-Arg(Pmc)-Lys(Boc)-Glu(OBu)-Ser(Bu)-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Pro-Pro-Ala-Lys(Boc)-Leu-Gln(Trt)-Pro-Arg(Pmc)-树脂。最后用DCC/HOBt引入Boc-Gly后，用1％TFA-5％TIPS-二氯甲烷溶液(15ml)处理所得到的保护性肽树脂(1.3g)30分钟。过滤肽树脂，然后用二氯甲烷(30ml)洗几次，用5％DIEA(10ml)洗，然后再用二氯甲烷(30ml)洗。用NMP(10ml)溶胀所得的de-Trt肽树脂(大约1.3g)，在DMAP(61.1mg，0.5mmol)存在下加入辛酸(144.2mg，1.0mmol)和DIPCI(126.6mg，1.0mmol)，使之反应8小时。过滤回收树脂，用NMP冲洗，然后用二氯甲烷冲洗，接下来在真空中干燥，产生约1.2g保护的肽树脂，其中侧链的第三个丝氨酸是辛酰化的。向此产物中加入由88％TFA-5％苯酚-2％TIPS-5％水组成的脱保护试剂(10ml)，室温下搅拌混合物2小时。过滤去除树脂，浓缩滤液，然后向所得残留物中加入醚形成沉淀。过滤回收沉淀并干燥，得到约550mg粗制肽。将200mg该产物溶解于10ml水中，加至YMC-Pack PROTEIN-RP(C4，20nm×250mm)，用0.1％三氟醋酸中0至54％乙腈线性梯度(流速：10ml/min)洗脱60分钟。收集所需级分并将其冻干，得到约120mg所需的产物。
合成具有酰基丝氨酸的衍生物(Fmoc法，羧基端酰胺化合物)的例子
生长素释放肽(1-9)-NH2；GSS(CO-C7H15)FLSPEH-NH2
用20％哌嗪处理Fmoc酰胺树脂(403mg，0.25mmol，ABI Co.，Ltd)20分钟，并用HBTU/HOBt重复引入Fmoc氨基酸，接下来用哌嗪除去Fmoc，得到Fmoc-Ser(Bu)-Ser(Trt)-Phe-Leu-Ser(Bu)-Pro-Glu(OBu)-His(Bo c)-树脂。最后用DCC/HOBt引入Boc-Gly后，用1％TFA-5％TIPS-二氯甲烷溶液(10ml)处理所得到的保护性肽树脂(约550mg)30分钟。过滤回收肽树脂，用二氯甲烷(30mL)冲洗几次，再用5％的DIEA(10mL)冲洗，然后用二氯甲烷(30mL)冲洗。用NMP(10ml)溶胀所得的de-Trt肽树脂(约750mg)，在DMAP(61.1mg，0.5mmol)存在下加入辛酸(144.2mg，1.0mmol)和DIPCI(126.6mg，1mmol)，使之反应4小时。过滤回收肽树脂，用NMP冲洗，然后用二氯甲烷冲洗，接下来在真空中干燥，产生约800mg保护的肽树脂，其中侧链的第三个丝氨酸是辛酰化的。向此产物中加入TFA(10mL)，室温下搅拌混合物30分钟。过滤去除树脂，然后浓缩滤液，接下来向所得残留物中加入醚形成沉淀。过滤回收沉淀并干燥，得到约250mg粗制肽。将约200mg该产物溶解于10ml 30％的含水乙酸中，加至YMC-PackPROTEIN-RP(C4，20nm×250mm)，用0.1％三氟醋酸中0至54％乙腈线性梯度(流速：10mL/min)洗脱60分钟。收集所需级分并将其冻干，得到约150mg所需的产物。
合成具有酰基丝氨酸的衍生物(Boc法)的例子
[Ser3(Propionyl)]-r生长素释放肽(1-28)；
GSS(CO-CH2CH3)FLSPEHQKAQQRKESKKPPAKLQPR
用Boc化学法由Boc-Arg(Tos)-Pam树脂(0.75g，0.5mmol)构建被保护的大鼠生长素释放肽树脂(4-28)，将Boc-Ser(CO-CH2CH3)-OH、Boc-Ser(Bzl)-OH和Boc-Gly-OH与一半(1.4g)树脂缩合。然后在0 DEG C用HF和p-cresol(8.5mL∶1.5mL)的混合物处理所得的1.5g树脂1小时，蒸发掉HF。往残留物中加入醚，由此得到671mg的粗肽。然后将该样品溶解于50％乙酸(AcOH)中，加至制备性柱YMC-Pack-ODS-A(5mum，20mm×250mm)，用0.1％TFA溶液中的0至95％乙腈浓度梯度以10mL/min的流速洗脱75分钟。将包含所需产物的级分冻干，得到约135.8mg粗肽。将一部分(0.5mg)该产物加至YMC-A-302柱(C18，4.6mm×l50mm)，以15至19％浓度梯度的乙腈以1mL/min的流速洗脱。然后重复该纯化程序，合并所需级分，得到约0.41mg的所需产物。
同样可以制备根据本发明的其它化合物。
实施例3
通过随机化的、单一中心、四个时期的交叉试验(randomised，singlecentre，four-period cross-period trial)来研究在健康对象中以三种不同单一剂量iv施用的生长素释放肽和sc施用的生长素释放肽的绝对生物利用度。
目的：
主要的：研究作为单一iv和sc剂量施用的三种不同剂量生长素释放肽的绝对生物利用度。
次要的：1)研究上升剂量的剂量线性(剂量比例)。2)研究并比较治疗之间的药效图谱。3)评估安全性和局部耐受性。
试验设计：
通过随机化的、单一中心、不平衡区块设计、四个时期的交叉试验(randomised，single centre，unbalanced block design，four-period cross-over trial)来研究在健康对象中以三种不同单一剂量iv施用的生长素释放肽和sc施用的生长素释放肽之间的绝对生物利用度。每种施用方式均使用三个剂量：低，中和高。为降低给予每个个体的给药次数(number of dosings)并因此降低试验长度，每个对象只接受总共6个剂量中的4个剂量，即分别iv和sc施用两个剂量水平。所述的不平衡区块设计(unbalanced block design)将确保所有的三剂量水平均能通过这种方式来覆盖，尽管并非所用对象均能获得所有剂量水平。在个体的定量给药期间设置足够的冲失(washout)期。
终点：
生长素释放肽的药代动力学：
AUC0-t，AUC，Cmax，tmax，t1/2，Cl/f，Vz/f，Cl，Vz，，t1/2，MRT
药效学：
GH：AUC，Cmax和tmax
心输出量，饥饿评估，食物/能量摄入，乐意进食的程度，体重，能量消耗，DEXA。
安全性：
将在整个研究过程中通过临床评价(身体检查和生命迹象)，绘心电图和实验室试验(血液学和临床化学)评定安全性和局部耐受性。
试验人群和能力计算：
健康男性对象，年龄18-45岁，体重指数(BMI)19-26kg/m2(两者均包括)。
该研究的首要目的是调查以iv和sc方式施用的生长素释放肽的绝对生物利用度。不均衡区块设计将用于缩短试验期时间并减少给予每个对象的给药次数。需要统计分析每个剂量水平的绝对生物利用度以及分析剂量之间的剂量线性的对象数目，将以现有文献资料为基础计算。
试验产品：
用于iv和sc施用的生长素释放肽。
实施例4
已通过皮下施用生长素释放肽治疗了一名已确定患癌症恶病质和厌食的患者，其对每周进行生长素释放肽IV注射反应良好。该患者患有间皮瘤，其未显示出对iv施用生长素释放肽治疗的不良反应。
治疗
每天皮下注射0.8-1.5mg/kg的生长素释放肽两次来治疗患者，治疗四周。注射在餐前进行。
评价
在第1和第2天通过每次注射前后采集血样并测量生长激素和活性及总生长素释放肽的血浆水平来进行药代动力学和药效学评估。
接下来每周将对患者进行标准实验室测验，恶病质/厌食和生活质量文卷调查，体重，身体成分分析(DEXA扫描)和胸部X射线或胸腔CT。
结果
患者具有稳定的体重和身体成分。他没有感觉到更强烈的饥饿，但他能吃完整盘的食物，这些是他在治疗前所无法完成的。
CT扫描可以证明在皮下生长素释放肽治疗期间肿瘤没有发展。实验室数值并没有显示出超出这样的患者本身固有的变化性的实质性差异。
测量两次皮下注射前后的血浆生长激素显示生长激素水平明显增长超过5倍(见图11)，因此证明注射的生长素释放肽是活性的，并在患者体内发挥了它的作用。
结论：
每天皮下注射生长素释放肽显示出对癌症恶病质和厌食患者的治疗有显著效果。该治疗使其体重在超过4周时间保持稳定，并增强真实的饥饿和进餐能力。此外，该治疗无显著的副作用，治疗期间肿瘤也没有发展。
实施例5
生长素释放肽受体的功能测试
转染和组织培养-将COS-7细胞培养于Dulbecco’s改进Eagle’s培养基1885中，该培养基中添加有10％的胎牛血清，2mM谷氨酰胺和0.01mg/ml庆大霉素。使用如前所述添加氯喹的磷酸钙沉淀法(Holst et al.Mol.Pharm(1998)；53；1；p166-175，“Steric hindrance mutagenesis versus alanine scan inmapping of ligand binding sites in the tachykinin NK1 receptor”)转染细胞。可变量的DNA用于基因剂量实验中。最大信号的cDNA的量(20μg/75cm2)是用于剂量响应曲线的量。将HEK-293细胞培养于富含葡萄糖的D-MEM，Dulbecco’s改进Eagle’s培养基31966中，培养基添加有10％的小牛胚胎血清，2mM谷氨酰胺和0.01mg/ml庆大霉素。用Lipofectamine 2000(LifeTechnologies)转染细胞。
磷酯酰肌醇转换(Phosphatidylinositol turnover)-转染1天后，将COS-7细胞在1ml培养基中与5μCi的[3H]肌醇([3H]-myo-inositol)(Amersham，PT6-271)一起培养24小时，所述培养基每孔添加10％的小牛胚胎血清、2mM谷氨酰胺和0.01mg/ml庆大霉素。将细胞在添加有140mM NaCl，5mMKCl，1mM MgSO4，1mM CaCl2，10mM葡萄糖，0.05％(w/v)牛血清的20mM HEPES，pH7.4的缓冲液中洗两次；在添加有10mM LiCl的0.5ml缓冲液中37℃培养30分钟。37℃下，用不同浓度的肽刺激45分钟后，用10％冰冻高氯酸提取细胞，然后在冰上培养30分钟。在HEPES缓冲液中用KOH中和得到的上清液，如所述那样在Bio-Rad AG 1-X8阴离子交换树脂上纯化产生的[3H]-肌醇磷酸。所述测定一式二份进行。
CRE，SRE和NF-κ-B报告因子检测。瞬时转染接种于96孔平板上的HEK293细胞(30000细胞/孔)。在CRE报告因子检测情况下，用pFA2-CREB和pFR-Luc报告因子质粒(PathDetect CREB反式报告系统，Stratagene)或SRE-Luc(PathDetect SRE顺式报告系统，Stratagene)和指定量的受体DNA的混合物转染细胞。转染之后，在整个试验中将细胞保持在低血清中(2.5％)，用各自的细胞内信号途径抑制剂处理。转染一天后，用各自的配体在测试量的100μl培养基中处理细胞5小时。用PBS冲洗细胞两次，并加入100μl荧光素酶测试试剂(LucLite，Packard)，以此结束测试。在TopCounter(TopCount NXTTM，Packard)中测定发光值5秒钟。以相对光单位(RLU)的方式给出发光值。
MAP激酶测试：在测试平板上转染COS 7细胞(接种密度150.000细胞/孔)。转染两天后，将指定浓度的配体加至不含任何血清的测试平板板，37°C培养10min。通过除去培养基和冰冷PBS的两次冲洗步骤来终止反应。在样品缓冲液中裂解细胞，并在根据Laemmli(″Cleavage of structural proteinsduring the assembly of the head of bacteriophage T4″Nature vol 227，p680-685)的SDS/10％PAGE上分离。将蛋白转移到硝化纤维上，用1∶5000稀释的小鼠单克隆antiphopho-ERK1/2抗体(Santa Cruz Biotechnology)进行Western印迹分析。用1∶10000稀释的抗ERK抗体测定总ERK蛋白。用抗小鼠辣根过氧化物酶偶联的第二抗体探查印迹，用增强型化学发光试剂(AmershamBioscience，New Jersey，US)成像，并用光密度分析法定量。通过记录phopho-ERK1/2相对于总ERK1/2的比例数据，依据加载的蛋白，校准ERK1/2的磷酸化。以在非刺激模拟转染细胞中获得的数值百分数的方式记录结果。
实施例6
皮下施用生长素释放肽的功效
通过颈部的皮下药团注射给6+6只鼠施用12或24nmol的生长素释放肽(分别相应于400和800nmol kg-1)。在注射前(时间0)和注射后15，60，120，240和300分钟采集血样(orbital puncture(Salehi等，J Physiolo 1999；514：579-591))。在20μl血浆中用放射免疫测试(RIA)测定免疫活性生长素释放肽，其使用由酰化人生长素释放肽(Phoenix Pharmaceuticals)产生的抗血清进行；1251标记的生长素释放肽-28作为示踪物，大鼠生长素释放肽-28作为标准物。该抗血清识别辛酰化和脱辛酰化的生长素释放肽-28，但不识别脱酰化-Gln14生长素释放肽。血浆浓度记录为每升大鼠生长素释放肽-28的pmol当量。使用免疫吸收测试(ELISA)试剂盒的酶(LINCO Research，St.Charles，MO，USA)测定50μl血浆中的活性(辛酰化的)生长素释放肽。此抗血清不识别脱辛酰化生长素释放肽。
结果：
(平均值以+/-S.E.M表示)
给小鼠(每组中n＝6)皮下注射(箭头)12和24nmol生长素释放肽提高了血浆生长素释放肽浓度(见图1A)；注射12nmol的生长素释放肽6h后血浆生长素释放肽仍然保持升高(见图1B)。由于注射了12nmol的生长素释放肽，小鼠中(n＝4)活性(辛酰化的)生长素释放肽的血浆浓度大幅提高(见图1C)；这些水平在注射6小时后仍保持高水平(见图1D)。
实施例7
皮下施用生长素释放肽治疗胃切除术个体的功效
对小鼠实施胃切除术或假手术。通过切除腺胃(窦和底)来实施胃切除手术，然后将十二指肠和瘤胃末端对末端接合。胃切除术相关的死亡率为10％。在8周时间里，对一些进行了胃切除术和假手术的小鼠每天施用皮下剂量的生长素释放肽(12nmol)。对照施用盐水。在起初的14天在早上(上午8-9点)注射，接下来的注射在下午(17-18pm；随之的反应在体重增加方面没变，因此注射的时间选择可以改变)。8周后断颈法杀死小鼠(最后注射16-18小时后)。收集血液，将血浆-20℃贮存用于生长素释放肽的测定(见下面)。用双能量X射线吸光测定法(DXA)(PIXImus，Lunar Corporation，Madison，MI，USA)分析瘦组织(lean tissue)。切割白色脂肪组织(WAT)(肠系膜的，腹膜后-肾脏的，性腺的和腹股沟的)和肩胛内褐色脂肪组织(BAT)并称重。
循环生长素释放肽的测量：如果没有另外说明，在杀死的动物的血浆上测定循环生长素释放肽(端点分析)。放射免疫测定法(RIA)测定20μl血浆中免疫活性生长素释放肽，其使用由酰化人生长素释放肽(PhoenixPharmaceuticals)产生的抗血清进行；125I标记的生长素释放肽-28用作示踪物，大鼠生长素释放肽-28作为标准物。此抗血清同时识别辛酰化和脱辛酰化生长素释放肽-28，但不识别脱酰化Gln14生长素释放肽。用每升大鼠生长素释放肽-28的pmol当量表示血浆浓度。酶联免疫吸收测试(ELISA)试剂盒(LINCO Research，St.Charles，MO，USA)测定50μl血浆中的活性(辛酰化)生长素释放肽。此抗血清不识别脱辛酰化生长素释放肽。
统计分析：以平均值+/-S.E.M表示数值。使用Bonferroni`s多对比检验，通过Student t-检验或单因子变异数分析(one-way analysis ofvariance)(ANOVA)分析差异。小于0.05的p值视为统计学显著的。
结果：
i)生长素释放肽水平：
测定假手术或胃切除术8周后每天皮下施用或不施用生长素释放肽的小鼠的血浆生长素释放肽浓度(12nmol sc)-见图2。胃切除术降低了血浆生长素释放肽浓度。注射生长素释放肽16-18小时后血浆生长素释放肽浓度升高。
ii)增重：
胃切除术降低了小鼠的体重(-15％)(见图3)。每天皮下注射生长素释放肽(12nmol sc)增加了胃切除小鼠的体重(8％)，但没有增加假手术老鼠的体重。
iii)身体组分：
脂肪储藏：胃切除术减少了小鼠的脂肪量(-30％)。每天施用生长素释放肽(12nmol sc)使胃切除小鼠的脂肪量恢复了正常，增加了假手术动物的脂肪量(21％)(见图4)。
瘦体重(lean body mass)：胃切除术降低了小鼠的瘦组织的量(-11％)。每天皮下施用生长素释放肽(12nmol sc)致使胃切除小鼠的瘦肉组织量恢复正常(见图5)。
实施例8
评估患者生活质量的调查问卷的例子
A)EORTC QLQ-C30
我们对有关您以及您的健康信息感兴趣。请回答以下问题，勾选最符合您的数字。没有“对”或“错”的答案。此信息将作保密处理。
                                    一点不 较少 一般 非常
1.身体负重会给您带来问题吗？(如：拎    1    2    3    4很重的购物袋或手提箱)
2.长时间行走会给您带来问题吗？         1    2    3    4
3.在屋外短时间行走会给您带来问题吗？   1    2    3    4
4.您是否一天的大部分时间都躺在床上或   1    2    3    4者坐在椅子上？
5.您吃饭，穿衣，洗刷或使用卫生间需要   1    2    3    4帮助吗？
在上半周期间：
                                        一点不 较少 一般 非常
6.您的工作或其它的日常活动受到限制吗？     1    2    3    4
7.您的业余爱好或其它的休闲娱乐受到限制     1    2    3    4吗？
8.您是否呼吸急促？                         1    2    3    4
9.您是否疼痛？              1    2    3    4
10.您是否不得不休息？       1    2    3    4
在上半周期间：
                                    一点不 较少 一般 非常
11.您是否失眠？                        1    2    3    4
12.您是否感觉虚弱？                    1    2    3    4
13.您是否没食欲？                      1    2    3    4
14.您是否感觉有病？                    1    2    3    4
15.您是否呕吐？                        1    2    3    4
16.您是否便秘？                        1    2    3    4
17.您是否腹泻？                        1    2    3    4
18.您是否疲倦？                        1    2    3    4
19.您是否由于病痛而使您的日常生活受    1    2    3    4到干扰？
20.您是否在将注意力集中于某些事物上    1    2    3    4有问题(如：读报或者看电视)？
21.您是否紧张？                        1    2    3    4
22.您是否担忧？                        1    2    3    4
23.您是否易怒？                       1    2    3    4
24.您是否感觉抑郁？                   1    2    3    4
25.您是否觉得记忆有问题？             1    2    3    4
26.您的身体状况或者您的医学治疗是否   1    2    3    4扰乱了您的家庭生活？
27.您的身体状况或者您的医学治疗是否   1    2    3    4扰乱了您的社会生活或您与其他人的事业？
28.您的身体状况或者您的医学治疗是否   1    2    3    4引发了您的经济问题？
关于以下问题请您在最符合您的1-7编号后面打勾。
29.您如何评价您在上半周期间内的 健康状况？
1    2    3    4    5    6    7
极差                          极好
30.您如何评价您在上半周期间内的 生活质量？
1    2    3    4    5    6    7
极差                          极好
更多问题：
有时患者会发出以下的抱怨。请指出上半周内您这些抱怨的程度。
                                       一点不 较少 一般 非常
31.您满意您的进食吗？                      1    2    3    4
32.您觉得营养充足吗？                      1    2    3    4
33.您担忧您的体重吗？                1    2    3    4
34.您能否正常吞咽而没有任何问题？    1    2    3    4
35.大多数的食物吃起来都不愉快吗？    1    2    3    4
36.您口干吗？                        1    2    3    4
37.您一开始吃就失去食欲吗？          1    2    3    4
38.您很快就觉得饱了吗？              1    2    3    4
39.家人或朋友劝您多吃吗？            1    2    3    4
40.您胃涨吗？                        1    2    3    4
41.您担心您可能看起来太瘦吗？        1    2    3    4
 42.您曾经因为您的外表而避免与其他人 1    2    3    4接触吗？
B)味觉问卷
名字：＿＿＿＿  日期：＿＿＿＿ #：＿＿＿＿
1.当时您的味觉干扰程度如何？
未被干扰                                    严重干扰
＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿
2.请勾出最合适的答案：
当您比较您现在与生病前的味觉时：
a)咸味：                1.更强
                        2.一样
                        3.更弱
                        4.根本感觉不到
b)甜味(如糖)：          1.更强
                        2.一样
                        3.更弱
                        4.根本感觉不到
c)酸味(如柠檬或醋)：    1.更强
                        2.一样
                        3.更弱
                        4.根本感觉不到
d)苦味(黑咖啡，奎宁水)：1.更强
                        2.一样
                        3.更弱
                        4.根本感觉不到
3.请勾出最合适的答案：
我嘴里味道总是不好。
1.从不
2.极少
3.有时
4.经常
5.总是
6.只在化疗期间和刚化疗后几天中
4.您认为味觉改变有多烦扰？
26.极其烦扰
27.非常烦扰
28.中度烦扰
29.稍微烦扰
30.一点也不烦扰
5.您是否因为味觉的改变而吃得更多或更少？
＿＿＿＿＿＿更多＿＿＿＿＿＿＿＿更少＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿一样
6.此刻我的味觉是：
非常好                                                     非常差
＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿_＿＿＿＿
C)饥饿-食欲-感觉过饱-恶心-焦虑-疲倦-感觉模拟分值(visual analoguescale)
姓名：＿＿＿＿＿＿＿＿日期：＿＿＿＿＿＿＿＿#：＿＿＿＿＿＿＿＿时间：
                                                         []早餐前
                                                          []10.15
                                                    []11.30午餐前
                                                    []12.30午餐后
1.您怎么评价您现在的食欲？
食欲非常好                            一点食欲都没有
＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿
2.您怎么评价您现在的饥饿？
不饿                                          非常饿
＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿
3.您怎么评价您现在的过饱的感觉？
没有过饱的感觉                      非常强的过饱感觉
＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿
4.您怎么评价您现在的恶心？
不恶心                                      非常恶心
＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿
5.您怎么评价您现在的焦虑？
非常焦虑                                一点也不焦虑
＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿
6.您怎么评价您现在的疲倦？
不疲倦                                     非常疲倦
＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿
实施例9
用于制备本发明中使用的药物组合物的适合的制剂的例子
制备两种不同类型的脂质体，其分别含有二棕榈酰DL-α-卵磷脂(DPPC)和卵磷脂与胆固醇(PC/Chol)的混合物。通过在氯仿中溶解并混合脂质来制备脂质体。通过旋转蒸发过夜去除氯仿，先用乙醇(99，9％)脱去所得的脂质膜，然后放在旋转蒸发器中过夜。在HEPES缓冲液(10mM HEPES，50mMKCl，1mM NaN3，pH＝5，5)中的水合至少1小时形成多层脂质体。水合温度为51℃(比磷脂的Tm高10℃)。随后，在1小时内用tip超声降解仪每10分钟超声降解脂质体30秒。用100nm聚碳酸酯滤膜挤压通过多层脂质体来制备100内米的单层脂质体。用Zetasizer 4(Malvern，UK)的动态光散射(DLS)测定大小。用差示扫描量热仪(Differential Scanning Caleometry，DSC；MicroCalTM Incorporated)测定Tm。以60μg每500μL的剂量在给动物施用所述制剂前大约2小时加入生长素释放肽。
特征描述：
DPPC脂质体的大小(Z平均数)：106,3nm
DPPC脂质体的多分散性：0,29
DPPC浓度：2mM
PC/Chol脂质体的大小(Z平均数)：108,4nm
PC/Chol脂质体的多分散性：0,20
胆固醇浓度：0.6mM
卵磷脂浓度：1.4mM
在Danish University Hospital Copenhagen(Rigshospitalet)的地方药店购买30％的Intralipid。1000mL包含：纯化的大豆油300g，纯化卵磷脂12g，无水甘油16.7g，注射用水q.s.加至1000mL。用氢氧化钠将PH值调至约7.5。
实施例10
研究实施例9中所述生长素释放肽制剂的药代动力学的动物研究。研究总结见图10。
动物：使用30只Sprague Dawley雄性大鼠(6-7周龄；约300g；CharleRiver，德国)。一到动物设备房就将他们3个一笼养一周，随后转至可随意摄取食物和水的单独的笼子里。
从到达日期起，在0600时将大鼠保持在12/12 L/D循环光线条件下且温度和湿度可控的房间里。
治疗组和随机化
单独养1周后，准备将大鼠用于试验，并将其随机分为体重匹配的5个组(每组6只)：
组1  媒介
组2  缓冲液中的生长素释放肽(200mg/kg)
组3  intralipid中的生长素释放肽(200mg/kg)
组4  Chol/PC中的生长素释放肽(200mg/kg)
组5  DPPC中的生长素释放肽(200mg/kg)
所有化合物均通过皮下施用方式施用(0.5ml/300g大鼠)。
试验程序
大鼠在实验开始前3天每天用NaCl(0.9％)模拟sc注射，使其习惯于试验程序并减轻注射相关的紧张。
在实验日(0800-0930)，接受测试剂量前15分钟，从尾静脉抽取200μl血样。在时间点0第二次取血样，之后立即用按照以上所列组的测试化合物对大鼠进行sc注射。在注射后15，30，45，60，90，120和240分钟的时间点采集另外7个血样(200μl)。所采集的总血量为1800μl(约为总血量的10％)。
将血样置于冰上直至可以实施血浆分离为止。离心(4000rpm，10分钟)后将血浆转至小瓶/试管内，小瓶/试管内含有5μL 1N HCl的5μL 2mg/mL溶于异丙醇中的苯甲基磺酰氟溶液。
根据厂商的方案用RIA测试(Linco Research，Inc)测量血浆样品中的活性(酰化的)生长素释放肽。
结果：
皮下施用缓冲液中的生长素释放肽(200mg/kg)后，活性生长素释放肽在药代动力学研究方面增长约10倍。15分钟后观测到血浆生长素释放肽的最大浓度，接下来的15分钟(时间点30分钟)其降低了约30％，再向后15分钟(时间点45分钟)进一步降低了60％。120分钟后活性生长素释放肽的血浆水平有微小的增加，然而240分钟后回到基础水平。
施用配制于脂质乳剂中的生长素释放肽没有改变所得到的生长素释放肽的最高水平，施用配制于脂质乳剂中的生长素释放肽没有改变所得到的生长素释放肽的最高水平，然而活性生长素释放肽的半衰期却有增加趋势(图9A)，其提示为储备效应。
也以两种不同的脂质体制剂方式施用生长素释放肽，所述制剂分别含有二棕榈酰DL-α-卵磷脂(DPPC)或卵磷脂与胆固醇(PC/Chol)的混合物。PC/Chol脂质体没有增加所得到的活性生长素释放肽的最大血浆水平，但是施用PC/Chol脂质体配制的生长素释放肽与缓冲液中的生长素释放肽相比，45分钟后血浆浓度更高(图9B)。在15分钟时间点，施用配制于DPPC脂质体中的生长素释放肽使所得的生长素释放肽最高水平几乎增加两倍。令人感兴趣的是，生长素释放肽血浆水平在30分钟和45分钟后增加超过两倍(图9C)。
结论：
不考虑制剂，皮下注射生长素释放肽使循环血浆水平显著升高。脂质中的制剂引发轻微的储存效应，因为生长素释放肽浓度以比配制于盐水的生长素释放肽更低的速率降低。DPPC脂质体中的制剂使活性生长素释放肽水平升高两倍，而对半衰期无明显作用。
实施例11
给癌症恶病质患者施用生长素释放肽(见图6和7)
在超过8周时间里给患癌症恶病质的患者施用生长素释放肽以改善其进食和营养状况。用经授权的GMP生产设备生产试验中所用的化合物。具有作为反离子的醋酸盐的野生型人生长素释放肽(GMP级别)购自Polypeptide Laboratories，Inc.(CAS no：SARA313)。用HPLC评定的肽纯度分别介于98.41和99.63％之间。该实施例中所要使用的物质的肽含量为84,3％，其余的是作为反离子的醋酸盐。在注射当天将该物质溶解于生理盐水(0.9％)中。
通过单一灌输生长素释放肽(剂量范围为100pmol/kg至1mol/kg)或盐水处理确定于一个试验中的患者。施用前患者已被禁食16小时。灌输期间，将按照图9表格所示每30分钟对患者监测一次。灌输30分钟后将给患者提供餐具柜供其选择并食用食物。这作为对照以确保所述活性化合物足够的活性。通过从自由餐具柜摄取的食物数量来评估生长素释放肽与安慰剂治疗相比较的敏锐影响。在持续8周的第二轮试验中，用1μg/kg到80μg/kg范围的高剂量s.c.生长素释放肽或0.1μg/kg到1.0μg/kg范围的低剂量s.c.生长素释放肽治疗患者。所述治疗以每天腹部皮下注射的方式通过瑞典家庭护理系统施用，大约在上午10点进行腹部注射。治疗4周后，将通过受控的进食日记和血样采集来评价患者。此外，将在试验期间通过进食、血样采集、活动水平、静息能量消耗、身体组分、完全身体检查、所述的标准血生化和一些与生活质量相关的健康的受控日记(controlled diary)分别在开始和结束时对患者进行评价。各个访问的评估将如图9所示进行。
患者：
患有已记录的癌症恶病质和-伴随有发展期的明显体重减轻和食欲减退的已记录的癌症恶病质的患者。
-恶病质可由任何类型的癌症所引起，包括食管癌，肺癌，乳腺癌，胃癌，胰腺癌，神经和尿道癌，骨癌，血癌，生殖道癌，外分泌腺癌，内分泌腺癌，多发性内分泌瘤，睾丸癌，前列腺癌，肾癌，皮肤癌，甲状腺癌，肝癌和结肠癌。
将依据图9评估生长素释放肽的作用功效：
临床评估：
-急性进食：营养专家评价的灌输期间及此后21/2小时的进食。
-慢性进食：一天期间食用食物量的每日报告，和有关进食的愉悦性评价。这可以以4天的饮食日记为基础，通过尿氮排泄来证实。
-体重：临床上将使用标准的和经校正的数值。
-静息能量消耗(REE)是非常重要的指标，因为它同时受疾病状态和身体尺寸的影响。
-训练测试
-活性曲线-依照主页(www.mtiactigraph.com)上描述的标准方案使用。
-使用别处描述的标准形式的健康相关的QoL。
产生临床症状体征的解剖或生化异常(Para-clinical)评估：
-尿中的氮排泄物：应使用24h收集的尿作为有效的进食报告。
-血浆葡萄糖，血浆FFA，血浆甘油三酸酯，血浆甘油和血浆氨基酸：测定血浆物质以确保所报告的进食与进食的吸收量一致。
-瘦体重和脂肪量由TSF厚度和胳膊中段周长来评估，其作为身体组分的度量。
-总身体脂肪(和游离脂肪量)将使用lunar DPX-L软件1.31(ScanexportMedical，Helsingborg，Sweden)通过DEXA扫描来评估。
-血浆瘦素：瘦素(leptin)由脂肪细胞生产和分泌。瘦素血浆水平给出了总脂肪细胞负荷(burden)的估计值。
-血浆生长素释放肽：恶病质患者中的基础生长素释放肽水平趋于增加。
-血浆GH：在先前的研究中，GH作为生长素释放肽施用效果的对照来测定(Enomoto等，2003)。
-IGF-I：单一的IGF-I测定概括24h的GH分泌。这已经由健康志愿者所证实，其中显示循环IGF-I水平与自发的GH分泌相关(Rose N Engl J Med1988；319：201-207)。通过改善营养状况，IGF-I也可以不依赖于GH的增加而增加。
-IGFBP-3：IGF-I的其中一种载体蛋白。它与IGF-I并行增加，但响应速度较慢。
-白蛋白：是营养状况的指示剂。
-前白蛋白(prealbumin)：营养状况的指示剂，具有比白蛋白更快的对改变的响应。
-皮质醇：已显示施用生长素释放肽提高血清皮质醇水平(Broglio等，2003a)。已显示皮质类固醇具有明显的抗恶心效应并改善衰弱和疼痛控制，这可能有利于恶病质癌症患者。然而从未显示皮质醇增加恶病质癌症患者的体重。
-CRP和ESR：急性期蛋白和ESR通常是与癌症过程相关的系统炎症的很好的指示(Inui，2002)。
实施例12
患癌症相关的厌食/恶病质的患者的治疗
相信患厌食/恶病质综合症(ACS)的晚期癌症患者，例如任何类型的晚期、不可治愈的癌症患者，在改善生活质量、增加食欲、增加进食、保持体重或增重、食物愉悦性、和/或脂肪沉积方面均可受益。
用溶解于250ml正常盐水(NaCl 0.9％)中的生长素释放肽以10pmol/kg/分钟(相当于0.0336mcg/kg/分钟)的剂量治疗患者。
研究性治疗：可由Calbiochem-Novabiochem AG，CLINALFA，MerckBiosciences，Switzerland获得制备于88mcg小瓶中的GMP-质量的生长素释放肽。安慰剂由250ml的空白正常盐水灌输液组成，其可由医院药房提供。将生长素释放肽溶于盐水中，为患者施用剂量为0.0336mcg/kg/分钟的生长素释放肽。
功效评估：
-饮食相关症状：使用“食欲和恶病质治疗的功能性评价(FAACT)”调查问卷；EORTC-QLQ-30厌食/恶病质调查问卷；NCCTG-厌食/恶病质调查问卷并采用Edmonton Sympton评价等级进行评价。
-生活质量：将使用EORTC-QLQ-C30调查问卷评价(见实施例8)。
-营养摄取和食物偏好：将通过患者每餐消耗的食物产品的百分比计算来测量进食，临床营养专家将把其作为常规评价的一部分来评价食物偏好。
1-食物愉悦性：将依照已建立的方法(anchors)在午餐后使用感觉模拟分值(visual analogue scales)评价。
-感觉到的食欲、饥饿、恶心和过饱：将依照已建立的方法在早晨，灌输前，午餐前后使用感觉模拟分值评价。我们也将使用简化的味觉专用调查问卷(shortened ad hoc taste questionnaire)。
-生长激素(GH)：由于GH直接反映生长素释放肽的生物学功能，在注射生长素释放肽后GH快速增长，因而我们也将在与生长素释放肽相同的时间点监测GH水平。将使用标准生长素释放肽测试。
-身体组分：将使用BMI、生物阻抗分析和双光子吸光测定法/双能量x-射线吸光测定法(DEXA)评价身体组分。将把白蛋白和转铁蛋白水平作为营养状况参数来测定。
-心血管自主功能：为筛选自主疾病(autonomic disorder)将进行20分钟的holter心电图，并测定SDNN值。
-主要厌食/恶病质综合症的介导物：第一周将测定促炎症反应的介导物(CRP，IL-6，TNF-α)，活化的新陈代谢(游离脂肪酸，甘油三酸酯，胰岛素，葡萄糖，瘦素)，内脏-大脑轴(生长素释放肽)，和促生长轴(IGF-1，游离睾丸素)作为基线。尿样将用于评估蛋白水解诱导因子(PIF)、肿瘤形成征兆的厌食/恶病质综合症的介导物。
参考文献列表
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17.Smith，R.G.et al.″Peptidomimetic regulation of growth hormone secretion.″Endocr.Rev.18.5(1997)：621-45.
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序列表
<110>加斯特罗泰克药物公司(Gastrotech Pharma A/s)
<120>促分泌素样生长素释放肽在癌症恶病质中以及在刺激食欲方面的应用
<130>P 799 PC00
<160>3
<170>PatentIn version 3.1
<210>1
<211>28
<212>PRT
<213>人(Homo sapiens)
<220>
<221>MOD_RES
<222>(3)..(3)
<223>第3位氨基酸由脂肪酸所修饰
<400>1
 Gly Ser Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys
 1               5                   10                  15
 Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg
             20                  25
<210>2
<211>27
<212>PRT
<213>人(Homo sapiens)
<220>
<221>MOD_RES
<222>(3)..(3)
<223>第3位氨基酸由脂肪酸所修饰
<400>2
Gly Ser Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Arg Lys Glu
1               5                   10                  15
Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg
            20                  25
<210>3
<211>28
<212>PRT
<213>大鼠(Rattus rattus)
<220>
<221>MOD_RES
<222>(3)..(3)
<223>第3位氨基酸由脂肪酸所修饰
<400>3
Gly Ser Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Ala Gln Gln Arg Lys
1               5                   10                  15
Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg
            20                  25
权利要求书
(按照条约第19条的修改)
1.生长素释放肽样化合物或其药学上可接受的盐用于制备药剂的用途，所述药剂用于在需要这种治疗的个体中预防或治疗癌症恶病质，
生长素释放肽生长素释放肽其中生长素释放肽样化合物包含式I所定义的结构
Z1-(X1)m-(X2)-(X3)n-Z2，其中
Z1为任选存在的保护基，每个X1独立地选自氨基酸，其中所述的氨基酸选自天然发生的和合成的氨基酸，
X2为选自天然发生的和合成的氨基酸，所述的氨基酸由大疏水基，优选由酰基、或脂肪酸所修饰，
每个X3独立地选自氨基酸，其中所述的氨基酸选自天然发生的和合成的氨基酸，
其中一个或多个的X1和X3任选可由大疏水基，优选酰基，或脂肪酸所修饰，
Z2为任选存在的保护基，
m为1-10范围内的整数，
n为0或1-35范围内的整数，
并且其中：
a)所述生长素释放肽样化合物或其药学上可接受的盐的长度是27-28个氨基酸，前提是所述生长素释放肽样化合物与SEQ ID NO：1至少80％同源，如与SEQ ID NO：1至少85％同源，和/或
b)所述生长素释放肽样化合物与SEQ ID NO：1至少90％同源。
2.根据权利要求1的用途，其中所述生长素释放肽样化合物与SEQ IDNO：1至少95％同源。
3.根据权利要求1的用途，其中所述生长素释放肽样化合物与SEQ IDNO：1至少98％同源。
4.根据前述权利要求中任一项的用途，其中m为1-9范围内的整数，例如1-8，例如1-7，例如1-6，例如1-5，例如1-4，例如1-3，例如1-2，例如2。
5.根据前述权利要求中任一项的用途，其中X2选自下组：修饰的Ser、修饰的Cys或修饰的Lys，例如X2为修饰的Ser。
6.根据前述权利要求中任一项的用途，其中生长素释放肽样化合物为选自以下述的化合物：
式II Z1-Gly-(X1)m-1-(X2)-(X3)n-Z2，
式III Z1-Gly-Ser-(X2)-(X3)n-Z2，和
式IV Z1-Gly-(X2)-(X3)n-Z2。
7.根据权利要求6的用途，其中生长素释放肽样化合物具有式III。
8.根据前述权利要求中任一项的用途，其中n为1-25范围内的整数，例如1-24，例如1-15，例如1-10，例如10-25，例如10-24，例如15-25，例如15-24。
9.根据前述权利要求中任一项的用途，其中所述酰基选自C1-C35酰基，例如C1-C20酰基，例如C1-C15酰基，例如C6-C15酰基，例如C6-C12酰基，例如C8-C12酰基。
10.根据前述权利要求中任一项的用途，其中所述酰基选自C7酰基，C8酰基，C9酰基，C10酰基，C11酰基，和C12酰基的基团。
11.根据前述权利要求中任一项的用途，其中所述酰基选自C8酰基，和C10酰基的基团。
12.根据前述权利要求中任一项的用途，其中所述酰基选自C7酰基，C9酰基，和C11酰基，如C9酰基和C11酰基的基团。
13.根据权利要求1的用途，其中所述生长素释放肽样化合物是生长素释放肽或其药学上可接受的盐。
14.根据权利要求1的用途，其中所述生长素释放肽样化合物具有SEQID NO：1，SEQ ID NO：2，或SEQ ID NO：3。
15.根据前述权利要求中任一项的用途，其中所述药剂是用于皮下施用的制剂。
16.根据前述权利要求中任一项的用途，其中所述制剂包含冻干物形式的生长素释放肽样化合物或其盐，并且该制剂更进一步包含溶剂，所述的冻干物和所述溶剂在使用前处于分离的间格中。
17.根据前述权利要求中任一项的用途，其中所述制剂为生长素释放肽样化合物或其盐的溶液。
18.根据权利要求16或17的用途，其中所述溶剂为盐水。
19.根据前述权利要求中任一项的用途，其中所述药剂在进餐前或在进餐期间施用。
20.根据前述权利要求中任一项的用途，其中以相当于10ng至10mg生长素释放肽每kg体重的浓度施用所述药剂。
21.根据前述权利要求20的用途，其中以相当于0.1μg至1mg生长素释放肽每kg体重的浓度施用所述药剂，例如0.5μg至0.5mg生长素释放肽每kg体重，例如1.0μg至0.1mg生长素释放肽每kg体重，例如1.0μg至50μg生长素释放肽每kg体重，例如1.0μg至10μg生长素释放肽每kg体重。
22.根据权利要求21的用途，其中以相当于0.1μg至1mg生长素释放肽每kg体重的浓度施用所述药剂，例如0.5μg至0.5mg生长素释放肽每kg体重，例如1.0μg至0.1mg生长素释放肽每kg体重，例如1.0μg至50μg生长素释放肽每kg体重，例如1.0μg至10μg生长素释放肽每kg体重。
23.根据前述权利要求中任一项的用途，其中所述药剂在进餐前或进餐期间作为药团施用，所述药团包含相当于0.3μg至600mg生长素释放肽的量的生长素释放肽样化合物或其盐。
24.根据权利要求23的用途，其中所述药剂在进餐前或进餐期间作为药团施用，所述药团包含相当于2.0μg至200mg生长素释放肽的量的生长素释放肽样化合物或其盐，例如5.0μg至100mg生长素释放肽，10μg至50mg生长素释放肽，10μg至5mg生长素释放肽，10μg至1.0mg生长素释放肽。
25.根据前述权利要求中任一项的用途，其中所述药剂每天施用一至三次，每次都在进餐期间施用，或在进餐前至多180分钟施用，例如进餐前至多90分钟，例如进餐前至多45分钟，例如进餐前至多30分钟，例如进餐前至多25分钟，例如进餐前至多20分钟，例如进餐前至多15分钟，例如进餐前至多10分钟，例如进餐前至多5分钟。
26.根据权利要求25的用途，其中每天施用药剂三次。
27.根据前述权利要求中任一项的用途，其中癌症恶病质由代谢疾病引起。
28.根据前述权利要求1至26中任一项的用途，其中癌症恶病质由厌食病引起。
29.根据前述权利要求1至27中任一项的用途，其中所述个体患有选自肺癌、胰腺癌、肝癌、和GI道癌的癌症。
30.根据前述权利要求中任一项的用途，其中所述的药剂与化疗药剂组合施用。
31.根据前述权利要求中任一项的用途，其中癌症恶病质的治疗或预防引起食欲的刺激，摄食的刺激，增重或体重保持的刺激，和/或身体脂肪量的增加。
32.预防或治疗癌症恶病质的方法，包含给需要的个体施用权利要求1至14中任一项所限定的有效量的生长素释放肽样化合物。
33.预防或治疗癌症的方法，包含将权利要求1至14中任一项所限定的有效量的促分泌素与抗肿瘤治疗组合施用到需要的个体。
34.根据权利要求33的方法，其中抗肿瘤治疗为放疗。
35.根据权利要求33的方法，其中抗肿瘤治疗为化疗。
36.根据权利要求33至35中任一项的方法，其中癌症恶病质的治疗或预防引起食欲的刺激，摄食的刺激，体重增加或体重保持的刺激，和/或身体脂肪量的增加。
37.预防或治疗恶病质的方法，包含给需要的个体施用有效量的生长素释放肽样化合物和有效量的NSAID药剂。
38.根据权利要求37的方法，其中所述的生长素释放肽样化合物如权利要求1至14中任一项所限定。
39.生长素释放肽样化合物或其药学上可接受的盐用于制备药物中的用途，该药物为皮下施用的制剂，通过向个体施用皮下剂量的所述药物刺激该个体的食欲，其中生长素释放肽样化合物包含式I所定义的结构
Z1-(X1)m-(X2)-(X3)n-Z2，其中
其中Z1为任选存在的保护基，
每个X1独立地选自氨基酸，其中所述的氨基酸选自天然发生的和合成的氨基酸，
X2为选自天然发生的和合成的氨基酸的任意的氨基酸，所述的氨基酸由大疏水基，优选由酰基，或脂肪酸修饰，
每个X3独立地选自氨基酸，其中所述的氨基酸选自天然发生的和合成的氨基酸，
其中一个或多个的X1和X3任选可由大疏水基，优选酰基，或脂肪酸修饰，
Z2为任选存在的保护基，
m为1-10范围内的整数，
n为0或1-35范围内的整数。
40.根据权利要求39的用途，所述生长素释放肽样化合物如权利要求1至14中任一项所限定。
41.根据权利要求40的用途，其中所述制剂如权利要求15-19中任一项所限定。
42.根据权利要求41的用途，其中所述溶剂为盐水。
43.根据权利要求39至42中任一项的用途，其中如权利要求19-26中任一项所述施用所述药剂。
44.根据权利要求39-43中任一项的用途，其中所述个体患脂肪代谢障碍。

Claims (82)

1.促分泌素化合物用于制备药剂的用途，所述药剂用于在需要这种治疗的个体中预防或治疗癌症恶病质。
2.根据权利要求1的用途，其中所述促分泌素是生长素释放肽或其药学上可接受的盐。
3.根据权利要求1或2的用途，其中所述促分泌素是生长素释放肽样化合物或其药学上可接受的盐，
其中生长素释放肽样化合物包含式I所定义的结构
Z1-(X1)m-(X2)-(X3)n-Z2，其中
Z1为任选存在的保护基，每个X1独立地选自氨基酸，其中所述的氨基酸选自天然发生的和合成的氨基酸，
X2为选自天然发生的和合成的氨基酸，所述的氨基酸由大疏水基，优选由酰基、或脂肪酸所修饰，
每个X3独立地选自氨基酸，其中所述的氨基酸选自天然发生的和合成的氨基酸，
其中一个或多个的X1和X3任选可由大疏水基，优选酰基，或脂肪酸所修饰，
Z2为任选存在的保护基，
m为1-10范围内的整数，
n为0或1-35范围内的整数。
4.根据权利要求3的用途，其中m为1-9范围内的整数，例如1-8，例如1-7，例如1-6，例如1-5，例如1-4，例如1-3，例如1-2，例如2。
5.根据权利要求3或4中任一项的用途，其中X2选自下组：修饰的Ser、修饰的Cys或修饰的Lys，例如X2为修饰的Ser。
6.根据权利要求3至5中任一项的用途，其中生长素释放肽样化合物为选自以下的化合物：
式II   Z1-Gly-(X1)m-1-(X2)-(X3)n-Z2，
式III  Z1-Gly-Ser-(X2)-(X3)n-Z2，和
式IV   Z1-Gly-(X2)-(X3)n-Z2。
7.根据权利要求6的用途，其中生长素释放肽样化合物具有式III。
8.根据权利要求6或7中任一项的用途，其中(X3)n包含选自如下所示的一个或多个序列的序列：
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln
Phe Leu Ser Pro Glu His
Phe Leu Ser Pro Glu
Phe Leu Ser Pro
Phe Leu Ser
Phe Leu
Phe
9.根据权利要求3至8中任一项的用途，其中n为1-25范围内的整数，例如1-24，例如1-15，例如1-10，例如10-25，例如10-24，例如15-25，例如15-24。
10.根据权利要求3至9中任一项的用途，其中(X3)n选自如下所示的一个或多个序列：
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys ProPro Ala Lys Leu Gln Pro Arg
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys ProPro Ala Lys Leu Gln Pro
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys ProPro Ala Lys Leu Gln
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys ProPro Ala Lys Leu
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys ProPro Ala Lys
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys ProPro Ala
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys ProPro
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys Pro
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln
Phe Leu Ser Pro Glu His
Phe Leu Ser Pro Glu
Phe Leu Ser Pro
Phe Leu Ser
Phe Leu
Phe
11.根据权利要求3至10中任一项的用途，其中所述酰基选自C1-C35酰基，例如C1-C20酰基，例如C1-C15酰基，例如C6-C15酰基，例如C6-C12酰基，例如C8-C12酰基。
12.根据权利要求3至11中任一项的用途，其中所述酰基选自C7酰基，C8酰基，C9酰基，C10酰基，C11酰基，或C12酰基。
13.根据权利要求3至12中任一项的用途，其中所述酰基选自C8酰基，或C10酰基。
14.根据权利要求3至13中任一项的用途，其中所述酰基选自C7酰基，C9酰基，或C11酰基，如C9酰基或C11酰基。
15.根据前述权利要求1至14中任一项的用途，其中所述药剂是用于皮下施用的制剂。
16.根据权利要求1至15中任一项的用途，其中所述药剂包含促分泌素或其药学上可接受的盐。
17.根据权利要求15至16中任一项的用途，其中所述制剂包含冻干物形式的促分泌素或其盐，并且该制剂更进一步包含溶剂，所述的冻干物和所述溶剂在使用前处于分离的间格中。
18.根据权利要求15至17中任一项的用途，其中所述制剂为促分泌素或其盐的溶液。
19.根据权利要求17或18的用途，其中所述溶剂为盐水。
20.根据权利要求1至19中任一项的用途，其中所述药剂在进餐前或在进餐期间施用。
21.根据权利要求1至20中任一项的用途，其中以相当于每kg体重10ng至10mg生长素释放肽的浓度施用所述药剂。
22.根据权利要求21的用途，其中以相当于0.1μg至1mg生长素释放肽每kg体重的浓度施用所述药剂，例如0.5μg至0.5mg生长素释放肽每kg体重，例如1.0μg至0.1mg生长素释放肽每kg体重，例如1.0μg至50μg生长素释放肽每kg体重，例如1.0μg至10μg生长素释放肽每kg体重。
23.根据权利要求22的用途，其中以相当于0.1μg至1mg生长素释放肽每kg体重的浓度施用所述药剂，例如0.5μg至0.5mg生长素释放肽每kg体重，例如1.0μg至0.1mg生长素释放肽每kg体重，例如1.0μg至50μg生长素释放肽每kg体重，例如1.0μg至10μg生长素释放肽每kg体重。
24.根据权利要求1至23中任一项的用途，其中所述药剂在进餐前或进餐期间作为药团施用，所述药团包含相当于0.3μg至600mg生长素释放肽的量的生长素释放肽样化合物或其盐。
25.根据权利要求24的用途，其中所述药剂在进餐前或进餐期间作为药团施用，所述药团包含相当于2.0μg至200mg生长素释放肽的量的生长素释放肽样化合物或其盐，例如5.0μg至100mg生长素释放肽，10μg至50mg生长素释放肽，10μg至5mg生长素释放肽，10μg至1.0mg生长素释放肽。
26.根据权利要求1至25中任一项的用途，其中所述药剂每天施用一至三次，每次都在进餐期间施用，或在进餐前至多180分钟施用，例如进餐前至多90分钟，例如进餐前至多45分钟，例如进餐前至多30分钟，例如进餐前至多25分钟，例如进餐前至多20分钟，例如进餐前至多15分钟，例如进餐前至多10分钟，例如进餐前至多5分钟。
27.根据权利要求26的用途，其中每天施用药剂三次。
28.根据权利要求1至27中任一项的用途，其中癌症恶病质由代谢性疾病引起。
29.根据权利要求1至27中任一项的用途，其中癌症恶病质由厌食病引起。
30.根据权利要求1至28中任一项的用途，其中所述个体患有选自肺癌、胰腺癌、肝癌、和GI道癌的癌症。
31.根据权利要求1至30中任一项的用途，其中所述的药剂与化疗药剂组合施用。
32.根据权利要求1至31中任一项的用途，其中癌症恶病质的治疗或预防引起食欲的刺激，摄食的刺激，增重或体重保持的刺激，和/或身体脂肪量的增加。
33.预防或治疗癌症恶病质的方法，包含给需要的个体施用权利要求2至14中任一项所限定的有效量的促分泌素。
34.预防或治疗癌症的方法，包含给需要的个体与抗肿瘤治疗组合施用的权利要求2至14中任一项所限定的有效量的促分泌素。
35.根据权利要求34的方法，其中抗肿瘤治疗为放疗。
36.根据权利要求34的方法，其中抗肿瘤治疗为化疗。
37.根据权利要求33至36中任一项的方法，其中癌症恶病质的治疗或预防引起食欲的刺激，摄食的刺激，体重增加或体重保持的刺激，和/或身体脂肪量的增加。
38.生长素释放肽样化合物或其药学上可接受的盐用于制备药剂的用途，所述药剂用于在个体中通过给所述个体皮下施用所述药剂以预防或治疗恶病质，
其中所述生长素释放肽样化合物包含式I所定义的结构
Z1-(X1)m-(X2)-(X3)n-Z2，其中
Z1为任选存在的保护基，
每个X1独立地选自氨基酸，其中所述的氨基酸选自天然发生的和合成的氨基酸，
X2为选自天然发生的和合成的任意的氨基酸，所述的氨基酸由大疏水基，优选由酰基，或脂肪酸所修饰，
每个X3独立地选自氨基酸，其中所述的氨基酸选自天然发生的和合成的氨基酸，
其中一个或多个的X1和X3任选可由大疏水基，优选酰基，或脂肪酸修饰，
Z2为任选存在的保护基，
m为1-10范围内的整数，
n为0或1-35范围内的整数。
39.根据权利要求38的用途，其中生长素释放肽样化合物为如权利要求4至14中任一项所限定的。
40.根据权利要求38或39的用途，其中药剂为皮下施用的制剂形式。
41.根据权利要求38或39的用途，其中所述制剂包含生长素释放肽样化合物或其药学上可接受的盐。
42.根据前述权利要求40或41的用途，其中所述制剂包含冻干物形式的生长素释放肽样化合物或其盐，该制剂进一步包含溶剂，所述冻干物和所述溶剂在使用前处于分离的间格中。
43.根据前述权利要求40或41的用途，其中所述制剂为生长素释放肽样化合物或其盐的溶液。
44.根据权利要求42或43的用途，其中所述溶剂为盐水。
45.根据前述任一项权利要求的用途，其中如权利要求20至27中任一项所限定的来施用所述药剂。
46.根据权利要求38至45中任一项的用途，其中每天施用药剂一至三次，每次施用是在进餐前或进餐期间，优选进餐前少于180分钟，例如进餐前少于90分钟，例如进餐前少于45分钟，例如进餐前少于30分钟，例如进餐前少于25分钟，例如进餐前少于20分钟，例如进餐前少于15分钟，例如进餐前少于10分钟，例如进餐前少于5分钟，例如在刚要进餐前，或在进餐期间，例如开始进餐后少于90分钟，例如开始进餐后少于45分钟，例如开始进餐后少于30分钟，例如开始进餐后少于25分钟，例如开始进餐后少于20分钟，例如开始进餐后少于15分钟，例如开始进餐后于10分钟，例如开始进餐后少于5分钟。
47.根据权利要求46的用途，其中每天施用药剂一至三次，优选早饭前或早饭期间一次，和/或午餐前或午餐期间一次，和/或晚饭前或晚饭期间一次。
48.生长素释放肽样化合物，其中生长素释放肽样化合物由式I所定义
Z1-(X1)m-(X2)-(X3)n-Z2，其中
其中Z1为任选存在的保护基，
每个X1独立地选自氨基酸，其中所述的氨基酸选自天然发生的和合成的氨基酸，
X2为选自天然发生的和合成的氨基酸的任意的氨基酸，所述的氨基酸由酰基所修饰，其中所述酰基为选自C7酰基，C9酰基，和C11酰基的酰基，例如为选自C9酰基和C11酰基的酰基。
每个X3独立地选自氨基酸，其中所述的氨基酸选自天然发生的和合成的氨基酸，
Z2为任选存在的保护基，
其中一个或多个的X1和X3任选可由大疏水基，优选酰基，或脂肪酸修饰，
m为0或1-10范围内的整数，
n为0或1-35范围内的整数。
49.根据权利要求48的化合物，其中m为1-9范围内的整数，例如1-8，例如1-7，例如1-6，例如1-5，例如1-4，例如1-3，例如1-2，例如2。
50.根据权利要求48或49中任一项的化合物，其中X2选自下组：修饰的Ser、修饰的Cys或修饰的Lys，例如其中X2为修饰的Ser。
51.根据权利要求48至50中任一项的化合物，其中所述的生长素释放肽样化合物选自化合物：
式II   Z1-Gly-(X1)m-1-(X2)-(X3)n-Z2，
式III  Z1-Gly-Ser-(X2)-(X3)n-Z2，和
式IV   Z1-Gly-(X2)-(X3)n-Z2。
52.根据权利要求51的化合物，其中所述生长素释放肽样化合物具有式III。
53.根据权利要求48至52中任一项的化合物，其中n为1-25范围内的整数，例如1-24，例如1-15，例如1-10，例如10-25，例如10-24，例如15-25，例如15-24。
54.根据权利要求48至53中任一项的化合物，其中(X3)n包含选自如下所示的一个或多个序列的序列：
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln
Phe Leu Ser Pro Glu His
Phe Leu Ser Pro Glu
Phe Leu Ser Pro
Phe Leu Ser
Phe Leu
Phe
55.根据权利要求48至54中任一项的化合物，其中(X3)n包含选自如下所示的一个或多个序列：
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys ProPro Ala Lys Leu Gln Pro Arg
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys ProPro Ala Lys Leu Gln Pro
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys ProPro Ala Lys Leu Gln
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys ProPro Ala Lys Leu
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys ProPro Ala Lys
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys ProPro Ala
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys ProPro
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys Pro
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys Lys
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser Lys
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu Ser
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys Glu
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg
Phe Leu Ser Pro Glu His Gln
Phe Leu Ser Pro Glu His
Phe Leu Ser Pro Glu
Phe Leu Ser Pro
Phe Leu Ser
Phe Leu
Phe
56.包含如权利要求48至55中任一项所定义的生长素释放肽样化合物或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的载体、媒介和/或赋形剂的药物组合物。
57.根据权利要求56的药物组合物，其中所述的组合物进一步包含转运分子，如脂质体，微团，免疫刺激化合物，和/或微球。
58.根据权利要求56至57中任一项的药物组合物，包含促分泌素偶联物。
59.根据权利要求58的药物组合物，其中所述的偶联物包含偶联于下述一种或多种物质的促分泌素：
a)聚合体分子
b)寡糖部分
c)IgG的Fc区。
60.包含一个或多个剂量单位的如权利要求56至59中任一项所述的药物组合物的医药包装制品。
61.根据权利要求60的医药包装制品，所述包装制品包含一至三个剂量单位。
62.根据权利要求61的医药包装制品，具有3个剂量单位。
63.根据权利要求60的医药包装制品，所述包装制品具有7-21个剂量单位。
64.根据权利要求60至63中任一项的医药包装制品，其中所述剂量单位包含相当于0.3μg至600mg生长素释放肽的量的生长素释放肽样化合物或其盐，例如2.0μg至200mg生长素释放肽，如5.0μg至100mg生长素释放肽，如10μg至50mg生长素释放肽，如10μg至5mg长生素释放肽，如10μg至1.0mg生长素释放肽。
65.根据权利要求60至64中任一项的医药包装制品，包含施用药物组合物的说明。
66.根据权利要求65的医药包装制品，其中所述说明包括涉及在进餐期间或者在餐前至多180分钟施用所述药物组合物的说明，例如餐前至多90分钟，例如餐前至多45分钟，例如餐前至多30分钟，例如餐前至多25分钟，例如餐前至多20分钟，例如餐前至多15分钟，例如餐前至多10分钟，例如餐前至多5分钟，例如刚要进餐前。
67.根据权利要求60至66中任一项的医药包装制品，其中所述包装制品为药筒形式，如用于注射笔的药筒。
68.根据权利要求48至55中任一项所限定的生长素释放肽样化合物，或其药学上可接受的盐用于制备药剂的用途，所述药剂用于治疗有需要的个体。
69.根据权利要求68的用途，其中所述的药剂为皮下施用的制剂。
70.根据权利要求68或69中任一项的用途，其中所述药剂包含冻干物形式的生长素释放肽样化合物或其盐，并且该药剂进一步包含溶剂，所述冻干物和所述溶剂在使用前处于分离的间格中。
71.根据前述权利要求68至70中任一项的用途，其中所述药剂包含生长素释放肽样化合物或其盐的溶液。
72.根据权利要求70或71的用途，其中所述溶剂是盐水。
73.根据权利要求68至72中任一项的用途，其中所述药剂如权利要求45至47任一项所限定的在进餐前或进餐期间施用。
74.监测用促分泌素治疗个体的效果的方法，包含测定所述个体中IGF-1，IGFBP-3，和/或ALS的血液水平。
75.预防或治疗恶病质的方法，包含给需要的个体施用有效量的促分泌素和有效量的NSAID药剂。
76.根据权利要求75的方法，其中所述的促分泌素如权利要求2至14中任一项所限定。
77.生长素释放肽样化合物或其药学上可接受的盐用于制备在个体中刺激食欲的药剂的用途，所述刺激食欲的作用通过向所述个体施用皮下剂量的所述药剂实现，其中生长素释放肽样化合物包含式I所定义的结构
Z1-(X1)m-(X2)-(X3)n-Z2，其中
Z1为任选存在的保护基，
每个X1独立地选自氨基酸，其中所述的氨基酸选自天然发生的和合成的氨基酸，
X2为选自天然发生的和合成的氨基酸的任意的氨基酸，所述的氨基酸由大疏水基，优选由酰基，或脂肪酸修饰，
每个X3独立地选自氨基酸，其中所述的氨基酸选自天然发生的和合成的氨基酸，
其中一个或多个的X1和X3任选可由大疏水基，优选酰基，或脂肪酸修饰，
Z2为任选存在的保护基，
m为1-10范围内的整数，
n为0或1-35范围内的整数。
78.根据权利要求77的用途，生长素释放肽样化合物如权利要求4至14中任一项所限定。
79.根据权利要求77或78的用途，其中所述药剂为用于皮下施用的制剂形式。
80.根据权利要求79的用途，其中所述制剂如权利要求41或42中任一项所限定。
81.根据权利要求80的用途，其中所述溶剂为盐水。
82.根据权利要求77至81中任一项的用途，其中如权利要求45至47中任一项所述施用所述药剂。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN107205389A (zh) * 2014-09-04 2017-09-26 赫尔辛医疗股份公司 基于阿拉莫林的药物治疗

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